Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Facial Nerve aksotomi i mus: en model til at studere motoneuron Reaktion på Skade

doi: 10.3791/52382 Published: February 23, 2015

Abstract

Målet med denne kirurgiske protokol er at udsætte den facial nerve, som innerverer ansigtets muskulatur på sin udgang fra stylomastoid foramen og enten skære eller knuse det at inducere perifer nerveskade. Fordele ved denne operation er sin enkelhed, høj reproducerbarhed, og den manglende effekt på vitale funktioner eller mobilitet fra den efterfølgende ansigtslammelse, hvilket resulterer i en relativt mild kirurgisk resultat i forhold til andre nerveskade modeller. En væsentlig fordel ved anvendelse af en kraniel nerveskade model er, at motorneuroner opholde sig i en relativt homogen population i facial motor kerne i pons, forenkle undersøgelse af motorisk cellelegemer. På grund af den symmetriske natur af facial nerve innervation og manglende krydstale mellem ansigtets motoriske kerner kan operationen udføres ensidigt med unaxotomized side tjener som en parret intern kontrol. En række analyser kan udføres postoperativt for at vurdereer den fysiologiske reaktion, hvis enkeltheder er uden for rammerne af denne artikel. For eksempel kan genvinding af muskelfunktion tjene som en adfærdsmæssig markør for reinnervation eller de motoriske neuroner kan kvantificeres at måle celleoverlevelse. Derudover kan motoneuroner nøjagtigt taget med laser mikrodissektion for molekylær analyse. Fordi facial nerve axotomi er minimalt invasiv og veltolereret, kan det anvendes på en lang række af genetisk modificerede mus. Desuden kan denne operation model anvendes til at analysere effektiviteten af ​​perifere nerveskade behandlinger. Facial nerveskade tilvejebringer et middel til at undersøge ikke blot motoneuroner, men også svarene fra det centrale og perifere glia mikromiljø, immunsystemet, og målet muskulatur. Den facial nerve skade model er en bredt accepteret perifer nerveskade, der fungerer som et effektivt redskab til at studere nerveskade og regenerering.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Mange perifere modeller nerveskade eksisterer, men en, der skiller sig ud for studiet af motorneuroner er ansigtets nerve axotomi model. Den facial nerve, også kendt som kranienerver VII, stammer i pons og innerverer musklerne i ansigtsudtryk 1,2. I denne kirurgisk protokol er den facial nerve eksponeret ved sin exit fra stylomastoid foramen og enten er skåret eller knust. Sværhedsgraden af nerveskade kan klassificeres efter Sunderland 3 klassifikationer, hvilket adskiller den skade baseret på intakthed af axoner, endoneurium, perineuriet og epineurium, som er bindevæv lag, sekventielt wrap rundt Axon bundter. I crush skade (axonotmesis), er axoner adskilles, men perineuriet og epineurium bevares. Komplet funktionel genvinding fra facial nerve crush forekommer i omkring 11 dage, fordi det intakte nerve kappe tjener som en ledning, inden for hvilken axoner regrow 4,5. PåDerimod i snittet skade (neurotmesis), axoner og alle 3 bindevæv lag adskilles, og hele distale nerve skal regrow at genoprette muskulatur innervation. Kirurgisk genetablering af epineurium udføres ofte i humane patienter med nerve transektion skader dog genopretnings- resultater er sjældent optimalt. Yderligere undersøgelse er nødvendig for at forstå, hvorfor den nerve ikke regrow til sit mål, og hvilke behandlinger kan anvendes til at forbedre og fremskynde regenerative proces.

Der er mange fordele ved at studere nerveskade ved hjælp af facial nerve axotomi model. For det første facial nerve axotomi procedure er hurtig, nem og meget reproducerbar; og den resulterende lammelse af ansigtsmuskler ikke påvirke vitale funktioner og tolereres godt af dyret. Da dette er en kranienerver skade model, studere motoneuron celle organer er forenklet, fordi motoneuroner opholde sig i en forholdsvis homogen befolkning i the facial motor kerne i pons. Befolkningen har forskellig baseret på subnuclear mønster i ansigtet motor kerne, da der er syv subnuclei hver enkelt at innerverer en bestemt gruppe af muskler, så inde i kernen forskelle i respons på axotomi kan påvirke resultaterne 2,6,7.

En stor fordel af ansigtets nerve skade modellen er, at den unaxotomized side kan tjene som en parret intern kontrol, fordi nerve innervation er meget symmetrisk og der er ingen crosstalk mellem ansigtets motoriske kerner 8. En anden fordel ved anvendelse af denne kirurgiske fremgangsmåde er den manglende direkte trauma på CNS eller afbrydelse af blod-hjerne barrieren 9. Komplikationer såsom overdreven blødning og infektion er sjældne med denne procedure.

En række analyser kan udføres for at vurdere den fysiologiske reaktion på nerveskade. Udvindingen af ​​øjet blinkerefleksen og whisker aktivitet kan anvendes som en adfærdsmæssigmåling af funktionel genopretning 10,11. Videooptagelse af vibrissae aktivitet er i øjeblikket den mest effektive metode til påvisning af inddrivelse af facial nerve innervation 12,13. Efter eutanasi kan histologisk analyse af hjernestammen udføres på motoneuron cellelegemer i facial motor kernen. Den facial motor kerne er opdelt i syv subnuclei, der er specifikke for visse ansigtsmuskler, der giver mulighed for differentieret undersøgelse af svarene til skade 2,6. Facial motorneuroner kan tælles at kvantificere celleoverlevelse eller immunhistokemi kan anvendes til at identificere biomarkører og specifikke cellepopulationer 14. Den facial motor kerne kan præcist mikrodissekeres hjælp af laser capture for molekylær analyse af den cellulære respons på nerveskade 15,16. Virkningerne af den facial nerve axotomi kan analyseres i den motoriske hjernebark 17,18. Desuden kan nerven dissekeres at studere Wallerian degeneration 19 elleraxon regeneration 20, og musklerne kan fjernes for at studere neuromuskulære junctions 21. Facialisnerven axotomi kan også anvendes til at studere de medfølgende centrale og perifere gliaceller 22, målrette muskulatur 21 og immunsystemet 23. Selvom meget er blevet opnået i at studere facial nerve axotomi model 24, er yderligere undersøgelse af perifer nerveskade påkrævet, fordi nerveskader er et væsentligt problem for patienter og nuværende behandlinger ikke at producere optimale resultater. Denne model er et kraftfuldt værktøj til at undersøge den fysiologiske reaktion på nerveskade og analysere effektiviteten af ​​nerve regenerering behandlinger.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Alle procedurer udført godkendes af Indiana University School of Medicine Institutional Animal Care og brug Udvalg og følg National Institute of retningslinjer Sundhed.

1. Kirurgisk teknik

  1. Oprethold aseptisk teknik under denne procedure ved hjælp af sterile handsker, instrumenter og et sterilt kirurgisk felt ifølge NIH retningslinjer 25. Steriliseres værktøjer, før du begynder kirurgi ved autoklavering dem (se tabel af specifikke reagenser / udstyr for komplet liste). Brug en glaskugle sterilisator at sterilisere redskaber under operationen.

2. Anæstesi og Forberedelse

  1. Bedøver musen i en anæstesi boks med en blanding af 0,9 L / min oxygen og 2,5% isofluran ved hjælp af en veterinær isofluran vaporizer system. Sørg for, at musen ikke reagerer på ændringer i kropsstilling, før du fjerner den fra kassen.
  2. Anvend oftalmologiske salve til mouSE øjne for at beskytte dem mod udtørring.
  3. Skift gasstrømmen fra boksen til næse kegle. Placer musen holdent på sin venstre side på en opvarmet pude dækket med en kirurgisk pad og absorberende bænk papir med sin næse og mund inde i keglen. Løbende overvåge musens vejrtrækning rytme og hastighed og justere isofluran niveauer efter behov (mellem 2,5-3% isofluran) for at opretholde et passende niveau for anæstesi, og bruge tå knivspids refleks at bekræfte total sedation.

3. Kirurgisk Approach

  1. Juster og fokusere stereoskop med det kirurgiske område. Juster næsekeglen og tape det ned, så det er placeret langs kanten af ​​synsfeltet.
  2. Med musen liggende på sin venstre side, tape kanten af ​​højre øre til næsekeglen, udsætter området bag øret, hvor snittet skal foretages. Sørg for, at den bageste ørevenen bevæger vandret over øret. Bemærk, at den korrekte placering af than dyr og tape af øret er afgørende for hurtigt at finde det facial nerve.
  3. Fugt pelsen på og bag øret med 70% ethanol og barbere det kirurgiske sted ved hjælp af et barberblad eller skalpelblad. Pre-befugtning pelsen gør barbering nemmere i denne anatomiske placering.
  4. Rens huden med en iodopløsning, såsom Betadine kirurgiske krat (7,5% povidon-iod), efterfulgt af 70% ethanol. Gentag denne rengøring to gange mere til grundigt desinficere området.
  5. For at bestemme, hvor at gøre snittet, spore den bageste ørevenen fra øret kaudalt til området bageste til øret forhøjning. Brug af foråret saks, lave en 4 mm snit 2-3 mm posteriort for fremspringet.
  6. Skær gennem det subkutane fedt og fascia ved stump dissektion. Undgå direkte skæring med saksen, fordi blodkar eller muskelvæv kan let beskadiget.
  7. Hvis der opstår blødning, lægge pres på det kirurgiske sted med en steril vatpindfor mindst 30 sek. Hvis betydeligt tab væske sker, injicere mus intraperitonealt med op til 0,5 ml steril 0,9% saltopløsning under anvendelse af en 25 eller 27 G nål.
  8. Brug flere vigtige vartegn, spinal tilbehør nerve, øregangen, og forreste digastric muskel (beskrevet nedenfor), for at lokalisere den facial nerve. Dissekere omkring disse vartegn, indtil grenene af facial nerve visualiseres. Nerven vises som en betydelig solid hvid struktur, når det er afsløret, og et lag af fascia klæber det til de underliggende strukturer.
    1. Find spinal tilbehør nerve, som bevæger sig fra den kaudale del af kraniet til innerverer trapezius musklen, når det subkutane fedt og fascia er blevet dissekeret. Det facial nerve er dybt til spinal tilbehør nerve.
    2. Find bruskagtig øregangen, der ser perlemorsfarvet og kan ses rostralt for facial nerve.
    3. Find muskelbugen af ​​den forreste digastric muskel, der ligger oven på og Caudal til ansigtet nerve.
  9. Når de vigtigste grene af facial nerve visualiseres, spore dem dorsalt at finde deres oprindelse fra stylomastoid foramen. Brug fine tippet Dumont pincet # 5/45 for at holde det kirurgiske sted åbent, fremrykke foråret Scissor tips efter nerve vej, derefter flytte tangen dorsalt for at holde den nyligt avancerede område åben.
  10. Visualiser stammen af ​​facial nerve med zygomatic, bukkal, og marginale mandibulære grene på dette punkt.
    BEMÆRK: Den tidsmæssige gren vil blive fundet tættere på foramen. Den marginale mandibulære nerve filialer i sine øvre og nedre del tættere på kæben, og dermed de nerve filialer vil ikke være synlige på dette niveau.
    1. Hvis der udføres en nerve transection stabilisere nerve forsigtigt med de fine spids pincet og skær nerven med foråret saks. Undgå at bruge for meget trækkraft til nerven med pincet for at forhindre avulsing nerven fra hjernestammen. Skubtræstubbe væk fra hinanden, eller klippe og fjerne en del af den distale nerve at sikre, at ingen gentilkobling kan forekomme.
    2. Hvis der udføres en crush skade, brug Dumont # 5/45 pincet til at komprimere nerve i 30 sek hjælp konstant pres for at afskære alle axoner, derefter gentage denne crush på en anden vinkel vinkelret på den første crush site. Undgå at anvende variable mængder af tryk under 30 sek knuse, ellers skaden vil være inkonsekvent mellem dyr.

4. Lukning og Recovery

  1. Flyt fedt og muskler i løbet af de underliggende strukturer.
  2. Omtrentlig kanterne af indsnit og lukke såret ved hjælp af en 7,5 mm sår klip. Suturer eller lim er også acceptable for sårlukning. Postsurgical analgetika kan leveres på dette tidspunkt.
  3. Fjern tapen fra musens øre. Sluk isofluran flow og tillade musen til at indånde ren oxygen i 30 sekunder til 1 min. Place musen i et tomt bur med ingen strøelse til at komme sig anæstesi.
  4. Når musen er genvundet, undersøge sin adfærd for genfremsatte tegn på ansigtslammelse. De whiskers bliver lammet og vinkles tilbage mod kinden, vil næsen fraviges, og øjet vil ikke blinke som reaktion på en pust af luft.
  5. Husdyr fællesskab efter operationen, hvis de er kvinder. Undgå boliger hanmus fællesskab, fordi de er mere aggressive og har tendens til at tvinge fjerne deres cagemate sår klip, hvilket fører til infektion. Giv postkirurgiske analgetika på dette tidspunkt, om nødvendigt.
  6. Overvåg musene én gang dagligt i flere dage efter operationen for at sikre, at ingen infektion eller andre komplikationer opstår postoperativt. Fjern sårklemmer 7-10 dage efter operationen, hvis de ikke er faldet ud på egen hånd.
  7. Anvend smøre øjet salve på det angrebne øje dagligt for at forhindre hornhinden komplikationer, enten indtil øjet blinkerefleksen er rebelagt eller indtil aflivning.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Efter facial nerve axotomi udføres, motoneuron tab opstår som følge af skaden. Motoneuron overlevelse efter skade afhænger af mange variabler, såsom køn, dyr alder på tidspunktet for kirurgi, og tidspunkterne, hvor de motoriske tæller er færdig, og Moran og Graeber anmeldelse 24 og Jinno og Yamada anmeldelse 22 både opsummere motoneuron overlevelsesdata. Typisk omkring 86% af motorneuroner overleve ved 28 dage efter axotomi 14,15,26. Kinetik for motoneuron tab er beskrevet i Serpe et al. 2000. Figur 1 illustrerer variationen i motoneuron overlevelse i flere genetisk modificerede mus. Er ikke observeret nogen signifikante forskelle i ansigtsudtryk motoriske tællinger af kontrol siden, viser, at de genetiske ændringer ikke påvirker baseline tæller. Sammenlignet med motoneuron overlevelse i vildtypemus (84% ± 2.0; figur 1A, D), betydeligt tab celle er observeret i en musemodelaf amyotrofisk lateral sklerose (SOD1 G93A; 68% ± 1, figur 1B, E) samt immundefekte rekombination-aktiverende gen-2 knockout mus (RAG-2 - / -; 57% ± 2,5; figur 1C, F) 27 .

Figur 2 viser laser capture microdissection teknik påføres facial motor kernen. Hele ansigtet motor kerne kan indfanges (figur 2A-C), eller subnuclei kan indsamles særskilt (figur 2D-F). For større præcision, kan motoneuroner indfanges enkeltvis, og de ​​resterende neuropil kan opsamles til analyse (figur 2G-I). Figur 3 viser qPCR resultaterne af RNA materiale ekstraheret fra inde i kernen prøver sammenligner ventromediale og ventrolaterale subnuclei. De fire gener testes, β II tubulin, vækst-associeret protein-43 (Gap-43), hemopoieTIC- og neurologisk udtrykt sekvens-1 (Hn1), og hjerne-afledt neurotrofisk faktor (BDNF) er alle forbundet med nerveregenerering respons og der er interessante forskelle mellem de to subnuclei og deres genekspressionsprofiler efter axotomi 16.

Figur 1
Figur 1. Repræsentative koronale facial motoriske kerne sektioner farvet med thionin og kvantificeres 28 dage efter facial nerve transection. Facial motordrevne kerner er vist fra (A, D) WT, (B, E) SOD1 G93A og (C, F) RAG- 2 - / - mus (kontrol side, axotomiserede side). Scale barer = 120 um. Dette tal er blevet ændret fra 27. Klik her for at se en større udgave af ther figur.

Figur 2
Figur 2. Laser mikrodissektion af ansigtets motoriske kerne. (A) thionin-farvet sektion af axotomiserede facial nucleus, (B) med delvis laser mikrodissektion af axotomiserede facial nucleus, og (C) samling af laser mikrodissekeres væv. En skabelon (D) af subnuclei blev overlejret på computerskærmen for at identificere ventromediale og ventrolaterale facial subnuclei til laser mikrodissektion (E, F). Facial motoneuroner var laser mikrodissekeret baseret på deres morfologi med en synlig kerne og nucleolus (* angiver motoneuron, G, H), mens FMN cellelegemet fragmenter, der er angivet med pilene (G), blev laser mikrodissekeres separat og bortskaffes på at fjerne FMN mRNA i neuropil ssempler. Efter at alle FMN og cellelegeme fragmenter blev opsamlet, og den resterende ansigtscellekerne væv var laser mikrodissekeres som neuropil prøve (I). Scale barer = 100 um. Dette tal er blevet ændret fra 16. Klik her for at se en større udgave af dette tal.

Figur 3
Figur 3. Pro-regenerering og pro-overlevelse mRNA ekspression i ventromediale (VM) og ventrolaterale (VL) facial motor inde i kernen regioner efter facial nerve axotomi. Gennemsnitlig procent af mRNA-ekspression ± SEM i gennemskæres VM og VL facial subnuclei forhold til ikke-opererede kontrol subnuclei (AD). Tidsforløbet for mRNA-ekspression omfatter ikke skade (0), 3, 7, 14 og 28 databeskyttelsesansvarlige for βII tubulin (A (B), Hn1 (C), og BDNF (D). # Repræsenterer betydelige forskelle i VL forhold til VM, ved p <0,05. Dette tal er blevet ændret fra 16.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Stereo microscope Leica M60
Labeling tape Fisher Scientific 15-952
Vannas-Tübingen spring scissors - straight/sharp/8.5 cm/5 mm cutting edge Fine Science Tools 15003-08 Sterilize before use
Dumont #5/45 forceps - standard tips/angled 45°/Dumoxel/11 cm Fine Science Tools 11251-35 Sterilize before use
Michel suture clips - 7.5 mm x 1.75 mm Fine Science Tools 12040-01 Described as "wound clip" in protocol, sterilize before use
Hagenbarth cross action wound clip applier 5" George Tiemann & Co 160-910 Used to apply wound clip, sterilize before use
Michel suture clip applicator & remover - For 7.5 mm clips Fine Science Tools 12029-12 Used to remove wound clip
0.9% Sodium chloride injection, USP Hospira 0409-4888-10
Betadine, 16 oz, with dispenser Fisher Scientific 19-027132
70% Ethanol
Glass bead sterilizer

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Kaufman, M., Bard, J. The Anatomical Basis of Mouse Development. Elsevier. New York, NY. (1999).
  2. Ashwell, K. The adult mouse facial nerve nucleus: morphology and musculotopic organization. Journal of Anatomy. 135, 531-538 (1982).
  3. Sunderland, S. A classification of peripheral nerve injuries producing loss of function. Brain : A Journal Of Neurology. 74, 491-516 (1951).
  4. Beahrs, T., Tanzer, L., Sanders, V. M., Jones, K. J. Functional recovery and facial motoneuron survival are influenced by immunodeficiency in crush-axotomized mice. Experimental Neurology. 221, 225-230 (2010).
  5. Mesnard, N. A., Haulcomb, M. M., Tanzer, L., Sanders, V., Jones, K. J. Delayed functional recovery in presymptomatic mSOD1G93A mice following facial nerve crush axotomy. Journal of Neurodegeneration & Regeneration. 4, 21-25 (2013).
  6. Komiyama, M., Shibata, H., Suzuki, T. Somatotopic representation of facial muscles within the facial nucleus of the mouse. A study using the retrograde horseradish peroxidase and cell degeneration techniques. Brain Behav Evol. 24, 144-151 (1984).
  7. Canh, M. Y., Serpe, C. J., Sanders, V., Jones, K. J. CD4(+) T cell-mediated facial motoneuron survival after injury: Distribution pattern of cell death and rescue throughout the extent of the facial motor nucleus. Journal of Neuroimmunology. 181, 93-99 (2006).
  8. Isokawa-Akesson, M., Komisaruk, B. Difference in projections to the lateral and medial facial nucleus: anatomically separate pathways for rhythmical vibrissa movement in rats. Exp Brain Res. 65, 385-398 (1987).
  9. Streit, W., Kreutzberg, G. Response of endogenous glial cells to motor neuron degeneration induced by toxic ricin. The Journal of Comparative Neurology. 268, 248-263 (1988).
  10. Serpe, C. J., Tetzlaff, J. E., Coers, S., Sanders, V., Jones, K. J. Functional recovery after facial nerve crush is delayed in severe combined immunodeficient mice. Brain, Behavior, And Immunity. 16, 808-812 (2002).
  11. Lal, D., et al. Electrical stimulation facilitates rat facial nerve recovery from a crush injury. Otolaryngology--Head And Neck Surgery. Official Journal Of American Academy Of Otolaryngology-Head And Neck Surgery. 139, 68-73 (2008).
  12. Tomov, T., et al. An Example of Neural Plasticity Evoked by Putative Behavioral Demand and Early Use of Vibrissal Hairs after Facial Nerve Transection. Experimental Neurology. 178, 207-218 (2002).
  13. Skouras, E., Angelov, D. N. Experimental studies on post-transectional facial nerve regrowth and functional recovery of paralyzed muscles of the face in rats and mice. Anatomy (International Journal of Experimental and Clinical Anatomy). 4, 1-27 (2010).
  14. Xin, J., et al. IL-10 within the CNS is necessary for CD4+ T cells to mediate neuroprotection). Brain, Behavior, And Immunity. 25, 820-829 (2011).
  15. Mesnard, N. A., Sanders, V. M., Jones, K. J. Differential gene expression in the axotomized facial motor nucleus of presymptomatic SOD1 mice. The Journal of Comparative Neurology. 519, 3488-3506 (2011).
  16. Mesnard, N. A., Alexander, T. D., Sanders, V. M., Jones, K. J. Use of laser microdissection in the investigation of facial motoneuron and neuropil molecular phenotypes after peripheral axotomy. Experimental Neurology. 225, 94-103 (2010).
  17. Franchi, G. Changes in motor representation related to facial nerve damage and regeneration in adult rats. Experimental Brain Research. 135, 53-65 (2000).
  18. Munera, A., Cuestas, D. M., Troncoso, J. Peripheral facial nerve lesions induce changes in the firing properties of primary motor cortex layer 5 pyramidal cells. Neuroscience. 223, 140-151 (2012).
  19. Liu, L., et al. Hereditary absence of complement C5 in adult mice influences Wallerian degeneration, but not retrograde responses, following injury to peripheral nerve. Journal of the Peripheral Nervous System. 4, 123-133 (1999).
  20. Ferri, C., Moore, F., Bisby, M. Effects of facial nerve injury on mouse motoneurons lacking the p75 low-affinity neurotrophin receptor. Journal of Neurobiology. 34, 1-9 (1997).
  21. Zhou, R. Y., Xu, J., Chi, F. L., Chen, L. H., Li, S. T. Differences in sensitivity to rocuronium among orbicularis oris muscles innervated by normal or damaged facial nerves and gastrocnemius muscle innervated by somatic nerve in rats: combined morphological and functional analyses. The Laryngoscope. 122, 1831-1837 (2012).
  22. Jinno, S., Yamada, J. Using comparative anatomy in the axotomy model to identify distinct roles for microglia and astrocytes in synaptic stripping. Neuron Glia Biology. 7, 55-66 (2011).
  23. Jones, K. J., Serpe, C. J., Byram, S. C., Deboy, C. A., Sanders, V. M. Role of the immune system in the maintenance of mouse facial motoneuron viability after nerve injury. Brain, Behavior, And Immunity. 19, 12-19 (2005).
  24. Moran, L. B., Graeber, M. B. The facial nerve axotomy model. Brain research. Brain research. 44, 154-178 (2004).
  25. Council, N. R. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals: Eighth Edition. The National Academies Press. New York, NY. (2011).
  26. Serpe, C. J., Kohm, A. P., Huppenbauer, C. B., Sanders, V., Jones, K. J. Exacerbation of Facial Motoneuron Loss after facial nerve transection in severe combined immunodeficient (scid) mice. Neuroscience. 19, (1999).
  27. Mesnard-Hoaglin, N. A., et al. SOD1(G93A) transgenic mouse CD4(+) T cells mediate neuroprotection after facial nerve axotomy when removed from a suppressive peripheral microenvironment. Brain, Behavior, And Immunity. 40, 55-60 (2014).
  28. Wang, H., et al. Establishment and assessment of the perinatal mouse facial nerve axotomy model via a subauricular incision approach. Experimental Biology And Medicine. 237, 1249-1255 (2012).
  29. Sharma, N., Moeller, C. W., Marzo, S. J., Jones, K. J., Foecking, E. M. Combinatorial treatments enhance recovery following facial nerve crush. The Laryngoscope. 120, 1523-1530 (2010).
  30. Lieberman, D. M., Jan, T. A., Ahmad, S. O., Most, S. P. Effects of corticosteroids on functional recovery and neuron survival after facial nerve injury in mice. Archives of Facial Plastic Surgery. 13, 117-124 (2011).
  31. Serpe, C. J., Coers, S., Sanders, V. M., Jones, K. J. CD4+ T, but not CD8+ or B, lymphocytes mediate facial motoneuron survival after facial nerve transection. Brain, Behavior, And Immunity. 17, 393-402 (2003).
  32. Haulcomb, M. M., et al. Axotomy-induced target disconnection promotes an additional death mechanism involved in motoneuron degeneration in ALS transgenic mice. The Journal of Comparative Neurology. (2014).
  33. Bauder, A. R., Ferguson, T. A. Reproducible mouse sciatic nerve crush and subsequent assessment of regeneration by whole mount muscle analysis. Journal of Visualized Experiments : JoVE. (60), (2012).
  34. Richner, M., Bjerrum, O. J., Nykjaer, A., Vaegter, C. B. The spared nerve injury (SNI) model of induced mechanical allodynia in mice. Journal of Visualized Experiments : JoVE. (54), (2011).
Facial Nerve aksotomi i mus: en model til at studere motoneuron Reaktion på Skade
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Olmstead, D. N., Mesnard-Hoaglin, N. A., Batka, R. J., Haulcomb, M. M., Miller, W. M., Jones, K. J. Facial Nerve Axotomy in Mice: A Model to Study Motoneuron Response to Injury. J. Vis. Exp. (96), e52382, doi:10.3791/52382 (2015).More

Olmstead, D. N., Mesnard-Hoaglin, N. A., Batka, R. J., Haulcomb, M. M., Miller, W. M., Jones, K. J. Facial Nerve Axotomy in Mice: A Model to Study Motoneuron Response to Injury. J. Vis. Exp. (96), e52382, doi:10.3791/52382 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter