Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Rahim içi Büyüme Kısıtlama bir Tavşan Modelinde Fetal Ekokardiyografi ve Pulsed-wave Doppler Ultrason

Published: June 29, 2013 doi: 10.3791/50392
Automatic Translation
1,2, 1, 3, 4,5, 1, 3, 3, 2, 1
1Division Woman and Child, Department Women, University Hospitals Leuven, 2The Ritchie Centre, Monash Institute of Medical Research, Department of Obstetrics and Gynaecology, Monash University, Victoria, Australia, 3Department of Cardiovascular Sciences, Katholieke Universiteit Leuven, 4Fetal and Perinatal Medicine Research Group, Institut d'Investigacions Biomediques August Pi i Sunyer (IDIBAPS), 5Maternal-Fetal Medicine Department, ICGON, Hospital Clínic, Universitat de Barcelona, Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER)

Summary

Biz çağdaş fonksiyonel fetal ekokardiyografi ve bir tavşan intrauterin fetal gelişme geriliği bir cerrahiye bağlı modelinde VisualSonics VEVO 2.100 microultrasound kullanarak fetoplasental Doppler ultrasonografi ile fetal kalp fonksiyonunun incelenmesi açıklar.

Abstract

Antenatal fetoplasental Doppler ultrasonografi ve fetal ekokardiyografi gelişmeler nedeniyle belirgindir anormal kalp fonksiyonlarında fetal intrauterin gelişme geriliği (IUGR) sonuçları. Giderek, bu görüntüleme yöntemlerinin böylece Doğum kararların zamanlaması rehberlik, kalp fonksiyonu incelemek ve utero refah değerlendirmek için klinik olarak istihdam edilmektedir. Burada, klinik olarak anlamlı bir şekilde kalp fonksiyonunun analizi sağlayan IUGR bir tavşan modeli kullanılmıştır. Izofluran bağlı anestezi kullanarak, IUGR cerrahi Bikornuat rahim açığa, bir laparotomi gerçekleştirerek gebelik yaşı gün 25 oluşturulan ve daha sonra tek bir uterin horn her gebelik kesesi besleyen uteroplasental damarların% 40-50 bağlanarak edilir. Tavşan Bikornuat rahim içinde diğer boynuz iç kontrol fetus olarak hizmet vermektedir. Daha sonra, gebelik yaşı gün 30 (tam süreli) de kurtarma sonra, aynı tavşan fetal kalp fonksiyonunun incelenmesi uğrar. Anestezi Ketam ile indüklenirine ve ksilizin kas içi, sonra fetal kalp fonksiyonu üzerinde iatrojenik etkilerini en aza indirmek için ketamin ve ksilizin sürekli intravenöz infüzyon tarafından yapılmaktadır. Bir tekrar laparotomi her gebelik kesesi ortaya çıkarmak için yapılır ve fetal kalp fonksiyonunun bir microultrasound sınavı (VisualSonics VEVO 2100), gerçekleştirilir. Plasental yetmezlik yükseltilmiş pulsatilite indeksi veya umbilikal arter Doppler dalga bir eksik veya ters diyastol sonu akım ile açıktır. Duktus venozus ve orta serebral arter Doppler sonra incelenir. Fetal ekokardiyografi kayıt B modu, M modu ve lateral ve apikal görünümlerinde akım hızları tarafından gerçekleştirilir. Çevrimdışı hesaplamalar standart M-mod kalp değişkenleri, triküspit ve mitral anüler düzlem sistolik gezi, izleme benek ve şekil değiştirme analizi, modifiye miyokard performans indeksi ve ilgi vasküler akım hızları belirler. IUGR Bu küçük hayvan modeli nedenle uter içinde incelenmesi tanıyorMevcut klinik uygulama ile uyumlu ve bir translasyonel araştırma ortamda bu nedenle yararlıdır o kalp fonksiyonu.

Introduction

Fetal intrauterin gelişme geriliği (IUGR) sonuçları göz ardı edilemez bu kardiyovasküler hastalık yükünü. Bu doğumsal anomaliler sonra ölü doğum önde gelen nedenidir. 1 IUGR büyüme potansiyeline ulaşmak için başarısız bir fetus anlamına gelir ve genellikle plasenta yetersizliği bir sonucudur. Kurtulan 2, kardiyovasküler hastalık belirgin miyokard disfonksiyonu olan ömrü boyunca belirgindir . iskemik kalp hastalığı 7 erken ölüm doğru doğumdan tüm kümülatif kardiyak risk faktörleri - Bebeklik ve çocukluk 3,4 ve sonraki hipertansiyon 5, diyabet 6 ve yetişkin yaşamda gelişen obezite

Ikimiz de daha iyi IUGR ile ilgili araç patofizyolojisi anlamak istiyorsak IUGR ve düşük yüzey durumu için daha sonraki fetal yanıt kurar maternal-fetal iletişim karakterize etmek için hayvan modellerinin geliştirilmesi gereklidirkardiyak bozukluğu ve fetal ve doğum sonrası sağlığını geliştirmek için kardiyo-koruyucu stratejiler geliştirmek. Bu bağlamda, farklı türler arasında çok farklı model tarif edilmiştir. 8 İUBG genellikle kemirgenlerde düşük bir protein diyeti ile yetersiz beslenme anne tarafından indüklenir, 9 cerrahi ablasyon veya rahim kan akışının ligasyonu kemirgenler ve kobay 10 ya da tıkanması koyunlarda umbilikal arter. 11. Ancak, belirgin olduğu bir model tam özetlediği insan IUGR. 12

Bu mevcut metodolojik çalışmada, klinik olarak 14 ultrason ile gözlenen fetal kardiyovasküler tepkiler üretir, ama aynı zamanda microultrasound teknolojisini kullanarak yeni ekokardiyografi ile fetal kalp fonksiyonunun sorgulama izin sadece bir tavşan 13-16 seçici uteroplasental vasküler kesinti iyi doğrulanmış bir yaklaşım kullanılır VisualSonics VEVO 2100. Iken fetopl Doppler ultrasonacental gemiler IUGR fetusa 17 mevcut doğum öncesi gözetim temel taşı olmaya devam etmektedir, fonksiyonel ekokardiyografi giderek hastalığın patofizyolojisi yeni bakış açıları sağlamak ve fetal refah değerlendirmek için kullanılmaktadır. 18. Buna göre, burada klinik araştırma bu gelişmeler almak ve bir hayvan modeli tarif Bu görüntüleme sofistike sadece limanlar değil, aynı zamanda mekanik yollar ve yeni tedavi araştırmak için deneysel bir platform sağlar.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Aşağıdaki deney protokolünde Hayvan Etik Kurulu, Katholieke Universiteit Leuven, Leuven, Belçika tarafından onaylanmıştır. Özellikle anestezi uygulanarak bazı yöntemsel değişiklikler dahil olmak üzere, daha önce tarif edildiği cerrahi prosedür 13 izledi.

1. İntrauterin Büyüme Kısıtlama (IUGR) uyaran

  1. Hamile tavşan (hibrid Dendermonde ve Yeni Zelanda Beyaz) tarihli Zaman gebelik yaşı (GA) 18 gün su ve standart tavşan yemi ad libitum erişimi olan 12/12 saat ışık programa bireysel kafeslerde yerleştirilmiştir. GA az 25 gün (tam süreli yaklaşık 31 gündür), tavşan IUGR cerrahi oluşturulması için Ameliyathane aktarılır. Ameliyat öncesinde, rastgele bir "durum" (IUGR) ve randomizasyon yazılım (GraphPad Yazılım, ABD) 19 kullanarak Bikornuat tavşan rahim içinde "kontrol" uterin boynuz tahsis. Örnek büyüklüğü bireysel r tarafından güç hesapları ile belirlenmelidirkendi ilgi soru için esearchers.
  2. Anestezi Prosedürü.
    Indüksiyon anestezi ketamin 35 mg / kg (Ceva Sante Animale, Brüksel, Belçika) ve ksilizin 5 mg / kg (Ceva Sante Animale, Brüksel, Belçika) kas içine arka bacak verilerek elde edilir. Anestezi sonra% 1-4 bir inhalasyon karışımı ile korunur izofluran (Isoba Vet; Abbott Laboratories Ltd, Queenborough, Kent, İngiltere) 2 L / dk O 2. Sürekli kalp hızı ve arteriyel O 2 satürasyonu izlemek için anne ikinci ve üçüncü ayak üzerinde bir pulse oksimetre (Nellcor N-20, Covidien, İrlanda) yerleştirin.
  3. Cerrahi Prosedür.
    1. Premedikasyon. Önce ameliyat başlamadan, antibiyotik profilaksisi Penisilin G, 300.000 IU (Kela Pharma, Hoogstraten, Belçika), rahim tokolitik medroksiprogesteron asetat 0.9 mg / kg (Depo-Provera, Pharmacia Upjohn, Puurs, Belçika) ve analjezik buprenorfin 0.03 mg / yönetmek kg (Temgesic, Schering-Plough) Subkutan tek bir 2.5 ml şırınga içinde.
    2. Tavşan hazırlık. Cerrahi süresince bir ısınma pad üzerinde tavşan yerleştirin. Karın cerrahi alanında saç kaldırmak ve (Betadine, Purdue, Connecticut, ABD)% 7.5 Povidon-iyot antiseptik uygulayın. Tam bir aseptik protokol daha sonra kullanılır.
    3. Karın laparotomi. Subkutan lokal anestezik (2 ml% 1 lidokain, B Braun Medical, Belçika) ile kesi sızmak. Kesi karın 2/3 alt orta hatta uzunluğu yaklaşık 5 cm, olmalıdır. Cilt açıldıktan sonra, rektus kılıf ortaya çıkarmak için keskin ve künt diseksiyon karışımı kullanın. Bakım girişi (Şekil 1A) üzerinde orta hat her iki tarafında bulunan damar anne meme bezleri önlemek için alınmalıdır. Rektus kılıf ve periton, karın içeriğinin yanlışlıkla dahil önlemek için çadır kavrayarak dikkatli keskin diseksiyon (Şekil 1B) kullanarak girin.
    4. Rahim eksteriorizasyon. Isıtılmış serum fizyolojik ile ıslatılmış gazlı bez perdeler ile cerrahi alan Surround. Dikkatlice kavrayın ve Bikornuat rahim her iki exteriorize. Bakım Bu istenmeyen kanama, ağrı ve uterus kasılma neden olabileceğinden, gerilim altında vajinal veya her bir uterin horn over sonuna ya yerleştirmek için dikkat edilmelidir. Yardımcısı sürekli olarak rahim kasılmaları önlemek için ısıtılmış serum fizyolojik ile maruz rahim sular. Palpe ve her boynuz mevcut fetusların sayısını kaydedin. Geleneksel olarak, yumurtalık sonunda fetus ilk fetus belirlenir. Bir uterin boynuz durumda boynuz ve diğer kontrol boynuz olduğunu. IUGR indüksiyon için daha önce rastgele tahsis durumda boynuz belirlemek ve daha sonra karın (iç kontrol fetus) geri kontrol boynuz değiştirin.
    5. Cerrahi IUGR bağlı. Belirlenen durum boynuz (Şekil 1C) her gebelik kesesi için uteroplasental damarlar belirleyin.Cerrahi bir 5-0 polyglactin sütür (Ethicon Vicryl, Johnson and Johnson Medical, ABD) (Şekil 1D-1E) kullanarak bu gemilerin% 40-50 Arter. Uygulamada, her gebelik kesesi temin üç damar demetleri genellikle vardır. Bu durumda, büyük damar paket bağlanır. Tamamlandığında, rahim tekrar ısıtılmış serum fizyolojik ve dikkatli bir şekilde karın iade ile sulanmaktadır.
    6. Karın kapatma. Sürekli çalışan 2-0 polyglactin sütür (Ethicon Vicryl, Johnson and Johnson Medical, ABD) kullanılarak iki kat karın kapatın. Subkütiküler 3-0 polyglactin sütür (Ethicon Vicryl, Johnson and Johnson Medical, ABD) ile cilt kapatın. Daha sonra dikişler ile müdahale tavşan önlemek için yara üzerine sprey alüminyum aerosol.
    7. Kurtarma. Anestezi kes ve yakın solunum kurtarma gözlemlemek. Yiyecek ve su ad libitum ile erişim, yukarıda tarif edildiği gibi günlük olarak gözlemlenir ve tavşan daha sonra yer almaktadır.

2. Fetal Ekokardiyografi ve Pulsed-wave Doppler Ultrason Sahne

  1. Aynı tavşan daha sonra GA ekokardiyografik ve ultrason değerlendirmesi için 30 gün aktarılır. Tavşan sınav süresince bir ısınma pad üzerinde yerleştirilir.
  2. Anestezi Prosedürü.
    1. Indüksiyon anestezi ketamin 35 mg / kg (Ceva Sante Animale, Brüksel, Belçika) ve ksilizin 5 mg / kg kas içi (Ceva Sante Animale, Brüksel, Belçika). Verilerek elde edilir Bir kez oturaklı, bir periferik kulak ven içine yerleştirilen bir 24 Ölçer kanül (BD INSYTE-W, Becton Dickinson İnfüzyon Tedavi Sistemleri, Utah, ABD) kullanılarak intravenöz erişim sağlamak.
    2. Ketamin ve ksilazin arasında sürekli bir infüzyon ile anestezi bakımı: 2 ml ketamin (100 mg / ml) ve 1.5 mL ksilazin (20 mg / ml) serum fizyolojik 46.5 ml, daha sonra 40 bir şırınga pompası ile aşılanmış ml / sa. Üç yönlü-musluk Güvenli ve kurtarma anestezi 5 ml şırınga takmak: 2 mlketamin (100 mg / ml) ve 1.5 mL ksilazin (20 mg / ml). 0.5 ml kurtarma anestezi bolus nadiren gereklidir. Cerrahi subcutaneouslyprior, 0.03 mg / kg (Schering-Plough Temgesic) analjezik buprenorfin yönetin. Oksijen 2 L / dk maskesi uygulanmaktadır. Sürekli kalp hızı ve arteriyel O 2 satürasyonu izlemek için anne ikinci ve üçüncü ayak üzerinde bir pulse oksimetre (Nellcor N-20, Covidien, İrlanda) yerleştirin.
  3. Karın laparotomi ve rahim eksteriorizasyon. 1.3.3 ve 1.3.4 bakın.
  4. Ekokardiyografik ve ultrason muayenesi için Fetal konumlandırma.
    1. Araştırmacı doğru bakan bir yan pozisyonda tavşan yerleştirin. Bu sınav için tek gebelik kesesi daha kolay alma kolaylaştırır ve uteroplasental damarların aşırı çekiş önler. Mümkün olduğunca, maruz kalma en aza indirmek için bir seferde sadece bir gebelik kesesi exteriorize çalışın. Maruz gebelik kesesi ile sulanan gazlı bez yerleştirilir oluntuzlu ısındı. Over ve her bir uterin boynuz vajinal ucunda genellikle farklı çalışma grupları, sadece fetus arasında standart sonuçları elde etmek için ultrason muayenesinde kullanılır.
    2. Fetal kalp fonksiyonu rahim eksteriorizasyon etkisini karşı son derece hassastır, sıcaklık ve plasental damarları üzerinde ultrason dönüştürücü baskısı değişiklik. Kalp fonksiyonu bu çevresel ve iyatrojenik karıştırıcı etkilerini en aza indirmek için, ultrasonografi gebelik kesesinin eksteriorizasyon hemen sonra başlamalıdır ve sistematik ve etkili olmalıdır. Bizim tecrübelerimize göre, fetal kalp fonksiyon değişiklikleri nadiren maruz kalma ilk 5 dakika içinde meydana gelir. Fetal bradikardi karşılaşılırsa, ultrason probu kaldırmak, plasental damarların bükülmesini önlemek amacıyla fetusun yeniden konumlandırmak, ısıtılmış serum fizyolojik ya da kısaca anne karın içine geri gebelik kesesi dönmek ile yıkayınız. Bu fe için fetal bradikardi kalıcı ise, muayenetus sonraki fetüsün incelenmesi lehine terk edilmelidir.
  5. Fetal ekokardiyografi.
    1. Visualsonics VEVO 2.100 (Toronto, Kanada) yüklü kalp ve şekil değiştirme analizi yazılımı ile yüksek çözünürlüklü microultrasound platformu gereklidir. Bir VisualSonics MS-250 dönüştürücü (VisualSonics, Toronto, Kanada) veri toplama için kullanılır. Bu bir bant genişliği 13-24 MHz ile 21 MHz merkez frekansı vardır. Geometrik odak 15 mm, maksimum görüntü genişliği 23 mm ve maksimum görüntü derinliği 30 mm'dir. Ayak izi 28 x 5.75 mm. Veri fetal ekokardiyografi performansı için Ekokardiyografi kılavuzların American Society uygun ve standartlarda elde edilir. 20
    2. Veri toplama 1: Lateral görünümde lateral dört odacık-bakış düzeyinde, gerilme, şekil değiştirme hızı, hız ve yer değiştirme belirlemek için en az beş kalp döngüsü bir B-mod sine döngü kaydedin.. Bu çevrimdışı VevoStrain kullanılarak analiz edilirDaha önce ayrıntılı olarak dergide anlatıldığı gibi (Visualsonics, Toronto, Kanada) algoritması. 21 M-mod ekokardiyografi endeksleri bu standart görünümde elde edilebilir. Kalp yapısı ve fonksiyonu hem de çevrimdışı ölçümleri daha sonra analiz edilebilir: sistol ve diyastol iç ventriküler septal ve çapları, hacimleri, atım hacmi, fraksiyonel kısalma, ejeksiyon fraksiyonu ve kalp debisi 21.
    3. Veri toplama 2:. Apikal görünümü apikal dört boşluk-görünümü, B-mod sine döngü düzeyinde yukarıda açıklandığı gibi analizler VevoStrain için tekrar edilebilir. M-mod ekokardiyografi triküspit (esneme mesafesi) ve mitral anüler düzlem sistolik gezi (mapse) ve boyuna strain ve strain oranını değerlendirmek için kullanılır. 22,23 Bu apikal görünümü, daha önce olduğu gibi kapak akım hızları değerlendirilmesi ve değiştirilmiş miyokard performans indeksi izin tanımladı. 24
  6. Fetoplasental Doppler ult darbe salladırasound.

Umbilikal arter akım hızları (FVW) renkli Doppler kullanarak göbek damarları bulma ve daha sonra göbek kordonu ücretsiz bir döngü umbilikal arter üzerinde darbeli Doppler örnekleme kapısı yerleştirerek elde edilir. 25 orta serebral arter (MCA) FVW olduğu Willis poligonu renkli Doppler tarafından bulunur zamanlar sadece MCA kökeni ötesinde darbeli Doppler örnekleme kapısı koyarak yer. 26 duktus venosus (DV) FVW görülen DV proksimal kısmında darbeli Doppler örnekleme kapısı yerleştirilerek elde edilir bu fetusun bir sagital veya enine görünümünde ya da intrahepatik umbilikal ven kaynaklanmaktadır. 26 renkli Doppler ile pulsatilite indeksi (PI) VisualSonics kardiyovasküler analiz yazılımı kullanarak çevrimdışı hesaplanır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Uteroplasental vasküler ligasyon gelen fetus ve plasenta sınırlı asimetrik büyüme Şekil 1F normal kontrol fetus ve plasenta ile karşılaştırılır. Kontrollere karın çevresi oranı: Asimetrik büyüme düşük bebeğin doğum ağırlığı ve artan baş çevresi tarafından onaylanır. Plasental Doppler çalışmalardan elde edilen Örnek sonuçları Şekil 2'de gösterilmiştir. Bir kontrol fetusta pozitif end-diyastolik akım normal bir düşük dirençli desen gösterilir. Sonra IUGR fetus, yokluğunda ve görülen plasental direnç ilerici artış ile diyastol sonu belirgindir tersine. Şekil 3 sağlıklı bir fetusta normal bir yüksek direnç orta serebral arter Doppler sinyali ve aynı fetusta olumlu bir dalga duktus venosus göstermektedir. IUGR fetuslarda, bir dalganın duktus venosus ve ters bir artış pulsatilite indeksi görülebilir. 14. Temsilcisi sonuçları M-mod, fetal ekokardiyografi daha sonra, Şekil 4 'de gösterilmiştir. Bu yan görünüm iç ventrikül çapları ve hacimleri hesaplanması sağlar. Apikal görünümü TAPSE ve mapse hesaplanması sağlar. Şekil 5 gösteriyor gerilme, şekil değiştirme hızı, yer değiştirme ve hız hesaplamak için hız vektörleri ve sonuç bölgesel gerilme eğrileri izleme benek.

Şekil 1
Şekil 1. Bir tavşan modelinde IUGR oluşturma cerrahi teknik bir: orta hat laparotomi rektus kılıf, ok = mammory bezleri açığa, B:. Karın boşluğuna Güvenli giriş, C: gebelik kesesi tedarik ok = uteroplasental gemiler; D: dikiş yöntemi, E: ok uteroplasental geminin = tamamlanmış ligasyonu, F: temsilcisi kontrolü ve IUGR fetus ve plasenta.

yeniden 2 "src =" / files/ftp_upload/50392/50392fig2.jpg "/>
Şekil 2. Umbilikal arter Doppler ultrasonografi A: pozitif end-diyastolik akım (EDF), B:. Yok diyastol sonu akım (AEDF); C: diyastol sonu akım (REDF) Ters.

Şekil 3,
Şekil 3 A: duktus venosus, s = s dalgası (ventrikül sistolik kasılma) Doppler ultrason, d = d dalga (erken ventriküler diyastol), a = bir dalga (atriyal kasılma), B:. Orta serebral arter Doppler ultrasonografi .

Şekil 4,
Şekil 4. M mod ekokardiyografi A:. Yan dört boşluktan, LVID = sol ventrikül iç çapı, IVSD = intraventriküler septum çapı, RVID = sağ ventricular septal çapı, ESD = sistol sonu çapı, EDD = diyastol sonu çapı, B: apikal görünümü triküspit halka düzleminde sistolik gezi (TAPSE) göstermek; C: mitral halka düzlem sistolik gezi (mapse) gösteren apikal görünümü.

Şekil 5,
Şekil 5,. Fetal kalp şekil değiştirme analizi A: sol ventrikül endo-ve epi-kard tarafından tanımlanan ilgi Bölgesi, B:. Altı miyokard segmentleri, SR = zirve sistolik gerilim oranı ve Strain oranı eğrileri; C: altı miyokard segmentleri ve Strain eğrileri, Str = zirve sistolik gerilim. M modu gösteren son diastole (ED) ve son sistol (ES) ile gösterilir kalp hareket. büyük rakam görmek için buraya tıklayın .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Biz cerrahi IUGR 13-16 üretmek için bir tavşan olarak uteroplasental kan akımını azaltarak ve daha sonra microultrasound teknoloji ve VisualSonics VEVO 2100 kullanılabilir kalp fonksiyon analizi tanımlamak için fetal kalp fonksiyonu 14 inceleme daha önceden belirlenmiş bir yaklaşım kullandık. Küçük bir hayvan modelinde insan IUGR fetuslarda fetoplasental Doppler değişiklikleri çoğaltmak ve daha sonra yakın zamanda tanımlanmış ekokardiyografi ile kalp fonksiyonlarının incelenmesi izin yeteneği bir klinik olarak anlamlı bir şekilde fetal kalp araştırmaları ilerleme muhtemeldir.

Ise küçük hayvan modellerinde yaygın, anne kalori kısıtlaması veya düşük protein tüketimi 9, ancak bu düşük plasental kan akımı, gelişmiş ülkelerde IUGR birincil mekanizması. Sıçanlarda 27 Ayrıca, cerrahi bilateral uterin arter ligasyonu göstermek için bir yetersizlik ile sınırlıdır güveniyor sık bildirilen, tekrarlanabilir i sonuçlanmazn gelişme geriliği. 28 tavşan fetuslarda bu akım yöntemi olarak, insan IUGR içinde ultrasonografik bulgularla tutarlı umbilikal arter Doppler (UA DAYTA), bir eksik ya da ters diyastol sonu akım ile belirgin olarak plasental yetmezlik göstermektedir. Bu Doppler sinyal artmış direnç plasental vasküler yatakta kan akımı aşağı akım empedans yansıtır ve plasental yetersizlik göstergesi olduğu deneysel olarak gösterilmiştir 29 UA DAYTA varlığı açıktır 50 zaman -. Villus damar 70% işlevsiz olduğu . Klinik 30,31, UA DAYTA hipoksi ve kötü perinatal sonuçlar güçlü bir belirleyicisi olduğunu ve seviyesi yüksek riskli gebelik yönetiminde kullanımı desteklemek için 1-kanıt yoktur. 17

UA DAYTA görülmektedir, bu modelde, araştırmacı birincil cerrahi ciddi plasental yetmezlik üretiminde başarılı olduğunu emin ve daha ekokardiyografi olabiliric değerlendirme verimli olması muhtemeldir. Fetal ekokardiyografi son zamanlarda artık kalp fonksiyonunun detaylı fonksiyonel değerlendirmeler sağlamaya konjenital anomalilerin ağırlıklı olarak teşhis etki alanından dışarı dallı vardır. 18. Doppler ve M-mod iki fetal ventrikül fonksiyonu değerlendirmek ve kalp debisi ölçümleri elde etmek için kullanılabilir. 32 Daha yakın zamanda, fetusta kalp performansı yeni endeksleri gibi benek izleme ve gerilme ölçümü 33 olarak tarif edilmiştir, miyokard performans indeksi 24,34, doku Doppler 35 ve (3D) üç boyutlu teknikleri. 32 Bu çalışmanın önemli bir özelliği olduğunu Bu son gelişmeler de Visualsonics VEVO 2.100 microultrasound ve kalp fonksiyonu analiz yazılımı kullanarak bu küçük ölçekli tavşan modeli üzerinde gerçekleştirilebilir. Ayrıca, daha önce bu model diğer vasküler territ en fetal hemodinamik yanıtın değerlendirilmesi sağlar 14 tarifories, özellikle büyüme-kısıtlı fetüs incelerken klinik pratikte yaygın olarak kullanılan orta serebral arter, duktus venosus ve aort berzah,. 36 Benzer şekilde, erken doğum için hazırlık glukokortikoid idare etkileri de incelenebilir. 37, 38 Bu tavşan modeli rahim ters boynuz iç kontroller açısından daha fazla avantaj, insan gebelik 13, düşük maliyetli, kullanılabilirlik ve nispeten kolay kullanım benzer bir villus ve hemochorial plasenta sunmaktadır.

Ele alınması gereken Bu modeli çeşitli sınırlamalar, yine de bulunmaktadır. Büyük sınırlama ekokardiyografi sırasında iyatrojenik fetal bradikardi olduğunu. Maternal izofluran fetal bradikardi 39 neden olabilir inhalasyon idare ve ekokardiyografi sırasında tüm kullanılmayan bizim durumumuzda en az ya da tutulmalıdır. Bunun yerine, ketamin, bir intravenöz enfüzyon için bu ikame edilen veSon zamanlarda kan basıncı 40 ortalama değiştirmemeyi tavşan gösterilmiştir ksilazin, böylece muhtemelen plasental (ve dolayısıyla fetal) perfüzyon sürdürülmesi. Bu yaklaşıma rağmen, dış çevre, taşıma ve ultrason dönüştürücü baskısı için gebelik kesesinin maruz tüm geçici fetal bradikardi neden olabilir. Biz bu etkiyi en aza indirmek için yöntem şekillerde tarif, ancak doğru sonuçlar için biz ekokardiyografik ve fetoplasental Doppler ultrason en iyi toplam maruz kalma yaklaşık 5 dakika ile sınırlı olduğuna inanıyoruz. Şimdi klinik literatürde 41 tarif giderek daha karmaşık ekokardiyografik teknikleri ve öğrenme eğrileri ile, titiz bir planlama standart sonuçları elde etmek için önceden gereklidir. Ekokardiyografik ölçümlerin birkaç örneğin, bu çalışmada kapak dairesel düzlem sistolik gezi tarif ve şekil değiştirme analizi ile izleme benek, inci rağmen, mevcut obstetrik klinik uygulamada kurulmuş değildiryetişkin kardiyoloji EIR kullanımı. Bununla birlikte 42,43, fetal tıp bu yeni ölçümlerde son araştırmalar ilgi göz önüne alındığında, biz bu tavşan modeli kullanırken elde etmek mümkün olduğunu araştırmacılar bilgilendirmek bizim metodoloji bunları dahil etmek seçti. IUGR fetuslarda bu özel parametrelerin analizi bu metodolojik çalışmanın kapsamı dışındadır. Başka bir sınırlama bu nedenle iyi perfüze over ve her boynuz vajinal uçları fetal durumda tahsisi için tavsiye edilir cenin pozisyonunda 44, dayalı IUGR için tavşan doğal eğilim ile ilgilidir. Bundan başka, bu metodoloji, 25 günlük bir gebelik yaşı cerrahi İUBG ikna etmek için kullanılır. Bu daha önce açıklanan başarılı deneyler dayanmaktadır, ancak beklenen ölüm oranı% 50'dir. 13,14 Son olarak, fetal boyut daha sonra olmayan ötenazi ölçümler için hemodinamik akış prob yerleştirilmesi için koyun modellerde yararlıdır kronik enstrümantasyon engeller ve tekrared kan örneklemesi. 11. Sonuç olarak, kalp fonksiyonunun sonraki microultrasound muayene ile tavşan IUGK üretmek için uteroplasental damarların selektif bağ çağdaş klinik uygulama ile uyumlu ve çift yönlü öteleme araştırmacılara bu nedenle yararlı bir hayvan modeli temsil eder.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazar Profesör Jan D'Hooge VisualSonics ile bir araştırma anlaşması var. Kalan yazarlar açıklamaları var.

Acknowledgments

(ME, PD) Avrupa Komisyonu tarafından desteklenen kazandırmakta Victoria Hükümeti'nin Operasyonel Altyapı Destek Programı (RH, EW) ve Marie Curie Industria-Akademi Ortaklığı ve tanımında, bu çalışma Hamilton-Fairley NHMRC Bursu (RH, AL) tarafından desteklenmektedir . Yazarlar bu videoyu üretiminde kendi teknik uzmanlık için Dr Andre Miyague, Dr Francesca Russo, Bayan Rosita Kinnart ve Bay Ivan Laermans teşekkür etmek istiyorum.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Ketamine Ceva Sante Animale http://www.ceva.com/en
Xylazine Ceva Sante Animale http://www.ceva.com/en
Depot Provera Pharmacia Upjohn
Penicillin G Kela Pharma http://www.kela.be
Lidocaine B Braun Medical http://www.bbraun.com/
Temgesic Schering-Plough http://www.merck-animal-health-usa.com/
Isolurane Isoba Vet; Abbott Laboratories Ltd http://www.abbottanimalhealth.com/index.html
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
VEVO 2100 VisualSonics SN100-0032 http://www.visualsonics.com/
Aquasonic Gel Parker Laboratories 01 02 http://www.parkerlabs.com/ultrasound_products.html
Nellcor N-20PA Pulse oximeter Covidien http://www.nellcor.com/prod/PRODUCT.ASPX?S1=POX&S2=MON&id=282&V

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Bukowski, R. Stillbirth and fetal growth restriction. Clin. Obstet. Gynecol. 53 (3), 673-680 (2010).
  2. American College of Obstetricians and Gynecologists. Intrauterine growth restriction. ACOG practice bulletin no. 12. 12, American College of Obstetricians and Gynecologists. Washington, DC. (2000).
  3. Crispi, F., Bijnens, B., et al. Fetal growth restriction results in remodeled and less efficient hearts in children. Circulation. 121 (22), 2427-2436 (2010).
  4. Cosmi, E., Visentin, S., Fanelli, T., Mautone, A. J., Zanardo, V. Aortic intima media thickness in fetuses and children with intrauterine growth restriction. Obstet. Gynecol. 114 (5), 1109-1114 (2009).
  5. Ojeda, N. B., Grigore, D., Alexander, B. T. Intrauterine growth restriction: fetal programming of hypertension and kidney disease. Adv. Chronic Kidney Dis. 15 (2), 101-106 (2008).
  6. Stocker, C. J., Arch, J. R., Cawthorne, M. A. Fetal origins of insulin resistance and obesity. Proc. Nutr. Soc. 64 (2), 143-151 (2005).
  7. Barker, D. J. Intrauterine programming of coronary heart disease and stroke. Acta Paediatr. Suppl. 423, 178-182 (1997).
  8. Anthony, R. V., Scheaffer, A. N., Wright, C. D., Regnault, T. R. Ruminant models of prenatal growth restriction. Reprod. Suppl. 61, 183-194 (2003).
  9. Woods, L. L., Weeks, D. A., Rasch, R. Programming of adult blood pressure by maternal protein restriction: role of nephrogenesis. Kidney Int. 65 (4), 1339-1348 (2004).
  10. Turner, A. J., Trudinger, B. J. A modification of the uterine artery restriction technique in the guinea pig fetus produces asymmetrical ultrasound growth. Placenta. 30 (3), 236-2340 (2009).
  11. Miller, S. L., Supramaniam, V. G., Jenkin, G., Walker, D., W,, Wallace, E. M. Cardiovascular responses to maternal betamethasone administration in the intrauterine growth-restricted ovine fetus. Am. J. Obstet. Gynecol. 201 (6), 613.e1-613.e8 (2009).
  12. Barry, J. S., Rozance, P. J., Anthony, R. V. An animal model of placental insufficiency-induced intrauterine growth restriction. Semin. Perinatol. 32 (3), 225-2230 (2008).
  13. Eixarch, E., Figueras, F., et al. An experimental model of fetal growth restriction based on selective ligature of uteroplacental vessels in the pregnant rabbit. Fetal Diagn. Ther. 26 (4), 203-211 (2009).
  14. Eixarch, E., Hernandez-Andrade, E., et al. Impact on fetal mortality and cardiovascular Doppler of selective ligature of uteroplacental vessels compared with undernutrition in a rabbit model of intrauterine growth restriction. Placenta. 32 (4), 304-309 (2011).
  15. Eixarch, E., Batalle, D., et al. Neonatal neurobehavior and diffusion MRI changes in brain reorganization due to intrauterine growth restriction in a rabbit model. PLoS One. 7 (2), e31497 (2012).
  16. Figueroa, H., Lozano, M., et al. Intrauterine growth restriction modifies the normal gene expression in kidney from rabbit fetuses. Early Hum. Dev. , (2012).
  17. Alfirevic, Z., Stampalija, T., Gyte, G. M. Fetal and umbilical Doppler ultrasound in high-risk pregnancies. Cochrane Database Syst. Rev. (1), CD007529 (2010).
  18. Baschat, A. A. Examination of the fetal cardiovascular system. Semin. Fetal Neonatal. Med. 16 (1), 2-12 (2011).
  19. GraphPad QuickCalcs: Random number calculators [Internet]. , GraphPad Software, Inc. Available from: http://graphpad.com/quickcalcs/randMenu/ (2012).
  20. Rychik, J., Ayres, N., et al. American Society of Echocardiography guidelines and standards for performance of the fetal echocardiogram. J. Am. Soc. Echocardiogr. 17 (7), 803-810 (2004).
  21. Gnyawali, S. C., Roy, S., Driggs, J., Khanna, S., Ryan, T., Sen, C. K. High-frequency high-resolution echocardiography: first evidence on non-invasive repeated measure of myocardial strain, contractility, and mitral regurgitation in the ischemia-reperfused murine heart. J. Vis. Exp. (41), e1781 (2010).
  22. Forfia, P. R., Fisher, M. R., et al. Tricuspid annular displacement predicts survival in pulmonary hypertension. Am J Respir Crit Care Med. 174 (9), 1034-1041 (2006).
  23. Matos, J., Kronzon, I., Panagopoulos, G., Perk, G. Mitral annular plane systolic excursion as a surrogate for left ventricular ejection fraction. J. Am. Soc. Echocardiogr. 25 (9), 969-974 (2012).
  24. Cruz-Martinez, R., Figueras, F., et al. Normal reference ranges from 11 to 41 weeks' gestation of fetal left modified myocardial performance index by conventional Doppler with the use of stringent criteria for delimitation of the time periods. Fetal Diagn. Ther. 32 (1-2), 79-86 (2012).
  25. Edwards, A., Baker, L. S., Wallace, E. M. Changes in umbilical artery flow velocity waveforms following maternal administration of betamethasone. Placenta. 24 (1), 12-16 (2003).
  26. Edwards, A., Baker, L. S., Wallace, E. M. Changes in fetoplacental vessel flow velocity waveforms following maternal administration of betamethasone. Ultrasound Obstet. Gynecol. 20 (3), 240-244 (2002).
  27. Neitzke, U., Harder, T., et al. Intrauterine growth restriction in a rodent model and developmental programming of the metabolic syndrome: a critical appraisal of the experimental evidence. Placenta. 29 (3), 246-254 (2008).
  28. Neitzke, U., Harder, T., Plagemann, A. Intrauterine growth restriction and developmental programming of the metabolic syndrome: a critical appraisal. Microcirculation. 18 (4), 304-311 (2011).
  29. Maulik, D., Mundy, D., Heitmann, E. Evidence-based approach to umbilical artery Doppler fetal surveillance in high-risk pregnancies: an update. Clin. Obstet. Gynecol. 53 (4), 869-878 (2010).
  30. Morrow, R. J., Adamson, S. L., Bull, S. B., Ritchie, J. W. Effect of placental embolization on the umbilical arterial velocity waveform in fetal sheep. Am. J. Obstet. Gynecol. 161 (4), 055-60 (1989).
  31. Kingdom, J. C., Burrell, S. J., Kaufmann, P. Pathology and clinical implications of abnormal umbilical artery Doppler waveforms. Ultrasound Obstet. Gynecol. 9 (4), 271-286 (1997).
  32. Van Mieghem, T., DeKoninck, P., Steenhaut, P., Deprest, J. Methods for prenatal assessment of fetal cardiac function. Prenat. Diagn. 29 (13), 1193-1203 (2009).
  33. Van Mieghem, T., Giusca, S., et al. Prospective assessment of fetal cardiac function with speckle tracking in healthy fetuses and recipient fetuses of twin-to-twin transfusion syndrome. J. Am. Soc. Echocardiogr. 23 (3), 301-308 (2010).
  34. Cruz-Martinez, R., Figueras, F., Hernandez-Andrade, E., Oros, D., Gratacos, E. Changes in myocardial performance index and aortic isthmus and ductus venosus Doppler in term, small-for-gestational age fetuses with normal umbilical artery pulsatility index. Ultrasound Obstet. Gynecol. 38 (4), 400-405 (2011).
  35. Comas, M., Crispi, F., Cruz-Martinez, R., Figueras, F., Gratacos, E. Tissue Doppler echocardiographic markers of cardiac dysfunction in small-for-gestational age fetuses. Am. J. Obstet. Gynecol. 205 (1), 57.e1-57.e6 (2011).
  36. Baschat, A. A. Venous Doppler evaluation of the growth-restricted fetus. Clin. Perinatol. 38 (1), 103-112 (2011).
  37. Hodges, R. J., Wallace, E. M. Mending a growth-restricted fetal heart: should we use glucocorticoids? J. Matern. Fetal Neonatal. Med. , (2012).
  38. Miller, S. L., Chai, M., et al. The effects of maternal betamethasone administration on the intrauterine growth-restricted fetus. Endocrinology. 148 (3), 1288-1295 (2007).
  39. Palahniuk, R. J., Shnider, S. M. Maternal and fetal cardiovascular and acid-base changes during halothane and isoflurane anesthesia in the pregnant ewe. Anesthesiology. 41 (5), 462-472 (1974).
  40. Baumgartner, C., Bollerhey, M., Ebner, J., Laacke-Singer, L., Schuster, T., Erhardt, W. Effects of ketamine-xylazine intravenous bolus injection on cardiovascular function in rabbits. Can. J. Vet. Res. 74 (3), 200-208 (2010).
  41. Cruz-Martinez, R., Figueras, F., et al. Learning curve for Doppler measurement of fetal modified myocardial performance index. Ultrasound Obstet. Gynecol. 37 (2), 158-162 (2011).
  42. Germanakis, I., Gardiner, H. Assessment of fetal myocardial deformation using speckle tracking techniques. Fetal Diagn. Ther. 32 (1-2), 39-46 (2012).
  43. D'hooge, J., Heimdal, A. Regional strain and strain rate measurements by cardiac ultrasound: principles, implementation and limitations. Eur. J. Echocardiogr. 1 (3), 154-170 (2000).
  44. Flake, A. W., Villa, R. L., Adzick, N. S., Harrison, M. R. Transamniotic fetal feeding. II. A model of intrauterine growth retardation using the relationship of "natural runting" to uterine position. J. Pediatr. Surg. 22 (9), 816-819 (1987).

Tags

Tıp Sayı 76 Gelişim Biyolojisi Biyomedikal Mühendisliği Moleküler Biyoloji Anatomi Fizyoloji Kardiyoloji Fetal Tedaviler Obstetrik Cerrahi Fetal Geliştirme Cerrahi Operatif intrauterin gelişme geriliği fetal ekokardiyografi Doppler ultrasonografi fetal hemodinamik hayvan modeli klinik teknikleri
Rahim içi Büyüme Kısıtlama bir Tavşan Modelinde Fetal Ekokardiyografi ve Pulsed-wave Doppler Ultrason
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Hodges, R., Endo, M., La Gerche, A., … More

Hodges, R., Endo, M., La Gerche, A., Eixarch, E., DeKoninck, P., Ferferieva, V., D'hooge, J., Wallace, E. M., Deprest, J. Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction. J. Vis. Exp. (76), e50392, doi:10.3791/50392 (2013).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter