Introduction
ここ数十年では、イメージング技術は、医師が病気を診断し、監視する方法に革命をもたらしてきました。これらのイメージング技術は、しかしながら、例えば、陽電子放射断層撮影（PET）、単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（SPECT）、コンピュータ断層撮影（CT）、磁気共鳴イメージング（MRI）などの全身画像化システムに大きく制限されています。特に注意は、がんが注目されている、技術イメージングブレークスルーを大幅にこの病気を診断し、治療される方法を改善しています。手術室：これらの進歩にもかかわらず、これらのイメージング技術がちょうど収まりきらない一つの場所があります。全身イメージング技術は、手術計画に役立つことができますが、それらは一般的に、腫瘍組織の全てが除去された又は残留腫瘍組織を切除縁1に隠されたままかどうかを医師がリアルタイムで決定するのに役立つのに十分に高い空間分解能を欠いています。ノー浸潤がしていることを確認し腫瘍マージンが最も重要な外科的な目標の一つであり、外科医は、厳格かつ慎重な組織切除の間にタイトロープを歩く必要があります残されています。あまりに多くが除去されると、患者に対する望ましくない副作用が悪化します。少なすぎるが削除された場合、再発率は2、3に増加しています。したがって、正確な腫瘍のマージンを描くために重要であり、我々は、化学発光術中イメージングは、そうでなければ、確立された技術で検出されない状態になる可能性があり、悪性組織を可視化するために外科医を支援することにより、腫瘍のマージンの識別の精度を向上させるために助けることができると信じています。
現在術中イメージングシステムとしてのそれらの可能な有用性について研究されている多くのイメージング技術があります。これらは、β-およびγ線放出プローブ4、光学蛍光5、ラマン分光法6を含みます> 7、及びチェレンコフ発光8、9。しかし、今日まで、これらのいずれも、標準的な臨床ツールとして確立されていません。光学蛍光イメージングは、これまで、これらの技術の中で最も有望であることが判明している、したがって、最も探索されます。既に多くの用途のための貴重なツールであることが示されているが、それには限界がないわけではありません。確かに、その主な欠点は、本質的に自家蛍光生体組織によって生成されたバックグラウンド蛍光です。このバックグラウンド自己蛍光シグナルは、蛍光シグナルの生成に必要な外部光源により、フルオロフォアに加えて、周囲の組織の励起との積です。実用的な観点から、この自己蛍光は、潜在的に手術室では、この技術の有用性を制限することができる低信号対雑音比をもたらすことができます。
校長蛍光画像上の化学発光画像化の利点は、励起光が必要でないことです。その結果、バックグラウンド自己蛍光はありません。化学発光イメージングでは、励起エネルギーは、代わりに、化学的に生成されます。このプロセスには意図されないバックグラウンド信号を生成しないので、より高い信号対雑音比をもたらすことができます。これは、最終的に切除縁のより精密かつ正確に検出される可能性があります。やや驚くべきことに、術中イメージング技術として、このアプローチの有用性は、10未踏のままです。実際、この手法に最も近い例は、マウス11、12、13におけるミエロペルオキシダーゼによるルミノールの酸化です。化学発光生物医学イメージングは、したがって、次のような利点を提供できる研究のかなり未踏の領域です：ハイとローバックグラウンド信号が得られる（1）最小限の自家蛍光gher信号対雑音比。 （2）可視光から近赤外までの化学発光放出の調整可能な波長を、 （3）リンカ技術とすでに存在している標的とする生体分子と結合し、官能化化学発光錯体を、対象となる分子イメージングプローブ14の全体のライブラリへのアクセスを提供します。
この証明の原理研究は、ルテニウムベースの造影剤を使用して、生物医学的環境において化学発光画像化の潜在的な有用性を示しています。この化合物の化学発光特性は、よく1960年代半ば15にさかのぼる調査で、研究されています。化学的活性化の際に、薬剤は、医療用イメージングのために適している約600 nmの16の光を生成します。活性化エネルギーは、励起状態の水17 -follで650ナノ秒の寿命を有するに至る酸化還元反応によって提供されますこの励起状態の緩和時に光子の生成によって負っ。特別に設計されたリモートネブライザーの使用を介して、我々は、化合物の両方のエキソビボおよびインビボで検出することができました。最初の実験の結果は、この技術のさらなる調査を示唆し、非常に有望です。
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Protocol
倫理の声明：承認されたプロトコルとメモリアルスローンケタリングがんセンター（MSK）施設内動物管理使用委員会（IACUC）の倫理ガイドラインの下に従って行った説明in vivo動物実験のすべて。
噴霧装置の1建設
- 2本のネジ（×25 mm 2と4）を使用して、パートB（12.7 X 10.7 X 1.8センチメートル3）の中央に直立木質部A（12.5 X 2.5×1.8センチメートル3）を取り付けます。 1本のネジを使用して、パートA（12.5 X 2.5×1.8 cm 3）での中央に木部C（11×2.5×1.8 cm 3で）を取り付け、その結果、C部（1.8×11×2.5cm 2の3）はまだ移動することができます。 図1を参照してください。
- 二つのループ、どちらかに1を形成するために介して2つの穴のプラスチック3オンスミニ噴霧器（D）のスプレーボトルトリガの下部先端のドリルスルーとステンレス棒をプッシュ（1/16 "鋼10センチ）（E）トリガーの側面。 抜けケーブルタイを防止するために、ダクトテープ（F）でスプレーボトルの底部を包みます。 2プラスチック製のケーブルタイを使用して、木質部C（11のx 2.5×1.8センチメートル3）（28センチメートル）（G）へのスプレーボトルを取り付けます。
- 011サーボモータ（I）を遮断し、サーボ制御（H）のケーブルが緩んでいないでそれを再接続します。そして、ダクトテープを使用して、木質部A（12.5 X 2.5×1.8センチメートル3）の上部にサーボモータを接続します。
- ペーパークリップ（K）を使用して、サーボモータレバーに鉛筆（J）を取り付けます。しっかりとプラスチックカバーされツイスト線（L）を使用して、スチールロッドループに鉛筆の最も外側の部分を接続し、ダクトテープと鉛筆の端を固定します。
- サーボモータ制御装置の磁気ケーブルコネクタ（M）を遮断し、スピーカーケーブル（N）に再接続します。そして、木質部B（12.7 X 10.7 1.8×cm 3）とするサーボモータ制御装置をテープ。半分に磁気コネクタ付きW1ケーブルをカットし、銅sの緩い最後に1部を添付ピーカーケーブル（1メートル）。 （磁気）12トグルスイッチとp1の電源が利用できW1ケーブルと9Vバッテリーに接続します。
法の2.感度決意
- 1.5 mLのマイクロ遠心チューブでは、260μgの（347ナノモル）、52μgの（69ナノモル）、26μgの（34ナノモル）の量で逆浸透水（100μL）の[3のRu（bpyで）]のCl 2の溶液を調製、5μgの（6.9ナノモル）、3μgの（3.5ナノモル）、520 ngの（694ピコモル）、260 ngの（347ピコモル）、52 ngの（69ピコモル）、26 ngの（34ピコモル）、5 ngの（6.9ピコモル）、および3 ngの（3.5ピコモル）。
- 各100μLをミックス[のRu（bpyで）3]顕微鏡スライド上の硝酸セリウムアンモニウムの水溶液100μL（（NH 4）2 Ceの（NO 3）6）の水（25 mM）のでのCl 2溶液。
- イメージングソフトウェアを初期化することにより、生物発光リーダーに買収を設定します。
- ユーザプロファイルにサインインし、アックイを探しますジションコントロールパネル。 「初期化」をクリックすると、機器の準備ができるまで待ちます。
- チェックされ、「画像表示モード」を探し、「発光」と「写真」がチェックされていることを確認し、その「蛍光」。
- 20秒に「発光」の設定「露出時間」に変更します。 「発光」のための残りの設定を設定し、次のように：「ビニング」：中。 「F /ストップ」：1。そして、「発光フィルタ」：オープン。
注：露光時間は、提示さ設定と異なる場合は、使用機器および実験設定に応じて適応させることが必要になる場合があります。 - 「露出時間」：次の設定を使用」、写真」のためのオート。 「ビニング」：ミディアム。および「F /ストップ」：8.「フィールドビューの「ドロップダウンメニュー用のtarget.Lookを画像化するに従って、「件名の高さ」を調整してください。初期設定は「C」でありますCとの間の「B」に変更します（14センチメートル距離アメーラと試料ステージ）。
- 酸化剤から保護するために撮影室の床に黒い画用紙のシートに顕微鏡スライドを配置することによって、噴霧器を設定します。 [のRu（bpyで）3]の100μLdroplet（NH 4）の水溶液100μLでのCl 2 -溶液を混ぜる2のCe（NO 3）6.緑色のボックスの十字線を観察します。
- 関心領域は、試料ステージ上に表示される緑色のライトボックスの十字線の中央にあるように、黒画用紙に被写体を配置します。木製のサポートから、プラスチック製のスプレーボトルを取り外して噴霧器を準備します。そのプラスチック製のリザーバーに、木製のサポートにそれを再接続します（水/エタノール中3 1）のトリエチルアミンの溶液を埋めます。
- 生物発光リーダーの内部噴霧器を配置し、電源コードがネブライザーコードから切り離されていることを確認します。その電源スイッチを確認してください上で、トグルスイッチがオフになっている、と赤色のLEDが点灯します。スプレーノズルヘッドによる被写体に向けてカメラからの眺め閉塞を最小限に抑えながら、噴霧流は、被写体上の関心領域に向かって指摘されるように噴霧器を置きます。
- スプレーからそれらを保護するために、任意の潜在的なホットスポット（顕微鏡スライドまたは注射部位に例えば、白マーク）の上に画用紙の小さな黒い駒を置きます。場所が撮像対象、噴霧器、または磁気ドアラッチと干渉しないように、撮像チャンバ内部ネブライザ遠隔コードの少なくとも40センチ、。イメージングシステムのドアを閉じます。
注：十字線がで設定」ビューのフィールド」に基づいてサイズを変更します」リビングイメージ; "これは「B」に設定されていることを確認してください。
- 撮像シーケンスを開始することにより画像を取得します。で、「取得」をクリックして「取得コントロールパネル。」第1の撮像sequ上レンスは、必要に応じて自動保存を有効にする（推奨）とデータフォルダを選択します。シーケンスの最後まで「編集イメージングラベル」ダイアログを無視します。
注：制御ソフトウェアは、機器のアクションは、ステップバイステップでリアルタイムに表示されます。測定を調製し、正しい位置に試料ステージを移動した後、それはカメラのシャッターを開き、測定時間をカウントします。シャッター開口部は、機械によって生成され、クリック音によって聞くことができます。 - 化学発光を生成するために、トグルスイッチを3回切り替えることにより：シャッターが開くと、トリエチルアミンの溶液の3バースト（水/エタノールで3、スプレーバーストあたり0.24±0.04 mLの1）をスプレー。
注：試料ステージは、測定中に移動します。これを可能にするために、機器の内部に十分な（最小40センチメートル）ケーブルを残します。解決策は、上昇管によって熱望することができ、噴霧器によって噴霧されることと配管内に気泡がないことを確認します。いくつかの予備バッテリー含みを持っています必要な場合には準備ができてネブライザーのための。
全身静脈内注射後のin vivoイメージング3
- 1.5 mlのマイクロ遠心管中で、[Ruの（BPY）3] Cl 2をナノモル8〜33を含有するリン酸緩衝生理食塩水（PBS）溶液100μLを調製します。同時に、（NH 4）の水溶液2のCe（NO 3）水に6（25 mm）を準備します。
- 静脈内に健康なマウスの尾静脈に[のRu（bpyで）3] Cl 2を100μLを注入した（n = 5）。
- CO 2窒息を介してマウスに注射後10分を安楽死させます。
- 心臓や肺を露出するようにU字状に肋骨弓を削除した後、胴体からYカットで皮膚を取り除きます。右心房にコンセントを切断し、左心室18に24ゲージの針を介してPBSの20mLのを注入することにより、マウスを灌流。慎重に腹を切って皮膚や腎臓および肝臓を露出させます。目に見えるカットを作成するために臓器を通って長手方向にカットします。
- 以下の変更を行い、ステップ2.3から2.6に記載されているように買収を設定します。
- 十分ネブライザプラスチックリザーバを洗浄した後、代わりにトリエチルアミン水（NH 4）2の溶液のCe（NO 3）6（25ミリモル）でそれを埋めます。
注：徹底的に（NH 4）2 Ceの（NO 3）6は、いくつかの使用後にスプレーノズルを破壊する可能性を結晶化するので、使用するたびに、ネブライザーノズルを洗浄することが重要です。
- 十分ネブライザプラスチックリザーバを洗浄した後、代わりにトリエチルアミン水（NH 4）2の溶液のCe（NO 3）6（25ミリモル）でそれを埋めます。
- 動物全体または器官のサンプルは、イメージングのために使用します。
- 腹部全体イメージングのために、カメラ、機器の背面を指して頭に直面して開いた腹部とマウスの死体を置きます。緑色のライトボックスの十字線で画像化される臓器（ 例えば、肝臓や腎臓）を中央に配置します。
- Fまたは臓器イメージングおよび定量個々の、イメージング装置からマウスを削除し、それを突き止めます。すでにオープンした体腔から出発し、内部器官（ 例えば、腎臓、肝臓、肺、筋肉、脾臓、脳、および心臓）を切り出します。筋肉組織を切除するために後肢の皮膚を介してカットします。慎重に脳を切除するメスで頭蓋骨を開きます。
- 関心のある器官は、肝臓、腎臓、脾臓の場合は、縦方向に半分にすべての器官をカットし、黒画用紙のシャーレまたは片に各臓器を置きます。
- 単一臓器のための化学発光トレーサーの相対発光を確立するためのステップ2.3から2.6に記載されている手順に従ってください。
リンパ節のin vivoイメージング4.
- [のRu（bpyで）3] Cl 2を80ナノモルを含むPBS溶液10μLを準備します。水溶液（NH 4）2 Ceと準備（NO 3）6ワシントン州同時にター（25 mM）の。
- 健康なマウスの後肢に皮下溶液10μLを注入した（n = 5）。陰性対照として、純粋なPBSの10μLと反対側の足を注入。 15分注射後、CO 2窒息を介してマウスを生け贄に捧げます。膝窩リンパ節までのリンパ運河を露出するために、両方の後ろ足の皮膚を取り除きます。
- ステップ3.4で説明したように買収を設定します。
- 定量化のために、両方の後肢からの膝窩リンパ節を除去半分にそれらを切断し、ペトリ皿上に酸化剤とそれらをスプレー、前述したように（ステップ3.5.3）。
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Representative Results
プロトコル項1に記載のネブライザーシステムは、低コストで容易に入手可能な材料から構成することができます。リモートトリガ生物発光リーダー（ 図1）の内部に還元/酸化剤の噴霧用のインセットであることが意図されます。私たちのデザインは、レンズ〜14センチの距離での生物発光リーダー内の噴霧器の安全な操作を可能にします。レンズのない曇りやボケは、動作中に観察されませんでした。我々は、市販の化学発光剤[のRu（bpyで）3]、その低価格に基づいて提案手法の開発のためのCl 2、水溶液、十分に記載の酸化還元挙動、および化学発光特性の安定性（ 図 2）19を選択しました。 [のRu（bpyで）3] Cl 2の（100μLの1滴を酸化することにより、プロトコル部2に記載されているように、最小の検出可能な信号を決定することができる6.9 pmol- 34H 2 O）で7ナノモル（NH 4）顕微鏡スライド上の2のCe（NO 3）6（100μL、25 mm）です。次に、（1：水/エタノール中3）噴霧器を使用して、トリエチルアミンの溶液に噴霧することにより、化学発光信号がトリガされます。我々の場合では、最小の検出可能なシグナルは6.9ピコモル/ cm 2で（ 図3）であると決定されました。これは、最適化された反応条件、カメラの感度、シャッター時間、ボリューム、および試薬濃度がより低い検出閾値をもたらすかもしれない、しかし、考えられます。これらの反応条件は、金属錯体、酸化剤および還元剤の任意の組み合わせの化学発光を探索し、テストするために使用することができます。
プロトコル部3,4におけるin vivo実験への移動、女性のヌード（近交系）マウス5-6週齢およびNU / J雄マウス6〜8週齢を用いました。静脈内注射の量のための8-33 nmolの[のRu（bpyで）3] Cl 2のPBSを100μLでマウス当たり（n = 5）を選択しました。動物は、注射後10分で屠殺し、腹腔を露出させました。マウスは、関心のある組織に向いネブライザー（ 図4）と生物発光リーダーに入れました。静脈内注入の撮像[のRu（bpyで）3] Cl 2を、化学発光シグナルが強い親水性小分子の腎排泄を示唆し、腎臓で主に検出された（ 図5）の場合。 PBS対てる（BPY）3] Cl 2を用いて注射したマウスのための信号対雑音比は、腎臓のため27/1および肝臓のための21/1でした。リンパ節のイメージングのために、80ナノモルてる（BPY）は3〕PBS10μlにCl 2をマウスの後肢足蹠に皮下注射した（N = 5）。マウスをCO 2窒息により15分後注射を屠殺しました。内側の後ろ足WAの両方をカバーする皮膚Sは、筋肉、リンパ節およびリンパ管を露出するために除去しました。膝窩リンパ節の後続の化学発光の視覚化は、リンパ節を含むという観察につながってる（BPY）を3]未処理のもの（167,000 P /（cm 2の×SR×S）が10±4.3倍高い輝度を示し2+ 17000 P /（cm 2と×SR×秒）; P <0.028）（ 図6）。
図1：ネブライザーの写真。使用パーツ：木造構造部品 （A、B、C）、スプレーボトル（D）、曲がった鋼棒（E）、ダクトテープ（F）、プラスチックケーブルタイ（G）、011サーボコネクタ部（H）、サーボモータ（I）、鉛筆（曲がったペーパークリップ（Kに保持されているJ））、プラスチック被覆線ツイストタイ（L）W1の線コネクタ（M）とバッテリーにつながるスピーカーケーブル（N）。この図は、もともと文献に発表された研究に基づいていますレンス19。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図 2. プロパティ[のRu（bpyで）3] 2+。構造（A）と、励起および発光スペクトル（B）のRu（BPY）3] 2+。酸化/還元基づく化学発光触媒サイクル（C）。この図は、もともと参照19に発表された研究に基づいています。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図3：の検出しきい値[のRu（bpyで）3] 2+。種々の濃度での代表的な信号強度 [のRu（bpyで）3] 2+顕微鏡スライド（A）に。検出閾値（赤い点線）と背景（黒い点線）（B）の撮像信号の定量化。この図は、もともと参照19に発表された研究に基づいています。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図4：化学発光イメージング。マウスおよび生物発光リーダーに位置付け噴霧器の模式図（A G>）とマウスのスプレー噴霧器の模式図（B）。この図は、もともと参照19に発表された研究に基づいています。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図5：[3のRu（bpyで）] 2+全身投与後の検出。白色光、化学発光、およびオーバーレイ（左から右へ）。 [ルテニウム（BPY）3] 2+とを噴霧の33ナノモルを注射したマウスの体腔内の画像（NH 4）2のCe（NO 3）6。右腎に向かって白い矢印ポイント。この図は、もともと参照19に発表された研究に基づいています。ftp_upload / 54694 / 54694fig5large.jpg "ターゲット=" _空白 ">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図6：[3のRu（bpyで）] 2+皮下投与後の検出。膝窩リンパ節イメージングを注射したマウスのために白色光、化学発光、および複合画像を示す[のRu（bpyで）3] 2+後肢中（上）およびPBS（下）。 80ナノモルを、PBSの10μLに、注射（A）15分後をイメージしました。 [ルテニウム（BPY）3] 2+（上）およびPBS（下）のために白色光と合成画像は、膝窩リンパ節（B）、切除処置されました。 PBSおよび[のRu（bpyで）3] 2+ -処置リンパ節（C）のための化学発光シグナルの定量化は、【選択データは、平均±SDを表します。この図はもともと研究に基づいています19 inreference発表しました。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
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Discussion
ここでは、光学的、化学発光レポーターによって作成された光子の放出を介して組織の輪郭を描くことのできる技術を提示しています。他のとは対照的に、多くのこの化学発光レポーター系は、非放射性であり、非常に高感度レベルでの検出を容易に画像化プローブを用い、技術4、5、6、7、8、9、確立されました。おそらくもっと重要なのは、化学発光イメージングは自己蛍光を最小化し、大幅にバックグラウンドシグナルを減少させる特性、 図20（光学的蛍光イメージングのように）入射光源を必要としません。
ルテニウム記者[のRu（bpyで）3] Cl 2を in vivoでを持っています イメージングのために許容できる毒性（INTraperitonealマウスLD 50：20ミリグラム/キログラム）21は 、水溶性（最大8 mmまで）で、血流中で安定しています。金属錯体の物理化学的性質は、十分に特徴付けられており、既に癌22、23の光線力学療法のために研究されてきました。酸化剤（NH 4）2のCe（NO 3）6、非常に低い毒性を有することが報告されている（経口ラットLD 50：1600から3200ミリグラム/ kg）を24および 20における最大2.57 Mの濃度で水に可溶でありますC 25°。この記事では、遠隔操作式噴霧装置の構成のための視覚的なデモだけでなく、テキストベースのガイダンスが提示されています。また、我々は、標準的な生物発光撮像装置において化学発光イメージングを実行するための強固なプロトコルを提供します。我々はvisualizatiのための[のRu（bpyで）3] Cl 2を使用することを示していますマウスにおける静脈内および皮下注射後の両方の組織の上。
しかしながら、任意の他の新生のイメージング技術と同様に、我々のプロトコルの改善の余地があります。我々は、この証明の原理研究は、生体系のための複数の化学発光アプリケーションの開発に拍車をかけることができると信じています。以下の点がこの技術をさらに改善し、その範囲を拡大して対処することができました。
リモートトリガ噴霧デバイスのより小さな第二世代は、したがって、空間分解能を向上させる、サンプルがカメラに近づくことができるようになります。改善された光学機器は、さらなる方法の検出限界を向上することがあります。プロトコルはまた、生きた動物を画像化するために拡張することができます。 （電流と電圧によって）トルクの正確な制御は、各スプレーでリリースされた試薬の量のより正確な制御を可能にするであろう。手入れの行き届いたネブライザーを維持することが重要です。 nozzを破壊することができる噴霧器をすすぎませんル。新しい電池は、噴霧器の適切な性能のために重要です。しかし、噴霧器に使用されるすべての材料は安価であり、容易に商業的に入手可能です。確立された合成プロトコルは、以下の[Ruの（BPY）3] 2+錯体は、容易にマレイミド26、アミン27、及びNHSエステル28、29を含む、種々のリンカーで修飾することができます。これは、小分子、ペプチド、または抗体にバイオコンジュゲーションを可能にし、従って、特定の分子標的30、31、32、33を容易にするであろう。最終的には、ターゲットとプローブの配信は、小さな病変を識別するために、かつ正確に、非常に高い特異性を有する手術室で外科的マージンを描写するために外科医を可能にすることができます。また、水溶性の高い[のRu（bpyで）のカプセル化3] 2+ナノ材料-の両方が標的と非標的-あり、彼らは外科的に34、35、36を削除されている間にも、病変の可視化を可能にしました。最後に、金属錯体レポーターの配位圏を修正及び/又は遷移金属中心自体を変更する可視及びNIR 37、38の範囲内の発光波長を調節し、微調整するために魅力的な経路を表します。
術中化学発光イメージングは、化学発光レポーターとだけそれらの毒性および溶解度の限度内で使用することができ、私たちの場合には、酸化剤を、必要とします。組織膜は、従って信号発生を組織中への酸化剤の拡散に対するバリアを表すことができます。化学発光レポーターが唯一のサイクルごとに1つの光子を生成しているので、生成された信号はかなり弱いです。手術室での周囲光は、したがって、技術の使用中に、カメラに入るのを防止しなければなりません。これは、周囲光が自然に排除される腹腔鏡アプリケーションの開発のために特に興味深いICIをレンダリングする可能性があります。
私たちは、この方法は手術室における外科医のための貴重なツールになるかもしれないことを願っています。放射能の不在を問わず、患者とオペレーティングチームに有益であり、潜在的に、より魅力的な代替手段にこの技術をレンダリング、少ない安全措置が必要になります。
ネブライザーとその測位良い結果を得るために重要な役割を果たしているの円滑な運営。次善の角度や面積は分散を知らせるために寄与することができます。制御ケーブルは、慎重にドアを通って置かなければならず、十分なケーブルは、それが窮屈か引きちぎらないように、生物発光リーダーの内側に残ることがあります。
最終的には、chemiluminescenceイメージングは、分子イメージングに非常に魅力的な新しいアプローチです。それは十分に確立された化学の基礎に基づいており、安価で容易に入手可能な材料を採用し、放射線と励起光源の両方を控え。その結果、私たちは希望に満ちた将来的には、化学発光イメージングは、疾患の外科的治療に大きな影響を持つことができると確信して両方です。
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Wood part A (12.5 × 2.5 × 1.8 cm) | Woodcraft | 131404 | Cut from a 3/4” x 24” x 30” birch plywood sheet |
| Wood part B (12.7 × 10.7 × 1.8 cm) | Woodcraft | 131404 | Cut from a 3/4” x 24” x 30” birch plywood sheet |
| Wood part C (11 × 2.5 × 1.8 cm) | Woodcraft | 131404 | Cut from a 3/4” x 24” x 30” birch plywood sheet |
| Screws (4 × 25 mm) | Screwfix | 79939 | |
| Harmon Face Values 3 oz mini sprayer | Bed, Bath and Beyond | ||
| stainless steel rod (10 cm of 1/16” steel) | Metals Depot Int. Inc. | 2192 | |
| Pencil Classic HB | Papermate | 58592 | |
| Paper clip | Office Depot | 221720 | |
| speaker cable | RCA Inc. | AH1650SN | |
| Energizer 9V alkaline battery | Energizer Holdings Inc. | EN22 | |
| Hitech HS-82MG Micro Servo Motor, 3.4 kg/cm output torque @ 6V | Hitech RCD USA Inc. | 32082S | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 28 cm plastic cable ties | General Electric Inc. | 50725 | |
| Duct tape | 3M Inc. | 3939 | |
| littleBits w1 wire | littleBits Inc. | w1 wire | |
| littleBits p1 power | littleBits Inc. | p1 power | |
| littleBits i2 toggle switch | littleBits Inc. | i2 toggle switch | |
| littleBits 011 servo | littleBits Inc. | 011 servo | |
| 20 cm plastic covered wire twist ties | Four Star Plastics | 71TIE8000 | |
| Tris(2,2′-bipyridyl)dichlororuthenium(II) hexahydrate | Sigma-Aldrich Inc. | 224758 | |
| Ammonium cerium(IV) nitrate | Sigma-Aldrich Inc. | 22249 | |
| Isofluorane | Baxter Healthcare | 1001936060 | |
| PBS | Sigma-Aldrich | PBS1 | |
| Ethanol | Sigma-Aldrich | 2854 | |
| Triethylamine | Sigma-Aldrich Inc. | T0886 | |
| Water | Water was purified using a Milipore Mili-Q (R ≥ 18 MΩ) | ||
| Female nude (outbred) mice | Jackson Laboratories | 1929 | age 5 - 6 weeks |
| Strain C57BL/6J | |||
| NU/J male mice at | Jackson Laboratories | 2019 | age 6 – 8 weeks |
| IVIS 200 bioluminescence reader | Caliper Live Science | ||
| Live Image 4.2 software | Perkin-Elmer | 128165 | |
| Microscope slides | ThermoScientific | 4951PLUS4 |
References
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