Summary

Samtidig detektion av c-Fos Aktivering från mesolimbiska och Mesocortical dopamin belöning webbplatser Efter Naive socker och fett Förtäring i råttor

Published: August 24, 2016
doi:

Summary

Målet med denna studie är att identifiera belöningsrelaterade distribuerade hjärn nätverk genom att avgränsa en tillförlitlig immunhistologisk teknik som använder cellulär c-fos aktivering för att mäta samtidiga förändringar i dopaminvägar och terminalplatser efter nya intag av fett och socker i råttor.

Abstract

Denna studie använder cellulära c-fos aktivering för att utvärdera effekterna av nya intag av fett och socker på hjärnan dopamin (DA) vägar i råttor. Intag av socker och fett förmedlas genom sina inneboende attraktioner samt inlärda inställningar. Dopamin i hjärnan, speciellt meso-limbiska och meso-kortikala projektioner från ventrala tegmentområdet (VTA), har varit inblandad i båda dessa olärda och lärt svar. Begreppet distribuerade hjärn nätverk, där flera platser och sändare / peptidsystem samverkar, har föreslagits att förmedla välsmakande födointag, men det finns begränsad evidens empiriskt visar sådana åtgärder. Sålunda framkallar sockerintag DA frisättning och ökar c-fos-immunoreaktivitet (FLI) från individuella VTA DA projektionszoner inklusive nucleus accumbens (NAC), amygdala (AMY) och mediala prefrontala cortex (mPFC) såväl som den dorsala striatum. Vidare, central administration av selektiva DA-receptorantagonister i dessa webbplatsär differentiellt minska förvärv och uttryck av rade smakpreferenser som framkallas av socker eller fett. En metod med vilken för att avgöra om dessa platser samverkade som en distribuerad hjärnnätverk som svar på socker eller fettintag skulle vara att samtidig bedöma om VTA och dess viktigaste mesotelencephalic DA projektionszoner (prelimbic och infralimbic mPFC, kärna och skal av NAC, basolaterala och central-kortiko-mediala AMY) såväl som den dorsala striatum skulle uppvisa samordnade och samtidig FLI aktivering efter oral, obetingade intag av majsolja (3,5%), glukos (8%), fruktos (8%) och sackarin (0,2 %) lösningar. Detta tillvägagångssätt är ett framgångsrikt första steg i att identifiera möjligheten att använda cellulära c-fos aktivering samtidigt över relevanta hjärnsajter för att studera belöning relaterat lärande i intag av välsmakande mat i gnagare.

Introduction

Dopamin i hjärnan (DA) har varit inblandad i centrala svar på intag av välsmakande socker genom föreslagna hedoniska 1,2, ansträngning relaterade 3 och vana baserade 4,5 verkningsmekanismer. Den primära DA vägen inblandad i dessa effekter har sitt ursprung i den ventrala tegmentområdet (VTA), och projekt till nucleus accumbens (NAC) kärna och skal, det basolaterala och central kortiko-medial amygdala (AMY) och prelimbic och infralimbic mediala prefrontala cortex (mPFC) (se recensioner 6,7). VTA har varit inblandad i sackarosintag 8,9, och DA frisättning observeras efter intaget av socker i NAC 10-15, AMY 16,17 och mPFC 18-20. Fettintag stimulerar också DA NAC släppa 21, och en annan DA-rika projektion zonen till rygg striatum (caudatus-putamen) har också i samband med DA-medierad utfodring 22,23. Kelley 24-27 föreslog att dessa flera projektion zoner denna DA-medierad systemet bildade ett integrerat och interaktivt distribuerade hjärnan nätverk genom omfattande och intima förbindelser 28-34.

Förutom förmågan hos DA D1 och D2-receptorantagonister för att minska intaget av sockerarter 35-37 och fetter 38-40, har DA-signalering även implicerats vid mediering av förmågan hos socker och fett för att producera rade färgpreferenser (GFP) 41- 46. Microinjections av en DA D1-receptorantagonist till NAC, AMY eller mPFC 47-49 eliminera förvärv av GFP framkallade genom intragastrisk glukos. Medan microinjections antingen DA D1 eller D2-receptorantagonister in i mPFC eliminerar förvärvet av fruktos-GFP 50, är förvärv och uttryck av fruktos-GFP differentiellt blockerad av DA-antagonister i NAC och AMY 51,52.

C-fos teknik 53,54 har använts för att undersöka neurala activation induceras av palatable intag och neural aktivering. Termen "c-fos-aktivering" att användas genom hela manuskriptet, och är operativt definierad av ökad transkription av c-Fos under neuronal depolarisation. Sackaros Ingången ökade FOS-liknande immunoreaktivitet (FLI) i den centrala AMY kärna, VTA liksom skalet, men inte kärnan av NAC 55-57. Medan sackaros intag i sken utfodring råttor ökade signifikant FLI i AMY och NAC, men inte VTA 58, intragastriska sackaros eller glukos infusioner ökat markant FLI i NAC och centrala och basolaterala kärnor av AMY 59,60. Upprepad tillsats av sackaros planerad chow tillgång ökade FLI i mPFC samt NAC skal och kärna 61. En sackaroskoncentration nedväxling paradigm visade att de största FLI ökningar inträffade den basolaterala AMY och NAC, men inte den VTA 62. Efter konditionering, utrotning av socker relaterade natur reward beteenden ökade FLI i basolateral AMY och NAC 63. Dessutom para ihop socker tillgänglighet till en ton resulterade i tonen därefter öka FLI nivåer i den basolaterala AMY 64. Fettrik Ingången ökade också FLI i NAC och mPFC platser 65-67.

De flesta av de tidigare citerade studierna undersöktes socker och fett effekter på c-fos aktivering i enstaka platser som inte ger information om identifiering av belöningsrelaterade distribuerade hjärnnätverk 24-27. Vidare, många av studierna inte heller beskriva de relativa bidragen från delområden i NAC (kärna och skal), AMY (basolateral och central kortiko-mediala) och mPFC (prelimbic och infralimbic) som skulle kunna prövas av fördelen med utmärkt rumslig, encelliga upplösning i c-Fos kartläggning 68. Vårt laboratorium 69 används nyligen c-fos aktivering och samtidigt uppmätta förändringar i VTA DA vägen och dess proprojiceringszoner (NAC, Amy och mPFC) efter nya intag av fett och socker i råttor. Den aktuella studien beskriver förfaranden och metodiska steg för att samtidigt analysera om akut exponering för sex olika lösningar (majsolja, glukos, fruktos, sackarin, vatten och en fettemulsion kontroll) skulle differentiellt aktivera FLI i delområden av NAC, AMY, mPFC liksom den dorsala striatum. Denna samtidig detektion av skillnader får bekräftelse av en betydande inverkan på FLI i varje plats och beslut om huruvida förändringar i en viss webbplats korrelerade med förändringar i relaterade webbplatser, vilket ger stöd för ett distribuerat hjärnnätverk 24-27. Dessa testade förfaranden huruvida VTA, den prelimbic och infralimbic mPFC, kärnan och skalet av NAC, och den basolaterala och central-kortiko-mediala AMY) såväl som den dorsala striatum skulle uppvisa samordnade och samtidig FLI aktivering efter oral, obetingade intag av glukos (8%), fruktos (8%), majsolja (3,5%) och sackarin (0,2%) lösningar.

Protocol

Dessa experimentella protokoll har godkänts av Institutional Animal Care och användning kommittén intygar att alla ämnen och förfaranden i enlighet med National Institutes of Health Guide för skötsel och användning av försöksdjur. 1. ämnen Inköp och / eller ras Sprague-Dawley (260-300 g). Hus råttor individuellt i nätburar. Underhålla dem på en 12:12 timmar ljus / mörker-cykel med råttfoder och vatten tillgängligt ad libitum. Tilldela lämpliga urvalssto…

Representative Results

Alla representativa resultat som beskrivs nedan har tidigare publicerats 69, och åter presenteras här för att stödja "proof of concept" för att indikera effektiviteten av tekniken. lösnings intag Signifikanta skillnader i baslinjen sackarin intag observerades under de första fyra dagarna för alla djur (F (3.108) = 57,27, p <0,001) med intag (Dag 1: 1,3 (± 0,2) ml, Dag 2:…

Discussion

Målet med studien var att fastställa om källan (VTA) och framhjärnan projektions mål (NAC, Amy, mPFC) av DA belöning relaterade nervceller samtidigt aktiveras efter nya intag av fett och socker i råttor med hjälp av cellulära c-fos teknik . Den aktuella studien är en detaljerad beskrivning av protokollen från en studie tidigare 69 publicerade. Det antogs att VTA, skulle dess större projektionszoner till prelimbic och infralimbic mPFC, kärnan och skalet av NAC och den basolaterala och central-kort…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Tack vare Diana Icaza-Culaki, Cristal Sampson och Theologia Karagiorgis för deras hårda arbete med detta projekt.

Materials

Equipment
Sprague-Dawley rats Charles River Laboratories CD-1
Wire Mesh Cages Lab Products, Seaford, DE 30-Cage rack
Rat Chow PMI Nutrition International 5001
Taut Metal Spring Lab Products, Seaford, DE n/a
Rat Weighing Scale Fisher Scientific Company n/a
Nalgene Centrifuge Tubes Lab Products, Seaford, DE 10-0501
Rubber Stopper Lab Products, Seaford, DE n/a
Metal Sippers Lab Products, Seaford, DE n/a
Saccharin Sigma Chemical Co 82385-42-0
Kool-Aid, Cherry Kool-Aid Commerical
Kool-Aid, Grape Kool-Aid Commercial
Fructose Sigma Chemical Co F0127
Glucose Sigma Chemical Co G8270
Corn Oil Mazzola Commerical
Xanthan Gum Sigma Chemical Co 11138-66-2
Sliding Microtome Microm International n/a
Neurolucida Camera MBF Bioscience Software application
Gelatin-coated Slides Fisher Scientific Company 12-550-343
Cover glass Fisher Scientific Company 12-545-M
Golden Nylon Brushes Loew-Cornell  2037
Natural Hair Sable  Loew-Cornell  2022
24 Well Plates Fisher Scientific 3527
6 Well Plates Fisher Scientific 3506
1L Pyrex bottles Fisher Scientific 1395-1L
Tissue insert (tissue strainer) Fisher Scientific 7200214
Eagle pipettes  World Precision Instruments E10 for 1-10ul 
Eagle pipettes  World Precision Instruments E100 for 20-100ul
Eagle pipettes  World Precision Instruments E200 for 50-200ul
Eagle pipettes  World Precision Instruments E1000 for 100-1000ul
Eagle pipettes  World Precision Instruments E5000 for 1000-5000ul 
Universal Tips .1-10ul World Precision Instruments 500192
Universal Tips 5-200ul World Precision Instruments 500194
Universal Tips 500-5000ul World Precision Instruments 500198
Blade Vibroslice 100 World Precision Instruments BLADE
DPX Mounting Medium  Electron Microscopy  13510
15mL centrifuge tubes Biologix Research Co. 10-0501
Slide Boxes Biologix Research Co. 41-6100
Orbital Shaker  Madell Corporation   ZD-9556
weigh boats  Fisher Scientific 02-202-100
5mL disposable pipettes Fisher Scientific 13-711-5AM
Stereo Investigator Software Micro Bright Field Software application
Name Company Catalog number Comments
Reagents
Paraformaldehyde Granular Fisher Scientific 19210
NaCl Fisher Scientific S271-1
Sodium Phophate Monobasic Fisher Scientific S468-500
Sodium Phosphate Diphasic Fisher Scientific BP332-500
Hydrogen Peroxide  Fisher Scientific H324-500
SafeClear II  Fisher Scientific 23-044-192
Methanol  Fisher Scientific A412-1
Normal Goat Serum Vector S-1000
Biotinylated Anti-Rabbit IgG (H+L) Vector BA-1000
ABC Kit Peroxidase Standard Vector PK-4000
Anti-cFos (Ab-5) Rabbit EMD chem/Cal Biochem PC38
Triton X 100 SigmaAldrich X-100
3,3' diaminobenzidine tetra hydrochloride  SigmaAldrich D5905
Sodium Hydroxide SigmaAldrich 5881
Primary TH anti body EMD Millipore AB152
Euthosol Virbac AH

References

  1. Koob, G. F. Neural mechanisms of drug reinforcement. Ann. N.Y. Acad. Sci. 654, 171-191 (1992).
  2. Wise, R. A. Role of brain dopamine in food reward. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 361, 1149-1158 (2006).
  3. Salamone, J. D., Correa, M. The mysterious motivational functions of mesolimbic dopamine. Neuron. 76, 470-485 (2012).
  4. Horvitz, J. C., Choi, W. Y., Morvan, C., Eyny, Y., Balsam, P. D. A "good parent" function of dopamine: transient modulation of learning and performance during early stages of training. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1104, 270-288 (2007).
  5. Wickens, J. R., Horvitz, J. C., Costa, R. M., Killcross, S. Dopaminergic mechanisms in actions and habits. J. Neurosci. 27, 8181-8183 (2007).
  6. Bjorklund, A., Dunnett, S. B. Dopamine neuron systems in the brain: an update. Trends Neurosci. 30, 194-202 (2007).
  7. Swanson, L. W. The projections of the ventral tegmental area and adjacent regions: a combined fluorescent retrograde tracer and immunofluorescence study in the rat. Brain Res. Bull. 9, 321-353 (1982).
  8. Cacciapaglia, F., Wrightman, R. M., Careli, R. M. Rapid dopamine signaling differentially modulates distinct microcircuits within the nucleus accumbens during sucrose-directed behavior. J. Neurosci. 31, 13860-13869 (2011).
  9. Martinez-Hernandez, J., Lanuza, E., Martinez-Garcia, F. Selective dopaminergic lesions of the ventral tegmental area impair preference for sucrose but not for male sex pheromones in female mice. Eur. J. Neurosci. 24, 885-893 (2006).
  10. Bassareo, V., Di Chiara, G. Differential influence of associative and nonassociative learning mechanisms on the responsiveness of prefrontal and accumbal dopamine transmission to food stimuli in rats fed ad libitum. J. Neurosci. 17, 851-861 (1997).
  11. Bassareo, V., Di Chiara, G. Differential responsiveness of dopamine transmission to food-stimuli in nucleus accumbens shell/core compartments. Neurosci. 89, 637-641 (1999).
  12. Cheng, J., Feenstra, M. G. Individual differences in dopamine efflux in nucleus accumbens shell and core during instrumental conditioning. Learn. Mem. 13, 168-177 (2006).
  13. Genn, R. F., Ahn, S., Phillips, A. G. Attenuated dopamine efflux in the rat nucleus accumbens during successive negative contrast. Behav. Neurosci. 118, 869-873 (2004).
  14. Hajnal, A., Norgren, R. Accumbens dopamine mechanisms in sucrose intake. Brain Res. 904, 76-84 (2001).
  15. Hajnal, A., Smith, G. P., Norgren, R. Oral sucrose stimulation increases accumbens dopamine in the rat. Am. J. Physiol. 286, R31-R37 (2003).
  16. Bassareo, V., Di Chiara, G. Modulation of feeding-induced activation of mesolimbic dopamine transmission by appetitive stimuli and its relation to motivational state. Eur. J. Neurosci. 11, 4389-4397 (1999).
  17. Hajnal, A., Lenard, L. Feeding-related dopamine in the amygdala of freely moving rats. Neuroreport. 8, 2817-2820 (1997).
  18. Bassareo, V., De Luca, M. A., Di Chiara, G. Differential expression of motivational stimulus properties by dopamine in nucleus accumbens shell versus core and prefrontal cortex. J. Neurosci. 22, 4709-4719 (2002).
  19. Feenstra, M., Botterblom, M. Rapid sampling of extracellular dopamine in the rat prefrontal cortex during food consumption, handling, and exposure to novelty. Brain Res. 742, 17-24 (1996).
  20. Hernandez, L., Hoebel, B. G. Feeding can enhance dopamine turnover in the prefrontal cortex. Brain Res. Bull. 25, 975-979 (1990).
  21. Liang, N. C., Hajnal, A., Norgren, R. Sham feeding corn oil increases accumbens dopamine in the rat. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 291, R1236-R1239 (2006).
  22. Dunnett, S. B., Iversen, S. D. Regulatory impairments following selective kainic acid lesions of the neostriatum. Behav. Brain Res. 1, 497-506 (1980).
  23. Salamone, J. D., Zigmond, M. J., Stricker, E. M. Characterization of the impaired feeding behavior in rats given haloperidol or dopamine-depleting brain lesions. Neurosci. 39, 17-24 (1990).
  24. Kelley, A. E. Ventral striatal control of appetitive motivation: role in ingestive behavior and reward-related learning. Neurosci. Biobehav. Rev. 27, 765-776 (2004).
  25. Kelley, A. E. Memory and addiction: shared neural circuitry and molecular mechanisms. Neuron. 44, 161-179 (2004).
  26. Kelley, A. E., Baldo, B. A., Pratt, W. E. A proposed hypothalamic-thalamic-striatal axis for the integration of energy balance, arousal and food reward. J. Comp. Neurol. 493, 72-85 (2005).
  27. Kelley, A. E., Baldo, B. A., Pratt, W. E., Will, M. J. Corticostriatal-hypothalamic circuitry and food motivation: integration of energy, action and reward. Physiol. Behav. 86, 773-795 (2005).
  28. Berendse, H. W., Galis-de-Graaf, Y., Groenewegen, H. J. Topographical organization and relationship with ventral striatal compartments of prefrontal corticostriatal projections in the rat. J. Comp. Neurol. 316, 314-347 (1992).
  29. Brog, J. S., Salyapongse, A., Deutch, A. Y., Zahm, D. S. The patterns of afferent innervation of the core and shell in the "accumbens" part of rat ventral striatum: immunohistochemical detection of retrogradely transported fluoro-gold. J. Comp. Neurol. 338, 255-278 (1993).
  30. McDonald, A. J. Organization of amygdaloid projections to the prefrontal cortex and associated stritum in the rat. Neurosci. 44, 1-14 (1991).
  31. McGeorge, A. J., Faull, R. L. The organization of the projection from the cerebral cortex to the striatum in the rat. Neurosci. 29, 503-537 (1989).
  32. Sesack, S. R., Deutch, A. Y., Roth, R. H., Bunney, B. S. Topographical organization of the efferent projections of the medial prefrontal cortex in the rat: an anterograde tract-tracing study with Phaseolus vulgaris leucoagglutinin. J. Comp. Neurol. 290, 213-242 (1989).
  33. Wright, C. I., Beijer, A. V., Groenewegen, H. J. Basal amygdaloid complex afferents to the rat nucleus accumbens are compartmentally organized. J. Neurosci. 16, 1877-1893 (1996).
  34. Wright, C. I., Groenewegen, H. J. Patterns of convergence and segregation in the medial nucleus accumbens of the rat: relationships of prefrontal cortical, midline thalamic and basal amygdaloid afferents. J. Comp. Neurol. 361, 383-403 (1995).
  35. Geary, N., Smith, G. P. Pimozide decreases the positive reinforcing effect of sham fed sucrose in the rat. Pharmacol. Biochem. Behav. 22, 787-790 (1985).
  36. Muscat, R., Willner, P. Effects of selective dopamine receptor antagonists on sucrose consumption and preference. Psychopharmacol. 99, 98-102 (1989).
  37. Schneider, L. H., Gibbs, J., Smith, G. P. D-2 selective receptor antagonists suppress sucrose sham feeding in the rat. Brain Res. Bull. 17, 605-611 (1986).
  38. Baker, R. W., Osman, J., Bodnar, R. J. Differential actions of dopamine receptor antagonism in rats upon food intake elicited by mercaptoacetate or exposure to a palatable high-fat diet. Pharmacol. Biochem. Behav. 69, 201-208 (2001).
  39. Rao, R. E., Wojnicki, F. H., Coupland, J., Ghosh, S., Corwin, R. L. Baclofen, raclopride and naltrexone differentially reduce solid fat emulsion intake under limited access conditions. Pharmacol. Biochem. Behav. 89, 581-590 (2008).
  40. Weatherford, S. C., Smith, G. P., Melville, L. D. D-1 and D-2 receptor antagonists decrease corn oil sham feeding in rats. Physiol. Behav. 44, 569-572 (1988).
  41. Azzara, A. V., Bodnar, R. J., Delamater, A. R., Sclafani, A. D1 but not D2 dopamine receptor antagonism blocks the acquisition of a flavor preference conditioned by intragastric carbohydrate infusions. Pharmacol. Biochem. Behav. 68, 709-720 (2001).
  42. Baker, R. M., Shah, M. J., Sclafani, A., Bodnar, R. J. Dopamine D1 and D2 antagonists reduce the acquisition and expression of flavor-preferences conditioned by fructose in rats. Pharmacol. Biochem. Behav. 75, 55-65 (2003).
  43. Dela Cruz, J. A., Coke, T., Icaza-Cukali, D., Khalifa, N., Bodnar, R. J. Roles of NMDA and dopamine D1 and D2 receptors in the acquisition and expression of flavor preferences conditioned by oral glucose in rats. Neurobiol. Learn. Mem. 114, 223-230 (2014).
  44. Dela Cruz, J. A., et al. Roles of dopamine D1 and D2 receptors in the acquisition and expression of fat-conditioned flavor preferences in rats. Neurobiol. Learn. Mem. 97, 332-337 (2012).
  45. Yu, W. Z., Silva, R. M., Sclafani, A., Delamater, A. R., Bodnar, R. J. Pharmacology of flavor preference conditioning in sham-feeding rats: effects of dopamine receptor antagonists. Pharmacol. Biochem. Behav. 65, 635-647 (2000).
  46. Yu, W. Z., Silva, R. M., Sclafani, A., Delamater, A. R., Bodnar, R. J. Role of D(1) and D(2) dopamine receptors in the acquisition and expression of flavor-preference conditioning in sham-feeding rats. Pharmacol. Biochem. Behav. 67 (1), 537-544 (2000).
  47. Touzani, K., Bodnar, R. J., Sclafani, A. Activation of dopamine D1-like receptors in nucleus accumbens is critical for the acquisition, but not the expression, of nutrient-conditioned flavor preferences in rats. Eur. J. Neurosci. 27, 1525-1533 (2008).
  48. Touzani, K., Bodnar, R. J., Sclafani, A. Dopamine D1-like receptor antagonism in amygdala impairs the acquisition of glucose-conditioned flavor preference in rats. Eur. J. Neurosci. 30, 289-298 (2009).
  49. Touzani, K., Bodnar, R. J., Sclafani, A. Acquisition of glucose-conditioned flavor preference requires the activation of dopamine D1-like receptors within the medial prefrontal cortex in rats. Neurobiol. Learn. Mem. 94, 214-219 (2010).
  50. Malkusz, D. C., et al. Dopamine signaling in the medial prefrontal cortex and amygdala is required for the acquisition of fructose-conditioned flavor preferences in rats. Behav. Brain Res. 233, 500-507 (2012).
  51. Bernal, S. Y., et al. Role of dopamine D1 and D2 receptors in the nucleus accumbens shell on the acquisition and expression of fructose-conditioned flavor-flavor preferences in rats. Behav. Brain Res. 190, 59-66 (2008).
  52. Bernal, S. Y., et al. Role of amygdala dopamine D1 and D2 receptors in the acquisition and expression of fructose-conditioned flavor preferences in rats. Behav. Brain Res. 205, 183-190 (2009).
  53. Dragunow, M., Faull, R. The use of c-fos as a metabolic marker in neuronal pathway tracing. J. Neurosci. Methods. 29, 261-265 (1989).
  54. VanElzakker, M., Fevurly, R. D., Breindel, T., Spencer, R. L. Environmental novelty is associated with a selective increase in Fos expression in the output elements of the hippocampal formation and the perirhinal cortex. Learn. Mem. 15, 899-908 (2008).
  55. Norgren, R., Hajnal, A., Mungarndee, S. S. Gustatory reward and the nucleus accumbens. Physiol. Behav. 89, 531-535 (2006).
  56. Park, T. H., Carr, K. D. Neuroanatomical patterns of fos-like immunoreactivity induced by a palatable meal and meal-paired environment in saline- and naltrexone-treated rats. Brain Res. 805, 169-180 (1998).
  57. Zhao, X. L., Yan, J. Q., Chen, K., Yang, X. J., Li, J. R., Zhang, Y. Glutaminergic neurons expressing c-Fos in the brainstem and amygdala participate in signal transmission and integration of sweet taste. Nan.Fang Yi.Ke.Da.Xue.Xue.Bao. 31, 1138-1142 (2011).
  58. Mungarndee, S. S., Lundy, R. F., Norgren, R. Expression of Fos during sham sucrose intake in rats with central gustatory lesions. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 295, R751-R763 (2008).
  59. Otsubo, H., Kondoh, T., Shibata, M., Torii, K., Ueta, Y. Induction of Fos expression in the rat forebrain after intragastric administration of monosodium L-glutamate, glucose and NaCl. Neurosci. 196, 97-103 (2011).
  60. Yamamoto, T., Sako, N., Sakai, N., Iwafune, A. Gustatory and visceral inputs to the amygdala of the rat: conditioned taste aversion and induction of c-fos-like immunoreactivity. Neurosci. Lett. 226, 127-130 (1997).
  61. Mitra, A., Lenglos, C., Martin, J., Mbende, N., Gagne, A., Timofeeva, E. Sucrose modifies c-fos mRNA expression in the brain of rats maintained on feeding schedules. Neurosci. 192, 459-474 (2011).
  62. Pecoraro, N., Dallman, M. F. c-Fos after incentive shifts: expectancy, incredulity, and recovery. Behav. Neurosci. 119, 366-387 (2005).
  63. Hamlin, A. S., Blatchford, K. E., McNally, G. P. Renewal of an extinguished instrumental response: Neural correlates and the role of D1 dopamine receptors. Neurosci. 143, 25-38 (2006).
  64. Kerfoot, E. C., Agarwal, I., Lee, H. J., Holland, P. C. Control of appetitive and aversive taste-reactivity responses by an auditory conditioned stimulus in a devaluation task: A FOS and behavioral analysis. Learn. Mem. 14, 581-589 (2007).
  65. Zhang, M., Kelley, A. E. Enhanced intake of high-fat food following striatal mu-opioid stimulation: microinjection mapping and fos expression. Neurosci. 99, 267-277 (2000).
  66. Teegarden, S. L., Scott, A. N., Bale, T. L. Early life exposure to a high fat diet promotes long-term changes in dietary preferences and central reward signaling. Neurosci. 162, 924-932 (2009).
  67. Del Rio, D., et al. Involvement of the dorsomedial prefrontal cortex in high-fat food conditioning in adolescent mice. Behav. Brain Res. 283, 227-232 (2015).
  68. Knapska, E., Radwanska, K., Werka, T., Kaczmarek, L. Functional internal complexity of amygdala: focus on gene activity mapping after behavioral training and drugs of abuse. Physiol. Rev. 87, 1113-1173 (2007).
  69. Dela Cruz, J. A. D., et al. c-Fos induction in mesotelencephalic dopamine pathway projection targets and dorsal striatum following oral intake of sugars and fats in rats. Brain Res. Bull. 111, 9-19 (2015).
  70. Paxinos, G., Watson, C. . The rat brain in stereotaxic coordinates. , (2006).
  71. Ranaldi, R., et al. The effects of VTA NMDA receptor antagonism on reward-related learning and associated c-fos expression in forebrain. Behav. Brain Res. 216, 424-432 (2011).

Play Video

Cite This Article
Dela Cruz, J. A. D., Coke, T., Bodnar, R. J. Simultaneous Detection of c-Fos Activation from Mesolimbic and Mesocortical Dopamine Reward Sites Following Naive Sugar and Fat Ingestion in Rats. J. Vis. Exp. (114), e53897, doi:10.3791/53897 (2016).

View Video