Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

نموذج الفأر من شبه المزمنة ومعتدل تغلب على الإجهاد الاجتماعية لفهم العجز السلوكية والفسيولوجية التي يسببها الإجهاد

Published: November 24, 2015 doi: 10.3791/52973
Automatic Translation
1,2, 1,2,3
1College of Agriculture, Ibaraki University, 2Cooperation between Agriculture and Medical Science, Ibaraki University, 3United Graduate School of Agricultural Science, Tokyo University of Agriculture and Technology

Summary

هنا، يتم وصف أساليب لتطوير نموذج الفأر من الإجهاد هزيمة الاجتماعية شبه المزمنة ومعتدل واستخدامها لتحقيق ميزات المسببة للأمراض الاكتئاب بما في ذلك hyperphagia- وأعراض تشبه عطاش التالية زيادة وزن الجسم.

Introduction

أنواع كثيرة من الأحداث المجهدة تحدث طوال حياة البشر. الإجهاد المفرط وغالبا ما يؤدي إلى عواقب والفسيولوجية الضارة على البشر والحيوانات. في البشر، والأحداث المجهدة هي عوامل الخطر الرئيسية للعجل الاضطرابات النفسية مثل الاكتئاب 1. وأشار العبء العالمي للمرض الدراسة أن الاكتئاب هو واحد من الاضطرابات وتعطيل معظم من حيث المصححة باحتساب مدد العجز الحياة سنة (سنوات العمر) وعاش سنوات مع الإعاقة 2. بالإضافة إلى ذلك، يشكل الاكتئاب لأكبر نسبة من سنوات العمر الانتحار 3. الأشخاص الذين يعانون من الاكتئاب يجدون صعوبة في إدارة حياتهم، ونتيجة لذلك، نوعية حياتهم كثيرا ما تزداد سوءا. ولذلك، هناك حاجة قوية لتطوير علاجات فعالة لتحسين نوعية الحياة لدى هؤلاء المرضى.

وقد أجريت العديد من الدراسات حول الاضطرابات الاكتئابية الرئيسية، ولقد كشفت أن مساهمة الوراثية لمرض susceptibilitذ ما يقرب من 30-40٪، وهو ما يفسره آثار مواضع متعددة من الآثار الصغيرة 4. لأن الآليات المسببة للأمراض المعقدة الكامنة وراء الاكتئاب والمسببات مفصل من المرض لا يزال بعيد المنال. وتشير التقارير السريرية أن هناك أنواع فرعية من الاكتئاب مثل السوداوي وغير نمطية الاكتئاب 5، التي تظهر انخفاض وزيادة وزن الجسم، على التوالي 6. على الرغم من 25-30٪، و15-30٪ من المرضى الذين يعانون من الاكتئاب تمثل الملامح الحزينة وشاذة نقية، على التوالي، معظمهم لديهم ميزات مختلطة من كل من الأنواع الفرعية 7. ولذلك، الاكتئاب الشديد لديها مجموعة واسعة من الأعراض. من أجل إيجاد المؤشرات الحيوية وتطوير العلاجات الموضوعية لأنواع مختلفة من الاكتئاب في البشر، فمن المهم وضع عدة نماذج حيوانية مختلفة من الاكتئاب 8.

وقد وضعت نماذج حيوانية من الاكتئاب باستخدام العديد من الطرق بما تعلمهالعجز، والإجهاد المزمن المعتدل لا يمكن التنبؤ بها، والإجهاد هزيمة الاجتماعية المزمن (منتجات المشروبات الغازية) 12/09. إنشاء تويودا وزملاؤه نماذج منتجات المشروبات الغازية من الجرذان والفئران 13-17 من أجل إلقاء الضوء على عملية التمثيل الغذائي والسلوكيات التي ترتبط مع الاكتئاب. وبالنظر إلى أن نماذج حيوانية من الاكتئاب وتقييمها من قبل صحة الوجه 18، السياق الذي يتم تأسيس نموذج مهم. وعلاوة على ذلك، ذكرت الذهبي وآخرون. 19 طرق لخلق الفئران منتجات المشروبات الغازية بالتفصيل. ومن المعروف أن العجز في السلوك الاجتماعي للفئران منتجات المشروبات الغازية يمكن استردادها عن طريق العلاج المزمنة، ولكن ليس عن طريق العلاج الحاد، ومضادات الاكتئاب، والتي تتشارك بها أعراض مشابهة لتلك الموجودة في المرضى الذين يعانون من الاكتئاب من حيث تنظيم التغذية العصبية المشتقة من الدماغ عامل 6.

انتقل آخرون. 13 وضعت سابقا الإجهاد هزيمة الاجتماعية شبه المزمنة ومعتدل (sCSDS) نموذج الفأر من خلال تعديل طرقالذهبي وآخرون. 19. وتبين أن الفئران sCSDS أعراض polydipsia- ومثل فرط الأكل بعد المكاسب في وزن الجسم وزيادة محتوى الماء الجسم 13. في هذا التقرير، يتم توفير بروتوكول لإنشاء نموذج الفأر sCSDS ونناقش جدوى هذا النموذج.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

وتمت الموافقة على الدراسات الحيوانية والتقى المبادئ التوجيهية لكل من رعاية الحيوان واللجنة الاستخدام من جامعة ايباراكي وزارة التربية والتعليم الثقافة والرياضة والعلوم والتكنولوجيا (وزارة التربية)، واليابان (إعلام No.71). ويرد نظرة شاملة للبروتوكول في الشكل 1.

1. جهاز

  1. تحضير نوعين من أقفاص: قفص واحد (العرض [W] × عمق [D] × الارتفاع [H] = 143 مم × 293 مم × 148 مم)، و "هزيمة الاجتماعية (SD)" قفص (W × D × H = 220 مم × 320 مم × 135 مم).
  2. كما هو مبين في الشكل 2، تقسيم قفص SD إلى قسمين مع الاكريليك الشفاف المفرق مجلس (5 مم) مع 15 الثقوب الدائرية (3 × 5 مصفوفة: 8 مليمتر في القطر).
  3. الحصول على رقائق الخشب الحلاقة المصنوعة من أشجار الصنوبر، والكريات الطعام المنقى النظام الغذائي، وزجاجة مياه الشرب. وبالإضافة إلى ذلك، الحصول على مناشف ورقية، قناع، وقفازات اللاتكس. لاختبار التفاعل الاجتماعي، وإعداد ساحة الميدان المفتوح (W × D × H = 40 سم × 40 سم × 40 سم) المصنوعة من البولي فينيل رمادي، الوزن مصنوعة من الفولاذ (190 غ)، وصندوق تفاعل البلاستيك (W × D × H = 10 سم × 10 سم × 13 سم، 100 غرام) مع ثلاث نوافذ سلك شبكة (W × D = 5 سم × 5 سم) (الشكل 3).
  4. وضع كاميرا CCD (2،8 حتي 12 مم؛ F = 1: 1.4؛ 1/3 بوصة CCD)، ونظام تتبع آلي في غرفة الاختبار السلوكية في منشأة الحيوان. وضع الرف المناسب للأقفاص الماوس في غرفة الاختبار السلوكية لروض الفئران لبيئة غرفة الاختبار لمدة 30 دقيقة على الأقل.

2. التعويد على البيئة

  1. استخدام الذكور C57BL / 6JJmsSlc (B6) الفئران التي هي 7 أسابيع من العمر والذكور SLC: ICR (ICR) الفئران التي هي أكثر من 5 أشهر من العمر وتسليم منشأة من شركة تربية الحيوانات.
  2. بشكل مستقل تحريك مجموعتين من الفئران B6 (ن= 12 في كل مجموعة) إلى المرفق؛ استخدام مجموعة واحدة (فرز B6 الفئران) لفحص الفئران ICR العدوانية ومجموعة أخرى (موضوع B6 الفئران) لتطوير نموذج sCSDS.
  3. إدخال الفئران ICR (ن = 12) إلى السجن من أجل فحص تصرفاتهم العدوانية.
  4. بيت الفئران بشكل فردي في أقفاص واحدة ل1 أسبوع في إطار دورة ضوء الظلام لمدة 12 ساعة (حوالي 100 لوكس ضوء الفلورسنت، أضواء على الساعة 08:00) مع درجة حرارة ثابتة (حوالي 23 درجة مئوية) ومستويات الرطوبة (حوالي 40٪) من أجل روض لهم البيئة. تقسيم كل قفص من خلال وضع لوحات بلاستيكية بيضاء اللون بين الأقفاص بحيث لا تتأثر الفئران عن طريق السلوكيات من الفئران المجاورة.
  5. جعل الكريات الطعام المنقى النظام الغذائي والمياه بالتناضح العكسي المتاحة بالمال وبالشهرة أيضا الإعلانية. استخدام AIN-93g وطعام لأن المكونات الأخرى الكريات النظام الغذائي غير المنقى قد تختلف.
  6. قياس وزن الجسم، وتناول الطعام (FI)، وكمية المياه (WI) من الفئران كل يوم. حساب بزيادة الوزن ODY (BWG) من اليوم الأول.

3. فحص المغامرين ICR الفئران

  1. بعد التعود على 1 الاسبوع على النحو المذكور أعلاه، وشاشة الفئران ICR (مقيم) باستخدام اختبارات مقيم الدخيل للمحاكمة 3 دقيقة مع الفئران فرز B6 (الدخيل و 8 أسابيع من العمر) في فترة ما بعد الظهر (14: 00-17: 00) تحت الإضاءة من حوالي 300 لوكس في غرفة السكن.
    1. على وجه التحديد، واختبار كل فأر مجلس النواب لثلاث محاكمات في اليوم لمدة 5 أيام متتالية (15 محاكمات في المجموع) تجاه العديد من الفئران B6 مختلفة ممكن للعثور التي تظهر الفئران ICR العدوان عالية تجاه المتسللين. وخلال الاختبارات، وتسجيل الكمون الهجوم ومدة السلوك العدواني (حركات سريعة مع هجوم العض).
  2. تحديد شديدة العدوانية الفئران ICR عن طريق التحقق من الجروح الضرر على الفئران الدخيل B6 بعد كل محاكمة.
  3. حساب نسبة المحاكمات التي الكمون الهجوم بعد أقل من 30 ثانية باعتبارها أول مؤشر لدرجة العدوان.
  4. Calculate نسبة المحاكمات التي الكمون الهجوم بعد أقل من 3 دقائق بمثابة مؤشر الثاني من النتيجة العدوان.
  5. تقييم درجات العدوان من المؤشر الأول. استخدام الفهرس الثاني عندما المؤشر الأول هو المساواة.
  6. حدد الفئران مجلس النواب التي كان عشرات العدوان عالية دون السلوكيات شديدة العدوانية كما الفئران ICR العدوانية. استخدام الفئران ICR العدوانية مرارا وتكرارا في جميع أنحاء المجموعة التالية من التجارب حتى ما يقرب من 12 شهرا من العمر؛ ومع ذلك، نفذ عملية الفرز بالنسبة للفئران ICR عدوانية كما هو موضح أعلاه قبل كل تجربة للتأكد من العدوانية من الفئران مجلس النواب.
  7. بعد كل دورة من دورات الفحص، تسجيل درجة إصابة الفئران فرز B6. إذا أصيب ماوس، عزل الماوس في قفص واحد ومراقبة التقدم عن طريق فحص مكاسبه وزن الجسم، وتناول الطعام، وتناول الماء. في حالة الجروح الشديدة التي تؤثر على وظائف الأعضاء والسلوك في الفئران، الموت ببطء وفقا لI المحليةالمبادئ التوجيهية ACUC.

4. sCSDS

  1. إدخال الفئران B6 يخضع قبل 7 أيام (يوم -6) في اليوم من التعرض الأولي الإجهاد (اليوم 1) وبيت الفئران بشكل فردي في أقفاص واحدة لروض لهم البيئة.
  2. قبل ثلاثة أيام من يوم 1 (يوم -2)، نقل الفئران ICR العدوانية في حجرة من كل قفص SD، الذي ينقسم من قبل مقسم الاكريليك السماح للفئران تضع أراضيها في أقفاص SD (نفس العدد من موضوع B6 الفئران).
  3. تقسيم أقفاص SD باستخدام لوحات التقسيم بيضاء اللون، كما في حالة واحدة قفص المذكورة أعلاه.
  4. بالنسبة للفئران B6 غير شدد الرقابة، وإعداد أقفاص SD (نصف عدد الفئران) للحفاظ على الفئران في أزواج. وضع اثنين من الفئران في كل حجرة مقسوما على المفرق في قفص SD لمدة 10 يوما.
  5. بعد القياسات اليومية BWG، FI، وWI في يوم 1، الفئران مكان خاضع B6 في واحدة من المقصورات من الأقفاص SD (مقيم في المنزل قفص) في بعد عملية الشراءrnoon (14: 00-16: 00) تحت إضاءة لحوالي 300 لوكس في غرفة السكن وقياس وقت الاتصال الجسدي من أول لدغة هجوم لإكمال الاختبار مقيم الدخيل.
  6. في يوم 1، تعيين وقت الاتصال البدني لمدة 5 دقائق من أول لدغة الهجوم ولقد المراقبين حساب عدد من لدغات هجوم من قبل الفئران ICR التي توجه تفضيلي في الظهر أو الجنب من الخصم كما وصفها Miczek وآخرون. 20 ل تحديد درجة الاجهاد البدني على الفئران B6.
  7. بعد وقت الاتصال الجسدي، والإنقاذ موضوع الفئران B6، وفحص وتسجيل حالة فرائها والجروح. ثم، ضع الفئران B6 إلى حجرة أخرى بجانب الفئران ICR في أقفاص SD حتى التعرض للإجهاد البدني في اليوم التالي.
  8. لأن المفرق الاكريليك في قفص SD شفاف ويحتوي على ثقوب، وتعريض الفئران B6 تخضع لمختلف الضغوط العاطفية، بما في ذلك البصرية والسمعية والشمية والمحفزات، من الفئران ICR في COMPART المجاورةمنة من القفص SD لمدة 24 ساعة كل يوم.
  9. قياس BWG، FI، وWI السيطرة الفئران B6 يوميا ومن ثم وضعها في كل حجرة في أقفاص SD لمدة 1 يوم.
  10. في يوم 2، بعد القياسات اليومية للBWG، FI، وWI، وإدخال الفئران B6 تخضع إلى الأراضي من الفئران ICR أخرى لتعرضهم للإجهاد البدني.
  11. تعيين المدة من الاتصال الجسدي في 4.5 دقيقة من أول لدغة الهجوم في يوم 2، والاعتماد على عدد من لدغات الهجوم.
  12. نقل السيطرة الفئران B6 إلى أقسام مختلفة وتغيير المجموعات الزوجية من أجل خلط التنسيب وشريك للأزواج كل يوم.
  13. تقليل مدة الاتصال الجسدي بنسبة 0.5 دقيقة في اليوم الواحد، بحيث يتم تعيين المدة في اليوم 10-،5 دقيقة من أول لدغة الهجوم.
  14. في يوم 7، واستبدال ما يقرب من نصف نجارة الخشب في جميع المقصورات في أقفاص SD.
  15. بعد التعرض للإجهاد البدني الماضي في يوم 10، نقل الفئران B6 تخضع إلى أقفاص واحدة. وعلى غرار الفئران B6 الموضوع، نقل السيطرة على الفئران B6 في أقفاص واحدة في يوم 10.
  16. إذا كان مجلس النواب الماوس لا تظهر أي لدغ الهجوم حتى 5 دقائق في كل محاكمة في أيام 1-10، إنهاء المحاكمة. استبدال الماوس مع ICR الغيار الفئران ICR العدوانية وإجراء محاكمة بديلة للماوس موضوع B6.
  17. إذا أصيب ماوس، عزل الماوس في قفص واحد ومراقبة التقدم عن طريق فحص مكاسبه وزن الجسم، وتناول الطعام، وتناول الماء. اتبع الإرشادات IACUC الخاص بك لتسكين الألم. في حالة الجروح الشديدة التي تؤثر على وظائف الأعضاء والسلوك في الفئران، الموت ببطء لهم وفقا لمبادئ توجيهية IACUC المحلية.

5. الاجتماعي تجنب اختبار (التفاعل الاجتماعي اختبار)

  1. أداء الاختبارات السلوكية لتجنب الاجتماعي في الصباح (09: 00-12: 00) في يوم 11.
  2. قبل ثلاثين دقيقة للاختبار، ونقل أقفاص الرقابة وموضوع B6 الفئران على الرف (ضوء خافت من أقل من 1 لوكس) في السلوكيةغرفة الاختبار تحت الإضاءة أقل من 20 لوكس للسماح لهم روض للبيئة.
  3. للحد من ترتيب الآثار، اختبار بالتناوب السيطرة وتخضع B6 الفئران.
  4. تنظيف ساحة الميدان المفتوح (مضاءة بضوء من 20 لوكس في وسط الميدان) ومربع تفاعل البلاستيك باستخدام مناشف ورقية غارقة مع الايثانول 70٪ قبل الاختبار السلوكي لكل الماوس لإزالة البراز والبول، وأية روائح .
  5. وضع ICR الماوس غير مألوف (لا تستخدم معتدية) من قفص واحد بالقرب من جهاز حقل مفتوح.
  6. ضع الماوس B6 في حقل مفتوح من مربع التفاعل شاغرا كما هو مبين في الشكل (4) رصد وتحليل سلوكها لمدة 2.5 دقيقة باستخدام نظام التحليل الآلي (موضح في الخطوة 5.10).
  7. بعد المحاكمة الأولى، وإزالة الماوس B6 من الميدان ووضعه في قفص وطنه.
  8. وفي أعقاب ذلك، وضع غير مألوف الذكور ICR الماوس (الهدف الاجتماعي) في مربع التفاعل ومن ثم إدخال B6الماوس في حقل مفتوح ومراقبة سلوكها لمدة 2.5 دقيقة.
  9. بعد المحاكمة الثانية، يعود كل من B6 والفئران ICR إلى أقفاص وطنهم، وتنظيف الميدان ومربع التفاعل على النحو المذكور أعلاه.
  10. كرر هذه الخطوات لكل الماوس B6 لاختبار السلوك الاجتماعي. خلال كل محاكمة، وسجل أعلى عرض الأفلام باستخدام كاميرا CCD.
    1. بعد الاختبارات السلوكية، حساب الوقت الذي يقضيه في منطقة التفاعل (بالثواني) وفي منطقة الزاوية (بالثواني) لكل محاكمة كما هو مبين في جوتو وآخرون. 13. الحكم على الموقف من الفأرة على أساس مركز من الفأرة.
    2. حساب عشرات التفاعل الاجتماعي إلى 100 ​​× (بالتوقيت التفاعل، مع الهدف) / (بتوقيت التفاعل، دون هدف)، وفقا للأساليب التي نشرت في كريشنان وآخرون. 21.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

رصد درجة من الاجهاد البدني لأكثر من فترتين لمدة 10 أيام، وأحصى عدد من لدغات هجوم من قبل مجلس النواب الفئران يدويا من قبل الباحث. الشكل 5A يدل على القيم الفردية لعدد من لدغات هجوم الواردة. كان هناك تفاوتا كبيرا في مرحلة مبكرة (حوالي 10-120 دغات يوم 1)، ولكن تم تخفيض هذا التباين في مرحلة لاحقة (حوالي 5-20 دغات يوم 10). يشير الشكل 5B أن متوسط ​​عدد من لدغات الهجوم حصل انخفضت تدريجيا مع مرور الوقت، لأن مدة الاتصال الجسدي انخفضت (من 5 دقائق إلى 0.5 دقيقة).

وأظهرت الفئران تخضع التغييرات زيادة الوزن، فضلا عن التغيرات في استهلاكهم اليومي من الغذاء والماء بعد التعرض للsCSDS الفئران لمدة 10 يوما. كان هناك اختلاف كبير في كسب وزن الجسم الكلي بين السيطرة والفئران تخضع (P <0.0001، أونبايريد الذيل يومين ستوديالإقليم الشمالي تي -test). كان BWG الكلي للالسيطرة على الفئران حوالي 0.5 غرام، في حين أن الفئران تخضع كان ما يقرب من 2.0 غ (الشكل 6). كان هناك فرق موحية في FI التام بين المجموعتين من الفئران (ع = 0.0904، ثنائي الطرف المفردة الطالب ر -test). مراقبة والفئران تخضع تستهلك حوالي 30 غراما و 33 غراما من المواد الغذائية، على التوالي (الشكل 7). كان هناك اختلاف كبير في WI التام بين المجموعتين (P <0.0001، ثنائي الطرف المفردة الطالب ر -test). كان WI مجموع من الفئران تخضع (حوالي 80 جم) مرتين أكبر من ذلك من السيطرة على الفئران (حوالي 40 جم)، كما هو موضح في الشكل (8).

لدرجة التفاعل الاجتماعي، كان هناك فرق كبير بين المجموعتين (P = 0.0033، ثنائي الطرف المفردة الطالب ر -test). وكانت السيطرة على الفئران بنتيجة 2؛ 100، في حين كانت الفئران تخضع بنتيجة <100 (الشكل 9).

الشكل 1
الشكل 1. الجدول الزمني التجريبية من وطأة الهزيمة الاجتماعية شبه المزمنة ومعتدل (sCSDS) نموذج. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 2
الشكل 2. صورة من الهزيمة الاجتماعية (SD) قفص المستخدمة في الضغط هزيمة الاجتماعية شبه المزمنة ومعتدل (sCSDS) التجارب. الرجاء النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 3 "SRC =" / ملفات / ftp_upload / 52973 / 52973fig3.jpg "/>
الشكل 3. صورة مربع تفاعل البلاستيك مع ثلاث نوافذ شبكات الأسلاك المعدنية التي كانت تستخدم في اختبار التفاعل الاجتماعي، ومن أجل منع الفئران من تحريك مربع، تم وضع الوزن مصنوعة من الصلب في منطقة الجزاء. يرجى النقر هنا ل عرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 4
الرقم 4. تمثيل تخطيطي لاختبار التفاعل الاجتماعي. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 5
الرقم 5. عدد اتاك ك دغات الواردة من يوم 1 إلى يوم 10. مستويات الإجهاد البدني وتقييمها من قبل الباحث الذي أحصى عدد من لدغات الهجوم. وتمثل (A) البيانات الفردية (ن = 23). بالرغم من وجود كمية عالية من التباين (حوالي 10-120 دغات) للفترة 5-مين في مرحلة مبكرة، انخفض هذا التغير تدريجيا نحو مرحلة متأخرة لمدة الاتصال الجسدي انخفضت (من 5 دقائق إلى 0.5 دقيقة) . يتم عرض (B) بيانات (ن = 23) كمتوسط ​​± الخطأ المعياري للمتوسط. على الرغم من أن عدد من لدغات الهجوم حوالي 35-40 في مرحلة مبكرة، انخفض هذا العدد إلى ما يقرب من 15-20 في مرحلة متأخرة. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

د / 52973 / 52973fig6.jpg "/>
الرقم 6. الجسم وزيادة الوزن من يوم 1 إلى يوم 10. هناك فرق كبير بين جهاز التحكم (ن = 24) والإجهاد هزيمة الاجتماعية شبه المزمنة ومعتدل (sCSDS) (ن = 23) الفئران من حيث مجموع الزيادة في وزن الجسم (*** P <0.0001، طالب المفردة اثنين من الذيل تي -test). الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 7
الرقم 7. تناول الطعام من يوم 1 إلى يوم 10. على الرغم من أنه لم يكن كبيرا، وهناك فرق بين موحية التحكم (ن = 24) والإجهاد هزيمة الاجتماعية شبه المزمنة ومعتدل (sCSDS) (ن = 23) الفئران من حيث مجموع السعرات الغذائية († ع = 0.0904، المفردة يومين الذيلر -test) الطالب. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 8
الرقم 8. تناول المياه من يوم 1 إلى يوم 10. هناك فرق كبير بين السيطرة (ن = 24) والإجهاد هزيمة الاجتماعية شبه المزمنة ومعتدل (sCSDS) (ن = 23) الفئران من حيث كمية المياه الإجمالي (** * P <0.0001، المفردة اثنين الذيل الطالب ر -test). الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 9
الرقم 9. درجة التفاعل الاجتماعي على داص 11. هناك فرق كبير بين السيطرة (ن = 24) والإجهاد هزيمة الاجتماعية شبه المزمنة ومعتدل (sCSDS) (ن = 23) الفئران لدرجة التفاعل الاجتماعي (** ع = 0.0033، تي طالب المفردة اثنين من الذيل و- الاختبار). الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

كانت هناك اختلافات محددة في وزن الجسم بين sCSDS الفئران والجرذان منتجات المشروبات الغازية تخضع لبروتوكول منتجات المشروبات الغازية القياسي (5-10 دقيقة من الاتصال الجسدي مع المعتدين في اليوم) 19. الفئران sCSDS أظهرت زيادة BWG خلال فترة التوتر، في حين أظهرت الفئران منتجات المشروبات الغازية العادية انخفاض في وزن الجسم خلال فترة التوتر 21،22،23. هناك فرق كبير بين البروتوكولين من حيث المدة الإجمالية للاتصال جسدي مع المعتدين خلال فترة التوتر 10 يوما. في حين أن النموذج الأصلي منتجات المشروبات الغازية ويشمل 50 أو 100 دقيقة من التفاعل الجسدي بين المعتدي والفئران المرؤوس في المجموع (نطاق كامل منتجات المشروبات الغازية)، تضمن طريقة sCSDS 27.5 دقيقة من هذا التفاعل في مجموع (نطاق نصف منتجات المشروبات الغازية). وعلى الرغم من شدة الإجهاد البدني على منتجات المشروبات الغازية الفئران القياسية كانت غير معروفة 19، تم التأكيد على أن متوسط ​​عدد من لدغات الهجوم حصل كان حوالي 30 في اليوم في sCSDS الفئران. اق المذكورة في جوتو وآخرون 13، sCSDS الفئران هي نموذج أخف من الاكتئاب مقارنة مع الفئران منتجات المشروبات الغازية العادية (غير مستدامة النفور الاجتماعي لأكثر من 1 في الشهر بعد هزيمة الإجهاد الماضي) 21 لأن الفئران sCSDS يتعافى بشكل طبيعي في غضون شهر 1 بعد هزيمة الإجهاد الماضي. بالإضافة إلى ذلك، ذكرت Savignac وآخرون 24 أن الاتصال الجسدي قصيرة نسبيا مع المعتدين يمكن ان تسرع BWG من الفئران تخضع خلال الضغط period.Interestingly، وأفادت وارن وآخرون 23 أن أكد عاطفيا الفئران التي شهدت فقط الاتصال الجسدي من الفئران الأخرى خلال نموذج منتجات المشروبات الغازية أظهرت انخفاضا BWG دون الاجهاد البدني. بهذه الطريقة، ونماذج منتجات المشروبات الغازية الأصلية والمعدلة تنتج نماذج مختلفة تظهر مجموعة واسعة من الظواهر BWG 13. هذه المظاهر هي مماثلة لتلك التي لوحظت في المرضى الذين يعانون من الاكتئاب السوداوي وغير نمطية، بما في ذلك الخسائر والمكاسب فيوزن الجسم، على التوالي 6. بالإضافة إلى ذلك، العديد من خطوط الأدلة تشير إلى أن الأحداث المجهدة في الحياة قاسية بما في ذلك الاعتداء البدني ترتبط بقوة مع الاكتئاب في البشر 25،26،27. من حيث صلاحية وجه 18 لالتوتر الناجم عن زيادة الوزن والإفراط في تناول الطعام، قد يكون الفئران sCSDS بعض الملامح المتعلقة الاكتئاب غير النمطي في البشر.

ومع ذلك، هناك بعض القيود المفروضة على الفئران sCSDS كنموذج للاكتئاب. في النماذج الحيوانية، للاكتئاب مثل التعديلات (على سبيل المثال، انعدام التلذذ في اختبار تفضيل السكروز، والسلوكيات مثل اليأس في السباحة القسري و / أو ذيل الاختبارات تعليق) تستخدم لتقييم النماذج. على الرغم من عدم وجود فروق بين sCSDS والفئران غير المجهدة من حيث يشبه اليأس تصرفاتهم 13، ينبغي تحليل انعدام التلذذ في المستقبل. وعلاوة على ذلك، ينبغي أن التغيرات الجزيئية في (HPA) نظام المهاد الغدة النخامية، الغدة الكظرية، والجهاز المناعي، والجهاز العصبي المركزييتم التحقيق فيها. وبالإضافة إلى ذلك، ينبغي إجراء تجارب الدواء مع مضادات الاكتئاب. كما ذكر أعلاه، وجهه، وبناء، وينبغي تراكمت الصلاحية التنبؤية لنموذج من الاكتئاب للفئران sCSDS.

وأظهرت الفئران sCSDS السلوكيات المفرطة WI (مثل عطاش الأعراض التي يسببها الإجهاد). في المرضى الذين يعانون من اضطرابات نفسية، عطاش النفسي و / أو تسمم المياه مع بوال وعطاش ويلاحظ عادة 28. على الرغم من أن هناك بعض العلاجات بما في ذلك تقييد السوائل والعلاجات السلوكية والدوائية 29، الفيزيولوجيا المرضية الكامنة وراء هذه الأعراض لا يزال غير واضح. ولذلك، نماذج حيوانية من عطاش ضرورية لفهم الآليات التي يسببها الإجهاد عطاش. Polydipsic STR / N الفئران 30 ونماذج عطاش الناجم عن الجدول الزمني 31 نماذج معروفة من عطاش. وبالإضافة إلى هذه النماذج، والفئران sCSDS هي نموذج مفيد للبولydipsia التي يمكن استخدامها لفهم ملامح الإجهاد الناجم عن عطاش.

وعلاوة على ذلك، يعتقد المؤلفون أن تغذية الفئران نظاما غذائيا النقي (AIN-93g و)، بدلا من اتباع نظام غذائي غير المكرر، من المهم للغاية لإنشاء الفئران sCSDS. لأن الأمعاء الجراثيم يمكن أن تؤثر على الحيوان السلوكيات 32، وينبغي التحقيق النباتات البكتيرية المعوية من كل حيوان والنبات البكتيرية الأصلية في كل مرفق الحيوانية في المستقبل. حتى الآن، فإن الأدلة بشأن استخدام sCSDS الفئران كنموذج للاكتئاب كان مطلوبا، والوقت، وينبغي إجراء بحوث إضافية على هذا النموذج النتائج السابقة من جوتو وآخرون 13،14 دعم استخدامها لزيادة صلاحية sCSDS الفئران كنموذج للاكتئاب. ومع ذلك، فإن نتائج الدراسة الحالية تشير إلى أن استخدام sCSDS الفئران هو مفيد لأن الفئران sCSDS يمكن أن تساعدنا في زيادة فهم الآليات الكامنة وراء التوتر الناجم عن زيادة الوزن وpolydipأعراض sia- ومثل فرط الأكل.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

تعلن الكتاب أنه ليس لديهم المصالح المالية المتنافسة.

Acknowledgments

الكتاب أشكر الدكاترة. كينتارو ناغاوكا (جامعة طوكيو للزراعة والتكنولوجيا) واتارو إي أوه (ايباراكى) لمناقشة مفيدة. وأيد هذا البحث في جزء من ايباراكي التعاون الجامعي بين مشروع البحث على تطوير المنتجات والأطعمة التي تحتوي على فوائد المعززة للصحة الزراعية (NARO) الزراعة والعلوم الطبية (IUCAM) (وزارة التربية، اليابان) و (وزارة الزراعة، اليابان) .

Materials

Name Company Catalog Number Comments
single cage Charles River Laboratories Japan width [W] × depth [D] × height [H] = 143 × 293 × 148 mm
M cage Natsume Seisakusho W × D × H = 220 × 320 × 135 mm
Whiteflake Charles River Laboratories Japan Wood-shaving chips made from spruce trees
AIN-93G Oriental Yeast purified-diet food pellets
Kimtowel Nippon Paper Crecia Co. Paper towels
open-field arena O’Hara & Co. made of gray polyvinylchloride

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Heim, C., Binder, E. B. Current research trends in early life stress and depression: Review of human studies on sensitive periods, gene-environment interactions, and epigenetics. Exp. Neurol. 233 (1), 102-111 (2012).
  2. Whiteford, H. A., et al. Global burden of disease attributable to mental and substance use disorders: findings from the Global Burden of Disease Study 2010. Lancet. 382 (9904), 1575-1586 (2013).
  3. Ferrari, A. J., et al. The Burden Attributable to Mental and Substance Use Disorders as Risk Factors for Suicide: Findings from the Global Burden of Disease Study 2010. PLoS ONE. 9 (4), e91936 (2014).
  4. Flint, J., Kendler, K. S. The genetics of major depression. Neuron. 81 (3), 484-503 (2014).
  5. Nestler, E. J., et al. Neurobiology of Depression. Neuron. 34 (1), 13-25 (2002).
  6. Gold, P. W., Chrousos, G. P. Organization of the stress system and its dysregulation in melancholic and atypical depression: high vs low CRH/NE states. Mol. Psychiatry. 7 (3), 254-275 (2002).
  7. O'Keane, V., Frodl, T., Dinan, T. G. A review of atypical depression in relation to the course of depression and changes in HPA axis organization. Psychoneuroendocrinology. 37 (10), 1589-1599 (2012).
  8. Nestler, E. J., Hyman, S. E. Animal models of neuropsychiatric disorders. Nat. Neurosci. 13 (10), 1161-1169 (2010).
  9. Katz, R. J. Animal models and human depressive disorders. Neurosci. Biobehav. Rev. 5 (2), 231-246 (1981).
  10. Krishnan, V., Nestler, E. J. Animal models of depression: molecular perspectives. Curr. Top. Behav. Neurosci. 7, 121-147 (2011).
  11. Kudryavtseva, N. N., Bakshtanovskaya, I. V., Koryakina, L. A. Social model of depression in mice of C57BL/6J strain. Pharmacol. Biochem. Behav. 38 (2), 315-320 (1991).
  12. Miczek, K. A., Yap, J. J., Covington, H. E. 3rd Social stress, therapeutics and drug abuse: preclinical models of escalated and depressed intake. Pharmacol. Ther. 120 (2), 102-128 (2008).
  13. Goto, T., et al. Subchronic and mild social defeat stress accelerates food intake and body weight gain with polydipsia-like features in mice. Behav. Brain Res. 270, 339-348 (2014).
  14. Goto, T., Kubota, Y., Toyoda, A. Plasma and Liver Metabolic Profiles in Mice Subjected to Subchronic and Mild Social Defeat Stress. J. Proteome Res. , (2014).
  15. Iio, W., Matsukawa, N., Tsukahara, T., Kohari, D., Toyoda, A. Effects of chronic social defeat stress on MAP kinase cascade. Neurosci. Lett. 504 (3), 281-284 (2011).
  16. Iio, W., et al. Effects of chronic social defeat stress on peripheral leptin and its hypothalamic actions. BMC Neurosci. 15 (72), (2014).
  17. Iio, W., et al. Anorexic behavior and elevation of hypothalamic malonyl-CoA in socially defeated rats. Biochem. Biophys. Res. Commun. 421 (2), 301-304 (2012).
  18. Crawley, J. N. What's Wrong With My Mouse?: Behavioral Phenotyping of Transgenic and Knockout Mice. , 2nd ed, John Wiley & Sons Inc. Hoboken. 978-970 (2007).
  19. Golden, S. A., Covington, H. E. 3rd, Berton, O., Russo, S. J. A standardized protocol for repeated social defeat stress in mice. Nat. Protoc. 6 (8), 1183-1191 (2011).
  20. Miczek, K. A., Maxson, S. C., Fish, E. W., Faccidomo, S. Aggressive behavioral phenotypes in mice. Behav. Brain Res. 125, 167-181 (2001).
  21. Krishnan, V., et al. Molecular adaptations underlying susceptibility and resistance to social defeat in brain reward regions. Cell. 131 (2), 391-404 (2007).
  22. Chuang, J. C., et al. A beta3-adrenergic-leptin-melanocortin circuit regulates behavioral and metabolic changes induced by chronic stress. Biol. Psychiatry. 67 (11), 1075-1082 (2010).
  23. Warren, B. L., et al. Neurobiological sequelae of witnessing stressful events in adult mice. Biol. Psychiatry. 73 (1), 7-14 (2013).
  24. Savignac, H. M., et al. Increased sensitivity to the effects of chronic social defeat stress in an innately anxious mouse strain. Neuroscience. 192, 524-536 (2011).
  25. Green, J. G., et al. Childhood Adversities and Adult Psychiatric Disorders in the National Comorbidity Survey Replication I: associations with first onset of DSM-IV disorders. Arch. Gen. Psychiatry. 67 (2), 113-123 (2010).
  26. Miniati, M., et al. Clinical characteristics and treatment outcome of depression in patients with and without a history of emotional and physical abuse. J. Psychiatr. Res. 44 (5), 302-309 (2010).
  27. Tao, M., et al. Examining the relationship between lifetime stressful life events and the onset of major depression in Chinese women. J. Affect. Disord. 135 (1-3), 95-99 (2011).
  28. Valente, S., Fisher, D. Recognizing and managing psychogenic polydipsia in mental health. J. Nurse Pract. 6 (7), 546-550 (2010).
  29. Dundas, B., Harris, M., Narasimham, M. Psychogenic Polydipsia Review: Etiology, Differential, and Treatment. Curr. Psychiatry Rep. 9 (3), 236-241 (2007).
  30. Tsumura, K., et al. Downregulation of AQP2 expression in the kidney of polydipsic STR/N mice. Am. J. Physiol. Renal Physiol. 290 (2), F478-F485 (2006).
  31. Flores, P., et al. Schedule-Induced Polydipsia: Searching for the Endophenotype of Compulsive Behavior. World J. Neurosci. 4, 253-260 (2014).
  32. Cryan, J. F., Dinan, T. G. Mind-altering microorganisms: the impact of the gut microbiota on brain and and behaviour. Nat. Rev. Neurosci. 13 (10), 701-712 (2012).

Tags

السلوك، العدد 105، والإجهاد هزيمة الاجتماعية المزمنة، والماوس، عطاش، والنظام الغذائي النقي، والسلوك الاجتماعي، وزيادة الوزن، نموذج حيواني، علم الأعصاب
نموذج الفأر من شبه المزمنة ومعتدل تغلب على الإجهاد الاجتماعية لفهم العجز السلوكية والفسيولوجية التي يسببها الإجهاد
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Goto, T., Toyoda, A. A Mouse Model… More

Goto, T., Toyoda, A. A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits. J. Vis. Exp. (105), e52973, doi:10.3791/52973 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter