Summary
हम एक 2.0 मिमी वीक्षक के साथ एक ओटोस्काप का उपयोग प्रत्यक्ष laryngoscopy के माध्यम से चूहों में अंतःश्वासनलीय इंटुबैषेण के लिए एक सरल, विश्वसनीय, और अपेक्षाकृत सस्ती विधि विकसित की है. इस तकनीक atraumatic है और पुरानी प्रयोगों में दोहराया माप के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. हम इसे बेहतर Tracheostomy या पहले से nonsurgical तकनीक की सूचना पाते हैं.
Abstract
चूहे, wildtype और ट्रांसजेनिक दोनों, वर्तमान में जैव चिकित्सा अनुसंधान में प्रिंसिपल स्तनधारी मॉडल हैं. इंटुबैषेण और मैकेनिकल वेंटिलेशन गहरी संज्ञाहरण या फेफड़े की कार्यक्षमता की माप के तहत शल्य चिकित्सा की आवश्यकता है कि पूरे पशु प्रयोगों के लिए आवश्यक हैं. Tracheostomy मैकेनिकल वेंटिलेशन अनुमति देने के लिए इन चूहों में airway intubating के लिए मानक किया गया है. Orotracheal इंटुबैषेण क्योंकि पर्याप्त तकनीकी कठिनाई या अति विशिष्ट और महंगे उपकरण के लिए एक आवश्यकता की सूचना दी गई है लेकिन सफलतापूर्वक कई अध्ययनों में इस्तेमाल नहीं किया गया. यहाँ हम एक 2.0 मिमी वीक्षक के साथ लगे एक ओटोस्काप का उपयोग और एक अंतःश्वासनलीय ट्यूब के रूप में एक 20 जी नसों में कैथेटर का उपयोग प्रत्यक्ष laryngoscopy की एक तकनीक की रिपोर्ट. हम नली लगाना और चूहों में फेफड़ों के समारोह का सटीक आकलन का संचालन करने के लिए बड़े पैमाने पर और मज़बूती से इस तकनीक का इस्तेमाल किया है. इस तकनीक अनुभवी हाथों में अनिवार्य रूप से कोई पशु हानि के साथ, सुरक्षित साबित हो गया है. इसके अलावा, इस तकनीकपुरानी मॉडल में चूहों के दोहराया अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
Introduction
प्रयोगशाला माउस जीव विज्ञान और pathobiology के प्रिंसिपल स्तनधारी मॉडल के रूप में लगभग सभी प्रजातियों supplanted किया है. प्रयोगशाला माउस स्पष्ट रूप से और बड़े पैमाने पर मानव रोग की एक मॉडल के रूप में मूल्य का होना दिखाया गया है और मानव जीव विज्ञान और रोग के बारे में हमारी समझ के अग्रिमों में अमूल्य साबित हो गया है कि छोटी से छोटी स्तनधारी प्रजातियों है. कम हमल समय और काफी कम लागत जैव चिकित्सा अनुसंधान के क्षेत्र में एक आम उपकरण के रूप में अशक्त और ट्रांसजेनिक चूहों के विकास और अध्ययन की अनुमति दी है. हालांकि, औसत प्रयोगशाला माउस (20-25 ग्राम) का आकार नतीजतन, कुछ जांचकर्ताओं बड़ा स्तनधारी प्रजातियों का अध्ययन, physiologically या शल्य चिकित्सा आधारित अध्ययन में उनके अध्ययन और सीमित कर दिया है. इन अध्ययनों में चूहों का उपयोग करने के लिए एक बाधा गहरी संज्ञाहरण के तहत शारीरिक माप या व्यापक शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं की अनुमति होगी कि इंटुबैषेण तकनीक के साथ कठिनाई का सामना है. Tracheostomy 1 एक मानक ते के रूप में इस्तेमाल किया गया हैक्योंकि आवश्यकता इस तकनीक और मामूली कौशल का प्रदर्शन करने में अधिक से अधिक आराम के बजाय इंटुबैषेण के chnique. हालांकि, Tracheostomy पुरानी या वसूली सर्जरी के अध्ययन के लिए अनुकूल नहीं है; इस प्रकार, यह तीव्र प्रयोगों के लिए सीमित है. Tracheostomy भी सूजन या संवेदनशील शारीरिक सजगता महत्वपूर्ण हैं जिसमें शोध में एक confounding चर हो सकता है.
हमारी प्रयोगशाला अन्य जांचकर्ताओं द्वारा वर्णित तकनीकों का सबसे कोशिश की और कारणों की एक किस्म के लिए अपर्याप्त पाया गया है. Tracheostomy भी दर्दनाक है और खून बह रहा है और airway सूजन लाती है. उससे भी ज्यादा समस्याग्रस्त यह feasibly दोहराया नहीं जा सकता है. उपकरण में एक मामूली निवेश की आवश्यकता है कि कई अपेक्षाकृत noninvasive तकनीक पर्याप्त विश्वसनीय नहीं कर रहे हैं. अन्य तकनीक उपकरण एक विशिष्ट आवेदन में काम करेंगे जानने के बिना औचित्य साबित करना मुश्किल है कि महंगे उपकरण की आवश्यकता होती है. इस प्रकार, हम कोई और अधिक टी की आवश्यकता है कि एक nontraumatic तकनीक विकसित करने की मांगहान विशेष उपकरण में एक मामूली निवेश, जल्दी से पूरा किया जा सकता है और मज़बूती से, पुरानी मॉडल में दोहराया जा सकता है, और पशुओं की बड़ी संख्या में इस्तेमाल किया जा सकता है. यहाँ हम एक ऐसी तकनीक की रिपोर्ट.
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Protocol
1. पशु तैयारी
- (छोटे चूहों एक विशेषज्ञ द्वारा intubated किया जा सकता है) 8 सप्ताह से अधिक उम्र और 20 से अधिक जी रहे हैं कि चूहों प्राप्त करते हैं.
- संज्ञाहरण
- Intraperitoneally एक preanesthetic रूप ketamine और xylazine की 20 मिलीग्राम / किलो, प्रत्येक, के साथ चूहों इंजेक्षन. (यह खुराक पूरी तरह से माउस anesthetize करने के लिए अपर्याप्त है, लेकिन मैकेनिकल वेंटिलेशन के लिए इंटुबैषेण के बाद सुरक्षित हस्तांतरण, सुविधा.) हालांकि, dosages का समायोजन संस्थागत पशु चिकित्सक के परामर्श से संवेदनाहारी प्रतिक्रिया के अनुसार आवश्यक हो सकता है.)
- 90-120 सेकंड के लिए एक प्रेरण कक्ष में 3.5% isoflurane / ऑक्सीजन के साथ चूहों में संज्ञाहरण प्रेरित.
- ध्यान से सांस की दर पर गौर करें. यह कम से कम 45 धड़कन प्रति मिनट करने के लिए उत्तरोत्तर धीमी गति से होना चाहिए.
2. इंटुबैषेण के लिए तैयारी
- प्रेरण कक्ष से माउस निकालें और कसकर कूड़ा.
- सज्जन को तकिये ठीक संदंश का प्रयोग करेंly मुंह से जीभ का विस्तार.
- दो उंगलियों के बीच जीभ पकड़ और सज्जन बल लगाने से जीभ का विस्तार बनाए रखें.
- एक ऊर्ध्वाधर गति के साथ ओटोस्काप के वीक्षक पर माउस ऊपर खींचो.
- कसकर scruffing जबकि ओटोस्काप की आंख के माध्यम से देखो और जीभ और कूड़ा द्वारा धीरे माउस को खींच.
- मुखर रस्सियों के लिए ध्यान से देखो. वे इस समय आसानी से दिखाई जानी चाहिए. laryngis प्रवेशिका (laryngeal खोलने की संरचना) अपेक्षाकृत सफेद दिखना चाहिए. प्रत्येक सांस के साथ तार के आंदोलन होना चाहिए. डोरियों नहीं बढ़ रहे हैं या खराब कल्पना कर रहे हैं, तो थोड़ा पशु बारी बारी से और धीरे से गर्दन hyperextend.
- प्रमुख हाथ से, एक पेंसिल की तरह, कैथेटर की नोक के माध्यम से विस्तार PE10 टयूबिंग की एक 1 सेमी लंबाई के साथ, कैथेटर में 20 ग्राम, 1 पकड़ और वीक्षक के पक्ष में डालें. पीई टयूबिंग एक ख़ंजर या बत्ती के रूप में कार्य करता है.
- PE10 TUBI प्रत्यक्षएनजी मुखर तार के माध्यम से (ख़ंजर) और हब तक पीई टयूबिंग से अधिक 20 जी कैथेटर (अंतःश्वासनलीय ट्यूब) अग्रिम कम छेनी के स्तर पर है. जल्दी से इस ख़ंजर निकालें.
- धीरे वीक्षक के बंद जानवर लेने के लिए और प्रयोग के दौरान सामान्य संज्ञाहरण बनाए रखने के लिए निरंतर 2% isoflurane के साथ एक यांत्रिक वेंटीलेटर पर पशु रखकर ट्यूब स्थान सत्यापित. इंटुबैषेण की पुष्टि के लिए एक झलक जाल के माध्यम से जाने की अवधि समाप्त हो हवा (बुलबुले) कल्पना. Esophageal इंटुबैषेण कुछ बुलबुले में हो सकता है, यद्यपि यह रूप में स्पष्ट या अंतःश्वासनलीय इंटुबैषेण के साथ के रूप में संगत नहीं होगा. इसके अलावा, नकारात्मक deflections के लिए एक airway दबाव ट्रेसिंग (चित्रा 1) का पालन. ये ट्यूब के उचित स्थान की पुष्टि करें. वैकल्पिक रूप से, चतुर्थ ट्यूबिंग में पानी की एक छोटी राशि जगह और यह एट ट्यूब से कनेक्ट. श्वसन 2 के साथ माउस को और से आंदोलन का सत्यापन करना. Esophageal इंटुबैषेण, पी के मामले मेंressure ट्रेसिंग काफी अधिक दबाव और कोई नकारात्मक deflections खोलेगा. अंत ज्वार सीओ 2 मददगार होगा हालांकि, तकनीकी रूप से इस छोटे से ज्वार की मात्रा (~ 200 μl) और यह बहुत महंगा हो जाएगा करने के लिए उपकरण को देखते हुए बहुत मुश्किल होगा. वर्णित सरल तकनीक पूरी तरह से पर्याप्त है और बहुत कम महंगे हैं. Isoflurane संज्ञाहरण उपलब्ध नहीं है, तो सभी प्रक्रियाओं सामान्य संज्ञाहरण के लिए xylazine 10-20 मिलीग्राम / किग्रा के साथ संयोजन के रूप में ketamine 80-120 मिलीग्राम / किग्रा का उपयोग किया जा सकता है.
3. वैकल्पिक तकनीक: सीधी laryngoscopy ओटोस्काप तकनीक के साथ मुख्य रूप फेफड़ों में अध्ययन पदार्थों की सीधी टपकाना के लिए, अन्य प्रयोजनों के लिए आसानी से किया जाता है.
- प्रेरण कक्ष में 90-120 सेकंड के लिए 3.5% से कम इस प्रक्रिया के लिए अकेले isoflurane के साथ पशुओं में संज्ञाहरण प्रेरित.
- कसकर खोपड़ी के आधार पर पशु कूड़ा और धीरे जीभ का विस्तारठीक संदंश के साथ.
- पशु आगे खिंचाई नहीं किया जा सकता जब तक धीरे जीभ पकड़, सीधे ऊपर वीक्षक पर (असंशोधित) पशु खींच.
- मुखर तार अकेले इस तकनीक से सबसे अधिक बार कल्पना की है, लेकिन पशु और पूर्ण दृश्य में उन्हें लाने के लिए अति बढ़ाया गर्दन बारी बारी से किया जा सकता है.
- उपजिह्वा को instillate युक्त एक जेल लोडिंग विंदुक अग्रिम और तरल पदार्थ टपकाना. वीक्षक hypopharynx साथ एक मुहर बनाता है क्योंकि माउस डोरियों के माध्यम से जाना नहीं है कि किसी भी अवशिष्ट तरल महाप्राण जाएगा. यह आसानी से rhonchorous द्वारा सत्यापित है साँस लेने में जब तरल पदार्थ फेफड़ों में पूरी तरह से वितरित किया जाता है जब तक माउस अब बनाता लगता है.
- वैकल्पिक रूप से, तरल के पीछे एक हवा सांस के साथ तरल पदार्थ के 50 μl युक्त एक 0.5 मिलीलीटर सिरिंज को PE10 टयूबिंग कनेक्ट. 0.5 सेमी के लिए मुखर तार के माध्यम से ध्यान पीई टयूबिंग अग्रिम और धीरे धीरे airway में सामग्री का निर्वहन. हालांकि, कम airway के लिए कभी कभी आघात यू तब होता हैनमूना के बेहतर वितरण के बिना इस तकनीक गाते हैं.
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Representative Results
ऊपर तकनीक के साथ इंटुबैषेण विश्वसनीय और तेज है. अंतःश्वासनलीय ट्यूब की उचित प्लेसमेंट सबसे आसानी से जलमग्न निःश्वास अंग से समाप्त हो गई है गैस बुदबुदाती देख द्वारा सत्यापित है वेंटीलेटर सर्किट (आमतौर पर एक झलक जाल में) और (चित्रा 1) अनुरेखण एक airway दबाव पर नकारात्मक deflections की. airway दबाव ट्रेसिंग पर नकारात्मक deflections सबसे अधिक विश्वसनीय हैं. दूसरों निःश्वास वेंटीलेटर सर्किट 2 से जुड़े नसों में ट्यूबिंग में एक छोटे से तरल पदार्थ छोटी बूंद के आंदोलन का इस्तेमाल किया है. हम बड़े पैमाने पर इस तकनीक का इस्तेमाल नहीं किया है, यह ट्यूब स्थान सत्यापित करने के लिए पर्याप्त होना चाहिए. एक अनुभवी ऑपरेटर पहले पारित पर इस विधि समय के बारे में 90% का उपयोग चूहों नली लगाना कर सकते हैं. ट्यूब तुरंत निकाल दिया जाता है, असफल है कि उन लोगों के लिए, पशु isoflurane संज्ञाहरण के साथ reinduced, और प्लेसमेंट फिर से प्रयास किया गया है. पशु एक ESO के मामले में वेंटीलेटर सर्किट से जुड़ा छोड़ दिया हैकोई हस्तक्षेप नहीं है अगर phageal इंटुबैषेण, पेट धीरे - धीरे (हवा, गैस आकद को) फूँक मारकर या सांस खींच कर शरीर - गुहा में भरना ऊंची चोटी airway दबाव, hypoxemia, और अंततः मौत पैदा होगा. उच्च शिखर airway दबाव के नकारात्मक सांस खींचने का प्रयास के बिना मनाया जाता है, पशु तुरंत वेंटिलेटर से हटा दिया है और extubated किया जाना चाहिए. हालांकि, वेंटीलेटर से पशु हटाने और अंतःश्वासनलीय ट्यूब को हटाने के आसानी से यह रिवर्स. इंटुबैषेण की आवश्यकता होती है जो पिछले 300 जानवरों के अध्ययन के दौरान एक अनुभवी ऑपरेटर दूसरा प्रयास से प्रारंभिक प्रयास और अधिक से अधिक 95% के साथ 80% intubated. सभी जानवरों अनुभवी ऑपरेटरों के तीसरे प्रयास से intubated थे. चूहों नली लगाना करने के लिए समय लिया isoflurane के साथ माउस को प्रेरित करने के लिए preanesthetic, 90-120 सेकंड के लिए 5 मिनट और 30 सेकंड की पहचान और वास्तव में airway नली लगाना करने पर निर्भर है. हम नए प्रशिक्षुओं पहली मुखर तार कल्पना करना सीखना चाहिए कि मिल गया है. वे सफलतापूर्वक मुखर रस्सियों में दस गुना की एक पूर्ण दृश्य प्रदर्शित कर सकते हैं, तो वे तैयार कर रहे हैं टीओ नली लगाना करने के लिए प्रशिक्षण शुरू करते हैं. प्रशिक्षुओं को सफलतापूर्वक 10 बार intubated करने के बाद, एक अनायास साँस लेने में पशु में अनुरेखण एक airway दबाव पर नकारात्मक deflections द्वारा प्रदर्शन के रूप में, वे प्रायोगिक पशुओं में पढ़ाई करने के लिए तैयार हैं. हालांकि, एक प्रशिक्षण वीडियो बहुत सीखने की अवस्था को गति देगा. केवल अनुभवहीन ऑपरेटरों को इस तकनीक से airway आघात प्रेरित और तकनीक सीखने जबकि जानवरों की मौत इस सेटिंग में हो सकता है. हालांकि, एक अनुभवी ऑपरेटर के साथ जानवरों के नुकसान दुर्लभ है. यह पिछले 4 वर्षों में 1,000 से अधिक पशुओं में हमारा अनुभव है.
यह इस प्रकार airway दबाव के सटीक उपाय की अनुमति, airway के साथ एक तंग सील करता है और यह airway प्रतिरोध के उपायों के लिए पर्याप्त व्यास का है क्योंकि एक 20 जी कैथेटर चूहों में एक अंतःश्वासनलीय ट्यूब के रूप में प्रयोग किया जाता है. हालांकि, एक ख़ंजर या बत्ती के रूप में पीई टयूबिंग का उपयोग 20 जी मुखर तार के माध्यम से आसानी से और अधिक मज़बूती से पारित करने के लिए अनुमति देता है. 1 मेंकैथेटर की (2.5 सेमी) की लंबाई ट्यूब स्थिरता के लिए कम incisors पर केंद्र के साथ रखा जा करने की अनुमति देता है, लेकिन कम airway के लिए आघात के कारण या mainstem ब्रांकाई intubating बिना.
हम airway प्रतिरोध का मापन करने चित्रा (2) methacholine खुराक प्रतिक्रिया घटता प्रदर्शन, और फेफड़ों में दबाव मात्रा रिश्ते (चित्रा 3) को मापने के लिए इस तकनीक का इस्तेमाल करते हैं. इन माप के सभी के लिए जानवरों को पूरी तरह से useable, सही आंकड़ा प्राप्त करने के लिए रुक जाना चाहिए. इस उद्देश्य के लिए हम nonrecovery प्रयोगों में एक सस्ती, nondepolarizing लकवाग्रस्त रूप pancuronium ब्रोमाइड का इस्तेमाल किया है. हालांकि, pancuronium उपलब्ध नहीं रह गया है और इसकी वजह से लंबे समय से आधा जीवन का ठीक जा रहे हैं कि जानवरों पर प्रयोग नहीं किया जा सकता है. इसलिए, हम समय पर दोहराया माप का विकल्प उपलब्ध कराने, क्योंकि उनके कम आधा जीवन की vecuronium (30 मिनट) या पक्षाघात के लिए rocuronium के लिए बंद कर दिया है. अन्य जांचकर्ताओं का इस्तेमाल किया हैएक depolarizing लकवाग्रस्त रूप succinylcholine, लेकिन इसके आधे जीवन हमारे प्रयोगों के बहुमत के लिए बहुत छोटा कर दिया गया है. इसके अलावा succinylcholine histamine रिलीज 3 पैदा कर सकता है और इसलिए एक संभावित confounding चर होगा.
हम भी मूल रूप से हेस्टिंग्स 4 से चूहों की रिपोर्ट में एक तकनीक पर आधारित फेफड़ों के लिए परीक्षण पदार्थों के वितरण के लिए बड़े पैमाने पर प्रत्यक्ष laryngoscopy तकनीक का इस्तेमाल किया है. चूहों लाचार नाक breathers कर रहे हैं और नाक टपकाना आसान है क्योंकि अधिकांश जांच के निचले श्वसन तंत्र को परीक्षण पदार्थों के वितरण के लिए नाक टपकाना का इस्तेमाल किया है. हालांकि, हम नाक टपकाना विधि मात्रात्मक वितरण के लिए अविश्वसनीय हो पाया है. हम मात्रात्मक वितरण फेफड़ों में अधिक विश्वसनीय और वितरण पाया है कि प्रत्यक्ष laryngoscopy तकनीक का उपयोग करके अधिक समान है. प्रत्यक्ष टपकाना तकनीक के हमारे प्रिंसिपल उपयोग कम श्वसन पथ मैं करने के लिए प्रतिजन देने के लिए किया गया हैएलर्जी सूजन की ना मॉडल (चित्रा 4) और airway hyperresponsiveness (चित्रा 2). हम भी इस पद्धति के माध्यम से इस तरह के साइटोकिन्स और दवाओं के रूप में अन्य परीक्षण पदार्थों को जन्म दिया है.
चित्रा 1. Airway दबाव ट्रेसिंग. ब्लू लाइन airway दबाव को दर्शाता है और लाल रेखा तुरंत इंटुबैषेण के बाद माउस में अनुरेखण ज्वार की मात्रा को दर्शाता है. दबाव की अवस्था (काला तीर) के नकारात्मक (नीचे) deflections सहज श्वसन प्रयास से माउस में नकारात्मक intrathoracic दबाव (C57BL / 6, 24 ग्राम) की पीढ़ी से संकेत मिलता है और अंतःश्वासनलीय ट्यूब के उचित स्थान को इंगित करता है. वी के लिए यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण iew.
चित्रा 2. श्वासनली प्रतिरोध और methacholine खुराक प्रतिक्रिया घटता. चूहों (C57BL / 6) इस तकनीक से intubated अल्ट्रासोनिक छिटकानेवाला के माध्यम से दिया methacholine के दोहरीकरण खुराक का उपयोग airway प्रतिरोध और ब्रोन्कियल जेट के उपायों से गुजरना कर सकते हैं. इस प्रतिनिधि उदाहरण में, एक नियंत्रण जानवर मिलीलीटर और ovalbumin प्रतिरक्षित और माउस methacholine को hyperresponsiveness दर्शाता चुनौती दी 25 मिलीग्राम / अप करने के लिए methacholine के लिए एक न्यूनतम प्रतिक्रिया है. इन मापों एक 20 जी कैथेटर के साथ intubated चूहों के साथ बनाया है और एक tracheostomized माउस में किए गए उन से पृथक कर रहे हैं.
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चित्रा 3. दबाव मात्रा वक्र. इस pancuronium साथ रुक एक 20 जी नसों में कैथेटर के साथ intubated किया गया है कि एक 20 ग्राम माउस में एक प्रतिनिधि दबाव मात्रा की अवस्था है, और यंत्रवत् हवादार है. यह कैथेटर 30 सेमी एच 2 हे दबाव को लीक नहीं करता है और इसलिए माउस में सटीक मापन दबाव मात्रा संबंधों को बनाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि यह दर्शाता है.
चित्रा 4. एलर्जी सूजन के ovalbumin मॉडल. यह एक प्रतिनिधि hematoxylin और प्रतिरक्षित और ovalbumin के साथ चुनौती दी गई है कि माउस फेफड़ों के दाग खंड eosin है. यह ovalbu की टपकाना की सामान्यीकृत प्रभाव को दर्शाता हैमिनट प्रत्यक्ष laryngoscopy विधि (बढ़ाई 4x) के माध्यम से प्रशासित.
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Discussion
इस रिपोर्ट में हम nontraumatic है और एक ही पशु में बार बार इस्तेमाल किया जा सकता है कि चूहों नली लगाना करने के लिए एक सरल, विश्वसनीय तकनीक का वर्णन. इस तकनीक को एक मामूली राशि के लिए खरीदा जा सकता है कि साधारण प्रयोगशाला या चिकित्सा उपकरणों के साथ पूरा किया जा सकता है. मूल रूप से हेस्टिंग्स और उनके सहयोगियों 4 द्वारा रिपोर्ट प्रत्यक्ष laryngoscopy की तकनीक, विभिन्न प्रयोजनों के लिए भी इस्तेमाल किया जा सकता है, लेकिन मुख्य रूप से सही कम श्वसन तंत्र को परीक्षण पदार्थों देने के लिए. हम क्योंकि दोहराया उपायों के लिए अपने आसानी, गति, सादगी, विश्वसनीयता, कम खर्च, और संभावित की तारीख करने के लिए अन्य जांचकर्ताओं द्वारा रिपोर्ट उन लोगों के लिए बेहतर है कि इस तकनीक मिल गया है.
चूहों नली लगाना करने के लिए तकनीक नई नहीं हैं. जल्द से जल्द रिपोर्टों में से एक, श्वासनली का इस्तेमाल किया transillumination एक 24 जी कैथेटर 5 के साथ मौखिक इंटुबैषेण द्वारा पीछा किया. हालांकि, इस अध्ययन और दूसरों 6,7 टीईसी को दोहराने के लिए पर्याप्त जानकारी प्रदान नहीं कियाहमारी प्रयोगशाला में hnique. हाल ही में अन्य जांचकर्ताओं अधिक से अधिक सफलता 8,9 के साथ इस transillumination तकनीक का इस्तेमाल किया है. ब्राउन और उनके सहयोगियों द्वारा पहले विस्तृत अध्ययन चूहों, एक 45 डिग्री बैकबोर्ड पर निलंबित कर दिया, उनके tracheas transilluminated था और उनकी श्वासनली एक गढ़े कंठदर्शी ब्लेड 10 का उपयोग प्रत्यक्ष दृश्य के तहत PE90 टयूबिंग के साथ मौखिक रूप से intubated एक अध्ययन में सूचना दी. इस तकनीक को दोहराने के लिए मुश्किल है और इसलिए, बड़े पैमाने पर उपयोग नहीं किया गया है साबित कर दी है. अतिरिक्त रिपोर्ट तकनीक की विश्वसनीयता बढ़ाने के लिए कठोर ऑप्टिकल scopes या अक्षितंतुतंत्र के उपयोग का वर्णन. Vergari और उनके सहयोगियों ने 11,12 मुखर तार कल्पना करने के लिए बाहरी व्यास में एक कठोर arthroscope 1.7 मिमी इस्तेमाल किया और फिर उपजिह्वा के माध्यम से एक गाइड तार रखा. लेखकों वे विशिष्ट और महंगे उपकरण के साथ प्रदर्शन किया है कि इस तकनीक के साथ 100% सफलता की रिपोर्ट. इस शल्य चिकित्सा उपकरणों की लागत चूहों में बड़े पैमाने पर उपयोग के लिए निषेधात्मक लगता है. अतिरिक्त तकनीक एक ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप और एक 2 एफ गाइड तार 13 का उपयोग कर विकसित किया गया है. इस तकनीक हमारा समान है, लेकिन एक ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप का उपयोग आवश्यक है, और इस तरह हम काफी हद तक कम खर्चीला है कि एक ओटोस्काप के उपयोग के पक्ष.
Fiberoptic इंटुबैषेण तकनीक भी एक अपेक्षाकृत सस्ती बैटरी चालित fiberoptic स्रोत 14 का उपयोग कर सूचना दी गई है. हम इस fiberoptic तकनीक का उपयोग करने का प्रयास किया, लेकिन कोई इसी fiberoptic दृश्य चैनल है क्योंकि वहाँ उपयोगी से प्रकाश कम पाया गया है. मैकडोनाल्ड और उनके सहयोगियों ने एक अधिक शक्तिशाली हलोजन प्रकाश स्रोत का इस्तेमाल किया और एक छोटा सा नमूना में सफलता की सूचना दी. वे बार बार भी airway प्रतिरोध 15 उपाय करने में सक्षम थे. अलग अलग समय बिंदुओं पर airway प्रतिरोध की दोहराया उपायों दूसरों 16 से सूचित किया गया है. झाओ, एट अल. श्वासनली puncturing और कमर के माध्यम से एक गाइड तार खिला द्वारा एक प्रतिगामी तकनीक का इस्तेमालहे और oropharynx 17. अभी हाल ही में गायक, एट अल. कैथेटर 18 के स्थान के दस्तावेज़ के लिए एक ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप और प्रतिदीप्तिदर्शन का उपयोग माउस में छोड़ दिया mainstem श्वसनी के चुनिंदा इंटुबैषेण प्रदर्शन किया है. वे तो फेफड़ों में चुनिंदा परीक्षण पदार्थों पैदा करने के लिए इस विधि का इस्तेमाल किया. बहरहाल, यह फिर से महत्वपूर्ण खर्च और उच्च तकनीकी प्रशिक्षण के बिना इस्तेमाल किया जा सकता है कि एक विधि नहीं होगा. इसके अलावा, प्रतिदीप्तिदर्शन भी अध्ययन करने के लिए एक विकिरण जोखिम जोड़ना होगा.
संक्षेप में, एक बाल चिकित्सा ओटोस्काप का उपयोग चूहों के प्रत्यक्ष laryngoscopy एक इंटुबैषेण के लिए बहुमूल्य तकनीक, दोहराया इंटुबैषेण और इंटुबैषेण बिना परीक्षण पदार्थ वितरण है. हम Tracheostomy करने के लिए इस तकनीक का बेहतर लगता है और पहले से noninvasively चूहों में अंतःश्वासनलीय इंटुबैषेण प्रदर्शन के तरीकों की सूचना दी.
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Disclosures
लेखकों वे कोई प्रतिस्पर्धा वित्तीय हितों की है कि घोषित.
Acknowledgments
वयोवृद्ध मामलों के विभाग से एक योग्यता अनुदान और राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान के NHLBI से एक T32-HL098062 अनुदान इस काम का समर्थन किया. हम कृतज्ञता Randolph एच. hasting, एमडी, पीएच.डी. की सलाह मानने के लिए इच्छा और सलाह और VA सैन डिएगो स्वास्थ्य प्रणाली के पशु चिकित्सा मेडिकल यूनिट का समर्थन करते हैं.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Operating Otoscope Head | Welch Allyn | 21700 | $188.98 |
| Otoscope Handle | Welch Allyn | 71000 | $112.20 |
| Reuseable Speculum | Welch Allyn | 22002 | $3.98 |
| Fine Forceps | Miltex | 18-779 | $107.18 |
| Small clamp stand to hold otoscope | |||
| Isoflurane Vaporizer (multiple circuit with vacuum waste gas handling) | Summit Medical | $3,000 | |
| Flexivent (Animal Ventilator) | SCIREQ | $35,000 | |
| Intravenous catheter (20 G, 1 in) | BD | 381233 | $9.62 |
| Polyethylene tubing (PE10) (0.011 in I.D., 0.024 in O.D.) 100 ft | Intramedic, Clay-Adams | 427401 | $115.70 |
| Ketamine 100 mg/ml (10 ml bottle) | Butler | 23061 | $10.00 |
| Xylazine (100 ml bottle) | Vedco | 24105 | $20.00 |
| Isoflurane (250 ml bottle) | $15.00 | ||
| Vecuronium bromide 10 mg/10 ml | Pfizer | NDC 0069-0094-01 | $15.00 |
References
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