Cet article décrit une méthode pour visualiser les artères cérébrales de rats à travers une fenêtre crânienne à l'aide craniectomie temporelle afin de voir les parties proximales de l'artère cérébrale moyenne (<strong> Figure 1</strong>). Cette méthode polyvalent peut être combiné avec différentes techniques de délivrance de médicaments à mesurer la réactivité artère cérébrale<em> In vivo</em>.
Création d'une fenêtre crânienne est une méthode qui permet la visualisation directe des structures sur la surface corticale du cerveau 1-3. Cette technique peut être réalisée dans de nombreux endroits qui recouvrent le cerveau du rat, mais est plus facilement réalisée par la création d'une craniectomie sur les os facilement accessibles frontale ou pariétale. Le plus souvent, nous avons utilisé cette technique en combinaison avec le modèle de l'endothéline-1 occlusion de l'artère cérébrale d'accident vasculaire cérébral ischémique à quantifier les changements de milieu diamètre de l'artère cérébrale navire qui se produisent avec l'injection de l'endothéline-1 dans le parenchyme cérébral adjacent au proximale MCA 4, 5. Afin de visualiser la partie proximale de la MCA au cours de l'endothéline -1 MCAO induite, nous utilisons une technique pour créer une fenêtre crânienne à travers l'os temporal sur la face latérale du crâne de rat (figure 1). Artères cérébrales peuvent être visualisés soit avec la dure-mère intacte ou avec la mère et incisé retrala Direction exécutive. Le plus souvent, nous laissons intacte la durée pendant la visualisation depuis l'endothéline-1 induite par MCAO implique la livraison du peptide vasoconstricteur dans le parenchyme cérébral. Cela évite la nécessité d'inciser la dure-mère directement sur les vaisseaux visualisés pour l'administration de médicaments. Ce protocole décrit comment créer une fenêtre crânienne de visualiser les artères cérébrales d'une manière progressive, ainsi que la façon d'éviter de nombreux pièges potentiels liés à cette méthode.
En résumé, cette technique de la fenêtre crânienne préparation est très polyvalent car il peut être modifié pour répondre aux besoins de nombreuses expériences avec des modifications mineures 4, 5. Par exemple, nous avons réussi à surveiller le débit sanguin cérébral dans les branches MCA spécifiques en utilisant la vélocimétrie laser se concentrer directement sur une artère cérébrale visualisée à travers une fenêtre crânienne (la Mecque AP 2009 et 2011). En outre, une préparation si…
The authors have nothing to disclose.
Ce travail a été soutenu par des subventions du Cœur d'affiliation Association américaine du Grand Sud-Est (09GRNT2060421), l'American Medical Association et de l'Université de Floride, clinique et translationnelle Institut des sciences. Adam La Mecque est un garçon NRSA NIH / NINDS, prédoctoral (F30 NS-060335). Robert Regenhardt reçu le soutien bourse pré-doctorale de l'Université de Floride du programme de formation multidisciplinaire sur l'hypertension (T32 HL-083810).
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
Inhalation anesthesia system | VetEquip Inc., Pleasanton, CA, USA | 901806 | |
Isoflurane anesthetic | Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL, USA | 1001936060 | |
Small animal stereotaxic system | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 900 | |
Non-rupture ear bars, rat | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 957 | |
Rat gas anesthesia head holder | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 1929 | |
BAT-12 microprobe thermometer | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12 | |
T/PUMP, Thermal blanket | Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, NY, USA | T/PUMP, TP600 | |
Metzenbaum Scissors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501254 | |
Iris forceps | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 15915 | |
Bulldog clamp retractors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14119-G | |
10 μl syringe 26-gaugue | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | SGE010RNS | |
Bovie, high temperature cautery kit | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500392 | |
Rat tooth forceps 0.12 | Stotz | E1811 | |
Micromotor drill | Stoelting, Wood Dale, IL, USA | 51449 | |
0.8 mm round drill bur | Roboz Surgical Instrument Co., Inc., Gaithersburg, MD, USA | RS-6280C-1 | |
STORZ Bonn suturing forceps | Bausch and Lomb, Inc., Rochester, NY, USA | ||
Nylon Suture, size 3.0 | Oasis, Mettawa, IL, USA | MV-663 | |
Cotton swabs | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | 22-029-488 | |
Puralube eye ointment | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | NC0138063 | |
Electric hair clippers | Oster, Providence, RI, USA | 78005-301 | |
ET-1 diluted to 80 μM concentration in PBS | American Peptide, Sunnyvale, CA, USA | 88-1-10A | |
Chlorhexidine, 2% | Agrilabs, St. Joseph, MO, USA | 1040, Rev. 6-06, NAC No.: 10580322 | |
Surgical microscope | Seiler Instrument and Manufacturing, St. Louis, MO, USA | Evolution xR6 | |
Sony Handycam | Sony, Minato, Tokyo, Japan | HDR-SR12 | |
Fiber optic illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–150 | |
VLC media Player | (Paris, France) | ||
Image J software | U.S. National Institutes of Health, Bethesda, MA, USA |