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आस्तीन Gastrectomy की तकनीक और संशोधित चूहों में रॉक्स एन वाई गैस्ट्रिक बाईपास

Published: March 20, 2017 doi: 10.3791/54905
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 2, 3, *1,4, *1
1l'Institut du Thorax, INSERM, CNRS, UNIV Nantes, 2CHU Nantes, Institut des Maladies de l'Appareil Digestif, INSERM U913, 3l'Institut du Thorax, INSERM, CNRS, UNIV Nantes, CHU Nantes, 4Service de Clinique Chirurgicale Digestive et Endocrinienne, CHU de Nantes
* These authors contributed equally

Abstract

मोटापे की वजह से (2003 से 2008 तक) यूरोप में 4 28% पुरुषों के लिए महिलाओं के लिए% करने के लिए और 6.2 के लिए 36.5 की व्यापकता के साथ एक प्रमुख सार्वजनिक स्वास्थ्य समस्या है। रुग्ण मोटापा अक्सर इस तरह के रूप टाइप 2 मधुमेह, उच्च रक्तचाप, और dyslipidemia चयापचय जटिलताओं के साथ जुड़ा हुआ है, जीवन प्रत्याशा और गुणवत्ता को कम करने। कोई प्रभावी noninvasive उपचार के अभाव में, बेरिएट्रिक सर्जरी रुग्ण मोटापे के साथ रोगियों (बॉडी मास इंडेक्स (बीएमआई)> 40 किग्रा / एम 2) के लिए एक मूल्यवान चिकित्सीय विकल्प है, लंबी अवधि के लिए अग्रणी, वजन घटाने और चयापचय जटिलताओं में सुधार निरंतर । हालांकि, बेरिएट्रिक सर्जरी के लाभदायक प्रभाव को बनाए रखने के लिए अंतर्निहित सेलुलर और आणविक तंत्र अभी तक पूरी तरह समझ नहीं रहे हैं। कई आनुवंशिक रूप से संशोधित उपलब्ध उपभेदों के कारण, माउस मॉडल बेरिएट्रिक सर्जरी के pleiotropic लाभकारी प्रभाव के पीछे आणविक तंत्र का पता लगाने के लिए सबसे सुविधाजनक पशु मॉडल है। यहाँ, हम अनुकूलित healthc विस्तृतआस्तीन gastrectomy और संशोधित रॉक्स एन वाई गैस्ट्रिक बाईपास: तरीकों और दो सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल बेरिएट्रिक सर्जरी के लिए चूहों में शल्य प्रोटोकॉल रहे हैं। बेरिएट्रिक सर्जरी के उपचारात्मक प्रभाव अंतर्निहित आणविक तंत्र का गूढ़ रहस्य नई चिकित्सा विज्ञान लक्ष्यों की पहचान करने का वादा करता है।

Introduction

मोटापा और मधुमेह की दुनिया भर में महामारी गंभीरता में विनाशकारी है। दुनिया भर में दो अरब से अधिक वयस्कों (जनसंख्या का 30%) या अधिक वजन (बीएमआई> 25 किग्रा / एम 2) या मोटापे से ग्रस्त (बीएमआई> 30 किग्रा / एम 2) कर रहे हैं 1। इस तरह के रूप में टाइप 2 मधुमेह, उच्च रक्तचाप, और dyslipidemia चयापचय जटिलताओं के साथ आ सकते हैं, वृद्धि की रुग्णता और मृत्यु दर के लिए अग्रणी। मोटापे की वजह से समग्र मृत्यु दर और कैंसर 2 की व्यापकता बढ़ जाती है। कोई प्रभावी noninvasive उपचार की कमी के कारण, बेरिएट्रिक सर्जरी है कि लंबे समय तक, निरंतर वजन कम 3, 4 के लिए नेतृत्व कर सकते हैं एकमात्र विकल्प का प्रतिनिधित्व करता है। विभिन्न शल्य चिकित्सा पद्धतियों की एक संख्या विकसित किया गया है, लेकिन आस्तीन gastrectomy (एसजी) और रॉक्स एन वाई गैस्ट्रिक बाईपास (RYGB) दो प्रक्रियाओं के सबसे अधिक नैदानिक ​​अभ्यास में इस्तेमाल कर रहे हैं। एसजी प्रक्रिया के दौरान, पेट की प्रारंभिक मात्रा का 80% हैहटा दिया; इस प्रकार, इस तकनीक को प्रतिबंधात्मक सर्जरी कि तृप्ति को बेहतर बनाता है में से एक है। RYGB प्रतिबंधात्मक-malabsorptive तकनीकों में से एक है। RYGB के दौरान एक छोटे से गैस्ट्रिक थैली (कुल गैस्ट्रिक मात्रा का 1-2%) बनाया जाता है और आंत एक वाई-आकार, जो पाचन और पोषक तत्वों का अवशोषण में देरी में पुन: व्यवस्थित किया जाता है। इन दोनों तकनीकों महत्वपूर्ण शरीर के वजन में कटौती और सामान्य सुधार अक्सर जुड़े comorbidities में (जैसे, उच्च रक्तचाप, टाइप 2 मधुमेह, और dyslipidemia) 3 के लिए नेतृत्व, एक उच्च दक्षता RYGB में देखा है। हालांकि, बेरिएट्रिक सर्जरी के pleiotropic लाभकारी प्रभाव के पीछे आणविक तंत्र अक्सर पूरी तरह से स्पष्ट नहीं कर रहे हैं। कई आनुवंशिक रूप से संशोधित उपलब्ध उपभेदों के कारण, एक माउस मॉडल इन आणविक तंत्र का पता लगाने के लिए सबसे सुविधाजनक पशु मॉडल है।

हालांकि, बेरिएट्रिक प्रक्रियाओं छोटे पशु मॉडल और requir के लिए सीधे अनुकूल करने के लिए मुश्किल हो जाता हैई उच्च शल्य निपुणता। एसजी आसानी से एक बहुत अच्छा जीवित रहने की दर के साथ कृन्तकों में प्रदर्शन किया जा सकता है, RYGB गंभीर आंत्र अवरोधों 5 की वजह से चूहों में घातक है। विभिन्न संशोधित RYGB तकनीक इस समस्या को, विशेष रूप से oesojejunostomy 5 प्रतिक्रिया करने के लिए प्रस्तावित किया गया है। एक पेट काटना बिना gastrojejunostomy: यहाँ, हम एक और विकल्प प्रस्तुत करते हैं। इस संशोधित RYGB reproduces मनुष्यों में मनाया लाभकारी प्रभाव से सबसे अधिक (यानी, एक महत्वपूर्ण शरीर के वजन में कमी और ग्लूकोज और लिपिड homeostasis में एक सुधार)।

इस पांडुलिपि को संक्षेप में और चूहों में एसजी और RYGB के तकनीकी और प्रयोगात्मक विवरण पर चर्चा और वीडियो की मदद से इन प्रक्रियाओं को सुविधाजनक बनाने के लिए करना है। एक विशेष प्रकाश डाला preoperative और पश्चात स्वास्थ्य प्रोटोकॉल है कि विटामिन और लौह तत्वों की कमी की कमी की अनुमति के अनुकूलन के बारे में बनाया जाएगा।

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Protocol

पशु और आवास: 8 सप्ताह पुराने C57BL / 6 नर चूहों प्राप्त करते हैं। वसा से 35% किलो कैलोरी, 25.8% caseine, 1.30% खनिज ऐन, 1.30% विटामिन, 1.70% dicalcium फॉस्फेट, 0.7: 10 सप्ताह की उम्र में, पानी के लिए C57BL / 6 चूहों मुक्त उपयोग और एक उच्च वसा वाले आहार (DIO आहार देना % कैल्शियम कार्बोनेट, 2.10% साइट्रेट पोटेशियम, 0.026% कोलीन bitartrate, 8.9% सूक्रोज, 0.384% cystine, 6.5% सेल्यूलोज, 31.7% चरबी, 3.3% सोयाबीन तेल, और 16.29% maltodextrine) 8 (एसजी) या 14 (RYGB) सप्ताह बेरिएट्रिक सर्जरी से पहले। वजन को बढ़ावा देने के लिए, चूहों RYGB सर्जरी (दिखावा और RYGB) पानी युक्त 20% फ्रुक्टोज के लिए समर्पित देना (डब्ल्यू / वी) उच्च वसा वाले आहार के अलावा।

आचार कथन: सभी प्रोटोकॉल कदम नीचे वर्णित पशु प्रयोग के लिए आचार समिति के दिशा निर्देशों का पालन के अनुमोदन नंबर 01,953.01 के तहत डे ला लॉयर भुगतान करता है।

1. सामान्य शल्यक्रिया पूर्व तैयारी

  1. 6 घंटे पहले सर्जरी के लिए चूहों तेजी से। जेल diएट भोजन 3 दिनों सर्जरी और विशेष रूप से एक दिन पहले सर्जरी से पहले दिया गया था। (; 0.4 एल / मिनट dioxygen) 5% isoflurane (0.4 एल / मिनट) और ओ 2 के साथ एक कक्ष में संज्ञाहरण प्रेरित। इस बात की पुष्टि करने के लिए कि anesthetization प्रभावी है एक पैर के अंगूठे चुटकी परीक्षण प्रदर्शन। दर्दनाशक दवाओं (0.1 मिलीग्राम / किलो buprenorphine), एंटीबायोटिक दवाओं (10 मिलीग्राम / किग्रा marbofloxacine), और समर्थक कैनेटीक्स (1 मिलीग्राम / किग्रा Metoclopramide) चमड़े के नीचे इंजेक्शन के माध्यम से प्रशासन।
  2. शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं (प्रयोगशाला यातायात और वेंटिलेशन प्रशंसकों से दूर) के लिए एक विशेष कार्य क्षेत्र का आवंटन। समर्पित कठिन सतह कीटाणुनाशक के साथ शल्य चिकित्सा क्षेत्र को साफ। सर्जरी के दौरान माउस homeothermy बनाए रखने के लिए काम कर अंतरिक्ष के क्षेत्र पर एक हीटिंग पैड रखें। हीटिंग पैड पर एक साफ, शोषक underpad लागू करें।
  3. उरोस्थि से पेट में दाढ़ी एक बिजली के रेजर का उपयोग कर श्रोणि के लिए। निष्फल प्लास्टिक की चादर (आंकड़े 1 ए और 2 ए) में माउस पेट लपेटें और हीटिंग पी पर लापरवाह स्थिति में माउस जगहविज्ञापन।
  4. आँखों पर पशु चिकित्सक मरहम लागू जबकि संज्ञाहरण के तहत सूखापन को रोकने के लिए। नाक शंकु में माउस प्लेस और 2% isoflurane (0.4 एल / मिनट) और ओ 2 (0.4 एल / मिनट) के साथ संज्ञाहरण बनाए रखें।
  5. सर्जरी शुरू करने से पहले, एक बाँझ परीक्षा गाउन, एक डिस्पोजेबल स्क्रब टोपी, एक facemask, और बाँझ दस्ताने पर डाल दिया। एक autoclaved पैकेज एक निष्फल शल्य चिकित्सा उपकरण सेट है, जो शल्य चिकित्सा के सभी चरणों के लिए आवश्यक है युक्त खोलें। निष्फल प्लास्टिक की चादर में एक खिड़की में कटौती और 2 लगातार povidone आयोडीन समाधान के साथ त्वचा कीटाणुरहित।

2. आस्तीन Gastrectomy: सर्जिकल प्रक्रिया

  1. माध्य laparotomy (चित्रा 1 बी)
    1. एक दूरबीन माइक्रोस्कोप के तहत और एक छुरी के साथ, उदर गुहा (पेट की मांसपेशियों को नुकसान नहीं है) खोलने के लिए पेट के बीच में उरोस्थि से एक midline चीरा प्रदर्शन करते हैं। एक बाँझ 37 डिग्री सेल्सियस खारा समाधान के साथ लथपथ सेक के साथ त्वचा की रक्षा।
  2. पेट जोखिम (चित्रा 1 सी)
    1. धीरे पेट सिक्त-कपास swabs का उपयोग करते हुए लामबंद। अपने पार्श्व बंद संयोजी ऊतक सिक्त कपास swabs या सूक्ष्म कैंची का उपयोग संलग्नक से पेट मुफ्त।
    2. धीरे, पेट पूरी तरह से अमल में लाना और एक hemostatic कोलेजन पेट के पीछे सेक जगह है। 8.0 गैर absorbable sutures के साथ pylorus और पेट में अधिक से अधिक वक्रता साथ घेघा वाहिकाओं सीवन खून बह रहा है (चित्रा 1 डी और ई) भविष्य से बचने के लिए। नोट: Hemostat उपयोग ऊतकों को नुकसान पैदा कर सकते हैं, केवल ऊतक कि उद्देश्य उच्छेदन किया जाना है पर इसका इस्तेमाल करने के लिए सुनिश्चित करें।
  3. पेट के हृदय क्षेत्र की लकीर (बुध्न)
    1. जठरनिर्गम क्षेत्र (कोष) और पेट (बुध्न) के हृदय क्षेत्र (चित्रा 1F) के बीच शारीरिक लाइन वर्तमान पर एक gastrotomy प्रदर्शन करना।
    2. प्रत्येक की ओर 2 सिक्त कपास swabs के साथ अवशिष्ट भोजन को दूरपेट की तरफ। सूक्ष्म कैंची का प्रयोग, बुध्न और पेट (चित्रा 1G) के कोष के बीच सीमा के साथ पेट काटा।
    3. एक hemostatic कोलेजन प्रमुख रक्तस्राव के मामले में 2 मिनट के लिए सेक दबाएँ। चीरा (चित्रा 1H) के अंत करने के लिए गैस्ट्रो oesophagal जंक्शन से 8.0 गैर absorbable sutures के साथ पेट उद्घाटन बंद करें।
  4. पेट की जठरनिर्गम क्षेत्र की लकीर (कोष)
    1. अधिक से अधिक वक्रता के साथ पेट लकीर को पूरा के रूप में तो पेट (चित्रा 1 मैं) का लगभग 80% हटा दें। 3 मिमी के लिए एसजी की चौड़ाई का मानकीकरण। एक hemostatic कोलेजन प्रमुख रक्तस्राव के मामले में 2 मिनट के लिए सेक दबाएँ।
    2. 8.0 गैर absorbable सिवनी (चित्रा 1J) के साथ पेट की जठरनिर्गम क्षेत्र के उद्घाटन बंद करें। धीरे पेट के प्रत्येक पक्ष की ओर 2 सिक्त कपास swabs रोल सुनिश्चित करने के लिए कि सिवनी रिसाव प्रूफ है।
    3. रिसाव के मामले में 8.0 गैर absorbable sutures के साथ पूरा करें। hemostatic कोलेजन लिफाफे निकालें और पेट की गुहा को पेट वापसी। एक hemostatic कोलेजन छोड़ दो सीवन के खिलाफ सेक।
  5. पेट बंद
    1. 5.0 गैर absorbable sutures (चित्रा 1K) के साथ पेट की दीवार की मांसपेशियों की परत को बंद करें। 1% isoflurane एकाग्रता को कम करने से संज्ञाहरण कम करें। त्वचा 5.0 गैर absorbable sutures (चित्रा 1L) का उपयोग बंद कर दें।

3. रॉक्स एन वाई गैस्ट्रिक बाईपास: सर्जिकल प्रक्रिया

  1. माध्य laparotomy
    1. एक दूरबीन माइक्रोस्कोप के तहत और एक छुरी के साथ, उदर गुहा (पेट की मांसपेशियों को नुकसान नहीं है) खोलने के लिए पेट के बीच में उरोस्थि से एक midline चीरा प्रदर्शन करते हैं। एक बाँझ 37 डिग्री सेल्सियस खारा समाधान (चित्रा 2 बी) से लथपथ सेक के साथ त्वचा की रक्षा।
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  2. Biliopancreatic अंग और पाचन अंग
    1. आंत (चित्रा -2) अमल में लाना। उपाय pylorus से 8 सेमी और 5.0 गैर absorbable sutures (चित्रा 2 डी) के साथ आंत के दो संयुक्ताक्षर प्रदर्शन करते हैं।
    2. दो संयुक्ताक्षर (चित्रा 2 ई) के बीच आंत कट। दोनों सिरों के समीपस्थ अंग पेट के ऊपरी-बाएँ चक्र में रखें। नोट: यह पाचन अंग (चित्रा 2 एफ) के रूप में इस्तेमाल किया जाएगा।
    3. पाचन अंग अंग समीपस्थ (चित्रा 2 एफ) के नीचे 6 सेमी का सामना करना पड़ दो सिरों के बाहर का अंग रखें।
      नोट: यह पित्त अंग के रूप में इस्तेमाल किया जाएगा।
  3. Jejuno-jejunostomy
    1. सूक्ष्म कैंची का उपयोग दोनों समीपस्थ अंग और आंत पाश कटौती और एक ही लंबाई के दो antimesenteric चीरों (चित्रा 2 जी और 2H) प्रदर्शन करते हैं।
    2. दो 8.0 के साथ कंधे-से-कंधा मिलाकर सम्मिलन प्रदर्शन करनागैर absorbable sutures। पृष्ठीय पक्ष सम्मिलन पहले (चित्रा 2I), उदर पक्ष सम्मिलन (चित्रा 2J) के बाद प्रदर्शन करते हैं।
    3. धीरे सम्मिलन के प्रत्येक पक्ष की ओर 2 सिक्त कपास swabs रोल सुनिश्चित करने के लिए कि सिवनी रिसाव प्रूफ है। रिसाव के मामले में 8.0 गैर absorbable sutures के साथ पूरा करें।
  4. गैस्ट्रो jejunostomy
    1. धीरे सिक्त कपास swabs का उपयोग करते हुए पेट को लामबंद। अपने पार्श्व बंद संयोजी ऊतक सिक्त कपास swabs या सूक्ष्म कैंची का उपयोग संलग्नक से पेट मुफ्त।
    2. धीरे, पेट पूरी तरह से अमल में लाना, रखकर एक फिर से absorbable hemostatic कोलेजन पेट के पीछे सेक। एक 5.0 गैर absorbable सिवनी omentum घुमावदार सूक्ष्म संदंश (चित्रा 2k और 2L) का उपयोग कर के माध्यम से पारित का उपयोग कर pylorus की एक संयुक्ताक्षर प्रदर्शन करना।
    3. दोनों पेट के उदर पक्ष, pylorus से 1.5 सेमी, और बाहर का अंग कटसूक्ष्म कैंची का उपयोग कर, एक ही लंबाई (चित्रा 2 एम) के दो चीरों बनाने।
    4. दो 8.0 गैर absorbable sutures के साथ कंधे-से-कंधा मिलाकर सम्मिलन प्रदर्शन करना। पृष्ठीय पक्ष सम्मिलन (चित्रा 2N) के साथ शुरू, और फिर उदर की ओर सम्मिलन (चित्रा 2O) प्रदर्शन करते हैं। धीरे सम्मिलन के प्रत्येक पक्ष की ओर 2 सिक्त-कपास swabs रोल सुनिश्चित करने के लिए कि सिवनी रिसाव प्रूफ है। रिसाव के मामले में 8.0 गैर absorbable sutures के साथ पूरा करें।
  5. पेट बंद
    1. पेट की दीवार 5.0 गैर absorbable sutures (चित्रा 2P) का उपयोग करने की मांसपेशी परत को बंद करें। 1% isoflurane एकाग्रता को कम करने से संज्ञाहरण कम करें। चमड़े के नीचे इंजेक्शन के माध्यम से त्वचा 25 एमएल / गर्म नमकीन घोल का किलो .Administer 5.0 गैर absorbable sutures (चित्रा 2Q) का उपयोग बंद कर दें।

4. सामान्य पश्चात की देखभाल

  1. isoflurane बंद करोऔर 0.8 एल / मिनट की एक हे 2 प्रवाह के साथ जारी रखने के लिए जब तक माउस पूरी तरह से जाग रहा है। माउस छोड़ पहुंच से बाहर है जब तक यह मोटर नियंत्रण, पशु शुरुआती ने संकेत पिंजरे चारों ओर ले जाने और खड़ा है और गिरने के बिना चलने में सक्षम होने के लिए आएगा मत करो।
  2. 5 दिनों के लिए 30 डिग्री सेल्सियस तापमान शर्त के तहत एक मशीन में माउस (पिंजरे प्रति केवल एक माउस) रखें।
  3. प्रोटोकॉल के अंत तक और विटामिन (800 मिलीग्राम / 180 मिलीलीटर पानी में) supplementations RYGB चूहों में, लोहा (चमड़े के नीचे इंजेक्शन 0.5 मिलीग्राम / किग्रा / दिन) बनाए रखें।
  4. सर्जरी के बाद 5 दिनों के लिए: (10% चरबी, 10% तरल चीनी, 57% पानी उच्च वसा वाले आहार जेल) जेल आहार भोजन के लिए स्वतंत्र पहुँच लौटें। 3 दिन सर्जरी के बाद एक ठोस आहार reintroduce।
  5. Subcutaneously (0 दिन से सर्जरी के बाद 3 दिन के लिए 0.1 मिलीग्राम / किलो, दिन में दो बार), meloxicam (1 मिलीग्राम / किलो, 0 दिन से सर्जरी के बाद 3 दिन के लिए), Metoclopramide (1 मिलीग्राम / किलो, 0 दिन से करने के लिए buprenorphine इंजेक्षन 5 दिन सर्जरी के बाद), और marbofloxacine (10 मिलीग्राम / किग्रा, 0 दिन से दिन में 3 afte आर सर्जरी)।

5. पश्चात मेटाबोलिक पैरामीटर आकलन

  1. भोजन का सेवन माप
    1. चूहों सर्जरी के बाद 1 सप्ताह के लिए ठीक करने के लिए अनुमति दें। हाउस चूहों पिंजरे के प्रति एक। पिंजरे में रखा ठोस आहार की मात्रा को मापने। भार शेष भोजन 24 घंटे के बाद में। के रूप में लंबे समय के रूप में की आवश्यकता इस चरण को दोहराएँ।
  2. मौखिक शर्करा सहिष्णुता परीक्षण
    1. मौखिक सांस से पहले 6 घंटे के लिए चूहों तेजी से। पूंछ सिरे से एक बूंद खून फसल और एक ग्लूकोमीटर में डाला 0 समय रक्त ग्लूकोज मूल्य निर्धारित करने के लिए एक ग्लूकोज पट्टी पर लागू होते हैं।
    2. 20% डी ग्लूकोज समाधान (2 जी / किग्रा) के एक मौखिक सांस प्रशासन। 15 में रक्त शर्करा के स्तर को मापने, 30, 60, और 120 मिनट पद gavage।
  3. हीमोग्लोबिन के स्तर का विश्लेषण
    1. एक रुधिर प्रणाली का प्रयोग, हीमोग्लोबिन स्तर नमूने के लिए ताजा रक्त के 20 μL उपाय।
"> 6। इच्छामृत्यु

  1. intraperitoneally एक xylazine / ketamine समाधान (10/80 मिलीग्राम / किग्रा) इंजेक्शन द्वारा चूहों anesthetize। एक गर्भाशय ग्रीवा अव्यवस्था प्रदर्शन करना। यह सुनिश्चित करना है कि दिल की धड़कन नहीं है और नेत्रगोलक झपकी पलटा खो दिया है द्वारा पूरा इच्छामृत्यु की जाँच करें।

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Representative Results

सामान्य परिस्थितियां

एसजी प्रक्रिया के लिए मतलब ऑपरेटिव समय 49.3 ± 1.5 मिनट था। हम जो पेट का लगभग 80% प्रतिशत का प्रतिनिधित्व करता पेट की 62.8 ± 5.0 मिलीग्राम, हटा दिया। कोई चूहों सर्जरी के दौरान या निम्नलिखित सात दिनों के दौरान मृत्यु हो गई। एक माउस (7.1%) एक गैस्ट्रिक एक बेज़ार की वजह से रुकावट की वजह से 11 वीं पश्चात दिन पर मृत्यु हो गई।

RYGB प्रक्रिया के लिए मतलब ऑपरेटिव समय 89.1 ± 2.8 मिनट था। मृत्यु दर RYGB (; पी = 0.038 66.6%: RYGB बनाम 25% दिखावा) के बाद काफी अधिक था। पश्चात होने वाली मौतों का मुख्य कारण थे anastomotic लीक (एन = 8), anastomotic एक प्रकार का रोग (एन = 5), संज्ञाहरण जटिलताओं (एन = 4), और पश्चात खून बह रहा है (एन = 2)। हम भी साथ जठरांत्र सम्मिलन एक प्रकार का रोग के कारण दो लोगों की मृत्यु लंबे समय तक मनायापुरानी रुकावट और कुपोषण। के रूप में 3 चित्र में दिखाया है, हम प्रोटोकॉल भर में पोस्ट ऑपरेटिव जीवित रहने की दर के एक प्रगतिशील सुधार देखा है, यह दर्शाता है कि गहन प्रशिक्षण शल्य RYGB सर्जिकल तकनीक में महारत हासिल करने के लिए आवश्यक है।

शरीर का वजन, भोजन का सेवन, और ग्लूकोज homeostasis

चूहों सर्जरी से पहले इसी तरह शरीर भार था। एसजी नकली नियंत्रण चूहों (पी <0.01, चित्रा -4 ए -16.0%: एसजी बनाम -6.6% दिखावा) की तुलना में 14 दिनों सर्जरी के बाद महत्वपूर्ण वजन घटाने का प्रदर्शन किया। 14 दिन के बाद सर्जरी पर -7.9% और 28 दिन RYGB बनाम बाद सर्जरी पर -5.1%: 14 दिन बाद सर्जरी पर -22.9% और -25.5% पर RYGB पश्चात दिन 14 (दिखावा से महत्वपूर्ण वजन घटाने के साथ जुड़े थे 28 दिन के बाद सर्जरी, चित्रा 4 बी)। दैनिक भोजन का सेवन 14 दिन पेरी के दौरान 35% से कम हो गया था आयुध डिपो एसजी (चित्रा 4C) के बाद। इसके विपरीत, हम दिखावा और RYGB चूहों (चित्रा 4D) के बीच इस तरह के एक anorexigenic प्रभाव का पालन नहीं किया। हम यह भी एसजी और RYGB सर्जरी (चित्रा 4E, 4F) के बाद ग्लूकोज सहिष्णुता के एक सुधार की सूचना दी।

RYGB प्रेरित एनीमिया पर लोहे की पूरकता के लाभदायक प्रभाव

हम एक का पालन नहीं किया hemoglobinemia 14 दिनों एसजी सर्जरी के बाद की महत्वपूर्ण कमी (डेटा) नहीं दिखाया। इसके विपरीत, गंभीर एनीमिया RYGB संचालित चूहों में मापा गया था, लेकिन यह विशिष्ट लोहे की पूरकता (चित्रा 5 ए) से फायदा हुआ। डेली लोहे की पूरकता वास्तव में महत्वपूर्ण था और 28 दिनों के RYGB सर्जरी (चित्रा 5 ब) के बाद महत्वपूर्ण एनीमिया रोका।

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चित्रा 1: आस्तीन Gastrectomy प्रक्रिया। (ए) शल्यक्रिया पूर्व तैयारी। (बी) के माध्य laparotomy। (सी) पेट जोखिम। (डी) pylorus पोत सिवनी। (ई) के घेघा पोत सिवनी। (एफ) प्रारंभिक gastrotomy। (G) पेट के हृदय क्षेत्र की लकीर। (एच) चीरा के अंत तक gastroesophageal जंक्शन से पेट खोलने के बंद हो। (आई) के पेट जठरनिर्गम क्षेत्र की लकीर। (जे) जठरनिर्गम क्षेत्र के उद्घाटन के बंद हो। (कश्मीर) पेट की दीवार की मांसपेशियों की परत के बंद हो। (एल) त्वचा के बंद हो। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।


चित्रा 2: रॉक्स एन वाई बाईपास प्रक्रिया। (ए) शल्यक्रिया पूर्व तैयारी। (बी) के माध्य laparotomy। (सी) छोटी आंत के externalization। (डी) Biliopancreatic और पाचन अंग संयुक्ताक्षर। (ई) संयुक्ताक्षर के बीच छोटे आंत अनुभाग। Jejuno-jejunostomy के लिए (एफ) आंतों अंग पोजीशनिंग। (G - एच) समीपस्थ अंग और आंत पाश की antimesenteric चीरों। (मैं) पृष्ठीय पक्ष की ओर सम्मिलन। (जे) उदर की ओर से पक्ष सम्मिलन। (कश्मीर - एल) pylorus संयुक्ताक्षर। (एम) के पेट के उदर पक्ष का चीरा। (एन) के बाहर का अंग और पृष्ठीय पक्ष की ओर सम्मिलन का चीरा। (ओ) उदर की ओर से पक्ष सम्मिलन। (पी (क्यू) त्वचा के बंद हो। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र तीन
चित्रा 3: चूहे 7 दिनों RYGB सर्जरी के बाद जीवित रहने की दर। डेटा RYGB संचालित चूहों के जीवित रहने की दर पर शल्य चिकित्सा प्रशिक्षण के लाभ दिखा। मूल्यों ± SEM के मतलब मूल्य के रूप में दिखाया जाता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 4
चित्रा 4: एसजी का प्रभाव (ए, सी, डी) और RYGB (बी, डी, एफ) बी परodyweight, दैनिक भोजन का सेवन, और ग्लूकोज सहनशीलता। डेटा ± SEM के मतलब मूल्य के रूप में दिखाया जाता है। एन एस: महत्वपूर्ण नहीं; * पी <0.05; ** पी <0.01 (मान व्हिटनी परीक्षण, परीक्षण एनोवा)। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 5
चित्रा 5: प्लाज्मा हीमोग्लोबिन चूहे में RYGB के बाद स्तरों के बिना (ए) या (बी) लोहे की पूरकता के साथ। डेटा ± SEM के मतलब मूल्य के रूप में दिखाया जाता है। एन एस: महत्वपूर्ण नहीं; * पी <0.05 (मान व्हिटनी परीक्षण)। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

मोटापे की बढ़ती महामारी पर काबू पाने के लिए, पहले बेरिएट्रिक सर्जरी की प्रक्रियाओं के संयुक्त राज्य अमेरिका में 1960 के दशक में उभरा। तब से, प्रक्रियाओं की संख्या हर साल दुनिया भर में अभी भी प्रदर्शन में वृद्धि, और आज, इन तकनीकों रुग्ण मोटापे 6 के प्रबंधन के लिए सबसे अच्छा विकल्प चिकित्सीय प्रतिनिधित्व करते हैं। प्रक्रियाओं को विकसित बीच, एसजी और RYGB दो सबसे लोकप्रिय नैदानिक अभ्यास 4 में इस्तेमाल तरीके हैं। पशु मॉडल, विशेष रूप से मूषक, बेरिएट्रिक सर्जरी के बाद मनाया सामान्य स्वास्थ्य में सुधार के पीछे तंत्र को समझने के लिए इस्तेमाल किया गया है।

बेरिएट्रिक सर्जरी के लाभदायक प्रभाव चयापचय को बनाए रखने के आणविक तंत्र को समझने के लिए, हम बेरिएट्रिक सर्जरी के दो माउस मॉडल विकसित: एसजी, जो अक्सर एक प्रतिबंधक तकनीक के रूप में परिभाषित किया गया है, और RYGB है, जो एक प्रतिबंधात्मक और malabsorptive सर्जरी के रूप में वर्णन किया गया है। इन माउस बेरिएट्रिक की प्राप्तिप्रक्रियाओं microsurgery में अनुभव की आवश्यकता है। इन मॉडलों को पशु शल्य चिकित्सा और एक मानव आंत में विशेष सर्जन एक तकनीशियन का उपयोग कर विकसित किया गया। अनुभव से, शल्य चिकित्सा प्रशिक्षण RYGB के बाद 75 से अधिक% अस्तित्व तक पहुंचने के लिए जरूरी हो गया था। माहिर एसजी रूप में ज्यादा समय की आवश्यकता नहीं है, और सीखने की अवस्था के बारे में 95% से कम कम है, मृत्यु दर के साथ। इसके विपरीत, RYGB एक अधिक जटिल तकनीक है और प्रशिक्षण के 6 से 8 सप्ताह की आवश्यकता है एक स्वीकार्य पश्चात जीवित रहने की दर तक पहुंचने के लिए।

साहित्य में, वहाँ है कि पहले किया गया है 7, 8, 9 वर्णित कृंतक बेरिएट्रिक प्रक्रियाओं की एक किस्म है। इस एसजी तकनीक में, हम पेट के हृदय क्षेत्र को हटा दिया है (यह भी बुध्न कहा जाता है), मनुष्यों में मौजूद नहीं। उद्देश्य पेट के बारे में 80% को दूर करने के लिए किया गया था। चूहों में RYGB मॉडल की थैली आकार <5% करने के लिए> प्रारंभिक पेट के आकार के 20% से पर्वतमाला। कई सेंटudies माउस RYGB मॉडल का इस्तेमाल किया है, या तो पेट में 10, एक छोटे से गैस्ट्रिक थैली 5, या कुल पेट मोड़ 5 का एक पूरा संरक्षण पेश किया। एक बहुत ही व्यापक अध्ययन में, देंग पिंग यिन और उनके सहयोगियों RYGB के विभिन्न माउस मॉडल का मूल्यांकन किया और बताया कि murine पेट anatomically एक गैस्ट्रिक थैली 5 के निर्माण के लिए अनुकूल नहीं था है। हमारे RYGB प्रक्रिया के लिए, हम पेट काटने के बिना एक रॉक्स एन वाई प्रदर्शन करने के लिए चुनें। एक सीमा के रूप में, हमारे मॉडल भोजन का सेवन, जो विरोधाभासों क्या यह RYGB के मानव मॉडल में मनाया में कमी के लिए प्रेरित नहीं किया।

चूहों में RYGB आपरेशन के बाद जीवित रहने की दर शायद ही कभी साहित्य में लेखकों द्वारा उल्लेख किया गया है, लेकिन इस पर औसत 11 के बारे में 30 से 35% तक पहुँच रहा है। हमारे हाथ में, मृत्यु दर मुख्य रूप से anastomotic रिसाव या एक प्रकार का रोग या देर पश्चात gastrojejunal सम्मिलन एस के लिए की वजह से थाtenosis, लगातार अत्यधिक वजन घटाने, जो पशु कल्याण समझौता के साथ पुरानी रुकावट के लिए अग्रणी। RYGB पहले तीन दिनों के दौरान पश्चात की एक जेल आहार और एक दर्द प्रबंधन व्यवस्था सहित विशिष्ट perioperative प्रबंधन की आवश्यकता है। सर्जरी के बाद लंबे समय तक जीवित रहने में सुधार करने के लिए, हम विटामिन postoperatively कहा, विशेष रूप से वसा में घुलनशील विटामिन और लोहा, एनीमिया को रोकने के लिए। इसके विपरीत, चूहों, एसजी बाद liposoluble विटामिन पूरकता की जरूरत नहीं है क्योंकि यह केवल एक प्रतिबंधक प्रक्रिया था। पिछले कागजात में, लेखकों पश्चात दौरान संचालित पशुओं के स्वास्थ्य की स्थिति का वर्णन नहीं किया। क्योंकि यह एक बड़ी सर्जरी है, हम नहीं मान सकते हैं इन अध्ययनों में जानवरों के व्यवस्थित अच्छी तरह से किया जा रहा।

अंत में, या तो प्रतिबंधात्मक (एसजी) के माउस मॉडल या प्रतिबंधात्मक-malabsorptive (RYGB) बेरिएट्रिक सर्जरी संभव है, लेकिन विशेष रूप से RYGB प्रक्रिया के लिए एक सीखने की अवस्था के साथ microsurgical प्रशिक्षण की आवश्यकता होती है। ke करने के लिए, लेकिन यह भी विटामिन पूरकता के मामले में जानवरों के अच्छे स्वास्थ्य में, PeriOperative प्रबंधन RYGB प्रक्रिया में बहुत महत्वपूर्ण है, विशेष रूप से दर्द के मामले में Ep। एक तेज, बाँझ सर्जरी प्राप्त करने के द्वारा और microsurgical प्रशिक्षण का उपयोग करके, हम बहुत पश्चात जीवित रहने की दर में सुधार कर सकते हैं। इन मॉडलों को बेरिएट्रिक सर्जरी के चयापचय प्रभाव को समझने के लिए उपयोगी और आवश्यक उपकरण हैं।

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Drugs
High Fat diet DIO diet Safe
Isoflurane Forane Baxter
Buprenorphin Buprecare Animalcare
Marbofloxacine Marbocyl Vetoquinol
Ammonium iron citrate, vitamins PP-B12 Fercobsang Vetoquinol
Vitamins A-D3-E-K-B Vita Rongeur Virbac
NaCl 0.9% NaCl 0,9%
Povidone solution Betadine Scrub Betadine
Povidone solution Betadine Solution Betadine
Carboptol 980 NF Ocrygel TVM
Name References Company Comments
Sutures
Prolene® 8.0, 6,5 mm Ethicon
Prolene® 5.0, 13 mm Ethicon
Name References Company Comments
Surgical equipments
Scissors FST
Needle holder Olsen-Hegar FST
Micro scissors Vannas FST
Micro forceps  Graefe FST
Micro forceps curved Graefe FST
Curved micro needle holder Castroviejo FST
Hemostatic collagen compress Pangen Urgo
Absorbent underpads VWR
Name References Company Comments
Specific equipments
Hematology system  Hemavet 950FS Hemavet
Glucose strips and glucometer One touch Verio Life scan
Stereo microscope MZ6 Leica 

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References

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चिकित्सा अंक 121 बैरिएट्रिक सर्जरी आस्तीन gastrectomy रॉक्स एन वाई गैस्ट्रिक बाईपास मोटापा माउस
आस्तीन Gastrectomy की तकनीक और संशोधित चूहों में रॉक्स एन वाई गैस्ट्रिक बाईपास
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Ayer, A., Borel, F., Moreau, F.,… More

Ayer, A., Borel, F., Moreau, F., Prieur, X., Neunlist, M., Cariou, B., Blanchard, C., Le May, C. Techniques of Sleeve Gastrectomy and Modified Roux-en-Y Gastric Bypass in Mice. J. Vis. Exp. (121), e54905, doi:10.3791/54905 (2017).

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