Summary
Биомаркеры непосредственно-измеренные биологические показатели болезней или здоровья. В населения и социальных наук, биомаркеры должны быть легко получить, транспорт, и анализировать. Сушеные крови пятна (DBS) коллекция удовлетворяет эту потребность, могут быть собраны в области с высоким уровнем реагирования и проанализированы для различных биомаркеров.
Abstract
Биомаркеры непосредственно-измеренные биологические показатели заболевания, здоровье, экспозиций, или другой биологической информации. В населения и социальных наук, биомаркеры должны быть легко получить, транспорт, и анализировать. Сухой капли крови удовлетворить эту потребность, и может быть собрана в области с высоким уровнем реагирования. Эти элементы особенно важны в продольных конструкций исследования, включая вмешательства, где истощение является критическим, чтобы избежать, и высокие темпы реагирования улучшить интерпретацию результатов. Высушенный образец крови набор пятно простой, быстрый, относительно безболезненно, менее инвазивные затем венепункции, и требует минимальных требований к хранению поле (т.е. образцы не должны быть немедленно заморожены и могут храниться в течение длительного периода времени в стабильной окружающей среды перед морозильной камерой анализ). Образцы могут быть проанализированы для множества различных аналитов, в том числе холестерина, С-реактивного белка, гликозилированного гемоглобина, многочисленные цитокинов и ОTher аналитов, а также обеспечивать генетический материал. Коллекция DBS изображается как применяется в ряде недавних исследований.
Introduction
Биомаркеры могут предоставить ценную информацию о биологических процессах, начиная от нормали к патогенных, которые могут способствовать клинически идентифицировать заболевания 1. В ходе проведения исследований, сухой капли крови (DBS) становятся все более предпочтительным, чтобы вены как метод сбора биомаркеров в цельной крови. Сбор DBS проста, относительно безболезненно, менее инвазивные затем венепункции, и требует минимальных требований к хранению (т.е. образцы не должны быть немедленно замораживали и могут храниться в течение длительного периода времени в стабильном морозильной среды перед исследованием). Образцы DBS могут быть проверены на множестве различных аналитов, в том числе холестерина, С-реактивного белка, гликозилированного гемоглобина, вирус Эпштейна-Барр антител, и несколько цитокинов.
Венепункция уже давно золотым стандартом для сбора биомаркеров в крови. Однако получение, хранение и поставки образцов крови требуется adherenсе к ряду протоколов и кодексов здоровья, которая не может быть возможно в некоторых исследовательских протоколов. Phlebotomists должны быть официально сертифицирована для вены, а процедуры отбора проб DBS проще и не требует нотариального заверения. Венозная сбора крови также требует больше оборудования, чем делает DBS коллекция (т.е. иглы, трубки, турникеты), и более после сбора усилия. Образцы венепункции должны быть обработаны (например, сыворотки или плазмы экстрагируют из пробы крови путем центрифугирования или стоянии при комнатной температуре в течение заданного периода времени) и замораживали при температуре от -20 ° С до -70 ° C немедленно, чтобы предотвратить деградацию аналитов , в то время как образцы DBS должно быть просто давали высохнуть на воздухе, а затем может храниться при комнатной температуре в течение недели или более в зависимости от анализируемого вещества, до перевода в морозильной камере 2. Образцы DBS являются менее дорогостоящими, чем собирать образцы венепункции по причинам, описанным выше. Образцы DBS такжезанимают меньше места, уменьшая доставку и складские расходы до анализа.
Использование слюны как биомаркеров стал ключевым в биоповеденческие исследований. Слюна предлагает простой, неинвазивный метод для сбора биомаркеров и стал стандартом для полевых работ, направленных на измерение кортизола или котинина 3-5. Моча является еще одним образцом которые могут быть собраны неинвазивно и могут быть использованы в исследованиях уровня населения для анализов мелатонина или токсикологии. Хотя оба мочу и слюну предлагают прямо вперед процедур сбора, которые в состоянии быть завершена самими участниками, не все анализируемые можно измерить в этих средах.
DBS предлагает простой и экономически эффективной, альтернативу вены и становятся все более реализуется исследовательский инструмент в области и население изучает 6.
Protocol
Следующий протокол был одобрен действующим биомедицинской этике и было проведено в соответствии с Хельсинкской декларацией.
1. Перед началом: Стандартные Precuations
Убедитесь, что все сотрудники сбор образцов прошли NIOSH требуется через кровь возбудителя (ББП) Обучение.
- Технический контроль
- Использование пищевых продуктов и медикаментов одобрило контейнеры для утилизации острого инструментария для утилизации использованных стерильных одноразовых копьями. Используйте правильно надписью биоотходов бочку для любого другого материала, который вступает в контакт с возможно зараженной материала.
- Не перегружайте острых контейнер. Только заполнить контейнер для острых предметов, чтобы 3/4 емкости перед замене контейнера для предотвращения травм. Существует показатель для компартментного полноте на каждом контейнер для острых предметов.
- Только распоряжаться острых в контейнер для острых предметов. Не используйте острых контейнер для любого OTее отходов.
- Утилизировать любой nonsharp материала, который вступает в контакт с потенциальной BBP в соответствующим образом обозначенный биоотходов баррель.
- Средства индивидуальной защиты (СИЗ)
- Всегда правильно использовать СИЗ для защиты от инфекции от BBP. СИЗ используются при сборе DBS включают перчатки, халаты, защитные очки, длинные брюки и закрытые обувь.
- Надевайте перчатки для обработки крови или все, что связался с кровью или другими потенциально инфекционные материалы (OPIMs). Перчатки не должна быть слишком жесткой, ни слишком свободно, так как это может помешать процессу "доения" (который будет описан позже). Не носите кольца во время сбора пятна крови, поскольку они могут проколоть перчатку.
- Носите халат для защиты кожи и одежды от крови и OPIMs. Лабораторный халат, который пришел в контакт с BBP следует выстирать в 10%-ном растворе хлорной извести / воды перед повторным использованием. Независимо от экспозиции, лабораторный халат следует выстирать регулярно, чтобы его Cопереться.
- Носите закрытые носком туфли для защиты ног от возможного контакта с кровью и OPIMs.
- При желании, носить очки для защиты от возможного контакта с кровью и OPIMs из-за брызг.
- Для поддержания чистоты рабочей области, удалить все СИЗ, прежде чем покинуть рабочее место, чтобы избежать загрязнения пунктов за пределами области лабораторных условиях.
- Работа Практика управления
- Вымойте руки с мылом и теплой водой в течение 20 сек до и после физического контакта с каждого участника. Используйте полотенце, чтобы выключить проточную воду. Если раковина не доступна, используйте дезинфицирующее средство для рук, по крайней мере 60%-ном спирте.
- Независимо от возможности мыть руки, используйте спирт для дезинфекции рук перед применением и после снятия перчаток. Используйте достаточно дезинфицирующее, чтобы покрыть все поверхности обеих рук и не тереть руки до полного высыхания. Не смывайте и не вытирайте руки насухо полотенцем, так как это приведет к снижению эффективности дезинфицирующего средства.
- Не ешьте и непить или применять для макияжа или контактные линзы в районах сбора крови. Личная воздействие BBPs может произойти через эти пути, которые являются прямыми маршруты в слизистые оболочки.
- Не беритесь биологически опасными материалами без перчаток и не используйте неопасными материал с перчатками, которые ранее касались биологически опасными материалами.
- Правильное домашнее хозяйство
Хорошо уборка будет продолжаться для защиты от воздействия на BBP и предотвратит кросс-загрязнения окружающей среды.- Используйте вируцидным микробных дезинфицирующими салфетками, чтобы должным образом чистые районы загрязнены во время сбора DBS.
- Держите BIOHAZARDOUS или загрязненных отходов отдельно от обычного мусора; загрязненные материалы являются те, которые имеют видимые следы крови или OPIM на них.
- Ответ экспозиции
При воздействии на BBP, реагировать следующим образом.- Немедленно и тщательно вымойте открытые участки водой с мылом.Быстрые действия может уменьшить риск заражения.
- Определить источник и маршрут экспозиции, чтобы иметь возможность объяснить ситуацию с наблюдателем поля и / или отвечающего врача.
- Сообщите руководителю по вызову сразу после возникновения экспозиции. Подчеркивается, чтобы получить поддержку от полевого супервайзера понять уровень риска для инфекции, поэтому его можно оценить, если немедленная медицинская помощь не требуется. Руководящих принципов, изложенных в конкретных планов управления экспозицией (ТЭК) должны быть обеспечены всем тем, что находятся в опасности подвергнуться BBP.
2. Настройка Collection номере и материалов
- Выберите образец расположение сбора, который не предназначен для еды, такой как Breakroom, и который свободен от всех, не связанной оборудования проекта. Никто не хочет быть в области, которая является переполненным, это важно иметь легкость движения. Далее описывается, как настроить высушенного коллекцию крови пятна (LAB) площадь.
- Настройка ствол для биологически опасных отходов и выравнивают интерьер с мешком для биологически опасных отходов. Ствол отходов должны быть доступны в сидячем положении.
- Очистите область сбора тщательно дезинфицирующими салфетками или аналогичного продукта. Утилизировать всех материалов, используемых для очистки области лаборатории в стволе для биологически опасных отходов. Надевайте перчатки во время этого шага для защиты кожи от воздействия вредных химических веществ.
- Заменить перчатки и настроить оставшиеся запасы сбора.
- Место перчатки и алкоголь дезинфицирующее средство для рук на стол сбора.
- Поместите контейнер для острых предметов в пределах досягаемости кресла коллектора. Контейнер для острых предметов должны быть обработаны с перчатками во все времена, а затем утилизировать когда полный.
- Поместите все оставшиеся материалы, необходимые для сбора DBS на защитную underpad в области сбора. Включите сбора фильтровальная бумага карты, несколько ланцеты, спиртовые подушечки, марлевые прокладки и бинты, но не слишком много, поэтому, область загроможден. Делатьне настроен больше, чем можно было бы использовать для каждого участника.
3. DBS Образец Cellection
Всегда носите СИЗ (халате, перчатки, длинные штаны, закрытые носком туфли и, при желании, защитные очки) во время сбора и место защитный underpad (СЬих) на коленях, чтобы защитить свои уличную одежду.
- Подготовка участника:
- После получения согласия, просим участника, если он / она предпочла бы использовать левую или правую руку для сбора и выберите палец для коллекции. Избегайте сильно мозолистые или поврежденные (рваные) пальцы и любые кольчатых пальцы. Как правило, мизинец и большой палец не выбраны так, чтобы минимизировать участника боль и облегчить сбор, соответственно. Стороны кончиках пальцев используются в качестве места сбора для последовательности и удобства коллекции.
- Были участник потирать руки вместе, чтобы погреть руки и стимулировать кровоток. Рука ваrmer могут быть использованы, или участник может запустить свои руки под теплой водой, если раковина доступно. Другой метод, чтобы стимулировать приток крови будет иметь участник поочередно сжимать и расслабиться целевой руку, то будьте полностью до пальца.
- Очистите выбранный палец спиртом салфеткой и дайте ему полностью высохнуть. Повторите со второй площадки алкоголя полностью удалить любые загрязнений или крем для рук. Палец должен быть абсолютно сухим, прежде чем приступить с палкой пальца или алкоголя будет загрязнять образец крови. Как и во всех используемых материалов коллекции, немедленно выбрасывайте спиртовые салфетки в контейнер для биологически опасных отходов.
- Подготовка места прокола на палец участника:
- Безопасность руку участника, чтобы предотвратить движение во время сбора и расслабить руки и мышцы рук. Отдых локоть участника на краю стола или на коленях. Держите руки поз участникаitioned удобно на уровне сердца и их мышцы расслабились, чтобы облегчить приток крови.
- Возьмитесь за выбранный палец между большим и указательным пальцами и осторожно доить палец, медленно и твердо сжимая палец при перемещении понимание от ладони к кончиками пальцев тянуть кровь по направлению к кончику.
- Нажмите микро-ланцет против пальца участника перпендикулярно отпечатков пальцев и разрядить ланцет. Не прокол центр пальцем или близко к ногтевого ложа; вместо стремиться между этими двумя точками, на локтевой стороне пальца. Немедленное помещение использованной ланцет в контейнер для острых предметов.
- Сбор пятна крови:
- Протрите первую каплю крови от стерильным марлевым тампоном, чтобы удалить тканевую жидкость из образца и сразу выбрасывайте марлю в ствол для биологически опасных отходов.
- Сохраняя руку участника ниже их сердца с нисходящим углом, GenTLY молоко ручной запуск на запястье и работать вниз к основанию пальца для получения крови. Не просто сжать палец, так как это приведет к снижению притока крови. Молоко палец, пока большая капля не висит от пальца.
- Сбор пятна, используя бумагу сбора.
- Тщательно устанавливайте бумагу сбора под пальцем и позволяют падение падать под собственным весом. Это позволяет коллекцию пятен крови максимальной громкости. Если луж крови на фильтровальной бумаге, то есть "шарики", слегка постучите карту для поощрения кровь для насыщения в бумагу.
- Если в крови слишком вязким или капли слишком малы, чтобы падать из их собственного веса, медленно довести бумагу сбора в контакт с капли крови, чтобы поглотить кровь от пальца под действием капиллярных сил, не касаясь пальцем. Если палец затрагивает бумаги сбора, перемещения в другое место на бумаге, поскольку та область коллекция была скомпрометирована. Палец шо УчастникаULD никогда не прикасайтесь к фильтровальную бумагу.
- Не ставьте капли крови на верхней части друг друга, даже если пятно крови не заполняет сбора круг.
- Не позволяйте кровь бежать вниз палец или на ноготь, как это делает коллекцию больших пятен сложнее.
- Если кровь участника сгустки в любое время в процессе сбора, спрашивать разрешения колоть еще один палец, а затем чистой и перевязать начальное место прокола и начать все сначала, если запрос будет принят.
- Чтобы предотвратить свертывание, продолжать доение палец участника сохранить кровь течет или попробовать твердо вытирая прокол стерильной марли, чтобы сорвать образование тромбов.
Примечание: Последующие пальцев палочки может быть необходимо по нескольким причинам: холодная комната может привести к более быстрому свертыванию; также вязкость крови участников не может быть идеальным, или бедные методы доения может также повлиять на кровоток. Ручные подогреватели или теплой проточной водой, используется до puncтуры может изменить эффект холодной комнате.
- Чтобы предотвратить свертывание, продолжать доение палец участника сохранить кровь течет или попробовать твердо вытирая прокол стерильной марли, чтобы сорвать образование тромбов.
- После того, как DBS были собраны, или если участник не хочет последующие пальцев палочки, очистить место прокола любого постороннего крови.
- Перевязать место прокола, чтобы предотвратить возможное загрязнение после того, как участник покидает область сбора образца.
- FI контроль качества (КК) оценка:
После завершения сбора проб, оценки образцов для качества. Обеспечить пятна 1) по крайней мере 0,375 в в диаметре при измерении от задней части области сбора; 2) адекватно пропитанной через бумагу для сбора так, чтобы быть одинакового размера с обеих сторон фильтровальной бумаги, пятна, не отвечающие этому критерию указывают Коллекция через контакт пальца на бумагу сбора и, вероятно, размазывая, 3) не в контакте друг с другом (перекрытие областей пятен не assayable). - Завершение отбор проб
- После графический интерфейсdelines описанные на стадии 1.1, распоряжаться оставшихся загрязненных коллекционных материалов, в том числе любые вопросы, которые, возможно, были в контакте с потенциально инфекционными материалами.
- Стенд сбор документ по защитным underpad высохнуть. Космические карты сбора, чтобы позволить хороший поток воздуха между ними. Минимальное количество времени высохнуть на воздухе на 15 мин, предпочтительно по меньшей мере 30 мин. Чтобы разрешить максимальный воздушный поток, важно, чтобы сложить заднюю часть сбора карты таким образом, что он может стоять свободно и обеспечить поток воздуха позади образцов на бумаге сбора.
- С все шаги удалим СИЗ.
- Ответ на предмет дурно или не так
Хотя вряд ли, каждый участник может стать головокружение, головокружение или обморок во время или после прокола пальца. Будьте бдительны в отношении признаков, таких как бледность, пот на лице и лбу, жалоб размывание зрение, опустив или трепета веки, или жалобы на тошноту. Наступление тHESE симптомы часто внезапно; образцы коллекционеры должны быть готовы быстро реагировать, если какой-либо из симптомов могут видеть. Если любой из этих признаков присутствуют в любой момент во время процедуры, реагируют в соответствии со следующими процедурами.- Если участник дурно, головокружение, головокружение или показывает никаких признаков обморока, предпринять следующие действия:
- Остановите процедуру.
- Следите за тем, участник не упасть или стать ранения.
- Спокойно успокоить участника и, если необходимо, попросите участника согнуть в талии и положить его / ее голову между его / ее ног. Если подвижность ограничена и участник может быть перемещен, рядом мягкая расположение может быть использован, чтобы отдохнуть.
- Имейте участника отдохнуть в течение 10 мин.
- Повторите процедуру, если участник дает согласие, чтобы продолжить.
- Если участник падает в обморок, предпринять следующие действия:
- Остановите процедуру.
- Позаботьтесь о том,участник не упасть или стать ранения.
- Имейте участника лежат на его / ее спиной как можно быстрее с ноги повышен. Участник будет поручено лечь непосредственно из положения сидя не вставая.
- Попросите участников, чтобы ослабить любую тесную одежду.
- Имейте участника отдохнуть в течение 10 мин.
- Кровь коллекция пятно не должно продолжаться.
- Если участник не отвечает после 1 мин, звоните по телефону 911.
- Если участник дурно, головокружение, головокружение или показывает никаких признаков обморока, предпринять следующие действия:
- Ломая лаборатории площадь:
После того, как сбор пятен крови была завершена, площадь коллекция должна быть разбита и область обеззараживать чтобы убедиться, что прохожих не будут заражены BBP. Площадь для сбора крови, оборудования контейнеры, сбор материалов и контейнеры для отходов должны быть чистыми от BBP. Как всегда, носить СИЗ при обращении с потенциально инфекционными материалами.- Удалить из области сбора иупакуйте все незагрязненных материалов.
- Утилизировать любого оставшегося загрязненного отходов в биологических отходов баррель.
- Закройте контейнер для острых предметов и хранить это в области, которая обеспечивает защиту от загрязнения. Если острых контейнер на 3/4, соответственно распоряжаться им и заменить его на новый контейнер для острых предметов.
- Протрите всю область сбора образца с вирулицидных микробных дезинфицирующих салфеток.
- После того как все биологически опасными материалами была продана, биологической мешок можно в автоклаве. При снятии сумку из бочки с отходами, будьте осторожны, чтобы только прикоснуться к внешней стороне сумки и запечатать сумку крепко. Это также хорошая практика, чтобы использовать вирулицидное микробная салфетки для чистки поверхности всего оборудования для предотвращения перекрестного загрязнения.
4. Обучение для сбора DBS
Проверьте любой сушат капля крови коллектор сертифицирован квалифицированному специалисту перед выполнением процеДюре на пациентах или предметов исследования. Убедитесь, коллекционеры демонстрируют уважение к участников, уверенность и знание использования средств индивидуальной защиты и поставок для сбора крови, в коллекции пятен достаточном объеме, и в завершении процедуры в своевременной и эффективной, в идеале в рамках 10 мин.
5. Образец Упаковка и хранение
- Убедитесь, образцы DBS высохли в течение минимального 15 мин, прежде чем они в мешках для хранения, насыщенный карты может занять 30 минут или больше, чтобы адекватно сухой. Закройте крышку коллекция карт, обеспечивая образец полностью высохнет, чтобы предотвратить размытие и загрязнение образца.
- Возьмите биологической опасности образца мешок и поместите осушитель мешочек в образце сумке. Поместите образец DBS в биологической образца мешок. Всегда надевайте перчатки при работе с образцами DBS. Не позволяйте образцы крови, чтобы коснуться снаружи образца мешок.
- Поместите каждый образец по-своему для отбора проб биологической остроумияха-осушитель пакет. Свести сумку, чтобы удалить лишний воздух и плотно закройте пакет плотно. Поместите в мешках образец в холодильнике для хранения транспорта или временного хранения. Допускать повышения температуры.
- Замораживание или анализ образцов DBS в течение двух недель после сбора, а образцы DBS могут быть обычно хранили при комнатной температуре в течение двух недель без значительной деградации в зависимости от анализируемого вещества 7,2.
6. Образец Транспорт и пересылка
- Если не известно, содержат инфекционных агентов, корабль высушенные образцы пятна крови, как освобожденных человека образцов при Министерства транспорта США правил и в соответствии с частью 2, глава 6, § 6.3.2.3.6 Международной организации гражданской авиации (ИКАО) Технические инструкции 8 .
- Если заморожены, образцы кораблей ночь на сухом льду с необходимыми дополнительные меры предосторожности для опасных веществ, или с gelpaks замороженные до -80 ° С. Корабль на понедельник-средуизбежать оттепель в пути в связи с задержками или выходные / праздничные дни, с подтверждением приемной сайте, что они ждут и готовы принять и заморозить образцы.
7. Оценка Контроль качества
- После сбора и до анализа (предпочтительно перед замораживанием, чтобы минимизировать количество циклов замораживания-оттаивания) оценивать образцы для качества.
- Включают в себя следующие критерии в оценке качества образцов; надлежащей упаковки, оставшиеся нетронутыми (сухой) с цветовой кодировкой осушитель, насыщенность пятен, размер пятна, соответствующие методы сбора включая пятен не перекрывающихся и грязное на карту с указанием контактов с предметной пальца.
8. Морозильник хранения
Хотя раз деградации отличаются анализируемого вещества, заморозить образцы DBS в течение двух недель коллекции для лучших результатов. Замораживание образцов вместе с осушителем морозильнике лабораторно-класса. Как и в любых биологических образцов, свести к минимуму при замораживании-оттаивании Cycles, хотя некоторые анализы в образцах DBS не показали никаких признаков деградации в до шести циклов мороз-тепло 9-11.
Representative Results
Рисунок 1. Сушеные крови пятно образец. Коллекция карта показан с четырьмя, действительных собранных мест в процессе сушки. Кликните здесь, чтобы посмотреть увеличенное изображение.
Рисунок 2. Хорошее и плохое высушенных образцов местная крови. Результаты успешного (справа) и неудачной (слева) коллекции DBS показаны. Нажмите здесь, чтобы увеличить внутримышечновозраст.
Рисунок 3. Отношение и практики, связанных с риском сотрудник кардиометаболических болезни 6 менеджеров. Эта цифра была изменена с Беркман, LF, Бакстон, О.М., Эртель, К. & Okechukwu, практики С. Управляющего, связанных с работой и семьей баланс предсказать сотрудников сердечно-сосудистой риск и продолжительность сна в настройках расширенного ухода. журнал охране труда психологии 115, 316-329 (2010). Сотрудники подвергаются менеджеров с середины или низкими оценками работы-семьи открытости и творчества за помощь с работой своих сотрудников и семьи нуждаются, имеют статистически значимое увеличение вероятность наличия двух или более сердечно-сосудистых рисков (текущее курильщик, ожирение, высокое кровяное давление или Обманrtension, высокий уровень холестерина и высокое гликозилированного гемоглобина (Hb A1C) или диагноз сахарный диабет). Верхней и средней панели изображают средние значения ± стандартные отклонения для общего холестерина, оцененной высушенной капли крови и гемоглобина A1C оцененной момент ухода устройства (который также может быть надежно измерена с помощью сухой капли крови). Нижняя панель показывает риск сердечно-сосудистых заболеваний по счету менеджера. Анализ проведен только для медицинских сестер и других сотрудников, которые предоставляют непосредственную помощь показывают, что воздействие менеджеров с низкой креативность и открытость, связанных вопросов работать-семейные может быть особенно важно для этих лиц (ИЛИ для низкий балл WF = 6,4, р = 0,01). Все модели управления для возраста, пола, заработной платы, образования, расы / этнической принадлежности и месту работы. Кликните здесь, чтобы посмотреть увеличенное изображение.
Discussion
Биомаркеры являются чрезвычайно полезными инструментами по нескольким дисциплинам, в том числе медицины, клеточной биологии, генетики, психологии, социологии, демографии и социальной эпидемиологии. В каждой дисциплине, ранняя фаза действия и надежность исследования биомаркеров был использован, чтобы раскрыть как скрытый риск заболевания и обеспечения продольной предсказание последствий для здоровья. В этих случаях, биомаркеры, которые точными, долговечными (т.е. они могут выжить отставание между сбором и реализации лабораторного анализа проб, чтобы извлечь биомаркеров), и универсальный (т.е. полезны в различных моделей) обязательны для заполнения.
В то время как коллекция DBS является относительно простой процедурой, несколько методов может помочь максимизировать объем собранных пятен. Перед началом сбора, обеспечения руку участника теплая, и, следовательно, что кровеносные сосуды расширены, поможет кровоток, как только палец проколот. Использование ручных грелки или имеющиеучастник запустить свои руки под теплой водой может помочь в этом процессе. Доильный пальцем до сбора будет тянуть кровь на кончике пальца и согреть руку, чтобы помочь кровотока. Доение это процесс, который улучшается с практикой. Коллекционеры должны использовать любую технику они считают наиболее удобным и эффективным, но наиболее распространенным подходом включает доения руку участника с противоположной стороны коллектора. Этот метод позволит палец коллекционное работать глубоко в ладони участника то время как противоположная рука может стабилизировать запястье участника. В качестве примера, если собирали кровь из пальца на левой руке участника, коллекционер бы стабилизировать запястье участника с левой рукой и молока с правой руки. Общие ошибки, допущенные во время доения включают в себя не используя жесткий контроль, потянув над рукой, а рабочей в мышцы тянуть кровь по направлению к кончику пальца кожу. Важно также, чтобы избежать штифтцзин пальцем с доения вручную или крепко сжав запястье участника с nonmilking стороны, оба из которых препятствуют кровоток.
Когда прокалывания пальца, делают прокол как можно глубже, с усилием нажимая ланцет в палец перед выпиской. Мелкой прокол приводит к меньшему кровотока и быстрой свертываемости. После прокалывания пальца, работая быстро является ключевым фактором. Тонкий крови приводит к более легкому сбора и больших пятен. После прокола, кровь становится все более и более вязкой до свертывания. Чем меньше времени требуется для сбора пятна крови на карте тем больше их объема.
В идеале кровь участника будет достаточно тонкие, что капли будут падать из их собственного веса, но это не будет иметь место для всех участников, как кровь некоторых людей толще или сгустки быстрее, чем другие. Если кровь слишком густая падать из пальца, фильтр карта должна быть доведена до крови для коллекции. Белыйан чего карту в крови важно, чтобы удерживать карты в контакте с каплей, пока он висит от пальца до тех пор, возможно, а не просто вытирать кровь на карту. Это поможет тянуть кровь из пальца, чтобы максимизировать размер пятна. Этот метод требует устойчивые руки, чтобы поддерживать контакт между кровью и карты. Обеими руками один, чтобы стабилизировать руку участникам и один, чтобы держать карту, и держа обе руки в контакте друг с другом помогает стабилизировать карты и кровь вместе.
Расширенный научные направления, такие как кардиометаболических оценки риска, уже давно полагаются на биомаркеров, таких как С-реактивного белка (CRP), инсулин и гликозилированного гемоглобина (HbA1c) для раннего обнаружения рисков и мер профилактики, а также биомаркеров "жестких конечных точек" сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) риска и сердечно-сосудистых заболеваний связанных смертности 12. Клиническая эпидемиология часто оценивает биомаркеры для prospectivelу предсказать кардиометаболических результаты риска, таких как болезни сердца и диабет типа II. Пожалуй, наиболее широко используемой из всех биомаркеров является оценка риска Framingham, композитный, что включает в себя кровяное давление, уровень холестерина ЛПВП и общего холестерина уровней, которая продемонстрировала полезность в прогнозировании CVD 13. Тем не менее, оценка Framingham испытал некоторые технические разногласия и имеет ограничения в исследованиях, направленных на связь социальных и экологических факторов на здоровье, что говорит о необходимости уточнения и конкретных биомаркеров, связанных с сердечно-сосудистых исследований.
Есть целый ряд из коммерчески доступных наборов ELISA с использованием или аналогичные методы, доступные для анализа образцов DBS. Необходимые для анализа образцов DBS являются использование точных и оптимизированных стадий элюции принести высушенных образцов в раствор 2. Это развивающаяся область исследований, как анализы для нескольких анализируемых веществ в настоящее время разрабатываются 1. Среди йе анализы уже проверенные и широко используются холестерина 2, СРБ 10,14,15, IgE16, ВЭБ 9,15, лептин 17, и cyotkines 18. Есть целый ряд лабораторий, специализирующихся на анализе DBS, в том числе университет Вашингтона Департамента лабораторной медицины (UW Лаборатория Med) биомаркеров лаборатории (Режиссер: Марк Wener).
Учитывая, что панель биомаркеров, а не одинокого биомаркеров, является наиболее полезным в области сердечно-сосудистой и диабета исследований, биомаркеры должны рассматриваться наряду с различными ситуативными факторами с целью максимизации их полезность. Биомаркеров исследования могут быть дорогими, однако, как финансово, так и во времени для сбора данных. Таким образом, в то время как очень важно, чтобы выбрать биомаркеров, которые являются точными, прочный и универсальный, работа и семья исследования биомаркеров должна опираться на практичности, выбрав биомаркеров, которые стоят недорого, это необходимо, и могут быть собраны быстро шй легкость. Кроме того, практические соображения часто приводят к неспособности одновременно максимизировать цену, качество и скорость в течение одной процедуры. Здесь лежат следующие шаги в здоровье биомаркеров исследований в рамках полевых и населения исследований. Поле биомаркеров исследований в настоящее время в период стремительного роста, однако, большая часть работы еще впереди.
Disclosures
Orfeu Бакстон получил следователь по инициативе грант от Sepracor Inc (сейчас Sunovion; ESRC-0977, ClinicalTrials.gov идентификатор NCT00900159); выступает в качестве консультанта и эксперта-свидетеля для Динсмор LLC, на Научно-консультативного совета Мацутани Америки, и получил консалтинг сборы от Wake Forest University Medical Center.
Acknowledgments
Эта работа была поддержана работа, семья и сети здравоохранения (www.WorkFamilyHealthNetwork.org), которая финансируется за счет соглашения о сотрудничестве через Национальных Институтов Здоровья и Центров по контролю и профилактике заболеваний: Юнис Кеннеди Шрайвер Национального института детского здоровья и человеческое развитие (грант # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), Национальный институт по проблемам старения (грант # U01AG027669), офис поведенческих и науки наук исследований, Институтом Крови Национального сердца, легких и (R01HL107240) и Национальный институт по охране безопасности и гигиене труда (грант # U01OH008788, U01HD059773). Субсидии из Уильям Т. Грант Фонда, Альфред Р Слоуна, и Администрацией для детей и семей выделили дополнительное финансирование. Содержание данной публикации является исключительной прерогативой авторов и не обязательно отражают официальную точку зрения этих институтов и подразделений.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Asepti II Microbial Wipes | EcoLab | D12330345 | 3rd party shipping |
| Biohazard waste bags | VWR | 14220-092 | High Strength Autoclavable Polypropylene Biohazard Bags, 2 mil |
| Biohazard waste barrel | Tyco | 58578-092 | 8 g Slide lid |
| Sharps Container | BD Medical | BD305487 | 1.4 qt |
| Chux | VWR | 82020-845 | Absorbent bench underpads |
| Gloves | VWR | XSmall: 89038-267 | Powder-free, latex-free nitrile gloves |
| Small: 89038-268 | |||
| Medium: 89038-270 | |||
| Large: 89038-272 | |||
| XLarge: 89038-274 | |||
| Hand sanitizer (e.g. Purell) | Johnson Johnson | 89040-210 | 3rd party shipping |
| Alcohol wipes | Webcol and Curity | 82003-856 | Prep pads |
| Gauze | Versalon | 82004-826 | Nonwoven sponges |
| Band-Aids | Nutramax Stat Strips | 15431-475 | |
| Lancets | Owen Mumford | 82028-060 | 3.0 mm, 21 G |
| Protein paper collection cards | Whatman | Custom-build | 903 Protein Saver Collection paper |
| Desiccant | VWR | 61161-319 | Humidity sponges |
| Specimen bags | Lab Guard Reclosable Biohazard Bags, ITW Minigrip | 56766-370 | 6 in x 9 in |
| Specimen storage cooler | Igloo | Playmate Mini | 4 qt; direct from manufacturer |
References
- McDade, T. W., Williams, S., Snodgrass, J. J. What a drop can do: dried blood spots as a minimally invasive method for integrating biomarkers into population-based research. Demography. 44, 899-925 (2007).
- Kirschbaum, C., Read, G. F., Hellhammer, D. H. Assessment of hormone and drugs in saliva in biobehavioral research. , Hogrefe & Huber Publishers. (1992).
- Piazza, J. R., Almeida, D. M., Dmitrieva, N. O., Klein, L. C. Frontiers in the use of biomarkers of health in research on stress and aging. J. Gerontol. Series B Psychol. Sci. Soc. Sci. 65, 513-525 (2010).
- Smyth, J. M. Individual differences in the diurnal cycle of cortisol. Psychoneuroendocrinology. 22, 89-105 (1997).
- Berkman, L. F., Buxton, O. M., Ertel, K., Okechukwu, C. Manager's practices related to work-family balance predict employee cardiovascular risk and sleep duration in extended care settings. J. Occup. Health Psychol. 115, 316-329 (2010).
- Buxton, O. M., Malarick, K., Wang, W., Seeman, T. Changes in dried blood spot Hb A1c with varied postcollection conditions. Clin. Chem. 55, 1034-1036 (2009).
- International Civil Aviation Organization. Technical Instructions for the Safe Transport of Dangerous Goods by Air. , (2010).
- McDade, T. W. Epstein-Barr virus antibodies in whole blood spots: a minimally invasive method for assessing an aspect of cell-mediated immunity. Psychosom. Med. 62, 560-567 (2000).
- McDade, T. W., Burhop, J., Dohnal, J. High-sensitivity enzyme immunoassay for C-reactive protein in dried blood spots. Clin. Chem. 50, 652-654 (2004).
- McDade, T. W., Shell-Duncan, B. Whole blood collected on filter paper provides a minimally invasive method for assessing human transferrin receptor level. J. Nutr. 132, 3760-3763 (2002).
- Gerszten, R. E., Wang, T. J. The search for new cardiovascular biomarkers. Nature. 451, 949-952 (2008).
- D'Agostino, R. B., Grundy, S., Sullivan, L. M., Wilson, P. Validation of the Framingham coronary heart disease prediction scores: results of a multiple ethnic groups investigation. J. Am. Med. Assoc. 286, 180-187 (2001).
- McDade, T. W., Rutehrford, J., Adair, L., Kuzawa, C. W. Early origins of inflammation: microbial exposures in infancy predict lower levels of C-reactive protein in adulthood. Proc. R Soc. B.. , (2009).
- McDade, T. W. Measuring Stress in Humans. A Practical Guide for the Field. Ice, G. H., James, G. D. , Cambridge University Press. 181-207 (2007).
- Tanner, S., McDade, T. W. Enzyme immunoassay for total immunoglobulin E in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. 19, 440-442 (2007).
- Miller, A. A., Sharrock, K. C., McDade, T. W. Measurement of leptin in dried blood spot samples. Am. J. Hum. Biol. 18, 857-860 (2006).
- Miller, E. M., McDade, T. W. A highly sensitive immunoassay for interleukin-6 in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. , (2012).
