Summary
Biomarcadores são indicadores biológicos diretamente-medidos de doença ou de saúde. Na população e as ciências sociais, os biomarcadores precisa ser de fácil obtenção, transporte e analisar. Secas mancha de sangue (DBS) coleção atende a essa necessidade, podem ser coletadas no campo com altas taxas de resposta e analisados para uma variedade de biomarcadores.
Abstract
Biomarcadores são indicadores biológicos diretamente-medidos de doença, saúde, exposições, ou outra informação biológica. Na população e as ciências sociais, os biomarcadores precisa ser de fácil obtenção, transporte e analisar. Manchas de sangue seco atender a essa necessidade, e podem ser coletadas no campo com altas taxas de resposta. Estes elementos são particularmente importantes em projetos de estudo longitudinal, incluindo intervenções onde o atrito é fundamental para evitar, e altas taxas de resposta melhorar a interpretação dos resultados. Coleção secas amostra mancha de sangue é simples, rápido e relativamente indolor, menos invasiva, em seguida, a punção venosa, e exige requisitos de armazenamento campo mínimos (ou seja, as amostras não precisam ser imediatamente congelado e pode ser armazenado por um longo período de tempo em um ambiente estável congelador antes ensaio). As amostras podem ser analisadas para uma variedade de diferentes analitos, incluindo o colesterol, a proteína C-reactiva, a hemoglobina glicosilada, numerosas citocinas, e outras analitos, bem como fornecer material genético. Recolha DBS é descrito como empregada em diversos estudos recentes.
Introduction
Biomarcadores podem fornecer informações valiosas sobre os processos biológicos que variam de normal a patogênica que pode contribuir para a doença clinicamente identificável 1. Em ambientes de pesquisa, manchas de sangue seco (DBS) estão se tornando cada vez mais preferido para punção venosa como um método para coleta de biomarcadores no sangue total. Recolha DBS é simples, relativamente fácil, menos invasiva, em seguida, a punção venosa, e requer o mínimo de requisitos de armazenamento (isto é, as amostras não precisam de ser imediatamente congelados e pode ser armazenado durante um longo período de tempo em um ambiente estável congelador antes do ensaio). Amostras DBS pode ser testado para uma variedade de diferentes analitos, incluindo o colesterol, a proteína C-reactiva, a hemoglobina glicosilada, anticorpos contra o vírus de Epstein-Barr, e diversas citoquinas.
Punção venosa tem sido o padrão-ouro para a coleção de biomarcadores no sangue. No entanto, a obtenção, armazenamento e transporte de amostras de sangue requer aderênciasce a uma série de protocolos e códigos de saúde, que pode não ser possível em certos protocolos de pesquisa. Flebotomistas deve ser oficialmente certificadas para a punção venosa, enquanto procedimentos de amostragem de DBS são mais simples e não necessitam de certificação oficial. Coleta de sangue venoso também exige mais equipamentos do que a coleção DBS (ou seja, agulhas, tubos, torniquetes), e mais esforço de pós-colheita. Punção venosa devem ser processados (por exemplo, soro ou plasma extraído a partir da amostra de sangue através de centrifugação ou de repousar à temperatura ambiente durante um determinado período de tempo) e congelados entre -20 ° C e -70 ° C imediatamente a fim de evitar a degradação dos analitos , enquanto que as amostras de DBS deve simplesmente ser deixada secar ao ar e, em seguida, pode ser armazenada à temperatura ambiente durante uma semana ou mais, dependendo de o analito, antes da transferência para um congelador 2. Amostras DBS são menos caros do que para coletar amostras de punção venosa, por razões descritas acima. Amostras DBS tambémocupam menos espaço, reduzindo os custos de transporte e armazenamento antes do ensaio.
O uso de saliva como biomarcador tornou-se fundamental em estudos biobehavioral. Saliva oferece um método simples, não invasivo para coletar biomarcadores e tornou-se o padrão para o trabalho de campo que visa medir o cortisol ou cotinina 3-5. A urina é outra amostra que podem ser recolhidos de forma não invasiva e podem ser utilizados em estudos de nível de população para ensaios de melatonina ou de toxicologia. Embora ambos urina e saliva oferecer para a frente os procedimentos de coleta que são capazes de ser concluída pelos próprios participantes, nem todos os analitos pode ser medida em estes meios.
DBS oferece uma simples e de baixo custo, alternativa para punção venosa e estão se tornando cada vez mais uma ferramenta de pesquisa implementado no campo e estudos populacionais 6.
Protocol
O protocolo a seguir foi aprovado pelo comitê de ética aplicável e foi conduzido de acordo com a Declaração de Helsinki.
1. Antes de começar: Precuations Padrão
Certifique-se de todos os funcionários de coleta de amostras passaram a NIOSH exigido pelo sangue de Patógenos (BBP) Treinamento.
- Controles de engenharia
- Use Food and Drug Administration aprovou recipientes para descarte farelos de dispor de usados, lancetas estéreis de uso único. Use o barril resíduos biológicos devidamente rotulados para qualquer outro material que entra em contato com material possivelmente infectado.
- Não encha demasiado o recipiente para objectos cortantes. Só encher um recipiente para objectos cortantes a 3/4 da capacidade antes de substituir o recipiente para evitar lesões. Há um indicador de plenitude compartimental em cada recipiente para objectos cortantes.
- Só descarte de materiais perfurocortantes no recipiente para objectos cortantes. Não utilize o recipiente apropriado para qualquer otseu desperdício.
- Elimine qualquer material nonsharp que entra em contato com um potencial BBP em um barril de resíduos biológicos devidamente rotulados.
- Equipamentos de Proteção Individual (EPI)
- Sempre use corretamente os EPI destinados a proteger contra a infecção do BBP. PPE usado durante a coleta de DBS incluir luvas, jalecos, proteção para os olhos, calças compridas e sapatos-dedos fechados.
- Usar luvas para lidar com sangue ou qualquer coisa que entrou em contato com sangue ou outros materiais potencialmente infecciosos (OPIMs). Luvas não deve ser muito apertado nem muito solto, pois isso pode dificultar o processo de "ordenha" (a ser descrito mais tarde). Não usar anéis durante a coleta de gotas de sangue que podiam perfurar a luva.
- Usar um jaleco para proteger a pele e roupas de sangue e OPIMs. Um jaleco que tenha entrado em contato com um BBP devem ser lavados em uma solução de água sanitária / água de 10% antes de reutilizar. Independentemente da exposição, o jaleco deve ser lavado regularmente para mantê-lo cinclinar-se.
- Usar sapatos fechados dedos para proteger os pés contra o possível contato com sangue e OPIMs.
- Se desejar, use óculos de proteção para proteger contra um possível contato com sangue e OPIMs devido ao splatter.
- Para manter a limpeza de uma área de trabalho, remova todos os EPI antes de deixar a área de trabalho para evitar a contaminação itens fora da área de laboratório.
- Controles de prática de trabalho
- Lavar as mãos com sabão e água morna por 20 s antes e após o contato físico com cada participante. Use uma toalha para desligar a água corrente. Se uma pia não estiver disponível, usar um desinfetante para as mãos de pelo menos 60% de álcool.
- Independentemente da oportunidade para lavar as mãos, usar álcool desinfetante para as mãos antes de aplicar e depois de retirar as luvas. Use desinfetante suficiente para cobrir todas as superfícies de ambas as mãos e esfregue as mãos até secar. Não lave ou limpe as mãos secas com uma toalha, pois isso reduzirá a eficácia do desinfetante.
- Não coma oubeber ou aplicar maquiagem ou lentes de contato nas áreas de coleta de sangue. Exposição pessoal a BBPs poderia ocorrer através destes caminhos que são rotas diretas para as membranas mucosas.
- Não manusear material de risco biológico sem luvas e não manuseie materiais não perigosos com luvas que já tocaram material de risco biológico.
- O serviço de limpeza adequada
Uma boa limpeza vai continuar a ajudar a proteger contra a exposição a um BBP e evitar contaminação cruzada no ambiente.- Use virucidas toalhetes desinfectantes microbianas para áreas limpas adequadamente contaminada durante a coleta de DBS.
- Mantenha risco biológico ou resíduos contaminados separado do lixo comum; materiais contaminados são aqueles que têm sangue visível ou OPIM sobre eles.
- Response Exposição
Se for exposto a um BBP, responder da seguinte maneira.- Lave a área exposta imediatamente e cuidadosamente com água e sabão.A ação rápida pode reduzir o risco de infecção.
- Identificar a fonte e rota da exposição a ser capaz de explicar a situação para o supervisor de campo e / ou o médico de responder.
- Notificar o supervisor de plantão imediatamente após ocorrer a exposição. Ressalta-se a obter o apoio de um supervisor de campo para entender o nível de risco para a infecção para que possa ser avaliado se a atenção médica imediata é necessária. Diretrizes estabelecidas nos Planos de Controle de exposição específicos (PCE) deve ser transmitida a todos os que estão em perigo de serem expostos a BBP.
2. Configuração da sala de coleta e Materiais
- Selecione um local de coleta de amostras que não se destina para comer, como um breakroom, e que está livre de todos os equipamentos do projeto não relacionado. Um não quer estar em uma área que está lotado, é importante ter facilidade de movimento. A seguir descreve como configurar a coleta de sangue local seco (lab) área.
- Configure o barril resíduos de risco biológico e forre o interior com um saco de resíduos de risco biológico. O barril de resíduos deve ser acessível sentado.
- Limpe a área de coleta de bem com toalhetes desinfectantes ou produto similar. Elimine todo o material usado para limpar a área do laboratório no barril resíduos de risco biológico. Usar luvas durante este passo para proteger a pele da exposição a substâncias químicas nocivas.
- Substituir luvas e configurar restantes fontes de coleta.
- Luvas lugar e álcool desinfetante para as mãos sobre a mesa da coleção.
- Coloque o recipiente para objectos cortantes ao alcance da cadeira do cobrador. O recipiente para objectos cortantes devem ser manuseados com luvas em todos os momentos e, em seguida, descartado adequadamente quando estiver cheio.
- Coloque todos os materiais restantes necessários para a coleta de DBS em um resguardo de proteção na área de coleta. Incluir um cartão de recolha de papel de filtro, algumas lancetas, almofadas de álcool, compressas de gaze, e Band-Aids, mas não muitos para que a área é desordenado. Fazernão configurar mais do que aquilo que pode ser usado para cada participante.
3. DBS Amostra Cellection
Sempre utilizar EPI (jaleco, luvas, calças compridas, sapatos fechados dedos e, se desejar, óculos de segurança) durante a coleta e colocar um resguardo de protecção (chux) no colo para proteger sua roupa de rua.
- Preparar o participante:
- Após a obtenção do consentimento, peça ao participante se ele / ela prefere utilizar a mão esquerda ou direita para a coleta e selecione um dedo para a coleção. Evite (lacerados) dedos fortemente calejadas ou danificados e quaisquer dedos anelados. Tipicamente o mindinho e o polegar não são seleccionadas de modo a minimizar a dor participante e facilitar a recolha, respectivamente. As laterais das pontas dos dedos são usados como local de coleta para a consistência ea facilidade de coleta.
- Já o participante esfregar as mãos juntas para aquecer as mãos e estimular o fluxo sanguíneo. A wa mãoRömer pode ser usado, ou o participante pode executar suas mãos em água morna, se uma pia está disponível. Outra técnica para estimular o fluxo sanguíneo seria ter o participante alternadamente apertar e relaxar a mão alvo, em seguida, descansar totalmente antes da punção digital.
- Limpe o dedo selecionado com uma compressa embebida em álcool e deixe-o secar completamente. Repita o procedimento com uma segunda compressa embebida em álcool para remover completamente quaisquer contaminantes ou loções para as mãos. O dedo deve estar completamente seca antes de prosseguir com a picada no dedo ou o álcool vai contaminar a amostra de sangue. Tal como acontece com todos os materiais de coleta utilizados, dispor imediatamente dos toalhetes com álcool no recipiente de resíduos de risco biológico.
- Preparar o local da punção no dedo do participante:
- Prenda o braço do participante para impedir o movimento durante a coleta e para relaxar o braço e músculos da mão. Descansar cotovelo do participante no bordo da mesa ou sobre a sua volta. Mantenha mão pos do participanteitioned confortavelmente abaixo do nível do coração e os músculos relaxados para facilitar o fluxo de sangue.
- Segure o dedo escolhido entre o polegar eo dedo indicador e leite delicadamente o dedo devagar e com firmeza apertando o dedo enquanto se move ao alcance da palma de ponta do dedo para puxar o sangue para a ponta do dedo.
- Pressione o micro-lanceta firmemente contra o dedo do participante perpendicular à impressão digital e descarregar a lanceta. Não perfurar o centro do dedo ou perto do leito da unha, em vez disso destinam entre esses dois pontos, do lado ulnar do dedo. Descartar imediatamente a lanceta usada no recipiente para objectos cortantes.
- Coleta as manchas de sangue:
- Seque a primeira gota de sangue com uma compressa de gaze estéril para remover o fluido de tecido a partir da amostra e dispor imediatamente de gaze para dentro do tambor de resíduos de risco biológico.
- Apesar de manter a mão do participante abaixo de seu coração com um ângulo para baixo, gently ordenhar a partida mão no pulso e trabalhar até a base do dedo para produzir sangue. Não basta apertar o dedo, pois isso irá reduzir o fluxo de sangue. Leite o dedo até que uma grande queda está pendurado na ponta do dedo.
- Colete pontos usando o papel de coleta.
- Posicionar cuidadosamente o papel de recolha por baixo do dedo e permitir que a gota a cair do seu próprio peso. Isso permite a coleta de gotas de sangue de volume máximo. Se piscinas de sangue em papel de filtro, ou seja, "beads", bata suavemente o cartão para incentivar sangue para saturar no papel.
- Se o sangue é muito viscoso ou gotas são pequenas demais para cair de seu próprio peso, levar lentamente o papel coleção em contato com a gota de sangue para absorver o sangue para fora do dedo através de ação capilar sem tocar o dedo. Se o dedo toca o papel coleta, vá para outro local no papel como a área de coleta foi comprometida. Dedo sho do participanteULD nunca toque no papel de filtro.
- Não coloque gotas de sangue em cima da outra, mesmo se uma mancha de sangue não preenche o círculo coleção.
- Não deixe o sangue correr pelo dedo ou na unha, pois isso faz coleção de grandes manchas mais difíceis.
- Se o sangue do participante coágulos qualquer momento durante o processo de coleta, pedir permissão para picar outro dedo, em seguida, limpa e enfaixar o local inicial da punção e começar de novo, caso o pedido seja aceito.
- Para evitar a coagulação, continuar ordenhando dedo do participante para manter o sangue fluindo ou tente firmemente limpando a punção com gaze estéril para interromper a formação de coágulos.
Nota: subseqüentes dedo-paus podem ser necessários para algumas razões: Uma sala fria pode causar a coagulação mais rápida e também a viscosidade do sangue dos participantes pode não ser ideal, ou técnicas de ordenha pobres também podem afetar o fluxo sanguíneo. Aquecedores de mão, ou água corrente quente, usado antes da punctura pode reverter o efeito de uma sala fria.
- Para evitar a coagulação, continuar ordenhando dedo do participante para manter o sangue fluindo ou tente firmemente limpando a punção com gaze estéril para interromper a formação de coágulos.
- Uma vez que os DBS foram recolhidos, ou se o participante não quiser dedo-paus subseqüentes, limpe o local da punção de qualquer sangue alheio.
- Curativo no local da punção para evitar a contaminação potencial, uma vez que o participante sai da área de coleta de amostras.
- FI Controle de Qualidade (CQ) de avaliação:
Ao completar a coleta de amostras, as amostras para avaliar a qualidade. Certifique-se de manchas são 1), pelo menos, 0.375 na de diâmetro, conforme medido a partir da parte de trás da área de colheita, 2) embebidas adequadamente através do papel de recolha, de modo a ter um tamanho semelhante em ambos os lados do papel de filtro, os pontos que não satisfazem este critério indicam coleção através do contato do dedo com o papel de coleta e provavelmente manchas, 3) não estão em contacto umas com as outras (áreas de sobreposição de pontos não são analisável). - Completando a coleta de amostras
- Após guiretrizes descritos no passo 1.1, dispor de todos os restantes materiais de coleta contaminados, incluindo todos os itens que podem ter estado em contacto com materiais potencialmente infecciosos.
- Coloque o papel de coleção em um resguardo de protecção para secar. Espaço das cartas de cobrança para permitir uma boa circulação de ar entre eles. A quantidade mínima de tempo para o ar seco é de 15 minutos, de preferência, pelo menos, 30 min. Para permitir que o fluxo máximo de ar, é importante para dobrar a parte de trás do cartão de recolha de uma forma que ele pode estar livremente e proporcionar um fluxo de ar atrás das amostras no papel de recolha.
- Com todas as etapas concluída, remova PPE.
- Resposta a um leve sentimento assunto ou não bem
Embora improvável, os participantes podem sentir tonturas, vertigens ou desmaio durante ou após a picada no dedo. Esteja alerta para sinais como palidez, suor no rosto e na testa, queixas de borrar a visão, caídas ou vibra pálpebras, ou queixas de náuseas. O aparecimento de tstas sintomas é muitas vezes súbita, coletores de amostra deve estar preparado para responder rapidamente, se qualquer um dos sintomas são visíveis. Se algum destes sintomas estão presentes em qualquer momento durante o procedimento, reagir de acordo com os seguintes procedimentos.- Se um participante está se sentindo fraco, sonolento, com tonturas, ou mostra quaisquer sinais de desmaio, tomar as seguintes medidas:
- Pare o procedimento.
- Tome cuidado para que o participante não cair ou ficar ferido.
- Calmamente tranquilizar o participante e, se necessário, solicitar ao participante a dobrar na cintura e colocar seu / sua cabeça entre seus / suas pernas. Se a mobilidade é limitada e o participante pode ser movido, de uma localização adjacente almofadada pode ser utilizada para repouso.
- Ter o resto participante para 10 min.
- Retomar o procedimento com o consentimento dos participantes para continuar.
- Se um participante desmaia, tomar as seguintes medidas:
- Pare o procedimento.
- Tome cuidado para queo participante não cair ou ficar ferido.
- Ter a mentira participante em seu / sua volta o mais rápido possível com os pés elevados. O participante será instruído a deitar-se directamente a partir da posição sentada, sem se levantar.
- Peça ao participante para soltar qualquer roupa apertada.
- Ter o resto participante para 10 min.
- Coleção mancha de sangue não deve continuar.
- Se o participante não responder após 1 min, ligue para o 911.
- Se um participante está se sentindo fraco, sonolento, com tonturas, ou mostra quaisquer sinais de desmaio, tomar as seguintes medidas:
- Quebrando a área de laboratório:
Uma vez que o conjunto de manchas de sangue tenha sido concluída, a área de coleta deve ser dividido ea área descontaminada a certeza de que transeuntes não será infectado por BBP. A área de coleta de sangue, os recipientes de recolha de equipamentos, materiais e recipientes de resíduos devem estar limpos de BBP. Como sempre, utilizar EPI ao manusear materiais potencialmente infecciosos.- Remover da área de coleta ereembalar todos os materiais não contaminados.
- Elimine qualquer material resíduos contaminados restante para o barril resíduos biológicos.
- Feche o recipiente para objectos cortantes e armazená-lo em uma área que fornece proteção contra a contaminação. Se o recipiente apropriado é 3/4 completo, devidamente descartá-lo e substituir por um novo recipiente para objectos cortantes.
- Limpe toda a área de coleta de amostras com toalhetes desinfectantes virucidas microbianas.
- Uma vez que todo o material de risco biológico foi descartado, o saco de risco biológico podem ser autoclavados. Ao retirar o saco do barril de resíduos, ser cauteloso para apenas tocar a parte externa do saco e para selar o saco com força. Também é boa prática usar microbiana virucidal toalhetes para limpar o exterior de todos os equipamentos para evitar a contaminação cruzada.
4. Treinando para coletar DBS
Verifique qualquer colecionador mancha de sangue seco é certificada por uma pessoa qualificada antes de realizar o procedimentomento em pacientes ou sujeitos de pesquisa. Certifique-se de coletores de demonstrar respeito para os participantes, a confiança e proficiência no uso de EPI e de material de coleta de sangue, na coleção de pontos de volume suficiente, e para completar o processo de uma forma atempada e eficiente, de preferência em menos de 10 min.
5. Embalagem e armazenamento das amostras
- Certifique-se de amostras DBS secaram por um período mínimo de 15 minutos antes de serem ensacados para armazenamento, um cartão saturada pode levar 30 minutos ou mais para adequadamente seco. Feche a tampa do cartão de coleta, garantindo que a amostra é completamente seca para evitar manchas e contaminação da amostra.
- Pegue um saco de amostra de risco biológico e coloque uma bolsa dessecante dentro do saco de amostra. Coloque a amostra DBS no saco espécime de risco biológico. Use sempre luvas ao manusear amostras DBS. Não permitir que as amostras de sangue para tocar no lado de fora do saco de amostra.
- Coloque cada amostra em seu próprio saco de amostra biohazard sagacidadeha pacote dessecante. Achate o saco para retirar o excesso de ar e, em seguida, feche o saco com força. Coloque a amostra ensacado em um refrigerador de armazenamento para transporte ou armazenamento temporário. Evite temperaturas elevadas.
- Congelar ou ensaio amostras DBS no prazo de duas semanas de coleta, como amostras DBS pode ser normalmente armazenados à temperatura ambiente durante duas semanas sem degradação significativa, dependendo do analito 7,2.
6. Transporte de amostras e Expedição
- A não ser conhecido por conter agentes infecciosos, navio seco amostras de sangue como espécimes humanos isentas, EUA Departamento de regulamentos de transporte e de acordo com a parte 2, capítulo 6, § 6.3.2.3.6 da Organização da Aviação Civil Internacional (ICAO) Instruções Técnicas 8 .
- Se congelado, amostras do navio durante a noite em gelo seco com as precauções adicionais necessárias para substâncias perigosas, ou com gelpaks congeladas a -80 ° C. Navio na segunda-feira-Quarta-feirapara evitar degelo em trânsito devido a atrasos ou fins de semana / feriados, com a confirmação do local de recepção que eles estão esperando e pronto para receber e congelar amostras.
7. Avaliação de Controle de Qualidade
- Após a colheita e antes do ensaio (de preferência antes da congelação de modo a minimizar o número de ciclos de congelamento-descongelamento) avaliar as amostras de qualidade.
- Inclua os seguintes critérios na avaliação da qualidade da amostra; embalagem adequada, com código de cores dessecante restante intacto (seco), saturação de manchas, tamanho de manchas, métodos de coleta adequados incluindo os locais não se sobrepõem ou manchadas no cartão indicando contacto com o dedo assunto.
8. Freezer Armazenamento
Embora os tempos de degradação diferem por analito, congelar as amostras DBS dentro de duas semanas de coleta para obter melhores resultados. Congelar as amostras com dessecante em um freezer de laboratório grau. Como acontece com qualquer amostra biológica, minimizar congelamento e descongelamento cycles, embora alguns ensaios em amostras DBS não demonstraram qualquer evidência de degradação em até seis ciclos de congelamento e descongelamento 9-11.
Representative Results
Figura 1. Secas amostra mancha de sangue. Uma placa de coleção é mostrada com quatro, válido pontos coletados no processo de secagem. Clique aqui para ver imagem ampliada.
Figura 2. Boa e má amostras de sangue seco. Resultados de sucesso (à direita) e sem sucesso (à esquerda) coleção DBS são mostrados. Clique aqui para ver maior imidade.
Figura 3. Gestores atitudes e práticas associadas com o risco de doença cardiometabólico empregado 6. Este valor foi modificado a partir do Berkman, LF, Buxton, OM, Ertel, K. & Okechukwu, práticas C. do Gestor relacionadas ao trabalho familiar equilíbrio prever cardiovascular empregado risco e duração do sono em ambientes de cuidados prolongados. Jornal de Psicologia da Saúde Ocupacional 115, 316-329 (2010). Trabalhadores expostos a gestores com dezenas trabalho-família meados ou baixos de abertura e criatividade para ajudar com o trabalho de seus funcionários e família precisam, têm chances aumentadas estatisticamente significativas de ter dois ou mais riscos cardiovasculares (fumante atual, obesidade, pressão alta ou campanha publicitáriartension, colesterol alto e alto de hemoglobina glicosilada (Hb A1C) ou diagnóstico de diabetes). Painéis superior e médio representam valores médios ± desvios-padrão para o colesterol total avaliado pela mancha de sangue seco e Hb A1C avaliada por dispositivo de ponto de atendimento (que também pode ser mensurado de forma confiável por manchas de sangue seco). Painel inferior mostra o risco de doença cardiovascular pelo escore gerente. Análise restrita aos enfermeiros e outros funcionários que prestam atendimento direto indicam que a exposição para os gerentes com baixa criatividade e abertura questões relacionadas ao trabalho-família pode ser particularmente importante para estes indivíduos (OR para baixa pontuação WF = 6,4, p = 0,01). Todos os modelos de controle de idade, sexo, salário, educação, raça / etnia e local de trabalho. Clique aqui para ver imagem ampliada.
Discussion
Biomarcadores são ferramentas extremamente úteis em várias disciplinas, como medicina, biologia celular, genética, psicologia, sociologia, demografia e epidemiologia social. Dentro de cada disciplina, validade e confiabilidade fase inicial de pesquisa de biomarcadores foi usado para descobrir tanto o risco de doença oculta e fornecer previsão longitudinal dos resultados de saúde. Nestes casos, os biomarcadores que são precisas e durável (isto é, podem sobreviver ao desfasamento entre a recolha da amostra e a execução do ensaio de laboratório para extrair o biomarcador), e versátil (isto é, útil em uma variedade de modelos) são necessários.
Enquanto coleção DBS é um procedimento relativamente simples, várias técnicas podem ajudar a maximizar o volume de pontos coletados. Antes da coleta começa, garantindo a mão de um participante é quente e, portanto, que os vasos sanguíneos se dilatam, vai ajudar o fluxo de sangue uma vez que o dedo está perfurado. Usando aquecedores de mão ou ter umparticipante executar suas mãos em água morna pode ajudar com este processo. Ordenhar o dedo antes da coleta de sangue vai puxar a ponta do dedo e aquecer a mão para ajudar o fluxo sanguíneo. A ordenha é um processo que melhora com a prática. Os coletores devem usar qualquer técnica que achar mais confortável e eficaz, mas a abordagem mais comum envolve a ordenha manual do participante com a mão em frente ao colecionador. Este método permitirá que o polegar do coletor de trabalhar em profundidade palma do participante, enquanto a mão oposta pode estabilizar o pulso do participante. Como exemplo, se um estavam coletando sangue de um dedo na mão esquerda do participante, o coletor seria estabilizar o pulso do participante com a sua mão esquerda e leite com a mão direita. Erros comuns cometidos durante a ordenha não incluem o uso de um aperto firme, puxando a pele acima da mão, em vez de trabalho para os músculos para puxar o sangue para a ponta dos dedos. É também importante para evitar pinoching o dedo com a mão ordenha ou segurando firmemente o pulso do participante com a mão nonmilking, os quais impedem o fluxo sanguíneo.
Ao perfurar a dedo, fazer a punção o mais profundamente possível, pressionando firmemente a lanceta no dedo antes da alta. Uma punção superficial resulta em menor fluxo de sangue e de coagulação mais rápido. Após a perfuração do dedo, trabalhando rapidamente é fundamental. Fina sangue leva a mais fácil coleta e manchas maiores. Após a punção, o sangue torna-se mais e mais viscoso até coagulação. Quanto menos tempo necessário para coletar as manchas de sangue no cartão, maior o seu volume.
O ideal é o sangue do participante será suficiente fina que cai vai cair de seu próprio peso, mas isso não será o caso para todos os participantes, como o sangue de algumas pessoas é mais grosso ou coágulos mais rápido do que outros. Se o sangue é muito grosso para cair do dedo, o cartão de filtro deve ser trazido para o sangue para a coleção. When trazer o cartão para o sangue é importante para manter o cartão em contacto com a gota, enquanto ele está pendurado a partir do dedo durante o tempo possível, em vez de apenas limpando o sangue para o cartão. Isto irá ajudar a puxar o sangue do dedo para maximizar o tamanho da mancha. Esta técnica requer mãos firmes para manter contato entre o sangue eo cartão. Com as duas mãos, uma para segurar a mão participantes e um para segurar o cartão, e mantendo as duas mãos em contacto uns com os outros ajuda a estabilizar o cartão eo sangue juntos.
Áreas de pesquisa avançadas, tais como a avaliação de risco cardiometabólico, há muito tempo invocado biomarcadores, como a proteína C-reativa (PCR), insulina e hemoglobina glicosilada (HbA1C) para a detecção precoce dos riscos e os esforços de prevenção, bem como biomarcadores de "endpoints rígidos" para a doença cardiovascular (DCV) e mortalidade associada à doença cardiovascular 12. Epidemiologia clínica freqüentemente avalia biomarcadores para prospectively prever resultados de risco cardiometabólico, como doença cardíaca e diabetes tipo II. Talvez o mais utilizado de todos os biomarcadores é o escore de risco de Framingham, um composto que inclui a pressão arterial, os níveis de colesterol HDL e os níveis totais de cholesterols que demonstrou utilidade na previsão de DCV 13. No entanto, o escore de Framingham tem experimentado algumas controvérsias técnicas, e tem limitações em estudos voltados para ligar os fatores sociais e ambientais para a saúde, o que sugere a necessidade de biomarcadores mais precisos e específicos relacionados com a investigação cardiovascular.
Há um número de kits disponíveis comercialmente utilizando técnicas de ELISA ou similares disponíveis para o ensaio de amostras de DBS. Necessária para o ensaio de amostras de DBS são o uso de etapas específicas e optimizadas de eluição para levar as amostras secas em solução 2. Esta é uma área em expansão de investigação como ensaios para mais analitos estão sendo desenvolvidos atualmente 1. Entre ªe ensaios já validados e sendo amplamente utilizados são o colesterol 2, CRP 10,14,15, IgE16, EBV 9,15, a leptina 17 e cyotkines 18. Há uma série de laboratórios especializados na análise de DBS, incluindo a Universidade de Washington Departamento de Medicina Laboratorial (UW Lab Med) Biomarcador Laboratory (Diretor: Mark Wener).
Tendo em conta que um painel de biomarcadores, ao invés de um biomarcador solitário, é mais útil nas áreas de pesquisa cardiovascular e diabetes, os biomarcadores devem ser considerados, juntamente com uma variedade de fatores contextuais, a fim de maximizar a sua utilidade. Pesquisa de biomarcadores pode ser caro no entanto, tanto financeiramente como no tempo de coleta de dados. Assim, embora seja vital para escolher biomarcadores que são precisas, durável e versátil, o trabalho ea família investigação biomarcador deve estar radicado na praticidade, selecionando biomarcadores que são de baixo custo, apropriado e pode ser recolhida rapidamente wiª facilidade. Além disso, considerações de ordem prática, muitas vezes resultar em uma incapacidade de maximizar simultaneamente preço, qualidade e velocidade dentro de um procedimento. Aqui encontram-se os próximos passos na pesquisa de biomarcadores de saúde dentro de estudos de campo e da população. O campo de pesquisa de biomarcadores está atualmente em um período de forte crescimento, no entanto, a maior parte do trabalho ainda está por vir.
Disclosures
Orfeu Buxton recebeu uma subvenção iniciado pelo investigador de Sepracor Inc (agora Sunovion; ESRC-0977, ClinicalTrials.gov Identificador NCT00900159); atua como consultor e perito para Dinsmore LLC, no Conselho Consultivo da Matsutani Scientific America, e recebeu consultoria honorários da Universidade Florestal Centro Médico Wake.
Acknowledgments
Este trabalho foi apoiado pelo Trabalho, Família e Rede de Saúde (www.WorkFamilyHealthNetwork.org), que é financiado por um acordo de cooperação com os Institutos Nacionais de Saúde e os Centros de Controle e Prevenção de Doenças: Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health e Desenvolvimento Humano (Grant # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), do Instituto Nacional do Envelhecimento (Grant # U01AG027669), Secretaria de Ciências Comportamentais e Science Research, National Heart, Lung and Blood Institute (R01HL107240) e Instituto Nacional de Segurança Segurança e Saúde (Grant # U01OH008788, U01HD059773). Bolsas do William T. Grant Foundation, Alfred Sloan Foundation P, ea Administração para Crianças e Famílias têm fornecido financiamento adicional. O conteúdo desta publicação é de responsabilidade exclusiva de seus autores e não representam necessariamente a posição oficial dos institutos e escritórios.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Asepti II Microbial Wipes | EcoLab | D12330345 | 3rd party shipping |
| Biohazard waste bags | VWR | 14220-092 | High Strength Autoclavable Polypropylene Biohazard Bags, 2 mil |
| Biohazard waste barrel | Tyco | 58578-092 | 8 g Slide lid |
| Sharps Container | BD Medical | BD305487 | 1.4 qt |
| Chux | VWR | 82020-845 | Absorbent bench underpads |
| Gloves | VWR | XSmall: 89038-267 | Powder-free, latex-free nitrile gloves |
| Small: 89038-268 | |||
| Medium: 89038-270 | |||
| Large: 89038-272 | |||
| XLarge: 89038-274 | |||
| Hand sanitizer (e.g. Purell) | Johnson Johnson | 89040-210 | 3rd party shipping |
| Alcohol wipes | Webcol and Curity | 82003-856 | Prep pads |
| Gauze | Versalon | 82004-826 | Nonwoven sponges |
| Band-Aids | Nutramax Stat Strips | 15431-475 | |
| Lancets | Owen Mumford | 82028-060 | 3.0 mm, 21 G |
| Protein paper collection cards | Whatman | Custom-build | 903 Protein Saver Collection paper |
| Desiccant | VWR | 61161-319 | Humidity sponges |
| Specimen bags | Lab Guard Reclosable Biohazard Bags, ITW Minigrip | 56766-370 | 6 in x 9 in |
| Specimen storage cooler | Igloo | Playmate Mini | 4 qt; direct from manufacturer |
References
- McDade, T. W., Williams, S., Snodgrass, J. J. What a drop can do: dried blood spots as a minimally invasive method for integrating biomarkers into population-based research. Demography. 44, 899-925 (2007).
- Kirschbaum, C., Read, G. F., Hellhammer, D. H. Assessment of hormone and drugs in saliva in biobehavioral research. , Hogrefe & Huber Publishers. (1992).
- Piazza, J. R., Almeida, D. M., Dmitrieva, N. O., Klein, L. C. Frontiers in the use of biomarkers of health in research on stress and aging. J. Gerontol. Series B Psychol. Sci. Soc. Sci. 65, 513-525 (2010).
- Smyth, J. M. Individual differences in the diurnal cycle of cortisol. Psychoneuroendocrinology. 22, 89-105 (1997).
- Berkman, L. F., Buxton, O. M., Ertel, K., Okechukwu, C. Manager's practices related to work-family balance predict employee cardiovascular risk and sleep duration in extended care settings. J. Occup. Health Psychol. 115, 316-329 (2010).
- Buxton, O. M., Malarick, K., Wang, W., Seeman, T. Changes in dried blood spot Hb A1c with varied postcollection conditions. Clin. Chem. 55, 1034-1036 (2009).
- International Civil Aviation Organization. Technical Instructions for the Safe Transport of Dangerous Goods by Air. , (2010).
- McDade, T. W. Epstein-Barr virus antibodies in whole blood spots: a minimally invasive method for assessing an aspect of cell-mediated immunity. Psychosom. Med. 62, 560-567 (2000).
- McDade, T. W., Burhop, J., Dohnal, J. High-sensitivity enzyme immunoassay for C-reactive protein in dried blood spots. Clin. Chem. 50, 652-654 (2004).
- McDade, T. W., Shell-Duncan, B. Whole blood collected on filter paper provides a minimally invasive method for assessing human transferrin receptor level. J. Nutr. 132, 3760-3763 (2002).
- Gerszten, R. E., Wang, T. J. The search for new cardiovascular biomarkers. Nature. 451, 949-952 (2008).
- D'Agostino, R. B., Grundy, S., Sullivan, L. M., Wilson, P. Validation of the Framingham coronary heart disease prediction scores: results of a multiple ethnic groups investigation. J. Am. Med. Assoc. 286, 180-187 (2001).
- McDade, T. W., Rutehrford, J., Adair, L., Kuzawa, C. W. Early origins of inflammation: microbial exposures in infancy predict lower levels of C-reactive protein in adulthood. Proc. R Soc. B.. , (2009).
- McDade, T. W. Measuring Stress in Humans. A Practical Guide for the Field. Ice, G. H., James, G. D. , Cambridge University Press. 181-207 (2007).
- Tanner, S., McDade, T. W. Enzyme immunoassay for total immunoglobulin E in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. 19, 440-442 (2007).
- Miller, A. A., Sharrock, K. C., McDade, T. W. Measurement of leptin in dried blood spot samples. Am. J. Hum. Biol. 18, 857-860 (2006).
- Miller, E. M., McDade, T. W. A highly sensitive immunoassay for interleukin-6 in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. , (2012).
