Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer.
Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen’s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.
Djurmodeller ge insikt i sjukdomspatologi, som inte kan erhållas genom in vitro-analys. För att åstadkomma de mest effektiva resultaten, är det viktigt att använda en djurmodell som är nära relaterad till sjukdomen och arter av intresse. Till exempel, Reeves muntjac (muntiacus reevesi), en liten asiatiska rådjur 1,2, och transgena möss som uttrycker den cervid prionprotein (CerTgPrP) 3, är användbara djurmodeller för cervid arter. Båda arterna är polyestrous, vilket gör året runt avel, och därmed en enhetlig källa för graviditetsrelaterade vävnader och vätskor för att studera specifika mekanismer i hjortdjur biologi. Studier av mjölk har ett brett spektrum av applikationer som är mer helt enkelt (och billigt) åstadkommit i djurmodeller än hos människor. Forskare kan undersöka mjölk och råmjölk som en potentiell källa till 1) smittsam sjukdom sprids, 2) immunoglobuliner överförs från mor till avkomma i utveckpment av passiv immunitet 4 och 3) laktoferrin, ett protein som finns i bröstmjölk inblandad i passiv immunitet som forskare för närvarande försöker att producera kommersiellt 5.
Samla en väsentlig mängd av mjölk från små djur kan visa sig vara en svår uppgift. Rogers föreslog en metod för att samla in mjölk från råttor 6, som sedan användes i möss. DePeters och Hovey föreslagit två metoder för uppsamling av mjölk, en med användning av en manuellt genererat vakuum som produceras av en gummi pipett glödlampa ansluten till en pasteurpipett, och en andra som kräver konstruktion av en mjölkningsenhet, som sedan är fäst vid en vakuumkälla (exempelvis som en kran) för att skörda mus mjölk 7. Här föreslår vi en enkel, billig metod för insamling av mjölk från både möss och Reeves muntjac rådjur, som kräver endast lätt tillgängliga laboratorieutrustning och grundläggande teknisk kompetens. Vår metod ger tillräckliga volymer av mjölk för olikaapplikationer.
Mus
Det finns flera faktorer att ta hänsyn till när man samlar in mjölk från en mus, däribland 1) den tid som avsatts för insamling, 2) den dos av oxytocin administreras, 3) hur många valpar dammen är idag omvårdnad och 4) det belopp tid som har gått sedan förlossning vid tidpunkten för insamlingen. Med hjälp av tidigare studier som riktlinjer, vi ut för att optimera förutsättningarna för mjölkproduktion.
Tidigare forskning har …
The authors have nothing to disclose.
These experiments were funded by the NIH grant #RAI093634A. We express immense gratitude to Jenny Powers, DVM, PhD, for her assistance in muntjac milking.
Materials-Mouse | |||
Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
Ketamine (KetaVed 100 mg/mL) (dose: 80-100 mg/kg) | MWI/Vedco | 011075 | |
Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose:5-10 mg/kg) | MWI/Vedco | NADA 139236 | |
Eye lubricant | MWI/Apexa | 701013 | |
Oxytocin (2 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
Materials- Muntjac | |||
Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
Midazolam (1-2 mg/kg) | Amerisource Bergen Drug Corp | 924326 | optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic |
Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health | NADA 135-780 | |
Azaperone tartrate (0.25 mg/kg) | ZooPharm | ||
Medetomadine HCl (0.07 mg/kg) | ZooPharm | ||
Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg) | Orion Corporation | NADA 141-033 | |
Oxytocin (10 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
Equipment- Mouse | |||
Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
P-200 Pipetman | Gilson | F123601 | |
200 μL pipette tips | Light Labs | B-2004-SH | |
1 ml syringes | MWI | 005427 | |
27 gauge needles | MWI | 002031 | |
Equipment- Muntjac | |||
Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
15 ml conical tubes | VWR | 21008-918 | |
22 gauge needles | MWI | 873 | |
3 ml luer lock syringes | MWI | 001377 |