Summary

कम itraconazole एकाग्रता और durations के इलाज में सफल रहे हैं<em> Batrachochytrium dendrobatidis</em> उभयचरों में संक्रमण

Published: March 14, 2014
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Summary

उभयचर में Batrachochytrium dendrobatidis संक्रमण एक कम एकाग्रता (0.0025%) और आम तौर पर प्रयोग किया जाता है से itraconazole की कम अवधि (छह दिनों के लिए पांच मिनट का स्नान) का उपयोग कर समाप्त किया जा सकता है. कम मृत्यु दर और कम नकारात्मक पक्ष प्रभाव इस संशोधित उपचार प्रोटोकॉल का उपयोग कर मनाया गया.

Abstract

उभयचर किसी भी हड्डीवाला वर्ग की सबसे बड़ी गिरावट का सामना कर रहे हैं और इन गिरावट की एक प्रमुख कारण रोग chytridiomycosis का कारण बनता है, जो एक कवक रोगज़नक़, Batrachochytrium dendrobatidis (बी), है. कैप्टिव आश्वासन कालोनियों की धमकी दी उभयचर प्रजातियों के लिए दुनिया भर में महत्वपूर्ण हैं और विलुप्त होने के महत्वपूर्ण खतरे में उन लोगों के लिए केवल जीवन रेखा हो सकता है. रोग मुक्त कालोनियों को बनाए रखने बंदी प्रबंधकों की एक प्राथमिकता है, सभी प्रजातियों के लिए और जीवन चरणों में अभी तक सुरक्षित और प्रभावी उपचार की पहचान नहीं की गई है. आमतौर पर इस्तेमाल किया खुराक कुछ व्यक्तियों और प्रजातियों के लिए हानिकारक हो सकता है सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल chemotherapeutic इलाज, itraconazole है. हम itraconazole की एक कम है और सुरक्षित है लेकिन प्रभावी खुराक बी.डी. संक्रमण का इलाज करने के लिए पाया जा सकता का आकलन है कि एक चिकित्सीय उपचार परीक्षण प्रदर्शन किया. हमने पाया है कि 0.01-0.0025% से इलाज एकाग्रता को कम करने और 11 से इलाज की अवधि को कम करने से5 मिनट स्नान के -6 दिन, मेंढ़क कम साइड इफेक्ट और कम उपचार से जुड़े मृत्यु दर के साथ बी.डी. संक्रमण का इलाज किया जा सकता है.

Introduction

उभयचर वर्तमान में सभी हड्डीवाला taxa 1 की जैव विविधता में सबसे बड़ी गिरावट का सामना कर रहे हैं. . Chytridiomycosis, chytrid कवक रोगज़नक़ Batrachochytrium dendrobatidis (बी) के कारण एक त्वचा रोग, बी.डी. जैव विविधता के नुकसान के कारण के लिए सबसे खराब रिकॉर्ड पर रोगज़नक़ है इन नाटकीय गिरावट के 2 के प्रमुख कारणों में से एक है: यह उभयचरों की 600 से अधिक प्रजातियों को संक्रमित करता है और है के रूप में कई के रूप में 200 प्रजातियों के गंभीर खतरे या 2,3 विलुप्त हो गए हैं, जिनमें से 300 से अधिक प्रजातियों में गिरावट आती है, के कारण होता है. उभयचर chytrid कवक विशिष्ट मेजबान नहीं है और यह गंभीर रोग के कारण प्रगति के लिए बी.डी. संक्रमण के लिए अनुमति देने के मेजबान के गुण क्या स्पष्ट नहीं है. Chytridiomycosis इलेक्ट्रोलाइट नुकसान और दिल की विफलता के 4, जिसके परिणामस्वरूप त्वचा में आयन चैनल में बाधा पहुँचा द्वारा मौत का कारण बनता है. इसके अलावा, (कोई बी.डी. zoospores युक्त) बी.डी. सतह पर तैरनेवाला tadpoles में एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया 5 leadin का कारण बनता हैजी शोधकर्ताओं बी.डी. द्वारा उत्पाद 6 एक जहरीले पैदा करता है विश्वास करना.

कई प्रजातियों के तेजी से गिरावट आ रही है, क्योंकि बंदी आश्वासन कालोनियों और प्रजनन कार्यक्रम महत्वपूर्ण संरक्षण उपाय कर रहे हैं, और कुछ प्रजातियों के लिए केवल जीवन रेखा हो सकता है. स्थापना और रोग मुक्त कालोनियों को बनाए रखने उभयचर प्रबंधन सुविधाओं के लिए एक चुनौती है. बी.डी. संक्रमण के इलाज के लिए वर्तमान chemotherapeutic तरीकों, प्रभावी, हालांकि इलाज किया जा रहा से पशुओं के लिए हानिकारक हो सकता है, और कोई एक उपचार विधि प्रजातियों और उभयचर 7 साल की उम्र वर्गों में सफल रहा है.

बी.डी. संक्रमण के लिए उपचार के कुछ नैदानिक ​​परीक्षणों 7 प्रदर्शन किया गया है. उपचार के तीन सबसे अधिक इस्तेमाल किया तरीकों गर्मी चिकित्सा, chloramphenicol और itraconazole हैं. हीट थेरेपी कुछ साइड इफेक्ट, कई जीवन चरणों पर इस्तेमाल किया जा सकता है प्रतीत होता है कि एक nonchemotherapeutic उपचार विकल्प है, और gener हैसहयोगी प्रभावी. एक इलाज के परीक्षण में, Chatfield और रिचर्ड्स-Zawacki 8 इलाज जानवरों के 96% से 10 दिनों के लिए 30 डिग्री सेल्सियस पर रखे जाने के बाद संक्रमण मंजूरी दे दी थी कि पाया. इस परीक्षण 100% सफल नहीं था, यह दूसरों के लिए अपने ही प्रजाति के लिए गर्मी चिकित्सा का आकलन करने के लिए एक आधार रेखा प्रदान करता है. गर्मी चिकित्सा, कई प्रजातियों के लिए प्रभावी हालांकि, समय की एक विस्तारित अवधि के लिए उच्च तापमान पर नहीं रह सकते हैं कि कई अल्पाइन प्रजाति के लिए अव्यावहारिक है. Chloramphenicol, एक जीवाणुरोधी, कई प्रजातियों में बी.डी. इलाज के लिए सफलतापूर्वक इस्तेमाल किया, और इन विट्रो में कवक विकास को रोकता किया गया है. एक जीवाणुरोधी के रूप में, chloramphenicol विशेष रूप से कवक हमला नहीं करता है लेकिन कोशिकाओं 9 में apoptosis का कारण ज्ञात किया गया है. यह कार्रवाई की सटीक व्यवस्था अज्ञात है, हालांकि chloramphenicol चिकित्सा, intracellular sporangia हत्या, त्वचा में apoptosis का कारण बनता है कि अनुमान लगाया गया है. कोई चिकित्सीय परीक्षण इसलिए आयोजित किया गया है, हालांकिखुराक और उपचार समय का मूल्यांकन नहीं किया गया है वर्तमान उपचार प्रोटोकॉल आम तौर पर स्थलीय उभयचर के लिए इस इलाज अव्यावहारिक बना रही है, दो से चार सप्ताह 10,11 के लिए डुबकी आवश्यकता होती है. मानव जोखिम अप्लास्टिक अनीमिया 12 की एक दुर्लभ रूप के साथ संबद्ध किया गया है क्योंकि chloramphenicol भी पशु चिकित्सा उपयोग के लिए कुछ देशों में प्रतिबंधित कर दिया गया है.

Itraconazole, एक azole रोधी, सबसे व्यापक रूप से कैद में उभयचर में बी.डी. संक्रमण के उपचार के लिए प्रयोग किया जाता है. सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया प्रोटोकॉल पांच मिनट लगातार 11 दिनों के लिए एक दिन के लिए एक 0.01% itraconazole समाधान में स्नान जानवरों है. इस प्रोटोकॉल उभयचर के लिए प्रभावी है, यह उभयचर 11,13 में नैदानिक ​​परीक्षणों पर आधारित नहीं है, स्तनधारी प्रशासन के लिए इस्तेमाल किया मानकों से ली गई है, और किया गया था. इस प्रोटोकॉल विशेष रूप से जीनस राणा में और tadpoles और हाल metamorphs 11 में, कुछ प्रजातियों में नकारात्मक पक्ष प्रभाव पैदा कर सकता है.टैडपोल उपचार itraconazole का एक बहुत कम एकाग्रता (0.0005%) का उपयोग सफल रहा है, लेकिन विरंजनता 14 के साथ जुड़े थे. यह एक ही एकाग्रता हाल metamorphs पर trialed और संक्रमण 15 के उपचार में असफल हो पाया था. Itraconazole उपचार के साथ नकारात्मक पक्ष प्रभाव का खतरा है, क्योंकि कुछ चिकित्सकों लगातार 11 दिनों के लिए एक आधा सामान्य एकाग्रता (0.005%) का इस्तेमाल किया और इस बी.डी. संक्रमण 16 का इलाज करने में सफल हो पाया है.

वर्तमान अध्ययन बी.डी. संक्रमण 15 के इलाज के लिए itraconazole का उपयोग कर एक चिकित्सीय उपचार परीक्षण का सार है. प्रोटोकॉल itraconazole साथ बी.डी. संक्रमित पशुओं के इलाज के लिए सुरक्षित और प्रभावी है कि दोनों निम्नतम खुराक और उपचार समय मिल करने की कोशिश का वर्णन करता है. इस अध्ययन में प्रयुक्त जानवर खाड़ी तट toads का हाल metamorphs, Incilius nebulifer थे.

Protocol

आचार स्वीकृति: यह अध्ययन और उसके तरीकों Tulane विश्वविद्यालय के पशु इस्तेमाल और देखभाल समिति (. प्रोटोकॉल कोई 0407) द्वारा अनुमोदित किया गया. 1. बी.डी. संक्रमण के लिए परीक्षण BD के लिए s…

Representative Results

सभी जानवरों को चार सप्ताह समाप्त हो गया उपचार के बाद BD-नकारात्मक थे itraconazole उपचार सफल माना जाता था. इलाज शुरू करने से पहले उपचार को समाप्त चार सप्ताह के बाद, BD-सकारात्मक नियंत्रण जानवरों 16,765.12 का एक मतल…

Discussion

इस प्रोटोकॉल का उपयोग हम सुरक्षित और कारगर ढंग उभयचर में BD के लिए itraconazole उपचार के उपचार खुराक और समय को कम करने में सक्षम थे. सबसे कम उपचार खुराक और समय (छह दिनों के लिए 0.0025%) subclinically संक्रमित मैं के लिए एक …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

मैं में मदद के लिए प्रयोगात्मक डिजाइन conceptualizing और सामग्री के साथ सहायता, एक इलाज के आहार और शव – परीक्षा की स्थापना में मदद के लिए ए Pessier का विश्लेषण करती है, MWH चत्फिएल्ड, एम.जे. Robak, लालकृष्ण Tasker और डी. Lenger मदद के लिए सीएल रिचर्ड्स-Zawacki शुक्रिया अदा करना चाहूँगा प्रयोगशाला और फिल्मांकन के दौरान उनके अंतरिक्ष के इस्तेमाल के लिए समर्थन और Taronga चिड़ियाघर में एम. McFadden और पी. हार्लो. परियोजना आंशिक रूप से ला Brannelly को सम्मानित किया लुइसियाना पर्यावरण शिक्षा आयोग अनुदान के माध्यम से और जीवन टेक्नोलॉजीज द्वारा वन्यजीव और मत्स्य पालन के लुइसियाना विभाग द्वारा वित्त पोषित किया गया.

Materials

0.1% Aqueous Itraconazole, Sporonox Janssen Pharmaceutica Inc.
NaCl Fisher Scientific S640-500
KCl Fisher Scientific BP366-1
CaCl2 Fisher Scientific BP510-100
NaHCO3 Fisher Scientific BP328-500
Sterile cotton swabs Medical and Wire Equipment MW113
1.5 ml micro tubes Sarstedt 73.703.217
Qiagen DNEasy Blood and Tissue Kit Qiagen 69581
7500 Real-time PCR Applied Biosystems 4351104
VIC IPC Applied Biosystems 4308323
BSA Applied Biosystems AM2618
Agar Invitrogen 30391023
Tryptone Invitrogen Q10029
Penicillin-streptomycin Invitrogen 15070-063
Petri Dish Sigma Aldrich CLS430589

References

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Cite This Article
Brannelly, L. A. Reduced Itraconazole Concentration and Durations Are Successful in Treating Batrachochytrium dendrobatidis Infection in Amphibians. J. Vis. Exp. (85), e51166, doi:10.3791/51166 (2014).

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