Summary
我们描述了压缩激素粒料的制造方法，以及皮下外科手术植入到小鼠体内。这种策略可以与细胞和组织异种移植物下的无胸腺裸小鼠的肾被膜，以评估内分泌癌和良性前列腺生长的调节生长相结合。
Abstract
新疗法两种常见的前列腺疾病，前列腺癌（PRCA）和良性前列腺增生（BPH），关键取决于实验评估其激素调节。性类固醇激素（主要是雄激素和雌激素）是重要的PRCA和BPH，我们探讨在诱导前列腺的生长和癌变的小鼠使用压缩激素颗粒的实验各自的角色。激素和/或药物颗粒很容易用压片机制造的，并且通过外科手术植入到雄性小鼠宿主的皮下组织。我们还通过组合皮下激素植入粒料与根据免疫受损小鼠的肾被膜前列腺细胞的重组体异种移植描述一个协议，用于激素致癌作用的评价。此外，皮下激素颗粒植入，在前列腺增生组织中肾胶囊异种移植相结合，以更好地了解良性普罗斯特的激素调节是非常有用的吃了增长，并针对测试性类固醇激素途径的新疗法。
Introduction
前列腺癌（PRCA）和良性前列腺增生（BPH）是显著的健康负担。 PRCA是第二个最常见的实体器官癌症在男性和癌症的首要原因有关的死亡1。前列腺增生症也是在老年男性非常普遍，而且据估计，前列腺增生症的临床表现，下尿路症状（LUTS），会影响男性2 50-90％。而雄激素和雌激素是众所周知的PRCA和BPH是重要的，我们的背后发生和生长的荷尔蒙机制的理解仍然是不完整的3,4。简单和基因听话的动物模型支撑的研究，将解决这些重点在前列腺研究。在激素敏感的疾病，如PRCA和BPH，采用皮下，缓慢释放激素的颗粒，在分离或与肾小囊的组合异种移植（细胞，来自一个物种的组织或器官的转移到另一个）插入immunocompromised鼠标的主机，为研究发展和癌变的激素调节简单，重复性好方法。
皮下激素颗粒植入术是一种简单和可重复性技术研究肿瘤发生和前列腺良性5增长的激素调节。成年雄性小鼠25毫克睾酮（T）和2.5毫克17β-雌二醇（E 2）皮下植入，导致增加血清E 2和T中逐渐减少，再造的老年男性5,6动态激素环境。此外，这种模式概括了许多的BPH-LUTS 5,7的临床特点。激素给药的替代性方法包括口服/管饲法给药或腹膜内注射，这造成困扰的啮齿动物，是不太一致的在递送药物的相同量随着时间的推移，并且是劳动密集型比一次性外科手术植入。其他皮下模式的Hormone和/或药物递送包括硅橡胶胶囊8。虽然我们也有与使用硅橡胶胶囊的经验，压缩颗粒的青睐，因为它们易于使用和可重复性。此外，压缩激素颗粒释放率更好的模仿老男人5,7观察到的动态性类固醇激素的比例。
因为遗传免疫缺陷小鼠的发展，结合异种移植技术的许多体内模型系统已被开发用于广泛的正常和患病组织的研究。有异种移植的几个基本类别。组织异种移植物包括一小片完好的组织，它可以是一个正常的结构，恶性肿瘤，良性肿瘤或生长的影响。 Szot 等人 （2007）最近照射胰岛9肾胶囊异种移植。 Aamdal 等人（1985）所描述的在IM 27人癌细胞系肾包膜异种移植munocompromised鼠标主机10。移植物也可以由单一的永生化细胞系（癌性或非致瘤性）的，或者可以由永生化细胞系结合的细胞从间质（细胞重组接枝）中分离的。
我们看好细胞重组的异种移植，探讨基质和上皮PRCA和BPH的发展各自的作用。库尼亚等人 （1980）是第一个报告在成年小鼠膀胱上皮细胞结合胚胎生殖窦间质（UGM）和异种移植的小鼠下主机男性的肾囊，组织发展成结构类似前列腺腺泡11。 Norman 等人（1986）表明，成年小鼠前列腺导管上皮和UGM，当在组织中的重组体结合时，经过导管的增长和分支形态12。海沃德等人（1988）表明，人类前列腺上皮响应感性胎儿米esenchyme以类似的方式13。致癌作用于前列腺甲荷尔蒙模型，通过结合BPH-1与UGM，首次报道由Wang 等人 14（2001），并已被广泛使用在我们的实验室15永生化的人类前列腺上皮细胞系。这个模型是非常适合了解PRCA进展，因为前列腺上皮转变为转移性疾病，在人类5建模先进PRCA。因为特定的组件可以被遗传操纵，细胞重组嫁接是作为评价基质 - 上皮相互作用的方法是特别有用的。
适用于异种移植其他网站都是皮内，皮下和原位位置16。根据所关注的组织和疾病的过程中，这些可能是合适的替代方法。对于前列腺癌的激素和良性生长调节的研究中，我们选择了肾胶囊网站异种移植，由于其较高的接枝率取，丰富的血液供应，并植入到一个局限的网站16更多数量的移植能力。此外，荷尔蒙操纵主机鼠标而导致前列腺萎缩的限制使用的前列腺原位移植术16。
这个协议概括了压缩激素/药物粒料制造和外科手术植入，以及人类前列腺细胞和组织移植的肾被膜异种移植的技术。总之，这些技术提供了一个敏感的检测，以确定是否一个转基因小鼠更容易受到PRCA和/或前列腺增生引发比对照菌株。异种移植是一种强大的技术用于体内评价试验细胞的发育组织学和恶性肿瘤的分子特征的潜力，以及一个用于测定用于多种良性和恶性疾病的新的治疗策略。
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Protocol
1。压缩激素/药物颗粒的制备
- 此过程应在化学安全罩来完成，而穿着实验室的外套，手套，口罩，防护眼镜和帽子。以防止交叉污染，这是至关重要的颗粒制造设备彻底用70％乙醇之前和生产每种粒料的后清洗。
- 使用分析天平和称量纸，测量激素/药物粉末的所需量。约5％的额外材料，建议，以适应压制过程中的损失。
- 一些激素/药物需要结合剂或填料，其沉淀生产混合之前。例如，为了制造17β-雌二醇2.5毫克小球，结合激素与22.5毫克的胆固醇，这导致25毫克沉淀。
- 小心地转移到芯片组，地方新闻和下杆推用力向下压缩颗粒。使用一致的压力，以保持恒定的表面是一个与体积之比。
- 接着扭转模座和杠杆再次向下推以释放颗粒。
- 检查颗粒的完整性，并确定最终质量是理想的范围内。可接受的范围是在最终质量为±5％的差异（例如，在可接受的范围为25毫克丸是23.8-26.3毫克）。
- 粒料可以在手术之前并存储（条件和存储的时间长度取决于粒料制造中使用的激素或药物的稳定性）。激素粒料可购买作为替代沉淀制造。购买颗粒避免使用非药用级药物，因为它们将被制定和复杂。
2。重组细胞移植瘤的制备
- 采收和文化原代小鼠泌尿生殖系统间充质（UGM）间质细胞少于4周被收集用于计数之前。
- 培养永生化前列腺上皮细胞株以通常的烦恼离子和收集计数。在这个例子中，通过将每接枝100000 BPH-1上皮细胞以每接枝250000 UGM基质细胞在悬浮液中制备的重组细胞移植。
- 颗粒细胞一起，再暂停足够的中和1型鼠尾胶原，使在25微升至50微升体积移植所需的数量，每个。
- 设置重组移植物在37℃15分钟，然后盖上存储生长培养基，在37℃下长达48小时嫁接前。
3。组织异种移植物的制备
- 维持组织采购和手术过程中对血源性病原体普遍预防。下列机构审查委员会的批准和知情同意，获得新的前列腺组织从手术切除。对于前列腺增生的增长研究，组织可以从经尿道前列腺切除术或单纯前列腺程序有所收获。 PRCA或良性普罗斯特的主要移植吃的组织可以从前列腺癌根治术标本中获得。
- 贮存于等渗缓冲细胞介质或冰生理盐水收获的组织。取决于组织和储存条件下，样品可以保存长达24小时之前制备的组织移植物。常见的做法是将试样分成三部分，其中一个部分固定在福尔马林中，并定期地处理用于组织学，连衣裙快速冷冻用于分子分析和1枚进一步分为组织异种移植物（1-3毫米大小）。
4。抛光的玻璃吸管火的制备
- 佩戴眼镜保护眼睛，实验室外套，耐热手套，代替玻璃巴斯德吸管尖端插入本生灯火焰在大约60°角开始。
- 保持一个恒定的，轻微的运动，以移液管，以避免产生热点。
- 绘制尖薄和火抛光的目标是略微弯曲端采用了圆角，收小费。 5。仪器的准备和手术套房
- 高压灭菌所有仪器。手术前，检查所有仪表，注意保持无菌区。
- 设置无菌手术区与吸收垫，清扫范围，麻醉鼻锥体，手术器械和加热灯朝向工作区域。消毒小鼠，prewarm珠灭菌的工具。
- 组装和测试麻醉机;权衡气体清除剂。
- 使用微波，热蜡垫长达5分钟（以1分钟为增量，揉捏蜡垫，以便熔化和未熔化的蜡结合）在70-80％的功率，直到所有的蜡均匀地熔化。通过触摸屏，保证了空灭鼠笼复苏下的垫是不是太热和地点。
- 唐的个人防护设备啮齿动物外科手术，包括外科口罩，帽子，手套和礼服。
- 所有涉及实验动物的程序应与机构动物护理和使用委员会批准后执行。前麻醉诱导，观察鼠标，以确保健康和福祉。
- 将鼠标放到室内诱导异氟醚麻醉在3-5％。当动物已经停止移动和呼吸频率有所降低，转移到鼻锥俯卧位，并在1-3％维持麻醉。
- 如有必要，使用指甲钳刮胡子鼠标的背面。这种利用无胸腺裸鼠（女/女）小鼠时，是没有必要的。
- 适用于公司的压力，延长后足的织带评估麻醉是否足够。如果鼠标响应的压力，更多的时间是需要的麻醉生效。如果有必要，调整麻醉流量略有达到足够的麻醉。
- 当鼠标被充分麻醉后，消毒与外科碘（聚维酮碘）溶液中，随后外科手术部位70％的酒精。
- 唐无菌手套和礼服，运用无菌单手术部位。抬起背部皮肤有一对带齿的钳，并使用粗剪刀进行2-3厘米背中线切口。
- 使用钝的剪刀或探头，独立的真皮底层离体壁（上切口双边嫁接两侧或一侧单边嫁接）。
- 重新定位鼠标变成侧卧位，并通过肌壁观察肾轮廓识别肾脏的位置。采用温和的手动压力用拇指和食指放在腹部可协助可视化内脏。
- 用细虹膜剪，和照顾，以避免大血管和脊柱神经，制成1厘米的切口平行于脊椎体壁。轻轻打开放置在最初的切口后，将剪刀更宽扩大此切口1.5-2.0厘米（比肾脏的长轴稍长）。
- 通过施加温和的压力肌壁使用食指和拇指肾脏两侧外Exteriorize肾脏。塔克皮肤边缘下方的形象化的肾脏，这将休息的体壁。而肾是形象化，通过应用无菌生理盐水维持肾小囊的水合作用。
- 用细＃5镊子从肾脏的实质轻轻抬起肾囊，并用细手术刀，做一个2-4毫米的切口囊中。切口的大小是由移植物的尺寸来确定，而是应该以保持胶囊的完整性被最小化。
- 方式管理已经绘制的薄和火抛光的胶囊相切于肾脏的表面之下一个圆形封闭端的玻璃巴斯德吸管。轻轻地打开一个小囊袋的移植，使用非常小心，不要损坏肾实质。
- 肾囊切割边缘抬起与细镊子，和移植物我s，使用火抛光的玻璃吸管包膜下插入口袋。几个移植物可以被放置在肾囊和间隔均匀的肾脏表面。
- 如果，接枝过程中，胶囊变得脱水，应该通过将无菌生理盐水润湿。
- 当接枝完成后，轻轻抬起肌壁切口的两侧，以代替肾脏背面进入体腔。观察到移植物不从胶囊下滑出。
- 与单个缝合（4-0，FS-2薇乔缝线）关闭肌壁。手术过程可以通过重新定位鼠标重复在对侧肾。
- 当嫁接完成后，鼠标可在同一手术过程中发生皮下植入颗粒（见议定书第7步）。
- 用齿镊，使皮肤切口边缘及应用2-3手术创口夹子，关闭切口。管理镇痛（我们用5〜10毫克/千克carprof恩用皮下注射），然后将鼠标在恢复笼的外侧卧位。确保维修体温热，从一盏灯或加热垫。观察鼠标，应该发生在不到15分钟的全面复苏。
- 老鼠应该在未来24小时的手术后疼痛的迹象观察，出血和/或其他并发症。定期检查手术切口感染的迹象。
- 手术后7〜14天，手术创口夹子拆除设备中取出伤口剪辑。
- 重复肾胶囊异种移植的手术步骤6.1-6.5。
- 抬起背部皮肤有一对镊子的皮肤，并用粗剪刀做成1-2厘米背中线切口。
- 使用钝的剪刀或探头，独立的真皮底层由体壁中颅方向。
- 使用皮肤镊子，轻轻抬起的皮肤切口颅方面，并保持激素的颗粒轻轻伸直，锯齿钳，插入颗粒并释放在颈背，在您的钝探头产生的口袋。
- 重复肾胶囊异种移植的手术步骤6.18-6.20。如果执行皮下植入颗粒仅使用1手术创口夹子关闭手术切口。
6。外科手术：肾胶囊异种移植
7。外科手术：皮下植入颗粒
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Representative Results
取决于待测试的假设，可以进行隔离，或与皮下激素植入丸组合的组织或细胞中的重组体肾包膜异种移植。一个假设的实验相结合的肾小囊异种移植实验，皮下激素颗粒植入的示意图如图1所示。各种粉末状和/或结晶性物质，可在压缩粒料与粒料压机可用于制造图2示出了25毫克，12毫克和6毫克压缩激素颗粒。
图3示出了外科手术过程中所使用的火抛光的玻璃移液管的一个例子。的玻璃巴斯德移液管通过本生灯火焰多遍导致用于创建一个口袋为移植肾包膜下和肾包膜下操纵移植火抛光，圆尖。
ntent“>正如图4所示，从BPH患者主要组织异种移植物，补充外源性睾酮（25毫克皮下注射片），以模拟人类的雄性激素环境，存活和组织结构被保留（ 图4A）。中还示出了图4中 ，肾小囊的接枝可用于评估内分泌癌。含有良性前列腺上皮（BPH-1）和电感泌尿生殖道间质（UGM）在未经处理的小鼠细胞生长的重组体形成良性生长（ 图4B）。同样接枝，在生长收到25毫克T和2.5毫克E 2皮下激素丸四个月一台主机，发展成侵入肾小囊（ 图4C）5,14前列腺癌。upload/50574/50574fig1.jpg“/>
图1。肾胶囊异种移植和颗粒植入过程示意图。通过背中线的方法是进行肾胶囊异种移植。在同一手术过程中，鼠标被手术植入的颈脖颈子区域缓释皮下压缩激素和/或药物颗粒。
图2。本协议制造的压缩激素颗粒的例子。答：12毫克颗粒。B. 6毫克沉淀。C. 25毫克颗粒。
图3。火抛光的玻璃巴斯德移液管的移液管成品是弯曲的，以适合于创建一个麻子光滑圆形尖端等下肾包膜异种移植。移液管也可用于操纵下的肾小囊的接枝。
图4。肾囊移植的例子。人类前列腺增生组织A.组织移植（箭头）是根据一个裸体雄性小鼠的肾包膜生长一个月。鼠标主机被补充有25毫克睾酮丸，以模拟人类男性的激素环境含有肾下生长的人前列腺上皮细胞系（BPH-1）和电感泌尿生殖道间质（UGM）。B.细胞重组异种移植物（箭头）裸鼠，这不是植入含有BPH-1和UGM，在裸鼠 也经历子的肾小囊生长的皮下激素颗粒四个月。C.细胞重组异种移植的胶囊25毫克睾丸酮和2.5毫克17β-雌二醇四个月皮肤粒料注入。
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Discussion
本文本文和概述的协议描述压缩激素和/或药物的颗粒中的用途，以及在外科手术过程对小鼠皮下植入的颗粒。取决于所研究的问题得到解决，该方法可以执行单独使用，或与前列腺细胞的重组移植物或前列腺组织异种移植物，这是技术广泛应用于前列腺研究17-19肾包膜异种移植组合。综上所述，这些技术提供了强大的方法来研究激素致癌，并在人类和小鼠前列腺良性增长的调控。
球团生产是简单的执行，容易复制，而且需要有限的设备。它可以应用到各种激素和药物制剂。它在化学安全罩进行这项技术，并穿戴适当的个人防护装备是至关重要的。对于实验评估前列腺癌变ND诱导小鼠膀胱出口梗阻我们用25毫克T和2.5毫克E 2 5,7,15。这些剂量被选择，因为它们产生所需的体内响应并且因为它们创建血清激素水平，是生理有关对人类男性与感兴趣6的疾病过程。颗粒模具允许几个不同大小的颗粒来制造，我们通常使用25毫克丸评估致癌作用和良性增长。颗粒大小的选择取决于假设要处理的，以及生产所期望的效果，所需的循环水平的生产和实验的持续时间。如果药物或激素结合的结合剂（如胆固醇），我们建议激素的均匀混合物和结合剂。
取决于研究中，皮下植入丸能够进行阳主机15的下面阉割。根据我们的经验，对T的25毫克植入引起下丘脑 - 垂体 - 睾丸轴的反馈抑制，抑制内源性分泌。因此，我们选择以比较25毫克牛逼处理，以模拟人类男性的雄激素环境，以保持完整，但未经治疗的男性，具有维持内源性牛逼分泌小鼠。我们不经常利用阉割主机由于前列腺和前列腺异种移植于雄激素撤退的萎缩响应。
该协议还介绍了创建一块专用设备肾小囊异种移植，火抛光的玻璃巴斯德吸管。这可以容易地执行与设备中存在的大多数实验室，产生定制的外科器械相比，可以制造并在外科手术过程中在使用前灭菌。穿戴个人防护装备是很重要的，以确保工作人员的安全建立火抛光的玻璃吸管的时候。
在此之前embarki纳克任何在本协议所述的外科手术，所有的技术必须经过审查和批准的机构动物护理和使用委员会。在啮齿类动物进行外科手术需要培训和实践的过程中无论是技术方面，以及原则和无菌技术的实践。的介绍，对设备和技术在这些程序的重要，我们建议工作人员查看最近报道Prichett -康宁等视频稿件，（2011）20。我们还建议所有员工接受实践培训的啮齿动物外科手术和无菌技术。
在我们的实验室，这些程序通常执行与两名工作人员。手术助手负责管理麻醉，在恢复过程中观察到的动物，协助医生与程序非无菌方面，并介绍了所有手续。外科医生保持无菌区，负责管理一个镇痛次执行本协议所列的外科手术。通过适当的规划和培训，皮下激素颗粒植入手术过程简单，易于操作。
有几种实验设计考虑细胞重组异种移植。与利用永生化细胞系的任何实验，污染是很重要的，尽量减少和检测。对于使用BPH-1细胞系的实验中，我们建议采用低通道数（小于25）。为了控制基质的影响，我们利用只含有BPH-1细胞的一个肾脏及载有对侧肾BPH-1和UGM移植移植。对于旨在解决荷尔蒙致癌实验中，我们通常有一个未经治疗的控制条件（鼠标不植入颗粒，或已植入胆固醇颗粒）。在评估其他条件THA阳性对照（主机鼠标植入T + E 2颗粒）也同样重要t可以促进癌变与这个模型系统。根据不同的研究问题加以解决，为颗粒植入和/或移植瘤生长的时间范围可以从几个星期到四个月的计划超过四个月的实验，我们建议额外的颗粒植入，以保持外源性的激素水平。对于涉及良性前列腺组织异种移植实验中，佩戴合适的个人防护装备和维持血源性病原体普遍预防是很重要的。新鲜收获的组织可以被存储异种移植为12-72小时之前。
手术方法为肾小囊异种移植需要规划，实践和一些手巧。最大限度地减少了外科手术的持续时间，保持体温和仔细的手术技术可以减轻手术死亡和手术并发症。围手术期死亡的在我们的经验的机会与苏的持续时间增加rgical过程，为此我们限制了外科手术，以不超过20-25分钟。采用手术和恢复过程中的加热灯，温热的蜡垫是理想的维持体温。常规术后护理是这项技术的成功的另一个重要方面。老鼠应该在麻醉恢复观察和手术后的痛苦和困难的症状的一天。管理适当镇痛，尽量减少后期手术疼痛和痛苦。
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Disclosures
作者宣称，他们有没有竞争的财务权益。
Acknowledgments
笔者想感谢里克实验室的所有成员，过去和现在。我们感谢卡尔文彭定康，小，DVM和碧姬拉贝，数字电压表，了解有关的协议有帮助的意见。我们要感谢的NIDDK，NCI和NIEHS他们对这些研究的资金支持：R01DK093690，R01CA123199，RC2ESO18764。 TMN是在医学家训练计划学员在罗切斯特大学由美国国立卫生研究院的T32 GM07356资助;下露丝属Kirschstein国家研究服务奖F30DK093173美国国立卫生研究院也支持这个项目。在威斯康星大学麦迪逊分校的支持，T32ES007015 CDV是支持T32CA157322和ABT。内容完全是作者的责任，并不一定代表一般医学科学院或美国国立卫生研究院国立研究所的官方意见。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Pellet press | PARR Industries | 2815 | 3mm Punch & Die set |
| Analytical Balance | Ohaus | 1918302 | Voyager or other |
| Bunsen burner | Fisher Scientific | 03-962Q | |
| Dissecting microscope | Leica | L2 | |
| Deltaphase Pad Kit (reheatable wax) | Braintree Scientific | 39DP | Alternative to an electric heating pad |
| Hot Bead sterilizer | F.S.T. | 18000-45 | |
| Isoflurane Vaporizer | Supera Anesthesia Innov | VAP3000 | |
| Induction Chamber | Supera Anesthesia Innov | RES644 | |
| F/AIR Canister | Supera Anesthesia Innov | 80120 | |
| 4 port Manifold | Supera Anesthesia Innov | RES536 | |
| Rebreathing Circuits | Supera Anesthesia Innov | CIR529 | |
| Inlet/Outlet Fittings | Supera Anesthesia Innov | VAP203/4 | |
| Pressure Reg/Gauge | Supera Anesthesia Innov | OXY508 | |
| Oxygen Flowmeter | Supera Anesthesia Innov | OXY660 | |
| 21mm Clear Tubing | Supera Anesthesia Innov | 301-150 | |
| Small Mice Nose Cone | Supera Anesthesia Innov | ACC526 | |
| Sterile surgical gown | Midwest Vet Supply | 350.79866.2 | |
| Surgical mask | Midwest Vet Supply | 350.50111.2 | 2-ply w/ earloops |
| Sterile gauze | Midwest Vet Supply | 001.14100.2 | 2 x 2 inches |
| Sterile Gloves | Kimberly Clark | 55092 | |
| Bouffant | Midwest Vet Supply | 001.27100.2 | |
| Cotton Tip Applicator | Midwest Vet Supply | 001.06220.2 | |
| Surgical Scrub Wash | Midwest Vet Supply | 733.80010.3 | |
| Sterile Fields (Fenestrated) | General Econopak, Inc | 88VCSTF | |
| REAGENTS | |||
| Cholesterol | Sigma-Aldrich | C-3292 | |
| Testosterone Proprionate | Sigma-Aldrich | T-1875 | |
| 17β-estradiol | Sigma-Aldrich | E-2758 | |
| Isoflurane | Midwest Vet Supply | 193.33161.3 | |
| Carprofen | Midwest Vet Supply | 193.70200.3 | Injectable (Rimadyl) |
| Betadine | Webster Veterinary | 07-836-3379 | |
| Sterile saline | Midwest Vet Supply | 193.74504.3 | NaCl 0.9%, Injectable |
| SURGICAL INSTRUMENTS | |||
| Straight Sharp/Blunt Scissors | Fine Scientific Tools (F.S.T.) | 14054-13 | |
| Graefe forceps (Serrated, Toothed, Curved) | F.S.T. | 11055-10 | |
| Fine Iris scissors | F.S.T. | 14090-09 | |
| Graefe Scalpel | F.S.T. | 10071-12 | |
| Dumont #5 forceps | F.S.T. | 11251-20 | |
| Glass Pasteur pipets | Fisher Scientific | S67050 | 5" length |
| Graefe forceps (Serrated, Curved) | F.S.T. | 11052-10 | |
| Graefe forceps (Serrated, Straight) | F.S.T. | 11050-10 | |
| Vicryl Suture | Midwest Vet Supply | 295-92100.2 | 4-0, FS-2, Absorbable |
| Needle Holder w/ scissor action | F.S.T. | 12002012 | |
| Wound Clips | Braintree Scientific | ACS CS | May use 7mm or 9mm clips |
| Reflex Wound Clipper | F.S.T. | 12031-09 | Correspond w/ wound clip size |
| Would Clip Remover | F.S.T. | 12033-00 | Universal |
| Sterilization Container | F.S.T. | 20810-01 | Any autoclavable container will do |
| Syringe w/ needle | BD | 148292C | 1cc, 25Gx1 |
| Ear Tag Applicator | National Band Tag Co. | 1005s1 | Alternative to ear notching |
| Small Animal Ear Tags | National Band Tag Co. | 1005-1 | |
References
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