Summary

Akryl Resin Molding Based Leder Fixation Technique i Gnagere

Published: January 12, 2016
doi:

Summary

Traditional head fixation techniques have used metallic frames attached on the skull as an interface for head fixation apparatus. This protocol demonstrates a frameless, acrylic resin molding based head fixation technique for behavioral tasks in rodents.

Abstract

Head fixation is a technique of immobilizing animal’s head by attaching a head-post on the skull for rigid clamping. Traditional head fixation requires surgical attachment of metallic frames on the skull. The attached frames are then clamped to a stationary platform resulting in immobilization of the head. However, metallic frames for head fixation have been technically difficult to design and implement in general laboratory environment. In this study, we provide a novel head fixation method. Using a custom-made head fixation bar, head mounter is constructed during implantation surgery. After the application of acrylic resin for affixing implants such as electrodes and cannula on the skull, additional resins applied on top of that to build a mold matching to the port of the fixation bar. The molded head mounter serves as a guide rails, investigators conveniently fixate the animal’s head by inserting the head mounter into the port of the fixation bar. This method could be easily applicable if implantation surgery using dental acrylics is necessary and might be useful for laboratories that cannot easily fabricate CNC machined metal head-posts.

Introduction

Hodet fiksering eller hodet besøksforbud er en teknikk for å immobilisere dyrets hode ved å feste en ramme eller plate på skallen for rigid fastspenning. Teknikken har blitt vedtatt for nøyaktig sansestimulering, atferds sensing med eller uten nevrale opptak i våken dyr 1-3 og for juxtacellular merking under søvn-våkne syklus fire. Det er også brukt for in vivo avbildning av hjernen 5,6. Nå hodet fiksering teknikken er et vanlig verktøy i nevrovitenskap og atferdsforskning.

I utgangspunktet tradisjonelle hodefiksering krever kirurgisk feste metallhodestolper på toppen av skallen 6-8. Vedleggene blir deretter festet til en stasjonær plattform, noe som resulterer i immobilisering av hodet. Nevrofysiologiske undersøkelser i våken dyr som nevrale og / eller optisk opptak, hjerne kretser intervensjon, er avbildning av hjernen ledsaget av implantasjon kirurgi ved hjelp av tann akryl. Derfor,synes det en enkel oppgave å implementere hodet fiksering i de laboratoriene når det er nødvendig eksperimentelt. Rammene bør være utformet for å være lette og små nok til ikke å forstyrre dyrets naturlige atferd i sine egne bur. Det gir også mekanisk stivhet når klemt til den stasjonære plattform. Den har videre biokompatibilitet avhengig eksperimentelle formål. Derfor er det teknisk vanskelig å designe og dikte slike hode innlegg i generelt laboratorieutstyr.

I denne studien er en roman hodet fiksering metoden beskrevet, og gir mekanisk stivhet gjennom praktisk klem uten å bruke metall hode-innlegg. Ved anvendelse av fremgangsmåten, kan hodet fiksering foregå under de generelle laboratoriebetingelser, hvor implantasjon operasjon utføres vanligvis i gnagere for hjernen studien. Metallhode innlegg er erstattet med akryl sement støpt delvis av en skreddersydd hodet fiksering bar og støpeprosessen er ferdig i løpet av implantering kirurgi. Fiksering bar gir høy romlig kompatibilitet med andre implantater, for eksempel nevrale opptak sonder, stimuleringselektroder. Også det forenkler trinnene klem dyrets hode på fiksering plattformen ved å fjerne skruefeste. Vi brukte denne metoden i forrige atferdsstudie og vi konkluderte med at denne metoden er enkel å implementere og praktisk i praktisk eksperimentering 9.

Protocol

Etikk Uttalelse: Dette eksperimentet ble godkjent av Kyungpook National University Institutional Animal Care og bruk komité, og ble utført i henhold til guide for Care og bruk av forsøksdyr (National Institute of Health, 1996). Etter forsøket ble dyrene avlivet etter karbondioksid dødshjelp. 1. Design av Head-fiksering Bar for Rats MERK: Dette trinnet er en generell retningslinje for en fiksering bar design. Enhver endring om dimensjon …

Representative Results

Dette hodet fiksering metoden gjelder for både rotter og mus. Totalt åtte rotter fikk bilateral implantasjon av stimulerende elektroder i mediale forebrain bunt. For fire av dem, ble tilpasset wolfram trådelektroder (Microdrive) i tillegg implantert i M1 forbena området (Figur 2C). For mus (n = 2), fire rustfrie stålelektroder ble implantert i frontal / oksipitale hjernebark. Under operasjonen ble det hode mounters støpt for hodet fiksering i både rotter og mus, som beskriver i protokoll § 2. Et…

Discussion

This protocol demonstrates a simple and convenient head fixation method using materials at hand. For physically successful head fixation, the first critical steps during surgery is to rinse and dry the skull surface clearly before applying the dental adhesive resin cement. Second, this method does not uses screws implanting under temporal muscles and only depends on the screws on the skull, their perpendicular implantation against the surface of skull rim is crucial10. This reduces the possibility of accidenta…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

This research was supported by Basic Science Research Program through the NRF funded by the Ministry of Education, Science and Technology (2010-0022362) and (2012R1A2A2A02046812).

Materials

Dental acrylic resin Lang Dental Manufacturing Ortho-Jet to make molded mounter
Paraffin film Bemis Parafilm to prevent adhesion of acrylic resin to the bar
Dental adhesive Sun Medical Super-Bond C&B to bond between acrylic resin and skull
Plexglass or other acrylic plate to make fixation bar and box platform
Cyanoacrylate to bond acrylic plates

References

  1. Mayrhofer, J. M., et al. Novel two-alternative forced choice paradigm for bilateral vibrotactile whisker frequency discrimination in head-fixed mice and rats. J Neurophysiol. 109, 273-284 (2013).
  2. Bryant, J. L., Roy, S., Heck, D. H. A technique for stereotaxic recordings of neuronal activity in awake, head-restrained mice. J Neurosci Methods. 178, 75-79 (2009).
  3. Ollerenshaw, D. R., et al. Detection of tactile inputs in the rat vibrissa pathway. J Neurophysiol. 108, 479-490 (2012).
  4. Lee, M. G., Manns, I. D., Alonso, A., Jones, B. E. Sleep-wake related discharge properties of basal forebrain neurons recorded with micropipettes in head-fixed rats. J Neurophysiol. 92, 1182-1198 (2004).
  5. Lutcke, H., et al. Optical recording of neuronal activity with a genetically-encoded calcium indicator in anesthetized and freely moving mice. Front Neural Circuits. 4, 9 (2010).
  6. Dombeck, D. A., Khabbaz, A. N., Collman, F., Adelman, T. L., Tank, D. W. Imaging large-scale neural activity with cellular resolution in awake, mobile mice. Neuron. 56, 43-57 (2007).
  7. Kimura, R., et al. Reinforcing operandum: rapid and reliable learning of skilled forelimb movements by head-fixed rodents. Journal of neurophysiology. 108, 1781-1792 (2012).
  8. Hadlock, T., Kowaleski, J., Mackinnon, S., Heaton, J. T. A novel method of head fixation for the study of rodent facial function. Experimental neurology. 205, 279-282 (2007).
  9. Roh, M., Jang, I. S., Lee, M. G. Push-in Head Restraining Apparatus for Intracranial Self Stimulation Tasks in Rats. Korean J Physiol Pharmacol. 18, 103-108 (2014).
  10. Schwarz, C., et al. The head-fixed behaving rat–procedures and pitfalls. Somatosensory & motor research. 27, 131-148 (2010).
  11. Guo, Z. V., et al. Procedures for Behavioral Experiments in Head-Fixed Mice. PLoS ONE. 9, (2014).
  12. Osborne, J. E., Dudman, J. T. RIVETS: a mechanical system for in vivo and in vitro electrophysiology and imaging. PLoS One. 9, e89007 (2014).

Play Video

Cite This Article
Roh, M., Lee, K., Jang, I., Suk, K., Lee, M. Acrylic Resin Molding Based Head Fixation Technique in Rodents. J. Vis. Exp. (107), e53064, doi:10.3791/53064 (2016).

View Video