Summary
Biomarkører er direkte-målte biologiske indikatorer på sykdom eller helse. I befolkningen og samfunnsfag, biomarkører må være lett å få tak i, transport, og analysere. Tørket Blood Spot (DBS) samling møter dette behovet, kan samles inn i feltet med høye svarprosenter og analysert for en rekke biomarkører.
Abstract
Biomarkører er direkte-målte biologiske indikatorer på sykdom, helse, eksponeringer, eller annen biologisk informasjon. I befolkningen og samfunnsfag, biomarkører må være lett å få tak i, transport, og analysere. Tørket blodflekker møte dette behovet, og kan hentes i feltet med høye svarprosenter. Disse elementene er spesielt viktig i langsgående studiedesign inkludert intervensjoner hvor frafall er kritisk for å unngå, og høye svarprosenter forbedre tolkningen av resultatene. Tørket Blood Spot prøvetakingen er enkel, rask, relativt smertefritt, mindre invasiv da venepunksjon, og krever minimalt med feltlagringsbehov (dvs. prøver trenger ikke å være umiddelbart frosset og kan lagres for en lengre periode i et stabilt fryser miljø før prøve). Prøvene kan analyseres på en rekke forskjellige analytter, inkludert kolesterol, C-reaktivt protein, glykosylert hemoglobin, mange cytokiner, og other analytter, så vel som å gi genetisk materiale. DBS samlingen er avbildet som sysselsatt i flere nyere studier.
Introduction
Biomarkører kan gi verdifull informasjon om biologiske prosesser som spenner fra normal til sykdomsfremkallende som kan bidra til klinisk identifiserbar sykdom en. I forskning innstillinger, er tørket blod flekker (DBS) blir stadig foretrukket til venepunksjon som metode for innsamling av biomarkører i fullblod. DBS samlingen er enkel, relativt smertefritt, mindre invasiv og venepunktering, og krever minimale krav til lagring (dvs. prøvene trenger ikke å være umiddelbart frosset og kan lagres i lang tid i et stabilt frysemiljø før analyse). DBS prøver kan testes for en rekke forskjellige analytter, inkludert kolesterol, C-reaktivt protein, glykosylert hemoglobin, Epstein-Barr-virus-antistoffer, og flere cytokiner.
Venepunksjon har lenge vært gullstandarden for innsamling av biomarkører i blod. Men innhenting, lagring og forsendelse av blodprøver krever adherence til en rekke protokoller og helse koder, som kanskje ikke er mulig i visse forskningsprotokoller. Phlebotomists må være offisielt sertifisert for venepunksjon, mens DBS prøvetakingsprosedyrer er enklere og krever ikke offisiell sertifisering. Venøs blodprøvetaking krever også mer utstyr enn gjør DBS samling (dvs. nåler, rør, kors), og mer etter inndrivingen. Venepunktering prøver må behandles (dvs. serum eller plasma utvunnet fra blodprøven via sentrifugering eller stående ved romtemperatur i en gitt tidsperiode), og frosset mellom -20 ° C og -70 ° C umiddelbart for å hindre nedbrytning av analytter , mens DBS prøver må ganske enkelt tillates å lufttørke og deretter kan lagres ved romtemperatur i en uke eller mer, avhengig av analytten, før overføring til en fryseboks 2. DBS prøvene er mindre kostbart å samle inn enn venepunksjon og prøver for grunner som er beskrevet ovenfor. DBS prøver ogsåtar mindre plass, redusere frakt og lagerkostnader før analysen.
Bruken av spytt som biomarkør er blitt nøkkel i biobehavioral studier. Spytt tilbyr en enkel, ikke-invasiv metode for å samle biomarkører og har blitt standard for feltarbeid rettet mot å måle kortisol eller kotinin 3-5. Urin er et annet eksemplar som kan samles invasivt og kan brukes i populasjonsnivået studier for analyser av melatonin eller for toksikologi. Mens både urin og spytt tilby rett frem samling prosedyrer som er i stand til å være ferdig innen deltakerne selv, kan ikke alle analyttene måles i disse mediene.
DBS tilby et enkelt, kostnadseffektivt alternativ til venepunksjon og blir en stadig implementert forskningsverktøy i feltet og befolkningsstudier seks.
Protocol
Følgende protokoll er godkjent av gjeldende institusjonell gjennomgang bord og ble gjennomført i samsvar med Helsinkideklarasjonen.
En. Før du begynner: Standard Precuations
Sørg for all prøvetaking ansatte har bestått NIOSH nødvendig Blood Borne Patogen (BBP) Training.
- Tekniske kontroller
- Bruk Food and Drug Administration godkjent Sharps beholdere til avhending å deponere brukte sterile, engangs lansetter. Bruk godt merket bioavfall fat for noe annet materiale som kommer i kontakt med muligens infisert materiale.
- Ikke fyll beholderen for spisse gjenstander. Bare fylle en beholder for skarpe gjenstander til 3/4 kapasitet før du setter beholderen for å hindre skade. Det er en indikator for compartment fylde på hver beholder for skarpe gjenstander.
- Bare kast spissmel i beholderen for spisse gjenstander. Ikke bruk skarpe gjenstander container for noen otsitt avfall.
- Kast eventuelle nonsharp materiale som kommer i kontakt med potensielle BBP i en riktig merket bioavfall fat.
- Personlig verneutstyr (PVU)
- Fest alltid bruke personlig verneutstyr for å beskytte mot smitte fra BBP. PPE brukt under innsamling av DBS inkluderer hansker, lab strøk, øyebeskyttelse, lange bukser og lukket toed sko.
- Bruk hansker for å håndtere blod eller noe som har kontaktet blod eller andre potensielt smittefarlig materiale (OPIMs). Hansker bør ikke være for stramt eller for løst, da dette kan vanskeliggjøre prosessen med å "melking" (for å bli beskrevet senere). Unngå bruk av ringer mens samle blodflekker som de kunne punktere hanske.
- Bruk laboratoriefrakk for å beskytte hud og klær fra blod og OPIMs. En lab frakk som har kommet i kontakt med en BBP må renses i en 10% blekemiddel / vann løsning før gjenbruk. Uavhengig av eksponering, bør labfrakk renses regelmessig for å holde det clene.
- Bære lukket toed sko for å beskytte føttene mot mulig kontakt med blod og OPIMs.
- Dersom det er ønskelig, bruk vernebriller for å beskytte mot mulig kontakt med blod og OPIMs grunn splatter.
- For å opprettholde renslighet av et arbeidsområde, fjerne all personlig verneutstyr før du forlater arbeidsområdet for å unngå forurensende elementer utenfor laboratoriet området.
- Arbeidspraksis Controls
- Vask hendene med såpe og varmt vann i 20 sekunder før og etter fysisk kontakt med hver deltaker. Bruk et håndkle til å slå av rennende vann. Hvis en vask ikke er tilgjengelig, kan du bruke et rensemiddel på minst 60% alkohol.
- Uavhengig av muligheten til å vaske hender, bruke alkohol rensemiddel før påføring og etter fjerning av hansker. Bruk nok rensemiddel til å dekke alle flater på begge hendene og gni hendene sammen til den er tørr. Ikke skyll eller tørk hendene tørre med et håndkle, da dette vil redusere effekten av rensemiddel.
- Ikke spis ellerdrikke eller bruke sminke eller kontaktlinser i blodprøvetaking områder. Personlig eksponering for BBPs kunne skje gjennom disse stiene som er direkteruter til slimhinner.
- Ikke håndter biologisk materiale uten hansker og ikke håndterer ufarlig materiale med hansker som tidligere har rørt biologisk materiale.
- Riktig Housekeeping
Good Housekeeping vil fortsette å bidra til å beskytte mot eksponering for et BBP og vil forhindre kryss-forurensning av miljøet.- Bruk virucide mikrobielle desinfiserende våtservietter til skikkelig rene områder forurenset under DBS samling.
- Hold biologisk farlig eller forurenset avfall atskilt fra vanlig søppel; forurensede materialer er de som har synlig blod eller OPIM på dem.
- Eksponering Response
Hvis utsatt for en BBP, svare på følgende måte.- Vask det eksponerte området umiddelbart og grundig med såpe og vann.Hurtig bevegelse kan redusere risikoen for infeksjon.
- Identifisere kilden og rute av eksponeringen for å være i stand til å forklare situasjonen til feltet leder og / eller reagere lege.
- Varsle bakvakt veileder umiddelbart etter eksponering. Det understrekes for å få støtte fra et felt veileder for å forstå graden av risiko for infeksjon slik at det kan vurderes om øyeblikkelig legehjelp er nødvendig. Retningslinjer lagt ut i konkrete eksponeringskontroll Plans (ECPs) må gis til alle dem som er i fare for å bli utsatt for BBP.
2. Oppsett av Collection Room and Materials
- Velg en eksempelsamling plassering som ikke er ment for å spise, for eksempel en breakroom, og som er fri for alt som ikke er relatert prosjekt utstyr. Man ønsker ikke å være i et område som er overfylt, er det viktig å ha enkel bevegelse. Følgende beskriver hvordan du setter opp den tørket blod-spot samling (lab) område.
- Sett opp biologisk avfall fat og linje interiøret med en biologisk avfall bag. Avfallet fat bør være tilgjengelig mens du sitter.
- Rengjør samling området grundig med desinfisering våtservietter eller lignende produkt. Kvitt deg med alt materiell som brukes til å rense lab-området i biologisk avfall fat. Bruk hansker under dette trinnet for å beskytte huden mot eksponering for skadelige kjemikalier.
- Skift hansker og sette opp resten av innsamlings forsyninger.
- Plassér hansker og alkohol rensemiddel på samling bordet.
- Plasser beholder for skarpe gjenstander innen rekkevidde av samle stol. Den beholder for skarpe gjenstander skal håndteres med hansker hele tiden, og deretter avhendes på riktig måte når den er full.
- Plasser alle gjenværende materialer som kreves for DBS samling på et beskyttende underpad i samlingen området. Inkluder en filterpapir samling kort, noen lansetter, alkohol pads, gasbind pads, og plaster, men ikke for mange slik at området er rotete. Gjørikke satt opp mer enn hva som kan brukes for hver deltaker.
Tre. DBS Sample Cellection
Bruk alltid verneutstyr (frakk, hansker, lange bukser, lukket-toed sko, og hvis det er ønskelig, vernebriller) under innsamling og plassere en beskyttende underpad (chux) på fanget for å beskytte ens gaten klær.
- Forbereder deltakeren:
- Etter innhenting av samtykke, spør deltakeren om han / hun foretrekker å bruke venstre eller høyre hånd for innsamling og velg en finger for samlingen. Unngå tungt sløvt eller skadet (lacerated) fingre og eventuelle ring fingre. Vanligvis lillefingeren og tommelen ikke er valgt for å minimalisere deltaker smerte og lette oppsamling hhv. Sidene av fingertuppene anvendes som oppsamlingsside for konsistens og enkelhet i samlingen.
- Har deltakeren gni hendene sammen for å varme hendene og stimulere blodsirkulasjonen. En hånd warmer kan anvendes, eller deltaker kan løpe hendene under varmt vann hvis en vask er tilgjengelig. En annen teknikk for å stimulere blodstrømmen ville være å ha deltakeren vekselvis knipe og slappe av målet hånd, deretter hvile fullt før fingeren.
- Rengjør den valgte fingeren med en alkohol pad og la det tørke helt. Gjenta med en andre alkohol pad for å fullstendig fjerne eventuelle forurensninger eller hånd lotion. Fingeren må være helt tørt før du fortsetter med fingeren stick eller alkohol vil forurense blodprøven. Som med alle innsamlingsmateriell, straks disponere over alkohol våtservietter i biologisk avfall container.
- Forbereder stikkestedet på deltakerens finger:
- Fest deltaker i armen for å hindre bevegelse under innsamling og å slappe av i armen og hånden muskler. Hvil deltaker albuebruk på kanten av bordet eller på fanget. Hold deltakerens hånd positioned komfortabelt under hjertenivå og sine muskler avslappet for å lette blodstrømmen.
- Grip valgt finger mellom tommel og pekefinger og forsiktig melke fingeren ved sakte og fast klemme fingeren mens du flytter grep fra håndflaten for fingertuppen til å trekke blod mot fingertuppen.
- Trykk på mikro-lansetten fast mot deltakerens finger vinkelrett på fingeravtrykk og utslipp The Lancet. Ikke punkteres midten av fingeren eller nær negl, men i stedet tar sikte på mellom disse to punkter, på den ulnar side av fingeren. Umiddelbart kast den brukte lansetten i beholderen for spisse gjenstander.
- Innsamling av blodflekker:
- Tørk den første dråpe blod bort med en steril kompress for å fjerne vev fluid fra prøven og umiddelbart kastes gasen inn i biologisk avfall fat.
- Samtidig opprettholde deltakerens hånd under sitt hjerte med en vinkel nedover, gently melke hånden start ved håndleddet og arbeide ned til bunnen av fingeren for å produsere blod. Ikke bare presse fingeren, da dette vil redusere blodstrømmen. Melke fingeren til en stor dråpe henger fra fingertuppen.
- Samle flekker ved hjelp av samlingen papir.
- Stilling forsiktig samling papir under fingeren og la dråpe til å falle av sin egen vekt. Dette gjør at innsamling av blodflekker av maksimalt volum. Hvis blod bassengene på filterpapiret, dvs. "perler", banke forsiktig på kortet for å oppmuntre blod å mette inn i papiret.
- Hvis blod er for viskøs eller dråper er for små til å falle av sin egen vekt, langsomt bringe oppsamlings papiret i kontakt med bloddråpen å absorbere blodet fra fingeren via kapillar-virkning uten å berøre fingrene. Hvis fingeren berører samlingen papir, flytte til et annet sted på papiret som det samling området har blitt kompromittert. Deltakeren finger should aldri røre filterpapiret.
- Ikke plasser blod dråper på toppen av hverandre, selv om en blod flekk ikke fyller samlingen sirkel.
- Ikke la blodet kjøre ned fingeren eller på neglen som dette gjør samling av store flekker vanskeligere.
- Hvis deltakerens blodpropp helst under innsamlingsprosessen, be om tillatelse til å stikke en annen finger, så rent og bandasjere den første stikkstedet og starte på nytt hvis forespørselen er akseptert.
- For å forebygge blodpropp, fortsetter melking deltakerens finger for å holde blodet flyter eller prøv fast tørke punktering med steril kompress å forstyrre dannelse av blodpropper.
Merk: Påfølgende finger-pinner kan være nødvendig for noen grunner: Et kaldt rom kan føre til raskere clotting, også viskositet av deltakernes blod kan ikke være ideelt, eller fattige melke teknikker kan også påvirke blodstrømmen. Håndvarmerne, eller rennende, varmt vann, brukes før punktture kan reversere effekten av et kaldt rom.
- For å forebygge blodpropp, fortsetter melking deltakerens finger for å holde blodet flyter eller prøv fast tørke punktering med steril kompress å forstyrre dannelse av blodpropper.
- Når DBS har blitt samlet inn, eller hvis deltakeren ikke ønsker følgende finger-pinner, rense stikkstedet på noe overflødig blod.
- Bandasje stikkstedet for å forhindre potensiell forurensning når deltakeren forlater prøvetakingsområdet.
- FI Kvalitetskontroll (QC) vurdering:
Etter endt prøvetaking, vurdere prøvene for kvalitet. Sikre flekker er 1) i det minste 0.375 i i diameter, målt fra baksiden av oppsamlingsområdet, 2) tilstrekkelig fuktet gjennom oppsamlings papir, slik som å være av samme størrelse på begge sider av filterpapiret, flekker som ikke oppfyller dette kriterium angir innsamling via kontakt med fingeren til innsamling av papir og sannsynlig smøre, 3) ikke er i kontakt med hverandre (overlappende områder av flekker er ikke målbar). - Fullfører prøvetakingen
- Etter guiRetningslinjene som er beskrevet i trinn 1.1, kast eventuelle gjenværende forurensede samling materialer, inkludert noen elementer som kan ha vært i kontakt med potensielt smittefarlig materiale.
- Stå samlingen papir på en beskyttende underpad til tørk. Space innsamlingskort for å tillate god luftstrøm mellom dem. Den minste mengde tid til å lufttørke er 15 minutter, fortrinnsvis minst 30 min. For å tillate maksimal luftstrøm, er det viktig å brette tilbake av samlingen kortet på en slik måte at det kan stå fritt og gir luftstrømmen bak prøver på oppsamlings papir.
- Med alle trinn ferdig, fjernes PPE.
- Respons på et emne følelse svak eller ikke godt
Selv usannsynlig, kan en deltaker blir svimmel, ør, eller besvime under eller etter finger pinne. Vær på vakt for symptomer som blekhet, svette i ansiktet og pannen, klager over uskarpe syn, hengende eller flagrende øyelokk, eller klager over kvalme. Utbruddet av these symptomer er ofte plutselig; sample samlere må være forberedt på å reagere raskt hvis noen av symptomene er synlige. Hvis noen av disse symptomer er til stede på ethvert tidspunkt i løpet av fremgangsmåten, å reagere i henhold til følgende fremgangsmåter.- Hvis en deltaker er følelsen svak, ør, svimmel, eller viser noen tegn til besvimelse, gjøre følgende:
- Stopp prosedyren.
- Pass på at deltakeren ikke faller eller blir skadet.
- Rolig bero deltakeren, og hvis nødvendig, spør deltakeren å bøye i midjen og sette hans / hennes hode mellom hans / hennes ben. Hvis mobilitet er begrenset, og deltakeren kan flyttes, kan en tilstøtende polstret posisjon brukt til hvile.
- Har deltakeren hvile i 10 min.
- Gjenoppta prosedyren hvis samtykker deltakeren å fortsette.
- Hvis en deltaker besvimer, gjøre følgende:
- Stopp prosedyren.
- Pass på atdeltakeren ikke faller eller blir skadet.
- Har deltakeren ligge på ryggen hans / hennes så raskt som mulig med føttene hevet. Deltakeren vil få beskjed om å legge seg ned direkte fra sittende stilling uten å stå opp.
- Be deltakeren å løsne noen stramme klær.
- Har deltakeren hvile i 10 min.
- Blod flekk samling bør ikke fortsette.
- Hvis deltakeren ikke svarer etter 1 min, ring 911.
- Hvis en deltaker er følelsen svak, ør, svimmel, eller viser noen tegn til besvimelse, gjøre følgende:
- Bryte ned laboratoriet området:
Når innsamling av blodflekker er fullført, må oppsamlingsflaten brytes ned og området dekontaminert å være sikker på at passer bys vil ikke bli smittet av BBP. Blodet samling område, må de utstyrscontainere, innsamlingsmateriell og avfallsbeholdere være ren av BBP. Som alltid, slitasje PPE ved håndtering av potensielt smittefarlig materiale.- Fjern fra oppsamlingsområdet, ogpakke alle forurensede materialer.
- Kast eventuelle rester av forurenset avfall inn i bioavfall fat.
- Lukk beholderen for spisse gjenstander og lagre det i et område som gir beskyttelse mot forurensning. Hvis beholderen for spisse gjenstander er 3/4 full, riktig kast den og erstatte med en ny beholder for skarpe gjenstander.
- Tørk hele prøvetakingsområdet med virusdrepende mikrobiell desinfeksjonsservietter.
- Når alt biologisk materiale er avhendet, kan biohazard bag autoklaveres. Når du tar ut posen fra avfalls fat, være forsiktige for å bare berøre utsiden av posen og å forsegle posen tett. Det er også god praksis å bruke virucidal mikrobiell kluter å rengjøre utsiden av alt utstyr for å hindre kryssforurensning.
4. Trening for å samle DBS
Kontroller eventuelt tørket blod flekk solfangeren er sertifisert av en kvalifisert person før du utfører prosedure på pasienter eller forsøkspersoner. Sørg for samlere vise respekt for deltakerne, selvtillit og ferdigheter i bruk av personlig verneutstyr og for blodprøvetaking forsyninger, i samlingen av flekker av tilstrekkelig volum, og i å fullføre prosedyren på en riktig og effektiv måte, gjerne på under 10 min.
5. Sample Emballasje og oppbevaring
- Sikre DBS prøver har tørket i minst 15 minutter før de blir sikret for lagring, kan en mettet kortet tar 30 minutter eller lengre for å tilstrekkelig tørr. Lukk samling kortdekselet, slik utvalget er helt tørt for å unngå flekker og forurenser prøven.
- Ta en biologisk prøvepose og plassere en tørkepose i prøvepose. Plasser DBS prøven inn i biologisk prøveposen. Bruk alltid hansker når du håndterer DBS prøver. La ikke blodprøver for å berøre utsiden av prøveposen.
- Plasser hver prøve i sin egen biologisk prøve bag viddha pakke med tørkemiddel. Flat ut posen for å fjerne overflødig luft og deretter forsegle posen tett. Plasser poseprøven i en lagrings kjøler for transport og midlertidig lagring. Unngå høye temperaturer.
- Fryse-eller assay DBS prøvene i løpet av to uker etter innsamling, som DBS-prøver kan vanligvis lagret ved romtemperatur i to uker uten vesentlig degradering, avhengig av analytt 7,2.
6. Sample Transport og forsendelse
- Med mindre kjent for å inneholde smittestoffer, skips tørket blod stikkprøver som fritatt menneskelige eksemplarer i henhold til US Department of Transportation forskrifter og i samsvar med del 2, kapittel 6, § 6.3.2.3.6 av International Civil Aviation Organization (ICAO) Tekniske instruksjoner 8 .
- Hvis frosset, skips prøver over natten på tørris med de nødvendige ekstra forholdsregler for farlige stoffer, eller med gelpaks frosset til -80 ° C. Skip på mandag-onsdagå unngå tine i transitt på grunn av forsinkelser eller helg / ferie, med bekreftelse fra den andre enden at de forventer og klar til å motta og fryse prøvene.
7. Quality Control Assessment
- Etter oppsamling og før analysen (fortrinnsvis før frysing for å minimere antallet av fryse-tine-sykluser) vurdere prøver for kvalitet.
- Inkluder følgende kriterier i vurderingen av prøvekvalitet, riktig emballasje, fargekodede tørkemiddel gjenværende intakte (tørr), metning av flekker, størrelsen på flekker, riktig innsamlingsmetoder, inkludert flekker ikke overlappende eller utflytende på kortet som viser kontakt med faget finger.
8. Fryser Storage
Selv degraderings ganger variere fra analytt, fryse DBS prøver innen to uker samling for best resultat. Fryse prøver med tørkemiddel i en laboratorie-grade fryser. Som med alle biologiske prøven, minimere fryse-tine cycles, selv om enkelte analyser i DBS prøvene har ikke vist tegn til nedbrytning i opptil seks fryse-tine sykluser 9-11.
Representative Results
Figur 1 Tørket. Blod flekk prøven. En samling kortet vises med fire, gyldig innsamlede flekker i prosessen med tørking. Klikk her for å se større bilde.
Figur 2. Gode og dårlige tørket blod stikkprøver. Resultater av vellykket (til høyre) og mislykket (venstre) DBS samling vises. Klikk her for å se større imalder.
Figur 3. Lederes holdninger og praksis knyttet til ansattes kardiometabolske sykdomsrisiko seks. Dette tallet har blitt forandret fra Berkman, LF, Buxton, OM, Ertel, K. & Okechukwu, C. Managers praksis knyttet til arbeid-familie-balansen forutsi ansatt hjerte risiko og søvnlengde i utvidet omsorg innstillinger. Journal of Occupational Health Psychology 115, 316-329 (2010). Medarbeidere ble utsatt for ledere med midten eller lave arbeidsfamilie score til åpenhet og kreativitet for å bidra med sine ansattes arbeid og familie trenger, har statistisk signifikant økt odds for å ha to eller flere kardiovaskulær risiko (røyker, overvekt, høyt blodtrykk eller hypertension, høyt kolesterol, og høyt glykosylert hemoglobin (Hb A1C) eller diabetes diagnose). Øvre og midtre paneler skildre middelverdier ± standardavvik for totalkolesterol vurderes av tørket blod flekk og Hb A1C vurdert av poenget med omsorg enhet (som også kan måles pålitelig av tørkede blodflekker). Nedre panel viser kardiovaskulær sykdomsrisiko av manager poengsum. Analyse begrenset til sykepleiere og andre ansatte som gir direkte pleie tyder på at eksponering for ledere med lav kreativitet og åpenhet knyttet til arbeids familiens problemer kan være særlig viktig for disse personene (OR for lav WF poengsum = 6,4, p = 0,01). Alle modellene kontrollerer for alder, kjønn, lønn, utdanning, rase / etnisitet, og arbeidssted. Klikk her for å se større bilde.
Discussion
Biomarkører er svært nyttige verktøy på tvers av flere fagområder, blant annet medisin, cellebiologi, genetikk, psykologi, sosiologi, demografi, og sosial epidemiologi. Innenfor hver disiplin, ble tidlig fase validitet og reliabilitet biomarkør forskning brukes til å avdekke både skjulte sykdomsrisiko og gi langsgående prediksjon av helseutfall. I disse tilfeller, biomarkører som er nøyaktige, robuste (dvs. at de kan overleve i lag mellom prøvetaking og gjennomføring av lab-analysen for å trekke ut biomarkør), og allsidig (dvs. nyttig i en rekke modeller) er påkrevd.
Mens DBS kolleksjonen er en relativt enkel prosedyre, kan flere teknikker bidra til å maksimere volumet av den innsamlede flekker. Før innsamlingen starter, noe som sikrer en deltakers hånd er varm, og derfor at blodårene blir utvidet, vil bidra til blodstrømmen når fingeren er punktert. Ved hjelp av håndvarmere eller å ha endeltaker kjøre hendene under varmt vann kan hjelpe til med denne prosessen. Melking fingeren før samlingen vil trekke blod til fingerspissen og varme hånden for å hjelpe blodstrømmen. Melking er en prosess som øker med praksis. Samlere bør bruke uansett teknikk de finner mest komfortabelt og effektivt, men den mest vanlige tilnærmingen innebærer melking deltakerens hånd med samle motsatt hånd. Denne metoden vil tillate samle tommelen til å arbeide dypt inn deltakerens flaten mens den andre hånden kan stabilisere deltakerens leddet. Som et eksempel, hvis man skulle samle inn blod fra en finger på deltakerens venstre hånd, ville samleren stabil deltakerens håndledd med sin venstre hånd og melk med sin høyre hånd. Vanlige feil som blir gjort mens melke ikke inkluderer bruk av et fast grep, dra huden over hånden heller jobbe inn i musklene til å trekke blod mot fingertuppen. Det er også viktig å unngå pinching finger med melking for hånd eller tett gripende deltakerens leddet med nonmilking hånd, som begge hemmer blodstrømmen.
Når punktering av finger, gjør det punktering så dypt som mulig ved å trykke hardt lansetten inn i fingeren før utslipp. En grunne punktering resulterer i mindre blodgjennomstrømning og raskere clotting. Etter punktering av fingeren, jobber raskt er nøkkelen. Tynne blodet fører til enklere innsamling og større stedene. Etter punktering, blir blodet mer og mer tyktflytende til blodpropp. Jo mindre tid det tar å samle blodflekker på kortet jo større volum deres.
Ideelt deltakerens blod vil være tynn nok som faller vil falle av sin egen vekt, men dette vil ikke være tilfelle for alle deltakerne, som noen folks blod er tykkere eller propper raskere enn andre. Hvis blod er for tykk til å falle ned fra fingeren, må filterkort bringes til blodet for samlingen. Whno bringe kortet til blod er det viktig å holde kortet i berøring med rulle mens den henger ned fra fingeren så lenge det er mulig, i stedet for bare dabbing blodet til kortet. Dette vil bidra til å trekke blod fra fingeren for å maksimalisere størrelsen av flekken. Denne teknikken krever jevn hender for å opprettholde kontakt mellom blodet og kortet. Bruk begge hender, til en jevn deltakerne hånd og en til å holde kortet, og holder begge hendene i kontakt med hverandre bidrar til å stabilisere kortet og blod sammen.
Avanserte forskningsområder, som for eksempel kardiometabolske risikovurdering, lenge har stolt på biomarkører som C-reaktivt protein (CRP), insulin, og glykosylert hemoglobin (HbA1c) for tidlig risiko deteksjon og forebyggende arbeid, samt biomarkører for "harde endepunkter" for hjerte-og karsykdommer (CVD) risiko og CVD-assosiert dødelighet 12. Klinisk epidemiologi ofte vurderer biomarkører for å prospectively forutsi kardio utfall risiko som hjertesykdom og type II diabetes. Kanskje den mest brukte av alle biomarkører er Framingham risk score, en sammensatt som inkluderer blodtrykk, HDL-kolesterolet og total cholesterols nivåer som har vist nytte i å forutsi CVD 13. Imidlertid har Framingham poengsum opplevd noen tekniske kontroverser, og har begrensninger i studier fokusert på å knytte sosiale og miljømessige faktorer til helse, noe som tyder på behovet for mer nøyaktige og spesifikke biomarkører knyttet til kardiovaskulær forskning.
Det er en rekke kommersielt tilgjengelige kit ved hjelp av ELISA eller lignende teknikker som er tilgjengelige for analyse av DBS-prøver. Nødvendig for analyse av DBS prøvene er bruk av spesifikke og optimaliserte eluering trinn for å bringe den tørkede prøver i løsning 2. Dette er et voksende område av forskning som analyser for flere analyser er under utvikling en. Blant the-analyser allerede validerte og blir mye brukt er kolesterol 2, CRP 10,14,15, IgE16, EBV 9,15, leptin 17, og cyotkines 18. Det finnes en rekke laboratorier som spesialiserer seg i analysen av DBS, deriblant University of Washington Institutt for laboratoriemedisin (UW Lab Med) Biomarkør Laboratory (Regissør: Mark Wener).
Med tanke på at et panel av biomarkører, snarere enn en enslig biomarkør, er mest nyttig innen hjerte-og diabetes forskning, biomarkører må vurderes sammen med en rekke kontekstuelle faktorer for å maksimere sin nytte. Biomarkør forskning kan være dyrt men, både økonomisk og i tid for datainnsamling. Således, mens det er viktig å velge biomarkører som er nøyaktige, holdbar og allsidig, arbeid og familie biomarkør forskning må være forankret i det praktiske ved å velge biomarkører som er billig, det er hensiktsmessig, og kan hentes raskt with letthet. Videre praktiske betraktninger ofte resultere i en manglende evne til samtidig å maksimere pris, kvalitet og hastighet i løpet av en prosedyre. Heri ligger de neste trinnene i helse biomarkør forskning innen felt-og befolkningsstudier. Feltet av biomarkør forskning er for tiden i en periode med dramatisk vekst, men det meste av arbeidet er ennå ikke kommet.
Disclosures
Orfeu Buxton har mottatt en etterforsker-initiert stipend fra Sepracor Inc (nå Sunovion; ESRC-0977, ClinicalTrials.gov Identifier NCT00900159), fungerer som en konsulent og sakkyndig vitne for Dinsmore LLC, på Scientific Advisory Board of Matsutani Amerika, og fikk rådgivning avgifter fra Wake Forest University Medical Center.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble støttet av arbeid, familie og helsenett (www.WorkFamilyHealthNetwork.org), som er finansiert av en samarbeidsavtale gjennom National Institutes of Health og Centers for Disease Control and Prevention: Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health og Human Development (Grant # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), National Institute on Aging (Grant # U01AG027669), Office of Behavioral and Science Sciences Research, National Heart, Lung and Blood Institute (R01HL107240), og National Institute for Occupational Safety and Health (Grant # U01OH008788, U01HD059773). Tilskudd fra William T. Grant Foundation, Alfred P Sloan Foundation, og administrasjonen for barn og familier har gitt ekstra midler. Innholdet i denne publikasjonen er utelukkende ansvaret til forfatterne og representerer ikke nødvendigvis de offisielle visningene av disse instituttene og kontorer.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Asepti II Microbial Wipes | EcoLab | D12330345 | 3rd party shipping |
| Biohazard waste bags | VWR | 14220-092 | High Strength Autoclavable Polypropylene Biohazard Bags, 2 mil |
| Biohazard waste barrel | Tyco | 58578-092 | 8 g Slide lid |
| Sharps Container | BD Medical | BD305487 | 1.4 qt |
| Chux | VWR | 82020-845 | Absorbent bench underpads |
| Gloves | VWR | XSmall: 89038-267 | Powder-free, latex-free nitrile gloves |
| Small: 89038-268 | |||
| Medium: 89038-270 | |||
| Large: 89038-272 | |||
| XLarge: 89038-274 | |||
| Hand sanitizer (e.g. Purell) | Johnson Johnson | 89040-210 | 3rd party shipping |
| Alcohol wipes | Webcol and Curity | 82003-856 | Prep pads |
| Gauze | Versalon | 82004-826 | Nonwoven sponges |
| Band-Aids | Nutramax Stat Strips | 15431-475 | |
| Lancets | Owen Mumford | 82028-060 | 3.0 mm, 21 G |
| Protein paper collection cards | Whatman | Custom-build | 903 Protein Saver Collection paper |
| Desiccant | VWR | 61161-319 | Humidity sponges |
| Specimen bags | Lab Guard Reclosable Biohazard Bags, ITW Minigrip | 56766-370 | 6 in x 9 in |
| Specimen storage cooler | Igloo | Playmate Mini | 4 qt; direct from manufacturer |
References
- McDade, T. W., Williams, S., Snodgrass, J. J. What a drop can do: dried blood spots as a minimally invasive method for integrating biomarkers into population-based research. Demography. 44, 899-925 (2007).
- Kirschbaum, C., Read, G. F., Hellhammer, D. H. Assessment of hormone and drugs in saliva in biobehavioral research. , Hogrefe & Huber Publishers. (1992).
- Piazza, J. R., Almeida, D. M., Dmitrieva, N. O., Klein, L. C. Frontiers in the use of biomarkers of health in research on stress and aging. J. Gerontol. Series B Psychol. Sci. Soc. Sci. 65, 513-525 (2010).
- Smyth, J. M. Individual differences in the diurnal cycle of cortisol. Psychoneuroendocrinology. 22, 89-105 (1997).
- Berkman, L. F., Buxton, O. M., Ertel, K., Okechukwu, C. Manager's practices related to work-family balance predict employee cardiovascular risk and sleep duration in extended care settings. J. Occup. Health Psychol. 115, 316-329 (2010).
- Buxton, O. M., Malarick, K., Wang, W., Seeman, T. Changes in dried blood spot Hb A1c with varied postcollection conditions. Clin. Chem. 55, 1034-1036 (2009).
- International Civil Aviation Organization. Technical Instructions for the Safe Transport of Dangerous Goods by Air. , (2010).
- McDade, T. W. Epstein-Barr virus antibodies in whole blood spots: a minimally invasive method for assessing an aspect of cell-mediated immunity. Psychosom. Med. 62, 560-567 (2000).
- McDade, T. W., Burhop, J., Dohnal, J. High-sensitivity enzyme immunoassay for C-reactive protein in dried blood spots. Clin. Chem. 50, 652-654 (2004).
- McDade, T. W., Shell-Duncan, B. Whole blood collected on filter paper provides a minimally invasive method for assessing human transferrin receptor level. J. Nutr. 132, 3760-3763 (2002).
- Gerszten, R. E., Wang, T. J. The search for new cardiovascular biomarkers. Nature. 451, 949-952 (2008).
- D'Agostino, R. B., Grundy, S., Sullivan, L. M., Wilson, P. Validation of the Framingham coronary heart disease prediction scores: results of a multiple ethnic groups investigation. J. Am. Med. Assoc. 286, 180-187 (2001).
- McDade, T. W., Rutehrford, J., Adair, L., Kuzawa, C. W. Early origins of inflammation: microbial exposures in infancy predict lower levels of C-reactive protein in adulthood. Proc. R Soc. B.. , (2009).
- McDade, T. W. Measuring Stress in Humans. A Practical Guide for the Field. Ice, G. H., James, G. D. , Cambridge University Press. 181-207 (2007).
- Tanner, S., McDade, T. W. Enzyme immunoassay for total immunoglobulin E in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. 19, 440-442 (2007).
- Miller, A. A., Sharrock, K. C., McDade, T. W. Measurement of leptin in dried blood spot samples. Am. J. Hum. Biol. 18, 857-860 (2006).
- Miller, E. M., McDade, T. W. A highly sensitive immunoassay for interleukin-6 in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. , (2012).
