Summary
Den tibiale nerve transection model er en veltolereret, valideret og reproducerbar model af skeletmuskulaturen atrofi. Modellen kirurgiske protokol er beskrevet og vist i C57Black6 mus.
Abstract
Den tibiale nerve transection model er en veltolereret, valideret og reproducerbar model af denervering-induceret skeletmuskulatur atrofi i gnavere. Selv om de oprindeligt udviklet og anvendt i udstrakt grad i rotter på grund af sin større størrelse, den tibiale nerve i mus er stort nok, at det let kan manipuleres med enten knuse eller overskæring, forlader peroneal og sural nerve grene af iskiasnerven intakt og dermed bevare deres mål muskler. Således er denne model giver fordelene ved at inducere mindre sygelighed og hindring af ambulation end iskiasnerven overskæring model og også tillader undersøgere at studere de fysiologiske, cellulære og molekylære biologiske mekanismer, der regulerer processen muskelatrofi i gensplejsede mus. Den tibial nerve leverer gastrocnemius, soleus og plantaris muskler, så dens transection tillader studiet af denerverede skeletmuskulatur bestående af hurtige ryk type II fibre og / eller langsomme twitch type Ifibre. Her har vi demonstrere tibial nerve transection model i C57Black6 mus. Vi vurderer atrofi af musculus gastrocnemius, som en repræsentativ muskel, ved 1, 2 og 4 uger efter denervering ved måling muskel vægt og fibertype specifik tværsnitsareal på paraffinindstøbte histologiske snit immunfarvet for hurtige ryk myosin.
Introduction
Skeletmuskulatur denervering, grundet traumatisk perifer nerveskade, sygdom eller farmakologiske indgreb, resulterer i øjeblikkelig tab af muskel frivillig kontraktile funktion. Muscle samtidig begynder at atrofi og denne atrofi er reversibel, hvis rettidig, god kvalitet reinnervation opstår 1,2. I mangel af reinnervation, skrider myofiber atrofi og irreversible biologiske forandringer i musklen forekomme med muskel fibrose og myofiber død. Her har vi demonstrere tibial nerve transection model, en model af denervering-induceret skeletmuskulatur atrofi og fibrose, i mus. Denne model gør det muligt for forskerne at undersøge de fysiologiske, cellulære og molekylære biologiske mekanismer, der ligger til grund muskelatrofi in vivo i gastrocnemius og soleus muskler. Mens historisk brugt overvejende rotter nyere anvendelse af denne model på knockout og transgene mus linjer specifikt giver efterforskerne at vurdere den rolle deresbestemt protein (erne) af interesse i induktionen, udvikling og vedligeholdelse, eller alternativt opløsning, muskelatrofi og fibrose in vivo.
Den tibiale nerve er en blandet motor-sensorisk perifer nerve hos gnavere bagben, og er en af de tre terminale grene af iskiasnerven. Overskæring af den tibiale nerve denervates gastrocnemius, soleus og plantaris muskler (og de tre små dybe bøjemuskler af foden, herunder tibialis posterior, flexor digitorum longus og flexor hallicus longus), og er et godt standardiseret og valideret model i rotter 3,4 . Gastrocnemius og soleus muskler kan nemt dissekeret serielle tidspunkter efter tibial nerve transection, fikseret og forarbejdet til vurdering af muskel histologi og muskelfibrene morphometrics eller lynfrosset til ekstraktion af muskel-RNA og protein med henblik på at studere, for eksempel, de cellulære signalnetværker regulerer muskelatrofi. Den gastrocnemius muskel er en blandet fibertype muskel (type I og type II, selvom overvejende type II) og soleusmusklen er sammensat af en stor del af type I-fibre, hvorved der tilvejebringes både hurtig og langsom twitch muskel til vurdering 5,6. Den tibial nerve transection Modellen er velegnet til at studere processen denervering-induceret muskelatrofi på både kort sigt (dage) 7 og lang sigt (uger til måneder) 4,8.
I modsætning til iskiasnerven overskæring model (en anden model af denervering-induceret muskelatrofi almindeligt anvendt i gnavere), inducerer tibial nerve transection mindre morbiditet i dyret, hvilket gør det mere tiltrækkende model. Transection af iskiasnerven denervates alle musklerne i benet (under knæet) og fod, der krænker dyrets evne til at ambulate 2, mens transection af tibial nerve forlader peroneal og sural nerve grene af iskiasnerven intakt, således at beskyttederes mål muskler og sensoriske territorier. Musen er i stand til plantar flex eller vend foden, men er i stand til at ambulate nemt og vægten bærer ligeligt på begge bagben, og dermed betydeligt mindske sygeligheden af modellen. Ganganalyse studier, som evaluerede walking mønstre er blevet udført i rotter efter tibiale og iskiasnerven skader og vise, at fodaftryk og vægtbærende bedre bevaret med tibial skade 9,10. Desuden, i tibial nerve transection model kan peronealnerve mobiliseres på et senere tidspunkt og overføres som en kilde til forsinket reinnervation, hvis undersøgelsens design kræver 3. I modsætning hertil nødvendiggør forsinket reinnervation i iskiasnerven transection model brugen af en nerve graft til iskiasnerven underskud, meget væsentligt at øge tekniske vanskeligheder af modellen og begrænse brugen til dygtige kirurger.
Mens den tibiale nerve transection model requires kendskab for operatøren med steril operative teknik i dyre kirurgi, både tibial nerve og lægmuskler den innerverer er let tilgængelige og identificerbare for manipulation, så personer, som ikke kirurger, eller meget erfarne med dyr operation, let kan mestre denne model .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Forud for at bruge denne model, skal efterforskerne har fået godkendt den kirurgiske protokol fra deres institutions brug af dyr styrende organ. Modellen er godkendt af Research Ethics Board, Hamilton Health Sciences Corporation, McMaster University (AUP # 10-04-24) og udføres i nøje overensstemmelse med anbefalingerne fra den canadiske Råd om Animal Care.
1.. Mus Forberedelse
- Afvejes musen. Fremkald anæstesi med 5% isofluran eller 2% halothan. Den anvendte kredsløb bør sikre passende scavenging af bedøvelsesmidlet at beskytte kirurgen. Efter 2-3 min dyrets respiration vil aftage. Sørg blinkerefleksen er fraværende, og klemme interdigital rum i pote at bekræfte kirurgisk anæstesi (dvs. ingen reaktion fra mus). Påfør ophthalmisk smøremiddel til øjet, for at forhindre udtørring af hornhinden under operationen.
- Shave den laterale lår og balde fra ischiadicushak til knæet og desinficere med proviodine. Barbering vil holde siden af snittet hårfri at sikre tilstrækkelig visualisering af det kirurgiske område og for at minimere interferens med nerve dissektion og overskæring. Ischiadicus hak, som er overlegen og posteriore til lårbenet, kan identificeres ved palpering.
2.. Operativ procedure
- Reducer inhaleres isofluran til 2% (halothan 1%), og placer musen på sin side (side beregnet til operation opad) under et operativsystem eller dissektionsmikroskop. Alternativt kirurgi kan udføres med kirurgiske lupper da 3.5x forstørrelse er tilfredsstillende for en voksen (20-25 g) mus.
- Don sterile handsker. Identificer ischiadicus hak ved palpation. Ved hjælp af en skalpel, incise huden af den laterale låret fra ischiadicus hak til knæet (ca. 1 cm).
- Spred forsigtigt huden. Identificer biceps femoris-musklen, som er den flade overfladisk muskel i laterale lårumiddelbart under huden. Ved hjælp af fine sakse, split biceps femoris musklen langs muskelfibrene og holde åbent med en fjeder retractor at eksponere iskiasnerven og dets filialer.
- Identificer iskiasnerven umiddelbart dybt til biceps femoris musklen. Det kan identificeres ved sin karakteristiske skinnende hvide farve og er cirka 0,8 mm i diameter. Det løber fra ischiadicus hak til knæet, forgrening i den tibiale, Peroneal og sural nerver på niveau med den knæhasen.
- Forsigtigt adskille tibiale fra peroneal og sural nerve grene med ultrafine pincet og foråret microdissecting saks. Den tibial nerve er den største gren og er normalt centralt. Det er vigtigt ikke at knuse den nerve, mens adskille grenene. Holding nerven netop på det ydre adventicial lag med de ultrafine pincet og holde nerve slæk (ikke undervises), vil undgå nerve crush og trækkraft skade.
- For fuldstændig og varig denervatitændt, tibial nerve skæres med microdissecting saks så distalt som muligt, omhyggeligt undgår knæhaselymfeknuderne fartøjer. Alternativt til midlertidig denervering med forventet komplet reinnervation i 2-4 uger, kan den tibiale nerve simpelthen knust med ultrafine pincet til 15 sek i stedet for transected. (Perifere nerver regrow efter skade og vil reinnervere målmusklen.)
- Hvis en fuldstændig denervering er påkrævet, sutur enden af transected tibial nerve til den forreste overflade af biceps femoris-musklen med 10-0 nylon og re-omtrentlige biceps femoris med 5-0 Vicryl at forhindre afvigende re-innervation af gastrocnemius og soleus muskler.
- Luk huden med en kørende 5-0 Vicryl sutur.
3.. Postoperative pleje
- Sluk inhalationsanæstesimiddel men opretholde strømmen af ilt. Indgiv buprinorphine (eller stedfortræder) smertestillende subkutant.
- Overfør musen til en ren bur med ingensengetøj, mens vågne fra anæstesi. Hold på en opvarmning tæppe i buret og under direkte observation, indtil ambulating.
- Transfer og hus i blød bund bur (ikke tråd) med rigelig bløde strøelse.
- Inspicere den udløsende led dagligt for betingelse af operationssåret og foden for udvikling af liggesår hæl sår eller tegn på tygning. Mindre problemer kan håndteres med aktuelle antibiotika eller antiseptiske såsom proviodine. Endpoint indikatorer kræver dyr eutanasi vægttab, viser tegn på dårlig egenomsorg (pjusket pels) og krum stilling. Desuden bør dyr med større sår afbrydelse eller sår, der ikke heler i 1-2 uger med topiske antibiotika eller synes at have smerter ofres.
4.. Denerverede gastrocnemius og soleusmusklen Harvest
- På det postoperative tid ønskede punkt, vejer musen og ofre med CO 2 overdosis.
- Barbere den mediale aspekt af bådeoperative og kontralaterale kontrol ben og ren med alkohol. Placer musen under en driver eller dissektionsmikroskop eller alternativt bruge kirurgiske visning loupes for forstørrelse.
- På den operative lem, incise mediale kalveskind med en skalpel fra anklen til knæet og omkredsen omkring anklen. Træk forsigtigt huden med en pincet off muskler og proksimalt mod låret. Dette udsætter alle muskler i benet. Identificer musculus gastrocnemius, som er lægmusklen der løber fra knæet til anklen på den posteriore side af benet og ligger umiddelbart under huden. Identificere den distale insertion af biceps femoris-musklen, proximalt til musculus gastrocnemius på den mediale aspekt af knæet. Ved sin distale indsættelse biceps femoris vises tynd og tynd og overlejrer den mest proximale del af gastrocnemius. Med en saks og stump ende dissektion, forsigtigt adskille distale insertion af biceps femoris fra gassentrocnemius muskel.
- Ved sin distale indsættelse i calcaneous tilspidser musculus gastrocnemius i akillessenen. Identificer akillessene, som vises hvid og senet. Hold akillessenen med en pincet, pas på ikke at holde eller knuse gastrocnemius muskler og opdele akillessenen fra calcaneus indsættelse med en saks.
- Stadig holder senen, forsigtigt løfte gastrocnemius musklen (blegrød) off dybe soleus (dybere rød), fra den distale indsættelse mod sin oprindelse ved knæet (soleus kan høstes separat).
- Dissekerer gastrocnemius off benet ved at dividere oprindelse gastrocnemius fra de mediale og laterale femur chondyles med en saks. Meget blid trækkraft på musklen letter denne proces. Vær omhyggelig med ikke at knuse musklen.
- De soleus vil nu være tydeligt synlige, umiddelbart under det sted, hvor gastrocnemius. Løft soleus fra dets indsættelse på akillessenen til sin ellerigin på den bageste kalv. Hvis soleus utilsigtet hæves med gastrocnemius, forsigtigt adskille den fra den høstede prøve. Gastrocnemius (lys rød) og soleus (mørkerød), forbliver let identificerbare i det høstede prøven på grund af deres farve forskelle.
- Afveje musklerne separat på en præcision skala.
- Split musklerne lodret halvdelen til snap nedfrysning i flydende nitrogen (for efterfølgende proteiner og / eller RNA-ekstraktion), og halvdelen til histologi (dvs. morfometrisk vurdering immunhistologi) fastsættelse af enten 10% formalin, eller frosne fiksering i isopentan afkølet med flydende nitrogen som ønsket.
- Gentag fra trin 4.3 ovenfor om kontrol, un-opererede, side at høste kontrol gastrocnemius og soleus muskler.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Tibial nerve transection denervates gastrocnemius, soleus og plantaris muskler i læggen. Her vi vurdere udviklingen af atrofi i musculus gastrocnemius, som en repræsentativ muskel. Musculus gastrocnemius blev høstet fra 2-3 måneder gammel C57Black 6 mus (Jackson Laboratories) denerverede for 1, 2 eller 4 uger. Muskel vægte gradvist falde (figur 1), som gør tværsnitsarealet af type II hurtige ryk muskelfibre (figur 2), over tid. Gastrocnemius er en blandet fibertype muskel (type I og type II), men denervering inducerer en fibertype skifte fra type I til type II fibre 11, og som et resultat et tilstrækkeligt antal af type I fibre kan ikke være til rådighed for måling og robust statistisk analyse.
50657fig1.jpg "/>
Figur 1. Denerverede musculus gastrocnemius demonstrerer progressiv atrofi. C57Black 6 mus undergik overskæring af højre tibial nerve. Musculus gastrocnemius blev høstet fra denerverede (til højre) og den kontralaterale kontrol (venstre) bagbensknogler ved 1, 2 eller 4 uger efter nerve transection. Gastrocnemius muskler blev vejet, og vægten af den denerverede musklen er udtrykt som et forhold af den kontralaterale kontrol innerverede muskel. Denervering inducerer en fremadskridende tab af muskelmasse.
Figur 2. Denerverede gastrocnemius musklen demonstrerer progressivt fald i myofiber tværsnitsareal (A) denerverede og kontrol gastrocnemius muskler var formalin fast skære på tværsnit ved muscle midtersektion og immunfarvet for anti-skeletmuskulatur myosin, hurtige ryk isoform (My-32, Sigma, 1:500 fortynding) efterfulgt af biotinyleret sekundært antistof og streptavidin-HRP/DAB som beskrevet 7.. Hematoxylin blev anvendt som en kontrastfarve. Hurtige ryk type II fibre pletten brun og langsomme ryk type I fibre pletten lys lilla. Den tværsnitsareal (CSA) af fibrene blev målt under anvendelse ImageJ software (Bethesda, NIH) som beskrevet 7,12. De hurtige ryk type II fibre demonstrere progressiv atrofi. For få type I fibre er til stede i denerverede gastrocnemius at tillade en statistisk gyldig evaluering af fiberstørrelse. (N = 6 til 9 mus / gruppe A mindst 200 myofibre blev målt per muskel ved en korrekturlæser blindet for operative fænotype Data er præsenteret som den gennemsnitlige + / -... SD Scale bar lig 100 um). Klik her for at se større figur .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Den tibiale nerve transection model af denervering-induceret skeletmuskel atrofi er en almindeligt anvendt og godt valideret model i rotter. Vi har tilpasset denne model til brug i mus, som giver investigator til at drage fordel af eksistensen af gensplejsede mus og studere processen muskelatrofi in vivo i fravær af proteiner er afgørende for reguleringen af muskelmasse 7,8. Gastrocnemius og soleus muskler, både denerveres i denne model, kan være let og hurtigt dissekeret med minimal håndtering, hvilket giver fremragende kvalitet mRNA og protein til efterfølgende molekylære analyser. Ligeledes på grund af størrelsen af musklerne, kan de deles, giver væv fra det samme dyr til samtidige histologiske og morfometriske analyser. Hvis bagben funktionel vurdering er påkrævet, kan gå spor analyse være serielt udført. Fødderne er dyppet i blæk og musen gik gennem et kabinet med papir påbund. Karakteristik af udskrifter kan opgøres pålideligt og scorede til at angive omfanget af den neuromuskulære handicap og gangart kompromis, da fodaftryk karakteristika afspejler de funktionelle muskelgrupper 13,14. Mens oprindeligt udviklet og valideret i rotte 13, kan gå spor analyse også udføres i mus 15.
Tibial nerve transection er generelt særdeles veltolereret af musene. Kun en enkelt dosis af smertestillende er nødvendig i den umiddelbare postoperative periode. Med brugen af passende steril teknik, er blødt væv infektion sjældne. Mens tibial nerve transection gør fremkalde sensorisk paræstesi på plantar aspekt af foden, i vores erfaring C57black6 og knockout eller transgene mus afledt på denne linje ikke har tendens til auto-lemlæster. Dog skal de mus inspiceres dagligt for tegn på auto-lemlæstelse, tryksår på hælen, samt point of care endepunkter. Mens vi har ubetydelig dødelighed with modellen, finder vi, at ca 2-5% af musene skal aflives på grund selv-medieret skade, eller tryksår udvikler på, det opererede bagben. Anvendelsen af blødt underlag postoperativt er afgørende for at sikre dyrets komfort og bidrager til at forebygge udviklingen af tryksår på den opererede side. Iskiasnerven ligering samt SNI model for ligering (hvor den tibiale og fælles peroneal grene af ischiadicus ligeres, men sural efterlades intakt) tjener som modeller for neuropatisk smerte 16,17. Således kunne allodyni og termisk hyperalgesi forekomme i foden i vores model så godt, men vi har ikke set åbenlys smerte adfærd i de mus med normale daglige aktivitet på blødt underlag.
Den tibiale nerve af én bagben er transected og da mus vægt bærer næsten ligeligt på begge bagben, kan muskulaturen fra den kontralaterale un-opererede lemmer anvendes som en intern kontrol i hvert dyr 7-10.Dette er ikke nødvendigvis tilfældet i sciatic overskæring model, hvor mere betydelige abnormiteter gangart kan fremkalde et hypertrofisk respons i den kontralaterale ben muskel. I tibial nerve transection model, vi typisk bruger gastrocnemius og soleus muskel fra un-opererede ekstremitet som vores kontrol muskel 7,8. Hvis investigator vælger at anvende separate dyr, hvorfra man kan høste kontrol muskel, så simuleret operation skal udføres. Skinkirurgi ville bestå af administrationen af anæstesi, opsplitning af huden for at blotlægge den tibiale nerve, men ingen overskæring. Hud ville simpelthen blive lukket efter nerve eksponering.
I nogle perifere nerve transection modeller, forurener vildfaren reinnervation fra den proximale stump til målmusklen den planlagte denervering. I denne model og dermed sikre den proximale ende af transected tibial nerve til den overfladiske overflade af biceps femoris-musklen, lukker muskel interface, hæmningts vildfarne reinnervation. Som sådan er det en kritisk og afgørende skridt i modellen. Vildfaren reinnervation er sjælden i denne model.
Tilsvarende omhyggelig håndtering af nerven under operationen er afgørende. De sural og peronealnerve grene skal forsigtigt adskilt fra den tibiale nerve før tibiale overskæring, og ikke knuste eller strakt i processen. Hårdhændet håndtering af disse nerver vil kompromittere deres funktion, delvist denervating anden bagben muskulatur. Hvis dette sker dyrets gangart bliver differentielt påvirket i forhold til de mus, der gennemgår eneste tibial nerve overskæring, og den variable muskel belastning kan forurene de eksperimentelle resultater. Tilsvarende skal der udvises forsigtighed, når dissekere denerverede muskulatur. Muskel bør håndteres af senen, og ikke fattet direkte for at undgå crush artefakt, der vil påvirke histologi muskelfiber morfometriske analyser og eventuelt genekspression.
Vi typically anvender denne model i mus 20-24 g (2-3 måneder), som dyret er modent og ischiadicus og tibial nerver er begge af tilstrækkelig størrelse til let håndteres. Operationen kan udføres på yngre, mindre dyr, hvis det ønskes, men den begrænsende faktor her vil være dygtighed af kirurgen. Dette kan være et problem, hvis investigator er interesseret i at studere satellit celle respons i denerverede muskel. Satellitten celle regenerativ potentiale bliver mindre i ældre, sammenlignet med yngre, dyr 18 og derfor yngre dyr kan være nødvendige i den eksperimentelle design, præsentere en teknisk udfordring for en mindre erfaren operatør.
Den tibiale nerve transection model kan tilpasses fra blot en model af denervering-induceret muskelatrofi, at en forsinket muskel reinnervation (> 4 uger), hvis det ønskes, og hvis erfarne kirurgiske operatører er tilgængelige 1,3. Efter en periode med denervation specificeret af investigator kan musen blive reoperated og peronealnerve mobiliseret for at reinnervere den denerverede muskulatur. Den distale stump af transected tibiale nerve er identificeret, trimmet og peronealnerve mobiliseres ved sin distale ende og microsurgically repareret til den tibiale nerve stumpen. Den peronealnerve vil vokse med en hastighed på ca 1 mm / dag i tibial nerve stump at reinnervere de gastrocnemius og soleus muskler. Den tibiale nerve transection model giver en fordel i forhold til iskiasnerven overskæring model at en nerve graft er ikke nødvendig i reinnervation procedure 2 på grund af tilgængeligheden af peronealnerve. Dog skal det bemærkes, at nerve reanastomoses kræver præcision af en kvalificeret og erfaren operatør.
Sammenfattende har vi her vise tibial nerve transection model i mus, som en let, robust, godt validerede og reproducerbar model af denervering-induceret skeletmuskulatur atrofi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Ingen interessekonflikter deklareres.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af tilskud fra CIHR Neuromuskulær Research Partnership (JNM - 90.959, til JAEB).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Reagents and Materials | |||
| 10-0 Nylon suture | Ethicon | 2850G | |
| 5-0 Vicryl suture | Ethicon | J553G | |
| Equipment | |||
| Spring microdissecting scissors | Fine Surgical Tools | 15021-15 | |
| Ultra fine forceps | Fine Surgical Tools | 11370-40 | |
| Non locking micro needle holder (driver) | Fine Surgical Tools | 12076-12 | |
| Spring retractor | Fine Surgical Tools | 17000-02 | |
References
- Fu, S. Y., Gordon, T. Contributing factors to poor functional recovery after delayed nerve repair: prolonged denervation. J. Neurosci. 15, 3886-3895 (1995).
- Kobayashi, J., Mackinnon, S. E., Watanabe, O., Ball, D. J., Gu, X. M., Hunter, D. A., Kuzon, W. M. The effect of duration of muscle denervation on functional recovery in the rat model. Muscle Nerve. 20, 858-866 (1997).
- Bain, J. R., Veltri, K. L., Chamberlain, D., Fahnestock, M. Improved functional recovery of denervated skeletal muscle after temporary sensory nerve innervation. Neuroscience. , 103-503 (2001).
- Batt, J., Bain, J., Goncalves, J., Michalski, B., Plant, P., Fahnestock, M., Woodgett, J. Differential gene expression profiling of short and long term denervated muscle. FASEB J. 20, 115-117 (2006).
- Sher, J., Cardasis, C. Skeletal muscle fiber types in the adult mouse. Acta Neurol. Scand. 54, 45-56 (1976).
- Agbulut, O., Noirez, P., Beaumont, F., Butler-Browne, G. Myosin heavy chain isoforms in postnatal muscle development of mice. Biol. Cell. 95, 399-406 (2003).
- Nagpal, P., Plant, P. J., Correa, J., Bain, A., Takeda, M., Kawabe, H., Rotin, D., Bain, J. R., Batt, J. A. The ubiquitin ligase nedd4-1 participates in denervation-induced skeletal muscle atrophy in mice. PLoS ONE. 7, e46427 (2012).
- Plant, P. J., Bain, J. R., Correa, J. E., Woo, M., Batt, J. Absence of caspase-3 protects against denervation-induced skeletal muscle atrophy. J. Appl. Physiol. 107, 224-234 (2009).
- Varejao, A. S., Meek, M. F., Ferreira, A. J., Patricio, J. A., Cabrita, A. M. Functional evaluation of peripheral nerve regeneration in the rat: walking track analysis. J. Neurosci. Methods. 108, 1-9 (2001).
- Willand, M. P., Holmes, M., Bain, J., Fahnestock, M., de Bruin, H. Electrical muscle stimulation after immediate nerve repair reduces muscle atrophy without affecting reinnervation. Muscle Nerve. 48, 219-225 (2013).
- Sterne, G. D., Coulton, G. R., Brown, R. A., Green, C. J., Terenghi, G. Neurotrophin-3-enhanced nerve regeneration selectively improves recovery of muscle fibers expressing myosin heavy chains 2b. J. Cell Biol. 139, 709-715 (1997).
- Plant, P. J., North, M. L., Ward, A., Ward, M., Khanna, N., Correa, J., Scott, J. A., Batt, J. Hypertrophic airway smooth muscle mass correlates with increased airway responsiveness in a murine model of asthma. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 46, 532-540 (2012).
- Bain, J. R., Mackinnon, S. E., Hunter, D. A. Functional evaluation of complete sciatic, peroneal, and posterior tibial nerve lesions in the rat. Plast. Reconstr. Surg. 83, 129-138 (1989).
- Hare, G. M., Evans, P. J., Mackinnon, S. E., Best, T. J., Midha, R., Szalai, J. P., Hunter, D. A. Walking track analysis: utilization of individual footprint parameters. Ann. Plast. Surg. 30, 147-153 (1993).
- McLean, J., Batt, J., Doering, L. C., Rotin, D., Bain, J. R. Enhanced rate of nerve regeneration and directional errors after sciatic nerve injury in receptor protein tyrosine phosphatase sigma knock-out mice. J. Neurosci. 22, 5481-5491 (2002).
- Richner, M., Bjerrum, O. J., Nykjaer, A., Vaegter, C. B. The spared nerve injury (SNI) model of induced mechanical allodynia in mice. J. Vis. Exp. (54), e3092 (2011).
- Rogoz, K., Lagerstrom, M. C., Dufour, S., Kullander, K. VGLUT2-dependent glutamatergic transmission in primary afferents is required for intact nociception in both acute and persistent pain modalities. Pain. 153, 1525-1536 (2012).
- Thornell, L. E. Sarcopenic obesity: satellite cells in the aging muscle. Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab. Care. 14, 22-27 (2011).
