هذه المقالة طريقة لتصور الشرايين الدماغية الفئران من خلال نافذة الجمجمة باستخدام قطع القحف الزمنية لعرض أجزاء القريبة من الشريان الدماغي الأوسط (<strong> الشكل 1</strong>). ويمكن الجمع بين هذه الطريقة تنوعا مع تقنيات مختلفة لاستخدام العقاقير لقياس التفاعل الدماغي الشريان<em> في الجسم الحي</em>.
إنشاء نافذة الجمجمة هو الأسلوب الذي يسمح التصور المباشر الهياكل على سطح القشرية من الدماغ 1-3. لا يمكن أن يؤديها هذه التقنية في العديد من المواقع التي تغمر المخ الفئران، ولكن هو الأكثر بسهولة نفذت من خلال خلق قطع القحف على العظام يمكن الوصول إليها بسهولة أو الجبهي الجداري. في معظم الأحيان، وقد استخدمنا هذه التقنية بالاشتراك مع endothelin-1 الشريان المخي الأوسط نموذج انسداد السكتة الدماغية لتحديد التغيرات في الشريان المخي الأوسط قطر السفينة التي تحدث مع الحقن من 1-endothelin في لحمة الدماغ المتاخمة للMCA القريبة 4، 5. من أجل تصور الجزء القريب من خلال MCA يسببها endothelin MCAO -1، نستخدم تقنية لإنشاء إطار الجمجمة عن طريق العظم الصدغي على الجانب الوحشي من الجمجمة الفئران (الشكل 1). يمكن تصور الشرايين الدماغية إما مع أو الجافية سليمة مع قطعي الجافية وretraالمديرية. الأكثر شيوعا، نترك سليمة الجافية خلال التصور منذ endothelin-1 MCAO بفعل ينطوي على تسليم الببتيد vasoconstricting في لحمة الدماغ. هذا يتجاوز الحاجة إلى شق الجافية مباشرة عبر السفن تصور لتسليم المخدرات. وهذا البروتوكول تصف كيفية إنشاء إطار لتصور الشرايين القحفية الدماغية على نحو تدريجي، وكذلك كيفية تجنب الكثير من المزالق المحتملة المتصلة بهذا الأسلوب.
وباختصار، هذه النافذة إعداد الجمجمة تقنية متعددة جدا ويمكن تغييره لتلبية احتياجات العديد من التجارب مع تعديلات طفيفة 4، 5. على سبيل المثال، رصد نجحنا تدفق الدم الدماغي في فروع محددة باستخدام الليزر MCA دوبلر flowmetry التركيز مباشرة على الشريان الدماغي تصور من خلال ?…
The authors have nothing to disclose.
وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من أمريكا انضم جمعية القلب جنوب شرق الكبرى (09GRNT2060421)، الجمعية الطبية الأمريكية، ومن جامعة العلوم السريرية ومعهد فلوريدا بالحركة. آدم مكة هو زميل NRSA NIH / NINDS، predoctoral (NS-F30 060335). تلقى روبرت Regenhardt predoctoral الدعم زمالة من جامعة فلوريدا برنامج التدريب المتعدد التخصصات في ارتفاع ضغط الدم (HL-T32 083810).
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
Inhalation anesthesia system | VetEquip Inc., Pleasanton, CA, USA | 901806 | |
Isoflurane anesthetic | Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL, USA | 1001936060 | |
Small animal stereotaxic system | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 900 | |
Non-rupture ear bars, rat | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 957 | |
Rat gas anesthesia head holder | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 1929 | |
BAT-12 microprobe thermometer | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12 | |
T/PUMP, Thermal blanket | Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, NY, USA | T/PUMP, TP600 | |
Metzenbaum Scissors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501254 | |
Iris forceps | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 15915 | |
Bulldog clamp retractors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14119-G | |
10 μl syringe 26-gaugue | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | SGE010RNS | |
Bovie, high temperature cautery kit | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500392 | |
Rat tooth forceps 0.12 | Stotz | E1811 | |
Micromotor drill | Stoelting, Wood Dale, IL, USA | 51449 | |
0.8 mm round drill bur | Roboz Surgical Instrument Co., Inc., Gaithersburg, MD, USA | RS-6280C-1 | |
STORZ Bonn suturing forceps | Bausch and Lomb, Inc., Rochester, NY, USA | ||
Nylon Suture, size 3.0 | Oasis, Mettawa, IL, USA | MV-663 | |
Cotton swabs | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | 22-029-488 | |
Puralube eye ointment | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | NC0138063 | |
Electric hair clippers | Oster, Providence, RI, USA | 78005-301 | |
ET-1 diluted to 80 μM concentration in PBS | American Peptide, Sunnyvale, CA, USA | 88-1-10A | |
Chlorhexidine, 2% | Agrilabs, St. Joseph, MO, USA | 1040, Rev. 6-06, NAC No.: 10580322 | |
Surgical microscope | Seiler Instrument and Manufacturing, St. Louis, MO, USA | Evolution xR6 | |
Sony Handycam | Sony, Minato, Tokyo, Japan | HDR-SR12 | |
Fiber optic illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–150 | |
VLC media Player | (Paris, France) | ||
Image J software | U.S. National Institutes of Health, Bethesda, MA, USA |