Summary
Los biomarcadores son indicadores biológicos medidos directamente-de la enfermedad o la salud. En la población y de las ciencias sociales, los biomarcadores deben ser fáciles de obtener, transportar y analizar. Secado de gotas de sangre (DBS) colección responde a esta necesidad, se puede recoger en el campo con altas tasas de respuesta y analizada por una variedad de biomarcadores.
Abstract
Los biomarcadores son indicadores biológicos medidos directamente-de la enfermedad, la salud, las exposiciones, o cualquier otra información biológica. En la población y de las ciencias sociales, los biomarcadores deben ser fáciles de obtener, transportar y analizar. Manchas de sangre seca satisfacer esta necesidad, y se pueden recoger en el campo con altas tasas de respuesta. Estos elementos son especialmente importantes en los diseños de estudios longitudinales que incluyen intervenciones en las que el desgaste es fundamental para evitar, y las altas tasas de respuesta a mejorar la interpretación de los resultados. Recogida de muestras de sangre seca es simple, rápida, relativamente sin dolor, menos invasiva a continuación, la punción venosa, y requiere un mínimo de requisitos de almacenamiento de campo (es decir, muestras no necesitan ser inmediatamente congelado y se puede almacenar durante un largo período de tiempo en un ambiente estable antes de congelador ensayo). Las muestras pueden ser analizadas para una variedad de diferentes analitos, incluyendo el colesterol, proteína C reactiva, hemoglobina glicosilada, numerosas citoquinas, y Oanalitos Ther, así como proporcionar material genético. Colección DBS es representado como empleado en varios estudios recientes.
Introduction
Los biomarcadores pueden proporcionar información valiosa sobre los procesos biológicos que van de normal a patógenos que pueden contribuir a la enfermedad clínicamente identificable 1. En entornos de investigación, manchas de sangre seca (DBS) son cada vez más preferido para la punción venosa como un método para la recogida de los biomarcadores en la sangre entera. Colección de DBS es simple, relativamente sin dolor, menos invasiva a continuación, la punción venosa, y requiere un mínimo de requisitos de almacenamiento (es decir, muestras no necesitan ser congelados de inmediato y se puede almacenar durante un largo período de tiempo en un ambiente estable congelador antes del ensayo). Muestras de DBS pueden ser probados para una variedad de diferentes analitos, incluyendo el colesterol, proteína C reactiva, hemoglobina glicosilada, anticuerpos contra el virus de Epstein-Barr, y varias citocinas.
Venopunción ha sido durante mucho tiempo el estándar de oro para la colección de biomarcadores en la sangre. Sin embargo, la obtención, almacenamiento y envío de muestras de sangre requiere adherence a una serie de protocolos y códigos de salud, lo que puede no ser posible en ciertos protocolos de investigación. Phlebotomists deben ser certificadas oficialmente para la venopunción, mientras que los procedimientos de toma de muestras de DBS son más simples y no requieren la certificación oficial. La extracción de sangre venosa también requiere más equipo que hace colección DBS (es decir, agujas, tubos, torniquetes), y el esfuerzo más después de la recolección. Muestras de venopunción deben ser procesados (es decir, suero o plasma extraído de la muestra de sangre a través de centrifugación o de pie a temperatura ambiente durante un período de tiempo dado) y congelado entre -20 ° C y -70 ° C inmediatamente con el fin de prevenir la degradación de los analitos , mientras que las muestras de DBS simplemente se debe permitir que se seque al aire y después se pueden almacenar a temperatura ambiente durante una semana o más, dependiendo del analito, antes de la transferencia a un congelador 2. Muestras de DBS son menos costosos de recoger que las muestras de venopunción por razones descritas anteriormente. Muestras de DBS tambiénocupan menos espacio, reduciendo los costos de transporte y almacenamiento antes del ensayo.
El uso de la saliva como biomarcador se ha convertido en clave en los estudios biobehavioral. Saliva ofrece un método simple, no invasivo para recoger biomarcadores y se ha convertido en el estándar para el trabajo de campo destinado a medir el cortisol o la cotinina 3-5. La orina es otra muestra que se pueden recoger de forma no invasiva y se puede utilizar en los estudios a nivel de población para los ensayos de la melatonina o de toxicología. Mientras tanto la orina y la saliva ofrecen sencillo los procedimientos de recogida que sean capaces de ser completado por los propios participantes, no todos los analitos se pueden medir en estos medios.
DBS ofrece una forma simple, rentable y alternativa a la punción venosa y se están convirtiendo en una herramienta de investigación cada vez más implantado en el campo y estudios de población 6.
Protocol
El siguiente protocolo ha sido aprobado por la junta de revisión institucional aplicable y fue llevado a cabo de conformidad con la Declaración de Helsinki.
1. Antes de comenzar: Precuations estándar
Asegúrese de que todo el personal de recolección de la muestra han pasado el NIOSH requiere sangre patógenos transmitidos (BBP) Adiestramiento.
- Controles de ingeniería
- Uso Food and Drug Administration aprobó recipientes de eliminación de objetos punzantes para disponer de, lancetas estériles de uso único utilizados. Utilice un barril de residuos biológicos debidamente etiquetado para cualquier otro material que entre en contacto con material posiblemente infectado.
- No llene demasiado el recipiente para objetos punzantes. Sólo llenar un contenedor de objetos punzantes a 3/4 de la capacidad antes de reemplazar el contenedor para evitar lesiones. Hay un indicador de plenitud compartimental en cada contenedor de objetos punzantes.
- Devuelva las sostenidos en el contenedor de objetos punzantes. No utilice el contenedor de objetos punzantes para cualquier otsu desecho.
- Deshágase de cualquier material no cortante que entra en contacto con un potencial de BBP en un barril de residuos biológicos correctamente etiquetado.
- Equipo de Protección Personal (PPE)
- Siempre use correctamente el PPE para proteger contra la infección de BBP. PPE utilizados durante la recogida de DBS incluye guantes, batas de laboratorio, gafas protectoras, pantalones largos y zapatos cerrados.
- Use guantes para manipular sangre o cualquier cosa que se ha puesto en contacto la sangre u otros materiales potencialmente infecciosos (OPIMs). Los guantes no deben ser demasiado apretada ni demasiado suelta, ya que esto puede impedir el proceso de "ordeño" (que se describirá más adelante). No use anillos, mientras que la recogida de muestras de sangre, ya que podría perforar el guante.
- Use una bata de laboratorio para proteger la piel y la ropa de la sangre y OPIMs. Una bata de laboratorio que haya estado en contacto con un BBP debe ser lavada en una solución de lejía / agua al 10% antes de su reutilización. Independientemente de la exposición, la bata de laboratorio debe lavarse con regularidad para evitar que capoyarse.
- Use zapatos de punta cerrada para proteger los pies contra el posible contacto con la sangre y OPIMs.
- Si lo desea, use gafas de protección contra el posible contacto con la sangre y OPIMs debido a salpicaduras.
- Para mantener la limpieza de un espacio de trabajo, retire todo el PPE antes de salir del área de trabajo para evitar la contaminación de los elementos fuera del área de laboratorio.
- Controles de prácticas laborales
- Lávese las manos con agua tibia y jabón por 20 segundos antes y después de tener contacto físico con cada participante. Use una toalla para cerrar el agua corriente. Si un fregadero no está disponible, utilice un desinfectante para las manos de al menos 60% de alcohol.
- Independientemente de la oportunidad de lavarse las manos, usar desinfectante con alcohol antes de aplicar y después de quitarse los guantes. Utilice suficiente desinfectante para cubrir todas las superficies de las manos y frote las manos hasta que se seque. No enjuague o limpie las manos secas con una toalla ya que esto reducirá la eficacia del desinfectante.
- No coma nibeber o aplicar maquillaje o lentes de contacto en las zonas de extracción de sangre. La exposición personal a BBPs podría ocurrir a través de estos caminos que son rutas directas a las membranas mucosas.
- No manipule el material de riesgo biológico sin guantes y no manipule materiales no peligrosos con los guantes que hayan tocado previamente el material de riesgo biológico.
- La limpieza adecuada
La buena limpieza continuará para ayudar a proteger contra la exposición a un BBP e impedirá la contaminación entre el medio ambiente.- Utilice paños desinfectantes virucidas microbianos para adecuadamente las áreas limpias contaminadas durante la recolección de DBS.
- Mantenga riesgo biológico o residuos contaminados separado de la basura normal; materiales contaminados son los que tienen sangre visible u OPIM en ellos.
- Respuesta de la exposición
Si se expone a una BBP, responder de la siguiente manera.- Lavar inmediatamente la zona expuesta con abundante agua y jabón.La acción rápida puede reducir el riesgo de infección.
- Identificar el origen y la ruta de la exposición a ser capaz de explicar la situación al supervisor de campo y / o el médico de responder.
- Notifique al supervisor de turno inmediatamente después de que ocurre la exposición. Se hace hincapié en obtener el apoyo de un supervisor de campo para entender el nivel de riesgo para la infección por lo que se puede evaluar si es necesaria la atención médica inmediata. Directrices establecidas en los Planes de Control de Exposición específicos (PAE) deben ser proporcionados a todos los que están en peligro de ser expuestos a BBP.
2. Configuración de la sala de colección y Materiales
- Seleccione un lugar de recogida de muestras que no está diseñado para comer, como una sala de descanso, y que está libre de todo el equipo del proyecto no relacionado. Uno no quiere estar en un área que está lleno de gente, sino que es importante contar con la facilidad de movimiento. A continuación se describe cómo configurar la recolección de sangre seca in situ (lárea ab).
- Configure el barril de residuos de riesgo biológico y la línea del interior con una bolsa de residuos de riesgo biológico. El barril de residuos debe ser accesible mientras está sentado.
- Limpie la zona de recogida de fondo con toallitas desinfectantes o productos similares. Deseche todo el material utilizado para limpiar el área del laboratorio en el barril de residuos de riesgo biológico. Use guantes durante este paso para proteger la piel de la exposición a productos químicos nocivos.
- Reemplazar los guantes y configurar restantes provisiones de cobranza.
- Coloque los guantes y alcohol desinfectante de manos en la tabla de colección.
- Coloque el contenedor de objetos punzantes al alcance de la silla del colector. El contenedor de objetos punzantes deben ser manejados con guantes en todo momento y luego desechados de manera adecuada cuando esté lleno.
- Coloque todos los materiales restantes necesarios para la recogida de DBS en un underpad de protección en la zona de recolección. Incluya una tarjeta de recogida de papel filtro, un par de lancetas, toallitas de alcohol, gasas y curitas, pero no demasiados por lo que la zona está abarrotada. HacerNo instale más de lo que podría ser utilizado para cada participante.
3. DBS Cellection Muestra
Siempre use PPE (bata, guantes, pantalones largos, zapatos con punta cerrada y si se desea, las gafas de seguridad) durante la recogida y se coloca una almohadilla inferior de protección (chux) en la vuelta para proteger la ropa de uno de la calle.
- Preparación del participante:
- Después de obtener el consentimiento, pida al participante si él / ella prefiere usar la mano izquierda o derecha para colección y selecciona un dedo para la colección. Evitar (laceradas) dedos fuertemente callosas o dañados y cualquier dedos anillados. Normalmente, el dedo meñique y el pulgar no se seleccionan a fin de minimizar el dolor participante y facilitar la recogida, respectivamente. Los lados de las puntas de los dedos se utilizan como el sitio de recogida para la consistencia y facilidad de recogida.
- Haga que los participantes se frotan las manos para calentar sus manos y estimular el flujo de sangre. A wa manormer pueden utilizarse, o el participante puede correr sus manos con agua tibia si un fregadero está disponible. Otra técnica para estimular el flujo de sangre sería tener el participante alternativamente apretar y relajar el lado objetivo, luego descansar por completo antes de la punción en el dedo.
- Limpie el dedo seleccionado con un algodón con alcohol y deje que se seque completamente. Repita con la segunda almohadilla con alcohol para eliminar totalmente cualquier contaminante o lociones para las manos. El dedo debe estar completamente seca antes de proceder con la punción del dedo o el alcohol va a contaminar la muestra de sangre. Al igual que con todos los materiales de recolección utilizados, deshágase inmediatamente de las toallitas con alcohol en el envase para peligros biológicos.
- Preparación de la zona de punción en el dedo del participante:
- Asegure el brazo del participante para evitar el movimiento durante la recolección y para relajar el brazo y músculos de la mano. Descanse el codo del participante en el borde de la mesa o en su regazo. Mantenga la mano pos del participanteitioned cómodamente por debajo del nivel del corazón y sus músculos relajados para facilitar el flujo de sangre.
- Agarre el dedo elegido entre el pulgar y el dedo índice y la leche suavemente el dedo por la lenta y firmemente apretando el dedo mientras se mueve al alcance de la palma de la yema del dedo para extraer la sangre hacia la punta del dedo.
- Pulse el micro-lanceta firmemente contra el dedo del participante perpendicular a la huella digital y expulsar la lanceta. No perfore el centro del dedo o cerca del lecho de la uña, sino apuntar entre esos dos puntos, en el lado cubital del dedo. Inmediatamente deseche la lanceta usada en el contenedor de objetos punzantes.
- Recopilación de las manchas de sangre:
- Limpie la primera gota de sangre con una gasa estéril para retirar el líquido de los tejidos de la muestra y disponer inmediatamente de la gasa en el barril de residuos de riesgo biológico.
- Mientras se mantiene la mano del participante por debajo de su corazón con un ángulo hacia abajo, genla leche de partida TLY la mano en la muñeca y trabajar hacia abajo a la base del dedo para producir sangre. No se limite a apretar con el dedo, ya que esto reducirá el flujo de sangre. Leche con el dedo hasta que una gota grande está colgando de la punta del dedo.
- Recoge los puntos utilizando el papel de recogida.
- Coloque con cuidado el papel de recogida por debajo del dedo y deje que la gota caiga por su propio peso. Esto permite la recogida de manchas de sangre de volumen máximo. Si la sangre se acumula en el papel de filtro, es decir, "beads", golpee suavemente la tarjeta para animar a la sangre para saturar en el papel.
- Si la sangre es demasiado viscoso o gotas son demasiado pequeños para caer por su propio peso, poner lentamente el papel de recogida en contacto con la gota de sangre para absorber la sangre desde el dedo a través de la acción capilar sin tocar el dedo. Si el dedo toque el papel colección, trasladarse a otro lugar en el papel que el área de la colección se ha visto comprometida. Dedo sho del participanteuld nunca toque el papel de filtro.
- No coloque gotas de sangre en la parte superior de unos a otros, si una mancha de sangre no llena el círculo colección.
- No dejes que la sangre correr por el dedo o en la uña, ya que hace que la recolección de grandes manchas más difíciles.
- Si la sangre de los participantes coagula cualquier momento durante el proceso de recolección, pedir permiso para pinchar otro dedo, y luego limpia y vendar el sitio de punción inicial y empezar de nuevo, si se acepta la solicitud.
- Para prevenir la coagulación, continuar ordeñando dedo del participante para mantener la sangre fluyendo o intente limpiar con firmeza la punción con una gasa estéril para interrumpir la formación de coágulos.
Nota: Las huellas palos posteriores pueden ser necesarios por varias razones: Una sala de frío puede provocar la coagulación más rápida, también la viscosidad de la sangre de los participantes puede que no sea ideal, o las técnicas de ordeño pobres también puede afectar el flujo de sangre. Calentadores de manos, o chorro de agua tibia, que se utiliza antes de punctura puede revertir el efecto de una cámara frigorífica.
- Para prevenir la coagulación, continuar ordeñando dedo del participante para mantener la sangre fluyendo o intente limpiar con firmeza la punción con una gasa estéril para interrumpir la formación de coágulos.
- Una vez que los DBS se han recogido, o si el participante no quiere posteriores dedos palos, limpiar la zona de la punción de sangre extraña.
- Cubrir bien el sitio de punción para evitar posible contaminación una vez que el participante sale de la zona de recogida de muestras.
- Control de Calidad FI (QC) Evaluación:
Al término de toma de muestras, las muestras para evaluar la calidad. Asegúrese de manchas son 1) al menos 0,375 en diámetro según se mide desde la parte posterior de la zona de recogida; 2) empapado adecuadamente a través del papel de recogida de manera que sea de tamaño similar en ambas caras del papel filtro, manchas que no cumplan este criterio indican colección a través del contacto de los dedos para el papel de recogida y es probable que se corra; 3) no en contacto uno con el otro (las zonas de superposición de manchas no son ensayable). - Finalización de la recogida de la muestra
- Siguiendo guitrices que se describen en el paso 1.1, venta de cualquiera restantes materiales de la colección contaminados, incluidos los elementos que pueden haber estado en contacto con materiales potencialmente infecciosos.
- Coloque el papel de recogida en un underpad protectora para secarse. Espacio las tarjetas de cobro para permitir buena circulación de aire entre ellos. La cantidad mínima de tiempo que se seque al aire es de 15 min, preferiblemente de al menos 30 min. Para permitir el flujo de aire máximo, es importante para plegar la parte posterior de la tarjeta de colección de una manera que puede colocarse libremente y proporcionar un flujo de aire detrás de las muestras sobre el papel de recogida.
- Con todos los pasos, retire PPE.
- Respuesta a una leve sensación de tema o no están bien
Aunque es poco probable, un participante puede padecer mareos, aturdimiento o desmayo durante o después de la punción en el dedo. Esté alerta a los signos como palidez, sudor en la cara y la frente, las quejas de visión borrosa, caída de los párpados o aleteo, o quejas de náuseas. El inicio de la Tstos síntomas suele ser repentino; recolectores de muestras deben estar preparados para responder rápidamente si alguno de los síntomas son visibles. Si cualquiera de estos síntomas se presentan en cualquier momento durante el procedimiento, reaccionará de acuerdo con los siguientes procedimientos.- Si un participante se siente débil, mareado, mareado, o muestra signos de desmayo, tomar las siguientes acciones:
- Detenga el procedimiento.
- Tenga cuidado de que el participante no se cae o se lesiona.
- Con calma tranquilizar al participante y si es necesario, pida al participante que doblar la cintura y poner su / su cabeza entre sus / sus piernas. Si la movilidad es limitada y el participante se puede mover, una ubicación adyacente acolchado se puede utilizar para descansar.
- Haga que el resto de los participantes durante 10 min.
- Reanudar el procedimiento si los participante da su consentimiento para continuar.
- Si un participante se desmaya, tome las siguientes medidas:
- Detenga el procedimiento.
- Tenga cuidado de queel participante no se cae o se lesiona.
- Tener la mentira participante en su / su espalda lo más rápido posible con los pies elevados. El participante se le instruyó que se acueste directamente de la posición de sentado sin ponerse de pie.
- Pida al participante para aflojar la ropa apretada.
- Haga que el resto de los participantes durante 10 min.
- De la mancha de sangre no debe continuar.
- Si el participante no responde después de 1 minuto, llame al 911.
- Si un participante se siente débil, mareado, mareado, o muestra signos de desmayo, tomar las siguientes acciones:
- Romper el área de laboratorio:
Una vez que la colección de muestras de sangre se ha completado, el área de recolección debe ser dividido y el área descontaminada para asegurarse de que los transeúntes no se infecte por BBP. La zona de extracción de sangre, los contenedores de recogida de equipos, materiales y contenedores de residuos debe estar limpio de BBP. Como siempre, usar el EPP cuando se manejan materiales potencialmente infecciosos.- Eliminar de la zona de recogida yvuelva a embalar todos los materiales no contaminados.
- Deshágase de cualquier material de desecho contaminado restante en el barril de residuos biológicos.
- Cierre el contenedor de objetos punzantes y guárdelo en un área que proporciona protección contra la contaminación. Si el contenedor de objetos punzantes es de 3/4 de su capacidad, debidamente disponer de él y reemplazarlo con un nuevo contenedor de objetos punzantes.
- Limpie toda la zona de recogida de muestras con virucidas toallitas desinfectantes microbianos.
- Una vez que todo el material de riesgo biológico se ha eliminado, la bolsa de riesgo biológico puede esterilizarse en autoclave. Al retirar la bolsa del barril de residuos, tenga cuidado de tocar sólo la parte exterior de la bolsa y sellar bien la bolsa. También es una buena práctica utilizar microbiana virucida toallitas para limpiar el exterior de todo el equipo para evitar la contaminación cruzada.
4. Capacitación para recopilar DBS
Verifique cualquier coleccionista de gotas de sangre seca está certificada por una persona calificada antes de realizar el procedimientoDuré en pacientes o sujetos de investigación. Asegúrese de coleccionistas demuestran respeto por los participantes, la confianza y la competencia en el uso de equipo de protección y de los suministros de extracción de sangre, en la colección de puntos de volumen suficiente, y en la realización del procedimiento en forma oportuna y eficiente, a ser posible en menos de 10 min.
5. Embalaje y almacenamiento de muestras
- Asegúrese de muestras de DBS se han secado durante al menos 15 minutos antes de que se embolsan para almacenamiento, una tarjeta saturada puede tardar 30 minutos o más para adecuadamente seco. Cierre la tapa de la tarjeta de recogida, asegurando la muestra esté completamente seco para evitar manchas y la contaminación de la muestra.
- Tome una bolsa de muestras de peligro biológico y coloque una bolsa desecante en la bolsa de muestra. Coloque la muestra de DBS en la bolsa de muestras de peligro biológico. Siempre use guantes al manipular muestras de DBS. No permita que las muestras de sangre para tocar la parte exterior de la bolsa de muestra.
- Colocar cada muestra en su propia bolsa de riesgo biológico muestra el ingenioja paquete desecante. Acoplar la bolsa para eliminar el exceso de aire y luego sellar bien la bolsa. Colocar la muestra en bolsas en un refrigerador de almacenamiento para el transporte o el almacenamiento temporal. Evite temperaturas elevadas.
- Congelar o ensayo muestras de DBS dentro de dos semanas de colección, como muestras de DBS pueden ser almacenadas normalmente a temperatura ambiente durante dos semanas sin degradación significativa dependiendo de analito 7,2.
6. Transporte de muestras y envío
- A menos que se sabe que contienen agentes infecciosos, nave seca muestras de sangre como muestras humanas exentas bajo regulaciones del Departamento de Transporte de los EE.UU. y de conformidad con la Parte 2, Capítulo 6, § 6.3.2.3.6 de la Organización de Aviación Civil Internacional (OACI) Instrucciones Técnicas 8 .
- Si se congela, envíe muestras durante la noche en el hielo seco con las precauciones necesarias para sustancias peligrosas, o con gelpaks congelados a -80 ° C. Nave en lunes a miércolespara evitar el deshielo en el tránsito debido a los retrasos o fines de semana / días de fiesta, con la confirmación del lugar de recepción que están esperando y listo para recibir y congelar muestras.
7. Evaluación del Control de Calidad
- Después de la recolección y antes del ensayo (preferiblemente antes de la congelación con el fin de minimizar el número de ciclos de congelación-descongelación) evaluar muestras de calidad.
- Incluya los siguientes criterios en la evaluación de la calidad de la muestra, el embalaje adecuado, desecante un código de colores que permanecen intactos (seco), la saturación de los puntos, el tamaño de los lugares, métodos de recolección apropiados incluyendo manchas no se solapan y con manchas en la tarjeta que indica el contacto con sujetos dedo.
8. Freezer Storage
Aunque los tiempos de degradación se diferencian por analito, congelar las muestras de DBS dentro de dos semanas de la colección para obtener mejores resultados. Congelar las muestras con desecante en un congelador de laboratorio de grado. Al igual que con cualquier muestra biológica, reducir al mínimo la congelación-descongelación cycles, aunque algunos ensayos en muestras de DBS no han mostrado evidencia de degradación en hasta seis ciclos de congelación-descongelación 9-11.
Representative Results
Figura 1. Secado de muestras de gotas de sangre. Una tarjeta de colección se muestra con cuatro puntos recogidos, válido en el proceso de secado. Haz clic aquí para ver la imagen más grande.
Se muestra en la Figura 2. Buenas y malas muestras de sangre seca. Resultados de éxito (a la derecha) y sin éxito (izquierda) Colección DBS. Haga clic aquí para ver la mayor imedad.
Figura 3. Actitudes y prácticas asociadas con el riesgo de enfermedades cardiometabólicas empleado 6 Managers '. Esta cifra ha sido modificado de Berkman, LF, Buxton, OM, Ertel, K. & Okechukwu, C. Prácticas del Administrador relacionados con el trabajo familiar equilibrio predicen cardiovascular empleado el riesgo y la duración del sueño en los entornos de cuidados prolongados. Journal of Occupational Health Psychology 115, 316-329 (2010). Los empleados expuestos a los administradores con las puntuaciones entre trabajo y familia a mediados o bajos de la apertura y la creatividad para ayudar con el trabajo de sus empleados y la necesidad de la familia, han aumentado las probabilidades estadísticamente significativas de tener dos o más riesgos cardiovasculares (fumador actual, la obesidad, presión arterial alta o bombortension, colesterol alto y alto de hemoglobina glicosilada (Hb A1C) o el diagnóstico de la diabetes). Los paneles superior e intermedia representan valores medios ± desviación estándar para el colesterol total evaluada por gotas de sangre seca y Hb A1C evaluado por dispositivo de punto de atención (que también puede ser medido de forma fiable por manchas de sangre seca). El panel inferior muestra el riesgo de enfermedad cardiovascular en un puntaje de gerente. El análisis se limita a las enfermeras y otros empleados que prestan atención directa indican que la exposición a los gestores con baja creatividad y apertura relacionadas cuestiones para trabajar en la familia puede ser particularmente importante para estas personas (OR para la puntuación baja WF = 6,4, p = 0,01). Todos los modelos de control para la edad, sexo, salario, educación, raza / origen étnico y lugar de trabajo. Haga clic aquí para ver la imagen más grande.
Discussion
Los biomarcadores son herramientas de gran utilidad en múltiples disciplinas, como la medicina, la biología celular, la genética, la psicología, la sociología, la demografía y la epidemiología social. Dentro de cada disciplina, se utilizó la validez y fiabilidad de fase temprana investigación de biomarcadores para descubrir tanto el riesgo de enfermedad oculta y proporcionar la predicción longitudinal de los resultados de salud. En estos casos, los biomarcadores que sean precisos, duraderos (es decir, que pueden sobrevivir el retraso entre la recogida y la aplicación de la prueba de laboratorio de la muestra para extraer el biomarcador), y versátil (es decir, útil en una variedad de modelos) se requiere.
Mientras colección DBS es un procedimiento relativamente sencillo, varias técnicas pueden ayudar a maximizar el volumen de puntos obtenidos. Antes de comenzar la captura, lo que garantiza la mano de un participante es cálido, y por lo tanto que los vasos sanguíneos se dilatan, le ayudará el flujo de sangre, una vez se pincha el dedo. El uso de calentadores de mano o tener unparticipante ejecutar sus manos con agua tibia puede ayudar con este proceso. Ordeño con el dedo antes de la recolección se tire de sangre a la punta del dedo y calentar la mano para ayudar a la circulación sanguínea. El ordeño es un proceso que mejora con la práctica. Los colectores deben utilizar cualquier técnica que les resulte más cómodo y eficaz, pero el enfoque más común consiste en el ordeño manual del participante con la mano opuesta del colector. Este método permitirá que el pulgar del colector para trabajar profundamente en la palma de la participante, mientras que la otra mano puede estabilizar la muñeca del participante. A modo de ejemplo, si se estaban recogiendo sangre de un dedo en la mano izquierda del participante, el colector se estabilizaría la muñeca del participante con la mano izquierda y la leche con la mano derecha. Errores comunes que se cometen mientras ordeño no incluyen el uso de un agarre firme, tirar de la piel por encima de la mano en lugar de trabajo en los músculos para tirar de la sangre hacia la punta del dedo. También es importante evitar pasadorChing el dedo con la mano de ordeño o bien de agarre de la muñeca del participante con la mano sin ordeño, ambos de los cuales impide el flujo de sangre.
Al pinchar el dedo, hacer que el pinchazo lo más profundo posible, presionando firmemente la lanceta en el dedo antes de la descarga. Una punción superficial resulta en menos flujo de sangre y la coagulación más rápido. Después de la punción del dedo, trabajando con rapidez es la clave. Finos de sangre conduce a la colección más fácil y manchas más grandes. Después de la punción, la sangre se vuelve más y más viscosa hasta que la coagulación. Cuanto menos tiempo necesario para recoger las gotas de sangre en la tarjeta mayor es su volumen.
Lo ideal sería que la sangre de los participantes será lo suficientemente fina que cae, caerá por su propio peso, pero esto no será el caso para todos los participantes, como la sangre de algunas personas es más gruesa o coágulos más rápido que otros. Si la sangre es demasiado gruesa como para caer del dedo, la tarjeta de filtro se debe traer a la sangre para la colección. Whes llevar la tarjeta a la sangre es importante para mantener la tarjeta en contacto con la gota mientras se está colgando del dedo durante el mayor tiempo posible, en lugar de simplemente frotando la sangre a la tarjeta. Esto ayudará a la sangre tirón del dedo para maximizar el tamaño de la mancha. Esta técnica requiere manos firmes para mantener el contacto entre la sangre y la tarjeta. Con las dos manos, una para estabilizar la mano a los participantes y otra para sostener la tarjeta, y mantener las dos manos en contacto entre sí ayuda a estabilizar la tarjeta y la sangre juntos.
Áreas de investigación avanzadas, tales como la evaluación del riesgo cardiometabólico, siempre han confiado en los biomarcadores, como la proteína C-reactiva (PCR), la insulina y la hemoglobina glicosilada (HbA1C) para la detección temprana del riesgo y los esfuerzos de prevención, así como biomarcadores de "puntos finales duros" para la enfermedad cardiovascular (ECV) y mortalidad por ECV asociada 12. Epidemiología clínica con frecuencia evalúa biomarcadores para prospectively predecir los resultados de riesgo cardiometabólico, como la enfermedad cardíaca y la diabetes tipo II. Tal vez el más utilizado de todos los biomarcadores es la puntuación de riesgo de Framingham, un compuesto que incluye la presión arterial, los niveles de colesterol HDL y los niveles totales de colesteroles que ha demostrado utilidad en la predicción de ECV 13. Sin embargo, la puntuación de Framingham ha experimentado algunas controversias técnicas, y tiene limitaciones en los estudios centrados en la vinculación de los factores sociales y ambientales para la salud, lo que sugiere la necesidad de biomarcadores más precisos y específicos relacionados con la investigación cardiovascular.
Hay una serie de kits disponibles comercialmente utilizando ELISA o técnicas similares disponibles para el ensayo de muestras de DBS. Necesario para el ensayo de muestras de DBS son el uso de medidas específicas y optimizadas de elución para traer las muestras secas en la solución 2. Se trata de una zona en expansión de la investigación como se están desarrollando ensayos para varios analitos 1. Entre ªensayos e ya validadas y ampliamente utilizados son el colesterol 2, CRP 10,14,15, IgE16, EBV 9,15, la leptina 17 y cyotkines 18. Hay una serie de laboratorios especializados en el análisis de la DBS, incluyendo la Universidad de Washington Departamento de Medicina de Laboratorio (UW Lab Med) biomarcadores Laboratorio (Director: Mark Wener).
Teniendo en cuenta que un panel de biomarcadores, en lugar de un biomarcador solitario, es más útil en los campos de la investigación cardiovascular y diabetes, los biomarcadores deben ser considerados junto con una variedad de factores contextuales con el fin de maximizar su utilidad. La investigación de biomarcadores puede ser costoso, sin embargo, tanto económicamente como en el tiempo de recogida de datos. Así, mientras que es de vital importancia para elegir los biomarcadores que sean precisos, duraderos y versátiles, el trabajo y la familia la investigación de biomarcadores debe estar arraigada en la practicidad al seleccionar biomarcadores que son baratos, apropiado y se puede recoger rápidamente wiª facilidad. Además, las consideraciones prácticas a menudo resultan en una incapacidad para maximizar simultáneamente precio, la calidad, y la velocidad dentro de un procedimiento. Aquí se encuentran los siguientes pasos en la investigación de biomarcadores de salud dentro de los estudios de campo y de población. El campo de la investigación de biomarcadores se encuentra actualmente en un período de crecimiento espectacular, sin embargo, la mayor parte del trabajo está por venir.
Disclosures
Orfeu Buxton ha recibido una beca de investigación iniciada por Sepracor Inc (ahora Sunovion; CERS-0977, Identificador ClinicalTrials.gov NCT00900159); sirve como consultor y testigo experto de Dinsmore LLC, en el Consejo Asesor Científico de Matsutani América, y recibió asesoría honorarios de la Wake Forest University Medical Center.
Acknowledgments
Este trabajo fue apoyado por el trabajo, la familia y la Red de Salud (www.WorkFamilyHealthNetwork.org), que es financiado por un acuerdo de cooperación a través de los Institutos Nacionales de Salud y los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades: Eunice Kennedy Shriver Instituto Nacional de Salud Infantil y Desarrollo Humano (Grant # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), el Instituto Nacional sobre el Envejecimiento (Grant # U01AG027669), Oficina del Comportamiento y Ciencias Ciencias de Investigación, Instituto Nacional del Corazón, los Pulmones y la Sangre (R01HL107240), y el Instituto Nacional para la Seguridad Seguridad y Salud (Grant # U01OH008788, U01HD059773). Becas de la Fundación William T. Grant, Alfred P Sloan Fundación, y la Administración para Niños y Familias ha proporcionado financiación adicional. Los contenidos de esta publicación son de exclusiva responsabilidad de sus autores y no representan necesariamente la opinión oficial de estos institutos y oficinas.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Asepti II Microbial Wipes | EcoLab | D12330345 | 3rd party shipping |
| Biohazard waste bags | VWR | 14220-092 | High Strength Autoclavable Polypropylene Biohazard Bags, 2 mil |
| Biohazard waste barrel | Tyco | 58578-092 | 8 g Slide lid |
| Sharps Container | BD Medical | BD305487 | 1.4 qt |
| Chux | VWR | 82020-845 | Absorbent bench underpads |
| Gloves | VWR | XSmall: 89038-267 | Powder-free, latex-free nitrile gloves |
| Small: 89038-268 | |||
| Medium: 89038-270 | |||
| Large: 89038-272 | |||
| XLarge: 89038-274 | |||
| Hand sanitizer (e.g. Purell) | Johnson Johnson | 89040-210 | 3rd party shipping |
| Alcohol wipes | Webcol and Curity | 82003-856 | Prep pads |
| Gauze | Versalon | 82004-826 | Nonwoven sponges |
| Band-Aids | Nutramax Stat Strips | 15431-475 | |
| Lancets | Owen Mumford | 82028-060 | 3.0 mm, 21 G |
| Protein paper collection cards | Whatman | Custom-build | 903 Protein Saver Collection paper |
| Desiccant | VWR | 61161-319 | Humidity sponges |
| Specimen bags | Lab Guard Reclosable Biohazard Bags, ITW Minigrip | 56766-370 | 6 in x 9 in |
| Specimen storage cooler | Igloo | Playmate Mini | 4 qt; direct from manufacturer |
References
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