Biz hızla pro-inflamatuar ajan dekstran sülfat sodyum (DSS) üç kür takip ve sürekli insan kolit görülenler ile morfolojik ve moleküler benzerlikleri olan farelerde kolon tümörleri oluşturur genotoksik ajan azoxymethane (AOM) hangi yönetiminde bir protokol göstermek kanserle ilişkili.
Gibi Crohn hastalığı (CH) ve ülseratif kolit (ÜK) gibi enflamatuar barsak hastalığı olan bireyler (İBH), sağlıklı bireyler üzerinde kolorektal kanser (CRC) yakalanma riski altındadır. Bu risk yaygın kolon tutulumu ile köklü UC olan bireylerin% 30 gibi yüksek bir kümülatif insidans, hastalık süresi ve kapsamı ile orantılıdır. İBH ve ilişkili kolit kansere (CAC) 1 Kolon displazi sonucunda geliştiği düşünülmektedir Bu hücrelerin kronik inflamatuar bir sitokin ortamda kalmış ise. 2 spontan ve kolit ile ilişkili kanserler olmak adenokarsinomların kalitesi paylaşmakla birlikte epitel hücre hasarı ve onarım tekrarlanan döngü, altta yatan moleküler olaylar dizisi farklı olduğuna inanılıyor. 3. Bu ayrım CAC belirli hayvan modelleri için ihtiyaç savunuyor.
Birkaç fare modelleri anda CAC çalışma yapılmamış. Dekstran sülfat Sodium (DSS), kolon epiteli üzerine doğrudan toksik etkileri olan bir ajan, kronik inflamatuar bir devlet oluşturmak için birden fazla döngüleri farelere içme suyu tatbik edilebilir. Yeterli süre ile bu farelerin bazı tümörler gelişir. Yanlısı bir kanserojen ortamda yönetilen eğer 4 tümör gelişimi bu modelde hızlandırdı edilir. Bunlar, tümör oluşumunun yollar genetik mutasyonlar ile fareler (APC, p53, Msh2) yanı sıra, fareler genotoksik ajanlar (azoxymethane [AOM], 1,2-dimetilhidrazin [DMH]). 5 ile ön tedavi içermektedir
Kolit ilişkili kanser için bir model olarak AOM ile DSS kombinasyonu, tekrarlanabilirlik, kudret, düşük fiyat ve kullanım kolaylığı için popülerlik kazanmıştır. Bunlar ortak bir mekanizmaya sahip olsa da, AOM DMH daha çözelti daha kuvvetli ve stabil olduğu tespit edilmiştir. Diğer modellerde tümör gelişme genellikle gerektirir iken birkaç ay, AOM ile enjekte ve sonradan DSS ile tedavi edilen farelerde bir yeterli tümörler gelişirnin 7-10 hafta kadar az. 6, 7 Son olarak, AOM ve DSS belirli bir tümörojenik suşu ile melezlenmesi herhangi bir genetik arka fareler (Transgenik, vs nakavt) ile tatbik edilebilmektedir. Burada, biz 10 haftalık dönemde DSS üç yedi günlük döngüleri takip AOM tek bir enjeksiyon kullanan farelerde inflamasyon odaklı kolonik tümörogenez için bir protokol göstermektedir. Bu model yakın insan CAC meydana benzeyen histolojik ve moleküler değişiklikler tümör uyarıcı ve bu hastalıkta karsinojeneze ve kemoprevensiyonu çalışması için son derece değerli bir model sunar. 8
Hızlı ve etkili modeller insan kolit ile ilişkili kanser AOM ve DSS ile farelerin tedavisi. Kolit ile ilişkili kanserlerin katkıda bulunan faktörleri kalıtsal ilişkin Hipotezler kolayca genetiğiyle oynanmış farelerin ile ele alınabilir. 13. Alternatif 16, kolit ilişkili kanser farmakolojik hedefler etkisi wild-tip fareler kullanılarak incelenebilir.
Bu model son derece inflamasyon ortamda kolon tümör gelişimini çalışmaya ilgilenenler tarafından değ…
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma DK089016 ve L30 RR030244 (MAC), CA153036 (AS) ve P30-DK52574 (Washington Üniversitesi Sindirim Hastalıkları Araştırma Core) tarafından finanse edildi. AIT Howard Hughes Tıp Enstitüsü Tıbbi Araştırma Eğitim Görevlisi oldu.
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
C57BL/6J Mice | Jackson Laboratory | 000664 | |
Azoxymethane (AOM) | Sigma Aldrich | A5486-100MG | Stock solution: dilute to 10 mg/ml in distilled water to be kept at -20 °C as 0.5 – 1 ml aliquots.
Working solution: dilute stock to 1 mg/ml in isotonic (0.9%) saline |
Dextran Sulfate Sodium (DSS) | TdB Consultancy | DB001 | MW 40 kDa (36-50 kDa preparations from other sources are acceptable; The same lot should be used for a single experiment)6 |
Coloview miniendoscopic system | Karl Storz | Multiple | See Becker et al. for detailed explanation of equipment and setup.11 |
TPP Rapid FILTERMAX 500 ml Bottle-Filter, 0.22 μm PES | Midwest Scientific | TP99500 | Any standard tissue culture filter is acceptable |
Ethyl Alcohol 200 Proof ASC/USP | Pharmaco-AAPER (or other) | 11ACS200 | Dilute to 70% in distilled water |
Isoflurane, USP | Butler Animal Health Supply | 4029405 | Place mouse in glass jar with gauze or a small cloth soaked in anesthetic |
18G Straight Gavage Needle | Braintree Scientific | N-008 | |
Phosphate Buffered Saline (PBS) | Sigma Aldrich | P5493 | Dilute to 1X (0.01 M) in distilled water |
Cold Tray (Tissue Tek II Cold Plate) | Fisher Scientific | NC9491941 | Store at -20 °C |
ImageJ Software | NIH (free download) | http://rsbweb.nih.gov/ij/ | |
Formaldehyde (37%) | Fisher Scientific | F79-500 | Dilute to 10% in PBS |
BD Bacto Agar | Fisher Scientific | DF0140-01-0 | Use hotplate to create 2% solution in distilled water |
Miltex Eye Dressing Forceps | MedPlus Inc. | 18-780 | |
Miltex Eye Scissors | MedPlus Inc. | 18-1430 | Curved points prevent damage to colon during opening. |
Alcian Blue 8GX (powder) | Sigma Aldrich | A5268 | Add 1 g powder to 100 ml 3% acetic acid (3 ml glacial acetic acid + 97 ml distilled water) |
1 mL Tuberculin syringe with attached 26 G x 3/8 in intradermal bevel needle | BD | 305946 | For injection of AOM |