Introduction
심장 질환은 사망 전 세계적으로 1, 2의 주요 원인 남아있다. 뿐만 아니라,이 공통 심근 손상 부위 심근 경색 4 전신 3 심장에서 혈액을 펌핑 할 책임이 좌심실 (LV) 가장 근육 챔버이다. 좌심실 조직 죽음은 종종 수축기 심부전 발생합니다. 심장 질환의 동물 모델은 의치 심혈관 연구의 발전을위한 필수적이다. 마우스의 C57BL / 6 변형으로 인해 자신의 빠른 번식 시간, 저렴한 비용으로 동물 모델에 대한 인기가 선택되어 유전자 변형 완화했다. 심장 질환에 대한 연구를위한 대부분 외과 뮤린 모델은 왼쪽 관상 동맥 LAD 분기의 폐색을 포함한다. 젊은이는 왼쪽 둔각 한계 5,6라고도합니다. 젊은이는 좌심실 전방 및 안테 - 측면 벽에 혈액을 공급한다. LAD 폐색 연구는 때때로, 전방 경색을 유도 INT 확장을 목표로하고 있습니다하부 및 측면 벽 영역 (7) 오.
심근 경색의 연구에 자주 사용되는 두 모델은 만성 폐색 심근 경색과 심근 허혈 / 재관류 손상을 포함한다. 만성 폐색은 수술 주위 봉합 영구적으로 LAD 통해 혈액의 흐름을 차단하여 작성됩니다. 허혈 / 재관류 손상은 단지 일시적으로 일반적으로 30 ~ 60 분, 허혈성 기간을 같은 방법으로 많이 생성된다. 일과성 허혈을 달성하기 위해, 재관류 기간 뒤에 심장의 외막 표면에 LAD에 평행하게 배치되는 LAD 주위 흡장 봉합 관계 작은 PE-10 튜브, 호스 및 흡장 봉합사를 제거하고, 혈액이고 다시 동맥 통해 심근 내로 유동시켰다. 허혈 / 재관류 수술 인해 PROM 포함 인간 경색의 치료 평행 재관류 손상의 특성으로 임상 적으로 관련된 것으로 간주 한PT 관상 혈관 성형술 및 스텐트 삽입술 동맥, 관상 동맥 우회술. 일반적으로 이러한 수술하는 동안 마우스 마음에 LV의 허혈은 심근 벽의 볼 창백에 의해 확인된다. 그러나, 단순히 일정한 모니터링 조건으로 심전도 (ECG) 패드에서 수술을 수행하여, 볼 변화시켜 마우스 심근 허혈 및 재관류를 확인한 상기 ECG 파형을 관찰 할 수있다.
쥐의 심장이 네 챔버 구조를 포함 여러면에서 인간의 마음과 유사하지만, 마음도 차이가 있습니다. 성인 인간의 반면 분 (BPM) 당 700 비트입니다 ~ 60 ~ 100 BPM의 8,9 - 하나의 분명한 차이점은 성인 쥐의 평균 휴식 심박수는 600입니다. 또한, 마우스의 재분극 파도, J T는, 종종 탈분극의 QRS 복합체 (10)를 식별 할 명확한 ST 분절 어렵게으로 병합합니다. electrocardiographicall 과정을 복잡y는 그것이 T 파 인간에서 허혈 및 심근 경색 부상의 진단 마커로 사용되는 ST 분절의 상승이다, 심근 허혈을 확인, 임상 내가 nfarction 또는 STEMI yocardial ST 전자 levation의 m라고도합니다. 인간과 쥐의 파형의 주요 차이점 중 하나는 S 파가 바로 음의 T 파에 직접 전송하는 J 파 일 다음이다. 급성 심근 허혈 마우스에서 S 파의 진폭이 감소하고 동안 직접 비정상적인 J 파와 역 T 파 (11)에 의해 이어진다. T 개의 파 쥐 (11)의 재분극의 상당 부분을 표현하지 않는 것 같습니다. 인간의 차이 대 용어와 마우스에도 불구하고, 쥐의 심근 허혈 및 재관류의 ECG 확인은 여전히 가능하고 비교적 간단하다. 파형 해석을 단순화하기 위하여, 상기 SJT의 세그먼트는 ST-61000-4-3 구분이라NT를 여기에.
2013 년에 출판 STEMI 가이드 라인 .This은 동맥 때까지 환자의 관상 동맥 폐쇄의 식별에서 시간 프레임 미만 90 분이어야한다 재개되는 것을 의미 미만 90 분 (12)의 환자 도어 - 투 - 풍선 시간을 권장합니다. 박동 심장은 끊임없이 작동하기 때문에, 높은 산화 대사와 산소 소비 3의 높은 수준을 가지고있다. 이 제공하기 위해, 모세 혈관의 네트워크는 각각의 심근 3 사용할 수 있습니다. 그것은 단지 그 산소와 영양 공급을 방출하기 심장 몇 비트를합니다. 90 분 창에서 인간의 허혈성 심장 지역은 심장이 산소가 풍부한 혈액의 가치가 뛰는 5,400 사이 9,000 수신 차단 된 것입니다. 같은 90 분 창에서 마우스는 54,000 63,000에 심장 박동있을 것입니다. 뮤린 허혈 / 재관류 손상에 대한 실험 시간 포인트 (30)와 60 분 사이에 일반적이다.
개발의 중요성쥐 모델에서 심근 허혈 및 재관류를 확인하는 추가 방법을 보내고은 심근 허혈 / 재관류 연구에서 데이터의 일관성과 재현성에 깊은 의미를 가지고있다. 시각적으로 조직 색상의 변화에 대한 마음을 관찰하는 현재의 관행은 독립형 진단으로 적합하지 않습니다. 또한, 튜브의 제거와 봉합 후 재관류은 보장되지 않습니다. 동맥이 더 이상 해제 연결되어 있지만, 동맥이 절차를 수행하는 동안 지속적인 피해가 없을 수 있습니다 및 재관류 불가능 될 수 있습니다. 오히려 심근 및 rubor의 창백함 (붉은 색)의 관찰에 의존하기보다는 재관류를 확인 심전도 변화의 기록을 갖는 것이 유익 할 것이다. 허혈 / 재관류 손상의 마커를 표시하지 않는 하트는 빠르게 신고 할 수 있고, 진행하는 방법에 대한 결정은 연구자들에 의해 제조 될 수있다.
마지막으로, ECG의 기록을 확립하는 일에 걸쳐베이스 라인에서 변경허혈 및 재관류 기간 전자는 연구자가 초기 수술 후 심장을 계속 모니터링 할 수 있습니다. 수술이 완료 될 때 조사자는 현재 즉시 마음의 시력을 잃게됩니다. ECG는 수술 후 일 심근 시간에 발생하는 변화에 대한 통찰력을 얻을 수있는 간단한 방법입니다. 수술이 늦게 개발 Q-파도가 계속 표시 또는 조직의 죽음을 악화 밝힐 수 후 ECG는 시점에서 기록했다. 그러나, 효과적으로 기준 ECG 비교를 위해 사용할 수 있어야합니다, 신규 또는 악화 심전도 마커 게이지합니다.
12주 세 남성 C57BL / 6 마우스 -이 프로토콜은, 준비를 획득, 8을 사용하여 마우스 심장의 허혈 및 재관류를 확인하기 위해 심전도를 해석하는 방법을 보여줍니다.
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Protocol
동물에서 수행 모든 수술 절차는 관리 및 사용 실험 동물 (13) 또는 기타 적절한 윤리 지침에 대한 가이드에 따라 수행되어야한다. 프로토콜은 진행하기 전에 해당 기관에서 동물 복지위원회의 승인을 받아야한다.
1. ECG 준비
참고 : 시작하기 전에, 장갑, 안경 깨끗한 실험실 코트 또는 일회용 가운을 포함한 개인 보호 장비를 돈.
- 비 알코올 및 비 표백 계 염액을 이용하여 ECG 패드를 청소한다. 조심스럽게 전극 패드가 손상되지 않도록 초과 솔루션을 지워하는 닦아 섬세한 작업을 사용합니다.
- 심전도 패드가 가열 기능이 있으면, 그것을 사용할 수 있습니다. 마취 된 쥐 빠르게 체온을 상실하는 경향이있다. 수술 14에 걸쳐 37 ℃의 정상 체온 체온을 유지하기 위해 40 ~ 42 ℃로 패드를 가열한다. 몸의 성질을 모니터링직장 온도계를 사용하여 ature. 체온 ~ 37 ° C를 유지하기 위해 필요에 따라 패드의 온도를 조정한다.
- 대부분의 thoracotomies이 마우스는 다시 (부정사)에 누워 수행되는, 토글은 "부정사"설정으로 반전되어 있는지 확인합니다. 많은 ECG 패드는 경향이와 부정사 위치 사이를 전환하는 기능을 가지고있다. 오른쪽 방향을 선택하지 않으면 심전도 이벤트의 허위 진술이 발생할 수 있습니다.
- 5 % 흡입 이소 플루 란 1 L / 분의 산소를 사용하여 마우스를 마취. 마우스가 마취되면, ECG 패드에 전송 마우스는 마취 코 콘을 갖춘 2 % 및 1 L / 분 산소 이소 플루 란을 줄일 수 있습니다. 마우스의 발을 집게로 끼 때 반응하지 않는 마우스를 보장함으로써 적절한 마취를 확인합니다.
- 마취 동안 건조 및 각막 손상을 방지하기 위해 마우스의 눈을 통해 눈의 윤활 연고의 얇은 코트를 적용합니다.
- 보이는 모든 침구를 제거하는 닦아 젖은로 마우스의 발을 청소즉 발에 붙어있을 수 있습니다 또는 ECG 패드로 발에서 전기 자극의 전달을 방해 할 수 있습니다. 와이프와 드라이 발.
- 심전도 패드에있는 4 개의 금속 전극들 각각에 높은 전도성 전해질을 겔 (a USD 다임보다 약간 작음) 소량을 적용한다.
참고 : 젤의 작은 금액을 적용해야하는 것은 너무 많은 젤 어려운 테이프를 사용하여 패드에 발을 억제 할 수있다. 또한, 발은 테이프를 적용하기 전에 젖은한다면 수술 중 구속에서 미끄러 가능성이 높다. - 부정사 위치에 마우스로, 해당 전극 (그림 1)에 각각의 발을 억제하는 명확한 의료 테이프를 사용합니다. 첫째을 눌러 각 테이프의 조각을 발하고는 ECG 패드에 테이프를 준수합니다. 각 구속 발 전해질 젤과 전극과의 접촉에 있는지 확인합니다.
2. ECG 취득
- ECG 획득, conf의 사용 장비에 따라심전도 파형을 실시간으로 시각화 될 수 있도록 시스템을 igure. 심장 초음파 시스템에서 생리적 모니터링 설정을 이용하여 ECG 녹화를 들어, 라이브 B 모드 영상은 화면의 하단 실행 ECG 파형을 가질 것이다.
참고 : 가장 그 장비를 구성하는 방법을 결정하기 위해 개별 컴퓨터 사용자 가이드를 참조하십시오. - 심 초음파 기계에 B 모드 키 또는 다른 심전도 기록 장치에 해당하는 키를 눌러 ECG 파형의 실시간 시각화를 사용합니다.
- 진폭의 차이를 설명하기 위해 해상도를 조정합니다. 질문 파의 R 파 또는 트로프 (밸리)의 피크가 시각적 프레임 밖에있는 경우, 파형의 전체 높이를 관찰 할 수있을 때까지의 해상도를 조정한다.
참고 :이는 심 초음파 기계에 생리 설정 탭에서 수행 할 수 있습니다. 증가를 클릭하거나 전체 파형이 표시 될 때까지 화살표를 줄입니다.
- 진폭의 차이를 설명하기 위해 해상도를 조정합니다. 질문 파의 R 파 또는 트로프 (밸리)의 피크가 시각적 프레임 밖에있는 경우, 파형의 전체 높이를 관찰 할 수있을 때까지의 해상도를 조정한다.
- 이미지는 OBT 될 때마다ained, 도구의 ECG 패드를 취소합니다. 포셉 또는 손가락으로 ECG 기록하는 동안 마우스를 터치하면 파형을 방해합니다. 마우스가 어떤 심전도를 기록하기 전에 ECG 패드에 여전히 및 손길이 닿지 않은 있는지 확인하십시오.
- 마우스에 어떤 수술 절개하기 전에 컴퓨터의 "레코드"또는 "저장"기능을 사용합니다. 이 이미지는 나중에 비교 기준으로 사용됩니다.
3. 수술 절차 및 녹화 ECG
- 시작하기 전에 (부 프레 노르 핀 1.5 μg의, 복강 내)을 진통제와 마취 마우스를 주입한다. 허혈 / 재관류 수술 절차의 세부 사항은도 5의 다른 찾을 수있다.
- 화학적으로 또는 기계적으로 수술 부위 주위의 머리를 제거하고 betadine 용액 영역 소독. 식도와 기관지에 수직 절개 평행을 만들기 위해 메스를 사용합니다. 부드럽게 기관을 덮는 얇은 조직 때까지 절개 양쪽에 림프절로 이동드러난. 기관의 흰색 연골 고리가 표시 될 때까지 집게를 사용하여 부드럽게 조직을 분리합니다.
참고 : 우리는 일반적으로 나이 르 머리 제거 로션을 사용합니다. 로션은 1 분 ~ 수술 부위에 적용된다. 나이 르는 철저하게 식염수 또는 물을 사용하여 씻어된다. 높은 해상도 심장 초음파 검사는 (모낭을 감지 할 수있는) 전과 수술 후 수행하기 때문에이 방법은 우리의 실험실에서 바람직하다. 그러나,주의 등 성기 민감한 영역을 피하기 위해주의해야하고 충분히 전위 피부 화상을 피하기 위해 떨어져 나이 르 세척. - 신속 코 콘에서 마우스의 코를 제거하고 마우스의 입으로와 목을 향해 환기 튜브를 삽입합니다. 통기 튜브의 선단이 노출 된 넥 영역을 통해 볼 때, 기관의 시동과 함께 튜브를 정렬. 부드럽게 t 시각적으로 확인할 수있는 기관에 튜브 슬라이드까지 상승 압력을가하면서쪽으로 튜브 측을 흔들반투명 기관 hrough.
- 마우스가 삽관 과정에서 마취 남아 있는지 확인합니다. 삽관에서 일시 중지하고 약동하기 시작하면 코 콘에 마우스를 반환합니다.
- 문자열의 루프를 사용하여 루프를 통해 마우스의 두 앞니 후크와 문자열이 마우스의 머리를 안정하고 수술 중 움직이지 않는 환기 튜브를 보장하기 위해 ECG 패드에 종료 테이프. 신속 설치류 인공 호흡기에 환기 튜브를 연결하고 마우스의 무게에 따라 환기 설정을 조정합니다. 장소에 테이프 환기 튜브.
- 건조에서 조직을 유지하기 위해 따뜻한 식염수에 적신 거즈와 마우스의 노출 된 기관을 커버.
- 흉골의 왼쪽에 메스를 사용하여 수직 절개를합니다.
- 집게를 사용하여 부드럽게 근육 근막 층으로부터 층을 분리한다. 조심스럽게 보이는 혈관을 절단하지 않고 기본 근육층을 자른다.
- 집게를 사용하면, 세 번째 늑골을 잡아 당겨위쪽으로 부드럽게. 한 손으로 갈비뼈에 그립을 유지하고 조심스럽게 세 번째와 네 번째 늑골 사이 늑간 조직을 절단하는 수술 가위를 사용합니다. 폐는 손상되지 않았는지 확인합니다.
주 : 폐 의한 압력 구배의 손실에 곧바로 흉강은 수술로 절개 한 후에 천공 깊이 흉강으로 후퇴한다. 폐 계속하기 전에 후퇴 할 때까지 기다립니다. - 잡아 부드럽게 마음을 둘러싸고있는 심낭의 얇은 층을 분리 집게를 사용합니다.
- 견인기를 삽입하거나 수동으로 심장이 갈비뼈 사이에 볼 수있는 위치로 갈비뼈를 이동 리브 견인기로 집게를 사용합니다.
참고 :이 합자의 배치 중에 오른쪽 발을 중첩되도록 마우스의 왼쪽 발을 이동하는 것이 일반적이다. 이 좌심방, 또는 귓바퀴가, 합자의 배치시 쉽게 볼 수 있도록 마음을 배치하는 데 도움이됩니다. w 유효한 ECG 그주의왼쪽 아래 발은 전극 떨어져있는 동안 aveforms를 얻을 수 없습니다. 이러한 이유로는 봉합의 합자는 심근 조직을 통해하지만 매듭이 강화되기 전에 전달 된 후 그 전극에 발을 반환하는 것이 좋습니다. - 왼쪽 귓바퀴 아래, 시각적으로 LAD을 찾습니다. 신속 LV 공동 침투로 LAD 아래를 통과하는 깊이 충분하지만 깊은 아니라 심근에 7-0 실크 테이퍼 봉합 바늘을 삽입합니다. 봉합 합자의 자유 (비 바늘) 끝 부분에 남아있는 봉합 실크의 약 4cm가있을 때까지 통해 봉합의 합자를 당깁니다.
- 간단한 봉합 매듭을 묶어 시작합니다. 봉합 실크의 자유 단부는 매듭을 형성하는 루프를 통해 인출 된 후, 일시.
- 집게와 봉합 실크의 자유와 바늘 끝을 모두 잡고 형성하는 매듭 아래 및 심 외막 표면 위에 PE-10 튜브의 ~ 1cm 섹션을 삽입합니다.
- 마우스의 왼쪽 발을 교차하는 경우, 그 프로에 발을 반환전극 당. 체육-10 튜브가 마음에 봉합 될 수 있도록 매듭을 조입니다. ECG 기록 할 수 있도록 마우스로 모든 신체 접촉을 놓습니다.
- ~ 10 초 동안 순환에 ECG 파형을 허용합니다. "폐쇄의 시간"으로 시각적으로 심전도 파형 기록 파형을 확인합니다. T 개의 파장이 1 분 내에 진폭이 증가하지 않는 경우, 끈의 위치를 재평가.
- T 파의 진폭은 증가 하나 연구에서 동물을 폐기 또는 합자 배치를 해결하려고하지 않습니다.
- 육안 LV의 허혈성 말뚝을 둘러 박기을 확인하는 심근의 색상을 선택합니다.
- 체육-10 튜브 주위 ECG 변화와 심근 색 변화가 허혈을 표시하는 경우, 두 번 매듭 봉합.
- 따뜻한 식염수 거즈와 오픈 흉강을 커버.
- 기록 ECG 허혈성 기간의 지속 시간마다 5 ~ 10 분.
ECG를 사용하여 재관류 4. 확인
- 식염수 거즈 코브를 제거흉강 링과 마음을 시각화.
- 체육-10 튜브 꼭대기 봉합 실크를 잘라 블레이드를 사용합니다. 합자이 절단되면, PE-10 튜브의 부분을 제거하고 부드럽게 심근에서 봉합의 합자를 제거합니다.
- 마우스로 모든 신체 접촉을 풀고 ~주기 10 초 심전도 파형을 할 수 있습니다. 등의 기록 파형 "재관류의 시간." 원하는 실험 시점에 도달 할 때까지 ECG 파형을 매 50-10 분을 기록하는 것을 계속한다.
- 필요에 따라 진폭의 변화에 대한 해상도를 조정합니다. T 개의 파가 PE-10 튜브 및 합자의 제거시 변경되지 않는 경우, 재관류가 확인되지 않습니다.
- T 개의 파가 튜브의 제거시 변경, 두 연구에서 동물을 폐기 또는 합자 배치를 해결하려고하지 않습니다.
- 시각적으로 추가로 붉은 색에 복귀하여 재관류를 확인하는 심근를 검사합니다.
- 5-0로 늑간 공간을 봉합 닫기 흉강실크 봉합 수술시 입력 한 과잉 공기를 배출하는 마우스의 가슴에 부드러운 압력을가하면서. 그리고 근육 층 그리고 마지막으로, 피부를 봉합. 주 : 흉강에 압력을 적용하면 모든 마우스에서 공기의 흉강을 철수하기에 충분하지 않을 수 있습니다. 따라서, 피난의 주사기와 바늘 방법은 모든 공기가 배출되었는지 확인하기 위해 사용되어야한다.
- 전극에서 마우스의 발을 흡입 마취를 해제하고 제거하기 전에 마지막 ECG를 기록합니다. 2 L / min의 산소를 증가 마우스가 의식을 회복 할 때까지 환기를 유지한다.
- 마우스가 경색 변동을 방지하기 위해 일정한 온도 제어 된 환경, 예를 들면 가열 패드 또는 따뜻한 인큐베이터에 복구 할 수 있습니다. 마우스 얼굴을 찡 그리기 규모로 나타낸 바와 같이 필요에 따라 다음 수술 후 부 프레 노르 핀 24 시간에 마우스를 치료합니다.
참고 : 재관류에 대한 절차도 쑤 등에 의해 자세히 설명합니다 (5).
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Representative Results
정상 쥐의 ECG가 전기 이벤트 P, Q, R, S, J와 T. P에 대한 알파벳 마커로 그림 2에 표시되어 초기 심방 탈분극입니다. QRS는 심실을 통해 탈분극의 물결입니다. J 조기 재분극이며, T는 복구 (11)로 알려진 이종 재분극을 나타냅니다. 많은 실험실은 ST 분절 10,15-17과 SJT 세그먼트를 참조하는 대신 J 파 명칭을 사용하지 않도록주의해야한다. 여기에, 결과 및 분석은 대표 (40) 쥐의 실험 관찰을 기반으로합니다. 대부분의 마우스는 수술 과정에 걸쳐 유사한 파형 진행을 나타냈다. 유사한 파형을 나타내지 않았다 마우스를 추가 분석을 위해 신고하고 비 경색 동물을 고려 하였다. 유사 파형 결과는 종 외. (15)에 의해보고되었다.
쥐의 마음 스와지역 허혈에서 기인 LAD 폐색에 일반적으로 증가 R-파의 진폭뿐만 아니라 ST 분절의 최종 높이 다음에 JT-세그먼트의 초급 피킹 등을 보여 ffering도 3을 보여줍니다 급성 심근 허혈의 첫 번째 기호.; T 파의 초급 피킹. 이 도면에서 알 수있는 바와 같이, T 파 기준선 조건에서 진폭이 증가하고있다. 그러나, 이는 기준 파형 않는 한 S 파 여전히 깊게 부정적인 돌출되므로 ST 분절 상승은 아직 없다.
기준 ECG 구성은 부정적으로 돌출 S 파 (그림 2)가 표시됩니다. 시간이 진행됨에 따라, 심전도 변화가 주목된다. 명세서 세그먼트는 S 파의 단부 및 T 파의 시작 사이의 구간으로 정의된다. 이 ST-세그먼트는 인간에 분명하다. 때문에 높은 심장 박동에,이 부분은 마우스에 병합되고, 추가, 조기 재분극 "J 파"9월S-와 T-파도 arates. 따라서, 등전위 선 이상으로 S 파의 높이가 ST 분절 상승의 쥐 버전으로서 고려되어야한다. 그림 4에서 초기 경색에 국소 빈혈의 진행은 ST 분절 상승 볼 수 있습니다. 다음은 S 파가 등전위 선 위에, 높은 진폭으로 표시됩니다. J 개의 파장은 기준 파형 (도 2)와 비교하여, 특히 증가된다. 따라서, ST-세그먼트는 상해 / 경색 (10)의 지시 인 상승.
그림 5는베이스 라인에서 한 마우스의 진행을 재관류를 통해 모든 방법을 따른다. 첫 번째 파형은 기록 된 기준이었다 정상 동 율동을 표시합니다. 합자가 묶여 및 동맥이 폐색 된 후 두 번째 파형은 ECG 1 분을 표시합니다. 이 라인의 빨간색 원은 초급 T 파의 피크를 나타냅니다. 비교 위스콘신 경우일 "기준선"T 파가 상승되는 것을 알 수있다. 세 번째 파형은 5 분의 시점에서 완전한 ST 분절 상승을 보여준다. 은 "1 분 허혈"이미지에서 S 파 여전히 등전위 선을 통과 음 돌출시켰다. 그러나 5 분의 복합체의 S 부분까지 부정이해야와 J- 및 T-파도로 진행하기 전에 도달하지 않습니다. S 자 및 T 파의 세그먼트가 등전위 선에서 상승하기 때문 ST 분절 상승으로 설명한다. 지역 허혈의 다른 전기 생리 학적 마커는 QRS 복합체의 선두로부터 연장되고 T 파의 끝까지 계속 QT 간격 (16)으로 확대된다. 국소 빈혈의 20 분에서, QT 간격이 확대했으며 ST-세그먼트는 여전히 상승. 국소 빈혈의 45 분 후, QT 간격 남아 확대 및 ST 분절 상승 된 남아있다.
이 심근의 재관류30 분 이하의 기간 동안 허혈성 된 마우스에 기본 상태로 다시 복귀 ECG가 발생한다. 프레 다와 Burlacu은 쥐의 심전도 변화, 허혈성 시간, 경색의 심각성 (17) 사이의 상관 관계를 설립했다. 이 1 시간의 허혈 기간 영구 ECG 변화를 일으킬 않은 반면, 30 분의 허혈 기간 영구 ECG 변화를 유발하지 않았 음이 관찰되었다. 또한, 허혈의 24 시간 후 폐색 된 동맥의 재관류은 회수 효과 (17)이 없었다. 일반적으로, Q 파가 직전 탈분극 QRS 복합체 약간 하방 돌출부로서 식별 될 수있다. 상당한 근육의 죽음은 10로 설정하기 시작 중요한, 또는 병적 Q 파 심근 허혈의 발병 직후 개발할 수 있습니다. 상당한 Q 파 넓은 Q 파의 결과로, 대응하는 R 파의 높이의 적어도 1/3 또는 긴 시간으로 정의된다. 죽은 심근 편향 ELECTRICA의 영역에서 중요한 Q 파 결과멀리 전극 (7)에서 리터 전류. 재관류 5 분, 깊은 증거 한 후, 상당한 Q 파 (그림 5)를 표시하기 시작합니다. 또한, T 파가 등전위 선 (그림 5)로 돌아갑니다. 재관류 30 분 후, 음의 Q-파도가 남아 가능성이 영구적 인 손상을 보이고있다. 이 시점에서, Q 파가 넓고 깊은 및 죽어 심장 조직 손상 부위 (도 5)의 주위에 전기 전류를 편향되는 것을 나타낸다.
연속 허혈 후, 상해 및 경색으로 진행이 향상 부정적인 T 파 투사 (그림 5, 30 분 재관류, 두 번째 빨간색 원)에 연결됩니다. 때문에 진정한 경색이 강화 된 T 파 투사는 일반적으로 7 영구적 인 것입니다. 30 분 재관류 파형의 두 번째 빨간색 원은 역 T 파 (그림 5)이 나타납니다 보여줍니다. 5 경우차 30 분 T-파도는 T 파가 더 부정적으로 돌출되어 있는지가 분명 비교된다. 중요한 Q-파도와 결합이,이 심장에 영구적 인 조직 손상의 증거를 제공합니다. 이는 흡입 이소 플루 란 마취 심박수를 감소시키고, 따라서-QT 간격을 증가 시킨다는 것을 알아야한다. 그러나 복구 T 파의 진폭은 18 영향을받지 남아있다.
상술 한 변화는 양적 전압의 관점에서 분석 될 수있다. .csv 파일로 생리 데이터 내보내기 매우 많은 양의 데이터를 제공 6은도. 분수 - 중 - 밀리 세컨드 속도 ECG 값 (진폭)을 제공 할뿐 아니라이 원한다면 호흡, 온도 프로브, 혈압 커프 등의 다른 데이터를 포함하도록 선택 될 수있다. 도 7에 도시 된 바와 같이 이러한 양적 데이터 그래프 될 수있다. P 파에 P 파의 파형은 일련의 그래프로는 ECG를 시각적 도움구성 추세. 500 밀리 초 시간주기는 짧은 시간에 충분한 파형 발생하지 않을 수 있으며, 그래프를 만들 추가 시간은 표준 컴퓨터 모니터에서 보면 복잡하고 전기 생리 이벤트 누락되거나 어려운 인식 나타 때문에 시각화하기 좋은 시간 프레임 .
그림 1 :. ECG 패드에 마우스의 올바른 배치이 마우스는 부정사 위치에 위치한다. 마우스의 발 하나 하나가 ECG 패드에 대응하는 전극에 녹화된다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2 : 정상 쥐 기준ECG 파형. 정상 쥐의 기본 심전도는 심장의 전기 이벤트를 설명하는 데 사용되는 문자 P, Q, R, S, J 및 T 표시되어 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 3 :. T 파 상승 또한 초급 T 파 또는 피킹으로 알려져 있습니다. T 개의 파를 증폭 및베이스 라인 T 파 (그림 2)보다 높다.되는 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 4 :. ST 분절 상승이 그림 DISPL보안 목표 명세서 세그먼트로 관찰 할 수 AYS ST 분절 상승은 등전점보다 높다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 5 :. 허혈 / 재관류 수술의 과정을 통해 일반적인 ECG 변경이 그림은 심근 허혈 / 재관류 수술의 기간에 걸쳐 하나의 마우스를 다음과 같습니다. 첫 번째 파형은 기록 된베이스 라인 (기준)을했다 정상 동 율동을 표시합니다. 합자가 묶여 및 동맥이 폐색 된 후 두 번째 파형 (1 분 허혈)는 파형 1 분을 표시합니다. 이 라인의 빨간색 원은 초급 T 파의 정점을 보여줍니다. 세 번째 파형 (5 분 허혈)에 빨간색 원은 전체 ST 분절 상승을 표시합니다. FOU에 빨간색 원 r 번째 파형 (20 분 허혈)는 확대 QT 간격 및 S 파가 여전히 상승을 표시합니다. 다섯 번째 파형에 빨간색 원 (45 분 허혈) 디스플레이는 QT 세그먼트를 확대 및 ST 분절 상승. 여섯 번째 파형 (1 분 재관류)의 일곱 번째 파형 (5 분 재관류) 깊은, 중요한 Q-파형 표시에 45 분 ischemia.The 빨간색 원에 비해 큰 변화가 표시되지 않습니다. 여덟 번째 파형 (30 분 재관류)의 첫 번째 빨간색 원은 두 번째 빨간색 원이 가능한 T 파 향상을 표시하면서. 상당한 Q-파도를 표시 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 6 :.이 스프레드 시트를 .csv 파일로 내 보낸으로 생리 학적 데이터는이 그림은 생리 학적 데이터를 보여줍니다.심판 = "https://www.jove.com/files/ftp_upload/54814/54814fig6large.jpg"대상 = "_ 빈">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
도 7 :. MV 값 그래프는 도면에 표시된 그래프는 생리 데이터 파일 (도 6)를 사용하여 세 개의 연속 완벽한 파형의 MV 값을 나타낸다. 그래프는 생리 학적 데이터 파일에서 포인트를 사용하여 간단한 선 그래프입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
심근 허혈 및 재관류를 확인하기위한 추가 방법은 흡장 합자의 정확한 위치를 보장으로 ECG 변화를 사용. 합자 위치의 정확도는 동물들 사이에서 데이터의 변동성을 줄이는 것이 중요합니다. 마우스 마음에 LAD 시각화하기 어려운 동맥이다. 따라서, 심전도 변화를 시각적 창백를 보충하면 합자 및 결과 조직 손상의 정확한 위치를 확인하는 데 도움이됩니다.
심전도 패드 심장의 비 침습적보기를 제공하기 때문에, 다수의 심전도는 연구 기간 동안 얻어 질 수있다. 이 중 및 수술 후 발생하는 심근 변화의 더 나은 이해를 제공 할 수 있습니다. 수술 후의 비교를 위해 사용하는 기준 ECG를 획득하는 것이 중요하다. 나중에 조직 죽음과도 심실 동맥류는 전기 생리 신호와 ECG 구성 변경의 처짐에 의해 관찰 할 수있다. 이 통찰력을 제공 할 수있다심부전의 진행에.
심 초음파 시스템을 이용하여 ECG 측정의 이점은 전 또는 허혈 / 재관류 수술 후 심장의 구조적 및 기능적 파라미터의 동시 측정을 포함한다. ECG 기록하는 시스템의 한계는 심장 초음파 검사 시스템을 구입하는 높은 비용을 포함한다. 실험은 다중 일 일정한 ECG 모니터링이 필요하지만 경우에, 기록 및 다양한 시간 간격으로 파형을 분석하는 프로그램시켜 될 수있는 소프트웨어에 대응하는 원격 원격 측정 ECG 유닛을 포함 ECG 기록 가능한 다양한 장치들이있다. 그러나, ECG의 원격 측정 단위의 많은 주입 절차 나 특별한 서식지를 필요로한다. 또한 많은 바꾸는 전극 옵션 전극 클립 바늘 포함 존재한다. 개흉술을 통해 허혈 / 재관류 수술은 매우 침습적 절차입니다. 심장 초음파 맥으로 ECG 패드를 사용하는 장점HINE 수술하는 동안 동물에 연결된 전선 및 별도의 외과 적 치료와 비 침습적 절차를 포함한다. 그러나 연구자들은 실험실과 실험의 요구에 가장 적합한 장비를 결정해야한다.
앞서 언급 한 바와 같이, 이소 플루 란 마취 심박수를 감소시킨다. 또한, 이소 플루 란은 K ATP 채널의 활성화를 통한 심장 보호 할 수 있으며, 19 개 발견되었다 따라서, 경색 크기를 감소시킨다. 마우스에서 전신 마취는 주사 에이전트를 사용하여 유도 할 수있다. 흡입 마취 특히 장기간의 절차, 더 큰 안전을 제공 않습니다. 그러나, 흡입 마취제는 정밀 유량계 및 기화기 특정 호흡 시스템, 환경 오염을 방지하는 효과적인 청소 시스템 등의 복잡하고 고가의 장비를 필요로한다. 주 사용 마취제의 단점은 초기 량을 정확하게 연장 ANE의 깊이를 조절할 기회가 선택의 어려움을 포함sthesia 장시간 복구 등 마취의 선택은 연구 20의 과정 및 목표의 길이에 따라 적응되어야한다.
경색의 일관성과 재현성을 개선하는 데 도움이됩니다 쥐에서 허혈 / 재관류 손상을 확인하기위한 보조 방법으로 ECG를 사용하여뿐만 아니라 양적 동향을 구축을 통해 기술의 미래 응용 프로그램에 대한 가능성을 엽니 다. 연구자들은 특정 실험 그룹 내 유사한 ECG 구성을 알 수 있습니다. 야생형과 비교할 때, 예를 들면, 유전자 변형 동물 그룹은 수술 후 비정상적 넓은-QT 간격을 나타낼 수있다. 연구자들은 허혈 및 재관류 손상의 단독 확인 심근 색상 변경을 사용하는 경우이 정보 데이터가 누락되었을 것이다. 야생형 및 형질 전환 생쥐 간의 비교 연구를 들면, 램버스 규칙 지침에 고려는 특히 연령, 성별과 관련하여 도움이 될 수있다, 눈부신과 동물 (21)의 임의.
결론적으로, 심근 허혈 / 재관류 손상의 추가 확인이 여러 혜택을 제공합니다. 보조 기술로 ECG를 사용하여 수술의 일관성을 확립 할 수 있습니다. 이는 높은 품질의 데이터를 제공하는 한편, 동물 용의 수를 감소시킬 수있는. 또한 연구자들은 심장 손상, 조직의 사망 및 / 또는 시간이 지남에 따라 비 침습적 리모델링을 모니터링 할 수 있습니다. 마지막으로, 심근 허혈 / 재관류의 확인으로 ECG를 사용하여 전기 생리 정량적 경향을 확립 할 가능성을 제공한다.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Vevo 1100 | Fujifilm Visual Sonics |
Echocardiography Machine | |
| Mouse Handling Plate | Fujifilm Visual Sonics |
Heated ECG plate | |
| Signa-Gel | Highly Conductive Multi- | ||
| Electrode Gel | Parker | 15-25 | Purpose Electrolyte |
| Transpore Medical Tape | 3M | 1527-0 | |
| PI-Spray II | Pharmaceutical Innovations | NDC 36-2013-25 | Cleaning agent for ECG plate |
| C57Bl6 Mice | The Jackson Laboratory | 000664 | Male, 8 - 12 wk |
| IsoThesia-Isoflurane | Henry Schein | NDC 1169-0500-1 | |
| Excel | Microsoft | ||
| Systane Nighttime Lubricant Eye Ointment | Alcon | 65050935 | |
| 7-0 Perma-Hand Silk Sutures | Ethicon | 640.O32 | |
| 5-0 Perma-Hand Silk Sutures | Ethicon | K809.O32 | |
| Surgical Scissors | ROBOZ | RS-5881 | |
| Forceps | Fine Science Tools | 11052-10 | |
| Gauze | Bio Nuclear Diagnostics Inc | DIS-022B | |
| Needle Holder | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| Buprenex CIII | Patterson Veterinary | 0-891-9756 | Buprenorphine Hydrochloride Analgesic |
| Betadine | Purdue Products | 67618-150-08 | |
| Nair | Church and Dwight Co. | NRSL-22339-05 |
References
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