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Medicine

Ecocardiografia fetal e ultra-som Doppler pulsátil em um modelo de coelho de restrição do crescimento intra-uterino

Published: June 29, 2013 doi: 10.3791/50392
Automatic Translation
1,2, 1, 3, 4,5, 1, 3, 3, 2, 1
1Division Woman and Child, Department Women, University Hospitals Leuven, 2The Ritchie Centre, Monash Institute of Medical Research, Department of Obstetrics and Gynaecology, Monash University, Victoria, Australia, 3Department of Cardiovascular Sciences, Katholieke Universiteit Leuven, 4Fetal and Perinatal Medicine Research Group, Institut d'Investigacions Biomediques August Pi i Sunyer (IDIBAPS), 5Maternal-Fetal Medicine Department, ICGON, Hospital Clínic, Universitat de Barcelona, Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER)

Summary

Descrevemos exame da função cardíaca fetal com a ecocardiografia fetal funcional contemporânea e fetoplacentária Doppler usando o VisualSonics VEVO 2100 microultrasound em um modelo induzido cirurgicamente de restrição do crescimento fetal intra-uterino em um coelho.

Abstract

Fetais crescimento intrauterino restrito (CIUR) resulta na função cardíaca anormal que é aparente pré-natal devido aos avanços na fetoplacentária Doppler e ecocardiograma fetal. Cada vez mais, essas modalidades de imagem estão sendo utilizados clinicamente para examinar a função cardíaca e avaliar o bem-estar no útero, orientando, assim, calendarização das decisões de nascimento. Aqui, usamos um modelo de coelho de CIUR, que permite a análise da função cardíaca de uma forma clinicamente relevante. Usando anestesia induzida isoflurano, CIUR é criado cirurgicamente em idade gestacional dia 25, realizando uma laparotomia, expondo o útero bicorno e ligadura de 40-50% dos vasos útero-placentários fornecendo cada saco gestacional em um único corno uterino. O outro chifre no útero bicorno coelho serve como fetos controles internos. Em seguida, após a recuperação em idade gestacional dia 30 (termo), o mesmo coelho passa por exame da função cardíaca fetal. A anestesia é induzida com Ketamine e xilazina por via intramuscular, em seguida, mantido por uma infusão contínua de cetamina e xilazina para minimizar os efeitos iatrogênicos sobre a função cardíaca fetal. Uma laparotomia repetição é realizada para expor cada saco gestacional e um exame microultrasound (VisualSonics VEVO 2100) da função cardíaca fetal é realizada. Insuficiência placentária é evidente por um elevado índice de pulsatilidade ou um fluxo diastólico final ausente ou reversa da artéria umbilical Doppler onda. O ducto venoso e da artéria cerebral média Doppler é então examinada. Ecocardiografia fetal é realizada pelo modo B gravação, o modo M e OVF em vista lateral e apical. Cálculos off-line determinar variáveis ​​padrão do modo M cardíacos, excursão sistólica avião anular tricúspide e mitral, salpico de monitoramento e análise de tensão, o índice de desempenho miocárdico modificado e vascular OVF de interesse. Assim, este modelo de pequenos animais de CIUR oferece exame em Utero da função cardíaca que é consistente com a prática clínica atual e é, portanto, útil em um ambiente de pesquisa translacional.

Introduction

A carga de doença cardiovascular que resulta da restrição do crescimento fetal intra-uterino retardado (CIUR) não pode ser exagerada. É a principal causa de morte fetal após anomalias congénitas. CIUR 1 refere-se a um feto que não consegue atingir o seu potencial de crescimento e é geralmente um resultado de insuficiência placentária. Em dois sobreviventes, a doença cardiovascular é evidente através do tempo de vida com a disfunção do miocárdio resulta na infância 3,4 e hipertensão subseqüente 5, 6 diabetes e obesidade em desenvolvimento na vida adulta - todos fatores de risco cardíaco cumulativos desde o nascimento à morte prematura por doença cardíaca isquêmica 7.

Desenvolvimento de modelos animais para caracterizar a comunicação materno-fetal que estabelece CIUR ea resposta fetal após a redução da disponibilidade de substrato é necessário se quisermos tanto melhor compreender a fisiopatologia do carro CIUR relacionadacomprometimento cardíaco e desenvolver estratégias cardio-protetores para melhorar a saúde fetal e pós-natal. A este respeito, muitos modelos diferentes, em diferentes espécies foram descritas. CIUR 8 é induzido por materno sob a nutrição com uma dieta de baixo teor de proteína em roedores, 9 ablação cirúrgica ou ligadura de fluxo sanguíneo uterino em roedores e cobaias 10 ou oclusão do artéria umbilical em ovinos. 11 No entanto, é evidente que nenhum modelo totalmente recapitula o CIUR humano 12.

Neste estudo metodológico atual, usamos uma abordagem bem validado de interrupção vascular útero-placentária seletiva em um coelho 13-16 que não só produz respostas cardiovasculares fetais observadas com ultra-som clinicamente 14, mas também permite o interrogatório da função cardíaca fetal com o romance ecocardiografia utilizando a tecnologia microultrasound do VisualSonics VEVO 2100. Apesar de ultra-som Doppler de fetoplvasos acental continua a ser a pedra angular da atual vigilância pré-natal de fetos com RCIU 17, ecocardiografia funcional está sendo cada vez mais utilizado para fornecer novos insights sobre a fisiopatologia da doença e para avaliar o bem-estar fetal. 18 Assim, aqui vamos dar esses avanços da pesquisa clínica e descrever um modelo animal que portos não só esta imagem de sofisticação, mas também fornece a plataforma experimental para investigar os caminhos mecanicistas e terapêuticas.

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Protocol

O seguinte protocolo experimental foi aprovado pelo Comitê de Ética Animal, Katholieke Universiteit Leuven, Leuven, na Bélgica. Seguimos cirúrgico descrito anteriormente 13 procedimentos, incluindo algumas mudanças metodológicas, especialmente no procedimento de anestesia.

1. Induzindo a restrição de crescimento intra-uterino retardado (CIUR)

  1. Tempo datado coelhos grávidas (híbrido Dendermonde e Nova Zelândia Branco) estão alojados em gaiolas individuais em uma hr horário 12/12 luz com acesso a água e padrão de coelho ração ad libitum da idade gestacional (IG) de 18 dias. No GA 25 dias (período completo é de 31 dias, aproximadamente), os coelhos são transferidos para a sala de operações para criação cirúrgica de CIUR. Antes da cirurgia, alocar aleatoriamente um "case" (CIUR) e "controle" corno uterino no útero bicorno coelho usando o software de randomização (GraphPad Software, EUA) 19. O tamanho da amostra deve ser determinado por cálculos de energia por indivíduo researchers para a sua pergunta de interesse.
  2. Procedimento anestesia.
    A indução da anestesia é conseguido através da administração de cetamina 35 mg / kg (Ceva Sante Animale, Bruxelas, Bélgica) e xilazina 5 mg / kg (Ceva Sante Animale, Bruxelas, Bélgica) por via intramuscular na pata traseira. A anestesia é mantida, em seguida, com uma mistura de inalação de 1-4% de isoflurano (Isoba Vet; Abbott Laboratories Ltd., Queenborough, Kent, Reino Unido) em O 2 a 2 L / min. Coloque um oxímetro de pulso (Nellcor N-20, Covidien, Irlanda) na segunda e na terceira toe materno para monitorizar continuamente a frequência cardíaca e a saturação de O2 arterial.
  3. Procedimento cirúrgico.
    1. A pré-medicação. Antes de iniciar a cirurgia, profilaxia antibiótica administrar penicilina G, 300.000 UI (Kela Pharma, Hoogstraeten, Bélgica), uterino tocolítico acetato de medroxiprogesterona 0,9 mg / kg (Depo-Provera, Pharmacia Upjohn, Puurs, Bélgica) e analgésica da buprenorfina 0,03 mg / kg (Temgesic; Schering-Plough) Por via subcutânea em 2,5 ml de uma única seringa.
    2. Preparação do coelho. Coloque o coelho em uma almofada de aquecimento durante todo o período da cirurgia. Remover os pêlos da área cirúrgica abdominal e aplicar anti-séptico Iodopovidona 7,5% (Betadine, Purdue, Connecticut, EUA). Um protocolo asséptica completo é, então, empregue.
    3. Laparotomia abdominal. Infiltrar no local da incisão, com anestesia local (2 ml de lidocaína a 1%, B Braun Medical, Bélgica) por via subcutânea. O local de incisão deve ser cerca de 5 cm de comprimento, na linha média, no 2/3 inferiores do abdómen. Uma vez que a pele está aberto, utilizar uma mistura de dissecção cortante e romba para expor a bainha do reto. Deve ser tomado cuidado para evitar as glândulas mamárias maternas vasculares situados de cada lado da linha média de entrada (Figura 1A). Segure o músculo reto abdominal e peritônio, tenda para evitar a inclusão involuntária de conteúdo abdominal e insira cuidadosamente o uso de dissecção aguda (Figura 1B).
    4. Exteriorização uterina. Cerque o campo cirúrgico com cortinas de gaze embebidas em soro fisiológico aquecido. Segure cuidadosamente e exteriorizar ambos os lados do útero bicorno. Cuidados devem ser tomados para não colocar tanto o vaginal ou no final de ovário de cada corno uterino sob tensão, pois isso pode resultar em sangramento indesejável, a dor ea contratilidade uterina. O assistente de irriga o útero exposto continuamente com solução salina aquecida para evitar as contracções uterinas. Palpar e registrar o número de fetos presentes em cada chifre. Por convenção, o feto no final do ovário é designado o primeiro feto. Um corno uterino é o caso do chifre e o outro é o controlo de chifre. Identificar o caso chifre previamente alocados aleatoriamente para indução CIUR e depois substituir o chifre controle de volta para o abdômen (fetos controles internos).
    5. Cirurgicamente induzida CIUR. Identificar os vasos útero-placentários para cada saco gestacional no caso corno designado (Figura 1C).Cirurgicamente ligadura 40-50% destes navios que utilizam a poliglactina 5-0 sutura (Ethicon Vicryl, Johnson e Johnson Medical, EUA) (Figura 1D-1E). Na prática, muitas vezes há três feixes vasculares fornecendo cada saco gestacional. Neste caso, o maior feixe vascular é ligado. Uma vez completo, o útero é novamente aquecido irrigado com solução salina e cuidadosamente devolvido ao abdómen.
    6. Fecho abdominal. Feche o abdómen em duas camadas, utilizando uma corrida contínua de sutura 2-0 de poliglactina (Vicryl Ethicon, Johnson & Johnson Medical, EUA). Feche a pele com subcuticular poliglactina 3-0 sutura (Ethicon Vicryl, Johnson e Johnson Medical, EUA). Pulverizador de aerossol de alumínio sobre a ferida, para impedir que o coelho depois de interferir com as suturas.
    7. Recuperação. Cessar anestesia e observar de perto a recuperação da respiração. O coelho é então alojados tal como descrito acima, com acesso a comida e água ad libitum e observados diariamente.

2. Realizar ecocardiografia fetal e ultra-som Doppler pulsátil

  1. O mesmo coelho é então transferido para GA 30 dias para ecocardiografia e avaliação ultra-som. O coelho é colocado sobre uma almofada de aquecimento durante todo o período de exame.
  2. Procedimento anestesia.
    1. A indução da anestesia é conseguido através da administração de cetamina 35 mg / kg (Ceva Sante Animale, Bruxelas, Bélgica) e xilazina 5 mg / kg (Ceva Sante Animale, Bruxelas, Bélgica) por via intramuscular. Uma vez calmo, obter acesso intravenoso usando uma cânula de calibre 24 (BD Insyte-W, Becton Dickinson sistemas de terapia de infusão, Utah, EUA), inserido em uma veia periférica auricular.
    2. Manter a anestesia com uma infusão contínua de cetamina e xilazina: 2 ml de cetamina (100 mg / ml) e 1,5 ml de xilazina (20 mg / ml) a 46,5 ml de solução salina normal, e depois infundido por meio de uma bomba de seringa de 40 ml / h. Garantir um three-way-tap e anexar uma ml seringa de anestesia resgate 5: 2 mlcetamina (100 mg / ml) e 1,5 ml de xilazina (20 mg / ml). Bolus de 0,5 ml anestesia salvamento são raramente necessária. Administrar analgésico buprenorfina 0,03 mg / kg (Temgesic; Schering-Plough) subcutaneouslyprior a cirurgia. Oxigénio 2 L / min, é aplicada por meio de máscara. Coloque um oxímetro de pulso (Nellcor N-20, Covidien, Irlanda) na segunda e na terceira toe materno para monitorizar continuamente a frequência cardíaca e a saturação de O2 arterial.
  3. Laparotomia e exteriorização uterina. Consulte a 1.3.3 e 1.3.4.
  4. Posicionamento para ecocardiografia fetal e ultra-sonografia.
    1. Coloque o coelho numa posição lateral virado para o investigador. Isso facilita a recuperação mais fácil de um único saco gestacional, para exame e impede tração excessiva em vasos útero-placentários. Tanto quanto possível, tentar exteriorizar apenas um saco gestacional de cada vez para minimizar a exposição. Assegurar o saco gestacional exposta é colocada sobre uma gaze irrigado comsalina aquecida. Para garantir resultados normalizados entre os diferentes grupos de estudo, em geral, apenas o feto no ovário e termina vaginais de cada trompa uterina são utilizados no exame de ultra-som.
    2. A função cardíaca fetal é muito susceptível ao efeito de exteriorização uterina, a mudança na temperatura e de pressão a partir do transdutor de ultra-som ao longo dos vasos placentários. Para minimizar esses efeitos de confusão ambientais e iatrogênica sobre a função cardíaca, o exame de ultra-som deve começar imediatamente após exteriorização do saco gestacional e deve ser sistemática e eficiente. Em nossa experiência, mudanças na função cardíaca fetal raramente ocorrem nos primeiros 5 min de exposição. Se bradicardia fetal é encontrado, remover a sonda de ultra-som, reposicionar o feto para evitar a torção dos vasos feto-placentárias, irrigar com soro fisiológico aquecido ou brevemente devolver o saco gestacional de volta para o abdome materno. Se bradicardia fetal é persistente, o exame para este fetus deve ser abandonada em favor de examinar o próximo feto.
  5. Ecocardiografia fetal.
    1. O Visualsonics VEVO 2100 (Toronto, Canadá), plataforma microultrasound de alta resolução com um software de análise cardíaca e tensão instalado é necessária. Um VisualSonics MS-250 transdutor (VisualSonics, Toronto, Canadá) é utilizado para a aquisição de dados. Isto tem uma frequência central de 21 MHz com uma largura de banda de 13-24 MHz. O foco geométrico é de 15 mm, a largura máxima da imagem é de 23 mm e a profundidade máxima da imagem é de 30 mm. A pegada é de 28 x 5,75 mm. Os dados são adquiridos de acordo com a Sociedade Americana de Ecocardiografia e normas para a realização do ecocardiograma fetal. 20
    2. Aquisição de dados 1: vista lateral No nível do quatro câmaras visão lateral, gravar um modo-B cine circuito de pelo menos cinco ciclos cardíacos para determinar a tensão, taxa de deformação, velocidade e deslocamento.. Esta é analisada utilizando o desligada VevoStrain(Visualsonics, Toronto, Canadá) algoritmo como anteriormente descrito na revista em detalhe. Índices 21 ecocardiografia modo-M podem ser obtidos neste vista padrão. Medições off-line de estrutura e função cardíaca pode então ser analisada: ventricular interna e diâmetros de septo em sístole e diástole, volumes, volume sistólico, fração de encurtamento, fração de ejeção e débito cardíaco 21.
    3. A aquisição de dados 2:. Apical Ao nível do apical de quatro câmaras view, modo B cine loop pode ser repetido para VevoStrain análises tal como descrito acima. M-mode ecocardiografia é usada para avaliar tricúspide (TAPSE) e excursão mitral anular avião sistólica (MAPSE) e tensão longitudinal e taxa de deformação. 22,23 Essa visão apical também permite a avaliação de valvular OVF eo índice de performance miocárdica modificado conforme anteriormente descrito 24.
  6. Fetoplacentária pulso acenou Doppler ultrasound.

Fluxo de ondas de velocidade (FVW) da artéria umbilical são obtidos por localizar os vasos umbilicais, utilizando Doppler a cores e, em seguida, colocar a amostra portão Doppler pulsado sobre a artéria umbilical num circuito livre de cordão umbilical. 25 A artéria cerebral média (MCA) é FVW localizado colocando o portão amostra Doppler pulsado apenas para além da origem da MCA uma vez que o Círculo de Willis está localizado por Doppler colorido 26. ducto venoso (DV) FVW é obtida colocando o portão amostra Doppler pulsado na porção proximal do DV visto com Doppler colorido onde se origina a partir da veia umbilical intra-hepática ou em uma visão sagital ou transversal do feto. 26 O índice de pulsatilidade (PI) é calculada off-line usando o software de análise cardiovascular VisualSonics.

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Representative Results

Um crescimento assimétrico restrito feto e placenta de ligadura vascular útero-placentária é comparado a um feto controlo normal e placenta na Figura 1F. Crescimento assimétrico é confirmado pelo baixo peso ao nascer neonatal e aumento da circunferência da cabeça: a relação circunferência abdominal com os controles. Os resultados representativos de estudos feto-placentárias Doppler são mostrados na Figura 2. Um padrão de baixa resistência normal do fluxo diastólico final positivo em um feto de controle é mostrado. Com o aumento progressivo da resistência placentária visto em fetos com RCIU, ausência e, em seguida, inverteu o fluxo diastólico final é aparente. Figura 3 demonstra a resistência cerebral sinal normal média alta artéria Doppler em um feto saudável e positivo uma onda ducto venoso na mesma feto. Em fetos com RCIU, um aumento do índice de pulsatilidade do ducto venoso e reversão da onda pode ser visto. 14 resultados representativos de modo-M ecocardiografia fetal são mostrados na Figura 4. Esta visão lateral permite o cálculo de diâmetros e volumes ventriculares internos. A visão apical permite o cálculo de TAPSE e MAPSE. Figura 5 demonstra salpico de monitoramento de vetores de velocidade e as curvas de deformação regionais resultantes para calcular a tensão, taxa de deformação, deslocamento e velocidade.

Figura 1
Figura 1. Técnica cirúrgica de criação de CIUR em um modelo de coelho A: laparotomia mediana expondo músculo reto abdominal, seta = glândulas mammory; B:. Entrada segura na cavidade abdominal; C: setas = útero-placentários vasos sanguíneos que alimentam saco gestacional; D: método de sutura; E: seta = ligadura completa do navio útero-placentária; F: controle representativo e CIUR feto e placenta.

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Figura 2. Doppler da artéria umbilical A: fluxo positivo diastólica final (EDF), B:. Fluxo diastólico final ausente (AEDF); C: fluxo reverso diastólico final (REDF).

Figura 3
Figura 3 A: Doppler do ducto venoso, s = s onda (contração sistólica ventricular), d = d onda (diástole ventricular precoce), a = uma onda (contração atrial); B:. Doppler da artéria cerebral média .

Figura 4
Figura 4. Ecocardiografia modo M A:. Vista lateral de quatro câmaras, LVID = diâmetro interno do ventrículo esquerdo, CIV = diâmetro do septo intraventricular, RVID = right vediâmetro do septo ntricular, ESD = diâmetro sistólico final, EDD = diâmetro final diastólica; B: apical demonstrando excursão tricúspide anular avião sistólica (TAPSE); C: apical demonstrando excursão sistólica avião anular mitral (MAPSE).

Figura 5
Figura 5. Análise de tensão cardíaca fetal A: região de interesse definida por endo-e epi-cardium do ventrículo esquerdo; B:. Curvas de taxa de deformação de seis segmentos do miocárdio, SR = pico da taxa de tensão sistólica; C: curvas cepa de seis segmentos do miocárdio, Str = pressão sistólica de pico. Movimento cardíaco representado pelo modo M demonstrando diástole (ED) e no final da sístole (ES). Clique aqui para ver a figura maior .

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Discussion

Nós usamos uma abordagem previamente validado de reduzir cirurgicamente fluxo sanguíneo útero-placentário em um coelho para produzir CIUR 13-16 e examinar mais tarde a função cardíaca fetal 14 para descrever a tecnologia microultrasound e análise da função cardíaca disponíveis na VEVO VisualSonics 2100. A capacidade de reproduzir feto-placentárias Doppler mudanças de fetos com RCIU humanos em um modelo animal pequeno e, em seguida, permitir o exame da função cardíaca com a ecocardiografia recentemente descrito é provável que o progresso da pesquisa cardíaco fetal de uma forma clinicamente relevante.

Modelos pequenos animais geralmente dependem de restrição calórica materna ou de baixo consumo de proteína 9, no entanto, estes são limitados por uma incapacidade de demonstrar a redução do fluxo sanguíneo placentário, o principal mecanismo de CIUR nos países desenvolvidos. 27 Além disso, a ligadura da artéria uterina bilateral cirúrgica em ratos, enquanto comumente relatados, não reproduzível resultar irestrição do crescimento n. 28 Nesta metodologia atual em fetos de coelho, mostramos insuficiência placentária ser evidente por um fluxo diastólico final ausente ou reversa da artéria umbilical Doppler (UA AREDF), de acordo com achados ultrassonográficos do CIUR humano. Tem sido demonstrado experimentalmente que o aumento da resistência a este sinal de Doppler reflecte a jusante impedância ao fluxo sanguíneo no leito vascular da placenta e é indicativo de insuficiência placentária 29 A presença de AI AREDF resulta quando 50 -. De 70% da vasculatura das vilosidades é disfuncional . 30,31 Clinicamente, a UA AREDF é um poderoso preditor de desfecho perinatal hipóxia e pobres, e não há nível 1 evidências para apoiar a sua utilização no tratamento de gravidez de alto risco. 17

Neste modelo, se UA AREDF é observado o pesquisador pode estar confiante de que a primeira cirurgia foi bem sucedida na produção de insuficiência placentária grave e que mais ecocardiografiaic avaliação é susceptível de ser frutífera. A ecocardiografia fetal recentemente ramificado a partir de um domínio predominantemente diagnóstico de anormalidades congénitas agora a fornecer avaliações funcionais detalhadas da função cardíaca. Ambos Doppler 18 e M-modo podem ser utilizados para avaliar a função ventricular fetal e obter medidas de débito cardíaco 32. Mais recentemente, novos índices de desempenho cardíaco do feto tem sido descrito como o salpico rastreio e medição da deformação de 33, o índice de desempenho do miocárdio 24,34, tecido de Doppler 35 e técnicas tridimensionais (3D). 32 Uma característica importante deste estudo é de que estes avanços recentes também pode ser realizada neste modelo de coelho de pequena escala usando a Visualsonics VEVO 2100 microultrasound e software de análise da função cardíaca. Além disso, como descrito anteriormente 14 este modelo também permite a avaliação da resposta hemodinâmica fetal em outro vascular territories, em particular, a artéria cerebral média, ducto venoso e istmo da aorta, que são amplamente utilizados na prática clínica quando se examina o feto crescimento restrito. 36 Da mesma forma, os efeitos da administração de glucocorticóides, em preparação para o parto prematuro pode também ser analisada. 37, 38 Este modelo de coelho oferece outras vantagens em termos de controles internos no corno oposto do útero, a placentação vilosidades e hemocorial semelhante a gravidez humana 13, de baixo custo, disponibilidade e manuseio relativamente fácil.

Há, no entanto, algumas limitações deste modelo que devem ser abordadas. A principal limitação é a bradicardia fetal iatrogênica durante ecocardiografia. Maternalmente administrado por inalação de isoflurano pode resultar em bradicardia fetal 39 e deve ser mantido a um mínimo ou, como no nosso caso não é usado durante todo ecocardiografia. Em vez disso, nós substituímos isso por uma infusão intravenosa de cetamina exilazina, a qual foi recentemente mostrado em coelhos para não alterar a pressão arterial média de 40, mantendo, assim, presumivelmente, a perfusão placentária (e, portanto, do feto). Apesar desta abordagem, a exposição do saco gestacional ao ambiente externo, o manuseamento e a pressão do transdutor de ultra-sons podem causar bradicardia fetal temporariamente. Descrevemos no método maneiras de minimizar esse efeito, no entanto, para resultados precisos acreditamos fetoplacentária ecocardiograma e ultra-som Doppler é melhor limitado a cerca de 5 min de exposição total. Com técnicas de ecocardiografia cada vez mais complexas e curvas de aprendizagem agora descritos na literatura clínica 41, planejamento meticuloso é necessária antecedência para garantir resultados padronizados. Várias das medidas ecocardiográficas descrito neste estudo, por exemplo excursão sistólica avião anular valvular e speckle tracking com a análise de tensão, não estão estabelecidos no atual prática clínica obstétrica, apesar ªuso eir em cardiologia adulta. 42,43 No entanto, dado o interesse recente pesquisa nessas novas medições em medicina fetal, optamos por incluí-los na nossa metodologia para informar os investigadores que são viáveis ​​para obter ao usar este modelo de coelho. A análise desses parâmetros específicos em fetos com RCIU está além do escopo deste estudo metodológico. Outra limitação diz respeito à tendência natural do coelho para CIUR com base na posição fetal 44, portanto, o do ovário bem perfundida e termina vaginais de cada corno são recomendados para a atribuição de um caso fetal. Além disso, nessa metodologia, a idade gestacional de 25 dias é usado para induzir cirurgicamente CIUR. Isto é baseado na bem-sucedidos experimentos anteriormente descritos, no entanto, a taxa de mortalidade esperada é de 50%. 13,14 Finalmente, o tamanho fetal opõe instrumentação crónica que é útil em modelos de ovino para a colocação de sondas de fluxo para medições hemodinâmicas posteriores não sacrificados e repetired coleta de sangue. 11 Em conclusão, ligadura seletiva dos vasos útero-placentários para produzir CIUR no coelho com exame microultrasound posterior da função cardíaca representa um modelo animal que é consistente com a prática clínica contemporânea e, portanto, útil para bidirecionais pesquisadores de translação.

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Disclosures

O autor Professor Jan D'hooge tem um acordo de pesquisa com VisualSonics. Os demais autores não têm divulgações.

Acknowledgments

Este trabalho é apoiado por uma Hamilton-Fairley NHMRC Fellowship (RH, AL), Programa de Apoio à Infra-Estrutura Operacional do Governo de Victoria (RH, EW) ea Curie Indústria-Academia Parceria Marie e Caminhos conceder patrocinado pela Comissão Europeia (ME, PD) . Os autores gostariam de agradecer ao Dr. Andre Miyague, Dr. Francesca Russo, a Sra. Rosita Kinnart eo Sr. Ivan Laermans por seus conhecimentos técnicos na produção deste vídeo.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Ketamine Ceva Sante Animale http://www.ceva.com/en
Xylazine Ceva Sante Animale http://www.ceva.com/en
Depot Provera Pharmacia Upjohn
Penicillin G Kela Pharma http://www.kela.be
Lidocaine B Braun Medical http://www.bbraun.com/
Temgesic Schering-Plough http://www.merck-animal-health-usa.com/
Isolurane Isoba Vet; Abbott Laboratories Ltd http://www.abbottanimalhealth.com/index.html
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
VEVO 2100 VisualSonics SN100-0032 http://www.visualsonics.com/
Aquasonic Gel Parker Laboratories 01 02 http://www.parkerlabs.com/ultrasound_products.html
Nellcor N-20PA Pulse oximeter Covidien http://www.nellcor.com/prod/PRODUCT.ASPX?S1=POX&S2=MON&id=282&V

DOWNLOAD MATERIALS LIST

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