Summary
Subkutan implantation af osmotiske pumper giver en bekvem metode til langvarig og konsekvent levering af forbindelser. Denne fremgangsmåde har været anvendt i udstrakt grad til at studere både abdominale og thorax aortaaneurismer i mus.
Introduction
Aortaaneurismer udviser permanent luminale udvidelse af aorta, der varsler brud og normalt fører til døden. Denne sygdom opstår i både abdominale og thorax aorta regioner, der betegnes som abdominale aortaaneurismer (AAAS) og thorax aortaaneurismer (TAA'er) henholdsvis. På grund af en ufuldstændig forståelse af molekylære mekanismer og patofysiologiske processer, er der ingen dokumenteret medicinsk behandling, der kan forhindre ekspansion eller brud på begge typer af aortaaneurismer. Da det er vanskeligt at erhverve patientprøver og udfører forsøg i mennesker direkte, forskning med fokus på at definere mekanismer AAA er ofte blevet ekstrapoleret fra dyremodeller. En almindeligt anvendt dyremodel er subkutan infusion af angiotensin II (Angll) i mus. Sammenlignet med andre kirurgiske metoder til fremkaldelse AAA i mus, såsom intraaortisk elastase perfusion eller peri-aorta anvendelse af calciumchlorid, der kræver laparotomi 1,2, dette method kræver ikke indrejse i kroppen hulrum og kræver minimal kirurgisk ekspertise 3,4.
Subkutan infusion af Angll gennem osmotiske pumper til at inducere AAA blev oprindeligt rapporteret i lav densitet-lipoprotein (LDL) receptor - / - mus fodret med en mættet fedt beriget kost 3, og efterfølgende i apoE - / - mus fodret med en normal laboratorium kost 4. Mange nyere undersøgelser har også vist, at Angll inducerer AAA i normolipidæmiske mus 5-7. Tilgangen af infusion Angll er blevet anvendt til at fremkalde AAA og udforske molekylære mekanismer samt udvikling af potentielle terapeutiske strategier (fx 5-15) da denne model rekapitulerer mange funktioner observeret i humane AAA. For eksempel, risikofaktorer for menneskelige AAA såsom rygning, aldring, og mandlig køn også forøge Angll-inducerede AAA i mus 16,17. Foreningen af hyperkolesterolæmi med AAA hos mennesker kræver afklaring. Det skal dog væreen konsekvent, at hypercholesterolæmi forøger Angll-induceret AAA i mus 18. Patologier i Angll-inducerede AAA i mus er meget heterogen og er kendetegnet ved dyb makrofaginfiltration, collagen nedbrydning, thrombotisk dannelse og opløsning og neovaskularisering 19-21. I modsætning til de mest almindelige infrarenale aorta placeringen af AAA hos mennesker, Angll-inducerede AAA i mus forekomme i suprarenale aorta region. En anden allestedsnærværende træk ved Angll-induceret AAA er transmurale mediale pause, hvilket fører til transmural trombose. Det er uklart, om transmural elastin brud forekommer hos mennesker, da patologisk udvikling af AAA hos mennesker er ikke blevet undersøgt udelukkende på grund af manglende aneurismale væv fra tidligere stadier.
Angll infusion i mus fører også til dybe udvidelse af thorax aorta region, som overvejende er begrænset til aorta ascendens, som er den mest almindelige region for TAA'er i mennesker
Det overordnede mål for subkutan Angll infusion i mus er at studere patologiske funktioner og molekylære mekanismer i AAA og TAA'er.
Protocol
Etik Statement: studier Mus udføres med godkendelse fra University of Kentucky Institutional Animal Care og brug Udvalg (IACUC protokol nummer: 2006 til 0009). Mus aflives ved afslutning ved hjælp af en overdosis cocktail af ketamin (~ 210 mg / kg) og xylazin (~ 30 mg / kg).
1. Beregning af Angll Beløb
BEMÆRK: Denne protokol anvender eksemplet med infusion af Angll (1.000 ng / kg / min) i 4 uger i 4 mandlige LDL-receptor - / - mus fodret med en mættet fedt-beriget kost.
- Afvejes studere mus før beregningen af Angll nødvendig til infusion.
- Brug skabelonen (tabel 1) for at beregne Angll masse som grundlag for eksperimentet. Brug "Mean pumpehastighed" angivet i instruktion af pumper som "pumpehastighed" i trin 4 af skabelonen. I skabelonen, optage trin 1 - 5 manuelt, og trin 6-10 beregnes automatisk.
- I skabelonen, antage, atmus får 1 g legemsvægt under infusion af Angll 1.000 ng / kg / min i 4 uger.
BEMÆRK: Hver mus kan have meget forskellig kropsvægt gevinst, der vil afhænge af mange variabler, såsom mus stamme og kost. Vi bruger rutinemæssigt "0" eller "1 g" baseret på vores egne erfaringer fra tidligere undersøgelser. - Beregne en 300 ul totalvolumen på Angll løsning for hver mus, da hver pumpe kræver ca. 250 pi.
- I skabelonen, antage, atmus får 1 g legemsvægt under infusion af Angll 1.000 ng / kg / min i 4 uger.
2. Opløsning af Angll
- Store lyofiliseret Angll hætteglas ved -20 ° C. Ækvilibrer Angll hætteglas til RT før åbning.
- Den beregnede Angll masse (7,3 mg som vist i tabel 1) afvejes i et sterilt plastikrør.
BEMÆRK: Per Merck Index, skal du ikke bruge glasrør til opløsning, da en vandig opløsning af Angll har en stærk affinitet for binding til glas. - Tilsæt beregnede volumen af sterilt saltvand (1.200 μl) ind i plastik rør indeholdende den frysetørrede Angll, cap, og bland grundigt ved inversion, indtil opløsningen er klar.
- Label mus numre # 1, # 2, # 3 og # 4 på individuelle sterile plastrør med hætter (0,5 - 1,5 ml). Forbered Angll opløsning under en laminar hood for hver mus baseret på kropsvægt som beregnet i trin 1.2 og tabel 1.
- For eksempel, pipette 3,6 pi sterilt saltvand i rør # 1, så 296,4 pi Angll løsning, og bland grundigt ved pipettering op og ned forsigtigt.
- Numre label musen på plastikrør med hætter (4 ml, steril). Disse vil blive anvendt til at inkubere pumper som beskrevet i trin 3.13.
3. osmotisk pumpe Påfyldning
- Opnå pumper i to særskilte dele: hoveddelen af pumpen og strømningsmoderatoren (figur 1). Hver kasse har 10 pumpehuse og flow moderatorer, der er snoet individuelt. Optag lotnummer.
BEMÆRK: Brug altidhandsker fordi olier overført fra hænder til den udvendige beklædning af pumper vil påvirke pumpe funktion. Brug sterile handsker, gaze, rør, påfyldning nål, og vejer både at forberede pumperne, for at undgå risiko for infektion fra implantatet. - Åbn kun antallet af pumpehuse og flow moderatorer nødvendige for undersøgelsen, da disse kan ikke gemmes efter åbning. Hvis der er behov for mere end 10 pumper, sikre, at lotnumrene af pumperne er de samme for en undersøgelse, da pumper fra forskellige lotnumre har forskellige Mean Fill Volumen og pumpe Rate.
- Hver pumpe (herunder både hoveddelen og flow moderator) afvejes, og bemærk vægten til 4 decimaler (f.eks 1,1443 g mus # 1). Denne vægt, betegnet "Pump Vægt tomt" i skabelonen (tabel 1), vil blive anvendt til at beregne den fyldte forhold.
- Monter pumpen påfyldning nål til en 1 cc steril sprøjte og omhyggeligt fylde sprøjten med Angll løsning fra det passendenummereret plastrør. Det er vigtigt at undgå at trække luft ind i sprøjten.
- Fjern alle luftbobler forsigtigt fra sprøjten, mens kanylen er placeret nedad. Hold nålen / sprøjten i denne stilling for at forhindre indslæbning af bobler ind i pumpen.
- Sæt forsigtigt fyldet nålen ind i pumpehuset. Advance spidsen af nålen ind i pumpen. Ikke hvile spidsen af nålen fast i bunden af pumpen.
- Skub sprøjtens stempel langsomt at fylde pumpen med Angll løsning. En mørk skygge inde i pumpen angiver påfyldningsniveau. Volumen Fyldet er ca 246 pi, pr instrukser.
- Stop fylde pumpen og fjern forsigtigt nålen, så snart en perle af væske stiger ud af pumpen.
- Sæt strømningsmoderator i pumpen gennem hullet på toppen af pumpehuset, indtil der ikke mellemrum ses mellem hovedet af strømningsmoderatoren og toppen af pumpehuset (figur 1).
- Indsættelse af Moderateller i pumpehuset fører til noget væske lækker fra åbningen af strømningsmoderatoren. Skamplet omhyggeligt alle ekstra væske, der kunne have lækket under placering af moderatorer.
- Fyldt pumpe afvejes. Noterer vægten under "Pumpe Vægt fyldt" i skabelonen.
- Beregn Påfyldning Ratio (%) = (pumpe Weight "fyldt" - "tom") x 1.000 / betyde fylde volumen x 100.
- Beregn fyldningsgraden som angivet i tabel 1. Ideelt set fyldningsgrad skal være lig med eller større end 100%. Refill pumpen, hvis fyldningsgraden er <95% (implicerer, at luftbobler kan være til stede i pumpen).
- Placer fyldt pumpe i den mærkede 4 ml rør (trin 2.5) med moderator hoved vender opad. Tilsæt tilstrækkeligt volumen sterilt saltvand til dækning pumpen. Hold pumpe i røret saltvand indtil implantation.
- Rørene anbringes i en 37 ° C inkubator. Inkuber pumper O / N (mindst 12 timer) for at give delvis priming, og derefter implantere i mus. PumpeING af Angll starter ca. 24 timer efter implantation, der gør det muligt mus til at inddrive fra kirurgi forud for enhver potentiel stress opstår under Angll infusion.
4. Forberedelse til pumpe implantation
- Autoklave (tyngdekraft-tilstand, tør cyklus, 15 min) gaze, vatpinde og kirurgiske værktøjer, herunder saks, hæmostat, pincet, hæfteklammer, og hæftemaskine mindst 1 dag før operation.
- I en procedure værelse, forberede fordamper til anæstesi ved hjælp af isofluran. Åbne op sterile forhæng i en laminar flow hætte, og placere næse kegle for isofluran anæstesi. Placer betadine, 70% ethanol, sterilt vand, perle sterilisator, antiseptisk handrub, vatpinde, gaze, og fyldte pumper i en laminar hætte.
- Don en maske og kjole, derefter åbne en ydre drapere i en laminar hætte med rene hænder. Sæt på sterile handsker og åbne den sterile indeni pakken.
5. Kirurgisk forretningsorden Pumpe Implantation
- Placer musen i en induktion chamber med indstrømning af isofluran ved en strømningshastighed på 1,5 - 2%. Overvåg musen i yderligere 2 - 3 min efter liggende stilling. Barberer et område på størrelse med en fjerdedel, i venstre eller højre skulder.
- Placer mus i en laminar hood, med næsen i plan med en kegle tilsluttet isofluran udstrømning (figur 2A). Placer musens hovedet mod kirurgens dominerende hånd. Brug dyrlæge salve på musens øjne til at forebygge tørhed, mens under anæstesi. Sikre, at musen har nogen reaktion på stimulering af smerte før operationen. For eksempel, pedal respons er en god indikator for smerter.
- Swab og tør barberet område med betadin efterfulgt af tre klude med 70% ethanol. Don eller ændre sterile handsker.
- Anvend en kirurgisk skalpel til at foretage en ~ 1 cm incision bag øret over skulderbladet af det forreste ben. Dette snit skal være vinkelret på halen. Vær forsigtig at skære kun huden og ikke underliggende væv.
- Hold kræfEPS i den ene hånd til at åbne indsnit, og bruge den anden hånd til at foretage en subkutan tunnel under huden med en hæmostat (figur 2B).
- Advance hæmostat spids mod halen, og skabe en lomme til pumpe. Dette opnås ved forsigtigt at åbne kæberne i arterieklemmen under huden for at åbne en pose. Træk hemostat fra snittet.
- Sæt pumpen ind i indsnittet med moderator hovedet placeret på bagsiden af musen (figur 2C). Skub forsigtigt pumpen helt ind i lommen. Der bør være tilstrækkelig ledig plads til at lukke såret uden spænding eller strækning af huden.
- Når en pumpe er blevet indsat, fast knivspids begge sider af snittet, glatning, så kanterne mødes, og læg 1 eller 2 sårklemmer at lukke (figur 2D). Undersøg incisionssted at sikre, at der er fuldstændig lukning af såret, og at pumpen ikke trykke direkte på stedet.
- Påfør aktuel lidocain creme(4% vægt / vægt) med en ren bomuld swab.Remove musen fra næsekeglen, og læg den på en varmepude, indtil det kommer til bevidsthed. Efter udvinding, er musen tilbage til sit bur.
- Placer kirurgiske instrumenter til en perle sterilisator i 10 sekunder mellem mus. Lad instrumenter til at køle af, før brug. Rene handsker med antiseptisk handrub mellem mus. Overvåg alle mus, indtil fuld bedring er opnået.
- Overvåg mus tæt efter operationen. Indsprøjte en bolus af sterilt saltvand (0,2 - 0,3 ml) subkutant, hvis en mus viser tegn på lidelse, dehydrering eller tilsyneladende vægttab. Overhold mus mindst to gange om dagen i de første 10 dage, og mindst en gang hver dag efterfølgende. Udfør en obduktion straks, hvis nogen mus dør under Angll infusion. Fjern sår klip mellem 7 - 14 dage efter operationen.
6. Høst, Fixing, Rensning, og Imaging af Aortas
- Skær åbne musen brysthule og bughule ventralt, klippe OPEn højre atrium, perfundere med saltvand gennem venstre ventrikel af hjertet for at fjerne blod i aorta, og derefter høste aorta 27.
- Placer høstet aorta i plastrør indeholdende mindst 3 ml 4% paraformaldehyd eller 10% neutralt pufret formalin for 24 - 48 timer 27.
- Fjern adventitiaceller væv omhyggeligt. Pin aorta på sort voks med stifter. Anskaf aorta billeder med samme forstørrelse. Omfatter en lineal i hvert billede til kalibrering, som vist i figur 3.
7. En face Imaging af Aortas
- Skåret op aorta på langs gennem den ydre og indre krumning af aortabuen, og skæres åbne store grene, herunder innominate, venstre halspulsåre, og venstre subclavia arterie. Pin aorta fladt med ydre adventitiale om der støder op til den sorte voks.
- Erhverve en face billede af intimal overflade aorta med samme forstørrelse. Medtag en lineal i hvert billede til kalibrering som shown i figur 4.
Representative Results
De 4 mænd LDL-receptor - / - mus er beskrevet i protokol afsnittet blev aflivet efter 4 ugers Angll infusion. Aortaer blev høstet, renset, og afbildes at visualisere aorta dilations. Som vist i figur 3, aorta har flere forskellige karakteristika, herunder udvidelse af suprarenale region (AAA; Fig 3A), udvidelse af opstigende region (TAA'er; figur 3B), eller udvidelse af de to regioner (tilstedeværelse af både AAA og TAA'er; fig 3C), mens morfologi i en mus var groft normal (figur 3D). Udvidelse af den abdominale aorta kvantificeres ved måling af ex vivo maksimale bredde af suprarenale region, som illustreret ved den røde linie i figur 3A. For at måle opstigende aorta dilatation, blev aorta skåret op og fastgjort som vist i figur 4. Intima overfladeareal blev målt i opstigende aorta region (område omgivet af the røde linjer i figur 4A) at kvantificere TAA'er. En lineal blev inkluderet i hvert billede for at standardisere målinger, som vist i begge figurerne 3 og 4.
. Figur 1. Repræsentative billede af fyldt osmotisk pumpe Hver pumpe indeholder to separate dele: en hoveddel og en strømningsmoderator. Efter påfyldning af pumpehuset med Angll, er strømningsmoderatoren indsat for at forsegle pumpen.
Figur 2. Fremgangsmåde pumpe implantering (A) mus anbringes i en laminar hætte med en næse kegle, der kontinuerligt frigiver isofluran og oxygen.; (B) En lige hæmostat indsættes i hudincision at foretage en subkutan tunnel; (C) Pumpen indføres gennem Hudincisionen forsigtigt (D) Huden incision hæftes efter pumpe indsættelse.
Figur 3. Aorta billeder (ex vivo) fra mus infunderet med Angll Angll 1.000 ng / kg / min blev infunderet i Male LDL-receptor -. / - Mus i 28 dage. (A) AAA ledsaget af trombose; Røde linje (2,05 mm) viser målingen af maksimal aortisk bredde i suprarenale region. (B) Stigende aorta dilatation (TAA) med groft normale abdominale aorta; (C) Gennemgribende dilations i både opstigende og suprarenal aorta regioner (TAA'er og AAAS); (D) groft normal aorta uden tilsyneladende dilatation af enten stigende eller suprarenal aorta region.
4.jpg "/>
Figur 4. En face billeder af thorax aorta regioner fra mus infunderet med Angll Angll 1.000 ng / kg / min blev infunderet i mandlige LDL-receptor -. / - Mus i 28 dage. Overfladeareal skitseret af en rød linje repræsenterer opstigende aorta regionen, herunder en del af aortabuen.
| 1 | Dosis, der kræves | 1.000 | ng / kg / min | ||||
| 2 | Start legemsvægt (største mus) | 24.8 | g | ||||
| 3 | Samlede anslåede tilvækst | 1 | g | ||||
| 4 | Pumpehastighed | 0.25 | pl / hr | ||||
| 5 | NuANTAL mus | 4 | |||||
| 6 | Dosis pr time for dyr | 1518 | ng | ||||
| 7 | Konc behov | 6072 | ng / pl | ||||
| 8 | For 300 ul løsning | 1,82 | mg / 300 pi | ||||
| LØSNING BEHOV | |||||||
| 9 | Total Angll (mg) | 7.3 | mg | ||||
| 10 | Opløst i saltvand &# 160; | 1.200 | pi | ||||
| Mus | Legemsvægt | Fortyndingsfaktor | Volumen (pi) | Pumpe Vægt (g) | Fyldt Ratio | ||
| # | (g) | Angll | Saltvand | Tom | Fyldt | (%) | |
| 1 | 24.5 | 1,0 | 296,4 | 3.6 | 1,1443 | 1,3877 | 99 |
| 2 | 23,0 | 0,9 | 278,2 | 21.8 | 1,1677 | 1,4145 | 100 |
| 3 | 24.8 | 1,0 | 300.0 | 0,0 | 1,1438 | 1,3904 | 100 |
| 4 | 21.8 | 0,9 | 263,7 | 36.3 | 1,1438 | 1,3904 | 100 |
| Fortyndingsfaktor = legemsvægt af musen / legemsvægt af de største mus | |||||||
| Mus | Legemsvægt | Fortyndingsfaktor | Volumen (pi) | Pumpe Vægt (g) | Fyldt Ratio | ||
| # | (g) | Angll | Saltvand | Tom | Fyldt | (%) | |
| 1 | 24.5 | 1,0 | 296,4 | 3.6 | 1,1443 | 1,3877 | 99 |
| 2 | 23,0 | 0,9 | 278,2 | 21.8 | 1,1677 | 1,4145 | 100 |
| 3 | 24.8 | 1,0 | 300.0 | 0,0 | 1,1438 | 1,3904 | 100 |
| 4 | 21.8 | 0,9 | 263,7 | 36.3 | 1,1438 | 1,3904 | 100 |
Tabel 1: Beregning for 28-dages infusion via osmotiske pumper.
Discussion
Osmotiske pumper leverer Angll subkutant er en rutinemæssig tilgang til at fremkalde aortaaneurismer i mus. Baseret på data fra mange laboratorier, har der været konsistente resultater, at dette er en pålidelig og reproducerbar metode til at studere både AAA 3,4 og TAA'er 22-26 i mus. Derfor er denne musemodel betragtes som en model, der sammenfatter flere funktioner i humane aortaaneurismer og giver mekanistiske indsigt i disse ødelæggende sygdomme.
Mens aldring er en risikofaktor for AAA i mennesker, det har ikke været systematisk undersøgt for Angll-inducerede AAA i mus. Det fremgår imidlertid, forekomsten og sværhedsgraden af Angll-inducerede AAA er ens i mus i en alder af 8 - 48 uger 4,5,7. I øjeblikket er der kun få undersøgelser, rapportering Angll-inducerede TAA'er i mus i en alder af 8 - 24 uger 22-26, der ikke udviste tilsyneladende aldersrelaterede forskelle på TAA-dannelse.
Hunmus har en langt lavere forekomst af AAA end hanmus infunderes med Angll 4,28. Det er også værd at bemærke, at forekomsten af Angll-induceret AAA er meget højere i hyper end Normo cholesterolsænkende mus, hvilket er mere end 50% versus mindre end 30%, hhv. Derudover aorta brud er hyppig (ca. 10 - 30%) i både normo- og hypercholesterolæmisk mus under Angll infusion. Infusion af Angll med en hastighed på 1.000 ng / kg / min i hypercholesterolæmiske mus, såsom LDL-receptor - / - mus fodret med en vestlig kost eller apolipoprotein (apoE) - / - mus fodret med en normal eller vestlig kost, har maksimal effekt på AAA udvikling 3,4,29. Denne infusionshastighed er optimal for en undersøgelse, hvor manipulere et gen af interesse i hypercholesterolæmisk mus forventes at reducere AAA. Hvis der forventes en manipulation i hypercholesterolæmisk mus at øge AAA, anbefales det at tilføre Angll med en hastighed på 500 ng / kg / min eller lavere 30. I modsætning til AAA, er der ingen demonstrated association mellem mandlige køn eller hyperkolesterolæmi og Angll-induceret TAA'er 25. Men på samme måde som AAA, hvis der forventes manipulation af et gen af interesse at øge TAA'er, anbefaler vi en lavere infusionshastighed end 1.000 ng / kg / min for Angll infusion.
Det er også vigtigt at vide, at forekomsten og sværhedsgraden af Angll-inducerede aortaaneurismer varierer mellem de enkelte mus og mellem studier. Hvis mus ikke udvikler aortaaneurismer, en potentiel mulighed er, at Angll måske ikke blevet leveret i mus. Til validering af en høj infusionshastighed på Angll, såsom 1.000 ng / kg / min, måling af blodtrykket anbefales før og under Angll infusion ved hjælp af en ikke-invasiv hale-manchet metode 31. Angll infusion med en hastighed på 1.000 ng / kg / min øger systoliske blodtryk hos mus. Også kan måles, plasma renin koncentrationerne i Angll infusion eller ved opsigelse, da Angll har en negativ feedback på rEnin sekretion. Derfor Angll infusion fører til reduktioner i plasma renin koncentrationer. Hvis en mus infunderet med Angll har ingen tilsyneladende aorta patologier, ingen forhøjelse af blodtrykket, og ingen fald i plasma-renin koncentration, ville det indikere, at Angll ikke er afgivet effektivt gennem den implanterede osmotiske minipumpe. Vi vil anbefale at fjerne denne mus fra undersøgelsen. Det er også vigtigt at bemærke, at nogle mus ikke udvikler aortaaneurismer trods øget systolisk blodtryk og nedsat plasma renin koncentrationer. Disse mus bør forblive i undersøgelsen.
Sammenfattende er Angll infusion opnås ved subkutan implantation hjælp osmotiske pumper til at inducere aortaaneurismer i mus. Denne metode giver Angll konstant ved en defineret hastighed for udpegede varigheder, der bruges til at studere både AAA og TAA'er.
Disclosures
Offentliggørelse af denne artikel er sponsoreret af Alzet.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Angiotensin II | Bachem | H-1705 | compound used to induce aortic aneurysms |
| Alzet Osmotic Pumps | DURECT Corporation | Alzet Model 2004 | feasible for 28-day infusion in mice weighed > 20 g |
| Saturated fat-enriched diet | Harlan Teklad | TD.88137 | 42% calories/calories to stimulate hypercholesterolemia in LDL receptor -/- mice |
References
- Pyo, R., et al. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1649 (2000).
- Chiou, A. C., Chiu, B., Pearce, W. H. Murine aortic aneurysm produced by periarterial application of calcium chloride. J Surg Res. 99 (2), 371-376 (2001).
- Daugherty, A., Cassis, L. Chronic angiotensin II infusion promotes atherogenesis in low density lipoprotein receptor -/- mice. Ann NY Acad Sci. 892 (1), 108-118 (1999).
- Daugherty, A., Manning, M. W., Cassis, L. A. Angiotensin II promotes atherosclerotic lesions and aneurysms in apolipoprotein E-deficient mice. J Clin Invest. 105 (11), 1605-1612 (2000).
- Deng, G. G., et al. Urokinase-type plasminogen activator plays a critical role in angiotensin II-induced abdominal aortic aneurysm. Circ Res. 92 (5), 510-517 (2003).
- King, V. L., Trivedi, D., Gitlin, J. M., Loftin, C. D. Selective cyclooxygenase-2 inhibition with celecoxib decreases angiotensin II-induced abdominal aortic aneurysm formation in mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 26 (5), 1137-1143 (2006).
- Uchida, H. A., Poduri, A., Subramanian, V., Cassis, L. A., Daugherty, A. Urokinase-type plasminogen activator deficiency in bone marrow-derived cells augments rupture of angiotensin II-induced abdominal aortic aneurysms. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 31 (12), 2845-2852 (2011).
- Wang, Y. X., et al. Angiotensin II increases urokinase-type plasminogen activator expression and induces aneurysm in the abdominal aorta of apolipoprotein E-deficient mice. Am J Pathol. 159 (4), 1455-1464 (2001).
- Bruemmer, D., et al. Angiotensin II-accelerated atherosclerosis and aneurysm formation is attenuated in osteopontin-deficient mice. J Clin Invest. 112 (9), 1318-1331 (2003).
- Gavrila, D., et al. Vitamin E inhibits abdominal aortic aneurysm formation in angiotensin II-infused apolipoprotein E-deficient mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 25 (8), 1671-1677 (2005).
- Wang, J., et al. IgE actions on CD4+ T cells, mast cells, and macrophages participate in the pathogenesis of experimental abdominal aortic aneurysms. EMBO Mol Med. 6 (7), 952-969 (2014).
- Yoshimura, K., et al. Regression of abdominal aortic aneurysm by inhibition of c-Jun N-terminal kinase. Nat Med. 11 (12), 1330-1338 (2005).
- Usui, F., et al. Inflammasome activation by mitochondrial oxidative stress in macrophages leads to the development of angiotensin II-induced aortic aneurysm. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 35 (1), 127-136 (2015).
- Mellak, S., et al. Angiotensin II mobilizes spleen monocytes to promote the development of abdominal aortic aneurysm in apoe-/- mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 35 (2), 378-388 (2015).
- Krishna, S. M., et al. Peptide antagonist of thrombospondin-1 promotes abdominal aortic aneurysm progression in the angiotensin II-infused apolipoprotein-E-deficient mouse. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 35 (2), 389-398 (2015).
- Norman, P. E., Curci, J. A. Understanding the effects of tobacco smoke on the pathogenesis of aortic aneurysm. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33 (7), 1473-1477 (2013).
- Daugherty, A., Powell, J. T. Recent highlights of ATVB: aneurysms. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 34 (4), 691-694 (2014).
- Liu, J., Daugherty, A., Lu, H. Angiotensin II and abdominal aortic aneurysms: an update. Curr Pharm Design. , (2015).
- Rateri, D. L., Howatt, D. A., Moorleghen, J. J., Charnigo, R., Cassis, L. A., Daugherty, A. Prolonged infusion of angiotensin II in apoE(-/-) mice promotes macrophage recruitment with continued expansion of abdominal aortic aneurysm. Am J Pathol. 179 (3), 1542-1548 (2011).
- Saraff, K., Babamusta, F., Cassis, L. A., Daugherty, A. Aortic dissection precedes formation of aneurysms and atherosclerosis in angiotensin II-infused, apolipoprotein E-deficient mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 23 (9), 1621-1626 (2003).
- Daugherty, A., Cassis, L. A., Lu, H. Complex pathologies of angiotensin II-induced abdominal aortic aneurysms. J Zhejiang Univ Sci B. 12 (8), 624-628 (2011).
- Daugherty, A., Rateri, D. L., Charo, I. F., Owens, A. P., Howatt, D. A., Cassis, L. A. Angiotensin II infusion promotes ascending aortic aneurysms: attenuation by CCR2 deficiency in apoE-/- mice. Clin Sci (Lond). 118 (11), 681-689 (2010).
- Rateri, D. L., et al. Endothelial cell-specific deficiency of Ang II type 1a receptors attenuates Ang II-induced ascending aortic aneurysms in LDL receptor-/- mice). Circ Res. 108 (5), 574-581 (2011).
- Rateri, D. L., et al. Depletion of endothelial or smooth muscle cell-specific angiotensin II type 1a receptors does not influence aortic aneurysms or atherosclerosis in LDL receptor deficient mice. PLoS One. 7 (12), 10-1371 (2012).
- Rateri, D. L., et al. Angiotensin II induces region-specific medial disruption during evolution of ascending aortic aneurysms. Am J Pathol. 184 (9), 2586-2595 (2014).
- Davis, F. M., et al. Smooth muscle cell deletion of low-density lipoprotein receptor-related protein 1 augments angiotensin II-induced superior mesenteric arterial and ascending aortic aneurysms. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 35 (1), 155-162 (2015).
- Daugherty, A., Rateri, D. Development of experimental designs for atherosclerosis studies in mice. Methods. 36 (2), 129-138 (2005).
- Henriques, T. A., Huang, J., D'Souza, S. S., Daugherty, A., Cassis, L. A. Orchidectomy, but not ovariectomy, regulates angiotensin II-induced vascular diseases in apolipoprotein E-deficient mice. Endocrinology. 145 (8), 3866-3872 (2004).
- Daugherty, A., Manning, M. W., Cassis, L. A. Antagonism of AT2 receptors augments angiotensin II-induced abdominal aortic aneurysms and atherosclerosis. Br J Pharmacol. 134 (4), 865-870 (2001).
- Wang, S., et al. Deficiency of receptor-associated protein attenuates angiotensin II-induced atherosclerosis in hypercholesterolemic mice without influencing abdominal aortic aneurysms. Atherosclerosis. 220 (2), 375-380 (2011).
- Daugherty, A., Rateri, D., Lu, H., Balakrishnan, A. Measuring blood pressure in mice using volume pressure recording, a tail-cuff method. J Vis Exp. (27), e1291 (2009).
