Introduction
Opheldering van de gebeurtenissen onderliggende cardiale respons op zowel ischemie en reperfusie zijn essentieel om de behandeling van myocardiaal infarct 1 en cardiale chirurgische procedures die vereisen aorta kruis-klemmen 2. Terwijl in vivo modellen van ischemie reperfusie schade toe nuttig eindpuntonderzoek, ze niet zo doeltreffend voor het bestuderen van de functionele effecten van ischemie reperfusie schade acuut in real time. Bovendien, in vivo reperfusie ischemie modellen produceren gewoonlijk aanzienlijke variabiliteit in infarctgrootte en directe afgifte van geneesmiddel aan het hart op het tijdstip van reperfusie is een uitdaging. Het gebruik van een Langendorff geïsoleerde hart voor het bestuderen ischemie reperfusie schade maakt real-time functionele beoordeling van farmacologische behandelingen, egale van geïnfarcteerd weefsel en onmiddellijke afgifte van geneesmiddel direct op het myocardium.
Beschreven by Oscar Langendorff in 1895 3, het Langendorff geïsoleerde hart is een robuust model voor het bestuderen van ischemie-reperfusie schade, die is gebruikt bij ischemie-reperfusie onderzoek voor de laatste 40 jaar van 4,5. Hier zijn enkele wijzigingen aangebracht in het geïsoleerde hart optimaliseren voor functionele analyse. In situ canulatie van de aorta terwijl het hart klopt zodat het hart niet ervaren ischemische voorconditionering, die de resultaten van ischemie reperfusie proeven 6 zou wijzigen. Om dit te vergemakkelijken, wordt een tracheotomie uitgevoerd, waardoor ventilatie zorgen fysiologische stabiliteit van de rat tijdens de operatie. Het hart wordt vervolgens naar een glas watermantel spiraal kolom waardoor Krebs Henseleit buffer wordt geleverd via retrograde perfusie direct in de aorta bevestigd. Een zoutoplossing gevulde ballon in de linker ventrikel en verbonden met een drukopnemer, die zorgt voor real time meting van de druk vanuit het ventrikel eend berekening van meerdere functionele parameters. Aan het einde van het experiment wordt het hart gespoeld met koude zoutoplossing om krimp en flash ingevroren in vloeibare stikstof naar stroomafwaartse analyse van DNA, RNA en eiwit niveau mogelijk aanhouden. Aldus gewijzigd, de Langendorff doorbloed hart fungeert als een doeltreffend systeem voor de directe controle van de fysiologische effecten van farmacologische interventies op elk moment acuut tijdens de ischemie-reperfusie schade.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle hier genoemde procedures zijn door de Institutional Animal Care en gebruik Comite aan de Medische Universiteit van South Carolina. De hier beschreven experimenten acute, niet-overlevingsexperimenten. Als zodanig is er geen gebruik van oogzalf en een steriele operatiekamer is niet vereist. Euthanasie wordt bereikt door verbloeding bij het oogsten van het hart.
1. Experimentele Voorbereiding
- Het opzetten van ofwel een constante druk of constante stroom Langendorff perfusie Apparatus 4.
- Bereid 4 L gemodificeerde Krebs Henseleit buffer (in mM: 112 NaCl, 5 KCI, 1,2 MgSO 4, 1 K 2 HPO 4, 1,25 CaCl 2, 25 NaHCO 3, 11 D-glucose, 0,2 octaanzuur, pH = 7,4).
- Maak 10x voorraad buffers.
- Los NaCl, KCl, MgSO4, en K 2 HPO 4 in 3 L ultrapuur water.
- Los CaCl2 in 500 ml ultrapuur water with 40 ml 1 N HCl.
- Voeg langzaam CaCl 2-oplossing aan de buffer in 1.2.1.1. Voeg genoeg ultrapuur water om een totaal aan 4 L. Laat roeren gedurende 1 uur voordat het filteren door middel van een 0,8 um filter. Bewaar bij 4 ° C.
- Los NaHCO3 in 4 L ultrapuur water. Laat roeren 1 uur vóór filtratie door 0,8 pm filter. Bewaren bij 4 ° C
- Combineer 400 ml 10 x Krebs Henseleit-buffer met 400 ml 10 x 3 NaHCO buffer. Voeg genoeg ultrapuur water om een totaal aan 4 L. Los glucose en octaanzuur onder roeren. Filteren door middel van 0,8 um filter.
- Maak 10x voorraad buffers.
- Bereid je voor het hart.
- Voeg 2 L gefiltreerde buffer een 4 L geplaatste fles 38 in boven de plugkraan bevestigd aan de aorta canule. Dit zal een perfusiedruk van 70-80 mmHg leveren aan het hart, dat is het aanbevolen perfusiedruk 4.
- Plaats gas dispersie bubbler in de buffer in de fles.
- Laat de buffer door het systeem, en zorg ervoor dat eventuele luchtbellen te verwijderen vanuit de slang.
- Schakel gas (95% O2 / 5% CO 2) ten minste 30 minuten voor het hart te worden gebracht. Gebruik een gasstroom sonde en bloed gas analyzer om zuurstofverzadiging te controleren.
- Bereid chirurgische voorraden en ballon.
- Voor het oogsten van hart, bereidt een paar 6,75 "chirurgische schaar, een paar 4,5" schaar, twee paar hemostats, twee sets caramalt forceps, twee spuiten met 27 G naalden, 2 stuks 0-guage zijden hechtdraad (ongeveer 15 cm lang), een 16/01 inch weerhaken canule en een tracheale canule.
- Om tracheacanule monteren, lijm een kort stuk van 1/16 inch diameter plastic slang aan op een Y-connector.
- Om ballon apparaat monteren: bevestig een maagsonde naald om een stuk van 1/16 inch buis, bevestig vervolgens slang aan druksensor huisvesting. Een kleine spuit bevestigd aan de andere kant van de druk transducer woningen zullen inflatie en deflatie van de ballon mogelijk te maken.
- Snijd een vierkant van plastic omslag en plaats punt van een maagsonde naald in het centrum. Wikkel de plastic omslag rond de maagsonde naald.
- Vul ballon met zoutoplossing en afhechten met twee hechtingen. Blaas de ballon om ervoor te zorgen dat er geen lekken. Het volume zoutoplossing binnen de opgeblazen ballon moet ongeveer 200 pl, maar kan variëren afhankelijk van de grootte van de rat.
- Alternatief, gebruik dan een latex vinger bed in plaats van de plastic verpakking. Plaats maagsonde naald binnen vinger kinderbed, vullen met zoutoplossing en afhechten.
2. Harvest het hart
- Weerhouden een Sprague Dawley rat met een decapicone of andere handmatige terughoudendheid apparaat. Weeg rat.
- Dien ketamine / xylazine mengsel (0,85 mg / kg ketamine en 0,15 mg / kg xylazine) via intraperitoneale injectie rat verdoven. Deze dosis verdoving voldoende verdoving voor bieden20-40 min, maar de procedure moet zo snel mogelijk na de anesthesie bevestigd worden voltooid.
- Bevestig juiste mate van anesthesie door testen teen knijpen reflex.
- Tracheotomie
- Verwijder pelt van half voorpoot naar de basis van de kaak, met behulp van hemostats om pelt en scharen verheffen tot incisie te maken. Houd de pels verheven om het scheiden van de onderliggende spieren, waardoor een te snijden langs de pels en verwijderen.
- Met behulp van hemostats, til klierweefsel en maak een horizontale incisie in de fascia inferieur aan het klierweefsel. Gebruik hemostats om incisie spreiden open, zorg niet te nick het jugularis aderen.
- Met hemostats pinch spier bovenliggende trachea en met een schaar maken een dwarse incisie in de spier net onder de punt van de hemostats. Met hemostats, verspreid tissue elkaar om trachea onthullen.
- Steek hemostats onder luchtpijp, clearing fascia terwijl vordert door voorzichtig vooruit en terugtrekken hemostats.
- Zodra hemostats succes achter de luchtpijp worden geplaatst, knijp 0-0 zijden hechtdraad met hemostats en hemisect de luchtpijp met een kleine, scherpe schaar.
- Plaats tracheacanule in de hemisected luchtpijp, hechtdraad trekt achter de luchtpijp, en bind de hechtdraad rond de gecanuleerde luchtpijp, het verankeren van de hechting aan de Y-lies van de canule met een chirurgen knoop.
- Met behulp van een 27 G naald, injecteren 1.000 U / kg heparine in de halsader en laten circuleren gedurende 30 sec.
- Thoracotomie
- Verwijder pelt van half buik om mid-voorpoot regio door te knijpen met hemostats en snijden met een schaar.
- Wordt ¾ inch dwarse incisie in de abdominale spierwand, net onder het diafragma.
- Voeg een verticale insnijding van de buikwand en borstwand snijden langs het borstbeen.
- Snijd het membraan terug bilateraal, vervolgens verspreid ribbenkast aan het hart, klem ribbenkast met hemostats om ervoor te zorgen het blijft verspreiden onthullen. Met behulp van hemostats, verwijder voorzichtig thymus, het blootstellen van de opgaande aorta.
- Plaag hemostats door de aorta lus, oprukkende en terugtrekken hemostats en voorzichtig verspreiden fascia aan puntje van hemostats door te laten.
- Gebruik hemostats naar 0-0 zijden hechtdraad achter oplopende aorta trekken, das hechtdraad in een losse halve vierkante knoop.
- Draai kraan om stroom van perfusie buffer, hemisect aorta beginnen en onmiddellijk steek de canule in de aorta lumen. Snel cinch een halve vierkante knoop en voltooien van de knoop, aanscherping grondig.
- Gebruik een schaar om het hart te ontleden weg van de grote vaten, verwijder het hart van de borst en hechten aan perfusie kolom.
- Trim overtollige longweefsel en laat het hart in evenwicht op de kolom voor ongeveer 15 minuten vóór het inbrengen van de ballon. Gebruik een normaal debiet van buffer door het hart van 10-20 ml / min.
3. Langendorff perfusie en ischemie-reperfusie schade
- Plaatsing van LV pressure ballon
- Leeglopen ballon terwijl rollen in een kegelvorm en draai kraantje om ervoor te zorgen ballon blijft leeggelopen.
- Accijnzen linker atrium met een kleine schaar om de toegang tot mitralisklep bloot.
- Plaats de ballon door de linker atrium en mitralisklep in linker ventrikel.
- Start druk monitoring software (LabChart Pro).
- Blaas de ballon door het openen van kraan en voorzichtig toenemende hoeveelheid zout in de ballon tot diastolische druk lezen van micromanometer overschrijdt nul.
- Om de lengte-spanning reactie te controleren, te blazen ballon langzaam naar een diastolische druk van 75 mmHg, langzaam leeglopen, herhaal een keer.
- Stel diastolische druk tot 10 mmHg door regeling van de hoeveelheid zout in de ballon. Draai kraan om de ballon te verzegelen op dit niveau van de inflatie, en onderhouden gesloten druksysteem tussen LV ballon en druksensor.
- Lagere hart in verwarmde kamer en deksel kamer met plastic.
- Advertentiebediening van ischemie-reperfusie schade
- Sluit de bodem van de verhitte kamer en laat ruimte te vullen met Effused buffer.
- Als buffer hart is ondergedompeld, draaien kraantje om de stroom van buffer te stoppen in het hart, inducerende globale ischemie. Ischemie kan variëren afhankelijk van de doelen van het experiment.
- Na 30 minuten van ischemie, draai kraan om stroom van buffer te herstellen in het hart, het initiëren van reperfusie.
- Laat reperfusie van het hart voor 1 uur voordat beëindiging van het experiment. Gebruik variabele reperfusie tijden, afhankelijk van de doelen van het experiment.
- Beëindiging van Experiment en oogsten van Tissue
- Met zijpoort van plugkraan, dienen 10 ml fosfaat gebufferde zoutoplossing bij 4 ° C in het hart met een snelheid van 10 ml / min aan het hart stil.
- Verwijder het hart uit perfusie kolom, trim weg resterende atriale weefsel.
- Plaats hart in een roestvrijstalen weefsel snijden matrix, bedek met Parafilm, en plaats bij -80 ° C gedurende 8 minuten, of totdat het hart heeft een marshmallow-achtige consistentie.
- Verwijder blok van diepvries en steek scheermesjes in moten matrix aan het hart snijden in 2 mm plakjes. Tissue blokken kunnen ook worden gekocht met andere dan 2 mm slice maten.
- Verwijder plakjes één op een tijd en vallen in vloeibare stikstof te knipperen te bevriezen voor biochemische studies. Bewaar de derde ventriculaire slice van de apex voor infarct kleuring.
- Verwijder weefsel uit vloeibare stikstof en bewaar bij -80 ° C tot gebruik in biochemische experimenten.
- Infarct kleuring
- Incubeer de derde ventrikel slice in 10 ml van 1% g / v trifenyltetrazoliumchloride (TTC) bij 37 ° C gedurende 15 min.
Opmerking: Incubatie in TTC kan worden uitgevoerd gedurende 15 of 30 min zonder verandering in effectiviteit 15. - Overdracht weefsel slice van TTC tot 10% gebufferde formaline en laat een nacht incuberen bij kamertemperatuur. Voor een optimaal resultaat, horents moet worden genomen van formaline en afgebeeld binnen 24 uur 4.
- Foto gekleurd slice en gebruik software zoals ImageJ om infarctgrootte te schatten volgens het protocol van de fabrikant. Neem foto zo spoedig mogelijk na fixatie, omdat de verf vervagen in de tijd.
- Incubeer de derde ventrikel slice in 10 ml van 1% g / v trifenyltetrazoliumchloride (TTC) bij 37 ° C gedurende 15 min.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
De linker ventriculaire ballonapparaat maakt real-time monitoring van de druk die wordt ontwikkeld door de opdrachtgever linker ventrikel (figuur 1). Zoals eerder 7 beschreven, kan deze drukspoor worden gebruikt om veel van de parameters van ventriculaire functie te berekenen. Deze berekeningen kunnen worden gemaakt in de basislijnfase en de reperfusiefase, gemiddeld over meerdere sporen binnen elke groep en vergeleken om te bepalen of de farmacologische interventie resulteerde in cardiale voorbehandeling, zoals we eerder 9 hebben gedaan. Een dergelijke parameter is de ontwikkelde druk, berekend als het verschil tussen de systolische en eind diastolische druk. De ontwikkelde druk in normaal geperfuseerde rattenharten variëren 70-130 mmHg (figuur 1A). Nadat een ischemisch insult, wordt de ontwikkelde druk verlaagd en uiteindelijk diastolische druk verheft (Figuur 1B). Als de rattentoegediend bekende voorbehandeling middel zoals klasse I en IIb HDAC inhibitor SAHA (Vorinostat) 18 vóór uitsnijden van het hart, de afname in de ontwikkelde druk en de hoogte van einddiastolische druk geassocieerd met ischemie reperfusie schade verzwakt (figuur 1C). Andere maatregelen van de linker ventrikel functie, zoals de snelheid van de druk generatie (dP / dt max), kan de snelheid van de druk ontspanning (-dP / dt max), en de snelheid druk product (RPP) rechtstreeks worden verkregen of berekend op basis van de software uitgang (figuur 2). De ischemische fase kan worden in real-time, waarbij de schijnbare stopzetting van drukopbouw binnen enkele minuten na het begin van ischemie. Ischemische krimp kan ook worden gecontroleerd door het meten van de tijd tot begin van de contractie en de tijd om krimp piek.
Trifenyltetrazoliumchloride (TTC) wordt vaak gebruikt om onderscheid te maken tussen een metabolischctive en inactieve weefsel, en wordt hier gebruikt voor het infarct kleuring. Eenmaal geabsorbeerd in het weefsel TTC verminderd met metabolische enzymen, draaien de actieve weefsel rood. Inactieve weefsel niet verminderen TTC, en als zodanig zal vlek wit 8. Langendorff doorbloed rat harten die niet zijn onderworpen aan ischemische letsel hebben geen witte gebieden (niet getoond) niet laten zien, terwijl de harten onderworpen aan ischemie-reperfusie letsel tonen aanzienlijke gebieden gekleurd wit, wat aangeeft infarct weefsel (figuur 3).
Figuur 1: Representatieve druk sporen van linker ventrikel ballondruk geregistreerd door de LV ballon op ventriculaire contractie.. Hearts niet onderworpen aan ischemie (A) ervaring een klein verlies van contractiele vermogen van de tijd. Hearts onderworpen aan ischemie (B) tonen immediate drukverlies generatie, gevolgd door tonische contractie. Bij reperfusie, deze harten ervaren verhoogde EDP en verminderde ontwikkelde druk. Harten voorgeconditioneerd met SAHA en onderworpen aan ischemie (C) tonen vermindering van ischemie reperfusie schade. N = 1 per groep.
Figuur 2: Berekende parameters van ventriculaire functie Rate van de druk generatie (A), snelheid van de druk ontspanning (B), ontwikkelde druk (C), en beoordeel de druk product (D) zijn enkele parameters van ventriculaire functie die kan worden berekend op basis van de. druk monitoring software.
Figuur 3: TTC kleuring voor infarctgebied.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
De geïsoleerde geperfuseerde rattenhart succes kan worden gebruikt om het effect van farmacologische interventie preconditionering bij cardiale ischemie reperfusie schade 9 bestuderen. Er zijn echter enkele essentiële stappen van de procedure die moet worden genormaliseerd om reproduceerbare resultaten. Een temperatuur van 37,4 ° C binnen het systeem kritisch, omdat zelfs milde hypothermie en hyperthermie cardiale voorbehandeling 10,11 veroorzaken. De totale tijd die verstrijkt vanaf de injectie van verdoving aan de uitsnijding van het hart moeten tot een minimum worden beperkt, zoals langdurige blootstelling aan ketamine kunnen interfereren met cardiale preconditionering 12. Tijdige canulatie van de aorta in situ is essentieel voor het voorkomen van de ontwikkeling van hypoxie in het hart of de verbloeding van het dier vóór het hart excisie. Over het algemeen moet de tijd van eerste incisie om verwijdering van het hart niet langer dan 6-8 min. De linker ventrikel balloon moeten worden gecontroleerd op lekken voor elk experiment, en vervangen indien nodig. Het systeem moet zorgvuldig worden gehandhaafd, waaronder het spoelen van de gehele inrichting met gedestilleerd water na elke run en vervanging van versleten buis noodzakelijk om lekkage of verontreiniging van het inwendige van de buis te voorkomen.
De geïsoleerde hart kan worden gewijzigd voor een aantal nieuwe toepassingen, waaronder fluorescentie beeldvorming 13, NMR spectroscopie 7 en optische mapping 14 onder vele anderen. Het systeem kan ook worden aangepast om de harten van verschillende dieren, waaronder muizen perfuseren. Deze wijziging is bijzonder nuttig omdat het zorgt voor experimenten met transgene muizen. Om het systeem voor muisharten kleinere canules en een kleinere perfusie kolom passen moet worden gebruikt, naast andere modificaties. Gedetailleerde beschrijvingen van hoe de Langendorff methode voor muizen harten te gebruiken zijn elders 16,17 gepubliceerd. Andere modificaties vandit protocol zijn de toediening van verschillende geneesmiddelen op verschillende tijdstippen. Bij het onderzoek naar het vermogen van een geneesmiddel om farmacologische preconditionering of nabewerkingsfactor veroorzaken, is het noodzakelijk om het geneesmiddel op verschillende tijdstippen dienen in relatie tot de ischemie reperfusie schade. Het geneesmiddel kan worden toegediend aan het dier voordat het hart uitgesneden of gemengd in de buffer hetzij vóór het hart wordt op de kolom of in de ischemische fase, zodat het geneesmiddel aanwezig is na reperfusie. Als alternatief kan een zijpoort worden gebruikt om een bolus toe te dienen geneesmiddel op elk tijdstip tijdens het protocol. Bovendien kan het protocol worden gewijzigd om de duur van ischemie, reperfusie, of beide te wijzigen. Dit maakt de analyse van functionele en biochemische gegevens op verschillende tijdstippen en kan worden gebruikt om het tijdsverloop van het acute effect van een geneesmiddel te volgen. Indien de reperfusieperiode wordt gewijzigd, is het van belang dat ten minste 60 minuten van reperfusie zijn necessary voor TTC kleuring om effectief af te bakenen infarct gebied 15.
De grootste beperking van het geïsoleerde hartmodel qua ischemie reperfusie schade is dat het geen rekening met veel van de systemische factoren die in de omgeving van ischemie reperfusie in vivo. Deze eliminatie van systemische invloed moet worden verantwoord in de analyse van de gegevens die met behulp van de Langendorff model, maar niet de capaciteit van het model om nieuwe vragen over de reactie van myocyten, fibroblasten en endotheelcellen aan ischemie en reperfusie daaropvolgende antwoord uitsluiten. De geïsoleerde hartmodel zorgt voor volledige manipuleren van vele variabelen invloed ischemie reperfusieletsel naast real time analyse van de functionele effecten op het hart over korte tijdsintervallen. De door het gebruik van het geïsoleerde hart systeem data is van onschatbare waarde in het begrijpen van de farmacologische preconditionering of post-conditionering van dehart als reactie op diverse farmaceutische interventies.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Deze publicatie werd gesteund door de Zuid-Carolina Clinical & Translational Research (SCTR) Instituut, met een academische huis aan de Medische Universiteit van South Carolina, NIH / NCATS Grant Number UL1 TR000062. Verdere ondersteuning werd verstrekt door VA merit award BX002327-01 aan DRM. DJH werd ondersteund door NIH / NCATS Grant Number TL1 TR000061 en door NIH Grant Number T32 GM008716. SEA werd ondersteund door NIH Grant Number T32 HL07260.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sodium Chloride | Sigma Aldrich | S3014 | |
| Potassium Chloride | Sigma Aldrich | P9541 | |
| Magnesium Sulfate | Sigma Aldrich | 203726 | |
| Potassium Phosphate Dibasic | Sigma Aldrich | RES20765-A7 | |
| Calcium Chloride Dihydrate | Sigma Aldrich | C8106 | |
| Sodium Bicarbonate | Sigma Aldrich | S5761 | |
| D-Glucose | Sigma Aldrich | G8270 | |
| Octanoic Acid | Sigma Aldrich | C2875 | |
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Sigma Aldrich | T8877 | |
| Medical Pressure Transducer | MEMSCAP | SP844 | |
| Masterflex Peristaltic Pump | Cole Parmer | EW-07521-40 | |
| Masterflex Easy Load Pump Head | Cole Parmer | EW-07518-10 | |
| Heated circulating water bath | Lauda | M3 | |
| Tubing Flow Module | Transonic | TS410 | |
| Modular Research Console | Transonic | T402 | |
| Inline flow sensor | Transonic | ME2PXN | |
| PowerLab Data Acquisition Device | AD Instruments | PL3508 | |
| LabChart data acquisition software | AD Instruments | MLU60/8 |
References
- Bainey, K. R., Armstrong, P. W. Clinical perspectives on reperfusion injury in acute myocardial infarction. American Heart Journal. 167 (5), 637-645 (2014).
- Beyersdorf, F. The use of controlled reperfusion strategies in cardiac surgery to minimize ischaemia/reperfusion damage. Cardiovascular Research. 83 (2), 262-268 (2009).
- Langendorff, O.
- Bell, R. M., Mocanu, M. M., Yellon, D. M. Retrograde heart perfusion: The langendorff technique of isolated heart perfusion. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 50 (6), 940-950 (2011).
- Tyers, G. F., Todd, G. J., Neely, J. R., Waldhausen, J. A. The mechanism of myocardial protection from ischemic arrest by intracoronary tetrodotoxin administration. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 69 (2), 190-195 (1975).
- Murry, C. E., Jennings, R. B., Reimer, K. A. Preconditioning with ischemia: A delay of lethal cell injury in ischemic myocardium. Circulation. 74 (5), 1124-1136 (1986).
- Kolwicz, S. C., Tian, R. Assessment of cardiac function and energetics in isolated mouse hearts using 31P NMR spectroscopy. The Journal of Visualized Experiments. (42), (2010).
- Fishbein, M. C., et al. Early phase acute myocardial infarct size quantification: Validation of the triphenyl tetrazolium chloride tissue enzyme staining technique. American Heart Journal. 101 (5), 593-600 (1981).
- Aune, S. E., Herr, D. J., Mani, S. K., Menick, D. R. Selective inhibition of class I but not class IIb histone deacetylases exerts cardiac protection from ischemia reperfusion. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 72, 138-145 (2014).
- Yellon, D. M., et al. The protective role of heat stress in the ischaemic and reperfused rabbit myocardium. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 24 (8), 895-907 (1992).
- Khaliulin, I., et al. Temperature preconditioning of isolated rat hearts--a potent cardioprotective mechanism involving a reduction in oxidative stress and inhibition of the mitochondrial permeability transition pore. The Journal of Physiology. 581 (Pt 3), 1147-1161 (2007).
- Molojavyi, A., et al. Effects of ketamine and its isomers on ischemic preconditioning in the isolated rat heart). Anesthesiology. 94 (4), 623-629 (2001).
- Asfour, H., et al. NADH fluorescence imaging of isolated biventricular working rabbit hearts. The Journal of Visualized Experiments. (65), (2012).
- Sill, B., Hammer, P. E., Cowan, D. B. Optical mapping of langendorff-perfused rat hearts. The Journal of Visualized Experiments. (30), (2009).
- Ferrera, R., Benhabbouche, S., Bopassa, J. C., Li, B., Ovize, M. One hour reperfusion is enough to assess function and infarct size with TTC staining in langendorff rat model. Cardiovascular Drugs and Therapy. 23 (4), 327-331 (2009).
- Sutherland, F. J., Shattock, M. J., Baker, K. E., Hearse, D. J. Mouse isolated perfused heart: Characteristics and cautions. Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. 30 (11), 867-878 (2003).
- Reichelt, M. E., Willems, L., Hack BA,, Peart, J. N., Headrick, J. P. Cardiac and coronary function in the langendorff-perfused mouse heart model. Experimental Physiology. 94 (1), 54-70 (2009).
- Xie, M., et al. Histone deacetylase inhibition blunts ischemia/reperfusion injury by inducing cardiomyocyte autophagy. Circulation. 129 (10), 1139-1151 (2014).
