Summary
La vaccination prophylactique et thérapeutique échoue souvent pour stimuler une forte réponse immunitaire due à la semaine drainage du vaccin vers les ganglions lymphatiques et par conséquent faible implication des cellules immunitaires. Par injection directe de vaccin vers les ganglions lymphatiques, dite injection intralymphatique, l'efficacité du vaccin peut être fortement améliorée, et les doses de vaccin peut être réduite.
Abstract
Les vaccins sont typiquement injectés par voie intramusculaire ou sous-cutanée pour la stimulation des réponses immunitaires. Le succès de cette nécessite un drainage efficace de vaccin vers les ganglions lymphatiques où les cellules présentant l'antigène peuvent interagir avec les lymphocytes pour la génération de réponses immunitaires recherchés. La force et le type de réponses immunitaires induites dépendent aussi de la densité ou la fréquence des interactions ainsi que le micro-environnement, en particulier la teneur en cytokines. Comme seule une infime partie de la périphérie vaccins injectés atteint les ganglions lymphatiques, la vaccination de souris et de l'homme ont été réalisées par injection directe de vaccin dans les ganglions lymphatiques inguinaux, à savoir l'injection intralymphatique. Chez l'homme, la procédure est guidée par échographie. Chez la souris, une petite (5-10 mm) incision est pratiquée dans la région inguinale des animaux anesthésiés, le ganglion lymphatique est localisé et immobilisé avec une pince, et un volume de 10-20 ul du vaccin est injecté sous contrôle visuel.L'incision est fermée avec un seul point à l'aide de sutures chirurgicales. Les souris ont été vaccinées avec de l'ADN plasmidique, l'ARN, un peptide, une protéine, des particules, et les bactéries ainsi que des adjuvants, et une forte amélioration de la réponse immunitaire contre tous les types de vaccins ont été observées. La méthode intralymphatique de la vaccination est particulièrement approprié dans les situations où la vaccination classique produit une immunité insuffisante ou lorsque la quantité de vaccin disponible est limitée.
Introduction
Les vaccins sont typiquement injectés par voie intramusculaire ou sous-cutanée pour la stimulation des réponses immunitaires. La réussite de ce procédé nécessite un drainage efficace de vaccin vers les ganglions lymphatiques où les cellules présentant l'antigène peuvent interagir avec les lymphocytes pour la production de T-et de réponses des cellules B. En outre, la force et le type de réponses immunitaires induites dépendent aussi de la densité ou de la fréquence de ces interactions ainsi que le micro-environnement lui-même, en particulier la teneur en cytokines. Comme seule une petite fraction d'un vaccin injecté dans un tissu périphérique atteint un ganglion lymphatique, la vaccination de souris et l'homme par injection directe du vaccin dans les ganglions lymphatiques, le site ont été les réponses immunitaires sont produits, ont été réalisées. Chez l'homme, la procédure est guidée par ultrasons, un procédé également utilisé pour l'administration d'agents d'imagerie pour la visualisation et de diagnostic dans le système lymphatique. Chez la souris, la procédure est invasive. Ici, une petite (5-10 mm) incision est fabriqué dans la région inguinale des animaux anesthésiés 1, le ganglion lymphatique est localisé et immobilisé avec une pince, et un volume de 10-20 ul du vaccin est injecté sous contrôle visuel, 10 pi est utilisé pour les premières injections et chez de jeunes souris avec de petits ganglions lymphatiques, tandis que 20 pl peuvent être injectés dans les ganglions lymphatiques de souris âgée ou déjà amorcés, qui ont de plus grands ganglions lymphatiques. L'incision peut être fermé avec un seul point à l'aide de sutures chirurgicales. Par cette méthode, les souris ont vaccinés avec l'ADN plasmidique de 2,3, l'ARN messager 4, 1,3,5,6 peptide, protéine 7-10, les particules 11, 12 des bactéries, ainsi que des adjuvants 7,13, et une forte amélioration de l'abri réponses contre tous les types de vaccins ont été observés. La méthode intralymphatique de la vaccination est particulièrement approprié dans les situations où la vaccination classique produit une immunité insuffisante ou lorsque la quantité de vaccin disponible est limité ou very coûteux. Chez l'homme, le procédé intralymphatique de vaccination a été appliquée à des patients allergiques à 14,15 ou 16 à 21 patients atteints d'un cancer. Bien que la notion de courant est que la méthode est intralymphatique plus invasif que d'autres méthodes injectables tels que des injections intramusculaires et sous-cutanées, la perception de la douleur n'est pas plus élevée qu'après une ponction veineuse 15. Il est prévu que la vaccination intralymphatique deviendra une alternative ou un complément à d'autres méthodes de vaccins prophylactiques et thérapeutiques en particulier. Cet article décrit en détail la façon dont la procédure de vaccination intralymphatique est réalisée chez la souris. Toutes les procédures décrites, ont été approuvés par l'Agence vétérinaire cantonal de Zurich et réalisés selon des lignes directrices et des directives sur la protection des animaux utilisés à des fins scientifiques fédéraux suisses.
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Protocol
Une. Anesthésie de souris
- Préparer les anesthésiques par mélange de kétamine (anesthésique dissociatif) et de xylazine (sédatif et analgésique) dans une solution saline tamponnée. Les concentrations de kétamine et de xylazine dans la solution finale est de 12,5 et 2 mg / ml, respectivement.
- Injecter l'anesthésique à la souris par voie intrapéritonéale à l'aide d'une seringue avec une aiguille de 25 à 30 G. Utiliser 0,1 ml/10 g de poids corporel.
- Appliquer une pommade ophtalmique aux yeux des souris afin d'éviter le dessèchement de la cornée.
- Assurez-vous que la souris est suffisamment anesthésiée par pincement son pied ou un orteil avec la pince. Si la souris ne réagit pas avec les réflexes au pincement, de procéder à une intervention chirurgicale. Si la souris réagit à la rigueur avec des réflexes ou des contractions musculaires, attendre 1-2 minutes et répéter le test de pincement. Si la souris réagit toujours, remplacez la souris avec un nouvel animal et répéter les procédures de l'étape 1.2 partir.
2. Je chirurgicalencision de la région inguinale de la souris
- Placez la souris sur son dos.
- Mouiller une région inguinale avec de l'éthanol désinfection (70%). Pour assurer une meilleure désinfection, la région inguinale peut être rasé pour enlever la fourrure désinfection préalable avec de l'éthanol.
- Prenez la patte arrière et plier la hanche pour produire un angle d'environ 90 ° de l'articulation de la hanche.
- L'utilisation d'un forceps courbes de microdissecting, prendre la peau de la souris dans la région inguinale où l'articulation de la hanche est plié et tirez la peau mouillée légèrement.
- Tout en maintenant la peau avec des pinces, couper une petite incision (<5 mm) à travers la peau avec des ciseaux chirurgicaux.
- Placez la pointe des ciseaux fermés dans l'incision et ouvrir davantage l'incision en ouvrant les ciseaux tout en maintenant à l'intérieur de l'incision. Cela entraînera la peau à se déchirer et devrait produire un diamètre inférieur à 10 mm. Remarque: Une source de lumière froide avec guides de lumière flexibles peut être utilisé pour améliorer la visibilité. En plusles souris mâles, en particulier, l'identification d'un ganglion lymphatique peut être difficile en raison de la quantité de tissu de matière grasse dans la région inguinale.
3. Injection intralymphatique
- Préparer une seringue (0,5 ml ou moins) avec une aiguille hypodermique G 28-30; biseau court peut être préférable à un long biseau. Aspirer 10 pi de vaccin à injecter et assurent que la seringue est exempte d'air.
- Localiser le ganglion lymphatique inguinal avec l'aide de la pince courbes et la pointe de ciseaux fermé. Le ganglion lymphatique apparaît grisâtre dans le tissu adipeux plus blanchâtre et peut encore être identifié par capillaires afférents et efférents qui entrent et sortent du ganglion lymphatique.
- Immobiliser le ganglion lymphatique en le maintenant entre les branches de la pince incurvés.
- Prenez la seringue et insérer l'aiguille dans le ganglion lymphatique avec les coniques orientés vers le haut; s'assurer que l'ensemble du biseau pénètre dans le ganglion lymphatique.
- Injecter le vaccin (10 pi). Si le feu vert de la lymphee est un gonflement (sauter), l'injection peut supposer succès. Si l'aiguille n'est pas placé assez profondément dans le ganglion lymphatique, une partie ou la totalité du vaccin peut s'échapper et ne pas entrer dans le ganglion lymphatique. Si l'aiguille est insérée trop profondément, le vaccin injecté sera publié voie sous-cutanée en dessous du noeud lymphatique. Dans ce dernier cas, répéter l'injection ou de remplacer la souris avec une nouvelle souris non traitées.
4. Fermeture de l'incision par suture
- Ouvrez un paquet de suture chirurgicale stérile.
- Saisir l'aiguille de suture et d'un support d'aiguille à la portion distale du corps d'aiguille. Serrer le porte-aiguille en le serrant jusqu'à ce que les premières prises de cliquet.
- Saisir la peau d'un côté de l'incision avec une pince (en fonction de la préférence du chirurgien, pinces ou crochets de la peau dentée ou non dentée peut être utilisé). Insérer l'aiguille ca. 2-3 mm du bord de l'incision, l'entrée de l'extérieur de la peau.
- Loosen attente de la peau avec la pince et à saisir le côté opposé de l'incision avec la pince. Insérer l'aiguille ca. 2-3 mm du bord de l'incision, l'entrée de l'intérieur de la peau.
- Desserrer le porte-aiguille et de saisir l'extrémité de l'aiguille avec la pince. Retirez l'aiguille de la bande de roulement à travers la peau, laissant une longueur convenable de la bande de roulement à l'extérieur du premier point insertion de l'aiguille (si plusieurs souris sont à traiter, laisser un extrémité la plus courte; 5-10 souris peut être utilisée sur une seule aiguille à suture / bande de roulement).
- Faire le noeud préféré selon les protocoles de chirurgien standard. Un point est suffisante si l'incision n'est pas supérieure à 10 mm. Pour les grandes incisions, faire un deuxième point.
5. Traitement post-opératoire
- Placez la souris dans la cage et couvrir avec les tissus pour garder au chaud. Lors du traitement de plusieurs souris, placez-les près de l'autre pour se réchauffer. Sinon, placez la souris sur un tapis chaud jusqu'à ce qu'ils se sont réveillésup.
- Observez la souris jusqu'à ce qu'ils se réveillent.
- Respecter les souris quotidiennement en ce qui concerne la cicatrisation ainsi que d'autres symptômes cliniques tels que des infections de plaies. La blessure est généralement suffisamment fermée dans les deux jours et guérit dans les sept jours de la procédure.
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Representative Results
La procédure d'injections intralymphatique chez la souris, en dépit de la nature chirurgicale, est simple et relativement rapide. Une personne formée peut effectuer la procédure en 3-4 min. L'incision est fermée avec une couture guérit normalement dans les deux jours (figure 1)
Intralymphatique vaccination ou l'immunisation a été réalisée avec l'ARNm, l'ADN plasmidique, les peptides, les protéines, les virus et les bactéries. Figure 2 illustre la production d'anticorps après immunisation avec la phospholipase A2 de la protéine (PLA2), l'allergène majeur de venin d'abeille. Souris CBA ont été immunisées aux jours 0, 14, et 28 avec 0,01, 0,1, ou 10 ug de PLA2 adsorbée sur l'hydroxyde d'aluminium par voie sous-cutanée (sc) ou intralymphatique (ILN) les injections. Les anticorps spécifiques de la PLA2 (IgG2a) ont été mesurés dans le sang après 8 semaines, et les résultats ont révélé que 0,01 ug de PLA2 a été suffisant pour stimuler de fortes réponses anticorps, tandis que 10 ug de PLA2 a été nécessaire lorsque uchanter la voie sous-cutanée 9.
Intralymphatique vaccination a également été utilisé pour stimuler des réponses T cytotoxiques de la cellule, par exemple, le peptide gp33 (KAVYNFATM) à partir de la glycoprotéine de LCMV, qui se lie au CMH de classe I dans le contexte de H-2Db pour la stimulation des cellules CD8 T. Bien que d'une seule injection sous-cutanée de souris TCR318 avec gp33 déclenché cytotoxiques CD8 réponses des lymphocytes T, l'effet était environ. six ordres de grandeur plus forte après l'injection intralymphatique (Figure 3A); TCR318 les souris transgéniques pour le récepteur de cellule T CD8 spécifique de gp33 1.
Les fonctions des cellules T CD4 ont également été testés dans un essai de provocation tumorale. Encore souris C57BL / 6 ont été immunisées par voie sous-cutanée ou intralymphatique avec le NP52 peptidique (de SDLRGYVYQGLKSG) à partir de la nucléoprotéine du VSV, qui se lie au CMH de classe II pour la stimulation des cellules T CD4 et le peptide ont été mélangées avec l'ODN CpG 1826. Lorsque les souris ont été provoquées par voie intraveineuse avec NP52-EL4 exprimant des cellules tumorales syngéniques, les souris ont développé un lymphome systémique (Figure 3B). Les souris qui ont été immunisées par la voie intralymphatique montré beaucoup plus longues durées de survie (> 75 jours) que les souris immunisées par voie sous-cutanée (<22 days).
Le procédé d'immunisation intralymphatique a également été réalisée chez l'homme, en particulier pour le traitement des allergies telles que le rhume des foins. Cette méthode est actuellement connu sous le nom ILIT (intra thérapie immunitaire lymphatique). Dans une étude sur 165 patients atteints de la fièvre des foins, 3 séances de ILIT plus de 2 mois avec les allergènes des pollens de graminées était aussi efficace que la thérapie conventionnelle avec 54 injections sous-cutanées sur 3 ans 15. En outre, la dose peut être réduite de plus de 1000 fois. De même, dans une étude sur 20 patients ayant une allergie chat de fourrure, 3 séances avec intralymphatique administré fourrure de chat allergène était suffisante pour provoquer une tolérance accrue à l'exposition aux allergènes plus tard 14.
jove_content "> Une explication de l'efficacité améliorée de la vaccination intralymphatique, par rapport à l'immunisation sous-cutanée peut être illustrée à l'homme. Utilisation d'une protéine marquée au 99mTc radioactif et comme illustré sur la figure 4, les injections sous-cutanées ont été observées pour drainer mal aux ganglions lymphatiques alors bien sûr livraison directe intralymphatique d'injection tout le contenu d'un vaccin pour le système lymphatique, par conséquent, rendre accessible à des cellules immunitaires ainsi que pour la stimulation de la réponse 22 immunitaire. Des résultats similaires ont été obtenus chez les souris injectées avec des protéines radioactives 9.
Figure 1. Guérison de plaie chirurgicale après injection intralymphatique. Des souris femelles BALB / c ont été immunisées par injection intralymphatique. Le INCIS ion a été fermé avec un seul point de suture. Deux jours plus tard, le site de la chirurgie et de l'injection ont été photographiés pour la gestion de la guérison de la plaie.
Figure 2. Intralymphatique immunisation avec la protéine de réponses d'anticorps de stimulation. Souris femelles CBA ont été immunisées aux jours 0, 14, et 28 avec la dose indiquée de la protéine phospholipase A2 adsorbé sur de l'hydroxyde d'aluminium. Le vaccin a été administré par voie sous cutanée (sc) par injection de 50 ul dans la peau du cou ou de 10 ul dans un ganglion lymphatique inguinal: le ganglion lymphatique gauche aux jours 0 et 28 et le ganglion lymphatique droit au jour 14.
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Figure 3. Intralymphatique immunisation avec le peptide de stimulation cytotoxiques CD8 réponses des lymphocytes T (A). TCR318 Des souris femelles ont été injectées avec le peptide gp33 dans le ganglion lymphatique inguinal (de iln) ou sous-cutanée (sc) dans le coussinet plantaire arrière. Après 24 h, les ganglions lymphatiques drainants ont été récoltés et analysés pour déterminer l'activité spécifique des CTL-gp33 à un effector/target- (E / T) de la cellule rapport de 30:1. (B) Femelle C57BL / 6 ont été immunisées aux jours 0, 2, et 4 à 10 ug NP52 par voie sous-cutanée (sc) ou intralymphatique (iln) des voies d'administration. Les souris ont ensuite contesté avec une cellule de lymphome syngénique (EL-4) exprimant VSVnp52, et la survie des souris a été illustrés par des courbes de Kaplan-Meyer.
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Figure 4. Intralymphatique administration du vaccin chez les humains. Intralymphatique administration du vaccin chez les êtres humains se fait en affectant les ganglions lymphatiques sous-cutanées à l'aide d'ultrasons. L'aiguille hypodermique est insérée dans le paracortex du ganglion lymphatique, et l'injection peut être contrôlée par l'observation de ganglion lymphatique immédiate de gonflement dans l'image ultrasonore. (A) L'injection intralymphatique est guidée par ultrasons. (B) Image échographique montrant aiguille (de droite blanchâtre) inséré dans le paracortex du ganglion lymphatique. (C) Biodistribution après l'injection de la protéine marqué radioactivement dans un noeud lymphatique inguinal ("Injekt im LK"; antérieure droite) et sous-cutanée ("Subkutan Injekt"; antérieur gauche). Chez l'homme Cliquez ici pour agrandir l'image.
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Discussion
Intralymphatique immunisation et l'immunothérapie se sont révélés être appropriés pour la stimulation des deux réponses d'anticorps et de réponses des cellules T. Comme démontré dans cette vidéo-article, la procédure intralymphatique de la vaccination est une méthode rapide et facile pour stimuler une forte réponse immunitaire chez les souris. Un chirurgien qualifié peut effectuer la procédure pendant 3-4 min. La session peut également être partagé entre deux chirurgiens où l'on est généralement en train de faire l'anesthésie et la suture et le second chirurgien fait l'incision et l'injection. L'efficacité de la procédure est plus dépendante de l'opérateur de l'autre méthode de vaccination, en particulier si le chirurgien n'est pas encore formé. Toutefois, un opérateur expérimenté est en mesure de reproduire les résultats expérimentaux aussi quantitativement comme contrôlé par analyse de la réponse immunitaire. Une modification de la méthode consiste à injecter le vaccin dans la rate de 1,2. La préparation est semblable à celle de l'injection intralymphatique, mais etaille e de l'incision est généralement plus volumineux et deux points de suture sont faits pour la refermer. Les principaux avantages d'une telle vaccination intrasplénique sont que la rate est plus facile à trouver et à atteindre que d'un ganglion lymphatique, les grandes injections volumes et des injections plus fréquentes peuvent être appliquées, et alors que les dommages d'un ganglion lymphatique causé par insertion de l'aiguille ou injection impliquerait un domaine majeur de ganglion lymphatique, les dommages de la rate impliquerait relativement moins de l'organe et d'être plus de caractère local.
La procédure de vaccination intralymphatique chez la souris peut être répété (par exemple vaccin de rappel injections) après un temps de 3-4 semaines avant la deuxième injection dans le même ganglion lymphatique de récupération est fait. Si des injections plus fréquentes sont planifiées, les ganglions inguinaux gauche et droite lymphatiques doivent être utilisés. Au moins deux injections par ganglionnaire peuvent être faites, mais d'autres études sont nécessaires pour définir cette limite potentielle plus précisément. D'autres injections peuvent être d difficileue à la formation de cicatrices à la fois dans les ganglions lymphatiques et dans la peau, ainsi que la formation de granulomes potentiels causés par des adjuvants. D'autre part, l'immunisation provoque une inflammation transitoire des ganglions lymphatiques, et la taille accrue des ganglions lymphatiques permettra de simplifier la localisation et des injections ultérieures. En effet, la localisation du ganglion lymphatique est une limitation importante de la méthode. Alors que les jeunes souris (moins de 5 semaines) peut avoir de très petits ganglions lymphatiques, plus et en particulier les souris mâles plus âgés peuvent avoir autant de graisse sous-cutanée, que la localisation est difficile. Les conditions optimales sont obtenues avec les souris femelles de 6-12 semaines. En effet, une des étapes les plus critiques de la procédure est l'injection dans le ganglion lymphatique lui-même. Une injection dans la zone adjacente du noeud sera équivalente à une injection sous-cutanée beaucoup plus faible avec le déclenchement de la réponse immunitaire après que l'injection directe intralymphatique. La raison en est que la capsule plutôt solide qui entoure le noeud n'est pas perméable aux molécules de grande taille.Pour un antigène pour entrer dans un ganglion lymphatique, il doit s'écouler avec la lymphe. Ce parcours commence typiquement dans les vaisseaux lymphatiques initiaux dans la peau, se poursuit dans les conduits de plus grandes dans la couche profonde de la peau, qui drainent la lymphe à la collecte de récipients dans le tissu sous-cutané, d'où la lymphe est entraîné par le péristaltisme vers la prochaine vidange ganglions lymphatiques 23,24. Le outre un antigène aval est déposé le long de ce chemin, moins il aura accès à la lymphe afférente.
Le procédé d'immunisation intralymphatique est particulièrement intéressant pour l'administration d'antigènes qui sont faiblement immunogène lorsque administrée par des procédés classiques tels que la voie intramusculaire ou sous-cutanée. Intralymphatique vaccination a été effectué avec de l'ARNm, l'ADN plasmidique, les peptides, les protéines, les virus et les bactéries 22,25-27. Alors que les peptides et les protéines n'ont pas adjuvants dans-construire, ARNm virus et les bactéries ADN plasmide exercer intrinsèque adjuvant effects par fournir des signaux de danger (réplication du virus et bactéries) ou par stimulation Toll-like récepteurs (TLR) qui peuvent détecter des agents pathogènes motifs moléculaires associés (PAMP) tels que l'ARN simple brin (TLR7 et TLR8), l'ARN double brin (TLR3), cytosine non méthylés et guanine oligonucléotides clusters (TLR9), flaggelin bactérienne (TLR5), lipopolysaccharide (TLR2 et 4) des molécules ainsi que d'autres virales et bactériennes 28. Par conséquent, en particulier de peptides et vaccins à base de protéines bénéficieraient de la potentialisation immunitaire de l'injection du vaccin directement dans le ganglion lymphatique. En effet, il a été démontré que les réponses B et de cellules T est augmenté, après intralymphatique peptide et la protéine vaccination chez la souris 1,8,9. De plus, les vaccins génétiques, en particulier les vaccins à base de l'ARNm, sont très instables raison pour laquelle ils seraient certainement bénéficier d'une méthode d'administration qui a permis à de courts temps de passage dans les tissus extra-cellulaires. En effet, la vaccination avec l'antigène intralymphatique-enARN codant suscité immunité prophylactique et thérapeutique efficace dans les modèles de tumeurs de souris 4. De même, l'administration intralymphatique des adjuvants tels que des CpG a permis une réduction de la toxicité due à la plus faible dose requise, et un effet adjuvant accru a été observé du fait de l'effet direct et non dilué sur les cellules immunitaires 13. Également la performance d'autres adjuvants ou systèmes de délivrance de l'antigène tels que polymères nano-et micro ainsi que des liposomes pourrait être améliorée par l'administration intralymphatique 11. Un autre avantage majeur de intralymphatique sur des routes de vaccination classiques est que des doses beaucoup plus faibles sont généralement nécessaires. Pour les protéines et pour la stimulation de réponses d'anticorps, la dose peut être réduite par un facteur 9, 100-1000, tandis que la dose de l'ADN pour la stimulation de CD8 cytotoxiques réponses des cellules T peut être réduit avec env. 10000 fois 2.
Contrairement aux antigènes sous-unitaires ou des vaccins morts, vivre viral et vaccins bactériens sont normalement ne devraient pas bénéficier d'administrations intralymphatique. La raison de cela est en partie que vivent les microbes généralement bien drainer vers les ganglions lymphatiques, sans aucune aide de l'adjuvant. En outre, les microbes infectieux peuvent faire face aux effets de dilution antigène dans les tissus périphériques par la réplication. Par conséquent, la dose d'antigène pour atteindre le système lymphatique secondaire sera généralement suffisante pour générer une immunité. Toutefois, lorsque les vaccins vivants existants produisent une immunité insuffisante, l'administration intralymphatique pourrait fournir la correction nécessaire pour rendre le vaccin efficace. Il a été récemment démontré que l'immunité après la vaccination avec le vaccin contre la tuberculose actuellement disponible uniquement M. bovis BCG pourrait être nettement améliorée par l'injection directe de BCG dans les ganglions lymphatiques inguinaux de souris 12. Administration intralymphatique a également permis une réduction de la quantité inoculée par le BCG 100-1000 fois supérieure à administration sous-cutanéetration. Cela représente un avantage pour la sécurité de la vaccination intralymphatique, surtout chez les personnes immunodéprimées.
Vaccination intralymphatique et l'immunothérapie chez l'homme a jusqu'ici été appliqué à des patients cancéreux et des patients allergiques. Le procédé est non invasive chez l'homme, mais les meilleurs résultats et le contrôle de qualité est obtenue en utilisant des ultrasons pour guider l'injection, ce qui peut limiter l'application aux hôpitaux ou aux grandes unités de soins. Dans les études sur le cancer, la vaccination prime-boost avec l'ADN plasmidique et le peptide pour le traitement du mélanome métastatique révélé l'immunogénicité et la preuve du contrôle de la maladie dans une population définie de patients 29. Aussi vaccination autologue intralymphatique avec des cellules dendritiques a été réalisée chez des patients atteints de cancer. Alors que certains essais améliorées réponses immunitaires 30,31, d'autres essais n'ont pas réussi à démontrer le bénéfice des administrations intralymphatique 32,33. La procédure d'administration intralymphatique s'est avéré être particument bénéfique dans l'immunothérapie des patients allergiques. En changeant la méthode intralymphatique, le nombre d'injections pour l'immunothérapie complète et réussie pourrait être réduite d'environ 50 injections sous-cutanées sur 3 ans à seulement 3 injections pendant 2 mois 14,15. Puisque les deux nombres d'injection des doses peuvent être fortement réduits par l'action spécifique d'un allergène immunothérapie intralymphatique, et étant donné que les ganglions lymphatiques ne contiennent pas les mastocytes d'histamine de libération, les méthodes représente un avantage en matière de sécurité, et avec la courte durée du traitement, l'observance du patient est améliorée. Au cours des prochaines années, l'allergie est peut-être l'indication qui verrait avantage le plus immédiat de cette nouvelle méthode de vaccination et immunothérapie.
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Disclosures
TMK est désigné comme l'inventeur de brevets portant sur l'immunothérapie intralymphatique chez l'homme. TMK a été conseiller scientifique et a reçu les frais de voyage de ImVisioN GmbH, Cytos Biotechnology, MannKind Corporation, et XBiotech USA Inc. PJ n'a aucun intérêt à divulguer des conflits.
Acknowledgments
Les auteurs sont reconnaissants pour l'aide au développement expérimental de la méthode de la vaccination chez les souris de intralymphatique Iris Erdmann, Barbara von Beust, Maria et Julia Martínez-Gómez. Merci aussi à Maggy Arras et Nikola Cesarovic pour nous laisser utiliser leur salle d'opération pour cette production vidéo.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ketamine (Ketasol-100) | Graeub AG, Switzerland | Anesthetics | |
| Xylazine (Rompun) | Bayer, Germany | Anesthetics | |
| Viscotears Eye-Gel | Novartis, Switzerland | To keep eyes from drying out during anesthesia. | |
| BD Micro-Fine 0.5 ml | BD Medical, France | 29 G Insulin syringes with permanently attached needles | |
| 6-0 Dermalon Monofilament Nylon | Covidien, MA, USA | For sutures (0.7 metric, 18 G, 45 cm, Blue) | |
| Curved forceps, 4.5 in | Polymed, Switzerland | For incision and holding of lymph node | |
| Straight surgical scissors, 4.5 in | Polymed, Switzerland | For incision | |
| Needle holder, 5.5 in | Polymed, Switzerland | To close incision with suture |
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