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अंतर्गर्भाशयी विकास प्रतिबंध का एक खरगोश मॉडल में भ्रूण इकोकार्डियोग्राफी और स्पंदित लहर डॉपलर अल्ट्रासाउंड

Published: June 29, 2013 doi: 10.3791/50392
Automatic Translation
1,2, 1, 3, 4,5, 1, 3, 3, 2, 1
1Division Woman and Child, Department Women, University Hospitals Leuven, 2The Ritchie Centre, Monash Institute of Medical Research, Department of Obstetrics and Gynaecology, Monash University, Victoria, Australia, 3Department of Cardiovascular Sciences, Katholieke Universiteit Leuven, 4Fetal and Perinatal Medicine Research Group, Institut d'Investigacions Biomediques August Pi i Sunyer (IDIBAPS), 5Maternal-Fetal Medicine Department, ICGON, Hospital Clínic, Universitat de Barcelona, Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER)

Summary

हम समकालीन कार्यात्मक भ्रूण इकोकार्डियोग्राफी और एक खरगोश में गर्भाशय के अंदर भ्रूण के विकास प्रतिबंध की एक शल्य चिकित्सा द्वारा प्रेरित मॉडल में Visualsonics VEVO 2100 microultrasound उपयोग कर भ्रूण तथा अपरा संबंधी डॉपलर अल्ट्रासाउंड से भ्रूण हृदय समारोह की परीक्षा का वर्णन है.

Abstract

Antenatally भ्रूण तथा अपरा संबंधी डॉपलर अल्ट्रासाउंड और भ्रूण इकोकार्डियोग्राफी के क्षेत्र में प्रगति के कारण स्पष्ट है कि असामान्य हृदय समारोह में भ्रूण अंतर्गर्भाशयी विकास प्रतिबंध (IUGR) का परिणाम है. तेजी से, इन इमेजिंग रूपात्मकता जिससे जन्म के फैसले के समय मार्गदर्शक, हृदय समारोह की जांच करने और गर्भ में भलाई का आकलन करने के लिए चिकित्सकीय नियोजित किया जा रहा है. यहाँ, हम एक नैदानिक ​​प्रासंगिक रास्ते में हृदय समारोह के विश्लेषण की अनुमति देता है कि IUGR की एक खरगोश मॉडल का इस्तेमाल किया. Isoflurane प्रेरित संज्ञाहरण का उपयोग करना, IUGR शल्य चिकित्सा bicornuate गर्भाशय उजागर, एक laparotomy प्रदर्शन से गर्भावधि उम्र 25 दिन में बनाया और फिर एक एकल गर्भाशय सींग में प्रत्येक गर्भावधि थैली की आपूर्ति uteroplacental वाहिकाओं के 40-50% ligating है. खरगोश bicornuate गर्भाशय में अन्य सींग आंतरिक नियंत्रण भ्रूण के रूप में कार्य करता है. फिर, गर्भावधि उम्र 30 दिन (पूरी अवधि) में वसूली के बाद, एक ही खरगोश भ्रूण हृदय समारोह की परीक्षा आए. संज्ञाहरण ketam से प्रेरित हैine और xylazine intramuscularly, तो भ्रूण हृदय समारोह पर चिकित्सकजनित प्रभाव को कम करने के लिए ketamine और xylazine की एक निरंतर नसों में जान फूंकना द्वारा बनाए रखा. एक दोहराने laparotomy के प्रत्येक गर्भावधि थैली का पर्दाफाश करने के लिए किया जाता है और भ्रूण हृदय समारोह की एक microultrasound परीक्षा (Visualsonics VEVO 2100) किया जाता है. अपरा कमी एक उठाया pulsatility सूचकांक या नाल की धमनी डॉपलर तरंग के एक अनुपस्थित या उलट अंत डायस्टोलिक प्रवाह से स्पष्ट है. शिरा वाहिनी और मध्य मस्तिष्क धमनी डॉपलर तो जांच की है. भ्रूण इकोकार्डियोग्राफी रिकॉर्डिंग बी मोड, एम मोड और पार्श्व और शिखर विचारों में प्रवाह वेग waveforms के द्वारा किया जाता है. ऑफ़लाइन गणना मानक एम मोड हृदय चर, त्रिकपर्दी और mitral कुंडलाकार विमान सिस्टोलिक भ्रमण, ट्रैकिंग धब्बा और तनाव विश्लेषण, संशोधित दौरे प्रदर्शन सूचकांक और ब्याज की नाड़ी प्रवाह वेग waveforms का निर्धारण करते हैं. IUGR का यह छोटा सा जानवर मॉडल इसलिए uter में की परीक्षा परमिटवर्तमान नैदानिक ​​अभ्यास के अनुरूप है और एक शोधों सेटिंग में इसलिए उपयोगी है कि ओ हृदय समारोह.

Introduction

भ्रूण अंतर्गर्भाशयी विकास प्रतिबंध (IUGR) से परिणाम अतिरंजित नहीं किया जा सकता है कि हृदय रोग का बोझ. यह जन्मजात असामान्यताएं के बाद मृत प्रसव का प्रमुख कारण है. 1 IUGR इसके विकास क्षमता तक पहुँचने में विफल रहता है कि एक भ्रूण को संदर्भित करता है और आमतौर पर अपरा कमी का परिणाम है. बचे में 2, हृदय खराब सेहत स्पष्ट दौरे रोग के साथ जीवन काल में स्पष्ट है . इस्कीमिक हृदय रोग 7 से अकाल मृत्यु की ओर जन्म से सभी संचयी हृदय जोखिम कारकों - शैशव और बचपन 3,4 और बाद में उच्च रक्तचाप 5, मधुमेह 6, और वयस्क जीवन में विकसित मोटापे में

हम दोनों बेहतर IUGR से संबंधित कार के pathophysiology को समझने के लिए कर रहे हैं अगर IUGR और कम सब्सट्रेट उपलब्धता के बाद भ्रूण की प्रतिक्रिया है कि स्थापित प्रसूति भ्रूण संचार चिह्नित करने के लिए पशु मॉडल का विकास आवश्यक हैDIAC परेशानी होती है और भ्रूण और प्रसव के बाद स्वास्थ्य में सुधार करने के लिए हृदय सुरक्षात्मक रणनीति विकसित करने के लिए. इस संबंध में विभिन्न प्रजातियों भर में कई अलग अलग मॉडल में वर्णित किया गया है. 8 IUGR सामान्यतः कृन्तकों में एक कम प्रोटीन आहार के साथ पोषण के तहत मातृ से प्रेरित है, 9 शल्य पृथक या गर्भाशय रक्त प्रवाह के बंधाव rodents और गिनी सूअरों 10 में या का रोड़ा भेड़ में नाल की धमनी. 11 बहरहाल, यह स्पष्ट है कि कोई मॉडल पूरी तरह से स्मरण दिलाता मानव IUGR. 12

इस वर्तमान पद्धति अध्ययन में, हम चिकित्सकीय 14 अल्ट्रासाउंड के साथ मनाया भ्रूण हृदय प्रतिक्रियाओं पैदा करता है, लेकिन यह भी microultrasound प्रौद्योगिकी का उपयोग उपन्यास इकोकार्डियोग्राफी साथ भ्रूण हृदय समारोह से पूछताछ की अनुमति देता है कि न केवल एक खरगोश 13-16 में चयनात्मक uteroplacental संवहनी व्यवधान की एक अच्छी तरह से मान्य दृष्टिकोण का इस्तेमाल किया Visualsonics VEVO 2100 की. जबकि fetopl की डॉपलर अल्ट्रासाउंडacental वाहिकाओं IUGR भ्रूण 17 के मौजूदा प्रसवपूर्व निगरानी की आधारशिला बनी हुई है, कार्यात्मक इकोकार्डियोग्राफी तेजी रोग pathophysiology में नए अंतर्दृष्टि प्रदान करने के लिए और भ्रूण भलाई का आकलन करने के लिए उपयोग किया जा रहा है. 18 तदनुसार, यहाँ हम नैदानिक ​​अनुसंधान से इन अग्रिम लेने के लिए और एक पशु मॉडल का वर्णन है कि इस इमेजिंग मिलावट न केवल बंदरगाहों लेकिन यह भी यंत्रवत रास्ते और उपन्यास चिकित्सा जांच के लिए प्रयोगात्मक मंच प्रदान करता है.

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Protocol

निम्नलिखित प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल पशु आचार समिति, कथोलिएके Universiteit लोवेन, बेल्जियम, बेल्जियम ने मंजूरी दे दी है. हम विशेष रूप से संज्ञाहरण प्रक्रिया में कुछ पद्धति में परिवर्तन, सहित पहले से वर्णित शल्य प्रक्रिया 13 का पालन किया.

1. अंतर्गर्भाशयी विकास प्रतिबंध (IUGR) उत्प्रेरण

  1. गर्भवती खरगोश (संकर Dendermonde और न्यूजीलैंड सफेद) दिनांक समय गर्भावधि उम्र (जीए) 18 दिनों से पानी और मानक खरगोश चाउ यथेच्छ के उपयोग के साथ एक 12/12 घंटे प्रकाश समय पर व्यक्तिगत पिंजरों में रखे जाते हैं. जीए कम 25 दिनों (पूरी अवधि लगभग 31 दिन), खरगोश IUGR की शल्य चिकित्सा के निर्माण के लिए ऑपरेटिंग थिएटर करने के लिए स्थानांतरित कर रहे हैं. सर्जरी से पहले, बेतरतीब ढंग से एक "मामले" (IUGR) और randomization सॉफ्टवेयर (GraphPad सॉफ्टवेयर, यूएसए) 19 का उपयोग करके bicornuate खरगोश गर्भाशय में "नियंत्रण" गर्भाशय सींग का आवंटन. नमूने का आकार व्यक्तिगत r द्वारा बिजली की गणना के द्वारा निर्धारित किया जाना चाहिएब्याज की अपने प्रश्न के लिए esearchers.
  2. संज्ञाहरण प्रक्रिया.
    प्रेरण संज्ञाहरण ketamine 35 मिलीग्राम / किग्रा (Ceva Sante ANIMALE, ब्रुसेल्स, बेल्जियम) और xylazine 5 मिलीग्राम / किग्रा (Ceva Sante ANIMALE, ब्रुसेल्स, बेल्जियम) intramuscularly हिंद पैर में प्रशासन द्वारा हासिल की है. संज्ञाहरण तो 1-4% की inhalational मिश्रण के साथ बनाए रखा है isoflurane (Isoba डॉक्टर, एबॉट लैबोरेटरीज लिमिटेड, Queenborough, केंट, ब्रिटेन) 2 एल / मिनट पर ओ 2 में. लगातार हृदय गति और धमनी 2 हे संतृप्ति नजर रखने के लिए मातृ दूसरे और तीसरे पैर की अंगुली पर एक पल्स oximeter (Nellcor एन 20, Covidien, आयरलैंड) रखें.
  3. सर्जिकल प्रक्रिया.
    1. Premedication. पहले सर्जरी शुरू करने से, एंटीबायोटिक प्रोफिलैक्सिस पेनिसिलीन जी, 300,000 आइयू (केला फार्मा, Hoogstraten, बेल्जियम), गर्भाशय tocolytic medroxyprogesterone एसीटेट 0.9 मिलीग्राम / किग्रा (Depo-Provera, फार्मेशिया अपजॉन, Puurs, बेल्जियम) और एनाल्जेसिक buprenorphine 0.03 मिलीग्राम / प्रशासन किलो (Temgesic, Schering-सप्तऋषि) Subcutaneously एक भी 2.5 मिलीलीटर सिरिंज में.
    2. खरगोश तैयारी. सर्जरी की अवधि के लिए एक वार्मिंग पैड पर खरगोश रखें. पेट की शल्य चिकित्सा क्षेत्र से बालों को हटाने और (Betadine, पर्ड्यू, कनेक्टिकट, संयुक्त राज्य अमरीका) 7.5% povidone आयोडीन एंटीसेप्टिक लागू होते हैं. एक पूरा सड़न रोकनेवाला प्रोटोकॉल फिर कार्यरत है.
    3. उदर laparotomy. Subcutaneously स्थानीय संवेदनाहारी (2 मिलीलीटर 1% lidocaine, बी Braun मेडिकल, बेल्जियम) के साथ चीरा साइट घुसपैठ. चीरा साइट पेट के 2/3 कम में midline में लंबाई में लगभग 5 सेमी, होना चाहिए. त्वचा खोला है एक बार, रेक्टस म्यान पर्दाफाश करने के लिए तेज और कुंद विच्छेदन के एक मिश्रण का उपयोग करें. केयर प्रविष्टि (चित्रा 1 ए) पर मध्य रेखा के दोनों ओर स्थित नाड़ी मातृ स्तन ग्रंथियों से बचने के लिए लिया जाना चाहिए. रेक्टस म्यान और पेरिटोनियम, पेट सामग्री के अनजाने शामिल किए जाने को रोकने के लिए तम्बू समझ, और ध्यान से तेज विच्छेदन (चित्रा 1 बी) का उपयोग करें.
    4. गर्भाशय बाह्यीकरण. गरम खारा में भिगो धुंध पर्दे के साथ शल्य चिकित्सा क्षेत्र चारों ओर. ध्यान से समझ और bicornuate गर्भाशय के दोनों ओर अमल में लाना. केयर इस अनिष्ट खून बह रहा है, दर्द और गर्भाशय के संकुचन में हो सकता है, के रूप में तनाव के तहत योनि या प्रत्येक गर्भाशय सींग का डिम्बग्रंथि के अंत या तो जगह नहीं लिया जाना चाहिए. सहायक लगातार गर्भाशय के संकुचन को रोकने के लिए गरम नमक के साथ संपर्क में गर्भाशय irrigates. टटोलना और प्रत्येक सींग में मौजूद भ्रूण की संख्या रिकॉर्ड है. परंपरा के मुताबिक, डिम्बग्रंथि के अंत में भ्रूण पहले भ्रूण में नामित है. एक गर्भाशय सींग मामले सींग और अन्य नियंत्रण सींग है. IUGR शामिल होने के लिए पहले से बेतरतीब ढंग से आवंटित मामले सींग पहचानें और फिर पेट (आंतरिक नियंत्रण भ्रूण) में वापस नियंत्रण सींग जगह.
    5. शल्य चिकित्सा IUGR प्रेरित किया. नामित मामले सींग (चित्रा 1C) में प्रत्येक गर्भावधि थैली को uteroplacental जहाजों को पहचानें.शल्य चिकित्सा द्वारा एक 5-0 polyglactin सीवन (Ethicon Vicryl, जॉनसन और जॉनसन मेडिकल, यूएसए) (आंकड़े 1D-1E) का उपयोग कर इन जहाजों के 40-50% ligate. अभ्यास में, प्रत्येक गर्भावधि थैली की आपूर्ति तीन संवहनी बंडलों अक्सर होते हैं. इस मामले में, सबसे बड़ा संवहनी बंडल ligated है. पूरा एक बार, गर्भाशय फिर गर्म नमकीन और ध्यान से पेट में लौटे साथ सिंचित है.
    6. उदर बंद. एक निरंतर चल 2-0 polyglactin सीवन (Ethicon Vicryl, जॉनसन और जॉनसन मेडिकल, संयुक्त राज्य अमरीका) का उपयोग कर दो परतों में पेट बंद करें. Subcuticular 3-0 polyglactin सीवन (Ethicon Vicryl, जॉनसन और जॉनसन मेडिकल, यूएसए) के साथ त्वचा को बंद करें. बाद में टांके के साथ हस्तक्षेप से खरगोश को रोकने के घाव पर स्प्रे एल्यूमीनियम एयरोसोल.
    7. वसूली. संज्ञाहरण संघर्ष और बारीकी से श्वसन की वसूली का पालन. भोजन और पानी यथेच्छ के उपयोग के साथ ऊपर वर्णित है और दैनिक के रूप में मनाया खरगोश तो रखे है.

2. भ्रूण इकोकार्डियोग्राफी और स्पंदित लहर डॉपलर अल्ट्रासाउंड का निष्पादन

  1. एक ही खरगोश तो जीए एचोकर्दिओग्रफिक और अल्ट्रासाउंड मूल्यांकन के लिए 30 दिन में सौंप दिया है. खरगोश परीक्षा की अवधि के लिए एक वार्मिंग पैड पर रखा गया है.
  2. संज्ञाहरण प्रक्रिया.
    1. प्रेरण संज्ञाहरण ketamine 35 मिलीग्राम / किग्रा (Ceva Sante ANIMALE, ब्रुसेल्स, बेल्जियम) और xylazine 5 मिलीग्राम / intramuscularly किलो (Ceva Sante ANIMALE, ब्रुसेल्स, बेल्जियम). प्रशासन द्वारा हासिल की है एक बार शांत, एक परिधीय auricular नस में सम्मिलित एक 24 गेज प्रवेशनी (बी Insyte-W बेक्टन डिकिन्सन आसव थेरेपी सिस्टम्स, यूटा, संयुक्त राज्य अमरीका) का उपयोग कर नसों में पहुँच प्राप्त करते हैं.
    2. Ketamine और xylazine की एक निरंतर प्रेरणा के साथ संज्ञाहरण बनाए रखें: 2 मिलीलीटर ketamine (100 मिलीग्राम / एमएल) और 1.5 मिलीलीटर xylazine (20 मिलीग्राम / एमएल) सामान्य नमक की 46.5 मिलीलीटर के लिए, फिर 40 पर एक सिरिंज पंप के माध्यम से संचार मिलीग्राम / घंटा. एक तीन तरह नल सुरक्षित और बचाव संज्ञाहरण के एक 5 मिलीलीटर सिरिंज संलग्न: 2 मिलीलीटरketamine (100 मिलीग्राम / एमएल) और 1.5 मिलीलीटर xylazine (20 मिलीग्राम / एमएल). 0.5 मिलीलीटर बचाव संज्ञाहरण के boluses शायद ही कभी आवश्यक हैं. सर्जरी के लिए subcutaneouslyprior, 0.03 मिलीग्राम / किग्रा (Schering-सप्तऋषि Temgesic) एनाल्जेसिक buprenorphine प्रशासन. आक्सीजन 2 एल / मिनट मुखौटा द्वारा लागू की गई है. लगातार हृदय गति और धमनी 2 हे संतृप्ति नजर रखने के लिए मातृ दूसरे और तीसरे पैर की अंगुली पर एक पल्स oximeter (Nellcor एन 20, Covidien, आयरलैंड) रखें.
  3. उदर laparotomy और गर्भाशय बाह्यीकरण. 1.3.3 और 1.3.4 का संदर्भ लें.
  4. एचोकर्दिओग्रफिक और अल्ट्रासाउंड जांच के लिए भ्रूण स्थिति.
    1. अनुसंधानकर्ता की ओर का सामना कर रहे एक पार्श्व स्थिति में खरगोश रखें. इस परीक्षा के लिए एक एकल गर्भावधि थैली की आसान पुनर्प्राप्ति की सुविधा और uteroplacental जहाजों पर अत्यधिक कर्षण से बचाता है. जितना संभव हो, जोखिम को कम करने के लिए एक समय में केवल एक गर्भावधि थैली अमल करने का प्रयास करें. उजागर गर्भावधि थैली के साथ सिंचित धुंध पर रखा गया है सुनिश्चित करेंखारा गरम. डिम्बग्रंथि और प्रत्येक गर्भाशय सींग की योनि सिरों पर आम तौर पर अलग अध्ययन समूह, केवल भ्रूण के बीच मानकीकृत परिणाम सुनिश्चित करने के लिए अल्ट्रासाउंड परीक्षा में उपयोग किया जाता है.
    2. भ्रूण हृदय समारोह गर्भाशय बाह्यीकरण के प्रभाव को बहुत अतिसंवेदनशील है, तापमान और अपरा वाहिकाओं से अधिक अल्ट्रासाउंड transducer से दबाव में बदल जाते हैं. हृदय समारोह पर इन पर्यावरण और चिकित्सकजनित confounding प्रभाव को कम करने के लिए, अल्ट्रासाउंड परीक्षा गर्भावधि थैली की बाह्यीकरण के बाद तुरंत शुरू करना चाहिए और व्यवस्थित और कुशल होना चाहिए. हमारे अनुभव में, भ्रूण हृदय समारोह में परिवर्तन शायद ही कभी जोखिम के पहले 5 मिनट में होते हैं. भ्रूण मंदस्पंदन का सामना करना पड़ा है, तो अल्ट्रासाउंड जांच निकालने, भ्रूण तथा अपरा संबंधी जहाजों की kinking को रोकने के लिए भ्रूण का स्थान बदलने, गरम खारा या संक्षेप में मातृ पेट में वापस गर्भावधि थैली लौटने के साथ सिंचाई. इस फ़े के लिए भ्रूण मंदस्पंदन कायम रहती है, तो परीक्षादर्जा अगले भ्रूण की जांच के पक्ष में छोड़ दिया जाना चाहिए.
  5. भ्रूण इकोकार्डियोग्राफी.
    1. Visualsonics VEVO 2100 (टोरंटो, कनाडा) स्थापित हृदय और तनाव विश्लेषण सॉफ्टवेयर के साथ उच्च संकल्प microultrasound मंच की आवश्यकता है. एक Visualsonics एमएस -250 ट्रांसड्यूसर (Visualsonics, टोरंटो, कनाडा) डाटा अधिग्रहण के लिए प्रयोग किया जाता है. यह एक बैंडविड्थ 13-24 मेगाहर्ट्ज के साथ 21 मेगाहर्ट्ज के एक केंद्र आवृत्ति है. ज्यामितीय फोकस 15 मिमी है, अधिकतम छवि चौड़ाई 23 मिमी है और अधिकतम छवि गहराई 30 मिमी है. पदचिह्न 28 एक्स 5.75 मिमी है. डाटा भ्रूण इकोकार्डियोग्राम के प्रदर्शन के लिए इकोकार्डियोग्राफी दिशा निर्देशों के अमेरिकन सोसायटी के अनुसार और मानकों में अधिग्रहण कर लिया है. 20
    2. डाटा अधिग्रहण 1: पार्श्व दृश्य पार्श्व चार कक्ष के दृश्य के स्तर पर, तनाव, तनाव की दर, वेग और विस्थापन का निर्धारण करने के लिए कम से कम पांच हृदय चक्र का एक बी मोड सिने पाश रिकॉर्ड.. इस ऑफ़लाइन VevoStrain विश्लेषण का उपयोग कर रहा हैपहले विस्तार में पत्रिका में वर्णित के रूप में (Visualsonics, टोरंटो, कनाडा) एल्गोरिथ्म. 21 एम मोड इकोकार्डियोग्राफी सूचकांक तो इस मानक को ध्यान में रखते हुए प्राप्त किया जा सकता है. हृदय की संरचना और समारोह में दोनों की ऑफलाइन माप तो विश्लेषण किया जा सकता है: प्रकुंचन और पाद लंबा में आंतरिक निलय और सेप्टल व्यास, मात्रा, स्ट्रोक मात्रा, आंशिक छोटा करने, इंजेक्शन फ्रैक्शन और कार्डियक आउटपुट 21.
    3. डाटा अधिग्रहण 2:. शिखर देखने शिखर चार कक्ष को देखने, बी मोड सिने पाश के स्तर पर ऊपर वर्णित के रूप में विश्लेषण VevoStrain के लिए दोहराया जा सकता है. एम मोड इकोकार्डियोग्राफी त्रिकपर्दी (TAPSE) और माइट्रल कुंडलाकार विमान सिस्टोलिक भ्रमण (MAPSE) और अनुदैर्ध्य तनाव और तनाव की दर का आकलन करने के लिए प्रयोग किया जाता है. 22,23 इस शिखर दृश्य भी पहले से ही वाल्वुलर प्रवाह वेग waveforms के आकलन और संशोधित दौरे प्रदर्शन सूचकांक परमिट वर्णित. 24
  6. भ्रूण तथा अपरा संबंधी डॉपलर ult पल्स लहरायाrasound.

नाल की धमनी का प्रवाह वेग तरंग (FVW) रंग डॉपलर का उपयोग कर नाल वाहिकाओं लगाने और उसके बाद गर्भनाल के एक मुक्त पाश पर नाल की धमनी के ऊपर स्पंदित डॉपलर नमूना द्वार रखने से प्राप्त कर रहे हैं. 25 मध्य मस्तिष्क धमनी (एमसीए) FVW है विलिस के सर्किल रंग डॉपलर से स्थित है, सिर्फ एक बार एमसीए के मूल से परे स्पंदित डॉपलर नमूना गेट रखकर स्थित. 26 शिरा वाहिनी (डीवी) FVW देखा डीवी के समीपस्थ हिस्से में स्पंदित डॉपलर नमूना द्वार रखने से प्राप्त किया जाता है यह भ्रूण के एक बाण के समान या अनुप्रस्थ दृश्य में या तो intrahepatic नाल की शिरा से निकलती है. 26 रंग डॉपलर साथ pulsatility सूचकांक (पीआई) Visualsonics हृदय विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग कर ऑफ़लाइन गणना की जाती है.

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Representative Results

Uteroplacental संवहनी बंधाव से भ्रूण और प्लेसेंटा प्रतिबंधित एक विषम विकास चित्रा 1F में एक सामान्य नियंत्रण भ्रूण और प्लेसेंटा की तुलना में है. नियंत्रण करने के लिए पेट की परिधि अनुपात: विषम विकास कम नवजात की जन्म के समय वजन और बढ़ सिर परिधि से इसकी पुष्टि की है. भ्रूण तथा अपरा संबंधी डॉपलर पढ़ाई से प्रतिनिधि परिणाम चित्रा 2 में दिखाया गया है. एक नियंत्रण भ्रूण में सकारात्मक अंत डायस्टोलिक प्रवाह की एक सामान्य कम प्रतिरोध पैटर्न दिखाया गया है. तब IUGR भ्रूण, अभाव और में देखा अपरा प्रतिरोध में प्रगतिशील वृद्धि के साथ अंत डायस्टोलिक प्रवाह स्पष्ट है उलट. चित्रा 3 एक स्वस्थ भ्रूण में एक सामान्य उच्च प्रतिरोध मध्य मस्तिष्क धमनी डॉपलर संकेत और एक ही भ्रूण में एक सकारात्मक एक लहर शिरा वाहिनी को दर्शाता है. IUGR भ्रूण में, एक लहर की शिरा वाहिनी और उत्क्रमण का एक बढ़ा pulsatility सूचकांक देखा जा सकता है. 14 प्रतिनिधि परिणाम एम मोड से भ्रूण इकोकार्डियोग्राफी तो चित्रा 4 में दिखाया गया. इस पार्श्व दृश्य आंतरिक निलय व्यास और मात्रा की गणना की अनुमति देता है. शिखर देखने TAPSE और MAPSE की गणना की अनुमति देता है. चित्रा 5 दर्शाता तनाव, तनाव दर, विस्थापन और वेग की गणना करने के वेग वैक्टर और उसके एवज में क्षेत्रीय तनाव घटता की ट्रैकिंग धब्बा.

चित्रा 1
चित्रा 1. एक खरगोश मॉडल में IUGR बनाने के सर्जिकल तकनीक एक: Midline laparotomy रेक्टस म्यान, तीर = mammory ग्रंथियों को उजागर, बी. उदर गुहा में सुरक्षित प्रविष्टि, सी: गर्भावधि थैली की आपूर्ति तीर = uteroplacental जहाजों, डी: सीवन विधि, ई: तीर uteroplacental पोत के = पूरा बंधाव, एफ: प्रतिनिधि नियंत्रण और IUGR भ्रूण और प्लेसेंटा.

फिर 2 "src =" / files/ftp_upload/50392/50392fig2.jpg "/>
चित्रा 2. नाल की धमनी का डॉप्लर अल्ट्रासाउंड एक: सकारात्मक अंत डायस्टोलिक प्रवाह (EDF), बी. अनुपस्थित अंत डायस्टोलिक प्रवाह (AEDF), सी: अंत डायस्टोलिक प्रवाह (REDF) उलट.

चित्रा 3
चित्रा 3 ए: शिरा वाहिनी, एस एस = लहर (निलय सिस्टोलिक संकुचन) के डॉपलर अल्ट्रासाउंड, घ = घ लहर (जल्दी वेंट्रिकुलर पाद लंबा), एक = एक लहर (आलिंद संकुचन), बी. मध्य मस्तिष्क धमनी की डॉपलर अल्ट्रासाउंड .

चित्रा 4
4 चित्रा. एम मोड इकोकार्डियोग्राफी एक:. पार्श्व चार कक्ष दृश्य, LVID = बाएं निलय आंतरिक व्यास, IVSD = intraventricular सेप्टल व्यास, RVID = सही ventricular सेप्टल व्यास, ईएसडी = अंत सिस्टोलिक व्यास, EDD = अंत डायस्टोलिक व्यास, बी: शिखर देखने त्रिकपर्दी कुंडलाकार विमान सिस्टोलिक भ्रमण (TAPSE) का प्रदर्शन, सी: माइट्रल कुंडलाकार विमान सिस्टोलिक भ्रमण (MAPSE) का प्रदर्शन शिखर दृश्य.

चित्रा 5
चित्रा 5. भ्रूण हृदय तनाव विश्लेषण एक: बाएं वेंट्रिकल की एंडो और महामारी cardium द्वारा परिभाषित हित के क्षेत्र, बी. छह दौरे क्षेत्रों, एसआर = शिखर सिस्टोलिक तनाव दर के तनाव दर घटता, सी: छह दौरे क्षेत्रों से तनाव घटता है, Str = शिखर सिस्टोलिक तनाव. एम मोड प्रदर्शन अंत पाद लंबा (ईडी) और अंत प्रकुंचन (ते) द्वारा दर्शाया हृदय गति. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .

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Discussion

हम शल्य चिकित्सा IUGR 13-16 निर्माण करने के लिए एक खरगोश में uteroplacental रक्त प्रवाह को कम करने और बाद में microultrasound प्रौद्योगिकी और Visualsonics VEVO 2100 पर उपलब्ध हृदय समारोह विश्लेषण का वर्णन करने के लिए भ्रूण हृदय समारोह में 14 की जांच के लिए एक पहले से मान्य दृष्टिकोण का इस्तेमाल किया है. एक छोटे पशु मॉडल में मानव IUGR भ्रूण की भ्रूण तथा अपरा संबंधी डॉपलर परिवर्तन पुन: पेश करने और फिर हाल ही में वर्णित इकोकार्डियोग्राफी साथ हृदय समारोह की परीक्षा की अनुमति की क्षमता एक नैदानिक ​​प्रासंगिक रास्ते में भ्रूण हृदय अनुसंधान प्रगति की संभावना है.

जबकि छोटे पशु मॉडल आमतौर पर, मातृ गरमी प्रतिबंध या कम प्रोटीन की खपत 9, लेकिन इन कम अपरा रक्त प्रवाह, विकसित देशों में IUGR का प्राथमिक तंत्र. चूहों में 27 इसके अलावा, शल्य द्विपक्षीय गर्भाशय धमनी बंधाव का प्रदर्शन करने में असमर्थता द्वारा सीमित कर रहे हैं पर भरोसा आमतौर पर सूचना दी, reproducibly मैं परिणाम नहीं करताएन विकास प्रतिबंध. 28 खरगोश भ्रूण में इस मौजूदा पद्धति में, हम मानव IUGR में sonographic निष्कर्षों के साथ संगत नाल की धमनी डॉपलर (यूए AREDF), की एक अनुपस्थित या उलट अंत डायस्टोलिक प्रवाह से स्पष्ट होना अपरा कमी दिखाते हैं. यह इस डॉपलर संकेत में वृद्धि हुई प्रतिरोध अपरा संवहनी बिस्तर में रक्त के प्रवाह को डाउन स्ट्रीम प्रतिबाधा को दर्शाता है और अपरा कमी का संकेत है कि प्रयोगात्मक दिखाया गया है 29 यूए AREDF की उपस्थिति स्पष्ट है 50 जब -. विलस vasculature की 70% बेकार है . चिकित्सकीय 30,31, यूए AREDF हाइपोक्सिया और गरीब प्रसवकालीन परिणाम का एक शक्तिशाली कारक है, और स्तर उच्च जोखिम गर्भावस्था के प्रबंधन में इसके उपयोग का समर्थन करने के लिए 1-सबूत नहीं है. 17

यूए AREDF मनाया जाता है, तो इस मॉडल में, शोधकर्ता प्राथमिक सर्जरी गंभीर अपरा कमी का निर्माण करने में सफल रहा था, विश्वास है कि और कहा कि आगे echocardiograph हो सकता हैआईसी मूल्यांकन उपयोगी होने की संभावना है. भ्रूण इकोकार्डियोग्राफी हाल ही में अब हृदय समारोह की विस्तृत कार्यात्मक मूल्यांकन प्रदान करने के लिए जन्मजात असामान्यताएं की एक मुख्य रूप से नैदानिक ​​डोमेन से बाहर branched है. 18 डॉपलर और एम मोड दोनों भ्रूण निलय समारोह का आकलन और कार्डियक आउटपुट के उपायों को प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. 32 अभी हाल ही में भ्रूण में हृदय प्रदर्शन के उपन्यास सूचकांक ऐसे बिंदु पर नज़र रखने और तनाव माप 33 के रूप में वर्णित किया गया है, दौरे प्रदर्शन सूचकांक 24,34, ऊतक डॉपलर 35 और (3 डी) तीन आयामी तकनीक. 32 इस मौजूदा अध्ययन का एक महत्वपूर्ण विशेषता यह है कि हाल ही में इन अग्रिमों भी Visualsonics VEVO 2100 microultrasound और हृदय समारोह विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग इस छोटे पैमाने पर खरगोश मॉडल पर किया जा सकता है. इसके अलावा, जैसा कि पहले इस मॉडल को भी अन्य संवहनी प्रदेश में भ्रूण hemodynamic प्रतिक्रिया के मूल्यांकन की अनुमति देता है 14 वर्णितories, विशेष रूप से विकास को प्रतिबंधित भ्रूण की जांच जब नैदानिक ​​व्यवहार में व्यापक रूप से इस्तेमाल कर रहे हैं जो मध्य मस्तिष्क धमनी, शिरा वाहिनी और महाधमनी स्थलडमरूमध्य,. 36 इसी प्रकार, अपरिपक्व जन्म के लिए तैयारी में glucocorticoids के प्रशासन के प्रभाव की भी जांच की जा सकती है. 37, 38 यह खरगोश मॉडल गर्भाशय के विपरीत सींग में आंतरिक नियंत्रण के मामले में आगे लाभ, मानव गर्भावस्था के 13, कम लागत, उपलब्धता और अपेक्षाकृत आसान से निपटने के लिए एक समान विलस और hemochorial गर्भनाल प्रदान करता है.

संबोधित किया जाना चाहिए कि इस मॉडल की कई सीमाएं हैं, फिर भी कर रहे हैं. प्रमुख सीमा इकोकार्डियोग्राफी दौरान चिकित्सकजनित भ्रूण मंदस्पंदन है. माता के रूप में isoflurane के भ्रूण मंदस्पंदन 39 में परिणाम कर सकते हैं inhalational दिलाई और इकोकार्डियोग्राफी के दौरान बिल्कुल भी इस्तेमाल नहीं हमारे मामले में एक न्यूनतम या के रूप में रखा जाना चाहिए. इसके बजाय, हम ketamine के एक अंतःशिरा निषेचन के लिए इस एवजी औरहाल ही में धमनी दबाव 40 मतलब परिवर्तन करने के लिए नहीं खरगोशों में दिखाया गया है जो xylazine, जिससे संभवतः अपरा (और इस प्रकार भ्रूण) छिड़काव बनाए रखने. इस दृष्टिकोण के बावजूद, बाहरी वातावरण, हैंडलिंग और अल्ट्रासाउंड transducer से दबाव गर्भावधि थैली का जोखिम सभी अस्थायी रूप से भ्रूण मंदस्पंदन पैदा कर सकता है. हम इस प्रभाव को कम करने के लिए विधि तरीके में वर्णन है, लेकिन सही परिणाम के लिए हम एचोकर्दिओग्रफिक और भ्रूण तथा अपरा संबंधी डॉपलर अल्ट्रासाउंड सर्वश्रेष्ठ कुल निवेश का लगभग 5 मिनट तक ही सीमित रहे हैं. अब नैदानिक ​​साहित्य 41 में वर्णित जटिल एचोकर्दिओग्रफिक तकनीक और सीखने घटता के साथ, सावधानीपूर्वक योजना मानकीकृत परिणाम सुनिश्चित करने के लिए पहले से आवश्यक है. एचोकर्दिओग्रफिक माप के अनेक उदाहरण के लिए, इस अध्ययन में वाल्वुलर कुंडलाकार विमान सिस्टोलिक भ्रमण वर्णित और तनाव विश्लेषण के साथ ट्रैकिंग धब्बा, वें के बावजूद, वर्तमान प्रसूति नैदानिक ​​अभ्यास में स्थापित नहीं कर रहे हैंवयस्क कार्डियोलॉजी में EIR उपयोग. फिर भी 42,43, भ्रूण चिकित्सा में इन उपन्यास माप में हाल के शोध से ब्याज दिया, हम वे इस खरगोश मॉडल का उपयोग करते समय प्राप्त करने के लिए संभव है कि शोधकर्ताओं को सूचित करने के लिए हमारी कार्यप्रणाली में उन्हें शामिल करने के लिए चुना है. IUGR भ्रूण में इन विशिष्ट मापदंडों का विश्लेषण इस पद्धति के अध्ययन के दायरे के बाहर है. एक और सीमा इसलिए अच्छी तरह से perfused डिम्बग्रंथि और प्रत्येक सींग की योनि सिरों भ्रूण मामला आवंटन के लिए सिफारिश कर रहे हैं भ्रूण की स्थिति 44 के आधार पर IUGR के लिए खरगोश में स्वाभाविक प्रवृत्ति से संबंधित है. इसके अलावा, इस पद्धति में, 25 दिनों की एक गर्भावधि उम्र शल्य चिकित्सा IUGR प्रेरित किया जाता है. यह पहले से वर्णित सफल प्रयोगों पर आधारित है, लेकिन उम्मीद की मृत्यु दर 50% है. 13,14 अन्त में, भ्रूण आकार बाद में गैर euthanized मापन के लिए रक्तसंचारप्रकरण प्रवाह जांच की नियुक्ति के लिए भेड़ मॉडल में उपयोगी है कि पुरानी इंस्ट्रूमेंटेशन precludes और दोहरानेएड रक्त नमूने. 11 अंत में, हृदय समारोह के बाद microultrasound परीक्षा के साथ खरगोश में IUGR निर्माण करने के लिए uteroplacental वाहिकाओं के चुनिंदा संयुक्ताक्षर समकालीन नैदानिक ​​अभ्यास के साथ संगत और द्विदिश अनुवादकीय शोधकर्ताओं को इसलिए उपयोगी है कि एक पशु मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है.

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Disclosures

लेखक प्रोफेसर जनवरी डी 'Hooge Visualsonics साथ एक अनुसंधान समझौता किया है. शेष लेखक कोई प्रकटीकरण है.

Acknowledgments

(इ, पीडी) यूरोपीय आयोग द्वारा प्रायोजित अनुदान विक्टोरियन सरकार की आपरेशनल इन्फ्रास्ट्रक्चर सहायता कार्यक्रम (आरएच, ईडब्ल्यू) और मैरी क्यूरी Industria-एकेडेमिया भागीदारी और रास्ते, यह काम एक हैमिल्टन Fairley NHMRC फैलोशिप (आरएच, एएल) द्वारा समर्थित है . लेखक इस वीडियो के निर्माण में उनकी तकनीकी विशेषज्ञता के लिए डा. आंद्रे Miyague, डा. फ्रांसिस्का रूस, सुश्री Rosita Kinnart और श्री इवान Laermans धन्यवाद देना चाहूंगा.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Ketamine Ceva Sante Animale http://www.ceva.com/en
Xylazine Ceva Sante Animale http://www.ceva.com/en
Depot Provera Pharmacia Upjohn
Penicillin G Kela Pharma http://www.kela.be
Lidocaine B Braun Medical http://www.bbraun.com/
Temgesic Schering-Plough http://www.merck-animal-health-usa.com/
Isolurane Isoba Vet; Abbott Laboratories Ltd http://www.abbottanimalhealth.com/index.html
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
VEVO 2100 VisualSonics SN100-0032 http://www.visualsonics.com/
Aquasonic Gel Parker Laboratories 01 02 http://www.parkerlabs.com/ultrasound_products.html
Nellcor N-20PA Pulse oximeter Covidien http://www.nellcor.com/prod/PRODUCT.ASPX?S1=POX&S2=MON&id=282&V

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Hodges, R., Endo, M., La Gerche, A., Eixarch, E., DeKoninck, P., Ferferieva, V., D'hooge, J., Wallace, E. M., Deprest, J. Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction. J. Vis. Exp. (76), e50392, doi:10.3791/50392 (2013).

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