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चूहे में व्यायाम क्षमता और कार्डिएक अनुकूलन पर रासायनिक प्रेरित डिम्बग्रंथि विफलता के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए एक विधि

Published: April 7, 2014 doi: 10.3791/51083
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1
1Department of Physiology, University of Arizona

Summary

दोनों अभ्यास लद व्यायाम क्षमता और व्यायाम करने के लिए हृदय रूपांतरण पर रजोनिवृत्ति के प्रभाव की जांच करने के लिए एक नव विकसित रासायनिक प्रेरित रजोनिवृत्ति माउस मॉडल पर परीक्षण किया गया.

Abstract

हृदय रोग के जोखिम (सीवीडी) रजोनिवृत्ति के बाद महिलाओं में बढ़ जाती है, फिर भी, व्यायाम की भूमिका, रजोनिवृत्ति के बाद महिलाओं में सीवीडी जोखिम के लिए एक उपाय के रूप में पर्याप्त रूप से अध्ययन नहीं किया गया. तदनुसार, हम स्वैच्छिक पिंजरे पहिया व्यायाम और रजोनिवृत्ति के चूहों में हृदय अनुकूलन पर मजबूर ट्रेडमिल व्यायाम के प्रभाव की जांच की. महिलाओं में रजोनिवृत्ति की नकल उतार के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल किया inducible मॉडल ovariectomized (OVX) कृंतक है. हालांकि, OVX मॉडल मानव में रजोनिवृत्ति से कुछ असमानताओं को बताया है. इस अध्ययन में, हम रजोनिवृत्ति चूहों में व्यायाम के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए एक वैकल्पिक रजोनिवृत्ति मॉडल के रूप में डिम्बग्रंथि विफलता accelerates है, जो मादा चूहों से 4 vinylcyclohexene diepoxide (वीसीडी) दिलाई. वीसीडी चुनिंदा बारीकी से प्राकृतिक प्रगति mimics कि एक endocrine राज्य में जिसके परिणामस्वरूप प्राथमिक और मौलिक रोम के नुकसान accelerates मानव में पेरी के बाद रजोनिवृत्ति पूर्व करने के लिए. व्यायाम पर व्यायाम के प्रभाव का निर्धारणक्षमता और वीसीडी का इलाज मादा चूहों में हृदय अनुकूलन, दो तरीकों का इस्तेमाल किया गया. सबसे पहले, हम एक स्वैच्छिक पिंजरे पहिया करने के लिए वीसीडी का इलाज और अनुपचारित चूहों के एक समूह को अवगत कराया. दूसरा, हम तीव्रता और धीरज व्यायाम करने के लिए एक सहिष्णुता के रूप में मापा एक अलग समूह वीसीडी का इलाज और अनुपचारित चूहों में व्यायाम क्षमता का निर्धारण करने के लिए मजबूर ट्रेडमिल व्यायाम का इस्तेमाल किया.

Introduction

रजोनिवृत्ति के प्राकृतिक शुरुआत अंततः डिम्बग्रंथि बुढ़ापा, जिसके परिणामस्वरूप अविवरता के माध्यम से डिम्बग्रंथि मौलिक रोम की कमी की विशेषता है. संयुक्त राज्य अमेरिका में, एक महिलाओं के जीवन का 30% से अधिक रजोनिवृत्ति के बाद खर्च किया जाएगा. डिम्बग्रंथि समारोह में कमी के जवाब में, कई शारीरिक और मनोवैज्ञानिक परिणामों वृद्धि adiposity, नाड़ी अस्थिरता, और मूड या सो गड़बड़ी सहित, हो सकता है. क्योंकि premenopausal समकक्षों 1,2 के साथ तुलना में वृद्धि हुई मोटापे / adiposity की, postmenopausal महिलाओं में हृदय रोग (सीवीडी) 3 सहित उपापचयी सिंड्रोम और संबद्ध comorbidities, विशेष रूप से अतिसंवेदनशील होते हैं. इसके अलावा, यह सीवीडी के साथ रोगियों के लिए सफल कार्डियक पुनर्वास नियमित एरोबिक व्यायाम शामिल है कि तेजी से स्पष्ट होता जा रहा है, और है कि व्यायाम इन विषयों 4,5 में हृदय रुग्णता और मृत्यु दर कम कर देता है. फिर भी, कैसे व्यायाम क्षमता चापूर्व के लिए रजोनिवृत्ति के संक्रमण के दौरान nges अच्छी तरह से अध्ययन नहीं किया गया है. इससे भी महत्वपूर्ण बात, रजोनिवृत्ति के बाद महिलाओं में सीवीडी जोखिम के लिए एक उपाय के रूप में व्यायाम की भूमिका उल्लेखनीय understudied बनी हुई है.

महिलाओं में रजोनिवृत्ति की नकल उतार के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल किया inducible मॉडल ovariectomized (OVX) कृंतक है. हाल ही में, व्यावसायिक रासायनिक -4 vinylcyclohexene diepoxide (वीसीडी) विशेष रूप से अंततः अन्य ऊतकों 6 में पाया कोई स्पष्ट विषाक्तता के साथ डिम्बग्रंथि विफलता में जिसके परिणामस्वरूप, अविवरता की प्राकृतिक प्रक्रिया में तेजी से छोटे प्राथमिक और मौलिक डिम्बग्रंथि के रोम लक्ष्य दिखाया गया है. एक मानव मासिक धर्म चक्र के अनुरूप है जो वीसीडी का इलाज चूहों की estrous चक्र,,, वीसीडी इंजेक्शन के पूरा होने के बाद 2-3 महीने के भीतर रहता है जो पेरी को रजोनिवृत्ति के बाद नकल उतार एस्ट्रोजन का एक क्रमिक वापसी, में बारी परिणामों में संक्रमण. इस प्रकार, एक कूप गिरेगा, अंडाशय बरकरार पशु बारीकी से प्राकृतिक मानव approximatesके माध्यम से प्रगति पूर्व तक पेरी को रजोनिवृत्ति के संक्रमण 7-9. इसके अलावा, यह इस तरह के संक्रमण के रूप में सर्जरी से जटिलताओं को कम करने OVX मॉडल के लिए एक nonsurgical विकल्प प्रदान करता है. इस अध्ययन में, हम रजोनिवृत्ति चूहों में हृदय रूपांतरण पर व्यायाम के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए वीसीडी प्रेरित रजोनिवृत्ति चूहों कार्यरत हैं.

दोनों लिंगों के कृन्तकों 10-13 में एस्ट्रोजन और पिंजरे पहिया व्यायाम के बीच सहयोग का सुझाव है कि ऐसे कई उदाहरण हैं. शल्य OVX द्वारा एस्ट्रोजन कमी चूहों और चूहों 14,15 में स्वैच्छिक व्यायाम गतिविधि कम हो जाती है. व्यायाम के दो तरीकों वीसीडी प्रेरित रजोनिवृत्ति चूहों के व्यायाम क्षमता का परीक्षण करने के लिए इस अध्ययन में इस्तेमाल किया गया. केज पहिया चल रहा है आम तौर पर पशु मॉडल में स्वैच्छिक व्यायाम का एक प्रकार के रूप में माना जाता है और कम तनावपूर्ण परिस्थितियों में, शायद, प्रदर्शन किया है. हालांकि, पिंजरे पहिया चल रहा है exerci के लिए जानवरों की आवश्यकता है, जो पशुओं के सापेक्ष व्यायाम क्षमता का संकेत नहीं हैएसई में बहुत उच्च स्तर. जबरिया ट्रेडमिल व्यायाम की तीव्रता और धीरज व्यायाम करने के लिए एक सहिष्णुता के रूप में मापा व्यायाम क्षमता, निर्धारित किया गया था. इसके अलावा, हम पहले से पिंजरे पहिया व्यायाम हृदय अतिवृद्धि के लिए एक प्रोत्साहन प्रदान करता है पता चला है कि और इस hypertrophic वृद्धि लिंग पर निर्भर 16 है. इसलिए, हम भी वीसीडी प्रेरित रजोनिवृत्ति चूहों में पिंजरे पहिया व्यायाम करने के लिए हृदय रूपांतरण मापा.

Protocol

सभी प्रयोगों, आवास और जानवरों की देखभाल के दिशा निर्देशों का पालन किया और एरिजोना विश्वविद्यालय में संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति ने मंजूरी दे दी, और प्रयोगशाला पशुओं की देखभाल और उपयोग के लिए 2011 एनआईएच दिशा निर्देशों के कि प्रोटोकॉल का उपयोग किया गया था.

1. 4 vinylcyclohexene Diepoxide के साथ उपचार

  1. वीसीडी खुराक प्रोटोकॉल: एक रासायनिक धूआं हुड में, एक साफ फ्लास्क वीसीडी की 0.587 मिलीलीटर जोड़ने तिल के तेल के साथ 10 मिलीलीटर के लिए अंतिम मात्रा लाने के लिए, और फिर धीरे से, कवर inverting द्वारा मिश्रण और Parafilm के साथ सील. एक खुराक शीशी का हल स्थानांतरण Parafilm के साथ इसे सील, और अप करने के लिए 7 दिनों के लिए 4 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर. सभी अभिकर्मकों बाँझ हैं सुनिश्चित करें.
    1. वीसीडी तिल के तेल में भंग कर रहा है के रूप में वाहन पर नियंत्रण के रूप में तिल के तेल का प्रयोग करें. स्टोर वीसीडी (मेगावाट = 140.2 छ / mol, घनत्व = 1.09 छ / एमएल) में -20 डिग्री सेल्सियस
    2. वीसीडी इंजेक्शन प्रोटोकॉल: उम्र के 2 महीने में, वजन और कमरे गुस्सा दैनिक intraperitoneal इंजेक्शन प्रशासन20 दिनों के लिए लगातार 160 मिलीग्राम / किलो की एक खुराक पर ature वीसीडी. 2.5 मिलीग्राम / किलो की मात्रा में, वाहन समाधान, तिल के तेल के साथ एक समान तरीके से नियंत्रण चूहों इंजेक्षन.
      नोट: इंजेक्शन अवधि के दौरान स्थानीय संक्रमण की संभावना को कम करने के लिए इंजेक्शन की साइटों वैकल्पिक करने के लिए प्रयास करें. इंजेक्शन के लिए आवश्यक मात्रा की गणना के लिए निम्न समीकरण का उपयोग करें: शरीर के वजन (छ) x किलोग्राम / 1000 GX 2.5 मिलीग्राम / किग्रा = एक 27 जी सुई का उपयोग करते हुए लगभग 50 मिलीग्राम / इंजेक्शन में जिसके परिणामस्वरूप इंजेक्षन मात्रा (एमएल) के समाधान की. कारण सुई के आकार के स्थानीय anesthetics की जरूरत नहीं हैं.
    3. Estrous चक्र निगरानी: इंजेक्शन अवधि पूर्ण होने के बाद, योनि स्मीयरों प्राप्त करने के द्वारा दैनिक estrous चक्र की निगरानी. पीठ कूड़ा विधि का उपयोग चूहों को नियंत्रित करना. 0.5 सेमी की गहराई तक योनि छिद्र में बाँझ खारा की 0.2 मिलीलीटर के साथ एक eyedropper डालें. खारा (3x) Triturate और एक खाली स्लाइड पर 1 बूंद जगह है. तुरंत microscopically एक मानक प्रकाश Microsc का उपयोग नमूनों का मूल्यांकन100X परिमाण में ope.
      नोट:. योनि कोशिका विज्ञान साइकिल के नुकसान सुनिश्चित करने और इसलिए डिम्बग्रंथि विफलता को मान्य करने के लिए निर्धारित है चित्रा 2A ठेठ योनि चूहों में estrous चक्र के विभिन्न चरणों में कोशिका विज्ञान, अर्थात् proestrus, मद, metestrus, 17-19 diestrus दिखाता है. Proestrus दौरान कोशिकाओं nucleated उपकला कोशिकाओं (चित्रा 2A, तीर nucleated कोशिकाओं से संकेत मिलता है) शामिल हैं; मद के दौरान, कोशिकाओं मुख्य रूप से स्क्वैमस उपकला कोशिकाओं शल्कित कर रहे हैं; Metestrus leukocytes की एक विशेषता के साथ, सेल प्रकार की एक मिश्रण की विशेषता है; Diestrus leukocytes का बोलबाला है. फोकल हवाई जहाज़ का समायोजन नमूना भर कोशिकाओं और नाभिक कल्पना करने के लिए आवश्यक हो सकता है. चित्रा 2B में सचित्र के रूप में, एक ठेठ murine मद चक्र 4-5 दिनों की होती है. चूहे लगातार diestrus में लगातार 15 दिनों के बाद अचक्रीय माना जाता है. लगातार प्रति अध्ययन की अवधि के दौरान estrous चक्र की निगरानीIOD वीसीडी इलाज चूहों में estrous चक्र की कमी की पुष्टि करने के लिए.

2. स्वैच्छिक केज पहिया व्यायाम


जन्मजात C57BL / 6 और B6C3F1 मादा चूहों, वृद्ध 7 महीने, स्वैच्छिक पिंजरे पहिया चलाने के लिए सामने आ रहे हैं. 28 दिनों के लिए एक पिंजरे पहिया के लिए भार रहित उपयोग के साथ एक पिंजरे (47 सेमी x 26 सेमी x 14.5 सेमी) में व्यक्तिगत रूप से घर पशुओं.

  1. उपकरण सेटअप: पिंजरे पहिया तंत्र विस्तृत पहिया रोटेशन से सक्रिय है कि एक डिजिटल चुंबकीय काउंटर से लैस सतह से चल रहा एक 5.0 सेमी के साथ एक 11.5 सेमी व्यास पहिया के होते हैं. प्रत्येक पहिया चल रहा है परीक्षण से पहले, निर्माता के दिशा निर्देशों के अनुसार पिंजरे पहिया जांचना. , चल पहिया का भीतरी व्यास को मापने परिधि की गणना और पहिया आकार के रूप में डिजिटल काउंटर में यह मान दर्ज करें.
    1. टेप का उपयोग पहिया खड़ा करने के लिए डिजिटल चुंबकीय काउंटर के कंप्यूटर भाग देते हैं.
    2. कंप्यूटर बंदरगाह अटैचटेप का उपयोग पहिया खड़ा करने के लिए डिजिटल चुंबकीय काउंटर के आयन.
    3. चुंबक फिर से क्षति चबाने से चुंबक की रक्षा के लिए पर्याप्त रूप से टेप, कंप्यूटर के लिए तार के रूप में एक ही पक्ष पर केंद्रीय पट्टी करने के लिए डिजिटल चुंबकीय काउंटर से मुक्त चुंबक देते हैं. पहिया के प्रत्येक रोटेशन पहिया रोटेशन पूरा करने के लिए किसी भी हस्तक्षेप या प्रतिरोध के बिना कंप्यूटर द्वारा दर्ज की गई है कि ताकि मैग्नेट तैनात किया जाना चाहिए.
      नोट: डक्ट टेप चल पहिया करने के लिए डिजिटल चुंबकीय काउंटर के घटक संलग्न करने के लिए सफलतापूर्वक इस्तेमाल किया गया है. टेप पूरी तरह चुंबक कवर और जानवर द्वारा चबाने से नुकसान को रोकने के लिए पर्याप्त होना चाहिए. चुंबक अपने आंदोलन निरोधक बिना पहिया करने के लिए संभव के रूप में बंद के रूप में तैनात किया जाना चाहिए. हालांकि, सेटअप क्षति चबाने के लिए दैनिक निगरानी और आवश्यक के रूप में मरम्मत की जानी चाहिए.
    4. पहिया जानवर पिंजरे के ऊपर तारों के माध्यम से खड़े फिसलने से पिंजरे में पहिया माउंट. टी के लिए पहिया स्टैंड सुरक्षितबांधने की मशीन क्लिप के साथ वह पिंजरे के तारों.
      नोट: क्लिप दूर पशु से, तारों के शीर्ष पर होना चाहिए. पिंजरे के तारों के माध्यम से कंप्यूटर हिस्सा है और किसी भी अतिरिक्त केबल फ़ीड. जानवर की पहुंच से बाहर कंप्यूटर और अतिरिक्त केबल रखें. यह एक मध्यम आकार के प्लास्टिक कंप्यूटर और अतिरिक्त केबल धारण करने के लिए पिंजरे के तारों के ऊपर पकवान तौलना रखकर पूरा किया जा सकता है.
  2. व्यायाम: एक दिया कूड़े के लिए, बेतरतीब ढंग से आसीन नियंत्रण या व्यायाम आहार या तो चूहों आवंटित. सभी जानवरों को पानी और मानक कठिन कृंतक चाउ यथेच्छ दीजिए.
    1. मैन्युअल चुंबकीय काउंटर द्वारा दिए दूरी भाग गया (किमी / दिन) और चल रहे खर्च कुल समय (घंटा / दिन), के लिए दैनिक मूल्यों रिकॉर्ड. एक ही 1 घंटा समय सीमा के भीतर रिकॉर्ड दूरी और समय मान व्यायाम की अवधि की 28 दिन की अवधि के दौरान सटीक और लगातार मूल्यों के लिए हर दिन है. साफ (शून्य) चुंबकीय काउंटर के बाद सटीक रीडिंग पालन सुनिश्चित करने के लिए प्रत्येक दिन की रिकॉर्डिंगदिन आईएनजी.
    2. प्रत्येक समूह के लिए दूरी और गति के औसत मूल्य की गणना. प्रत्येक माउस के लिए प्रत्येक दिन दूरी और समय के दिए गए मूल्यों के आधार पर गति की गणना. डेटा प्रत्येक मापा पैरामीटर के लिए ही दैनिक या साप्ताहिक मूविंग प्रदर्शित किया जा सकता है.
  3. ऊतक फसल: विशिष्ट व्यायाम की अवधि के अंत में, साँस संज्ञाहरण के तहत ग्रीवा अव्यवस्था से पिंजरों से हटाने के 30 मिनट के भीतर प्रयोग और आसीन नियंत्रण जानवरों euthanize. शरीर द्रव्यमान और तेजी से आबकारी दिल, कंकाल की मांसपेशी, और अंडाशय वजन.
    1. ऊतक कटाई के समय, माउंट और hemotoxylin और eosin (एच &E; चित्रा -2) के साथ एकत्र अंडाशय दाग. वृद्धि के तहत, गिनती और प्रत्येक वीसीडी का इलाज और नियंत्रित पशु 20 के लिए मौलिक, प्राथमिक, माध्यमिक, या कोटरीय के रूप में रोम में वर्गीकृत. एक मौलिक कूप एक छोटे प्राथमिक oocyte, बारीकी oocyte करने का विरोध चपटा या स्क्वैमस granulosa कोशिकाओं की एक परत, और एक बेसल शामिललामिना. एक प्राथमिक कूप oocyte आसपास एक परत में व्यवस्थित कर रहे हैं कि एक या एक से अधिक आयातफलकी granulosa कोशिकाओं की उपस्थिति द्वारा परिभाषित किया गया है. एक माध्यमिक कूप कई oocyte आसपास परतों, और एक theca कि फार्म granulosa सेल शामिल हैं. एक कोटरीय कूप तरल पदार्थ युक्त एक गुहा या "कोटर" की विशेषता है.
    2. दिल उत्पाद शुल्क के लिए, उदर पक्ष पर एक औसत दर्जे का चीरा और डायाफ्राम खोलने के बाद दिल कल्पना. तेजी से ठंड फॉस्फेट बफर खारा के लिए पर्याप्त रूप से धोने से बाहर अवशिष्ट निलय रक्त में आधार है और जगह पर दिल आबकारी. , अतिरिक्त ऊतक के दिल छाँटो पूरे दिल तौलना और तस्वीर फ्रीज तरल नाइट्रोजन में.
    3. Isopentane में एक संशोधित ठंडा फॉस्फेट बफर खारा समाधान (पीबीएस) के साथ अन्य सभी excised ऊतकों को धो लें, और तस्वीर फ्रीज तरल नाइट्रोजन में ठंडा.

3. जबरिया ट्रेडमिल व्यायाम

  1. एक मजबूर व्यायाम प्रतिमान टी रोजगार जबओ व्यायाम क्षमता को मापने, एक ट्रेडमिल का उपयोग और के रूप में स्थापित किया:
    1. ट्रेडमिल रैंप के आधार पर एक बिजली के झटके ग्रिड रखें. उत्पन्न इस सदमे व्यायाम के लिए एक प्रोत्साहन के रूप में कार्य करता है. बिजली उत्तेजनाओं की तीव्रता और आवृत्ति उपयोगकर्ताओं द्वारा मैन्युअल रूप से नियंत्रित कर रहे हैं. ग्रिड सक्षम या प्रत्येक लेन के लिए व्यक्तिगत रूप से निष्क्रिय किया जा सकता. सभी डेटा संग्रह मैन्युअल रूप से किया जाता है.
    2. समय समय पर, निर्माता के दिशा निर्देशों के अनुसार ट्रेडमिल जांचना.
      1. ट्रेडमिल नियंत्रक सामने पैनल टॉगल "रोक" करने के लिए सेट कर दिया जाता है सुनिश्चित करें.
      2. सुरक्षित स्थान गति ट्रेडमिल बेल्ट lane1 पर सेंसर और नीचे दिखाया स्थिति में पेंच अखरोट के साथ जकड़ना.
      3. ट्रेडमिल नियंत्रक सामने पैनल पर डायल का प्रयोग, 88.7 मी / मिनट के लिए गति को समायोजित तब, ट्रेडमिल नियंत्रक सामने पैनल पर 2 हर्ट्ज के लिए बिजली उत्तेजना आवृत्ति सेट.
      4. अंशांकन प्रक्रिया को प्रारंभ करने के लिए "ओडोमीटर पुनर्स्थापित" बटन पुश.
  2. दशानुकूलन: 3-7 दिन पहले दैनिक प्रयोग करने के लिए ट्रेडमिल के लिए चूहों acclimate. ऐसा करने के लिए, बंद, लेकिन (शोर) पर बेल्ट मोटर के साथ बेल्ट unmoving और सदमे ग्रिड के साथ ट्रेडमिल में जगह चूहों. कम से कम 15 मिनट तक अछूता चूहों छोड़ दें.
  3. वार्म अप इस प्रकार है: इस प्रोटोकॉल में इस्तेमाल कर रहे हैं के रूप में कदम गर्म:
    1. ट्रेडमिल पर प्रत्येक माउस रखें. सदमे ग्रिड अक्षम और 15 मिनट के लिए 4 मीटर / मिनट के लिए बेल्ट गति में वृद्धि.
    2. सदमे ग्रिड सक्षम और पर बेल्ट की गति को बनाए रखने केएक अतिरिक्त 10 मिनट के लिए 4 मीटर / मिनट बेल्ट गति.
  4. व्यायाम प्रशिक्षण regimens
    1. गर्म अप के बाद, पर सदमे ग्रिड रखने के लिए और 15 मिनट के लिए 5 मीटर / मिनट के लिए बेल्ट गति में वृद्धि.
    2. एक अतिरिक्त 15 मिनट के लिए 15 मीटर / मिनट के लिए बेल्ट गति बढ़ाएँ.
    3. प्रशिक्षण के बाद वापस अपने पिंजरों को चूहों हस्तांतरण.
      नोट: इस अध्ययन में, व्यायाम प्रशिक्षण 1 सप्ताह के लिए दैनिक प्रदर्शन किया गया था.
    4. तीव्र व्यायाम आहार: एक तीव्र व्यायाम आहार अत्यधिक व्यायाम तनाव के लघु और दीर्घकालिक प्रभाव का निर्धारण करने के लिए बनाया गया है.
      1. गर्म अप के बाद, 10, 15, 20, 25 के लिए 5 मीटर / मिनट से बेल्ट की गति को बढ़ाने, और 30 मीटर / मिनट 10 मिनट के अंतराल में.
        नोट: चूहों थकावट या संकट से चल रहा है या शो लक्षण जारी रखने में असमर्थ हैं, तो व्यायाम बर्खास्त. हमारे अध्ययन में, ज्यादातर जानवरों 25 मीटर / मिनट पर बंद कर दिया है, और कोई जानवर 30 मीटर / चरण मिनट से पारित कर दिया गया.
      2. प्रत्येक परीक्षा के बीच में 2-3 दिन की अनुमति, प्रत्येक माउस तीन बार परीक्षण. सभी exer भर में औसत मूल्य की गणनाप्रत्येक माउस के लिए cise सत्र.
    5. धीरज के लिए व्यायाम आहार: एक धीरज व्यायाम प्रोटोकॉल ट्रेडमिल व्यायाम प्रोत्साहन के लिए एक विस्तारित प्रदर्शन के लिए चूहों को प्रशिक्षित करने के लिए बनाया गया है. प्रोटोकॉल के इस प्रकार के उदारवादी व्यायाम तनाव की लंबी अवधि के प्रभाव को सहन करने की क्षमता का परीक्षण करती है.
      1. गर्म अवधि, 4 मीटर / मिनट दौरान उल्लिखित बेल्ट गति के साथ शुरू करो.
      2. धीरे - धीरे 20 मीटर की अंतिम गति तक 1m/min द्वारा बेल्ट की गति को बढ़ाने / मिनट पर पहुंच गया है. एक ठेठ अध्ययन प्रोटोकॉल की कुल अवधि 50 मिनट है.
      3. व्यायाम आहार के बाद वापस अपने पिंजरों को चूहों हस्तांतरण.
        नोट: थकावट को चूहों रनिंग बचा है. एक माउस थकावट के लक्षण दिखाता प्रयोग के दौरान किसी भी बिंदु पर है, सदमे ग्रिड को निष्क्रिय और माउस आराम और ठीक करने के लिए अनुमति देते हैं.

4. डेटा और सांख्यिकी विश्लेषण

  1. के रूप में उपस्थित परिणाम मतलब ± SEM और 2 तरह से एनोवा (उपचार समूह और exe का उपयोगमुख्य कारक के रूप में rcise) एक छात्र न्यूमैन Keuls पद अस्थायी परीक्षण या मतलब मूल्यों के बीच मतभेदों की तुलना करने के लिए एक छात्र के टी परीक्षण द्वारा पीछा किया.
  2. आसीन समूह की औसत हृदय जन को प्रत्येक प्रयोग जानवर के द्रव्यमान की तुलना द्वारा व्यायाम के साथ हृदय जन में प्रतिशत परिवर्तन का निर्धारण करते हैं. हृदय जन में अंतर तो प्रत्येक संबंधित जानवर के लिए आसीन जानवरों से एक प्रतिशत परिवर्तन के रूप में व्यक्त किया जाता है. <0.05 के पी मूल्यों सांख्यिकीय महत्वपूर्ण माना जाता है.

Representative Results

इस तरह के अध्ययन में इस्तेमाल किया है कि के रूप में एक ठेठ प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल, चित्रा 1 में सचित्र है. वीसीडी उपचार के 20 लगातार दिनों के बाद, योनि कोशिका विज्ञान वीसीडी इंजेक्शन चूहों में उपस्थिति या cyclicity की अनुपस्थिति निर्धारित किया गया था; वाहन इंजेक्शन चूहों भी निगरानी की गई. मद चक्र में मंच योनि स्मियर में उपकला कोशिकाओं, शल्कित उपकला कोशिकाओं, और leukocytes के अनुपात (2A चित्रा) द्वारा निर्धारित किया गया था. केवल शल्कित उपकला कोशिकाओं की उपस्थिति माउस मद में था संकेत दिया है, और इसलिए अभी भी साइकिल की गई थी. चूहों में estrous चक्र आम तौर पर इसलिए वीसीडी जानवरों अचक्रीय योनि कोशिका विज्ञान leukocytes के एक बहुमत (2A चित्रा) से पता चला है, जिसमें लगातार diestrus, के 15 दिनों के बाद विचार किया गया इंजेक्शन, 4 दिन तक रहता है. वीसीडी का इलाज चूहों की estrous चक्र अनियमित हो गया, और फिर वीसीडी इंजेक्शन की शुरुआत (चित्रा 2 बी) के बाद 2-3 महीने के भीतर रह गए (चित्रा -2) के एक पूरे कमी देखते हैं.

व्यायाम प्रदर्शन पर वीसीडी प्रेरित डिम्बग्रंथि विफलता के प्रभाव का परीक्षण करने के लिए, हम बेतरतीब 7 महीने पुराने वीसीडी और वाहन का इलाज चूहों (दो उपभेदों, C57BL / 6 और B6C3F1) आसीन या पिंजरे पहिया व्यायाम समूहों 4-6 सप्ताह के निम्न या तो साइकिल की समाप्ति (चित्रा 1). दैनिक व्यायाम मूल्यों 4 सप्ताह व्यायाम की अवधि के दौरान प्रत्येक प्रयोग जानवर के लिए समय और दूरी के लिए दर्ज किए गए. दूरी, समय और गति के लिए दैनिक चल मूल्यों के साप्ताहिक मूविंग वाहन या वीसीडी के साथ इलाज C57BL 6 / चूहों के लिए 3 चित्र में दिखाया गया. हम C57BL 6 / या B6C3F1 माउस या तो में वीसीडी और वाहन का इलाज समूहों के बीच पिंजरे पहिया पर औसत दैनिक समय, दूरी, और गति से मापा व्यायाम प्रदर्शन में काफी अंतर नहीं देखा थातनाव (चित्रा -4 ए). गणना पहिया चलने की गति धीरे - धीरे पहले 16 के रूप में दिखाया 4 सप्ताह चल रहा है अवधि में वृद्धि हुई है, लेकिन प्रयोगात्मक समूहों के बीच काफी अलग नहीं थे. इन अध्ययनों से स्वैच्छिक पिंजरे पहिया व्यायाम पर वीसीडी प्रेरित डिम्बग्रंथि विफलता के प्रभाव को कम से कम 2 माउस उपभेदों अतिक्रमण से संकेत मिलता है.

स्वैच्छिक पिंजरे पहिया व्यायाम प्रोटोकॉल की अवधि के बाद, शरीर मौरफोमैटरिक्स दर्ज किया गया और दिल तेजी से excised और तौला गया. हम पहले से स्वैच्छिक पिंजरे पहिया व्यायाम हृदय जन 16 में वृद्धि लाती दिखाई है. यहाँ, हम भी निरपेक्ष दिल वजन (HW) द्वारा मापा और HW tibial लम्बाई (टीएल) (तालिका 1) के लिए सामान्यीकृत पिंजरे पहिया अभ्यास के जवाब में हृदय अतिवृद्धि दिखा. आसीन समकक्षों की तुलना में जब पूर्ण दिल द्रव्यमान और hw / टीएल अनुपात वाहन और वीसीडी का इलाज चूहों में काफी अधिक थे. हालांकि, कोई measu वहाँ थेस्वैच्छिक पिंजरे पहिया व्यायाम के बाद नियंत्रण और वीसीडी प्रेरित डिम्बग्रंथि विफलता चूहों के बीच हृदय अतिवृद्धि में rable मतभेद.

अगला, हम ट्रेडमिल व्यायाम क्षमता निर्धारित करने के लिए चल रहे अनैच्छिक (मजबूर) का इस्तेमाल किया. हम पहले थकावट जब तक औसत गति stepwise हर 10 मिनट में वृद्धि हुई है कि एक उच्च तीव्रता प्रोटोकॉल को चूहों अधीन. औसत पर, वाहन इलाज चूहों की अधिकतम गति 26.7 ± 0.95 मीटर / मिनट और वीसीडी इलाज चूहों की अधिकतम गति थकावट से पहले मिनट 28 ± 1.4 मीटर था / थी. हम धीरज क्षमता के लिए परख करने के लिए 20 मीटर / मिनट (अधिक से अधिक के बारे में 80%) चल कम तीव्रता का इस्तेमाल किया. चित्रा 4 बी में दिखाया गया है, अधिक या कम तीव्रता व्यायाम क्षमता में कोई महत्वपूर्ण अंतर वीसीडी प्रेरित डिम्बग्रंथि विफलता माउस व्यायाम क्षमता पर कोई प्रभाव नहीं पड़ा यह दर्शाता है कि वाहन और वीसीडी इलाज समूह के बीच पाया गया.

अंत में, वीसीडी उपचार से प्रेरित रजोनिवृत्ति स्वैच्छिक या जबरन या तो आर पर कोई प्रभाव नहीं है unning क्षमता है, साथ ही व्यायाम करने के लिए हृदय अनुकूली प्रतिक्रिया.

चित्रा 1
चित्रा 1. वीसीडी प्रशासन और प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल. चूहे वीसीडी 20 दिनों के लिए लगातार उम्र के 2 महीने से शुरू होने (160 मिलीग्राम / किग्रा) या तिल का तेल (वाहन नियंत्रण) दिलाई गई. वीसीडी या वाहन इंजेक्शन के बाद, estrous चक्र निगरानी की गई और तरीके खंड में वर्णित के रूप में cyclicities निर्धारित किया गया है. डिम्बग्रंथि समारोह के नुकसान के 60-90 दिनों के भीतर हुई और योनि कोशिका विज्ञान के द्वारा पुष्टि की गई. उम्र के 7 महीनों में, चूहों 4 सप्ताह के लिए स्वैच्छिक पिंजरे पहिया व्यायाम से अवगत कराया गया या ट्रेडमिल व्यायाम प्रोटोकॉल के अधीन है.

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. चूहों में चित्रा 2 वीसीडी प्रेरित डिम्बग्रंथि विफलता एक:. Estrous चक्र के चार चरणों का प्रदर्शन एक वाहन इंजेक्शन माउस से एक बेदाग योनि स्मियर की कोशिका विज्ञान: 1) proestrous, संयुक्त राष्ट्र द्वारा विशेषता मुख्य रूप से nucleated उपकला कोशिकाओं से मिलकर 2) मद, शल्कित कोशिकाओं nucleated; Nucleated उपकला कोशिकाओं (तीर), संयुक्त राष्ट्र nucleated शल्कित उपकला कोशिकाओं (तीर), और leukocytes से मिलकर 3) metestrus,; Leukocytes के मुख्य रूप से मिलकर 4) diestrus,; और बी. वाहन और वीसीडी इंजेक्शन समूहों की estrous चक्र की औसत लंबाई (दिन). एक चक्र मद में अगले अवधि के पहले दिन के लिए मद में पहले दिन से मापा जाता है. योनि कोशिका विज्ञान इंजेक्शन की शुरुआत निम्न लगभग 6 सप्ताह शुरू हुआ. वीसीडी इंजेक्शन पशुओं की estrous चक्र वाहन इंजेक्शन जानवर की तुलना में अनियमित हो. उम्र के 8 महीनों में डिम्बग्रंथि ऊतक के एच ई धुंधला: एस, और 12 मद चक्र के बाद, सभी वीसीडी की कोशिका विज्ञान साइकिल चालन सी संकेत नहीं रह जानवरों इंजेक्शन. वाहन का इलाज (पैनल बाएं) और 20X में वीसीडी का इलाज (सही पैनल) चूहों (शीर्ष पैनल) और 200X (नीचे पैनल) बढ़ाई के लिए 5μm मोटाई पर किया वर्गों पार. 200X बढ़ाई डिम्बग्रंथि ऊतक वाहन तुलना वीसीडी का इलाज चूहों में रोम के एक नंबर से पता चलता है. इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.

चित्रा 3
चित्रा 3. वाहन या वीसीडी का इलाज C57BL/6J मादा चूहों में स्वैच्छिक पिंजरे पहिया प्रदर्शन. बाएं पैनल: औसत चल दूरी (किमी /दिन) 4 सप्ताह अध्ययन की अवधि में हर 1 सप्ताह की अवधि के लिए मध्यम पैनल:.. जवाब रनिंग टाइम (एचआर / दिन) 4 सप्ताह के अध्ययन अवधि राइट पैनल पर हर 1 सप्ताह की अवधि के लिए: औसत गति से चल रहा (किमी / घंटा) हर के लिए 4 सप्ताह अध्ययन की अवधि में 1 सप्ताह की अवधि. इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.

चित्रा 4
चित्रा 4. स्वैच्छिक पिंजरे पहिया और वाहन और वीसीडी का इलाज चूहों में ट्रेडमिल प्रदर्शन. एक: (शीर्ष पैनल) C57BL 6 / औसत चल दूरी (किमी / दिन) और 4 सप्ताह के अध्ययन की अवधि में हर 24 घंटे के लिए पहिया (घंटे / दिन) पर खर्च समय. (नीचे पैनल) & #160; B6C3F1 औसत चल दूरी (किमी / दिन) और 4 सप्ताह के अध्ययन अवधि के बी पर हर 24 घंटे के लिए पहिया (एचआर / दिन) पर खर्च समय: C57BL 6 / ट्रेडमिल चल मापदंडों.. अधिकतम समय सीमा तरीकों खंड में विस्तृत प्रोटोकॉल का उपयोग (शीर्ष पैनल) और अधिकतम गति (Botoom कक्ष).

Discussion

पिंजरे पहिया व्यायाम और ट्रेडमिल व्यायाम चल दोनों हमारे पिछले अध्ययनों 16,21,22 में इस्तेमाल किया गया है. सभी जानवरों को पर्यावरण या मानव गड़बड़ी को कम करने के लिए समर्पित व्यायाम कमरे में रखा जाता है. जानवरों की किसी भी गड़बड़ी व्यायाम प्रदर्शन 'जैविक लय काफी जानवरों को प्रभावित कर सकते हैं'. इसलिए, पूरे जानवरों की देखभाल, प्रदर्शन की निगरानी और रिकॉर्डिंग, और व्यायाम एक ही दैनिक समय सीमा के भीतर किया जाना चाहिए. जांचकर्ता इस तरह के तनाव जोखिम की अवधि सीमित करने और उचित जब पिंजरों को कवर के रूप में सावधानियों प्रदर्शन से पशुओं के लिए अतिरिक्त तनाव से बचने के लिए प्रयास करना चाहिए.

केज पहिया व्यायाम

पिंजरे पहिया तंत्र की तैयारी माउस माउंट और बाहर निकलने के लिए के लिए, पहिया आसानी से सुलभ होना चाहिए. वहाँ चाहिए पहिया के आसपास घोंसले के शिकार और fre निरोधक से चूहों को रोकने के लिए पिंजरे के तल पर न्यूनतम बिस्तरई पहिया आंदोलन. माउस का प्रयोग के रूप में पहिया के प्रत्येक रोटेशन गिनती के रूप में इतनी चुंबकीय संवेदक, पहिया के स्थिर भाग और मुक्त पहिया के लिए सुरक्षित चुंबक पर रखा गया था. चुंबकीय संवेदक से जुड़ी रिकॉर्डिंग डिवाइस पिंजरे के तार ढक्कन ऊपर रखा जाना चाहिए, और सब उजागर तारों क्षति चबाने के खिलाफ एक बाधा प्रदान करने के लिए इतनी के रूप में, चूहों से टेप या पहुंच से बाहर रखा जाना या तो जरूरत है. चुंबक और चुंबकीय संवेदक भी नुकसान और अवांछित आंदोलन दोनों को रोकने के लिए उपयुक्त संरचनाओं के लिए टेप किया गया था. दैनिक डेटा संग्रह के दौरान, सभी टेप तार को बारीकी से तारों बरकरार रहेगा और आवश्यक रूप retaped होना चाहिए बीमा करने के लिए जाँच की जानी चाहिए. चूहों नए वातावरण को acclimatize और नियमित रूप से व्यायाम शुरू करने के लिए इसे कई दिनों आवश्यकता हो सकती है के बाद से, डेटा रिकॉर्डिंग प्रत्येक व्यक्ति पशु के अनुरूप होना चाहिए. जानवरों पहिया पर कई घंटे खर्च करते हैं, चलाने का सबसे रात में होता है. इसलिए, कुछ जानवरों hig प्रकट हो सकता हैज प्रदर्शन गतिविधि वे दिन के दौरान निष्क्रिय दिखाई देते हैं, भले ही. इसके अलावा, यह कुछ जानवरों सीमित पिंजरे पहिया चल रहा प्रदर्शन करेंगे कि असामान्य नहीं है. आमतौर पर, एक औसत 1 किमी / दिन या उससे कम समय के लिए राशि है कि पिंजरे पहिया गतिविधि यादृच्छिक पिंजरे गतिविधि का परिणाम है और किसी भी महत्वपूर्ण चल रहे प्रोत्साहन के साथ जुड़ा नहीं की. इसलिए, जिसका चल रहा मापदंडों 1 किमी / दिन या 1 घंटा / दिन या उससे कम समय में कर रहे हैं जानवरों अंतिम डेटा विश्लेषण nonrunners में बाहर रखा जाना चाहिए.

एक व्यक्ति अध्ययन और शामिल चूहों के उपभेदों के विशिष्ट उद्देश्यों पर निर्भर करता है, व्यायाम की लंबाई संशोधित किया जा सकता है. हमारे पिछले अध्ययन शामिल दोनों माउस उपभेदों के लिए, औसत पहिया चलने की गति और पिंजरे पहिया पर व्यायाम की अवधि को धीरे - धीरे समय के साथ वृद्धि हुई है और 4 सप्ताह से plateaued दिखाया.

केज पहिया चल रहा है आम तौर पर कम तनावपूर्ण परिस्थितियों में प्रदर्शन किया जा रहा है के रूप में लिया जाता है, जो पशु मॉडल में स्वैच्छिक व्यायाम का एक प्रकार है. यूएनएलनिश्चित मापदंडों के पूर्व निर्धारित किया जा सकता है जिसमें आइक ट्रेडमिल व्यायाम, सभी परीक्षण पिंजरे में चल स्वैच्छिक और आसानी से पर्यावरण या व्यवहार cues से प्रभावित है. बड़े प्रयोगात्मक समूहों संख्या उपयोग किया जाता है जब तक कि इसलिए, विभिन्न प्रयोगात्मक सेटिंग्स के बीच तुलना में आम तौर पर परहेज कर रहे हैं. व्यायाम प्रतिमान के इस प्रकार से लाभ प्राप्त कर सकते है कि अनुसंधान के अन्य संभावित क्षेत्रों में इस तरह के संज्ञानात्मक तंत्रिका विज्ञान के रूप में शारीरिक परिणाम के साथ व्यवहार प्रतिक्रियाओं को शामिल कि अध्ययन कर रहे हैं. स्वैच्छिक पिंजरे पहिया प्रतिमान का उपयोग पढ़ाई के लिए, सबसे महत्वपूर्ण कदम पिंजरे की स्थापना और व्यायाम गतिविधियों की निगरानी कर रहे हैं.

ट्रेडमिल व्यायाम

दशानुकूलन कदम ट्रेडमिल व्यायाम प्रोटोकॉल के लिए जानवरों को तैयार करने के लिए आवश्यक हैं. व्यक्तिगत अध्ययन के विशिष्ट उद्देश्य पर निर्भर करता है, दशानुकूलन अवधि की अवधि भिन्न हो सकती हैं. इस अध्ययन में, एक सप्ताह की अवधि के जानवरों acclim के लिए अनुमति देने के लिए चुना गया थाको गर्म अवधि व्यायाम प्रशिक्षण आहार का एक महत्वपूर्ण कदम है, ट्रेडमिल तंत्र और पिंजरे में मोटर शोर को खा लिया. मानव समकक्षों की तरह, चूहों की चोट और संभावित डेटा कलाकृतियों से बचने के लिए किसी भी गहन व्यायाम regimens में हो रहा से पहले गरम किया जाना चाहिए. सदमे ग्रिड 15 मिनट के लिए बंद कर दिया साथ इस अध्ययन में, हम संभव सबसे कम गति (4 मीटर / मिनट) पर बेल्ट शुरू किया. इसमें शामिल सभी चूहों पर और बेल्ट से चलाने के लिए शुरू कर दिया. सदमे ग्रिड फिर पर दिया गया है और बेल्ट गति / मिनट 4 मीटर की ऊंचाई पर बनाए रखा. अधिक जोर दिया चूहों से बचने के लिए, हम एक हल्के स्तर (1 हर्ट्ज) पर बिजली के झटके की स्थापना की. कुछ ही दिनों के भीतर सभी चूहों ट्रेडमिल बेल्ट के लिए अनुकूलित.

चलने की अवधि के साथ ही त्वरण भी प्रत्येक प्रयोगात्मक डिजाइन के अनुरूप किया जा सकता है. एक सिफारिश शुरू कर त्वरण दर / मिनट 1 मीटर है. थकावट के लक्षण दिखाने के चूहों की ट्रेडमिल गलियों तुरंत बंद कर दिया जाना चाहिए. एमआई द्वारा प्रदर्शित थकावट के आम तौर पर संकेतइस प्रकार के रूप ट्रेडमिल पर CE हैं:

  1. > 5-10 सेकंड के लिए झटके ग्रिड के लिए निरंतर प्रदर्शन,
  2. एक भी व्यायाम आहार के दौरान झटका ग्रिड जोखिम> 5x में जिसके परिणामस्वरूप क्षमता से चल रहा है, और हानि
  3. सदमे ग्रिड जोखिम में जिसके परिणामस्वरूप क्षमता चलाने की हानि एक भी व्यायाम आहार के दौरान> 2 सेकंड में कम से कम 3x.

ऊपर सूचीबद्ध मूल्यों मुख्य रूप से एक विशिष्ट प्रयोग के लिए दिशानिर्देश के रूप में इस्तेमाल हो रहे हैं. इन मानकों यह माउस तनाव से अन्वेषक के लिए माउस तनाव, प्रयोग करने के लिए प्रयोग है, और अन्वेषक से भिन्न होता है के रूप में हर व्यायाम प्रोटोकॉल के लिए निर्धारित करने की आवश्यकता है.

पिंजरे पहिया व्यायाम के विपरीत, ट्रेडमिल पढ़ाई प्रदर्शन चल रहा है पर पर्यावरण और जैविक कारकों के प्रभाव को खत्म करने के लिए कई बार दोहराया जाना चाहिए. यह भी एक ही पशुओं के लिए परीक्षण के प्रदर्शन के बीच में चल रहे उतार चढ़ाव देखने के लिए असामान्य नहीं है. प्रत्येक व्यायाम आहार एक stre के लिए चूहों चल उजागर के बाद सेएस एस, परीक्षण के बीच एक उचित विश्राम अंतराल आवश्यक है. हमारे अनुभव में, प्रत्येक परीक्षण के बीच की अवधि आराम कर 2-3 दिनों चूहों को ठीक करने के लिए पर्याप्त था.

मानव ट्रेडमिल व्यायाम की तरह, धीरज व्यायाम के लिए गति सबसे अच्छा दिल दर या रक्त ऑक्सीजन संतृप्ति, माउस अध्ययन के साथ एक तकनीकी रूप से कठिन करतब द्वारा निर्धारित किया जाता है. ट्रेडमिल पढ़ाई का सबसे महत्वपूर्ण कदम आमतौर पर व्यक्तिगत चूहों के बीच होती है जो थकावट, के लिए दृढ़ संकल्प है, और 80% अधिक से अधिक गति के रूप में स्थापित किया गया था. थकावट के लिए मापदंड ज्यादातर व्यक्तिपरक हैं के बाद से हमारे अपने अनुभव में परिणाम की रिकॉर्डिंग काफी व्यक्तिगत शोधकर्ताओं के बीच भिन्न हो सकती है. इस प्रकार, रिकॉर्डिंग के दौरान एक ही मापदंड के अनुरूप आवेदन महत्वपूर्ण है.

Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है.

Acknowledgments

यह काम जेपी Konhilas और हृदय विज्ञान में अंतःविषय प्रशिक्षण अनुदान (HL007249 को सम्मानित किया एनआईएच से एक राष्ट्रीय और Mentored अनुसंधान विज्ञान विकास पुरस्कार (K01 AR052840) और स्वतंत्र वैज्ञानिक पुरस्कार (K02 HL105799) द्वारा NIH अनुदान (एच. एल 098,256), द्वारा समर्थित किया गया ). समर्थन एरिजोना विश्वविद्यालय में Sarver हार्ट सेंटर से और स्टीवन एम. Gootter फाउंडेशन से प्राप्त किया गया था.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
4-Vinylcyclohexene diepoxide (VCD) Sigma V-3630
11.5 cm Diameter wheel with a 5.0 cm wide running surface Petsmart model 6208
Digital magnetic counter Sigma Sport model BC 600
Treadmill exercise Columbus Instruments model 1055SDRM

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References

  1. Lindheim, S. R., et al. Comparison of estimates of insulin sensitivity in pre- and postmenopausal women using the insulin tolerance test and the frequently sampled intravenous glucose tolerance test. J. Soc. Gynecol. Invest. 1, 150-154 (1994).
  2. Dubnov-Raz, G., Pines, A., Berry, E. M. Diet and lifestyle in managing postmenopausal obesity. Climacteric. 10 Suppl 2, 38-41 (2007).
  3. Grundy, S. M. Metabolic syndrome: connecting and reconciling cardiovascular and diabetes worlds. J. Am. Coll. Cardiol. 47, 1093-1100 (2006).
  4. Sharma, S., Firoozi, S., McKenna, W. J. Value of exercise testing in assessing clinical state and prognosis in hypertrophic cardiomyopathy. Cardiol. Rev. 9, 70-76 (2001).
  5. Guyatt, G. H., Devereaux, P. J. A review of heart failure treatment. Mt. Sinai. J. Med. 71, 47-54 (2004).
  6. Mayer, L. P., et al. Long-term effects of ovarian follicular depletion in rats by 4-vinylcyclohexene diepoxide. Reprod. Toxicol. 16, 775-781 (2002).
  7. Mayer, L. P., Devine, P. J., Dyer, C. A., Hoyer, P. B. The follicle-deplete mouse ovary produces androgen. Biol. Reprod. 71, 130-138 (2004).
  8. Lohff, J. C., Christian, P. J., Marion, S. L., Hoyer, P. B. Effect of duration of dosing on onset of ovarian failure in a chemical-induced mouse model of perimenopause. Menopause. 13, 482-488 (2006).
  9. Wright, L. E., et al. Comparison of skeletal effects of ovariectomy versus chemically induced ovarian failure in mice. J. Bone Miner Res. 23, 1296-1303 (2008).
  10. Ogawa, S., Chan, J., Gustafsson, J. A., Korach, K. S., Pfaff, D. W. Estrogen increases locomotor activity in mice through estrogen receptor alpha: specificity for the type of activity. Endocrinology. 144, 230-239 (2003).
  11. Roy, E. J., Wade, G. N. Role of estrogens in androgen-induced spontaneous activity in male rats. J. Comp. Physiol. Psychol. 89, 573-579 (1975).
  12. Fahrbach, S. E., Meisel, R. L., Pfaff, D. W. Preoptic implants of estradiol increase wheel running but not the open field activity of female rats. Physiol. Behav. 35, 985-992 (1985).
  13. Morgan, M. A., Pfaff, D. W. Effects of estrogen on activity and fear-related behaviors in mice. Horm. Behav. 40, 472-482 (2001).
  14. Gorzek, J. F., et al. Estradiol and tamoxifen reverse ovariectomy-induced physical inactivity in mice. Med. Sci. Sports Exerc. 39, 248-256 (2007).
  15. Kadi, F., et al. The effects of physical activity and estrogen treatment on rat fast and slow skeletal muscles following ovariectomy. J. Muscle Res. Cell Motil. 23, 335-339 (2002).
  16. Konhilas, J. P., et al. Sex modifies exercise and cardiac adaptation in mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 287, 2768-2776 (2004).
  17. Caligioni, C. S. Assessing reproductive status/stages in mice. Curr. Protoc. Neurosci. 4, (2009).
  18. Goldman, J. M., Murr, A. S., Cooper, R. L. The rodent estrous cycle: characterization of vaginal cytology and its utility in toxicological studies. Birth Defects Res. B. Reprod. Toxicol. 80, 84-97 (2007).
  19. McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. Performing vaginal lavage, crystal violet staining, and vaginal cytological evaluation for mouse estrous cycle staging identification. J. Vis. Exp. , (2012).
  20. McKee, L. A., et al. Sexually dimorphic myofilament function and cardiac troponin I phosphospecies distribution in hypertrophic cardiomyopathy mice. Arch. Biochem. Biophys. 535, 39-48 (2013).
  21. Konhilas, J. P., et al. Exercise can prevent and reverse the severity of hypertrophic cardiomyopathy. Circ. Res. 98, 540-548 (2006).
  22. Perez, N. J., Chen, H., Regan, J. A., Emert, A., Constantopoulos, E., Lynn, M., Konhilas, J. P. The impact of chemically-induced ovarian failure on voluntary cage wheel exercise and cardiac adaptation in mice. Compar. Med. In press, (2013).

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