Abstract
Kronik sağ ventrikül (RV) disfonksiyonu ile ilişkili kronik tromboembolik pulmoner hipertansiyon (KTEPH) orijinal piglet modeli tarif edilmektedir. Pulmoner Hipertansiyon (PH) pulmoner vasküler yatağın ilerleyici tıkanma ile 3 haftalık domuz yavrularında oluşturuldu. Sol Pulmoner Arter (PA) bir ligasyonu mini torakotomi ile ilk gerçekleştirildi. İkincisi, sağ alt akciğer lobunun haftalık embolizasyon 5 hafta boyunca n-butil-2-siyanoakrilat ile floroskopi altında yapıldı. Ritght kalp catheterism ile ölçülen Pulmoner Arter Basıncı (mPAP) ortalama yanı sıra Sağ Atriyal basınç ve sahte hayvanlara kıyasla 5 hafta sonra Pulmoner Vasküler Direnç (PVR) olarak, giderek arttı. Sağ Ventriküler (RV) yapısal ve işlevsel biçimlenme transtorasik ekokardiyografi (RV çapları, RV duvar kalınlığı, RV sistolik fonksiyonu) ile değerlendirildi. RV elastans ve RV-pulmoner bağlama Basınç Hacim Döngüler ile değerlendirildiIletkenlik yöntemi ile (PVL) analizi. Akciğer ve sağ ventrikül histolojik çalışma da yapıldı. Moleküler taze dokular tekrarlanan transkutanöz endomiyokard biyopsi yoluyla yapılabilecek RV analizleri. Tıkalı ve engelsiz topraklarında Akciğer mikrovasküler hastalık moleküler analiz ve patoloji ile akciğer biyopsi çalışılmıştır. Bundan başka, güvenilirliği ve tekrarlanabilirliği hayvanlarda PH şiddetinin bir dizi ile ilişkilidir. İnsan KTEPH hastalığının en yönlerini altında yatan mekanizmalar (mitokondri, iltihap) ve aşırı sağ ventrikül yeni tedavi yaklaşımları (hedeflenen, hücresel veya gen terapileri) ama aynı zamanda akciğer mikrovasküler anlaşılması için yeni bakış açıları sağlayan bu modelde, çoğaltılamaz edildi hastalığı.
Introduction
Kronik tromboembolik pulmoner hipertansiyon (KTEPH) nedeniyle bir veya birden fazla akut akciğer embolisine 1-3 ile ilgili kalıcı ve organize pıhtı kronik pulmoner vasküler yatağın obstrüksiyonuna Pulmoner Hipertansiyon (PH) bir tipidir. Obstrüktif olmayan obstrüktif mikrovasküler hastalık bir kombinasyon, pulmoner vasküler direnç 4 ek bir artışa yol açar. Sağ ventrikül ilk kalp çıkışını sürdürmek için kompanse hipertrofisi adapte olmalıdır. Tedavi edilmezse, sağ ventrikül dilate ve zamanla başarısız olur. Modern çağda, PH, modern hedeflenmiş tedavilerin 5 kullanılmasına rağmen ilerleyici ve genellikle ölümcül bir hastalık olmaya devam etmektedir. Birçok çalışmada basınç yükü sağ ventrikül (RV) adaptasyon PH hastalarında sağkalım temel belirleyicisi olduğunu göstermiştir. Bu nedenle, uyumsuz RV yeniden karşı adaptif geçişi altında yatan mekanizmaların anlaşılması tedavi ve develo için temel taşıdırYeni tedavilerin pment. PH nadirdir ve doku örneklemesi bu zayıf hastalarda neredeyse olanaksız olduğundan, deneysel çalışmalara ihtiyaç vardır. Ayrıca, klinik öncesi çalışmalar akciğer damarlarında parası ile bir ilaç rv bozulmaya neden olmadığını tespit etmek için zorunludur.
Uzun yıllar boyunca, PH ve RV yetersizliği farklı deneysel modeller avantajları ve sınırlılıkları 6,7 ile geliştirilmiştir. Farmakolojik fare modellerinde (monokrotalin, SU5416, hipoksi) ise, PH ve RV yetersizliği moleküler yolu analizinde birkaç "taraf etkileri" ve önyargı neden olabilecek büyük bir inflamasyon, iskemi veya toksik stres sekonder oluşur. Furthemore bir murin modelinde RV endomiyokardik biyopsi hayvan feda olmadan çok zor olması gerekir. Büyük hayvanlarda Cerrahi modeller daha fizyolojik fakat pulmoner damarsal (pulmoner arter bantlama, sistemik-pulmoner şant) etkiler veya akut PH ve RV neden yokF (akut pulmoner emboli). Bu makalenin amacı, KTEPH patofizyolojisi daha temsilcisidir piglet içinde KTEPH özgün bir modelini tarif etmektir. Bu büyük hayvan modeli genellikle pulmoner hemodinamik ve RV fonksiyonu değişiklikleri takip etmek klinik pratikte (sağ kalp kateterizasyonu) yapılan non-invaziv ve invaziv ölçümler tekrarlandı mümkün kılar.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Bu protokol hayvan deneyleri yerel etik kurul ve kurumun Hayvan Refahı üzerinde Kurumsal Komitesi tarafından onaylandı. Bütün hayvanlar Ulusal tarafından Tıbbi Araştırma Ulusal Derneği ve Laboratuar Hayvan Kaynakları Enstitüsü tarafından hazırlanan "Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanım Kılavuzu" ile formüle ve yayımlanan "Laboratuar Hayvan Bakımı İlkeleri" ile uyumlu insancıl bakım almış Sağlık Enstitüleri (NIH Yayın No 86-23, 1996 revize).
Genel değerlendirmeler: Bütün hayvanlar (Yedek Ayrıntılandırma ve Araştırma Hayvanların Azaltılması Ulusal Merkezi) 3R kurallarına göre, saygı ile tedavi edilmelidir. Cerrahi girişimler sıkı sterilite ile aynı şekilde yapılmalıdır insan için olduğunu. Tüm tıbbi cihazlar steril olmalıdır.
1. Anestezi Protokolü
NOT: Büyük Whit(3-haftalık) 20 Kg ağırlığında e domuz kullanıldı. Pulmoner Hipertansiyon kademeli olarak oluşturuldu. İlk adım, bir sol torakotomi ile sol pulmoner arter (PA) ligasyonu çıkıyor. Aşağıdaki adımlar 5 hafta boyunca haftada PA embolizasyonlar performans oluşuyordu. Tüm işlemler, genel anestezi altında yapıldı.
- İşlemden önce hayvanlar 12 saat yem etmeyin.
- , Piglet bir premedikasyon yapın 30 mg kullanarak kas içi enjeksiyon gerçekleştirmek / Ketamin hidroklorür kg ve boyun kaslarında 0,05 mg / kg, işlemden önce 30 dakika aropine. 8
- Domuz sedasyon zaman, kulak damar içine bir kateter yerleştirin.
- Entübasyon öncesi intravenöz bir fentanil bolus (0.005 mg / kg) ve propofol (2mg / kg) yapın. Kulak damarından sisatrakuryum (0,3 mg / kg) damar içine enjekte edilir ve pik (7 Fransız sondası ile seçici olmayan entübasyon) entübe 9.
- Piglet sürekli izleme cihazları yerleştirin: Sürekli EKGEkspiratuar CO 2 ve oksimetre 8,9. Sistemik arter basıncı 8-10 izlemek için ekografi gözetiminde karotis arter yoluyla arteriyel sıvı alan kateter yerleştirin.
- % 100 oksijen takviyesi, sürekli damar içine enfüzyon fentanil (0.004 mg / kg) ve propofol (3 mg / kg) izofluran (% 2) ile birlikte genel anestezi bakımı.
- Cefatoxine (1 g) ve Gentamycine (80 mg), bir enjeksiyon ile antibioprophylaxy ekleyin.
- (0.01 mg / kg) TID içi operatif ve nalbufin enjeksiyonu ile ameliyat sonrası ağrıyı önlemek
- Her 15 min anestezi tamlığını kontrol edin: hareketi, stabil kalp hızı, kan basıncı, oksijenlenme yokluğunu.
- Gözleri veteriner merhem kullanılması anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için.
Sol Pulmoner Arter 2. ligasyonu
- Sol yan yatar pozisyonda piglet yükleyin ameliyat alanını tıraş ve bir alcoholi ile cildi dezenfektec çözeltisi. Yerel steril alanını kullanın.
- 4. interkostal 'uzayda küçük bir sol yanal torakotomi (5 ila 10 cm) ile göğüs açın. Scapula ucu arkasında gitmeyin. Dikkatle diyaframın doğru akciğer geri çekin.
- İdeal cerrahi pencere bulunan kez sol azygos ven geri çekin ve bir emilmeyen 2/0 ipek ile ipe önce sol ana pulmoner arter teşrih.
NOT: perikard açmak için çok önemlidir. - Emilebilir dikişlerle katmanın sonrası göğüs katmanı kapatın. Ameliyat sonrası pnömotoraks kaldırmak için bir göğüs tüpü kullanın. Sadece Piglet ekstübasyon sonrası göğüs tüpü çıkarın.
Sağ alt lob pulmoner arter 3. embolizasyonu
- Genel anestezi sonrasında, bir yatar pozisyonda piglet koydu. Oksimetre, ekspiratuar CO 2 sürekli bir izleme yürütmek, EKG, (mPAP sistemik kan basıncı (Mpa) ortalama ve ortalama pulmoner arter basıncı) Işlem boyunca.
- Ekografik rehberlik perkütan tüm kateterler yerleştirin. Kan basıncı takibi için karotis arter ve juguler ven yoluyla superior vena kava içinde 8 Fransız kılıf bir arteriyel 6 Fransız kateter takın (45 ° açı yönü ile delinme suprasternal çentik yukarıda 2 cm gerçekleştirin).
- Floroskopi altında, 8 Fr kılıftan, sağ pulmoner arter içinde 5 Fransız anjiyografik kateter yerleştirin. Kateterin ucu segmental alt lob pulmoner arter olmalıdır.
- Pulmoner arter embolizasyonu için malzeme hazırlayın: bir lipidik kontrast madde 2 ml ilave edilir, N-butil-2-siyanoakrilat içeren yumuşak doku yapıştırıcısı 1 ml.
DİKKAT: N-butil-2-siyanoakrilat ile deri veya gözlerin temasından kaçının. - Anjiyografik kateter iyi konumlandırılmış zaman, pulmoner arter hazırlık 0.4 ml 0.2 ml enjekte edilir. Ölçerek Embolizasyon toleransı değerlendirin0.5 geçmemelidir mPAP / MPa oranı. Oksijen satürasyonu ise <embolizasyon durdurun% 90 ve / veya MPA / dk 2 L altında 60 mm Hg ve / veya kardiyak output altında düştü.
- Anjiyografik kateter ve kılıfları çıkarın ve ponksiyon dijital kompresyonları gerçekleştirmek.
4. Hemodinamik Değerlendirme
- Genel anestezi sonrasında, bir yatar pozisyonda piglet yerleştirin. , Oksimetre sürekli bir izleme yürütmek CO 2 ekspiratuar, EKG, sistemik kan basıncı (MPA) ve prosedür boyunca pulmoner kan basıncı (mPAP).
- Oksijen satürasyonu (>% 95) göre mümkün olduğunca FiO 2 düşük olan domuzları havalandırın.
- Ekografik gözetiminde perkütan tüm kateter yerleştirin. Arteriyel 6 Fransız kateter karotid arter eklenir ve 8 Fransız kılıf 2 cm 45 ° ile suprasternal çentik yukarıdaki patlağı yapın (superior vena kava ekleniraçı yönü).
- Pulmoner arter bagajda 7 Fransız Swan-Ganz kateteri yerleştirin. 4 ° C de, tuzlu su solüsyonunun 10 ml enjeksiyonu ile ısı seyreltme tekniği ile kardiyak çıktı, değerlendirin.
- Aşağıdaki parametreleri kayıt: sistolik, diyastolik ve sistemik ve pulmoner arter basıncı, kalp hızı, oksijen doygunluğu, sağ atriyal basıncın, kardiyak çıkışı anlamına gelir.
Sağ Ventrikül 5. Ekokardiyografik Değerlendirmesi
- Genel anestezi sonrasında, yatar pozisyonda piglet yüklemek ve RV taraması için insan yönergelere göre trans torasik ekokardiyografi gerçekleştirin. Tutanak video bir ekspiryum sonu duraklatma sırasında döngüler.
6. Basınç Hacim İletkenlik Yöntemi ile Değerlendirilmesi Döngüler
- Genel anestezi sonrasında, bir yatar pozisyonda piglet yükleyin. Oksimetre bir sürekli izleme, ekspiratuar CO yürütmek 2, EKG, sistemik kan basıncı (MPA) veprosedür boyunca pulmoner kan basıncı (mPAP).
- Bir sağ arteriyel 6 Fransız kateter veya sol karotis arter ve sol ventrikül bir anjiyografik kateter yerleştirin. Bir 9 superior vena kava Fransız kılıfı, sağ 8 Fransızca veya sol femoral ven ve sağ arteriyel PiCCO kateter veya sol femoral arter yerleştirin. Perkütan ekografik gözetiminde tüm kateterler yerleştirin.
- Üreticinin tavsiyelerine göre iletkenlik probu basınç ve hacim kalibrasyonunu gerçekleştirin. Arteriyel kan 5 ml numune kan direncine (Rho) ölçün. Hasat arteryel kan 5 mi, de hava enjektör ve kan direnç. 10-13 ölçülmesi için sondayı doldurun.
- Üstün veina kava 9 Fr kılıftan sağ ventrikül iletkenlik kateter yerleştirin. Düzgün floroskopi ile kateterin ucunu yerleştirin. Teçhizat apeks kateterin ucunu yerleştirinht ventrikül ve ventrikül tüm mümkün olduğunca uzun yerleştirin.
- Döngüler kalitesini kontrol edin. (Şekil 6)
- Femoral ven yoluyla alt veina cava de gider bir ballon yerleştirin. Sadece sağ atriyal altında ekstremite yerleştirin. Floroskopi rehberlik kullanın.
- Bazal durumuna ve inferior vena kava tıkanıklığı sırasında sağ ventrikül Kayıt basınç-volüm döngüler daha önce 10-12 nitelendirdi. (Şekil 7)
Sağ Ventrikül 7. Endomiyokardiyal Biyopsiler
- Genel anestezi sonrasında, bir yatar pozisyonda piglet yerleştirin. , Oksimetre sürekli bir izleme yürütmek CO 2 ekspiratuar, EKG, sistemik kan basıncı (MPA) ve prosedür boyunca pulmoner kan basıncı (mPAP).
- Perkütan superior vena kava içinde 10 Fransız kılıfı yerleştirin. 7 Fransız Swan-Ganz (SG) prob ve sağ Atri uzun 7.5 Fransız kateter kılıf takınum. SG probunun ucu iyice sağ ventrikül (RV) yerleştirildiğinde, balonun karşı RV uzun kılıf kateter itmek, SG probunun balonu şişirmek. Balon Deflate ve RV uzun kılıf kateter bırakarak SG probu kaldırın. Uzun kılıf ucundan iyi pozisyon floroskopi ve ekokardiyografi ile kontrol edilir.
- Uzun kılıf içinde biotome yerleştirin ve ekografik, floroskopi ve EKG kontrolü altında Endomiyokardiyal biyopsi.
8. General Post-cerrahi Bakımı Hususlar
- Ameliyattan sonra, sadece spontan solunum fonksiyonlarının kurtarma sonra piglet ekstübe.
- Post operatif ilaç için, Cefatoxine (1 g), bir intramüsküler enjeksiyon yerine 5 gün Die ve 10 gün boyunca appropieted analjezi (Buprenorphin, intramuskuler enjeksiyon 0,01 mg / kg BID sağlar.
- Tam rec kadar diğer hayvanların şirkete ameliyat geçirmiş bir hayvan bırakmayınovered.
9. Ötenazi Yöntemi
- Ardından durumlarda hayvanların Euthanize; Bir hafta içinde ağırlığı% 15 veya daha fazla kayıp deneme sonu, unibability yeterince kendilerini beslemek için, iştahsızlık, değil tedavi edilebilir enfeksiyon, ağrı veya diğer didease, çok şiddetli desease: siyanoz, dispne önemli
- Sevoluorane% 8 ile genel anestezi sırasında potasyum klorür öldürücü bir dozuyla (/ kg 0,2 g) ile birlikte propofol yüksek dozda (0.5 mg / kg) enjekte edilir. Kalp diyastolde durdurulduğunda, histolojik ve moleküler çalışma yapmak amacıyla kalp ve akciğer bloğa hasat edilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Fizibilite
Kronik post-embolik pulmoner hipertansiyon bu domuz yavrusu modeli 2009-2010 laboratuvarda kurulmuştur. 2011 yılından bu yana, biz 70 domuz yavrusu kullanılan ve biz 63 tamamlanmış modeller uygulandı. Bizim tecrübelerimize göre, bu modelin gerçekleşmesi bir öğrenme eğrisi gerekli.
Ölüm ile ilgili olarak, biz esas olarak bizim deneyim ilk bölümünde, 5 plansız ölümleri (% 7.1) gözlendi. İki kritik adımlar, ilk akciğer embolizasyonu ve ikinci endomiyokard biyopsiler idi. Dört domuz akciğer embolizasyon sonrası ciddi akut sağ kalp yetmezliğinden öldü. Bir domuz yavrusu bilinmeyen bir nedene öldü. Morbidite ile ilgili olarak, 4 domuz yavrusu (% 5.7) işlemler sırasında önemli bir komplikasyon vardı.
İki domuz endomiyokardik biyopsi işlemi sırasında acil perikardiyal drenaj gerekli. Onlar yüzünden teçhizat bir perforasyon acil pericardo-sentez gerekliht ücretsiz duvar ventriküler. Kurtarma tüm vakalarda olaysız oldu. Ekografik rehberlik kullanımı Endomiyokard biyopsi yana, biz artık bu komplikasyon görülmedi.
Diğer iki domuz pulmoner arter ligasyonu sonrası Piyotoraks geliştirdi ve 7 gün de ameliyat sonrası ötenazi gerekli.
Biz 20 kg ortalama ağırlığı ile büyük beyaz domuz yavrusu kullanılır. Tüm hayvanlar erkekti ve bir Fransız çiftlikte (Gambais, Fransa) geldi. İlk saat ameliyat sonrası, domuz yavrusu oksijen ve yerden ısıtmalı özel bir odaya yerleştirildi. Daha sonra, tek başına veya bir 2 m2 kafeste bir domuz yavrusu ile yerleştirildi.
Piglet Kronik Pulmoner Hipertansiyon modeli sol pulmoner bağlanması ve 5 tekrarlanan embolizasyonlar (Şekil 1) sonra 6 hafta yerine getirilmiştir. Sol pulmoner arter küçük yanal thoracot yoluyla bağlandıomy. Sağ alt pulmoner arter ilk embolizasyon 5 gün sonra gerçekleştirildi. Emboli, N-butil-2-siyanoakrilat embolizasyon başına 3,2 ± 0,8 ml bir ortalama 5 hafta boyunca haftada bir tekrarlanır. Aşağıdaki gibi hemodinami, pulmoner damarlarda ve sağ ventrikül üzerindeki etkiler tarif edilebilir.
Sahte hayvanlar sol pulmoner arter ligasyonu olmadan sadece sol torakotomi uygulandı. Bunlar pulmoner arter embolizasyonu yok ama diğer hayvanlar ile aynı anda hemodinamik, ekokardiyografik ve histolojik değerlendirmeler tekrarlandı uygulandı.
Şekil 1. KTEPH hayvan modeli tasarımı. Sol pulmoner arter ligasyonu akciğer alt loba arter (A ve D) tekrarlanan embolizasyonu izledi. LPA ligasyonu (ok) yoluyla uygulandıküçük sol torakotomi (C). Embolizasyon 5 hafta (B) floroskopi rehberliği haftada gerçekleştirilmiştir. Tüm deneyler, genel anestezi altında yapılan ve perkütan damar erişimleri embolizasyonlar ve basınç ölçümleri için kullanıldı: (E) perkütan üstün veina cava (yıldız) ve sağ karotid arter kateterizasyon. Sol femoral arterden sağ femoral ven (yıldız) ve arteriyel termodilusyon kılıf sensörü (F) 8Fr kılıf. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Hemodinamik sonuçları
Ortalama pulmoner arter basıncı (mPAP) 25 mm Hg üzerinde embolizasyonlar sonra giderek arttı. Hemodinamik veriler Tablo 1'de özetlenmiştir. Sağ atriyal basıncın, mPAP / DDSÇ oranı ve pulmonervasküler direnç de tekrarlanan emboli artmıştır. Kardiyak İndeks RV disfonksiyonu yansıtan, birkaç embolizasyonlar sonra azalmaya trend. MPAP / DDSÇ oranı da giderek arttı. Bu oran sırf ölüm riski akut embolizasyondan sonra 0.5 geçmemelidir. Bu nedenle, embolizasyon enjeksiyon başına 2 ml 'lik bir maksimum gerçekleştirilmelidir. Önceki bir de hemodinamik tolere edilmiş ise 1 ml yeniden enjeksiyon yapılabilir. Bu modelde, PH PCWP artmadı çünkü sadece prekapiller oldu.
. KTEPH HR 8 domuz modellerinden Tablo 1. Hemodinamik veriler: kalp hızı; DDSÇ: Sistemik ortalama arter basıncı; RAP: sağ atriyal basınç; PEİ'ler: sistolik pulmoner arter basıncı; PAPd: diyastolik pulmoner arter basıncı; mPAP: Pulmoner arter basıncı anlamına gelir; PCWP: pulmoner kapiller wedge basın ure; CO: kardiyak output; CI: kardiyak indeks; ESV: ejeksiyon sistolik hacim; PVR: pulmoner vasküler dirençleri.
Pulmoner arterlerin Tadilat
Bronşiyal sirkülasyon hipertrofisi, sol akciğer, sağ alt lob ve mediastinal plevra boyunca gözlendi. Patolojide, geniş ve çok sayıda submukozal bronşiyal arterler bu topraklarda anjiyogenez artışı yansıtan, obstrüktif akciğerler (sol akciğer ve sağ alt lob) gözlendi. Taşma vaskülopati olmayan obstrüktif toprakları (sağ üst lob) gözlenirken medya hipertrofisi (Şekil 2) Gönder obstrüktif akciğer vaskülopati da, tıkalı bölgede (sol akciğerde ve sağ alt lob) tespit edildi. (Şekil 3) Patoloji ayrıca N-butil-2-siyanoakrilat ve fibrin çözülmemiş trombüs ile sağ alt lob pulmoner arter kronik tıkanıklık saptandı.
t ">
Şekil 2. KTEPH modelinde Vasküler remodeling. Sol akciğerde ve viseral plevra (A) bronş arterlerin gelişme gösteren İntraoperatif görüş ve mediasten (yıldız, B). Çözülmemiş intravasküler pıhtıları (C) gösteren hasat sağ alt lob anatomisi. Işık mikroskobu (ok) (D) görülen küçük pulmoner arterlerde Medya hipertrofisi. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Sham ve KTEPH hayvanlarda Şekil 3. Karşılaştırmalı pulmoner vasküler remodeling (Hematoksilen ve eozin boyama) sahte piglet gelen Histoloji (A):. TO pulmoner arter (ok) ve üç mikrodamarlar (daireler) ince duvarlar gösterilecek ve hiçbir hipertrofik değişiklikler görülebilir. Sağ üst lob medial kalınlaşma gösterisi çevresine 5 hafta (B), pulmoner arterler (ok) sonra KTEPH piglet içinde. Ancak, sadece çok hafif değişiklikler ile mevcut bu bölgede mikrodamarlar (daireler) (ölçek bar, 200 mikron). Yüksek büyütme (C), unremodelled görünür sağ üst lob (engelsiz bölge) den ve normal 5 haftalık bir KTEPH piglet içinde büyüklüğü bronşiyal arterler (oklar) (ölçek bar, 1.000 mikron) de. Büyük halini görmek için tıklayınız bu rakamın.
Sağ ventrikül Tadilat
Sağ ventrikül hipertrofisi ve fibrozis ile ilişkili önemli genişleme 6 hafta (Tablo 2 ve Şekil sonrasında gözlendi4 ve video 1 ve video 2). RV alanı, Sağ Atriyal (RA) alanı, RV çapları tekrarlanan embolizasyonlar sonra arttı. RV duvar kalınlığı da arttı. RV hipertrofisi kalbin hasattan sonra ışık mikroskobu teyit edilmiştir. Ekokardiyografide ise, Tricsupid Annula Düzlem Sistolik Gezi (TAPSE değeri) ve Sağ Ventriküler Fractionnal Alan Değişikliği (RVFAC) Bu modeldeki RV disfonksiyonu yansıtan 6 hafta sonra azaldı. RV fonksiyon bozukluğu da ventriküler-arteriyel kavrama (Tablo 3) azalarak PVL analizi ile tespit edilmiştir.
| Zamanlama | ||
| Değerler | T0 (LPA ligasyon) | 6 hafta |
| RV diyastol alanı, cm2 | 4.5 ± 0.2 | 7.1 ± 0.9 |
| RV bazal çapı, cm | 1.5 ± 0.8 | 3.7 ± 1.3 |
| RV serbest duvar kalınlığı, cm | 0.3 ± 0.02 | 0.59 ± 0.04 |
| RA alanı, cm2 | 3.9 ± 0.4 | 5.9 ± 0.3 |
| RVFAC,% | 0.50 ± 0.03 | 25.0 ± 1.0 |
| RV TAPSE değeri cm | 1.6 ± 0.2 | 1.11 ± 0.07 |
| LV EF,% | 55.7 ± 4.9 | 52.2 ± 6.0 |
. Ekokardiyografi RVFAC Tablo 2. RV remodeling: Sağ ventrikül fraksiyonel alan değişimi; TAPSE değeri: triküspit halka düzleminde gezi; LV EF: sol ventrikül ejeksiyon fraksiyonu.
| Zamanlama | ||
| Değerler | T0 (LPA ligasyon) | 6 hafta |
| RV İnme Çalışma, mm Hg.ml -1 | 579 ± 55 | 2248 ± 148 |
| RV elastans, Ees | 0.33 ± 0.06 | 0.40 ± 0.06 |
| Pulmoner arteriyel elastans, Ea | 0,32 ± 0,05 | 0.51 ± 0.03 |
| RV kancası, Ees / Ea | 1.33 ± 0.19 | 0.78 ± 1.0 |
Basınç Hacmi sağ ventrikül Tablo 3. Fonksiyonel yeniden şekillenme analizi Döngüler.
4. Sağ ventrikül remodeling Şekil. Dört boşlukları (A) ve kısa parasternal ekseni (B) görünümünde ekokardiyografi sağ ventrikül genişlemesi göstermiştir. Sol ventrikül üzerindeki interventriküler septum kayması ve sıkıştırma unutmayın. RV hipertrofisi makroskopik olarak (C) ve w ışık mikroskopisi ile teyit edilmiştir Sham (D ve E) ile karşılaştırıldığında kardiyomiyositlerin enine ekseni i genişlemesi. (H) gösterdiği gibi, Fulton oranı ortalama pulmoner arter basıncı ile ilişkilidir. RV fibrozis oranı SHAM (F ve G) ile karşılaştırıldığında KTEPH hayvanlarda artmıştır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Video 1:. Transtorasik 4 kavite ve sağ ventrikül genişlemesini gösteren kısa eksen görünümleri Bu videoyu görmek için lütfen buraya tıklayınız.
OAD / 53133 / 53133movie2.jpg "/>
Video 2: median sternotomi sonrası Operatif görünümü. Dilate sağ ventrikül perikard doldurun. Bu videoyu görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Genetik ve metabolik çalışma gerçekleştirmek için, sağ ventrikül endomiyokardiyal biyopsi tekniğidir kronik basınç yüklenmesinin mevcut modelinde geliştirilmiştir. Bu teknik güvenli ve anestezi domuz yavrularında taze miyokard örnekleme tekrarlandı sağlar. Ekokardiyografi ve skopi kontrolü biotome ile RV duvar delme riski azalır. Uzun kateter tekniği triküspit kapak hasarı (Şekil 5) önlemek için iyi bir stratejidir.
KTEPH'lu modelinde Şekil 5. Endomiyokardiyal biyopsi. (A </ strong>) 55 cm boyun biotome bir transkutanöz 7 Fr uzun kateter kılıf içinden sağ ventrikül eklemek edilir. Forseps ilerleme ekokardiyografi (C) ve floroskopi (B) ile kontrol edildi ve bir 6mm3 miyokard parçası (D) ile ekstre edilir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
PV için iletkenlik probu Şekil 6. Uygun yerleştirme değerlendirmesini döngüler. (A) floroskopi (katı ok) altında sağ ventrikül apeks prob ucunu yerleştirin. Sağ ventrikül içinde en az 3 kesimleri yerleştirin ve sonda düz lin olmak zorundae. Femoral ven yoluyla alt veina cava bir tıkanıklık balon yerleştirin. Balonun sonunda sadece sağ atrium girişi (kesikli ok) (* olmalıdır. Entübasyon probu; ** EKG tel (B) prob hacmi segmentleri "diastolik ve sistolik ve fazda olmalıdır doğrulayın Ekranda döngünün iyi Kadm. PV döngünün kötü durumda (C) Örnek nedeniyle sağ ventrikülde volüm kesimleri yanlış yerleşimi. Kötü bir hacim kalibrasyonu (D) Örnek. ventriküler hacimler negatifleri vardır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Bazal durumuna ve YALAN inferior veina cava tıkanıklığı (A ve A ') sırasında PV döngü şekli ve KTEPH piglet (b ve b & # Şekil 7. Örnek8217). Normal sağ ventrikül PV döngü düşük basınçlı ve pulmoner hipertansiyon altında sağ ventrikül ile karşılaştırıldığında hacim değerleri ile bir üçgen şekli vardır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
İnsan klinik uygulamada olduğu gibi, aseptik kurallara saygı Tüm cerrahi prosedürler sırasında zorunludur. Medyan sternotomi ile 14 O. Mercier ve diğ. Tarafından anlatılan orjinal KTEPH'lu yavrusu modelinde, sol pulmoner arter ligasyonu, perikard açıldıktan sonra gerçekleştirilmiştir. Perikard açıldı bırakıldı Çünkü, sağ ventrikül ve perikard arasındaki etkileşim bozuldu ve sağ kalp yetmezliği ertelenmişti. Kardiyak output RV genişlemenin olumsuz etki perikard 15 açık olduğunda anlamlı olarak düşük olduğu ortaya konmuştur. Bu nedenle, kalan PA ligasyon zamanında perikard açmak için daha iyi görünüyor. Bir daha teknik olarak zor bir tekniktir (bakım frenik sinir ve sol akciğeri korumak için ödenmesi gereken) ve ağrı kontrolü sorununa rağmen, sol yanal torakotomi perikard dışında sol PA ligasyonu için en iyi yaklaşım teklif olmasına rağmen. Sol PA ligatio gibin artan mPAP yol açmaz, sağ alt lob PA ilerici embolizasyon gerekliydi. Bu modelin ikinci kritik nokta sağ alt lob PA embolizasyon sonrası masif pulmoner emboli riski olduğunu. N-bütil-2-siyanoakrilat 2 ml 2 ml maksimum enjeksiyon yapıldı ve hemodinamik toleransı, her enjeksiyon arasında takdir edilmiştir. MPAP / MPa oranı 0.5 'i geçmemelidir. Buna ek olarak, embolizasyon wa oksijen satürasyonu ise <sstopped% 90 ve / veya 60 MPa mmHg ve / veya kalp çıkışı / dak 2 L altında olduğu altında düştü.
Beş embolizasyon genellikle her KTEPH'lu model yerine edildi. Numarası ve embolizasyon sıklığı indüklenen pulmoner hipertansiyon garantili şiddetine göre ayarlanabilir. 2 ardışık embolizasyonlar arasında dört gün daha iyi bir hemodinamik toleransı için saygı vardı. Ek embolizasyon veya şiddetli RV ile KTEPH ileri aşamalarında çoğaltabilir uzun bir gözlem süresibaşarısızlık.
Bu model, hastalığın kökeni ama kronik pulmoner vasküler tıkanıklığı sadece sonuçlarını çoğaltma değil. Teşkilatlanan taze pıhtıları patofizyolojisi ve lifli intravasküler malzeme yerine kaybolur hiçbir ipucu yoktur.
Bu başka terapötik testine izin veren kısa bir süre içinde yeniden üretilebilir kronik PH ilk büyük hayvan modelidir. Tüm hayvanlar, deneyin başlangıcından sonra 6 hafta içinde 25 mm Hg 'nin üzerine mPAP artmıştır. İnsan KTEPH sağ ventriküle görülen tüm morfolojik, fonksiyonel ve biyolojik değişiklikler çoğaltılamaz. Buna ek olarak, pulmoner mikrovasküler lezyonlar iki ayrı damar topraklarında (tıkalı olmayan vs engellenmiş) çoğaltılamaz bulundu. En azından, bu model yaralı pulmoner damarların (tıkanmıştır ve remodeling toprakları) ve sağ ventrikül arasındaki etkileşimi çoğaltılamaz.
Çeşitli physiological çalışmalar bu orijinal ve benzersiz KTEPH modeli 11,12,16 dayandırılmıştır. Bu RV yetersizliği (mitokondri, inflamasyon) ve yeni terapötik yaklaşımlara (hedeflenen, hücresel veya gen tedavileri) altında yatan mekanizmaların anlaşılması için yeni bakış açıları verir. Bu model aynı zamanda PH cerrahi tedaviden sonra RV iyileşme mekanizmalarını araştırmak için yardımcı olabilir. Nitekim, sol akciğer reperfüzyon cerrahi PA desobtruction ve RV boşaltma üreyen, yapılabilir. Hem bağımlı ve yeni tedavi ikisi de hedeflemelidir olarak pulmoner mikrovasküler hastalığı ve sağ ventrikül arasındaki etkileşimler ileri çalışmalara amacı olacaktır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Herhangi bir çıkar çatışması ifşa etmek.
Acknowledgments
Yazarlar teknik yardım ve hayvan bakımı için, Cerrahi Araştırma Laboratuvarı, Marie Lannelongue Hastanesi'nde ekibine teşekkür ederim. VividE9 kardiyak ultrason sistemi (General Electric Medical Sistemi) Cardio-vasculaire-obesite Domaine D'interet Majeur (CODDIM morina 100.158, RégionIle-de-France, Fransa) bir hibe ile finanse edilmiştir.
References
- Simonneau, G., et al. Updated clinical classification of pulmonary hypertension. J Am Coll Cardiol. 54, Suppl 1. S43-S54 (2009).
- Dartevelle, P., et al.
- Hoeper, M. M., Mayer, E., Simonneau, G., Rubin, L. J.
- Galie, N., Kim, N. H. Pulmonary microvascular disease in chronic thromboembolic pulmonary hypertension. Proc Am Thorac Soc. 3 (7), 571-576 (2006).
- Humbert, M., et al. Survival in patients with idiopathic, familial, and anorexigen-associated pulmonary arterial hypertension in the modern management era. Circulation. 122 (2), 156-163 (2010).
- Guihaire, J., et al. Experimental models of right heart failure: a window for translational research in pulmonary hypertension. Semin Respir Crit Care Med. 34 (5), 689-699 (2013).
- Mercier, O., Fadel, E. Chronic thromboembolic pulmonary hypertension: animal models. Eur Respir J. 41 (5), 1200-1206 (2013).
- Kaiser, G. M., Heuer, M. M., Fruhauf, N. R., Kuhne, C. A., Broelsch, C. E. General handling and anesthesia for experimental surgery in pigs. J Surg Res. 130 (1), 73-79 (2006).
- Flegal, M. C., Kuhlman, S. M. Anesthesia monitoring equipment for laboratory animals. Lab Anim (NY). 33 (7), 31-36 (2004).
- Guihaire, J., et al. Right ventricular reserve in a piglet model of chronic pulmonary hypertension. Eur Respir J. , (2014).
- Guihaire, J., et al. Right ventricular plasticity in a porcine model of chronic pressure overload. J Heart Lung Transplant. 33 (2), 194-202 (2014).
- Guihaire, J., et al. Non-invasive indices of right ventricular function are markers of ventricular-arterial coupling rather than ventricular contractility: insights from a porcine model of chronic pressure overload. Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 14 (12), 1140-1149 (2013).
- Kass, D. A., Yamazaki, T., Burkhoff, D., Maughan, W. L., Sagawa, K. Determination of left ventricular end-systolic pressure-volume relationships by the conductance (volume) catheter technique. Circulation. 73 (3), 586-595 (1986).
- Mercier, O., et al. Piglet model of chronic pulmonary hypertension. Pulm Circ. 3 (4), 908-915 (2013).
- Brooks, H., Kirk, E. S., Vokonas, P. S., Urschel, C. W., Sonnenblick, E. H. Performance of the right ventricle under stress: relation to right coronary flow. J Clin Invest. 50 (10), 2176-2183 (1971).
- Boulate, D., et al. Pulmonary microvascular lesions regress in reperfused chronic thromboembolic pulmonary hypertension. J Heart Lung Transplant. , (2014).
