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Behavior

Risonanza magnetica funzionale (fMRI) con Auditory Stimulation in uccelli canori

Published: June 3, 2013 doi: 10.3791/4369
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 1, 1, 1
1Bio-Imaging Lab, University of Antwerp

Summary

Questo articolo mostra una procedura ottimizzata per l'imaging dei substrati neurali della stimolazione uditiva nel cervello Songbird utilizzando la risonanza magnetica funzionale (fMRI). Esso descrive la preparazione degli stimoli sonori, il posizionamento del soggetto e l'acquisizione e la successiva analisi dei dati fMRI.

Abstract

La neurobiologia del canto degli uccelli, come modello per il linguaggio umano, è una zona marcata di ricerca in neuroscienze comportamentali. Considerando che l'elettrofisiologia e molecolare approcci permettono l'indagine sia stimoli differenti su alcuni neuroni, o uno stimolo in grandi parti del cervello, il livello di ossigenazione del sangue dipendente (BOLD), risonanza magnetica funzionale (fMRI) permette di combinare entrambi i vantaggi, cioè confrontare l'attivazione neurale indotta da stimoli differenti in tutto il cervello in una volta. fMRI in uccelli canori è impegnativo a causa delle piccole dimensioni del loro cervello e perché le loro ossa e soprattutto il loro cranio comprendono numerose cavità d'aria, inducendo importanti artefatti di suscettibilità. Gradient-echo (GE) fMRI BOLD è stato applicato con successo per uccelli canori 1-5 (per una rassegna, vedi 6). Questi studi si sono concentrati sulle aree cerebrali uditive primarie e secondarie, che sono le regioni libere di artefatti di suscettibilità. Tuttavia, poiché proccessi di interesse possono verificarsi al di là di queste regioni, è necessaria tutta la fMRI BOLD cervello utilizzando una sequenza MRI meno suscettibile a questi manufatti. Ciò può essere ottenuto utilizzando spin-echo (SE) BOLD fMRI 7,8. In questo articolo, si descrive come utilizzare questa tecnica in diamanti mandarini (Taeniopygia guttata), che sono piccoli uccelli canori, con un peso di 15-25 g ampiamente studiato in neuroscienze comportamentali del canto degli uccelli. Il tema principale di studi fMRI su uccelli canori è percezione canzone e canzone apprendimento. La natura degli stimoli uditivi in ​​combinazione con i deboli sensibilità BOLD di SE (rispetto a GE) sequenze fMRI basati rende l'implementazione di questa tecnica molto impegnativo.

Protocol

1. Preparazione degli stimoli uditivi

  1. Prima di registrare il suono-stimolo, mentre in fase di riproduzione all'interno del foro del sistema MR 7T. L'alesaggio è uno spazio limitato che può distorcere gli stimoli uditivi con conseguente valorizzazione di determinate frequenze uditive. Figura 1 mostra le frequenze enfatizzate e repressa come dimostrano le nostre registrazioni di rumore bianco realizzato in corrispondenza della posizione della testa degli stessi all'interno del magnete con un microfono in fibra ottica (Optimic 1160, Optoacoustics). Per compensare questo aumento artificiale, una funzione di equalizzazione viene applicata a ogni stimolo utilizzando il software WaveLab. Per la nostra particolare configurazione, la funzione consiste di un kernel gaussiano con i seguenti parametri: ampiezza massima:-20dB, centrata su 3.750 Hz, larghezza: 0,05 ottave (corrispondente al range 2.500-5.000 Hz per il nostro sistema).
  2. Gli stimoli brani sono composti da diversi singoli motivi canto di ogni uccello intercalati con periodi di silenzio. Il dfigurazione di questi periodi di silenzio viene regolata per mantenere la quantità totale di suono e silenzio identiche per tutti gli stimoli. Questa costruzione conserva la naturale variabilità intra-individuale e inter-individuale della durata del brano. La lunghezza totale di ogni stimolo è 16 sec. L'intensità di ogni canzone è normalizzato in termini di abbinamento root-mean-square e passa-alto a 400 Hz filtrata prima di essere integrato nel stimolo completo (canto e periodi di silenzio). Queste manipolazioni sono effettuate utilizzando il software Praat.
  3. L'esperimento è costituito da un ON / OFF di blocco di design si alternano periodi di stimolazione uditiva (su blocchi) con periodi di riposo (OFF blocchi) (Figura 2). Ogni blocco (ON e OFF) dura 16 sec, che corrisponde al tempo di acquisizione di due immagini (vedi sotto per acquisizione). Ogni tipo di stimolo è presentato 25 volte, con la conseguente acquisizione di 50 immagini al stimolo e per ogni soggetto. L'ordine di presentazione delle condizioni dovrebbe essere randomizzati entro e trasoggetti. Questo ordine casuale degli stimoli può essere codificato in un software di presentazione.

2. Oggetto Preparazione

2.1 Oggetto e dimensione del gruppo

Qui vi presentiamo un protocollo specificamente adattate per l'uso di (adulti) diamanti mandarini. La scelta della specie dipende dalla domanda scientifica. Tuttavia, altre considerazioni come uccello robustezza per l'anestesia può anche essere presa in considerazione. Zebra fringuelli (Taeniopygia guttata) dovrebbero essere alloggiati in voliere sotto una luce 12 ore: 12 ore fotoperiodo buio e di avere accesso a cibo e acqua ad libitum per tutto lo studio. Il numero minimo di individui per esperimento è 15. Questo numero tiene conto della sensibilità di spin-echo fMRI e la naturale variabilità interindividuale dei fenomeni biologici misurati nell'esperimento.

2.2 Installazione di configurazione e preparazione dell'animale

(Per le specifichedelle attrezzature utilizzate, si fa riferimento alla lista di reagenti e attrezzature specifiche alla fine di questo articolo)

  1. Installare la maschera becco sul letto risonanza magnetica di un sistema MR 7T e collegarlo al dispositivo di controllo del gas con tubi di plastica. Aprire entrambi ossigeno e bombole di gas di azoto e accendere il dispositivo di controllo del gas (portata di ossigeno: 200 cc / min di azoto: 400 cc / min).

Come detto sopra, un sistema RM 7T è utilizzato nella configurazione presentata. Altri sistemi MR con differenti intensità di campo sono possibili, ma a 7T che viene raggiunto un buon compromesso tra rapporto segnale-rumore e grado di artefatti di suscettibilità (vedi la discussione). Ad intensità di campo superiori, il rapporto segnale-rumore aumenta con il grado di artefatti di suscettibilità.

  1. Accendere il sistema di controllo di feedback e dispositivo di flusso d'aria calda.
  2. Anestetizzare il diamante mandarino con il 3% isoflurano in una miscela di ossigeno e azoto, introducendo il becconella maschera e tenendo la testa verso il basso fino a quando l'uccello è completamente anestetizzati. Questo può essere verificato tirando il piede dolcemente: quando l'uccello è completamente sedato il piede non sarà ritratto dalla uccello. Inoltre, gli occhi dell'uccello saranno parzialmente chiuse.
  3. Introdurre la sonda di temperatura cloacale per schermare la temperatura corporea e monitorare il tasso di respirazione mettendo un sensore pneumatico sotto il diamante mandarino pancia. Chiudere la giacca per trattenere il corpo dell'uccello (Figura 3).
  4. Mantenere la frequenza respiratoria nel range di 40 - 100 respiri al minuto e mantenere costante la temperatura corporea in un intervallo ristretto di 40 ± 0,5 ° C. Quando l'intervallo di respirazione è troppo basso / alto, regolare il livello di anestesia (% isoflurano) di conseguenza. Se il problema persiste, l'esperimento deve essere interrotto e l'animale rimosso dalla configurazione al fine di recuperare.
  5. Posizionare i diffusori dinamici non magnetici su entrambi i lati della testa e del fringuello con zebrali collegare all'amplificatore. Assicurarsi che i cavi degli altoparlanti sono guidati dalla sonda di temperatura, perché può influenzare la lettura della temperatura, quando troppo vicino.
  6. Disporre la bobina RF superficie sulla parte superiore della testa fringuello e posizionare il diamante mandarino nel centro del magnete (e automaticamente il centro della bobina di trasmissione che si trova al centro del magnete) zebra.
  7. Ridurre il livello di anestesia al 1,5% isoflurano mescolato con ossigeno e azoto.

3. Acquisizione Dati

  1. Acquisire una serie di 1 sagittale, 1 orizzontale e 1 coronale gradiente echo (GE) immagine Scout (tri-pilota sequenza) e set di immagini multi-slice orizzontali, coronale e sagittale (pilotaggio T 2-ponderata rapida acquisizione relax-enhanced ( RARE) sequenza SE) per determinare la posizione del cervello nel magnete (Figura 4).
  2. Diminuire il rumore dei gradienti, aumentando i loro tempi di rampa a 1.000 ms.
    3. <li> Preparare la sequenza fMRI: RARE T sequenza 2-ponderata, efficace TE: 60 msec, TR: 2.000 msec, fattore RARE: 8, FOV: 16 mm, dimensione della matrice: 64 x 32, l'orientamento: sagittale, spessore di taglio: 0,75 mm, Inter-fetta spessore dello spazio: 0,05 millimetri, 15 fette che coprono quasi tutto il cervello (Figura 4).
  3. Selezionare il protocollo uditivo (stimoli uditivi e tempi di consegna stimolo) nel software di presentazione. Questo protocollo è costituito da una sequenza di comandi - per l'avvio di specifici stimoli uditivi - che vengono eseguiti in una specifica scansione-numero. Ad ogni ripetizione all'interno della sequenza fMRI, il software dello scanner invierà un trigger al software di presentazione uditiva che a sua volta registra il numero di scansione ed esegue il comando corrispondente.
  4. Per assicurarsi che il software di presentazione uditiva non manca qualsiasi trigger dallo scanner, il protocollo uditivo è iniziato prima. Una volta che il protocollo è completamente caricato, la sequenza fMRI viene avviato.
  5. Ogni esperimento fMRI è preceduta dalla acquisizione di 12 immagini fittizie per permettere al segnale attribuita al rumore scanner per raggiungere uno stato stabile prima di iniziare la stimolazione uditiva.
  6. Dopo l'acquisizione zero riempire i dati a 64 x 64.
  7. Prendete un primo (preliminare) cerca i risultati utilizzando lo strumento funzionale di Paravision (opzione di elaborazione / Imaging Funzionale). Calcolare la risposta BOLD differenziale tra tutti su blocchi e la linea di base (OFF blocchi). Questa analisi fornisce una prima indicazione della qualità dell'esperimento. Se nessun attivazione è visto nelle aree uditive primarie, in questa fase, l'uccello ha probabilmente non sente / elaborati gli stimoli uditivi a causa di problemi tecnici con la presentazione dello stimolo, il livello di anestesia, ecc L'installazione deve essere verificato e la misurazione ripetuta.
  8. Eseguire un 3D RARE sequenza pesata in T2 anatomica con lo stesso orientamento come le precedenti scansioni fMRI e con efficace TE: 60 msec, TR: 2.000 msec, fattore RARE: 8, FOV: 16 mm, dimensione della matrice: 256 x 128 x 64.
  9. Zero riempire i dati di 256 x 256 x 256.
  10. Prendete il diamante mandarino dal letto MRI e lasciarlo recuperare da anestesia in una gabbia sotto una lampada rossa. Normalmente, il recupero di un diamante mandarino dopo isoflurano va relativamente veloce (massimo 5 min). Dopo pochi minuti, gli uccelli cercheranno di alzarsi in piedi e una volta che l'uccello è completamente recuperato, sarà appollaiarsi su un ramo invece di sedersi sul fondo della gabbia. La durata dell'anestesia è di circa 2 ore per il presente esperimento. Il tempo massimo di isoflurano applicato a diamanti mandarini nel nostro laboratorio è di 6 ore, dopo di che gli uccelli anche recuperato entro 5 min.

4. Elaborazione dati

  1. Convertire il MR-dati in formato Analyze o Nifti.
  2. Perché SPM è stato sviluppato per elaborare dati fMRI acquisiti in esseri umani, che è per voxel di circa 2 millimetri. Numerose impostazioni SPM sono adattati a questa dimensione approssimativa voxel. Se uno non wformica per cambiare tutte queste impostazioni, il modo più semplice di procedere è quello di aumentare artificialmente la dimensione voxel di dati fMRI uccelli. Regolare la dimensione del voxel nell'intestazione moltiplicando la dimensione reale voxel da 10 utilizzando MRIcro. Va notato, che tale rettifica non influenza i dati in sé, nessun ricampionamento o altre modifiche viene applicato l'dati.

Un'alternativa a questo è l'uso di 'SPMMouse', che è una cassetta degli attrezzi che consente SPM di aprire e analizzare i file di qualsiasi dimensione voxel. Lo strumento permette SPM 'cervelli in vetro "per essere creati da qualsiasi immagine, e regola automaticamente default scale di lunghezza basate sulle intestazioni di file di immagini o dati inseriti dall'utente. Quindi, questo toolbox funziona in modo opposto di quello che noi proponiamo. Invece di cambiare la dimensione del voxel delle immagini per adattarsi in SPM, le impostazioni di default di SPM vengono modificati per utilizzare le immagini con dimensioni diverse voxel.

  1. Riallineare i dati fMRI. Co-registrazione del anatomico set di dati 3D per tegli serie temporali fMRI. Normalizzare i dati 3D (e le serie storiche fMRI co-registrata) per il diamante mandarino cervello MRI atlante. Applicare la matrice di trasformazione per il set di dati fMRI. Tutto questo può essere fatto utilizzando Statistical Parametric Mapping (SPM) del software 8.
  2. Lisciare i dati con una larghezza di 0,5 mm kernel gaussiano con SPM8.
  3. Effettuare analisi voxel-based statistici utilizzando SPM8. Modello dei dati come un box-auto (nessuna funzione di risposta emodinamica). Stimare i parametri del modello con l'algoritmo di massima verosimiglianza ristretta classica. Calcola l'effetto medio di ogni stimolo uditivo in ogni materia (analisi a effetti fissi) e quindi calcolare le statistiche come auspicato per le analisi di gruppo (analisi mixed-effect).
  4. Proiettare la mappa parametrica statistica sul diamante mandarino atlante (Figura 5) 9 in SPM8 di localizzare le attivazioni funzionali (Figura 6).

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Representative Results

Siamo qui presentate visivamente una sequenza ottimizzata di procedure per l'imaging di successo di substrati neurali di stimoli uditivi nel cervello fringuello zebra. In primo luogo, la procedura descritta per la preparazione dei stimoli uditivi risultati in stimoli che può essere incorporato in un ON / OFF blocco paradigma (Figura 2) e che sono normalizzati per eliminare potenziali differenze nel livello di pressione sonora che potrebbe evocare una risposta differenziale nel cervello . Dopo aver preparato il diamante mandarino per la scansione MRI e posizionandolo nel foro del magnete (Figura 1), fMRI può essere acquisita. Inoltre, un'immagine ad alta risoluzione di immagini 3D è presa al fine di normalizzare i dati per il diamante mandarino atlante 9. Infine, l'analisi di pre-elaborazione e statistica dei dati permette la visualizzazione dei risultati ottenuti (Figura 6).

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Figura 1. Spettrogrammi di rumore bianco registrati al fine di stabilire le bande di frequenza che vengono esaltate / soppressi all'interno del magnete. A. Il rumore bianco al di fuori del magnete. B. Il rumore bianco registrata alla posizione della testa di uccello all'interno del magnete. C. White rumore dopo l'applicazione della funzione di equalizzazione per correggere le bande di frequenza avanzate / soppressa.

Figura 2
Figura 2. Panoramica del ON / OFF paradigma blocco in cui periodi di stimolazione uditiva si alternano a periodi di riposo. Ogni blocco (stimolo / riposo) dura 16 secondi durante i quali due immagini vengono acquisite. I diversi stimoli costituiti motivi rappresentativi di uccellini o altri tipi di suonoseconda dell'esperimento. Questi motivi sono concatenati e intercalati da periodi di silenzio e la durata dei periodi di silenzio viene regolata per mantenere la quantità totale di suono e silenzio identiche per tutti gli stimoli.

Figura 3
Figura 3. . Setup per uditivo fMRI in piccoli uccelli canori A. letto Animal riquadro:. Panoramica schematica dettagliata del posizionamento del volatile nel letto animale dello scanner: B. bobina testa RF, C. maschera Becco con D. fornitura di gas anestetico, E. cuffie non magnetici, F. sensore cuscino pneumatico per monitorare il tasso di respirazione, G. sonda di temperatura cloacale, H. feedback del sistema di riscaldamento controllato per mantenere il corpotemperatura stabile uccello durante la misura. Clicca qui per ingrandire la figura .

Figura 4
Figura 4. Geometria Slice per l'imaging fMRI tutto il cervello. Composizione di screenshot da editor di geometria nel software ParaVision. Acquisite precedentemente assiali, immagini pilotaggio RARE sagittali e coronali sono usati per definire l'orientamento fetta per la scansione fMRI.

Figura 5
Figura 5. Vista laterale di una rappresentazione 3D dell'emisfero sinistro con le strutture delineate dal diamante mandarino atlante 9, proiettato sulla sua fetta sagittale. Il codice colori dei nuclei delineato è presentato sulla destra. Questi delineatndr strutture fanno parte del percorso di motore vocale: HVC, nucleo robustus arcopallii (RA), nXII pars tracheosyringealis (nXIIts), il prosencefalo via anteriore: nucleo laterale magnocellularis pars lateralis (GESTLAY), zona X (X), il sistema uditivo: campo L, nucleo ovoidalis (Ov), nucleo mesencephalicus pars lateralis dorsale (MLD), il sistema olfattivo: bulbo olfattivo (OB), e il sistema visivo: nucleo entopalliallis (E), tectum opticum (TeO).

Figura 6
Figura 6. Esempio di una risposta BOLD fMRI nella regione uditiva primaria, Campo L, e le regioni uditive secondarie adiacenti evocati da diversi stimoli uditivi rispetto alla condizione di riposo. Le immagini sono costituite da mappe parametriche statistici sovrapposti su immagini anatomiche ad alta risoluzione dal fringuello cervello zebra atlante 9. T-valori sono colore codificato secondo ilscala visualizzata in figura e solo voxel in cui il t-test è risultato significativo (p <0.001) sono visualizzati.

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Discussion

In questo rapporto, descriviamo un protocollo ottimizzato per la dettagliata caratterizzazione in vivo di substrati neurali della stimolazione uditiva in anestetizzati diamante mandarino.

In linea con il protocollo presentato, la maggior parte degli studi di attivazione funzionale del cervello in animali utilizzando fMRI BOLD, anestetizzare gli animali durante l'acquisizione. Animali di addestramento per abituarli all'ambiente magnete e il rumore dello scanner durante i periodi di studio è anche possibile, ma piuttosto in termini di tempo e difficile e quindi raramente impiegato.

Anche se l'anestesia riduce al minimo gli effetti indotti dallo stress sulle risposte fisiologiche di interesse e facilita la movimentazione degli animali, il suo effetto sia sulla risposta neurale e sulla funzione di trasferimento tra l'attività neurale e la risposta BOLD misurato in fMRI è un argomento di ricerca in corso e importante . Pertanto, gli effetti dell'anestesia sulla risposta BOLD durante audstimolazione itory in diamanti mandarini sono stati studiati nel nostro laboratorio 2. Di conseguenza, tre anestetici utilizzati in diamanti mandarini - medetomodine, isoflurano e uretano - che agiscono su diversi sistemi di neurotrasmettitori, sono stati studiati. I risultati indicavano che la stimolazione uditiva provocato risposte chiare grassetto con tutte tre anestetici, ma che lievi differenze verificato tra i tre reagenti in termini, ad esempio estensione dell'area di attivazione. Sulla base dei risultati di questo studio e sul fatto che l'anestetico isoflurano è più comune nelle applicazioni cliniche come ha il grande vantaggio di avere relativamente rapido recupero e minori effetti collaterali e quindi ha il più alto potenziale per uso in studi longitudinali, isoflurano divenne l'anestetico di scelta per diamante mandarino fMRI presso il nostro laboratorio.

In questo protocollo si usa spin-echo (SE) fMRI al posto del più tradizionale gradiente-echo (GE) fMRI. Rispetto al GE fMRI, SE fMRI hail grande vantaggio di fornire segnale a tutto il cervello come non vi è alcuna perdita di segnale nelle immagini. Un altro vantaggio di SE BOLD fMRI è la sua specificità spaziale migliore 10,11. Infatti, ad alto campo magnetico, la componente intravascolare del segnale BOLD SE è ridotta (a causa di una lunga TE) e la componente extravascolare da grandi recipienti viene soppressa (dal 180 ° rifocalizzazione polso della MRI sequenza SE). Il segnale BOLD SE è così dominato da un segnale extravascolare accurata proveniente da piccoli vasi 12-14. La principale limitazione di SE fMRI è la sua sensibilità relativamente debole, che richiede sequenze ottimizzate e paradigmi di stimolazione ottimizzate. Il contrasto al rumore (CNR) aumenta con l'intensità di campo 15. Una lunga TE aumenta anche il CNR, ma compromette il rapporto segnale-rumore 12,13,15. L'ottimale TE corrisponde solitamente ad un tempo pari o superiore al valore T 2 dei tessuti. Abbiamo dimostrato che, a 7T,un valore di 60 msec TE fornisce un CNR e un rapporto segnale-rumore sufficiente per rilevare differenze significative nelle risposte BOLD innescate da stimoli differenti (Poirier, 2010).

Rispetto al GE T2 *-ponderata contrasto, SE contrasto T2 richiede un lungo TR (1.500-2.000 msec a 7T). Per essere in grado di immagine 15 fette, abbiamo utilizzato un TR di 2000 msec. Per mantenere il tempo di acquisizione di un limite ragionevole, SE sequenze MRI devono essere accelerati. Normalmente ciò viene ottenuto utilizzando l'eco planare di imaging (EPI) schema di campionamento 10,16-19. Tuttavia, EPI induce distorsioni dell'immagine che aumentano con l'intensità del campo magnetico, e contamina il segnale BOLD con T2 * effetti (rendendo il segnale più forte ma meno specifico). EPI produce anche un rumore acustico molto intenso, rendendo meno rilevante per l'uso nelle indagini stimoli uditivi. Abbiamo quindi usato una sequenza RARE con una matrice di dimensioni 64 x 32, che ha comportato un tempo di acquisizione di 8 sec. Questo Resolut temporaleione è ancora compatibile con la risposta BOLD lenta indotta da disegni a blocchi, ma troppo lento per campionare con precisione l'andamento nel tempo della risposta BOLD o di utilizzare i disegni evento-correlati. Con questa sequenza, abbiamo così ottenuto un segnale SE T2-pesata puro, che è caratterizzato da una buona specificità spaziale, una sensibilità sufficientemente elevata per rilevare risposte BOLD differenziali ed una risoluzione temporale compatibile con lo stimolo paradigma utilizzato 20,21.

Vantaggi e limiti dell'uso di fMRI in uccelli canori

Nel corso degli ultimi decenni, la fMRI è diventata una delle più popolari tecniche di neuroimaging in neuroscienze cognitive clinica per lo studio dell'attività cerebrale durante i vari compiti che vanno dal semplice senso-motorio a compiti altamente cognitive. In studi preclinici, questo metodo è, tuttavia, ancora solo scarsamente utilizzato. La scarsità di esperimenti fMRI completato nei piccoli animali e soprattutto uccelli canori ad oggi forseriguarda il fatto che l'anestesia o sedazione è richiesto per raggiungere immobilizzazione completa dei soggetti (vedere discussione di cui sopra). Quindi, questo è considerato il grave inconveniente della tecnica e limita il tipo di domande che possono essere affrontate. Tuttavia, anche se fMRI richiede l'anestesia e il segnale BOLD riflette soprattutto potenziali di campo locale e, quindi, si differenzia dai potenziali d'azione misurati nel gene precoce elettrofisiologico e immediato (IEG) studi (ad esempio 22), fMRI BOLD ha confermato molti dei risultati ottenuti con queste tecniche.

Ad oggi, le tecniche più popolari Songbird neuroscienze sono ancora espressione di attività-dipendente di registrazioni IEG ed elettrofisiologiche di singolo o multi-unità di attività. Queste tecniche beneficiano di una risoluzione spaziale molto elevata (5-30 micron; livello cellulare). Tuttavia, essi sono altamente invasiva o addirittura letali. Inoltre, tecniche elettrofisiologiche sono limitati dal numero di Locationi che possono essere campionate in un esperimento e quindi richiedono ipotesi a priori sulla localizzazione del substrato neuronale coinvolta nel processo indagato. In contrasto, fMRI BOLD consente un approccio tutto il cervello - con una risoluzione spaziale di 250 micron - e quindi può essere utilizzato per eseguire esperimenti ipotesi-free. Infine, e soprattutto, la non invasività della RM permette misure longitudinali ripetute sugli stessi soggetti, che si apre una vasta gamma di nuove possibilità.

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Disclosures

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Acknowledgments

Questa ricerca è stata sostenuta da finanziamenti della Fondazione per la Ricerca - Fiandre (FWO, progetto Nr. G.0420.02 e G.0443.11N), l'Ercole Foundation (Grant Nr. AUHA0012), concertate azioni di ricerca (finanziamento GOA) presso l'Università di Anversa, e in parte sponsorizzato dalla CE - FP6 progetto Dimi, LSHB-CT-2005-512146 e CE - FP6 progetto EMIL LSHC-CT-2004-503569 per A.VdL. G.DG e CP sono borsisti post-dottorato della Fondazione di Ricerca - Fiandre (FWO).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Isoflurane anaesthetic Isoflo 05260-05
PC-Sam hardware/software SA-Instruments http://www.i4sa.com
Monitoring and gating system 1025
MR-compatible small rodent heater system Model 1025 compatible
Rectal temperature probe RTP-102B 7'', 0.044''
7T MR scanner Bruker Biospin PHS 70/16
Paravision software 5.1
Gradient Insert BGA9S 400 mT/m, 300A, 500V
Gradient Amplifiers Copley Co., USA C256
Transmit resonators Inner diameter: 72 mm, transmit only, active decoupled
Receiver antenna - 20 mm quadrature Mouse Head Receive only, active decoupled
WaveLab software Steinberg
Praat software Paul Boersma, University of Amsterdam http://www.praat.org
Non-magnetic dynamic speakers Visation, Germany HK 150
Fiber optic microphone Optoacoustics, Optimic 1160
Sound amplifier Phonic corporation MM 1002a
Presentation software Neurobehavioral Systems Inc.
MRIcro Chris Rorden http://www.cabiatl.com/mricro/mricro/
Statistical Parametric Mapping (SPM) Welcome Trust Centre for Neuroimaging 8 http://www.fil.ion.ucl.ac.uk/spm/

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Risonanza magnetica funzionale (fMRI) con Auditory Stimulation in uccelli canori
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Van Ruijssevelt, L., De Groof, G.,… More

Van Ruijssevelt, L., De Groof, G., Van der Kant, A., Poirier, C., Van Audekerke, J., Verhoye, M., Van der Linden, A. Functional Magnetic Resonance Imaging (fMRI) with Auditory Stimulation in Songbirds. J. Vis. Exp. (76), e4369, doi:10.3791/4369 (2013).

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