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Medicine

Techniques de sleeve gastrectomie et modification Roux-en-Y bypass gastrique chez la souris

Published: March 20, 2017 doi: 10.3791/54905
* These authors contributed equally

Abstract

L'obésité est un problème majeur de santé publique, avec une prévalence de 4 à 28% pour les hommes et de 6,2 à 36,5% pour les femmes en Europe (2003-2008). L'obésité morbide est souvent associée à des complications métaboliques, comme le diabète de type 2, l'hypertension et la dyslipidémie, la réduction de l'espérance et la qualité vie. En l'absence de tout traitement non invasive efficace, la chirurgie bariatrique est une option thérapeutique précieuse pour les patients souffrant d' obésité morbide (indice de masse corporelle (IMC)> 40 kg / m 2), conduisant à long terme, soutenue perte de poids et l' amélioration des complications métaboliques . Cependant, les mécanismes cellulaires et moléculaires sous-jacents supportant les effets bénéfiques de la chirurgie bariatrique ne sont pas encore entièrement compris. En raison des nombreuses souches génétiquement modifiées disponibles, le modèle de la souris est le modèle animal le plus pratique pour explorer les mécanismes moléculaires derrière les effets bénéfiques pléiotropiques des chirurgies bariatriques. Ici, nous avons détaillé le Healthc optimisésont des méthodes et des protocoles chirurgicaux chez des souris pour les deux chirurgies bariatriques les plus couramment utilisés: la sleeve gastrectomie et la dérivation gastrique de Roux-en-Y modifiée. Décrypter les mécanismes moléculaires sous-jacents aux effets thérapeutiques des chirurgies bariatriques offre la promesse d'identifier de nouvelles cibles thérapeutiques.

Introduction

La pandémie mondiale de l'obésité et le diabète est dévastateur dans la sévérité. Plus de deux milliards d' adultes dans le monde (30% de la population) sont soit en surpoids (IMC> 25 kg / m 2) ou obèses (IMC> 30 kg / m 2) 1. Cela peut venir avec des complications métaboliques, comme le diabète de type 2, l'hypertension et la dyslipidémie, conduisant à une augmentation de la morbidité et de la mortalité. L' obésité augmente la mortalité globale et la prévalence du cancer 2. En raison de l'absence de traitements non invasifs efficaces, la chirurgie bariatrique représente la seule option qui peut conduire à long terme, la perte de poids durable 3, 4. Un certain nombre de différentes méthodes chirurgicales ont été développées, mais le sleeve gastrectomie (SG) et la dérivation gastrique de Roux-en-Y (DGRY) sont les deux procédures les plus couramment utilisés dans la pratique clinique. Pendant la procédure de SG, 80% du volume initial de l'estomacenlevés; Par conséquent, cette technique est l'une des chirurgies restrictives qui améliore la satiété. Le DGRY est l'une des techniques de malabsorption-restrictif. Pendant DGRY, une petite poche gastrique (1-2% du volume gastrique totale) est créé et l'intestin est réarrangé en une forme en Y, ce qui retarde la digestion et l'absorption des nutriments. Ces deux techniques conduisent à des réductions significatives de poids corporel et une amélioration générale de comorbidités fréquemment associés (par exemple, l' hypertension, le diabète de type 2 et la dyslipidémie) 3, avec une plus grande efficacité vu dans DGRY. Cependant, les mécanismes moléculaires à l'origine des effets bénéfiques pléiotropiques des chirurgies bariatriques sont souvent pas complètement élucidés. En raison des nombreuses souches génétiquement modifiées disponibles, un modèle de souris est le modèle animal le plus pratique pour explorer ces mécanismes moléculaires.

Toutefois, les procédures bariatrique sont difficiles à adapter directement aux petits modèles animaux et require dextérité chirurgicale haute. Alors que SG peut être facilement réalisée chez les rongeurs avec un taux de survie très bon, DGRY est létale chez la souris en raison de graves obstructions intestinales 5. Techniques de DGRY modifiées différentes ont été proposées pour remédier à ce problème, notamment le 5 oesojejunostomy. Ici, nous présentons une autre alternative: l'gastrojéjunostomie sans excision de l'estomac. Cette DGRY modifiée reproduit la plupart des effets bénéfiques observés chez les humains ( par exemple, une réduction de poids corporel important et une amélioration de la glycémie et de l' homéostasie lipidique).

Ce manuscrit a pour but de résumer et de discuter des détails techniques et expérimentaux de SG et DGRY chez la souris et de faciliter ces procédures avec l'aide de vidéos. Un point culminant particulier sera fait en ce qui concerne l'optimisation des protocoles de soins préopératoires et postopératoires qui permettent la réduction des vitamines et carences en fer.

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Protocol

Animaux et le logement: Obtenir 8 semaines d'âge des souris mâles C57BL / 6. À l'âge de 10 semaines, donner le C57BL / 6 libre accès à l'eau et un régime alimentaire riche en matières grasses (DIO régime alimentaire: 35% kcal de matières grasses, 25,8% de caséine, 1,30% AIN minérale, 1,30% de vitamines, 1,70% de phosphate dicalcique, 0,7 carbonate% de calcium, 2,10% citrate de potassium, 0,026% de bitartrate de choline, 8,9% de saccharose, 0,384% de cystine, 6,5% de cellulose, 31,7% de saindoux, 3,3% d'huile de soja et 16,29% de maltodextrine) pour 8 (SG) ou 14 (RYGB) semaines avant les chirurgies bariatriques. Pour favoriser le gain de poids, donner à la souris dédiée à la chirurgie DGRY (simulacre et DGRY) l'eau contenant 20% de fructose (p / v) en plus du régime alimentaire riche en matières grasses.

Déclaration éthique: Toutes les étapes de protocole décrites ci-dessous, suivez les directives du Comité d'éthique de l'expérimentation animale des Pays de la Loire sous le numéro d'agrément 01.953,01.

1. préopératoire Préparation générale

  1. Rapide les souris pendant 6 h avant la chirurgie. Gel diet la nourriture a été donné 3 jours avant la chirurgie et exclusivement un jour avant la chirurgie. Induire une anesthésie dans une chambre avec 5% d' isoflurane (0,4 L / min) et O 2 (dioxygène; 0,4 L / min). Effectuer un test toe-pincement pour confirmer que l'anesthésie est efficace. Administrer des analgésiques (0,1 mg / kg buprénorphine), des antibiotiques (10 mg / kg marbofloxacine), et pro-cinétiques (1 mg / kg métoclopramide) par injections sous - cutanées.
  2. Allouer une zone de travail spécifique pour les interventions chirurgicales (éloignés de la circulation et de ventilation de laboratoire ventilateurs). Nettoyer la zone chirurgicale avec des désinfectants de surfaces dures dédiées. Placez un coussin chauffant sur la zone de l'espace de travail pour maintenir homéothermie de la souris pendant la chirurgie. Appliquer un underpad absorbant propre sur le coussin chauffant.
  3. Raser l'abdomen du sternum au pelvis en utilisant un rasoir électrique. Enveloppez l'abdomen de la souris dans stérilisée pellicule plastique (Figures 1A et 2A) et placer la souris en position couchée sur le chauffage pun d.
  4. Appliquer une pommade vétérinaire sur les yeux pour prévenir la sécheresse sous anesthésie. Placer la souris dans le cône de nez et à maintenir l' anesthésie avec 2% d' isoflurane (0,4 L / min) et O 2 (0,4 L / min).
  5. Avant de commencer l'opération, mettre une blouse stérile d'examen, une casquette de gommages jetable, un masque et des gants stériles. Ouvrez un package autoclavé contenant un ensemble d'instruments chirurgicaux stérilisés, ce qui est nécessaire pour toutes les étapes de la chirurgie. Couper une fenêtre dans la pellicule de plastique stérilisée et désinfecter la peau avec 2 solutions de povidone-iode successifs.

2. sleeve gastrectomie: Procédure chirurgicale

  1. Laparotomie médiane (figure 1B)
    1. Sous un microscope binoculaire et avec un scalpel, effectuer une incision médiane du sternum au milieu de l'abdomen pour ouvrir la cavité abdominale (ne pas endommager les muscles abdominaux). Protéger la peau avec une compresse stérile imbibée de solution C saline 37 °.
  2. L' exposition de l' estomac (figure 1C)
    1. mobiliser doucement l'estomac en utilisant des tampons humidifié coton. Libérez l'estomac de ses latéraux proches des pièces jointes du tissu conjonctif à l'aide de tampons de coton humidifié ou micro ciseaux.
    2. Doucement, extérioriser l'estomac pleinement et placer un collagène hémostatique compresse derrière l'estomac. Suturer le pylore et l' œsophage vaisseaux le long de la grande courbure gastrique avec 8,0 sutures non absorbables afin d' éviter les saignements futurs (figure 1D et E). Note: L'utilisation hémostatique peut induire des lésions tissulaires, assurez-vous d'utiliser uniquement sur les tissus qui visent à réséquer.
  3. Résection de la région cardiaque de l' estomac (fundus)
    1. Effectuer une gastrotomie sur la ligne anatomique présente entre la région du pylore (corpus) et la région cardiaque de l' estomac (fundus) (figure 1F).
    2. Retirer les aliments résiduels avec 2 tampons de coton humidifié les uns envers lescôté de l'estomac. Utilisation de micro ciseaux, couper l'estomac le long de la frontière entre le fond et le corps de l'estomac (figure 1G).
    3. Appuyez sur un collagène hémostatique compresse pendant 2 minutes en cas de saignement majeur. Fermer l'ouverture de l' estomac avec 8,0 sutures non absorbables de la jonction gastro-œsophagienne à l'extrémité de l'incision (figure 1H).
  4. Relèvement de la région pylorique de l' estomac (corpus)
    1. Terminer la résection de l' estomac le long de la grande courbure de manière à éliminer environ 80% de l'estomac (figure 1I). Uniformiser la largeur de la SG à 3 mm. Appuyez sur un collagène hémostatique compresse pendant 2 minutes en cas de saignement majeur.
    2. Fermez l'ouverture de la région pylorique de l'estomac avec 8,0 suture non résorbable (figure 1J). Rouler délicatement 2 tampons de coton humidifié vers chaque côté de l'estomac pour faire en sorte que la suture est étanche.
    3. Complet avec 8,0 sutures non résorbables en cas de fuite. Retirez les compresses de collagène hémostatiques et retourner l'estomac dans la cavité abdominale. Laisser un collagène hémostatique comprimer contre la suture.
  5. fermeture abdominale
    1. Fermez la couche musculaire de la paroi abdominale avec 5,0 sutures non résorbables (Figure 1K). Réduire l'anesthésie en réduisant la concentration d'isoflurane à 1%. Fermez la peau en utilisant 5,0 sutures non résorbables (Figure 1L).

3. Roux-en-Y bypass gastrique: Procédure chirurgicale

  1. laparotomie médiane
    1. Sous un microscope binoculaire et avec un scalpel, effectuer une incision médiane du sternum au milieu de l'abdomen pour ouvrir la cavité abdominale (ne pas endommager les muscles abdominaux). Protéger la peau avec une compresse stérile imbibée de 37 ° C une solution saline (figure 2B).
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  2. Membre biliopancréatique et membre alimentaire
    1. Externaliser l'intestin (figure 2C). Mesure 8 cm du pylore et effectuer deux ligatures de l'intestin avec 5,0 sutures non résorbables (Figure 2D).
    2. Couper l'intestin entre les deux ligatures (figure 2E). Placez la branche proximale des deux extrémités dans le quadrant supérieur gauche de l'abdomen. Remarque: Il sera utilisé en tant que membre alimentaire (Figure 2F).
    3. Placer le membre distal des deux extrémités tournées vers la branche alimentaire de 6 cm au- dessous de la branche proximale (figure 2F).
      NOTE: Il sera utilisé en tant que membre biliaire.
  3. Jéjuno-jéjunostomie
    1. Couper la fois la branche proximale et la boucle de l' intestin au moyen de micro ciseaux et effectuer deux incisions antimésentérique de la même longueur (Figure 2G et 2H).
    2. Effectuer un côté à côté anastomose avec deux 8,0sutures non résorbables. Effectuer l'anastomose face dorsale première (figure 2I), suivie par l'anastomose côté ventral (Figure 2J).
    3. Rouler délicatement 2 tampons de coton humidifié vers chaque côté de l'anastomose pour assurer que la suture est étanche. Complet avec 8,0 sutures non résorbables en cas de fuite.
  4. Gastro-jéjunostomie
    1. mobiliser doucement l'estomac en utilisant des cotons-tiges humectés. Libérez l'estomac de ses latéraux proches des pièces jointes du tissu conjonctif à l'aide de tampons de coton humidifié ou micro ciseaux.
    2. Doucement, extérioriser l'estomac complètement, en plaçant un collagène hémostatique re-absorbable compresse derrière l'estomac. Effectuer une ligature du pylore en utilisant un fil de suture non résorbable 5.0 traversé l'épiploon utilisant des micro pince courbe (Figure 2K et 2L).
    3. Couper à la fois la face ventrale de l'estomac, 1,5 cm du pylore, et le membre distalau moyen de micro ciseaux, créant ainsi deux incisions de la même longueur (figure 2 M).
    4. Effectuer anastomose côte à côte avec deux 8,0 sutures non résorbables. Commencez avec l'anastomose côté dorsal (Figure 2N), puis effectuer l'anastomose face ventrale (Figure 2O). Rouler délicatement 2 tampons humidifié coton vers chaque côté de l'anastomose pour assurer que la suture est étanche. Complet avec 8,0 sutures non résorbables en cas de fuite.
  5. fermeture abdominale
    1. Fermez la couche musculaire de la paroi abdominale en utilisant 5,0 sutures non résorbables (Figure 2P). Réduire l'anesthésie en réduisant la concentration d'isoflurane à 1%. Fermez la peau en utilisant 5,0 sutures non résorbables (Figure 2Q) .Administer 25 mL / kg de solution saline chaude par injection sous - cutanée.

4. Général Soins postopératoires

  1. Arrêtez isofluraneet continuer avec un O 2 débit de 0,8 L / min jusqu'à ce que la souris est pleinement éveillé. Ne laissez pas la souris sans surveillance jusqu'à ce qu'il reprenne le contrôle du moteur, indiquée par le départ des animaux pour se déplacer autour de la cage et être capable de se lever et marcher sans tomber.
  2. Placer la souris (une seule souris par cage) dans une étuve à 30 ° C, les conditions de température pendant 5 jours.
  3. Maintenir le fer (0,5 mg / kg / jour, injection sous-cutanée) et de la vitamine (800 mg / 180 ml dans l'eau) supplémentations chez les souris DGRY jusqu'à la fin du protocole.
  4. Retour libre accès à l'alimentation de gel alimentaire (régime gel-riche en matières grasses: 10% de saindoux, le sucre liquide 10%, 57% d'eau) pendant 5 jours après la chirurgie. Réintroduire une alimentation solide 3 jours après la chirurgie.
  5. Par voie sous- cutanée injectent buprénorphine (0,1 mg / kg, deux fois par jour, du jour 0 au jour 3 après la chirurgie), le méloxicam (1 mg / kg, du jour 0 au jour 3 après la chirurgie), le métoclopramide (1 mg / kg, du jour 0 au 5 jours après la chirurgie), et marbofloxacine (10 mg / kg, du jour 0 au jour 3 aFTE Chirurgie r).

Évaluation 5. postopératoires Metabolic Paramètres

  1. Mesure de la consommation alimentaire
    1. Laisser les souris se rétablir pendant 1 semaine après l'intervention chirurgicale. Maison de la souris par une cage. Mesurer la quantité d'alimentation solide placé dans la cage. Poids restants 24 alimentaires h plus tard. Répétez cette étape aussi longtemps que nécessaire.
  2. Test de tolérance au glucose oral
    1. Rapide les souris pendant 6 h avant la bolus orale. Récolter une goutte de sang de la pointe de la queue et l'appliquer sur une bande de glucose inséré dans un glucomètre pour déterminer le temps 0 sang valeur de glucose.
    2. Administrer un bolus par voie orale d'une solution de D-glucose à 20% (2 g / kg). Mesurer les niveaux de glucose dans le sang à 15, 30, 60 et 120 minutes après gavage.
  3. Analyse des taux d'hémoglobine
    1. L'utilisation d'un système d'hématologie, mesurer 20 pi de sang frais pour échantillonner le taux d'hémoglobine.
". Euthanasie> 6

  1. Anesthésier les souris par injection intrapéritonéale d'une solution de xylazine / kétamine (10/80 mg / kg). Effectuer une dislocation cervicale. Vérifier l'euthanasie complète en veillant à ce que le cœur ne bat pas et le réflexe de clignement globe oculaire est perdu.

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Representative Results

Conditions générales

La durée opératoire moyenne pour la procédure de SG était de 49,3 ± 1,5 min. Nous avons retiré 62,8 ± 5,0 mg de l'estomac, ce qui représente environ 80% pour cent de l'estomac. Aucune souris sont mortes au cours de la chirurgie ou pendant les sept jours suivants. Une souris (7,1%) est décédé le 11 e jour postopératoire en raison d'une obstruction gastrique provoquée par un bézoard.

La durée opératoire moyenne pour la procédure DGRY était de 89,1 ± 2,8 min. Le taux de mortalité était significativement plus élevé après DGRY (sham: 25% contre DGRY: 66,6%; p = 0,038). Les principales causes de décès postopératoires étaient des fuites anastomotiques (n = 8), une sténose anastomotique (n = 5), complications de l'anesthésie (n = 4), et hémorragie postopératoire (n = 2). Nous avons également observé deux décès à long terme en raison de gastro-sténose de l'anastomose avecobstruction chronique et de la malnutrition. Comme le montre la figure 3, nous avons remarqué une amélioration progressive du taux de survie post-opératoire à travers le protocole, ce qui indique que la formation chirurgicale intensive est nécessaire pour maîtriser la technique chirurgicale DGRY.

Le poids corporel, la consommation alimentaire et l' homéostasie du glucose

Les souris ont un poids corporel similaires avant la chirurgie. SG a démontré une perte de poids significative de 14 jours après la chirurgie par rapport à des souris simulacres de contrôle (sham: -6.6% par rapport SG: -16,0%; p <0,01; Figure 4A). DGRY a été associée à une perte de poids significative de jours postopératoires 14 (sham: -7,9% au jour 14 post-chirurgie et -5,1% au jour 28 post-opératoires par rapport DGRY: -22,9% au jour 14 post-chirurgie et -25,5% sur 28 jours après la chirurgie, la figure 4B). La ration alimentaire quotidienne a été réduite de 35% au cours des 14 jours péri od après la SG (figure 4C). En revanche, on n'a pas observé un tel effet anorexigène entre l'imposture et les souris DGRY (Figure 4D). Nous avons également signalé une amélioration de la tolérance au glucose suivant SG et DGRY chirurgies (Figure 4E, 4F).

Effet bénéfique de la supplémentation en fer sur l' anémie induite par DGRY-

Nous n'avons pas observé diminution significative de hémoglobinémie 14 jours après la chirurgie SG (données non présentées). En revanche, une anémie sévère a été mesurée chez des souris DGRY-exploité, mais il a bénéficié de la supplémentation en fer spécifique (figure 5A). La supplémentation en fer quotidien était en effet crucial et a empêché l' anémie significative 28 jours après la chirurgie DGRY (figure 5B).

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Figure 1: Procédure Sleeve gastrectomie. (A) la préparation préopératoire. (B) laparotomie médiane. (C) l' exposition de l' estomac. (D) Pylore navire suture. (E) Oesophage navire suture. (F) de gastrotomie initiale. (G) La résection de la région cardiaque de l'estomac. (H) la fermeture de l'ouverture de l' estomac à partir de la jonction gastro - œsophagienne à l'extrémité de l'incision. (I) Résection de la région pylorique de l'estomac. (J) Fermeture de l'ouverture de la région du pylore. (K) Clôture de la couche musculaire de la paroi abdominale. (L) Fermeture de la peau. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.


Figure 2: Roux-en-Y bypass procédure. (A) la préparation préopératoire. (B) laparotomie médiane. (C) Externalisation du petit intestin. (D) biliopancréatique et des membres alimentaires ligatures. (E) de la section de l' intestin grêle entre la ligature. (F) Intestinal positionnement des membres pour le jéjuno-jéjunostomie. (G - H) des incisions antimésentérique de la branche proximale et la boucle de l' intestin. (I) Dorsal anastomose latéro-latérale. (J) ventral anastomose latéro-latérale. (K - L) Pylore ligatures. (M) Incision de la face ventrale de l'estomac. (N) Incision de la branche dorsale et anastomose distale côte à côte. (O) anastomose ventral côte à côte. (P (Q) Fermeture de la peau. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

figure 3
Figure 3: Taux de survie des souris 7 jours après la chirurgie DGRY. Les données montrent l'avantage de la formation chirurgicale sur le taux de souris DGRY exploités survie. Les valeurs sont indiquées en tant que valeur moyenne ± SEM. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

Figure 4
Figure 4: Effet de la SG (A, C, D) et DGRY (B, D, F) Bodyweight, apport alimentaire quotidien, et la tolérance au glucose. Les données sont présentées comme la moyenne ± SEM. NS: non significatif; * P <0,05; ** P <0,01 (test de Mann-Whitney, ANOVA test). S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

Figure 5
Figure 5: Niveaux d' hémoglobine plasmatique après DGRY chez les souris sans (A) ou avec (B) Supplémentation en fer. Les données sont présentées comme la moyenne ± SEM. NS: non significatif; * P <0,05 (test de Mann-Whitney). S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

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Discussion

Pour surmonter l'épidémie croissante de l'obésité, les premières procédures de chirurgie bariatrique sont apparus dans les années 1960 aux États-Unis. Depuis lors, le nombre de procédures effectué à travers le monde chaque année encore augmenter, et aujourd'hui, ces techniques représentent la meilleure option thérapeutique pour la prise en charge de l' obésité morbide 6. Parmi les procédures développées, SG et DGRY sont les deux méthodes les plus populaires utilisés dans la pratique clinique 4. Des modèles animaux, en particulier les rongeurs ont été utilisés pour déchiffrer les mécanismes sous-jacents à l'amélioration de la santé générale observée après la chirurgie bariatrique.

Pour déchiffrer les mécanismes moléculaires supportant les effets métaboliques bénéfiques des chirurgies bariatriques, nous avons développé deux modèles de souris de la chirurgie bariatrique: le SG, qui est souvent défini comme une technique restrictive, et l'DGRY, qui est décrit comme une chirurgie restrictive et malabsorption. La réalisation de ces bariatrique de la sourisprocédures exige une expérience en microchirurgie. Ces modèles ont été développés à l'aide d'un technicien spécialisé en chirurgie animale et un chirurgien viscéral humain. De l'expérience, la formation chirurgicale était nécessaire pour atteindre plus de 75% de survie après DGRY. Maîtriser SG ne nécessite pas autant de temps, et la courbe d'apprentissage est plus courte, avec une mortalité d'environ 95%. En revanche, DGRY est une technique plus complexe et nécessite 6 à 8 semaines de formation pour atteindre un taux de survie post-opératoire acceptable.

Dans la littérature, il existe une variété de procédures de rongeurs obèses qui ont été décrites précédemment 7, 8, 9. Dans cette technique de SG, on a enlevé la région cardiaque de l'estomac (également appelé le fundus), non présents chez les humains. L'objectif était d'éliminer environ 80% de l'estomac. La taille de la poche de modèles DGRY chez le rat est comprise entre <5% à> 20% de la taille initiale de l'estomac. Plusieurs studies ont utilisé des modèles de souris RYGB, présentant soit une sauvegarde complète de l'estomac 10, une petite poche gastrique 5, ou une déviation totale de l' estomac 5. Dans une étude très complète, Deng Ping Yin et ses collègues ont évalué les différents modèles de souris de DGRY et a rapporté que l'estomac murin n'a pas été anatomiquement adapté à la création d'une poche gastrique 5. Pour notre procédure DGRY, nous choisissons d'effectuer un Roux-en-Y sans couper l'estomac. Comme une limitation, notre modèle n'a pas induit une réduction de la prise alimentaire, ce qui contraste ce qu'il a observé dans les modèles humains de DGRY.

Le taux de survie après des opérations DGRY chez les rats est rarement mentionné par les auteurs dans la littérature, mais il semble atteindre environ 30 à 35% en moyenne 11. Dans nos mains, la mortalité était principalement due à une fuite anastomotique ou une sténose ou à la fin postopératoire gastrojéjunale anastomose stenosis, conduisant à une obstruction chronique avec une perte de poids excessive persistante, ce qui a compromis le bien-être des animaux. DGRY exige une gestion périopératoire spécifique, y compris un régime de gel pendant les trois premiers jours postopératoires et un régime de gestion de la douleur. Pour améliorer la survie à long terme après la chirurgie, nous avons ajouté des vitamines postopératoires, en particulier vitamines et de fer liposolubles, pour prévenir l'anémie. A l'inverse, les souris ne nécessitent pas la supplémentation en vitamine liposoluble après SG, car il était seulement une procédure restrictive. Dans les articles précédents, les auteurs ne décrivent l'état de santé des animaux opérés au cours de la période postopératoire. Parce qu'il est une chirurgie majeure, nous ne pouvons assumer le bien-être systématique des animaux dans ces études.

En conclusion, les modèles de souris de soit restrictive (SG) ou restrictive-malabsorption (DGRY) chirurgies bariatriques sont possibles, mais nécessitent une formation microchirurgicale avec une courbe d'apprentissage, en particulier pour la procédure DGRY. Pour keep les animaux en bonne santé, la gestion périopératoire est très important dans la procédure DGRY, notamment en termes de douleur, mais aussi en termes de la supplémentation en vitamine. En réalisant une chirurgie stérile rapide et en utilisant la formation de microchirurgie, nous pouvons grandement améliorer le taux de survie postopératoire. Ces modèles sont des outils utiles et essentiels pour comprendre les effets métaboliques de la chirurgie bariatrique.

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Drugs
High Fat diet DIO diet Safe
Isoflurane Forane Baxter
Buprenorphin Buprecare Animalcare
Marbofloxacine Marbocyl Vetoquinol
Ammonium iron citrate, vitamins PP-B12 Fercobsang Vetoquinol
Vitamins A-D3-E-K-B Vita Rongeur Virbac
NaCl 0.9% NaCl 0,9%
Povidone solution Betadine Scrub Betadine
Povidone solution Betadine Solution Betadine
Carboptol 980 NF Ocrygel TVM
Name References Company Comments
Sutures
Prolene® 8.0, 6,5 mm Ethicon
Prolene® 5.0, 13 mm Ethicon
Name References Company Comments
Surgical equipments
Scissors FST
Needle holder Olsen-Hegar FST
Micro scissors Vannas FST
Micro forceps  Graefe FST
Micro forceps curved Graefe FST
Curved micro needle holder Castroviejo FST
Hemostatic collagen compress Pangen Urgo
Absorbent underpads VWR
Name References Company Comments
Specific equipments
Hematology system  Hemavet 950FS Hemavet
Glucose strips and glucometer One touch Verio Life scan
Stereo microscope MZ6 Leica 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ng, M., Fleming, T., et al. Global, regional, and national prevalence of overweight and obesity in children and adults during 1980-2013: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2013. The Lancet. 384 (9945), 766-781 (2014).
  2. Calle, E. E., Thun, M. J., Petrelli, J. M., Rodriguez, C., Heath, C. W. Body-mass index and mortality in a prospective cohort of U.S. adults. The New England Journal of Medicine. 341 (15), 1097-1105 (1999).
  3. Sjöström, L., Lindroos, A. K., et al. Lifestyle, diabetes, and cardiovascular risk factors 10 years after bariatric surgery. The New England Journal of Medicine. 351 (26), 2683-2693 (2004).
  4. Buchwald, H., Avidor, Y., et al. Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis. JAMA. 292 (14), 1724-1737 (2004).
  5. Yin, D. P., Gao, Q., et al. Assessment of different bariatric surgeries in the treatment of obesity and insulin resistance in mice. Annals of surgery. 254 (1), 73-82 (2011).
  6. Buchwald, H., Oien, D. M. Metabolic/Bariatric Surgery Worldwide 2008. Obesity Surgery. 19 (12), 1605-1611 (2009).
  7. Liu, W., Zassoko, R., et al. Establishment of duodenojejunal bypass surgery in mice: A model designed for diabetic research. Microsurgery. 28 (3), 197-202 (2008).
  8. Lan, Z., Zassoko, R., et al. Development of techniques for gastrojejunal bypass surgery in obese mice. Microsurgery. , (2010).
  9. Schlager, A., Khalaileh, A., et al. A mouse model for sleeve gastrectomy: Applications for diabetes research. Microsurgery. 31 (1), 66-71 (2011).
  10. Troy, S., Soty, M., et al. Intestinal Gluconeogenesis Is a Key Factor for Early Metabolic Changes after Gastric Bypass but Not after Gastric Lap-Band in Mice. Cell Metabolism. 8 (3), 201-211 (2008).
  11. Seyfried, F., Lannoo, M., et al. Roux-en-Y gastric bypass in mice--surgical technique and characterisation. Obesity surgery. 22 (7), 1117-1125 (2012).

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Médecine numéro 121 la chirurgie bariatrique sleeve gastrectomie Roux-en-Y bypass gastrique l'obésité la souris
Techniques de sleeve gastrectomie et modification Roux-en-Y bypass gastrique chez la souris
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Ayer, A., Borel, F., Moreau, F.,More

Ayer, A., Borel, F., Moreau, F., Prieur, X., Neunlist, M., Cariou, B., Blanchard, C., Le May, C. Techniques of Sleeve Gastrectomy and Modified Roux-en-Y Gastric Bypass in Mice. J. Vis. Exp. (121), e54905, doi:10.3791/54905 (2017).

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