Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Bioengineering

Синтез наночастиц золота Интегрированный фотография проблематики липосом и измерении их микропузырьков кавитации при импульсном лазерном возбуждении

Published: February 24, 2016 doi: 10.3791/53619

Summary

Этот протокол описывает простой способ подготовки к золотой наночастицы интегрированной фотоальбомы проблематику липосом с коммерчески доступных материалов. Она также показывает, как измерить микропузырьков процесс кавитации синтезированных липосом при лечении импульсным лазером.

Introduction

Возможность вызвать высвобождение лекарства с помощью внешних стимулов является привлекательным способом для доставки лекарств в пространственно-, temporal- и лекарственных управлением мод с максимальным специфичности и минимальными побочными эффектами. Среди широкого спектра экзогенных раздражителей проблематику систем (света, магнитное поле, ультразвук, СВЧ-излучение), легкие инициируется платформы являются привлекательными из-за их не-инвазивности, простота и адаптивности в клиниках. 1 Обширные исследования в последнее десятилетие предоставил ряд технологий платформы, такие как в ближней инфракрасной области освещенности ответственного золота (Au) наноклетки покрыты смарт полимеров, 2 фото-лабильным, полимерные наночастицы (NPS), конъюгированные с наркотиками, 3 и самоорганизующихся porphysome nanovesicles. 4 Однако эти технологии все еще находятся на доклинических стадиях развития, и требуют четкого понимания и оптимизации параметров, участвующих в процессе инициирования и продолжениепрокатки высвобождение лекарственного средства.

Один из самых простых и легкодоступных способов получения такой системы состоит в интеграции Au NPS с термически чувствительных липосом 5,6, оба из которых широко доступны на рынке и широко исследованных в доклинических и клинических испытаний даже. Несмотря на ограничение активации глубокие ткани из Au наночастиц при их плазмонного волны, по сравнению с ближней инфракрасной активированные наноструктур Au (например, наноклетки), эта система по-прежнему имеет большие перспективы при использовании в малых животных или для местной доставки в организме человека. 7 Есть некоторые ранние усилия в объединение Au NPS с липосомами для светлой срабатывает выпуска. 8-11 Хотя большинство из них сосредоточиться на новизне материалов, проблемы доступности и масштабируемости необходимо решать. Кроме того, отчеты о механизмах высвобождения, использующих эти наноносителей все еще ограничены.

В данном случае изготовление фото-отзывчивымлипосомы, одновременно с грузом наркотиков и гидрофильных Au наночастиц была описана. Кальцеин используется в качестве модельного соединения для оценки эффективности инкапсуляции и профиль высвобождения системы. Кроме того, в этой системе, свет, поглощенный Au наночастиц рассеивает в окружающую микросреду в виде тепла, что приводит к увеличению локальной температуры. Воздушные микропузырьки образуются в процессе лазерного нагрева и вызвать механическое разрушение липосом (рисунок 1). Механизм микропузырьков кавитации подтверждается измерениями гидрофонов.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. Подготовка

  1. Чистые 100 мл с круглым дном колбы с использованием царской водки (1 часть концентрированной азотной кислоты (HNO 3), и 3 частей концентрированной соляной кислоты (HCl)) и мыть колбы дистиллированной водой. Автоклав колб и высушить их в печи с горячим воздухом при температуре 100 ° С в течение 15 мин. Оберните и не хранить стерильные колбы до использования.
  2. Стерилизовать ручной набор мини-экструдер с использованием 70% этанола.
  3. Включите роторном испарителе и установить температуру горячей водяной бане и градирни при 37 ° С и 4 ° С соответственно.
  4. Подготовьте 60 мм кальцеиновыми маточного раствора путем растворения 374 мг кальцеина в 10 мл 0,1 мМ фосфатным буферным раствором (PBS) (рН 7,4). Доводят рН до 7,4 с помощью 1 М раствора гидроксида натрия (NaOH).

2. Синтез липосом

  1. Удалить липиды (1,2-Dipalmitoyl- SN глицеро-3-фосфохолин (ДПФХ), 1-пальмитоил-2-гидрокси-SN глицеро-3-phosphochoЛиния (MPPC) и 1, 2-distearoyl- SN глицеро-3-phosphoethanol-аминов N - [карбокси (полиэтиленгликоль) -2000] (соль аммония) (DSPE-PEG2000)) из морозильника (-20 ° С) и оттаивать их до комнатной температуры.
  2. Взвешивание 15,9 мг ДПФХ, 1,3 мг MPPC и 2,8 мг DSPE-PEG2000. Растворите их вместе в 2 мл хлороформа.
  3. Передача раствора хлороформа к стерильной круглодонной колбе и испарения растворителя с использованием роторного испарителя при пониженном давлении, чтобы сформировать тонкую, сухую липидный слой.
  4. Гидрат липидный слой при 45 ° С с 2 мл водного раствора в течение 30 мин, содержащей 1,95 мл 60 мМ кальцеиновыми полученного на стадии 1.4, и 50 мкл Au NPS (3,36 × 10 16 частиц / мл).
  5. Предварительно нагреть нагревательный блок до 45 ° С. Поместите фильтр поликарбонатную мембрану 200 нм между фильтрующим опор и собрать множество мини-экструдера. Проверьте потенциальную утечку с дистиллированной водой.
  6. Заполните один из шприцов 1 мл раствора липосом с шага 2.4 и extruде образца пропусканием раствора к шприцу на другом конце сборки мини-экструдере. Повторите 11 раз.
  7. Запуск синтезированные липосом через колонку обессоливания PD-10 для удаления свободных Au NPS, липиды и кальцеина помощью PBS в качестве элюента соответствии с протоколом производителя.
  8. Хранить образцы в стерильные пробирки при температуре 4 ° С и используют в течение 2 дней.

3. Кальцеин Освобождение от липосом с Кондиционер

  1. Рассчитать липидный молярность раствора путем сложения molarities ДПФХ, MPPC и ДСФЭ-PEG2000 в шаге 2.2. Развести липосома маточного раствора до 5 мм концентрации липидов с использованием 0,1 мМ PBS буфера (рН 7,4). Передача образцов в центрифужную пробирку (2 мл).
  2. Поместите пробирку в горячую водяную баню, и повышать температуру постепенно от 25 до 70 ° C. Повышение температуры со скоростью 1 ° С / мин здесь.
  3. Собирают аликвот (10 мкл) при различных температурных точек (27, 32, 37, 39, 41,43, 45, 52, 57, 62, 67 и 70 ° С).
  4. Добавить 10 мкл 2% Triton X-100 до 2 мл аликвоты раствора липосомальной переварить липосом в течение 10 мин при комнатной температуре и для достижения полного освобождения кальцеина.
  5. Передача 200 мкл раствора липосомальной в каждую лунку в 96-луночный микропланшет и измеряют интенсивность флуоресценции собранных образцов с использованием ридера флуоресценции микропланшетов. Возбуждения и излучения длин волн кальцеина являются 480 и 515 нм соответственно.
  6. Принимая интенсивность флуоресценции Тритон Х-100, обработанных образцов за 100% выпуска, вычислить процент высвобожденного кальцеина в каждый момент времени, используя формулу:
    Формула 1
    Ft является интенсивность флуоресценции раствора в данной точке времени. F я и F х нормированные начальные и конечные интенсивности флуоресценции раствора соответственно.

4. Кальцеин Reарендовать у липосом с импульсным лазером

  1. Передача 100 мкл раствора липосом в кварцевую кювету и поместите его в держатель кювет. Используйте импульсный Nd: YAG лазер с длительностью импульса 6 нс при 532 нм в качестве источника света. Используйте следующую параметров лазера - Частота повторения: 1 Гц; Плотность Лазерная энергия: 1 мДж / см 2; Диаметр луча: 0,5 мм.
  2. Руководство коллимированный лазерный луч через кювету таким образом, что свет проходит через раствор липосом и собирать аликвот после различных импульсов.
  3. Добавить 10 мкл 2% Triton X-100 до 2 мл аликвоты раствора липосомальной переварить липосом в течение 10 мин при комнатной температуре и для достижения полного освобождения кальцеина.
  4. Учитывая кальцеина чувствителен к свету и может быть беленой течение лазерного эксперимента, предварительно измерить отбеливающий эффект импульсного лазера на кальцеиновой раствора для нормализации данных от выпуска липосом.
    1. В частности, выставить кальцеина решение (60 мм) до импульсного лазерного Wiй частоте 1 Гц в течение различного количества импульсов (0, 25, 50 и 100). Измерить интенсивность флуоресценции кальцеиновыми с возбуждения и излучения длиной волны 480 и 515 нм соответственно, до и после лазерного воздействия.
    2. Рассчитать количество отбеливания (интенсивность флуоресценции кальцеина перед интенсивности лазерного воздействия / флуоресценции кальцеина после определенного числа импульсов). Используйте этот фактор для нормализации значений, полученных из образцов липосом путем умножения интенсивности флуоресценции липосом с коэффициентом.
  5. Измерить интенсивность флуоресценции отобранной пробы с помощью устройства чтения флуоресценции микропланшетов при возбуждения и излучения длин волн при 480 и 515 нм соответственно.
  6. Принимая интенсивность флуоресценции Тритон Х-100, обработанных образцов за 100% выпуска, вычислить процент высвобожденного кальцеина на каждом номера импульса, используя формулу:
    Формула 1
    я и F х нормированные начальные и конечные интенсивности флуоресценции раствора соответственно.

5. Измерение импульсов давления

  1. Поместите 100 мкл образца на предметное стекло и установить фокус лазера на образец.
  2. Погрузитесь иглы гидрофон (диаметр 1 мм и 450 чувствительность нВ / Па) в растворе.
    Внимание: Гидрофон не должен быть освещен светом лазера, чтобы избежать повреждения.
  3. Облучать образец с импульсным лазером с различным числом импульсов (0-100) и энергии импульса (20-160 мкДж / импульс).
  4. Запись сигналов давления использовании цифрового осциллографа.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Липосомы получали при помощи обычного способа тонкая гидратации пленки с DPPC, MPPC и ДСФЭ-PEG2000 в молярном соотношении 86: 10: 4 или 7,95: 0,65:. 1,39 мг / мл 12 Размер Au наночастиц является критическим для определения свет нагреть эффективность преобразования в ходе следующего эксперимента возбуждения лазера. Меньший размер Au наночастиц, тем выше эффективность трансдукции. Были выбраны 13 Так 5 нм Au наночастицы, наименьшее образцы от поставщика для инкапсуляции. Во время синтеза, увлажняющий среду, содержащую Au NPS и кальцеин был добавлен для создания мульти-пластинчатые везикулы, которые затем были подвержены размера экструзии и гель-фильтрационной хроматографии для удаления свободных Au АПЛ и кальцеина.

Кальцеин представляет собой гидрофильную флуоресцентный краситель инкапсулирован в водном ядре липосом при концентрации 60 мМ. При таких высоких концентрациях, флуоресценция грalcein самостоятельно утоляет. Однако кальцеин разбавили как он будет выпущен из липосом, ведущей к флуоресценции вновь получить, указывающий срабатывает высвобождение лекарственного средства. 14 Основываясь на этом свойстве кальцеиновыми липосом разбавляли до 5 мМ и отклик системы липосомальной к изменению температуры был наблюдаемый. Как указано на фиг.2A, независимо от наличия Au наночастиц, липосомы были почти нетронутыми в физиологической температуре (т.е. 37 ° C) с процентом утечки менее 10%. Однако, когда температура была повышена до 42 ° C (чуть выше температуры перехода липидов), 60% -80% от инкапсулированного кальцеина высвобождается из липосом в течение 2 мин. Существенной разницы в процентах высвобождения не наблюдается в липосомы с и без Au наночастиц, когда расцепитель срабатывает с использованием тепла. Это связано с температурой фазового перехода системы. Кроме того, быстрый и эффективный выпуск обусловлен Пресесть 10% MPPC, который усиливает проницаемость липосом бислой при температуре перехода.

Далее, освобождение кальцеин липосом при лазерном облучении исследовали. Раствор липосомальный было принято в кварцевую кювету, которую помещали в держатель кювет. 532 нм Nd: YAG импульсный лазер с длительностью импульса 6 нс и мгновенной плотности мощности 166.67 кВт / см 2 фокусировалось на решении липосомальной. Аликвоты образцов были собраны в разных количествах импульсных (0, 25, 50 и 100), в котором частота импульсов была фиксированной частотой 1 Гц. Образцы немедленно перенос т в микроцентрифужных трубки и помещают в баню со льдом. Это делается для предотвращения дальнейшего высвобождения кальцеина. Лазер выключен во время сбора образцов. Как показано на фиг.2В, липосомы с Au наночастиц выпущен инкапсулированный кальцеина при возбуждении, в котором количество высвобожденного кальцеина повышенную качестве импульсного питБерс увеличилась.

Последний шаг был изучить механизм высвобождения кальцеиновой от липосом с гидрофона. Рис 3A представляет собой акустический сигнал, записанный для Au наночастиц (красный), липосомы с АС НЧ (черный) и липосом без Au наночастиц (синий). В то время как Au наночастицы и липосомы с АС НЧ показали волна давления сигналы, характерные, никакой сигнал не наблюдалось липосом без Au наночастиц. Импульс давления содержит как положительные, так и отрицательные фазы (вставка на рис 3а). Это предполагает, что микропузырьки образуют (положительный фаза) и нарушить (отрицательная фаза) в растворе. Максимальное и минимальное значения записанного пика в Au NP-содержащих липосомы 0,00093 и -0,00074 V соответственно. Наконец, были вычислены среднее максимумы и минимумы из импульсов давления как функции увеличивающейся лазерной энергии. Как и следовало ожидать, амплитуда сигнала акустика постепенно увеличивается с увеличением лазераЭнергия (фигура 3В). Это должно быть связано с повышенной интенсивностью колебаний частиц отнесения к последующему термоупругих расширения и сжатия. 15,16

Рисунок 1
Рисунок 1. Предлагаемый высвобождения лекарственного механизм фото- реагировать липосом: Au наночастицы (красные точки), когда подвергается облучению, генерировать микропузырьки, которые разрушают мембрану липосомы и, таким образом Отпустить кальцеин Кальцеин, самогасящихся внутри липосом (как показано), флуоресцирует. а выпускается к окружающим. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуре.

фигура 2
Рисунок 2. <сильный> Тепло и импульсный лазер срабатывает выпуск кальцеина от липосом (А) в процентах выделившегося кальцеина от липосом с или без Au наночастиц, которые были помещены в водяную баню с различных температурах в течение 2 мин.; (B) Процент высвобожденного кальцеина липосом с АС НЧ, которые лечили импульсного лазера (длительность импульса = 6 нс; плотность мощности ~ 12 мВт / см 2). Планки погрешностей представляют собой среднее ± стандартное отклонение (SD) трех независимых экспериментов, выполненных в трех экземплярах. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуре.

Рисунок 3
Рисунок 3. (A) Акустические сигналы измеряются с помощью системы гидрофонов для Au наночастиц (красный), липосомы с АС НЧ (черный) и липосом безу НЧ (синий). В то время как Au наночастицы и липосомы с АС НЧ показали волна давления сигналы, характерные, никакой сигнал не наблюдалось липосом без Au наночастиц. Вставка показывает увеличенный вид акустических сигналов фото- реагирующих липосом. (Б) Максимальный и минимальный пиковое значение импульсов давления как функции повышения мощности лазера. Амплитуда сигнала акустика постепенно увеличивается с увеличением энергии лазера. Планки погрешностей представляют собой среднее ± SD трех независимых экспериментов, выполненных в десяти трасс. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуре.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Тонкий гидратации пленки является обычным методом для получения липосом. Органические растворители (хлороформ в данном случае) впервые были использованы для растворения липидов, а затем удаляют на роторном испарителе при 37 ° С для генерирования липидный тонкую пленку на колбу. Это липидную пленку гидратируют водным раствором, содержащим 60 мм кальцеин и 5 нм Au NPS. Во время процесса гидратации, поддерживая температуру около 50 ° С, и колбу постоянном перемешивании при вращении колбы. Ключ в этом шаге является выбор температуры, при которых испарение и увлажнение проводились соответственно. Температура фазового перехода (Т м) ДПФХ, основной составляющей липосомы, составляет 41 ° С. Во время формирования липида думаю фильм, температура должна быть не ниже 41 ° С, чтобы предотвратить образование агрегированных комков высушенных липидов. Во время гидратации, была выбрана более высокая температура, чем Тпл водить фосфолипиды, чтобысамосборке в сферических многослойных структур. Хотя тонкий метод гидратации пленки легко выполнить, она ограничена низкой эффективностью инкапсуляции (<1%) от кальцеина и Au наночастиц в водном растворе. В будущем, инкапсуляция может быть улучшена за счет циклов замораживания-оттаивания.

Последующее размер экструзии было сделано с использованием ручной мини экструдер, размещенных на нагревательном блоке. Максимум 1 мл раствора можно прессовать с помощью этого настройку, которая идеально подходит для небольшого масштаба препарата в лаборатории. Ключ в этом шаге еще температура, которая должна быть выше температуры фазового перехода липосом. По передавая экструзию при 50 ° С, размер липосом стало равномерным после 10 циклов экструзии через мембрану с 200 нм поры. Движение на этой стадии должно быть медленным и нежным поскольку давление внутри экструдера является большим, пока мембрана является хрупким.

Одной из часто забывают, но важно Steр в процессе синтеза наркотиков, содержащая липосомы является очищение или удаление ООН инкапсулированных препаратов (т.е. кальцеиновыми и Au NPS здесь). Это было сделано путем гель-фильтрационной хроматографии. Это имеет решающее значение для исследователя заметить, что колонна PD-10 используется в данном исследовании подходит только для обработки <2 мл раствора. Образцы с большим объемом может быть обработан с помощью нескольких столбцов.

Изучение высвобождения кальцеиновой от липосомы опирается на самотушения кальцеина при более высоких концентрациях и повторного флуоресценции при разведении. Когда образцы подвергались воздействию тепла или света для термической или лазерной обработки соответственно аликвоты образцов постоянно сняты в различных температурных точек или числа импульсов и переданы отдельных ампулах. Флаконы должны быть немедленно помещены в ледяной бане, чтобы предотвратить потенциальную дальнейшего выброса кальцеина, для точных измерений. Другая вещь, чтобы заметить, что кальцеин чувствителен к светуи, следовательно, может быть беленой течение лазерного эксперимента. Чтобы преодолеть это, отбеливание эффект импульсного лазера на раствор кальцеиновой должны быть измерены и данные из выпуска липосом нормализованы соответственно.

Протокол в данном документе описан способ легкое подготовка к светочувствительных липосом. Тепловая релиз впервые продемонстрирована путем использования температуры реагировать фосфолипидов. Лазерной установки иллюстрируется и свет срабатывает высвобождение достигается с помощью импульсного лазера. Механизм свете срабатывает спусковой также исследовали и нашли, связано с мембранным дезорганизацию микропузырьков кавитации.

В отличие от всех зарегистрированных протоколов, этот протокол выбирает материалы (липиды и Au NPS), которые были часто используемые в клинических испытаниях и широко доступных на рынке. Использование легкодоступных материалов позволяет любому подготовить такой светочувствительный систему самостоятельно, без перед обратиться за технической помощью. Кроме того, этот протокол использует тонкой пленки гидратации подготовить липосом, который является одновременно экономически эффективным и легко масштабируемым.

Этот простой, но мощный протокол выиграют исследователей и клиницистов, которые заинтересованы в достижении контролируемой поставки наркотиков в поверхностных тканях, как кожа. Один из возможных применений будет поставлять анти-загар агенты путем включения этой системы в рамках солнцезащитный крем.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Нет конфликта интересов не объявлены.

Acknowledgments

Эта работа была частично поддержана Tier-1 академический исследовательские фонды по Министерство образования Сингапура (RG 64/12 к CX) и NTU-Northwestern Института Наномедицины.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DPPC) Avanti Polar Lipids (Alabama, US) 850355P Powder, Store at -20 °C
1-palmitoyl-2-hydroxy-sn-glycero-3-phosphocholine (MPPC) Avanti Polar Lipids (Alabama, US) 855675P Powder, Store at -20 °C
1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanol-amine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-2000] (ammonium salt) (DSPE-PEG2000) Avanti Polar Lipids (Alabama, US) 880120P Powder, Store at -20 °C
Gold Nanoparticles Sigma Aldrich 752568-100mL 5 nm particles, stabilized at 0.1 mM PBS
Calcein Sigma Aldrich C0875-10g 60 mM, pH 7.4 (adjusted using NaOH)
phosphate buffered saline (PBS) Sigma Aldrich P5493 0.1 mM, pH 7.4
Double distilled water Millipore Milli-DI water purification system
Triton X100   Sigma, Life Sciences X-100 To disrupt the liposomes to calculate total encapsulation
Rotavapor   Buchi (Switzerland) R 210 Used for Lipososme preparation
Heating bath Buchi (Switzerland) B 491 Used for Lipososme preparation
Vacuum Controller   Buchi (Switzerland) V-850 Used for Lipososme preparation
Vacuum Pump Buchi (Switzerland) V-700 Used for Lipososme preparation
Recirculation bath with temperature controller Polyscience Used for Lipososme preparation
Mini-extruder assembly with heating block  Avanti Polar Lipids (Alabama, US) 610000 Used for extrusion of liposomes
Syringes, 1,000 μl Avanti Polar Lipids (Alabama, US) 610017 Used for extrusion of liposomes
Polycarbonate filter membrane, 200 nm Whatmann 800281 Used for extrusion of liposomes
Filter Support Avanti Polar Lipids (Alabama, US) 610014 Used for extrusion of liposomes
PD 10 Desalting coulumns, Sephadex G-25 medium GE Healthcare, Life sciences 17-0851-01 Used to purify the liposomes
Centrifuge   Sigma Laboratory Centrifuges 3K30 Used to concentrate the liposomal solution 
Rotor Sigma 19777-H Used to concentrate the liposomal solution 
Zetasizer   Nano ZS Malvern Used for the determination of liposome size and zetapotential
UV-Visible Spectrophotometer Shimadzu UV-2450 Used to measure the absorbance of the samples
Fluorescent Spectrofluorometer   Molecular Devices SpectraMax M5 Used to measure the fluorescence emission of the samples
Nd:YAG Laser NewWave Research 532 nm; Maximum power: 17 mJ; Width: 406 nsec; Used for sample irradiation
HNR Hydrophone ONDA HNR-1000 1 mm diameter and 450 nV/Pa sensitivity, Proper working frequency range: 0.25-10 MHz; Calibration: 50 mV/Bar; Used to measure the acoustic signals
Digital Osciloscope LECORY - Wave Runner 64Xi-A Frequency: 600 MHz; Max sample rate: 10 Gs/sec (at two channel); Used to record the measured acoustic signals

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. McCoy, C. P., et al. Triggered drug delivery from biomaterials. Expert Opin. Drug Deliv. 7 (5), 605-616 (2010).
  2. Yavuz, M. S., et al. Gold nanocages covered by smart polymers for controlled release with near-infrared light. Nat. Mater. 8 (12), 935-939 (2009).
  3. Gohy, J. F., Zhao, Y. Photo-responsive block copolymer micelles: design and behavior. Chem. Soc. Rev. 42 (17), 7117-7129 (2013).
  4. Lovell, J. F., et al. Porphysome nanovesicles generated by porphyrin bilayers for use as multimodal biophotonic contrast agents. Nat. Mater. 10 (4), 324-332 (2011).
  5. Needham, D., Dewhirst, M. W. The development and testing of a new temperature-sensitive drug delivery system for the treatment of solid tumors. Adv. Drug Deliv. Rev. 53 (3), 285-305 (2001).
  6. Landon, C. D., Park, J. Y., Needham, D., Dewhirst, M. W. Nanoscale drug delivery and hyperthermia: the materials design and preclinical and clinical testing of low temperature-sensitive liposomes used in combination with mild hyperthermia in the treatment of local cancer. Open Nanomed. J. 3, 38-64 (2011).
  7. Sykes, E. A., Dai, Q., Tsoi, K. M., Hwang, D. M., Chan, W. C. Nanoparticle exposure in animals can be visualized in the skin and analysed via skin biopsy. Nat. Commun. 5, 3796 (2014).
  8. Paasonen, L., et al. Gold nanoparticles enable selective light-induced contents release from liposomes. J. Control. Release. 122 (1), 86-93 (2007).
  9. Wu, G., et al. Remotely Triggered Liposome Release by Near-Infrared Light Absorption via Hollow Gold Nanoshells. J. Am. Chem. Soc. 130 (26), 8175-8177 (2008).
  10. Leung, S. J., Kachur, X. M., Bobnick, M. C., Romanowski, M. Wavelength-Selective Light-Induced Release from Plasmon Resonant Liposomes. Adv. Funct. Mater. 21 (6), 1113-1121 (2011).
  11. Volodkin, D. V., Skirtach, A. G., Möhwald, H. Near-IR Remote Release from Assemblies of Liposomes and Nanoparticles. Angew. Chem. Int. Ed. 48 (10), 1807-1809 (2009).
  12. Mills, J. K., Needham, D. Lysolipid incorporation in dipalmitoylphosphatidylcholine bilayer membranes enhances the ion permeability and drug release rates at the membrane phase transition. Biochim. Biophys. Acta. 1716 (2), 77-96 (2005).
  13. Jiang, K., Smith, D. A., Pinchuk, A. O. Size-dependent Photothermal Conversion Efficiencies of Plasmonically Heated Gold Nanoparticles. J. Phys. Chem. C. 117 (51), 27073-27080 (2013).
  14. Chongsiriwatana, N., Barron, A. Comparing bacterial membrane interaction of antimicrobial peptides and their mimics. Antimicrobial Peptides. Giuliani, A., Rinaldi, A. C. 618, Humana Press. 171-182 (2010).
  15. Egerev, S., et al. Acoustic signals generated by laser-irradiated metal nanoparticles. Appl. Opt. 48 (7), C38-C45 (2009).
  16. González, M. G., Liu, X., Niessner, R., Haisch, C. Strong size-dependent photoacoustic effect on gold nanoparticles by laser-induced nanobubbles. Appl. Phys. Lett. 96, 174104 (2010).

Tags

Биоинженерия выпуск 108 Экзогенные раздражители проблематику наночастицы свет реагирующие липосомы наночастицы золота доставки лекарств контролируемое высвобождение микропузырьков кавитации
Синтез наночастиц золота Интегрированный фотография проблематики липосом и измерении их микропузырьков кавитации при импульсном лазерном возбуждении
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Mathiyazhakan, M., Chan, W., Ohl, C. More

Mathiyazhakan, M., Chan, W., Ohl, C. D., Xu, C. Synthesis of Gold Nanoparticle Integrated Photo-responsive Liposomes and Measurement of Their Microbubble Cavitation upon Pulse Laser Excitation. J. Vis. Exp. (108), e53619, doi:10.3791/53619 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter