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Bioengineering

Construção de Fichas de hidrogel modular para micropadronadas Macro-escalado 3D Cellular Arquitetura

Published: January 11, 2016 doi: 10.3791/53475
Automatic Translation
1, 1, 1
1Department of Bio and Brain Engineering, Korea Advanced Institute of Science and Technology (KAIST)

Abstract

Os hidrogéis podem ser modelado na micro-escala utilizando tecnologias de microfluidos ou micropatterning para proporcionar uma geometria de tecido vivo -like (3D) tridimensional. As construções resultantes celulares baseados em hidrogel 3D foram introduzidos como uma alternativa para as experiências com animais para estudos biológicos avançados, os ensaios farmacológicos e as aplicações de transplantes de órgãos. Embora as partículas e fibras à base de hidrogel pode ser facilmente fabricado, é difícil para manipulá-los para a reconstrução de tecidos. Neste vídeo, nós descrevemos um método de fabrico de folhas de hidrogel de alginato micropatterned, juntamente com a sua montagem para formar um sistema de cultura celular 3D macro-escala com um microambiente celular controlada. Utilizando uma forma de névoa do agente gelificante de cálcio, folhas finas de hidrogel são facilmente gerado com uma espessura na gama de 100 - 200 um, e com micropadrões precisas. As células podem ser cultivadas, em seguida, com a orientação geométrica das folhas de hidrogel emcondições independentes. Além disso, as folhas de hidrogel pode ser prontamente manipulada utilizando uma micropipeta com uma ponta de corte final, e podem ser montados em estruturas de camadas múltiplas por empilhá-los utilizando um polidimetilsiloxano modelado (PDMS) moldura. Estas folhas de hidrogel modular, que pode ser fabricado usando um processo fácil, têm potenciais aplicações de ensaios in vitro e estudos biológicos de drogas, incluindo estudos funcionais de micro- e macro-estrutura e a reconstrução de tecidos.

Introduction

Os hidrogéis são particularmente promissores biomateriais, e espera-se ser importante na biologia de base, os ensaios farmacológicos e medicina. 1 Biofabrication celulares de construções à base de hidrogel foi sugerido para reduzir o uso de experiências com animais, 2,3 substituir tecidos transplantáveis, 4 e melhorar ensaios baseados em células. 5,6-di-hidro- (contendo água) materiais viscoelásticos (geles) permitir que um grande número de células a ser encapsulado e mantida em uma estrutura de andaime para controlar o microambiente celular 3D. Em combinação com a orientação de tecnologias de microfluidos ou micropatterning, a geometria das construções de hidrogel pode ser controlada com precisão à escala celular. Até à data, uma variedade de formas, incluindo hidrogéis de partículas, 7 - 9, fibras 10 - 12 folhas, e 13 - 15 foram utilizados como unidades de construção na ascendente aprodores para a fabricação de macro-escala arquitecturas multicelulares.

Ambas as partículas e fibras à base de hidrogel ter sido facilmente e rapidamente fabricados para aplicações como ambientes celulares micro-escala, com controles fluídicos usando dispositivos microfluídicos. No entanto, como as unidades básicas de tecidos artificiais, seria complicado para reorganizá-las e para ampliar seu volume de construções de macro-escala. 16 É mais difícil de alcançar construções macro-dimensionado do que produzir módulos básicos de tamanho mícron-. Unidades do tipo folha de construções à base de hidrogel podem ser utilizadas para aumentar o volume de andaimes por meio de um processo de montagem simples. Consequentemente, as camadas de folhas empilhadas hidrogel proporcionar não só um aumento volumétrico, mas também uma extensão geométrica no espaço 3D.

Temos anteriormente relatado um método de fabrico de folhas de hidrogel micropatterned, 13 - 15, juntamente com a sua montagem em multi-layarquiteturas celulares recer. A técnica permite micropatterning complexo e design modular de construções de celulares através de um processo de empilhamento de estruturas multi-camadas. Através do fabrico de folhas de hidrogel modulares empilhados, os quais são micropadronadas, um sistema de cultura de células em 3D com um microambiente celular de macro-escala controlada pode ser realizada. Este protocolo de vídeo descreve um método de fabrico simples mas eficiente que pode ser utilizado para a construção de folhas de hidrogel modulares, com base na linha de células de carcinoma de fígado humano (HepG2). Nós demonstramos aqui simples manipulação dessas folhas hidrogel modulares padronizados, e sua montagem em uma estrutura multi-camadas.

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Protocol

1. Preparação da micropadronadas Moldes e hidrogéis

  1. Produzir os padrões de micro-escala desejada usando SU-8 fotorresistente na superfície de uma pastilha de silício através de um de dois passos 15,17 fotolitografia técnica padrão para a fundição de moldes de PDMS. O exemplo ilustrado utiliza um padrão de malha lóbulo semelhante fígado (Figura 1).
  2. Pesar PDMS e uma solução de agente de cura com uma proporção de 1: 5 (isto é, 12,5 g de PDMS e 2,5 g de agente de cura).
  3. Misturar a 15 g da solução exaustivamente, desgaseificar as bolhas numa câmara de vácuo, e depois espalhar a solução misturada sobre uma superfície micropadronadas da bolacha de silício uniformemente dentro de um prato de moldagem de folha.
  4. Coloque a bolacha de silício sobre uma placa aquecida a 65 ° C durante 90 minutos sobre uma superfície plana para curar o PDMS.
  5. Remover o PDMS curado a partir da placa de moldagem e a bolacha de silício.
  6. Corte as bordas do PDMS e colocá-lo sobre uma placa de Petri de 100 mm de diâmetro comDo lado de cima micropadronadas.
  7. Lavar o PDMS curados micropadronadas na placa de petri usando etanol a 70% e água destilada para a esterilização primário. Em seguida, secá-las completamente durante 10 min numa estufa a 65 ° C.
  8. Dissolve-se e mistura-O / N 3 g de um agente tensioactivo não iónico em pó em 100 ml de água destilada, a criação de um 3% (w / v) de solução de revestimento.
  9. Colocar os moldes PDMS micropatterned em um aspirador de plasma e limpá-los durante 1 min (85 W, 0,73 mbar) para criar uma superfície hidrófila, a fim de facilitar a adição de líquidos aquosos. Em seguida, o revestimento da superfície do PDMS com a solução de 100 ml de agente tensioactivo, pelo menos, 3 h (ORO / N) utilizando um balancim laboratório.
  10. Lava-se a solução de agente tensioactivo a partir dos moldes de PDMS e secá-las completamente num forno a 65 ° C durante 10 min. Em seguida, cada um dos moldes micropadronadas esterilizar por exposição a radiação ultravioleta (UV) ao longo de 30 min.

2. Preparar a suspensão de células num hidrogel Precursor

  1. Parapreparar hidrogel precursor, dissolver 0,1 g de alginato de sódio em pó em 10 ml de solução salina tamponada com fosfato (PBS), a criação de um 1% (w / v) de alginato de precursor. Para dissolver completamente o pó, incubar e misturá-los O / N.
  2. Filtrar a solução através de um filtro de 0,22 um ligado a uma seringa de 1 ml.
  3. Cultura das células HepG2 em meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) suplementado com 10% de soro fetal bovino e 1% de penicilina-estreptomicina em um prato de cultura de tecidos convencional até 70% - 80% de confluência numa incubadora humidificada com 5% de CO2 a 37 ° C .
  4. Lavar as células uma vez utilizando PBS, e em seguida, trypsinize-los por adição de 1 ml de 0,05% de tripsina-EDTA durante 4 minutos numa atmosfera de 5% de CO 2 a 37 incubadora humidificada ° C. Centrifugar as células colhidas a partir da placa de cultura a 250 xg durante 3 min e ressuspender utilizando 1 mL de PBS, após a remoção do sobrenadante.
  5. Contar o número de células individuais distribuídos em PBS utilizando uma célula automatizadobalcão.
  6. Após a centrifugação a 250 xg durante 3 minutos e remoção do PBS, adicionar 1 ml de 1% (w / v) da solução de alginato de sódio para o sedimento celular remanescente e misturá-las suavemente utilizando pipetagem. A densidade de sementeira final das células deve ser de 5 x 10 6 - 10 7 células / ml. Incubar a suspensão de células / hidrogel numa incubadora humidificada 5% CO 2 a 37 ° C.

3. Carregamento e Cross-linking de celular / Hidrogel Suspensão

  1. Dissolve-se 1,47 g de cloreto de cálcio desidratado em 100 ml de ddH2O para produzir um reagente de ligação cruzada (isto é, 100 mM CaCl2 · 2H 2 O em ddH2O).
  2. Lave o interior de um umidificador com transdutor ultra-sônico usando 70% de etanol, e encha-o com 200 ml de reagente de reticulação. O umidificador é de 110 mm de largura, 300 mm de comprimento e 170 mm de profundidade (ou seja, 110 mm x 300 mm x 170 mm (W x H x D)).
  3. Coloque os PDMS micropatternedmoldes em um aspirador de plasma e limpá-los durante 1 min a 85 W para criar uma superfície hidrófila.
  4. Firmemente carregar 7,2 ul da suspensão de células / hidrogel bem misturado na borda do micropadrão no molde. O exemplo ilustrado utiliza um padrão de malha lóbulo semelhante fígado (Figura 1). O volume da suspensão depende do padrão topográfico.
  5. Para conseguir a gelificação da suspensão de células / hidrogel, ligar o humidificador e verificar que o humidificador produz uma névoa do reagente de reticulação. Pulverizar o reagente de ligação cruzada para o precursor de hidrogel durante 5 min, cobrindo a superfície topográfica dos moldes PDMS no intervalo de 5 cm.
    Nota: distâncias mais longas e mais curtas do que 5 cm poderia provocar a gelificação incompleta e desigual, respectivamente. Assegure-se que o humidificador tem uma taxa de pulverização de 250 ml / h, produzindo 20 ml de névoa do reagente de reticulação em 5 min.
  6. Após o processo de cross-linking, desligue o humidificador e encher o mo PDMSLDS com PBS.

4. Transporte de folhas soltas Modular de hidrogel

  1. Retire cada folha hidrogel endurecido a partir dos moldes micropatterned via pipetando PBS suavemente em torno da folha de hidrogel com uma pipeta de ponta de 200 mL.
  2. Pegue cada folha hidrogel flutuante usando um 1000 ul final da ponteira de corte final. Cada malha folha hidrogel lóbulo-como fígado tem dimensões de 8 mm x 8,7 milímetros, e ser 100-200 mm de espessura.
  3. Transferir uma única camada de folha de hidrogel em 1 ml de DMEM numa placa de 12 poços, e a cultura das células in vitro, de uma forma flutuante utilizando o hidrogel de construir como um componente de unidade na placa de 12 poços durante uma semana num 5 % de CO 2 humidificado incubadora a 37 ° C. Trocar o meio de cultura todos os dias.

5. Fichas de hidrogel Assembléia de multi-camadas

  1. Repita os passos 1.1 a 1.5 para produzir uma armação de PDMS com as dimensões de 18 mm x 18 mm x 4 mm (W xH x D), e que contém estruturas de 170 mícrons de alta pilar na superfície inferior. Use 42 g da mistura de PDMS e agente de cura, com a mesma proporção que no passo 1.2. Coloque um molde de policarbonato especializada no wafer de silício para o quadro de PDMS para criar um quadro interior com dimensões de 8 milímetros x 9 mm x 2 mm (W x H x D).
  2. Esteriliza-se o quadro de PDMS e 180 mícrons de poros papéis de filtro de nylon submerso em água destilada e pinças numa autoclave durante 15 min a 121 ° C.
  3. Colocar o PDMS quadro esterilizado para um quarto de um pedaço de papel de filtro de nylon (com um diâmetro de 5 cm) de um 60-mm de diâmetro prato de petri.
  4. Transferir uma folha de hidrogel modular para o interior da armação de PDMS usando uma pipeta de ponta de 1.000 ul de corte final. As folhas de hidrogel utilizados para a montagem deve ser cultivadas por pelo menos um dia depois de terem sido fabricados.
  5. Alinhe a borda de cada folha hidrogel modular com o quadro PDMS usando um vazio de 200 ul ponteira.
  6. Repita os passos 5.4 e 5.5 usando folhas de hidrogel modulares para formar uma pilha de 4 - 6 camadas.
  7. Remover o meio de cultura por ele flui para fora através das estruturas de pilar na parte inferior da armação de PDMS. Em seguida, adicionar 2 ml de solução de alginato a 2% (w / v) a um canto da construção de multi-camada.
  8. Pulverizar uma névoa do reagente de reticulação durante 30 seg para a construção de multi-camadas para ligar as pontas de cada uma das camadas com as de outro. Utilizar 2 ml de névoa de o reagente de ligação cruzada (a uma taxa de pulverização de 250 ml / hr).
  9. Lavar a construção de multi-camadas suavemente com 400 mL DMEM e retire a armação PDMS usando uma pinça.
  10. Retire a construção de multi-camadas de papel de filtro limpando suavemente com uma célula levantador após a adição de 4 ml de DMEM.
  11. Transferir a multi-camadas para construção de uma placa de 6 cavidades contendo 3 mL de DMEM utilizando papel de filtro, e as células de cultura in vitro de uma forma flutuante, com o hidrogel como construirum andaime celular multi-escala na placa de 6 poços durante uma semana numa incubadora humidificada 5% CO 2 a 37 ° C. Trocar o meio de cultura todos os dias.

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Representative Results

Nós descrevemos a fabricação e manipulação de autônomo folhas hidrogel celulares. Como mostrado na Figura 1, nos moldes fabricados micropatterned PDMS, e hidrogel contendo as células foi carregada na superfície hidrofílica destas moldes e reticulada usando um humidificador para gerar uma névoa de aerossol de agente gelificante. Após libertação dos moldes, as células HepG2 foram cultivadas em folhas independentes de hidrogel com diferentes padrões (Figura 2). Assim, as folhas finas de hidrogel proporcionado um ambiente de cultura 3D. Além disso, as folhas de hidrogel modulares podem ser montados por camadas das folhas utilizando uma micropipeta com uma ponta de corte final, e utilizando uma moldura de PDMS, o que permite a cultura de células 3D macro-escala (Figura 3).

figura 1
Figura 1. Fluxo Chart Mostrando a fabricação de uma folha de hidrogel e Fichas de hidrogel Multi-camada. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 2
Figura 2. Independente 3D Cultura celular em diversas folhas de hidrogel. O método de fabricação de pulverização reagente de ligação cruzada activado modelação exacta de hidrogel de alginato na micro-escala. Além disso, as folhas de hidrogel fabricadas poderia ser colhida a partir do molde e facilmente manipulado em condições independentes. As células HepG2 foram cultivadas em modelado e uma folha plana de hidrogel (A), as folhas de hidrogel com pilares hexagonais (B), (C) de malha, malha-lóbulo do fígado como (D), uma matriz de furos (E), e multiple microcomb-like microfibras (F). As barras de escala são os seguintes:. 500 mm (A, D, F), 100 mm (B, C), e 2 mm (E) Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 3
Figura 3. Assembleia da micropatterned Folhas de hidrogel para Macro escala celulares Construções. Vários tipos de folha de hidrogel pode ser montado através de empilhamento camada por camada, com o alinhamento, incluindo a montagem de cinco folhas de hidrogel contendo células HepG2 coradas com fluorescência verde e células NIH3T3 coradas com fluorescência vermelha (A). Um conjunto de folhas de hidrogel micropatterned com estrutura gasoduto expandido (B) proporcionou maior viabilidade celular thaN o de folhas de hidrogel não estampados (C) após 7 dias. A viabilidade foi avaliada por coloração das células HepG2 com calceina-AM (células vivas mostrados como verde) e de etídio homodímero-1 (células mortas mostrados como vermelho). Barras de escala:. 500 mm (A) e 200 mm (B, C) ​​Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

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Discussion

Este protocolo proporciona um método simples de fabricar folhas de hidrogel modulares, e montá-los para formar suportes celulares 3D.

Para construir estruturas claras de alginato modelado num curto espaço de tempo, que deverá identificar um processo de ligação cruzada que pode criar estruturas suficientemente rígida para manter os micropadrões complexas do molde, bem como a manter a viabilidade celular e metabolismo. Desenvolvemos um processo de reticulação, incluindo uma transição sol-gel, para pulverizar um agente de reticulação usando um humidificador, sob a forma de uma névoa. Sem este processo de reticulação, os padrões em micro-escala não pôde ser gerado sob a forma de um hidrogel fina construir com a profundidade limitada difusora (100 - 200 um), que tem elevada permeabilidade difusiva aos metabolitos e nutrientes. Além disso, em comparação com os métodos baseados em difusão existentes, que exigem 30 - 60 min, 18 - 20 a TI de reticulaçãome foi relativamente curto (3-5 min).

Além disso, também foi difícil de manipular as folhas finas de hidrogel, que foram mecanicamente estável apenas em um meio líquido. Como mostrado na Figura 1, a estrutura fina foi hidrogel simplesmente e de forma estável tratadas e manipuladas usando uma ponta convencional de corte final para transfercia entre diferentes condições de cultura. Usando técnicas de geração e manipulação, podemos fornecer não apenas uma folha de camada única de uma maneira flutuante para aplicações potenciais em ensaios de medicamentos, mas estruturas multicamadas também empilhados, com aplicações potenciais como andaimes para construções de tecido-like.

Arquitecturas celulares multi-camadas pode ser gerado por empilhamento das folhas de hidrogel de camada única modulares (Figura 3A). Cada folha de hidrogel modular pode conter diferentes tipos de células, e podem ser expostos a diferentes condições de cultura. Estas construções de multi-camada podem então ser selectivamente assesangrou. No entanto, folhas de hidrogel simplesmente empilhamento pode levar a necrose celular no interior da estrutura montada, quando a profundidade total excede a profundidade limitada por difusão (Figura 3C). Para superar este problema, seria necessário alinhar padrões Micromesh, tais como malhas lóbulo-como o fígado, quando as folhas de hidrogel de multi-camada são montados. Por conseguinte, requerem um quadro de PDMS com o mesmo padrão que a fronteira interior da folha de hidrogel para alinhar as folhas empilhadas de hidrogel. Assim, alinhados micropadrões buraco-de matriz nas folhas de hidrogel de malha montados pode ser utilizado para formar estruturas expandidas de condutas, facilitando o transporte de nutrientes mais eficiente para melhorar a viabilidade celular (Figura 3B).

Uma limitação desta técnica é a ausência de interacções célula-matriz do hidrogel de alginato. Alginato não pode fornecer ligantes de adesão celular para in vivo -como interações célula-matriz; 21 no entanto, ele faz foraer efeitos mecânicos e geométricos como um encapsulando células andaime 3D com interacções célula-célula. Para as células primárias e as células-tronco, o alginato pode ser utilizado após a modificação com peptídeos contendo RGD-21, ou em combinação com colagénio ou gelatina. 14,18 Outra limitação é que, uma vez que as folhas de hidrogel incorporado-celulares são fabricados com baixa densidade celular inferior 5 x 10 6 células / ml, a construção da estrutura multi-camadas pode causar anexos fracas entre as folhas de hidrogel porque apenas a borda da estrutura é fixo através da utilização de alginato adicional. No entanto, as camadas podem ser empilhados de forma compacta, como uma única estrutura de andaime através de drenagem por baixo do chassis de PDMS. Além disso, uma maior densidade de células das folhas de hidrogel pode proliferar na superfície bem como dentro da camada depois de cultura de um dia, o que contribuiria anexos entre as camadas, como mostrado na Figura 3A.

A fabrica folha de hidrogelção e à manipulação técnica descrita aqui pode ser adaptado para os sistemas de cultura in vitro e modelos celulares de tecido semelhante para proporcionar um microambiente in vivo -como para aplicações, incluindo ensaios celulares e órgãos artificiais de engenharia. Esta técnica pode ser aplicada a baseados em células Os ensaios biológicos e estudos de drogas que requerem geometricamente diferente micro e macro-ambientes 3D celular que incorporam diferentes tipos de células ou de hidrogel.

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit Dow Corning Corporation 000000000001064291
Pluronic F-127 Sigma-Aldrich P2443 Powdered nonionic surfactant 
Alginic acid sodium salt, low viscosity Alfa Aesar B25266
Calcium chloride dihydrate Sigma-Aldrich C7902
Ultrasonic humidifier MediHeim MH-2800 Modified equipment, Maximum sprayed rate: 250 ml/hr
Nylon net filter hydrofilic, 180 μm EMD Millipore NY8H04700
Polycarbonate mold Customized mold for fabrication of a PDMS frame pattern

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References

  1. Hoffman, A. S. Hydrogels for biomedical applications. Adv. Drug Deliv. Rev. 64 (Supplement), 18-23 (2012).
  2. Lan, S., Starly, B. Alginate based 3D hydrogels as an in vitro co-culture model platform for the toxicity screening of new chemical entities. Toxicol. Appl. Pharm. 256 (1), 62-72 (2011).
  3. Szot, C. S., Buchanan, C. F., Freeman, J. W., Rylander, M. N. 3D in vitro bioengineered tumors based on collagen I hydrogels. Biomaterials. 32 (31), 7905-7912 (2011).
  4. Lim, F., Sun, A. M. Microencapsulated islets as bioartificial endocrine pancreas. Science. 210 (4472), 908-910 (1980).
  5. Koh, W. G., Itle, L. J., Pishko, M. V. Molding of hydrogel microstructures to create multiphenotype cell microarrays. Anal. Chem. 75 (21), 5783-5789 (2003).
  6. Xu, Y., et al. A Microfluidic Hydrogel Capable of Cell Preservation without Perfusion Culture under Cell-Based Assay Conditions. Adv Mater. 22 (28), 3017-3021 (2010).
  7. Um, E., Lee, D. S., Pyo, H. S., Park, J. K. Continuous generation of hydrogel beads and encapsulation of biological materials using a microfluidic droplet-merging channel. Microfluid. Nanofluid. 5 (4), 541-549 (2008).
  8. Lee, D. H., Lee, W., E, U. m, Park, J. K. Microbridge structures for uniform interval control of flowing droplets in microfluidic networks. Biomicrofluidics. 5 (3), 034117 (2011).
  9. Lee, D. H., Bae , C. Y., Han, J. I., Park, J. K. In situ analysis of heterogeneity in the lipid content of single green microalgae in alginate hydrogel microcapsules. Anal. Chem. 85 (18), 8749-8756 (2013).
  10. Yamada, M., Sugaya, S., Naganuma, Y., Seki, M. Microfluidic synthesis of chemically and physically anisotropic hydrogel microfibers for guided cell growth and networking. Soft Matter. 8 (11), 3122-3130 (2012).
  11. Yamada, M., et al. Controlled formation of heterotypic hepatic micro-organoids in anisotropic hydrogel microfibers for long-term preservation of liver-specific functions. Biomaterials. 33 (33), 8304-8315 (2012).
  12. Onoe, H., et al. Metre-long cell-laden microfibres exhibit tissue morphologies and functions. Nat. Mater. 12 (6), 584-590 (2013).
  13. Lee, W., Son, J., Yoo, S. S., Park, J. K. Facile and Biocompatible Fabrication of Chemically Sol−Gel Transitional Hydrogel Free-Standing Microarchitectures. 12 (1), 14-18 (2011).
  14. Lee, W., et al. Cellular hydrogel biopaper for patterned 3D cell culture and modular tissue reconstruction. Adv. Healthcare Mater. 1 (5), 635-639 (2012).
  15. Bae, C. Y., Min, M. K., Kim, H., Park, J. K. Geometric effect of the hydrogel grid structure on in vitro formation of homogeneous MIN6 cell clusters. Lab Chip. 14 (13), 2183-2190 (2014).
  16. Bruzewicz, D. A., McGuigan, A. P., Whitesides, G. M. Fabrication of a modular tissue construct in a microfluidic chip. Lab Chip. 8 (5), 663-671 (2008).
  17. Choi, S., Park, J. K. Two-step photolithography to fabricate multilevel microchannels. Biomicrofluidics. 4 (4), 046503 (2010).
  18. Lee, B. R., et al. In situ formation and collagen-alginate composite encapsulation of pancreatic islet spheroids. Biomaterials. 33 (3), 837-845 (2012).
  19. Cabodi, M., Choi, N. W., Gleghorn, J. P., Lee, C. S., Bonassar, L. J., Stroock, A. D. A microfluidic biomaterial. J. Am. Chem. Soc. 127 (40), 13788-13789 (2005).
  20. Choi, N. W., Cabodi, M., Held, B., Gleghorn, J. P., Bonassar, L. J., Stroock, A. D. Microfluidic scaffolds for tissue engineering. Nat. Mater. 6 (11), 908-915 (2007).
  21. Rowley, J. A., Madlambayan, G., Mooney, D. J. Alginate hydrogels as synthetic extracellular matrix materials. Biomaterials. 20 (1), 45-53 (1999).

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Son, J., Bae, C. Y., Park, J. K. Construction of Modular Hydrogel Sheets for Micropatterned Macro-scaled 3D Cellular Architecture. J. Vis. Exp. (107), e53475, doi:10.3791/53475 (2016).

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