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Medicine

集団研究への参加を最大化するために健康バイオマーカーの血液スポットコレクション乾燥させ

Published: January 28, 2014 doi: 10.3791/50973

Summary

バイオマーカーは、病気や健康の直接測定された生体指標である。人口や社会科学では、バイオマーカーは、交通機関を得ることが容易であり、分析する必要があります。乾燥した血液スポット(DBS)コレクションは、この必要性を満たし、高い応答率を持つフィールドで収集し、バイオマーカーの様々な分析することができる。

Abstract

バイオマーカーは、病気、健康、暴露、または他の生物学的情報を直接測定した生物学的指標である。人口や社会科学では、バイオマーカーは、交通機関を得ることが容易であり、分析する必要があります。乾燥した血液スポットは、この必要性を満たし、高い応答率を持つフィールドに収集することができる。これらの要素は、縦断的研究において特に重要である自然減は避けることが重要であり、高い応答率が結果の解釈を改善する介入を含む設計しています。乾燥した血液スポットサンプルの収集は、静脈穿刺後、簡単、迅速、比較的痛みのない、低侵襲性であり、最小限のフィールドストレージ要件を必要とする( すなわち、試料をすぐに凍結されると、前に安定冷凍庫環境で長期間保存することができる必要はないアッセイ)。サンプルは、コレステロール、C-反応性タンパク質、グリコシル化ヘモグロビン、多数のサイトカイン、およびoを含む異なる様々な検体のために分析することができるTHERの検体だけでなく、遺伝物質を提供する。いくつかの最近の研究で使用されるようなDBS収集が示されている。

Introduction

バイオマーカーは、通常の臨床的に識別疾患1に寄与する可能性がある病原性に至るまでの生物学的プロセスに関する貴重な情報を提供することができます。研究の場では、乾燥血液スポット(DBS)は、全血でのバイオマーカーを収集するための方法として、静脈穿刺することがますます優先になってきている。 DBSコレクションは、次いで、静脈穿刺、単純な比較的痛みのない、低侵襲性であり、最小限のストレージ要件( すなわち、試料は直ちに凍結されるべき、アッセイの前に、安定した冷凍環境下で長期間保存することができる必要はない)を必要とする。 DBS試料は、コレステロール、C-反応性タンパク質、グリコシル化ヘモグロビン、エプスタイン - バーウイルス抗体、およびいくつかのサイトカインを含む様々な分析物の様々な試験することができる。

静脈穿刺は、長い血中のバイオマーカーの収集のためのゴールドスタンダードとなっている。しかし、取得、格納、および血液サンプルを出荷することを必要とadheren特定の研究プロトコルにおいて可能でないかもしれないプロトコルおよび健康コードの数にCE。 DBSのサンプリング手順が単純であり、公式の証明を必要としないながらPhlebotomistsは正式に、静脈穿刺のために認定される必要があります。静脈採血はまた、DBSコレクション( すなわち針、チューブ、止血帯)であり、より後の回収作業よりも多くの装置を必要とする。静脈穿刺サンプルは、分析物の分解を防止するために、直ちにC処理された( すなわち、血清または血漿は遠心分離によって血液試料から抽出された、または一定時間室温で放置)およびC -20℃の間で凍結させ、-70されなければならない、DBS試料は単に空気乾燥させなければならず、次いで冷凍庫2に転送する前に、一週間以上の分析物に依存して、室温で保存されてもよい。 DBS試料は、上述の理由から、静脈穿刺サンプルを収集するよりも安価である。 DBSサンプルもアッセイ前に輸送および保管コストを削減し、より少ないスペースを取る。

バイオマーカーとしての唾液の使用は、生物行動の研究で重要となっています。唾液は、バイオマーカーを収集するために、単純な、非侵襲的な方法を提供し、コルチゾールやコチニン3-5の測定を目的としたフィールドワークのための標準となっている。尿を非侵襲的に収集することができ、メラトニンのアッセイのために又は毒物学のために集団レベルの研究に用いることができる別の試料である。尿と唾液の両方がまっすぐ進む参加者自身で完成されることが可能である収集手順を提供していますが、すべてではない検体は、これらのメディアで測定することができる。

DBSは、静脈穿刺に、シンプルでコスト効果の高い、選択肢を提供し、フィールドにますます実装研究ツールになりつつあり、人口は6を研究。

Protocol

次のプロトコルは、該当施設内倫理委員会によって承認され、ヘルシンキ宣言に従って実施した。

1。標準Precuations:始める前に

すべてのサンプル収集スタッフを確保するため、NIOSHは、血液媒介病原体(BBP)トレーニングを必要と合格しています。

  1. 技術的管理
    1. 使用食品医薬品局(FDA)は、使用済みの滅菌、使い捨てランセットを処分する鋭利物廃棄コンテナを承認した。おそらく感染した材料と接触する他の材料のために適切にラベルされたバイオ廃棄物の樽を使用してください。
    2. シャープコンテナを入れすぎないでください。唯一のけがを防ぐために容器を交換する前に、3月4日の容量に鋭利物容器を満たす。すべての鋭利物コンテナのコンパートメント膨満感の指標があります。
    3. 唯一の鋭利物容器に鋭利物を処分。任意のOTのための鋭利物コンテナを使用しないでください彼女の無駄。
    4. 正しくラベルバイオ廃棄物のバレルの潜在的なBBPと接触する任意のnonsharp材料を処分。
  2. 個人用保護具(PPE)
    1. 常に適切BBPからの感染から保護するためにPPEを使用しています。 DBSの収集中に使用されるPPEは手袋、白衣、目の保護、長ズボンとクローズドつま先の靴があります。
    2. 血液や血液や他の感染性物質(OPIMs)に接触した、何を処理するために手袋を着用してください。これは、後述する「搾乳」のプロセスを妨げる可能性がある手袋は、あまりにもタイトでも緩すぎるべきではありません。血液スポットを収集しながら、彼らは、手袋に穴を開けなかったとして指輪を着用しないでください。
    3. 血液やOPIMsから皮膚や衣服を保護するために白衣を着用してください。 BBPと接触している白衣は、再使用の前に10%漂白剤/水の溶液で洗濯されるべきである。関係なく、暴露、白衣はCに保つために定期的に洗濯されるべきである傾く。
    4. 血とOPIMsで可能な接触に対して足を保護するために、閉じたつま先の靴を着用してください。
    5. 必要に応じて、血液や飛散によるOPIMsで可能な接触から保護するためにゴーグルを着用してください。
    6. ワークスペースの清浄度を維持するために、研究室の領域外の項目の汚染を避けるために、作業領域を離れる前に、すべてのPPEを削除します。
  3. ワーク実践コントロール
    1. 各参加者との物理的接触の前後20秒間石鹸とぬるま湯で手を洗ってください。流水をオフにするにはタオルを使用してください。シンクが使用できない場合は、少なくとも60%アルコールのハンドサニタイザーを使用。
    2. いずれにしても、手を洗って適用する前にアルコール手指消毒剤を使用し、手袋を除去した後の機会に。両手のすべての面をカバーし、乾燥するまで一緒に手をこすりするのに十分な消毒剤を使用しています。これは消毒剤の有効性を減少させるようにタオルで乾燥した手を洗うか拭かないでください。
    3. 食べたりしないでください採血の分野でメイクやコンタクトレンズを飲むか、適用されます。 BBPSへの個人的な暴露は、粘膜への直接ルートであるこれらの経路を介して発生する可能性があります。
    4. 手袋なしでバイオハザード物質を処理しないと、以前にバイオハザード物質を触れた手袋で非危険物を処理しない。
  4. 適切なハウスキーピング
    グッドハウスキーピングもBBPへの暴露から保護するために継続し、クロス汚染する環境を防ぐことができます。
    1. 適切にクリーンエリアは、DBS収集中に汚染されたために殺ウィルス微生物消毒ワイプを使用してください。
    2. 通常のゴミ箱とは別のバイオハザードや汚染された廃棄物を保管し、汚染された材料は、それらの上に目に見える血液やOPIMを有するものである。
  5. 露出応答
    BBPにさらされた場合は、次のように応答します。
    1. 石鹸と水ですぐに、徹底的に露出面積を洗ってください。迅速な行動は、感染のリスクを減らすことができます。
    2. 現場監督者、および/または応答医師に状況を説明することができるように曝露源や経路を特定します。
    3. 暴露が発生した直後にオンコールバイザーに通知します。それは、直ちに医師の診察が必要な場合、それは評価することができるので、感染のリスクのレベルを理解するために、フィールド上司からの支援を得るために強調されている。具体的な露出コントロールプラン(環境調和型製品)にレイアウトガイドラインはBBPにさらされる危険にあることをすべての人に提供しなければなりません。

2。コレクションルームと材料のセットアップ

  1. このような休憩室などの、食べるためのものではありませんサンプル収集場所を選択し、そしてそれは、すべての関係のないプロジェクト設備の自由である。一つは、混雑しているエリアになりたいのではなく、動きやすさを持っていることが重要です。以下は、乾燥血液スポットコレクション(Lを設定する方法について説明しますAB)の領域。
  2. バイオハザード廃棄物のバレルを設定し、バイオハザード廃棄バッグとインテリアを並べる。座っている間、廃棄物のバレルは、アクセス可能でなければなりません。
  3. 消毒綿や同様の製品で十分に収集領域を清掃してください。バイオハザード廃棄物のバレル内のラボエリアをきれいにするために使用されるすべての材料を処分。有害な化学物質への暴露から皮膚を保護するために、このステップの間に手袋を着用してください。
  4. 手袋を交換し、残りのコレクションの供給を設定します。
    1. コレクションテーブルの上に置いて手袋、アルコール手指消毒剤。
    2. コレクターの椅子の手の届くところに鋭利物容器を置きます。シャープコンテナは、常に手袋で処理した後、適切にフル際に処分しなければならない。
    3. 収集領域において保護アンダーパッド上のDBS収集のために必要な残りのすべての材料を配置します。エリアが散らかっているので、フィルターペーパーコレクションカード、​​少数のランセット、アルコールパッド、ガーゼパッド、およびバンドエイドが、あまりにも多くはないが含まれています。やる各参加者のために使用されるかもしれないものよりも多く設定されていません。

3。 DBSサンプルCellection

常に、PPE(白衣、手袋、長ズボン、クローズドつま先の靴、必要に応じて、安全メガネ)収集中に着用し、自分の街着を保護するために、膝の上に保護アンダーパッド(chux)を配置します。

  1. 参加者の準備:
    1. 彼/彼女がコレクションのために左または右の手を使用することを好むと収集のための指を選択したい場合の同意を得た後、参加者に尋ねる。重く硬くなったり破損し(裂傷)指と任意の環状指を避ける。それぞれ、参加者の痛みを最小限にし、回収を容易にするように、典型的には小指と親指が選択されな​​い。指先の側面は、一貫性と回収を容易にするために、収集部位として使用される。
    2. 参加者は、彼らの手を温めると血液の流れを刺激するために一緒に手をこすっています。手のWARMERを用いてもよいし、またはシンクが利用可能である場合、参加者は、暖かい水の下に手を実行してもよい。血流を刺激する別の技術は、参加者が交互に握り締めるとターゲット手を緩和し、指先穿刺の前に完全に静止させることである。
    3. アルコールパッドで選択した指をきれいにし、それが完全に乾燥できます。完全に任意の汚染物質やハンドローションを削除するために第2のアルコールパッドで繰り返します。指は、指スティックまたはアルコールを続行する前に、血液サンプルを汚染する、完全に乾燥していなければならない。すべて使用されるコレクションの材料と同様に、すぐにバイオハザード廃棄物容器にアルコール綿を処分。
  2. 参加者の指に穿刺部位を準備する。
    1. コレクション中に動かないようにするためと、腕や手の筋肉をリラックスするために、参加者の腕を固定します。テーブルの端に、または自分の膝の上に参加者の肘を休ま。参加者の手のPOSを保つ快適に心臓の高さより下itionedおよびそれらの筋肉が血液の流れを促進するために緩和。
    2. 親指と人​​差し指の間に選ばれた指をつかみ、ゆっくりと指先に向かって血液を引っ張って指先に手のひらから把握して移動させながら、ゆっくりと、しっかりと指を絞ることによって、指の乳。
    3. 指紋に垂直に、参加者の指にしっかりとマイクロランセットを押してランセットを放電してください。指や爪床の近くの中心部に穴を開けないでください。代わりに、その2点間を目指して、指の尺骨側に。すぐに鋭利物容器に使用済みランセットを廃棄。
  3. 血液スポットの収集:
    1. サンプルから組織液を除去し、すぐにバイオハザード廃棄物のバレルにガーゼを処分するために滅菌ガーゼパッドで血液の最初の一滴を乾いた布で拭き取ってください。
    2. 下向きの角度、GENと彼らの心の下に参加者の手を維持しながら、TLY手首から始まる手を牛乳と血液を生成するために指の付け根まで働く。これは血流を低下するためだけで、指を圧迫しないでください。大粒の指先からぶら下がっされるまで指を牛乳。
    3. 回収紙を使用してスポットを集める。
      1. 慎重に指下のコレクションの紙を配置して、ドロップが自重落下させる。これは、最大音量の血液スポットの収集を可能にする。濾紙上の血液プールは、 すなわち 「ビーズ」場合は、ゆっくり紙に飽和させるために、血液を奨励するために、カードをタップします。
      2. 血液の粘性が高すぎるか、滴が自重で落下するには小さすぎる場合には、徐々に指を触れることなく、毛管作用を介して離れた指からの血液を吸収するために血液滴と接触収集用紙をもたらす。指がコレクション紙に触れた場合は、その収集領域が侵害されているように、紙の上に別の場所に移動します。参加者の指翔ULDは、ろ紙には絶対に触れないでください。
      3. 血液スポットは、コレクションの円に満たない場合であっても、互いの上に血液滴を置かないでください。
      4. これは大規模なスポットの収集がより困難にするように、血液が指や爪の上にダウンを実行させないでください。
    4. その後、清潔で、最初の穿刺部位を包帯し、要求が受け入れられた場合、最初からやり直す。参加者の血液が収集プロセス中にいつを凝固する場合は、別の指を刺すために許可を求める。
      1. 凝固を防ぐために、流れる血液を保持するか、しっかりと血栓形成を破壊するために、滅菌ガーゼで穿刺を拭く試して、参加者の指を搾乳し続ける。
        注意:以降の指スティックはいくつかの理由のために必要な場合があります。低温室は、より迅速な凝固を引き起こす可能性、また、参加者の血液の粘度が理想的ではないかもしれない、あるいは不十分な搾乳技術はまた、血流に影響を与えることができます。カイロ、または温かい流水、穿刺前に使用TUREは低温室の効果を逆にすることができます。
    5. DBSは、収集、または参加者がその後の指スティックを望まない場合、余分な血液の穿刺部位をきれいにしたら。
    6. 参加者は、サンプル収集領域を離れると潜在的な汚染を防止するために、穿刺部位に包帯。
  4. FI品質管理(QC)の評価:
    サンプル収集が完了すると、品質のためのサンプルを評価します。収集領域の裏面から測定したスポット径の1)は、少なくとも0.375であることを確認し、フィルター紙の両面に同様のサイズとなるように2)適切に収集濾紙を通して浸漬し、この基準を満たしていないスポットが示す収集用紙に指の接触可能性が高いとスミアを介して収集し、3)互いに接触(スポットのエリアと重ならない)がアッセイ可能ではない。
  5. サンプル収集を完了
    1. 次のGUIステップ1.1に記載delinesは、潜在的な感染性物質と接触していた可能性のある項目を含む、残りの汚染されたコレクションの材料を処分。
    2. 乾燥させるために、保護アンダーパッドで回収紙スタンド。それらの間の良好な通気を確保するためのスペースコレクションカード。空気乾燥までの時間の最小量を15分間、好ましくは少なくとも30分である。最大の空気流を可能にするために、それが自由に立って収集紙上のサンプルの背後空気流を提供することができるような方法で収集カードの裏面を折り畳むことが重要である。
    3. 完全なすべてのステップで、PPEを削除します。
  6. よくかすかな感じか主題への対応
    そうものの、参加者は指の棒の間または後に、めまいめまい、あるいはかすかになることがあります。このような蒼白、顔や額に汗、まぶたを、ビジョンをぼやけ垂下やひらひらの苦情、あるいは吐き気を訴えとして兆候喚起。 Tの発症ヘセ症状突然のことが多いです。サンプルコレクターは、症状のいずれかが表示されている場合は迅速に対応する準備をしなければならない。これらの症状のいずれかの手順の間の任意の時点で存在する場合、以下の手順に従って反応させる。
    1. 参加者がかすかに感じている場合は、めまいめまい、または失神の兆候を示し、次の操作を実行します。
      1. 手続きを停止します。
      2. 参加者は落ちやけがにならないように注意してください。
      3. 冷静に参加者を安心させるし、必要に応じて、腰を曲げて彼/彼女の足の間に彼/彼女の頭を置くために、参加者に依頼してください。移動度が制限され、参加者は移動することができる場合には、隣接するクッション位置が休憩するために使用することができる。
      4. 10分間、参加者の残りの部分を持っている。
      5. 参加者の同意が継続する場合は、この手順を再開します。
    2. 参加者が気絶した場合、次の操作を実行します。
      1. 手続きを停止します。
      2. その世話をする参加者は、秋​​やけがにはならない。
      3. 足が上昇して、可能な限り迅速に彼/彼女の背中に参加嘘を持っています。参加者は立ってなくても座った姿勢から直接横になるように指示されます。
      4. 任意の衣類の締め付けをゆるめるために参加していません。
      5. 10分間、参加者の残りの部分を持っている。
      6. 血液スポットコレクションは続けるべきではありません。
      7. 参加者は1分後に応答しない場合は、911に電話。
  7. ラボエリアを分解:
    血液スポットの収集が完了すると、収集領域が破壊されなければならず、面積が通行人BYSはBBPに感染されないことを確実にするために除染。血液採取面積は、機器の容器、回収材料、および廃棄物容器は、BBPの清浄でなければならない。潜在的な感染性物質を取り扱う際にはいつものように、PPEを着用してください。
    1. 収集領域から削除し、すべての汚染されていない材料を再梱包。
    2. バイオ廃棄物のバレルに残っている汚染された廃棄物を処分する。
    3. シャープコンテナを閉じて、汚染からの保護を提供するエリアに格納します。鋭利物コンテナが3月4日いっぱいの場合は、適切な方法で廃棄して新しいシャープコンテナと交換してください。
    4. 殺ウイルス微生物消毒ワイプで全サンプルの収集領域を拭いてください。
    5. すべてのバイオハザード物質が処分された後、バイオハザードバッグはオートクレーブ処理することができます。廃棄物のバレルから袋を取り外すときは、唯一のバッグの外側に触れ、しっかりと袋を密封するために注意が必要です。それは、殺ウイルス、微生物が交差汚染を防ぐために、すべての機器の外側をきれいに拭く使用することもお勧めします。

4。 DBSを収集するためのトレーニング

任意の乾燥血液スポットコレクターがproceを実行する前に、有資格者の認定を受けていることを確認します患者や研究課題にdure。コレクターは十分な容量のスポットのコレクションでは、10分間の下で、理想的には、タイムリーかつ効率的な方法で手順を完了におけるPPEの採血用品の使用、参加者、自信と能力の尊重を証明することを確認してください。

5。サンプルのパッケージ化とストレージ

  1. 彼らは保存のために袋詰めされる前に、DBSサンプルは、最低15分間乾燥していることを確認し、飽和カードが十分に乾いて30分以上かかる場合があります。コレクションカードカバーを閉じ、サンプルの確保がサンプルを塗抹し、汚染しないように、完全に乾燥している。
  2. バイオハザード検体バッグを取り出し、標本袋に乾燥剤の袋を置く。バイオハザード標本袋にDBSサンプルを置きます。 DBSサンプルを取り扱う際は、必ず手袋を着用してください。血液サンプルは、標本袋の外側に触れないようにしてください。
  3. 独自のバイオハザードサンプルバッグのウィットに各サンプルを配置乾燥剤パケットヘクタール。過剰の空気を除去した後、しっかりと袋を密封するために袋を平らに。輸送または一時保管用の記憶クーラーで袋詰めのサンプルを配置します。高い温度は避けてください。
  4. DBSサンプルは、典型的には、分析物に依存して7,2有意な劣化なしに二週間室温で保存することができるように、コレクションの二週間以内にDBS試料を凍結またはアッセイ。

6。サンプル輸送と出荷

  1. 感染性物質を含むことが知られていない限り、輸送規制の米国部門の下にパート2は、第6章に従い、免除ヒト検体として船乾燥血液スポットサンプルは、国際民間航空機関(ICAO)技術指導8の6.3.2.3.6を§ 。
  2. 凍結した場合は、一晩中の有害物質のために必要な追加の予防策とドライアイス発送をお願いしたり、と-80℃に凍結さgelpaks月曜日·水曜日に船彼らは期待してサンプルを受信し、凍結する準備ができている受信サイトからの確認と、による遅れや週末/休日に輸送中の融解を避けるために。

7。品質管理の評価

  1. 収集およびアッセイの前には、次の(好ましくは、事前の凍結融解サイクルの数を最小限にするために凍結する)の品質のためのサンプルを評価します。
  2. スポット、スポットの大きさ、対象の指との接触を示すスポットはない重複したり、カード上に塗抹を含む適切な回収方法の飽和、適切なパッケージそのまま残り、色分けされた乾燥剤(ドライ)、サンプルの品質の評価において、以下の基準を含む。

8。冷凍庫保管

分解時間は、分析物によって異なりますが、最良の結果を得るために、コレクションの2週間以内のDBSサンプルを凍結。研究室グレードの冷凍庫内の乾燥剤でサンプルを凍結。任意の生体試料と同様に、凍結 - 解凍cを最小限に抑えるycles、DBS試料中のいくつかのアッセイは、6回の凍結融解サイクル9月11日までの低下の証拠を示さなかったが。

Representative Results

図1
図1。乾燥血液スポットサンプル。コレクションカードは、乾燥の過程で4、有効な収集されたスポットに表示されます。 拡大画像を表示するにはここをクリックしてください。

図2
図2。良い例と悪い乾燥血液スポットサンプルで落札 (右)と失敗(左)、DBSコレクションの結果を示す。 大きなIMを見るにはここをクリックしてください時代。

図3
図3。経営者の態度·従業心血管代謝疾患リスク6に関連付けられている慣行。この図は、バランス·家族の仕事に関連した温度管理の慣行が、従業員の心血管系の予測、バークマン、LF、バクストン、OM、Ertel、K.&Okechukwuから変更されている拡張されたケア環境におけるリスクと睡眠時間労働衛生心理学 115 のジャーナル 、316から329(2010)。従業員の仕事と家庭のニーズを支援するための開放性と創造性の中間または低仕事と家庭のスコアを管理者に暴露され、従業員、2つ以上の心血管リスク(現在の喫煙、肥満、高血圧や誇大広告を持っていることの統計的に有意な増加オッズを持っているrtension、高コレステロール、高グリコシル化ヘモグロビン(HbとHbA1c値)または糖尿病の診断)。上部と中央のパネルは、乾燥血液スポット(これも確実に乾燥血液スポットで測定することができる)ケアデバイスの点によって評価ヘモグロビンA1Cによって評価総コレステロールの標準偏差平均値±を示している。下のパネルは、マネージャスコアにより心血管疾患のリスクを示しています。直接ケアを提供する看護師や他の従業員に限定され、分析がする仕事と家庭の問題に関連し、低創造性とオープン性を持つ管理職への曝露は、これらの個人のために特に重要であることを示している(または低WFのスコア= 6.4、P = 0.01)。すべてのモデルは、年齢、性別、賃金、教育、人種/民族、そして現場のために制御します。 拡大画像を表示するにはここをクリックしてください。

Discussion

バイオマーカーは、医学、細胞生物学、遺伝学、心理学、社会学、人口統計学、社会疫学を含む複数の分野にまたがる非常に便利なツール、です。各専門分野の中では、初期段階の妥当性と信頼性バイオマーカー研究は、隠された病気のリスクの両方を明らかにし、健康の結果の前後の予測を提供するために使用された。これらの例では、正確であるバイオマーカーは、耐久性のある( すなわち 、それらは、バイオマーカーを抽出するために、サンプル収集とラボアッセイの実装との間のずれを生き残ることができる)と、(様々なモデル、すなわち便利)汎用性が要求される。

DBSコレクションは比較的簡単な手順であるが、いくつかの技術は、収集されたスポットの音量を最大化することができます。コレクションが始まる前に、参加者の手を確保することは暖かく、指を穿刺したら、そのため血管が拡張していることを、血液の流れを助けます。カイロを使用するか、ある参加者は、暖かい水の下に手を実行して、このプロセスを支援することができます。コレクションの前に指を搾乳すると、指先に血液を引き出し、血液の流れを助けるために手を温めるます。搾乳は練習で改善しプロセスです。コレクターは、彼らが最も快適で効果的な見つけるどんな技術を使用する必要がありますが、最も一般的なアプローチは、コレクターの反対側の手で、参加者の手を搾乳が含まれます。この方法では、反対側の手が、参加者の手首を安定させることができますがコレクターの親指が深い参加者の手のひらに動作するようになります。 1は、参加者の左手指から血液を採取した場合の例として、コレクタは自分の右手で左手とミルクで参加者の手首を安定化させる。搾乳間に行われた一般的な間違いはなく、指先に向かって血液を引っ張る筋肉に働いて手の上の皮膚を引っ張って、しっかりしたグリップを使用していないなどがあります。これは、ピンを回避することも重要であるチンしっかりと血液の流れを妨げるどちらも、nonmilking手で参加者の手首を掴み搾乳手や指。

指を穿刺すると、しっかりと放電前の指にランセットを押して、可能な穿刺深させる。浅い穿刺少ない血流と迅速な凝固をもたらす。指を穿刺した後、すぐに作業が鍵である。薄い血が容易になり、コレクションより大きなスポットにつながる。穿刺後、血液が凝固するまで、ますます粘性になる。カードよりそのボリューム上の血液スポットを収集するのに必要な時間が短縮。

理想的には参加者の血が滴が自重で落下するが、一部の人々の血が速く、他よりも厚いまたは血栓であるように、これは、すべての参加者には当てはまらないよう十分に薄くなります。血液が指から落ち厚すぎると、フィルタカードは、コレクションのための血液にしなければならない。 WH血液にカードを持って来る途中、それはむしろちょうどカードに血液を軽くたたくよりも、できるだけ長くのために指からぶら下がっている間に、ドロップと接触し​​て、カードを保持することが重要です。これはスポットのサイズを最大化するために指から血を引くのに役立ちます。この技術は、血液とカードとの接触を維持する安定した手を必要とする。両手を使用して、1つはカードを保持する参加者の手と1を安定し、互いに接触両手を保つことは一緒にカードや血液を安定させるのに役立ちます。

このような心血管代謝リスク評価などの高度な研究分野は、長い間、このようなC反応性蛋白(CRP)、インスリン、およびグリコシル化ヘモグロビン(HbA1C値)は、初期リスクの検出と防止努力のためだけでなく、「ハードエンドポイント」のバイオマーカーとしてのバイオマーカーに依存してきた心血管疾患(CVD)リスクとCVD関連死亡率12。臨床疫学は頻繁prospectivelするバイオマーカーを評価Yは、心臓病およびII型糖尿病などの心血管代謝リスク結果を予測。おそらく、最も広く使用される全てのバイオマーカーのフレーミングハムリスクスコア、CVD 13の予測に有用性を実証した血圧、HDLコレステロールレベルおよび総コレステロールレベルを含む複合体である。しかし、フラミンガムスコアはいくつかの技術的な論争を経験し、心血管研究に関連、より正確で具体的なバイオマーカーの必要性が示唆され、健康への社会的、環境的要因をリンクに焦点を当てた研究には限界があるしている。

ELISAまたはDBS試料のアッセイのための利用可能な同様の技術を用いて市販のキットは多数存在する。 DBSサンプルの分析のために必要なソリューション2に乾燥されたサンプルを持って来るための具体的かつ最適化された溶出工程の使用である。それ以上の分析対象物についてのアッセイは、現在1開発されているので、これは研究の拡大領域です。目の中Eアッセイは、すでに検証され、広く使用されているコレステロール2、CRP 10,14,15、IgE16、EBV 9,15、レプチン17、およびcyotkines 18です。検査医学のワシントン大学の学科(UWラボメッド)バイオマーカー研究所(:マークWener監督)など、DBSのアッセイを専門の研究室がいくつかあります。

むしろ孤独なバイオマーカーよりもバイオマーカーのパネルは、心血管および糖尿病研究の分野で最も有用であることを念頭に置き、バイオマーカーは、それらの有用性を最大にするために文脈の様々な要因と一緒に検討する必要がある。バイオマーカー研究は、両方の財政、データ収集のための時間では、しかし、高価になることができます。 wiをそれは、正確で耐久性に優れ、かつ汎用性のあるバイオマーカーを選択することが重要ですしつつ、仕事と家庭のバイオマーカー研究は、安価で適切であるバイオマーカーを選択することで、実用性に根ざしている必要があり、かつ迅速に回収することができる目の使いやすさ。さらに、実用的な考察は、多くの場合、同時に1プロシージャ内で価格、品質、スピードを最大化することができないことになる。ここに、フィールドと人口の研究の中の健康バイオマーカー研究の次のステップをうそ。バイオマーカー研究の分野は、飛躍的な成長期に現在あるが、ほとんどの作業はこれからである。

Disclosures

松谷アメリカの科学諮問委員会に、コンサルタントやロッツLLCのための専門家証人として機能し、コンサルティングを受け、(; ESRC-0977、ClinicalTrials.gov識別子NCT00900159今サノビオン)Orfeuバクストンはセプラコール社からの研究者主導の助成金を受けているウェイクフォレスト大学医療センターからの手数料。

Acknowledgments

この作品は、米国国立衛生研究所と疾病管理予防センターを通じて協力協定によって資金を供給され、仕事、家族と健康ネットワーク(www.WorkFamilyHealthNetwork.org)によってサポートされていました:母子保健のユーニス·ケネディ·シュライバー研究所と人間開発(グラント#U01HD051217、U01HD051218、U01HD051256、U01HD051276)、独立行政法人高齢上(グラント#U01AG027669)、行動科学科学研究局、国立心肺血液研究所(R01HL107240)、労働研究所安全衛生(グラント#U01OH008788、U01HD059773)。ウィリアム·T·グラント財団、アルフレッド·P·スローン財団、子どもと家族のための行政からの補助金は、追加の資金を提供してきた。本書の内容はもっぱら著者の責任であり、必ずしもこれらの機関や事業所の公式見解を示すものではありません。

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Asepti II Microbial Wipes EcoLab D12330345 3rd party shipping
Biohazard waste bags VWR 14220-092 High Strength Autoclavable Polypropylene Biohazard Bags, 2 mil
Biohazard waste barrel Tyco 58578-092 8 g Slide lid
Sharps Container BD Medical BD305487 1.4 qt
Chux VWR 82020-845 Absorbent bench underpads 
Gloves VWR XSmall: 89038-267 Powder-free, latex-free nitrile gloves
Small: 89038-268
Medium: 89038-270
Large: 89038-272
XLarge: 89038-274
Hand sanitizer (e.g. Purell) Johnson Johnson 89040-210 3rd party shipping
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References

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医学号83、乾燥血液スポット(DBS)は、バイオマーカー、心血管代謝リスク、炎症、標準予防策、採血
集団研究への参加を最大化するために健康バイオマーカーの血液スポットコレクション乾燥させ
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Ostler, M. W., Porter, J. H.,More

Ostler, M. W., Porter, J. H., Buxton, O. M. Dried Blood Spot Collection of Health Biomarkers to Maximize Participation in Population Studies. J. Vis. Exp. (83), e50973, doi:10.3791/50973 (2014).

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