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Article de méthode

Modèle murin de la cicatrisation

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DOI :

10.3791/50265

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28 mai 2013

Dans cet article

Résumé

Un modèle murin de la cicatrisation cutanée qui peut être utilisé pour évaluer les composés thérapeutiques dans des contextes physiologiques et physiopathologiques.

Résumé

La cicatrisation des plaies et la réparation sont des processus biologiques les plus complexes qui se produisent dans la vie humaine. Après une blessure, de multiples voies biologiques s'activent. La cicatrisation des plaies, qui se produit chez les patients diabétiques par exemple, peut conduire à des résultats défavorables sévères telles que l'amputation. Il est, par conséquent, un élan croissant de développer de nouveaux agents qui favorisent la cicatrisation des plaies. Les essais de ces a été limitée aux grandes modèles animaux comme la viande porcine, qui sont souvent impraticables. Souris représentent le modèle préclinique idéal, car ils sont économiques et se prêtent à la manipulation génétique, ce qui autorise des investigations mécaniste. Cependant, la cicatrisation des plaies chez une souris est fondamentalement différente de celle de l'homme comme cela se fait principalement par l'intermédiaire de la contraction. Notre modèle murin surmonte ce en intégrant une attelle autour de la plaie. Moyen d'une attelle la plaie, le processus de réparation est alors dépendante de l'épithélialisation, la prolifération cellulaire et l'angiogenèse, qui reflètent étroitement lales processus biologiques de cicatrisation des plaies de l'homme. Bien que nécessitant cohérence et de soins, ce modèle murin ne comporte techniques chirurgicales complexes et permet de tester robuste des agents prometteurs qui peuvent, par exemple, favoriser l'angiogenèse ou inhiber l'inflammation. En outre, chaque souris agit comme son propre contrôle en deux plaies sont préparés, permettant l'application à la fois le composé d'essai et la commande du véhicule sur le même animal. En conclusion, nous démontrons un modèle pratique, facile à apprendre et robuste de cicatrisation de la plaie, ce qui est comparable à celle des humains.

Introduction

La cicatrisation des plaies est responsable de morbidité et de mortalité dans le monde entier significative, ce qui est particulièrement vrai pour les personnes souffrant de diabète sucré de 1,2. Chez l'être humain, la cicatrisation des plaies est un continuum de processus, dans lequel il est important de chevauchement 3. Immédiatement processus inflammatoires, blessant suivantes sont initiées. Les cellules inflammatoires libèrent des facteurs qui favorisent les processus de prolifération cellulaire, la migration et l'angiogenèse. Après réépithélisation et la formation de nouveaux tissus il ya une phase de rénovation qui implique à la fo....

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Protocole

1. Préparation des attelles et des pansements occlusifs

  1. Décrivez 10 cercles mm sur 0,5 mm feuilles de silicone épais et utiliser des ciseaux ou un biopsie pour créer des disques de silicone.
  2. Centre mm de biopsie 5 dans le milieu du cercle mm 10 et appuyez fermement pour créer un trou pour former un "donut"-comme disque qui sera utilisé comme une attelle.
  3. Décrivez 10 cercles mm sur un pansement occlusif transparent comme Opsite et utiliser des ciseaux pour créer des pansements circulaires.

2. Animaux de laboratoire

  1. Obtenir l'approbation du comité d'éthique animale pour toutes les expé....

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Résultats

Une courbe de fermeture de la plaie est déterminé en calculant le diamètre moyen de la plaie et d'exprimer les résultats sous forme de pourcentage, soit 100 - (Jour 0 / diamètre diamètre du Jour de X). Dans cette expérience, un composé thérapeutique (ou le contrôle du véhicule) a été appliqué quotidiennement sur la plaie. Le composé thérapeutique de fermeture de plaies fortement accélérée (Figure 3). Il est important de noter que les attelles doivent être conservés pendant la durée de l'.......

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Discussion

Il s'agit d'un modèle expérimental murin de la cicatrisation cutanée. Une caractéristique importante de ce modèle est l'utilisation d'attelles en silicone pour empêcher la contraction de la plaie afin que réépithélisation et la formation de nouveaux tissus peuvent se produire, ce qui en fait similaire au processus qui se produit chez l'homme. Ce modèle est polyvalent et peut être utilisé pour évaluer la cicatrisation des plaies dans les milieux physiologiques et physiopathologiques (diabète .......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n'ont rien à révéler.

Remerciements

Les auteurs tiennent à remercier le soutien financier du Conseil de recherches médicales (NHMRC) de l'Australie (Project Grant ID: 632512) Santé nationale et du. Louise Dunn a été soutenue par un début de carrière NHMRC Fellowship et Christina Bursill par une Fondation carrière Bourse nationale de développement du coeur.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Feuille de silicone press-to-seal 0,5 mm d’épaisseurInvitrogenP18178Coupé en « beignets » avec un diamètre extérieur de 1 cm externe, 0,5 cm de diamètre intérieur
Poinçon de biopsie 5 mmSteifelBC-B1-0500Pour délimiter la zone de la plaie à exciser
Ciseaux Vannas 8,5 cm incurvéWorld Precision Instruments 501232Pour l’incision et l’excision de la plaie
Dumonte #7b Pince de 11 cmWorld Precision Instruments501302Pour saisir la peau lors de la création d’une incision et de l’excision de la peau
Pince Graefe, dentelée de 10 cmWorld Precision Instruments14142Pour aider à fixer l’attelle en silicone à la peau
Porte-aiguille, mâchoires lisses, incurvées, 12,5 cmWorld Precision Instruments14132
Pince Malis, lisse, droite, 12 cmCodman and Shurtleff, Inc (J& ampère; J)80-1500Pour suturer les anneaux en silicone à la peau
Règle, gradation 0,5 mmn/a
Étriers Gradation 0,25 mmDuckworth et Kent9-653Pour mesurer la surface de la plaie
Film adhésif transparent Opsite FlexiFix. 10 cm x 1 mSmith & Neveu66030570
Rimadyl (Carprofène)Pfizer462986

Références

  1. Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair. 17, 763-771 (2009).
  2. Sen, C. K. Wound healing essentials: let there be oxygen. Wound Repair Regen. 17, 1-18 (2009).
  3. ....

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