Summary
예방 및 치료 백신은 종종 노드와 면역 세포의 결과로 가난한 참여 림프로 인해 백신의 주 배수에 강한 면역 반응을 자극하는 데 실패합니다. 림프절 백신의 직접 주사에 의해, 소위 intralymphatic 주입은 백신 효능 강하게 개선 될 수 있으며, 백신의 투여 량을 저감 할 수있다.
Abstract
백신은 일반적으로 면역 반응의 자극을 위해 피하 또는 근육 주사합니다. 이것의 성공은 항원 제시 세포가 원하는 면역 반응의 생성을 위해 림프구와 상호 작용할 수있는 림프절에 백신의 효율적인 배수를 필요로합니다. 강도 및 유도 된 면역 반응의 유형은 밀도 또는 주파수의 상호 작용뿐만 아니라, 미세 환경, 사이토킨, 특히 콘텐츠에 의존한다. 말초 주입 백신만을 분 분획 림프절에 도달 할 때, 마우스 및 인간의 예방 접종 서혜부 림프절, 즉 intralymphatic 주사로 백신의 직접 주입에 의해 수행되었다. 남자에서, 절차는 초음파에 의해 안내된다. 마우스에서, 작은 (5-10 ㎜) 절개, 림프절 지역화 및 집게로 고정화는 마취 된 동물의 서혜부 영역에 만들어지고, 백신의 20 μL의 부피는 카메라 제어하에 주입한다.절개 수술 봉합사를 사용하여 하나의 스티치 닫힙니다. 마우스는 플라스미드 DNA, RNA, 펩타이드, 단백질, 입자, 박테리아뿐만 아니라 보조제 접종하고, 백신의 모든 유형에 대한 면역 반응의 강력한 개선이 관찰되었다. 예방 접종의 intralymphatic 방법은 기존의 예방 접종이 부족 면제 또는 가능한 경우 백신의 양이 한정되어 생산 상황에 특히 적합합니다.
Introduction
백신은 일반적으로 면역 반응의 자극을 위해 피하 또는 근육 주사합니다. 이 절차의 성공은 항원 제시 세포는 T-와 B-세포 반응의 생성을 위해 림프구와 상호 작용할 수있는 림프절에 백신의 효율적인 배수를 필요로합니다. 또, 강도 및 유도 면역 반응의 유형은 밀도 또는 주파수와 같은 상호 작용뿐만 아니라 미세 환경 자체, 사이토 카인, 특히 콘텐츠에 의존한다. 말초 조직에 주입 백신의 단지 작은 분획이 림프절에 도달 할 때, 림프절로 백신의 직접 주입에 의해 생쥐와 인간의 접종은, 사이트가 면역 반응을 생성하고, 수행되었다. 사람에서의 절차는 초음파, 또한 림프 시스템의 시각화 및 진단을위한 이미징 요원의 관리에 사용되는 절차에 의해 안내된다. 마우스에서, 절차는 침습적이다. 여기에, 작은 (5 ~ 10 ㎜) incisioN 마취 된 동물 1의 서혜부 제, 림프 노드는 지역화 포셉 고정화하고, 백신의 10 ~ 20 μL의 부피는 시각 제어에 주입되고, 10 ㎕를 먼저 주사에 사용되는 젊은 생쥐 작은 림프 노드와, 반면에 20 ㎕의 큰 림프절이 림프 세의 노드 또는 이미 끝났다 마우스에 주입 할 수있다. 절개 수술 봉합사를 사용하여 하나의 스티치 닫을 수 있습니다. 이 방법으로, 마우스는 플라스미드 DNA, 3, 메신저 RNA 4, 펩타이드 1,3,5,6, 단백질 7 ~ 10, 11를 입자, 박테리아 (12)뿐만 아니라 보조제 7,13, 면역의 강력한 개선과 예방 접종 백신의 모든 유형에 대한 반응이 관찰되었다. 예방 접종의 intralymphatic 방법은 기존의 예방 접종이 부족한 면역을 생산 또는 사용 가능한 백신의 양이 제한 또는 버전입니다 상황에서 특히 적합하다비용이 많이 드는 예. 인간의, 예방 접종의 intralymphatic 방법은 알레르기 환자 14, 15 또는 암 16-21 환자에 적용되었습니다. 현재의 개념이 intralymphatic 방법 등 근육 및 피하 주사 등의 주사 방법보다 더 침습적 인 것입니다 만, 고통의 인식은 정맥 천자 (15) 후보다 높은 없습니다. 그것은 intralymphatic 예방 접종은 질병 예방 및 치료, 특히 예방 접종의 다른 방법에 대한 대안 또는 보완 될 것으로 예상된다. 이 문서 intralymphatic 예방 접종의 절차가 생쥐에서 수행하는 방법을 상세하게 설명합니다. 설명 모든 절차는 취리히의 주립 수의학 기관의 승인을 스위스 연방 정부의 가이드 라인과 과학적인 목적으로 사용되는 동물의 보호에 관한 지침에 따라 수행 하였다.
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Protocol
1. 쥐의 마취
- 완충 식염수에 케타민 (해리 성 마취제)과 자일 라진 (진정제 및 진통제)을 혼합하여 마취제를 준비합니다. 최종 솔루션에서 케타민과 자일 라진의 농도는 각각 12.5, 2 ㎎ / ㎖이다.
- 25 ~ 30 G 바늘과 주사기를 사용하여 복강 내 투여하여 마우스에 마취제를 주입한다. 체중의 0.1 ml/10 g을 사용합니다.
- 각막의 건조 아웃을 방지하기 위해 마우스의 눈에 안과 연고를 적용합니다.
- 마우스가 충분히 집게와의 발이나 발가락을 집어 마취 확신한다. 마우스가 핀치에 반사와 반응하지 않는 경우 수술을 진행합니다. 마우스는 반사 신경이나 근육의 수축과 핀치에 반응하는 경우, 1 ~ 2 분 정도 기다린 핀치 테스트를 반복합니다. 마우스가 여전히 반응의 경우, 새로운 동물로 마우스를 대체하고 이후 단계 1.2의 절차를 반복합니다.
2. 외과 I마우스의 사타구니 지역의 ncision
- 그 뒷면에 마우스를 놓습니다.
- 소독 에탄올 (70 %)와 하나의 서혜부 십니다. 더 나은 소독을 제공하기 위해, 서혜부 에탄올 모피 전에 소독을 제거하는 면도 할 수있다.
- 뒷다리를 가지고 고관절의 약 90 °의 각도를 생산하는 엉덩이 관절을 구부립니다.
- 곡선 microdissecting 집게를 사용하여 엉덩이 관절이 구부러 서혜부에서 마우스 스킨을 약간 적신 피부를 당겨.
- 집게로 피부를 누른 상태에서, 외과 용 가위를 사용하여 피부를 통해 작은 절개 (<5 mm)를 절단.
- 절개 부위에 폐쇄 가위의 끝을 놓고 더 절개 안쪽을 잡고 가위를 열어 절개를 엽니 다. 이 찢어 및 10 mm 이하의 직경을 생산한다 피부를 일으킬 것이다. 주 :가요 라이트 가이드 등으로 감기 광원 시인성을 향상시키기 위해 사용될 수있다. 이전에마우스, 특히 남성, 림프절의 식별 인해 사타구니 지역에있는 지방이 많은 조직에 어려울 수 있습니다.
3. Intralymphatic 주입
- 28 ~ 30 G 피하 주사 바늘과 주사기 (0.5 ㎖ 이하)을 준비, 짧은 베벨 긴 베벨 것이 바람직 할 수있다. 백신의 대기음 10 ㎕를 주입 주사기가 공기 무료입니다 확신합니다.
- 곡선 포셉의 도움 폐쇄 가위의 끝을 가진 서혜부 림프절 지역화. 림프절은 더 흰 지방 조직 내에서 회색 표시되고 추가로 입력하고 림프절을 떠나 심성 및 원심성 모세 혈관을 통해 확인할 수 있습니다.
- 곡선 포셉의 가지 사이를 잡고 림프절을 고정시킨다.
- 주사기를 타고 위로 향하게 경사와 림프절에 바늘을 삽입하고 전체 경사가 림프절을 들어 확인하고.
- 백신 (10 μL)을 주입한다. 만약 림프 고개를 끄덕전자는 (폭파) 팽창되고, 주입이 성공적으로 가정 할 수있다. 바늘이 림프절에 깊은 충분히 배치되어 있지 않은 경우, 일부 또는 전체 백신은 누출 및 림프 노드를 입력 할 수 있습니다. 바늘이 너무 깊이 삽입하면, 주입 된 백신은 피하 림프 노드 아래에 발표 될 예정이다. 후자의 경우, 주사를 반복하거나 새로운 미처리 마우스로 마우스를 교체.
4. 봉합하여 절개 닫기
- 무균 수술 봉합의 팩을 엽니 다.
- 바늘 몸의 말단 부분에 바늘 홀더 봉합 바늘을 잡아. 첫 번째 래칫 어획량까지 짜내서 바늘 홀더를 조입니다.
- (톱니 또는 취소 톱니 포셉이나 피부 후크 사용될 수있는 외과 의사의 선호도에 따라) 집게를 사용하여 절개의 한면에서 피부의 보류를 가져 가라. 바늘 CA입니까. 2-3mm을 절개의 가장자리에서, 피부의 외부로부터 입력.
- 이보게집게로 피부의 유지 EN과 집게로 절개의 반대편을 파악. 바늘 CA입니까. 2-3mm을 절개의 가장자리에서, 피부의 내부로부터 입력.
- 바늘 홀더를 풀고 집게로 바늘 끝을 잡고. 여러 마우스가 처리 될 경우, 짧은 끝을 떠나 (제 1 바늘 삽입 지점 외부 트레드 편리한 길이를 떠나, 피부를 통해 접지면과 바늘을 빼낼 수 있지만, 5 ~ 10 마우스는 하나의 봉합 바늘에 운영 할 수있다 /) 밟다.
- 표준 외과 의사의 프로토콜에 따라 선호하는 매듭을합니다. 절개 부위가 10mm 이하인 경우 하나의 스티치가 충분하다. 큰 절개를 들어, 두 번째 스티치를합니다.
5. 후 운영 처리
- 새장에 마우스를 놓고 보온하는 조직 커버. 여러 쥐를 치료하면, 따뜻하게 서로에게 가까이 놓습니다. 그들이 깨어 때까지 다른 방법으로는, 따뜻한 패드에 마우스를 배치최대.
- 그들이 일어날 때까지 쥐를 관찰합니다.
- 치유뿐만 아니라 상처 감염과 같은 다른 임상 증상을 상처에 관해서는 매일 쥐를 관찰합니다. 상처는 일반적으로 충분히 이틀 폐쇄 절차의 7 일 이내에 치유됩니다.
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Representative Results
생쥐 intralymphatic 주사의 절차는 수술 성격에도 불구하고, 정직하고 상대적으로 빠르다. 훈련을받은 사람이 3 ~ 4 분의 절차를 수행 할 수 있습니다. 한 스티치 폐쇄 절개 일반적으로 두 일 이내에 치유 (그림 1)
Intralymphatic 백신 또는 면역이 mRNA를 사용하여 수행되었으며, 플라스미드 DNA, 펩타이드, 단백질, 바이러스 및 박테리아. 2 단백질 포스 포 리파제 A2 (PLA2), 주요 봉독 알레르겐 접종 후에 항체 생산을 도시도. CBA 마우스는 0.01, 0.1, 또는 피하 (SC) 또는 intralymphatic (ILN) 주사하여 수산화 알루미늄에 흡착 된 10 μg PLA2로 0 일, 14 일 및 28 일에 면역시켰다. PLA2 특이 항체 (의 IgG2a가) 8 주 후에 혈액에서 측정 한 결과 때 U 10 μg PLA2가 필요하면서 0.01 μg PLA2가 강한 항체 반응을 자극하기에 충분하다고 밝혀진피하 경로 9 노래.
Intralymphatic 접종은 또한 세포 독성 T 세포 반응을 자극하는 데, 예를 들어 CD8 T 세포의 자극에 대한 H-2dB의 컨텍스트에 MHC 클래스-I를 바인딩 LCMV 당 단백질에서 펩티드 gp33 (KAVYNFATM).되었습니다 gp33와 TCR318 마우스의 단일 피하 주사가 세포 독성 CD8 T-세포 반응을 유발하지만, 그 효과가 약 하였다. intralymphatic 주입 후 강한 크기의 여섯 주문 (그림 3A) TCR318 마우스는 gp33 1 특정한 CD8 T 세포 수용체 유전자 변형이다.
CD4 T-세포 기능은 또한 종양 도전 분석에서 시험 하였다. 다시 C57BL / 6 마우스에 피하 면역화 또는 intralymphatically CD4 T 세포의 자극에 대한 MHC 클래스-II를 바인딩 VSV의 핵 단백질에서 펩티드 np52 (SDLRGYVYQGLKSG)로하고, 펩티드 ODN의 CpG 1826와 혼합 하였다. 마우스에게 정맥 내 감염시켰다되면 동계 EL4의 종양 세포를 np52-발현, 마우스는 전신 림프종 (도 3b)을 개발 하였다. intralymphatic 경로로 면역 된 마우스는 피하 경로 (<이십이일)에 의해 예방 접종을 마우스보다 훨씬 더 긴 생존 시간 (> 75 일)를 보여 주었다.
intralymphatic 접종의 방법은 또한 특히 화분증 등의 알레르기의 치료를 위해, 사람에서 수행되었다. 이 방법은 현재 ILIT (내부 림프 면역 치료)로 알려져 있습니다. 꽃가루 알레르기를 가진 165 명의 환자에 대한 한 연구에서, 꽃가루 알레르기 2 개월 동안 3 ILIT 세션 3 년 이상 15 54 피하 주사와 기존의 치료로 동등하게 효율적이었다. 또한, 투여 량은 1,000 명 이상의 배에 의해 감소 될 수있다. 마찬가지로, 고양이 털 알레르기, intralymphatically 관리 고양이 모피 알레르기 3 세션 20 명의 환자에 대한 연구에서 나중에 알레르기 항원 노출 (14)에 개선 된 내성을 일으키는 원인이하기에 충분했다.
jove_content는 "> 피하 면역화에 비해 intralymphatic 면역 개선 효능 한 설명은 인간에 도시 될 수있다. 방사성 99mTc과도 4에 도시 된 바와 같이 표지 된 단백질을 이용하여 피하 주사는 림프절 저조한 드레인 관찰 과정 동안 직접 분사 intralymphatic 우편 림프계에 백신 전체 함량은, 그러므로, 면역 세포가 이용할 수있게하고 면역 반응 자극 (22). 유사한 결과 방사성 단백질 구 주입, 생쥐를 얻었다.
intralymphatic 주입 후 수술 상처의 그림 1. 치유가. 여성 BALB / c 마우스는 intralymphatic 주사로 예방 접종을했다. incis 이온은 하나의 봉합 스티치로 마감했다. 이틀 후, 수술과 주사 부위는 상처 치유의 관리를 위해 촬영했다.
자극 항체 반응에 대한 단백질과 그림 2. Intralymphatic 예방 접종은. 여성 CBA 마우스는 0 일, 14 일에 예방 접종을하고, 수산화 알루미늄에 흡착 포스 포 리파제 A2 단백질의 표시된 용량 28되었다. 일 0과 28의 왼쪽 림프절 및 14 일째에 오른쪽 림프절 : 백신은 서혜부 림프절의 목에 10 μL의 목덜미에 50 ㎕를 주입하여 피하 (SC)을 투여 하였다.
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자극 세포 독성 CD8 T 세포 반응에 대한 펩타이드와 그림 3. Intralymphatic 예방 접종. (A) 여성 TCR318 마우스가 뒷다리 발바닥에 서혜부 림프절 (ILN) 또는 피하 (SC)에 gp33 펩티드를 주사했다. 30:1 effector/target- (E / T) 세포의 비율에서 24 시간 후, 림프절 수확하고, gp33 특정 CTL 활동에 대해 분석했다. (B) 여성 C57BL / 6 마우스는 일 0, 2에 예방 접종을하고 있었다 4 피하 (SC) 또는 intralymphatic (ILN) 투여 경로로 μg np52으로 10. 마우스는 다음 VSVnp52 표현 동계 림프종 세포 (EL-4)를 도전시키고, 마우스의 생존 카플란 - 마이어 곡선으로 설명 하였다.
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인간 그림 4. Intralymphatic 백신 투여. 인간의 Intralymphatic 백신 투여 초음파의 도움으로 피하 림프 노드를 할당하여 수행됩니다. 피하 주사 바늘 림프절 paracortex에 삽입하고, 주입은 초음파 영상에 붓기 즉각적인 림프절의 관찰에 의해 제어 될 수있다. (A) intralymphatic 주입 초음파에 의해 인도된다. (B) 바늘 림프절의 paracortex에 삽입 (직선 흰 선)를 보여주는 초음파 이미지. 피하 ( "Injekt의 subkutan"; 왼쪽 전방), 서혜부 림프절 (오른쪽 전방 "Injekt IM LK")에 방사성 표지 단백질의 주입 후 (C) 생체 분포. 남자는 큰 이미지를 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
Intralymphatic 예방 접종 및 면역 항체 반응과 T 세포 반응을 모두 자극에 적절한 것으로 표시되었습니다. 이 비디오 문서에서 알 수 있듯이, 예방 접종의 intralymphatic 절차는 생쥐에 강한 면역 반응을 자극하기위한 빠르고 쉬운 방법입니다. 숙련 된 외과 의사가 3 ~ 4 분 동안 절차를 수행 할 수 있습니다. 세션은 또한 하나가 일반적 마취와 봉합을 수행하고 제 외과 절개 및 주입을하고이 외과 의사 사이에서 공유 될 수있다. 절차의 효율성은 외과 의사가 아직 잘 훈련되지 특히, 다른 예방 접종 방법보다 더 의존 연산자입니다. 그러나, 숙련 된 작업자는 면역 반응 분석에 의해 모니터링으로 또한 정량적으로 실험 결과를 재현 할 수있다. 방법의 변경은 비장 1,2에 백신을 주입하는 것입니다. 제제 intralymphatic 주입 마찬가지이지만 번째절개의 E의 크기는 일반적으로 크게 두 개의 바늘이 그것을 닫 만들어진 것입니다. 니들 삽입 또는 주입에 기인 림프절의 손상이 수반 것이지만 그러한 intrasplenic 예방 접종의 주요 장점은 비장, 큰 주사 부피 및 더 빈번한 주사가 적용될 수를 찾을 수 있도록하고 림프절보다 칠 쉽다는 것을, 그리고 림프절의 주요 영역, 비장의 손상은 장기의 상대적으로 적게 포함 지역 자연의 더 많은 것입니다.
마우스에서의 면역화 intralymphatic 절차 수행 동일한 림프절에서 제 주입 전에 3-4주의 복구 시간 후 (예를 들면 백신은 주사를 부스팅) 반복 될 수있다. 더 빈번한 주사가 계획하는 경우에는, 좌우 양쪽 서혜부 림프절이 사용되어야한다. 림프절 당 적어도 두 개의 주사가 이루어질 수 있지만, 추가 연구가 더 정확하게 가능성이 제한을 정의하는 데 필요하다. 또한 주사는 어려운 D 수 있습니다림프절 및 피부 양 흉터 형성뿐만 아니라 보조제에 기인 한 전위 육아종 형성하는 UE. 반면에, 면역화 과도 임파선 염증을 일으킬 것이며, 증가 림프절 크기는 후속 지역화 주사제를 단순화한다. 사실, 림프절의 지역화 방법의 주요 제한 사항입니다. 젊은 마우스 (5 이하 주) 아주 작은 림프절, 나이 특히 오래된 수컷 마우스는 너무 많은 피하 지방이있을 수있을 수 있지만, 그 현지화가 어렵습니다. 최적의 조건 6 ~ 12 주 암컷 생쥐를 얻을 수 있습니다. 실제로, 절차의 가장 중요한 단계 중 하나는 림프절 자체에 주입이다. 노드의 인접 영역에 주입 직접 intralymphatic 주입 후 이상 면역 반응의 훨씬 약한 트리거와 피하 주사에 해당 될 것입니다. 이유는 노드를 둘러싸 오히려 고체 캡슐 큰 분자 투과성 없다는 것이다.항원은 림프 노드에 들어갈의 경우, 림프로 배출한다. 이 여행은 일반적으로 피부의 초기 림프 혈관에서 시작, 림프는 다음 배수으로 연동 운동에 의해 구동되는 곳에서 피하 조직에 혈관을 수집에 림프 배수 피부의 깊은 층에있는 큰 덕트 계속 림프는 23, 24 노드. 하류 항원이 경로를 따라 증착된다, 그것의 이하 심성 림프에 대한 액세스를 얻을 것이다.
intralymphatic 예방 접종의 방법은 근육 또는 피하 노선 등 기존의 방법으로 투여 할 때 약한 면역 원성 항원의 투여에 특히 흥미 롭다. Intralymphatic 예방 접종의 mRNA, 플라스미드 DNA, 펩타이드, 단백질, 바이러스와 박테리아 22,25-27으로 수행되었습니다. 펩타이드와 단백질이 더있는 빌드 보조제가없는 반면, mRNA의 플라스미드 DNA 바이러스와 박테리아는 고유 보조 EFFE을 발휘위험 신호 (바이러스 및 박테리아를 복제)를 제공하여 또는 단일 가닥 RNA (TLR7 및 TLR8), 이중 가닥 RNA (TLR3)와 같은 병원균 관련 분자 패턴 (PAMPS)을 감지 할 수있는 수신자 같은 수용체 (TLR에)를 자극하여 CTS, 취소 메틸화 시토신과 구아닌 뉴클레오티드 클러스터 (TLR9), 세균 flaggelin (TLR5), 리포 폴리 사카 라이드 (TLR2 4)뿐만 아니라 다른 바이러스 성 및 박테리아 분자 28. 따라서, 특히 펩타이드 및 단백질 기반의 백신은 직접 림프절에 백신을 주입하는 면역 증강 혜택을 누릴 것입니다. 실제로, B-및 T-세포 반응이 마우스에서 1,8,9 intralymphatic 펩티드와 단백질 백신 후 증가되어 입증되었다. 또한, 유전자 백신, 특히 mRNA를 기반 백신, 그들은 반드시 세포 조직에서 짧은 통행 시간을 사용 관리 방법에서 이익을 얻을만한 어떤 이유로 매우 불안정하다. 실제로,와 intralymphatic 백신 항원 - 엔코딩 RNA 마우스 종양 모델 4에서 강력한 예방 및 치료 면역을 유도. 마찬가지로, 소비재 등의 보조제의 intralymphatic 관리가 요구 된 더 낮은 복용량에 독성의 감소를 가능하게하고, 증가 된 보조 효과로 인해 면역 세포 (13)에 직접 희석 효과가 관찰되었다. 또한 중합체 및 나노 미립자뿐만 아니라 리포좀과 같은 다른 보조제 또는 항원 전달 시스템의 성능은 11 intralymphatic 투여함으로써 개선 될 수있다. 기존의 예방 접종 경로에 intralymphatic의 또 다른 큰 장점은 훨씬 더 낮은 복용량은 일반적으로 요구되는 것입니다. 세포 독성 CD8 T 세포 반응의 자극을위한 DNA의 투여 량은 약으로 감소 될 수있는 동안 단백질에 대한 항체 반응의 자극, 도즈는 100-1,000 폴드 (9)에 의해 감소 될 수있다. 10,000 배 2.
서브 유니트 항원 또는 죽은 백신과는 달리, 비르 라이브알 세균 백신은 일반적으로 intralymphatic 정부에서 수혜가 예상되지 않습니다. 이것에 대한 이유는, 미생물은 일반적으로 임의의 보조제의 도움없이 림프절로 잘 배출 충전부에있다. 또한, 전염성 미생물은 복제에 의해 말초 조직에서 항원 희석 효과에 대응할 수 있습니다. 따라서, 이차 림프계 도달 항원 투여 량은 전형적으로 면역을 발생시키기에 충분한 것이다. 기존의 라이브 백신이 부족한 면역력을 생산하는 곳 그러나 intralymphatic 정부는 백신이 효과적으로 만들기 위해 필요한 보정을 제공 할 수 있습니다. 그것은 최근에서만 제공 결핵 백신 M.와 예방 접종 후 그 내성을 증명했다 보비스 BCG는 크게 마우스 (12)의 서혜부 림프절에 BCG의 직접 주입에 의해 향상 될 수있다. Intralymphatic 관리는 피하 관리청에 비해 100-1,000 배에 의해 BCG의 접종 금액의 감소를 허용록해. 특히 면역 타협 사람의 경우, intralymphatic 예방 접종의 안전 혜택을 나타냅니다.
인간의 Intralymphatic 면역화 및 면역 요법은 지금까지 암 환자에게 알레르기 환자에 적용되었다. 인간의 방법은 비침이지만, 최상의 결과 및 품질 관리는 병원이나 큰 치료 장치에 적용을 제한 할 수있는 주입을 안내하는 초음파를 사용하여 수득된다. 암 연구에서 전이성 흑색 종의 치료에 대한 플라스미드 DNA 및 펩타이드 프라임 - 부스트 백신은 면역 원성 및 정의 환자 인구 29 질병 통제의 증거를 공개했다. 또한 수지상 세포와 intralymphatic자가 백신은 암 환자에서 수행되었습니다. 일부 시험은 면역 반응 (30, 31)를 강화하는 동안, 다른 시험은 intralymphatic 정부 (32, 33)의 이익을 설명하는 데 실패했습니다. intralymphatic 행정 절차는 ESPE 것으로 입증되었습니다cially 유익 알레르기 환자의 면역 요법에. intralymphatic 방법을 변경하여 완전하고 성공적인 면역 요법에 대한 주사의 수를 2 달 (14, 15)에 단 3 주사를 3 년간 약 50 피하 주사로 감소 될 수있다. 두 주입 번호 때문에 복용 강하게 알레르겐 특이 intralymphatic 면역 요법을 수행함으로써 감소 될 수 있고, 림프절 히스타민 방출 비만 세포를 포함하지 않기 때문에, 방법은 안전 이득을 나타내고, 짧은 치료 기간에 따라 순응하는 환자가 개선된다. 다음 몇 년 동안, 알레르기 아마 예방 접종 및 면역 요법이 새로운 방법의 가장 즉각적인 혜택을 볼 수있을 것입니다 표시입니다.
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Disclosures
TMK는 남자 intralymphatic 면역 요법을 다루는 특허의 발명자로 지정됩니다. TMK는 과학 고문되었으며 ImVisioN GmbH를, Cytos 생명 공학, MannKind 공사 및 XBiotech 미국 주식 PJ가 공개하는 충돌의 관심이없는에서 여행 경비를 받았다.
Acknowledgments
저자는 아이리스 Erdmann의, 바바라 폰 Beust, 줄리아 마르티네즈 마리아 고메즈의 생쥐 intralymphatic 예방 접종의 방법을 개발하는 실험적인 도움에 대해 감사합니다. 우리는이 비디오 제작에 대한 자신의 수술 극장을 사용셔서 또한 Maggy의 아라스와 니콜라 Cesarovic 감사합니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ketamine (Ketasol-100) | Graeub AG, Switzerland | Anesthetics | |
| Xylazine (Rompun) | Bayer, Germany | Anesthetics | |
| Viscotears Eye-Gel | Novartis, Switzerland | To keep eyes from drying out during anesthesia. | |
| BD Micro-Fine 0.5 ml | BD Medical, France | 29 G Insulin syringes with permanently attached needles | |
| 6-0 Dermalon Monofilament Nylon | Covidien, MA, USA | For sutures (0.7 metric, 18 G, 45 cm, Blue) | |
| Curved forceps, 4.5 in | Polymed, Switzerland | For incision and holding of lymph node | |
| Straight surgical scissors, 4.5 in | Polymed, Switzerland | For incision | |
| Needle holder, 5.5 in | Polymed, Switzerland | To close incision with suture |
References
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- Maloy, K. J., et al. Intralymphatic immunization enhances DNA vaccination. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98, 3299-3303 (2001).
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