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Neuroscience

L’utilisation de Trace Eyeblink conditionnement de classique pour évaluer le dysfonctionnement hippocampique dans un modèle de Rat de Fetal Alcohol Spectrum Disorders

Published: August 5, 2017 doi: 10.3791/55350

Summary

Conditionnement classique de trace eyeblink (ECC) a servi à évaluer apprentissage associatif hippocampe-dépendante chez des rats adultes qui ont administré une forte concentration (11,9 % v/v) d’alcool pendant le développement précoce du cerveau néonatal. En général, les procédures ECC sont sons outils de diagnostic pour la détection de dysfonctionnement cérébral à travers de nombreux paramètres psychologiques et biomédicales.

Abstract

Les rats nouveau-nés ont reçu une concentration relativement élevée de l’alcool éthylique (11,9 % v/v) pendant les jours 4 à 9, alors que le cerveau foetal subit des bouleversements organisationnels et est similaire à accéléré des changements de cerveau qui se produisent pendant le troisième trimestre chez les humains. Ce modèle de troubles du spectre de l’alcoolisation fœtale (FASDs) produit des lésions cérébrales graves, imitant le montant et le motif des beuveries qui survient chez certaines femmes enceintes alcooliques. Les auteurs décrivent l’utilisation de la trace de conditionnement eyeblink classique (ECC), une variante d’ordre supérieur d’apprentissage associatif, afin d’évaluer le dysfonctionnement hippocampique à long terme qui est généralement observée chez la progéniture adultes exposés à l’alcool. 90 jours après la naissance, les rongeurs ont été préparés chirurgicalement avec enregistrement et électrodes stimulants, qui mesure électromyographique (EMG) clignotent l’activité du muscle de la paupière gauche et livré léger choc postérieur de l’oeil gauche, respectivement. Après une période de récupération de 5 jours, ils ont subi de 6 sessions de trace ECC pour déterminer les différences d’apprentissage associatif entre les exposés à l’alcool et les rats témoins. Trace ECC est l’une des nombreuses procédures ECC possibles qui peuvent être facilement modifiés en utilisant le même matériel et le logiciel, afin que différents systèmes neuronaux peuvent être évalués. Procédures de l’ECC en général, peuvent servir comme outils de diagnostic pour détecter la pathologie neuronale dans des systèmes différents de cerveau et des conditions différentes qui insultent le cerveau.

Representative Results

Le logiciel eyeblink est capable de fournir un ensemble vaste et complet de données pour de nombreux types de mesures. Par souci de concision, nous présentons dans cette étude, représentant résulte pour l’apprentissage et du rendement mesures incluant adaptative pourcentage CR, amplitude de CR adaptative, pourcentage d’UR et amplitude UR. La période CR adaptative a été choisie car il représente l’acquisition des réponses eyeblink opportune sur formation répétée, à la suite de la plasticité synaptique accrue dans l’hippocampe au cours de la trace ECC50,51,52. Les mesures d’UR ont été choisis pour déterminer si les déficits néonatale induite par l’alcool apprentissage en trace ECC étaient dû à des perturbations dans l’apprentissage associatif ou des interruptions dans la réponse au choc nous - ce qui peut indiquer des différences de motivationnels ou moteurs, plutôt que d’apprentissage des différences entre les groupes de traitement. Pour chaque mesure ont été analysées à l’aide de 2 (sexe) x 3 (Neonatal Group) x 6 (Session) mixé ANOVA, avec Session comme le facteur de mesures répétées. Effets principaux significatifs pour le traitement néonatal ont été analysées à l’aide de tests post hoc de Tukey et interactions significatives ont été analysées à l’aide de tests simples effets. Toutes les analyses statistiques ont été effectuées à l’aide d’un niveau minimal d’alpha de 0,05 et résultats dans les graphes sont moyenne ± SEM

Commençant par la mesure de pourcentage CR adaptative, analyse de la variance indique un effet principal significatif du neonatal group, F(2,21) = 11,69, p < 0,001, mais sans effet principal du sexe (p = 0,71) ou d’une interaction significative entre ces facteurs (p = 0,20). Comme prévu, adaptative CR pourcentage a augmenté au cours des six sessions de formation, F(5, 105) = 81.15, p < 0,001 et les différences entre les groupes néonatales étaient dépendants à un certain niveau de session, F(10, 105) = 4.58, p < 0,001. Il n’y a aucune autre interaction importante mettant en cause le facteur de la session. De même pour adaptative amplitude CR, il y avait encore un effet principal significatif du neonatal group, F(2,21) = 22.32, p < 0,001, mais sans effet principal du sexe (p = 0,21) ou d’une interaction significative entre ces facteurs (p = 0,48). Amplitude de CR a aussi augmenté considérablement au cours des six sessions de formation, F(5, 105) = 59.27, p < 0,001 et les différences entre les groupes néonatales étaient dépendants à un certain niveau de session, F(10, 105) = 4.31, p < 0,001. Dans l’ensemble, ces deux mesures de CR ont montré des différences significatives entre les groupe des moyens et de ces moyens séparés significativement à différentes sessions de formation. Pour vérifier quels groupes diffèrent significativement, tests post hoc de Tukey ont montré que les rats [AI] alcool-intubé effectué sensiblement pire sur ces deux mesures CR que l’unintubated-(UC) rats témoins et sham-intubé (SI) (p < 0.01 pour pourcentage de CR ; p < 0,001 pour amplitude CR), qui ne diffère pas de l’autre (p> 0,05). Effets simples tests effectués sur le groupe néonatale importante x interactions de Session pour les deux mesures de CR, a confirmé que les rats AI portait une atteinte plus significativement dans l’acquisition de CRs commençant à 2 Session et exerçant son activité par le biais de Session 6 comparativement à des rats UC et de SI (tous p< 0,05), qui ne diffère pas de l’autre tout au long de six séances. La seule exception était adaptative amplitude CR pour rats SI n’a pas commencé à diffèrent sensiblement des rats AI jusqu'à 3 Session. Ces résultats sont présentés dans la Figure 5 a, 5 b.

Il n’y a aucune différence significative entre les mesures d’UR en raison de sexe, le groupe néonatale ou les interactions de ces facteurs avec le facteur de la session. Ces résultats négatifs ont indiqué que chaque groupe a été en mesure d’émettre des réponses eyeblink au choc nous également, et que les déficits d’apprentissage chez les rats AI n’étaient pas influencés par les différences de motivationnels ou moteurs à clignoter (Figure 6 a, 6 b).

Figure 5
Figure 5 : Acquisition de trace conditionné ayant répondu au questionnaire (moyenne ± SEM). Exposition à l’alcool au début (groupe IA) a considérablement affecté acquisition de pourcentage de réponse conditionnée adaptative (CR) (A) et l’amplitude (B). Trace ECC est intrinsèquement difficile à acquérir, c’est pourquoi les mesures sont relativement plus faibles pour tous les groupes - avec retard ECC, pourcentages peuvent atteindre 80 à 85 % dans les modèles de rongeurs de l’ETCAF21,53. Néanmoins, la trace de la procédure de l’ECC est plus taxer sur l’hippocampe, qui est sensible aux effets de l’alcool pendant le développement précoce du cerveau. * = p < 0,05, ** = p < 0,01, *** = p < 0,001 entre les rats UC et l’IA ; la taille des échantillons est fournie entre parenthèses. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Figure 6
Figure 6 : Acquisition des réponses inconditionnel (moyenne ± SEM). EyeBlink performance (pourcentage d’UR et l’amplitude de l’UR) n’était pas significativement différente entre les groupes. L’absence de différences indiquent que l’intensité du choc utilisée au cours de la formation de l’acquisition ne modifie pas différemment de motivation chez les rats AI ou leur capacité à produire défensive blink réponses au choc, comparé aux deux groupes de contrôle (UC et SI). La taille des échantillons est fournie entre parenthèses. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Discussion

Ratons nouveau-nés ayant reçu l’alcool éthylique pendant 4-9 jours exposé trace eyeblink conditionnement des déficiences à l’âge adulte. Ces résultats confortent l’idée que l’alcool est un agent tératogène avec immuable des effets néfastes sur la fonction de l’hippocampe. Dans l’ensemble, conditionnés répondant dans la procédure de trace était plus faible chez les rats exposés à l’alcool comparée à des rats dans les deux groupes témoins. Les troubles de l’apprentissage associatif chez les rats exposés à l’alcool n’ont pas été influencés par les différences de motivationnels ou moteurs (i.e., aucune différence en clignotant à l’intensité du choc U.S.).

Tandis que trace ECC est un outil diagnostique utile pour élucider neuropathologie hippocampe induite par le défi, les résultats de cette méthode doivent être placés dans le contexte approprié. Tout d’abord, les principaux éléments de procédures dans cette démonstration implique l’administration ciblée d’alcool pendant une fenêtre connue de vulnérabilité pour le cerveau en développement, la fabrication de matériel d’électrode qui permet l’enregistrement de l’activité électromyographique et délivre le choc, l’implantation chirurgicale du matériel susmentionné et l’expérimentation animale ultérieure à l’aide d’un paradigme d’apprentissage qui évalue une fonction cognitive d’intérêt. À chaque étape du processus, il faut ne pas causer de dommages inutiles/involontaire aux sujets rongeurs et de surveiller leurs signes de santé régulièrement. Leurs résultats comportements fournissent la « fenêtre » à la cognition, une construction psychologique qui n’est précisément décrit quand leur état de santé n’est pas compromise par les erreurs expérimentales qui englobe le dosage de l’alcool, les défauts de matériel ou implantation chirurgicale. Ainsi, chaque élément procédural dans le processus de recherche doit être implémentée de façon judicieuse afin de s’assurer que les résultats de l’ECC sont extrapolables à résultats chez l’homme. Deuxièmement, le paradigme de l’ECC donne un aperçu sur la nature de l’apprentissage associatif, mais il faut pas d’étendre les résultats à l’aide de cette approche et leur attribuer largement à d’autres domaines cognitifs - telles que la mémoire de travail, court/long terme souvenirs et conscience - à moins que l’un a incorporé certaines facettes de ces domaines au sein d’une étude de l’ECC par protocole expérimental. Par exemple, cette démonstration a examiné la phase d’acquisition de l’apprentissage ECC trace, mais n’examine pas la rétention de la mémoire chez les rats après qu’ils ont terminé la formation. La mémoire est donc un processus psychologique indépendant qui doit être évalué en plus de l’apprentissage. Par sa conception, on peut incorporer un intervalle de conservation de mémoire afin d’évaluer une capacité de mémoire à court terme ou à long terme. Troisièmement, la reconnaissance qu’il n’y a de systèmes de mémoire parallèle54 qui peuvent fonctionner simultanément avec motivationnels, expérientiels et hormonales des facteurs qui contribuent au comportement, est essentiel pour comprendre que l’associativité (pendant ECC) est mais l’un des nombreux procédés qui révèlent ce qui est « bon » ou « mauvaise » sur l’apprentissage. Enfin, trace ECC n’est pas une tâche purement hippocampe-dépendantes, comme d’autres régions du cerveau pourraient véhiculer des composantes de la République tchèque. Ainsi, une compréhension des interactions entre les différents circuits neurones ou le type des paramètres de stimulation qui sont utilisés dans une étude, doit être tenu compte lors de répercussions sur base des résultats discrets. Le cervelet, par exemple, contribue également à tracer ECC, où elle influe sur les caractéristiques topographiques du CR et CR timing, particulièrement lorsque l’ISI est de court durée. Trace ECC n’est pas affectée chez les humains avec des dommages cérébraux qui sont testés avec un intervalle long trace (1 000 ms), mais est affectée chez les personnes qui reçoivent une plus courte trace intervalle (400 ms)34. En outre, les lésions bilatérales du cortex préfrontal médial dorsale (MFPC) qui ciblent les régions antérieure agranulaires cingulaire et médiane chez la souris, prévenir l’acquisition de trace CRs55, tandis que la destruction de la caudale MFPC chez le lapin produit similaires résultats46. Ces résultats soulignent également l’importance d’examiner les différences entre les espèces préfrontal contributions au cerveau cervelet tige apprentissage associatif, comme trace ECC. Alors que dans cette étude et d’autres, l’exposition néonatale de l’alcool lors de l’acquisition de 4-9 nui PD de 500 ms trace CRs pour adulte rats47,56, ce n’est pas le cas même pour les rats exposés à l’alcool néonatales que rencontrer un intervalle 300 ms de la trace, même lorsque contestée à une dose relativement élevée de l’alcool (5 g/kg)57, ce qui suggère que la déficience de trace chez les rats exposés à l’alcool dépend de la durée de l’intervalle de la trace.

Dans cette étude, l’hippocampe a été soulignée comme étant d’une importance vitale pour la médiation de trace ECC et quand contestée par exposition à l’alcool néonatale, pièces dommages neuronaux liés, comme en témoigne les déficiences dans l’acquisition de trace CRs. Il doit toutefois, a averti que les circuits de tige de cerveau cervelet, particulièrement le nucleus interpositus, sont essentielle pour les nombreuses facettes de l’ECC, y compris l’acquisition, d’expression et des caractéristiques topographiques de la République tchèque, selon le type de tâche ECC dont trace ECC36,40,55,58,59. En effet, ce circuit neuronal interagit avec l’hippocampe pour la conduite de l’expression des CRs lors de formes d’ordre supérieur d’ECC, tels que trace ECC60. Si exposition à l’alcool pendant le développement précoce du cerveau affecte spécifiquement la fonction hippocampe dans trace ECC n’est pas entièrement clair. Plusieurs différentes régions du cerveau sont vulnérables au début insulte de l’alcool, y compris le MFPC, le cervelet et l’hippocampe18,19,23,47,61,62, et il est très probable que l’alcool perturbe le fonctionnement de ces structures à des degrés divers et à varier, mais fonctionnellement importantes différences à travers de nombreuses procédures d’ECC. Malgré les obstacles concernant l’interprétation des résultats d’études ECC trace et acquisition réussie de trace CRs s’est avérée au moins compter sur un hippocampe intact, comme pris en charge par lésion animaux études42,44,63,64,65. Cette procédure reste donc une approche très utile pour démontrer les liens entre l’exposition à l’alcool du développement à trace conditionné répond plus car les circuits neuronaux qui la sous-tendent, est beaucoup mieux comprise que celle des autres tâches hippocampe-dépendantes, telles que l’apprentissage de la place dans le labyrinthe de l’eau de Morris, reconnaissance des objets nouveaux et contextuelle et trace de conditionnement de la peur.

ECC comme une méthode comportementale pour « doser » cognition, a large applicabilité dans le domaine du développement neuroteratology. En effet, les découvertes récentes de notre laboratoire soutiennent l’idée que l’hippocampe en développement est très sensible aux effets de l’alcool, qui peuvent être atténuées par différentes stratégies interventionnelle18,47. Le principal avantage ici, c’est qu’avec une meilleure compréhension des déficits d’apprentissage ECC trace induite par l’alcool, ils peuvent être prédictives d’autres problèmes dans les fonctions hippocampiques en dehors de l’apprentissage associatif - en particulier ceux connus pour être médiée par le même neuronaux hippocampe.

Application de trace ECC et ses autres variantes (p. ex., retard, inversion, discrimination, composée) pour élucider les mécanismes neurobiologiques et les systèmes neuronaux impliqués dans l’apprentissage associatif, peut être étendue au-delà du domaine de la recherche de l’alcool sur le fœtus. Par exemple, ce paradigme a reçu beaucoup d’attention dans les cas humains et des modèles animaux de troubles psychiatriques comme la schizophrénie66,67, les maladies neurodégénératives comme la maladie d’Alzheimer68,,69et les drogues d’abus70,71,72. Ses avantages comme une méthode de recherche pour évaluer le dysfonctionnement et les fonctions neurocognitives ressortent donc nombreuses disciplines psychologiques et biomédicales, y compris des neurosciences.

Disclosures

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Acknowledgments

Ce travail a été soutenu par une subvention de TDT de l’alcool boisson Medical Research Foundation (ABMRF).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Neonatal Alcohol Exposure
190 Proof Ethyl Alcohol (USP) Pharmco-AAPER 225-36000 [ECU Medical Storeroom] Can be substituted; should be USP; avoid using 200 proof ethyl alcohol
Container/Basket for Pups Any
Corn Oil Any Food grade
Heated Water Therapy Pump w/ Pads Gaymar TP-500 To keep pups warm; can be substituted
Hypodermic Needles 22G x 1 in, Sterile Any
Hypodermic Needles 30G x 1/2 in, Sterile Any
Isopropyl Alcohol 70% EMD Millipore PX1840-4 [Fisher Scientific] Can be substituted; reagent grade
www.fishersci.com
Long-Evans Rats (Female and Male Breeders) Charles River Laboratories N/A [ECU Dept. of Comparative Medicine] Age and weight need to be specified; pricing varies by these factors
www.criver.com
Micro Dissecting Scissors, 3.5 in, 23 mm Blades Biomedical Research Instruments 11-2200 For cutting PE tubing
brisurgical.com
Polyethylene 10 Tubing (0.011 in. I.D.; 0.024 in. O.D.) BD Diagnostic Systems 22-204008 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Polyethylene 50 Tubing (0.023 in. I.D.; 0.038 in. O.D.) BD Diagnostic Systems 22270835 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Regulated water heater or baby milk bottle warmer Any Optional; helps with warming up cold milk solutions
Tuberculin Syringes, Sterile, 1.0 ml Any
Tuberculin Syringes, Sterile, 10 ml Any Can be used to draw out ethyl alcohol or use appropriate size micropipet
Weigh Scale Any Should have good resolution (in gram units)
Name Company Catalog Number Comments
EMG Headstage Fabrication and Bipolar Electrode Modification
Bipolar Electrode, 2 Channel SS Twisted Plastics One, Inc. MS303/2-B/SPC  ELECT SS  2C TW .008" Must specify custom length of 20 mm below pedestal
www.plastics1.com
Centi-Loc Strip Socket Insulator (aka, Micro Strip) ITT Cannon / ITT Interconnect Solutions CTA4-IS-60* or CTA4-1S-60* *Depends on vendor; see www.onlinecomponents.com or www.avnetexpress.avnet.com
Dental Pliers, Serrated CMF Medicon 390.20.05 Can be substituted; use to crimp wires to male contact pins
www.medicon.de
Micro Dissecting Scissors, 3.5 in, 23 mm Blades Biomedical Research Instruments 11-2200 Only use to cut 3T wires; cutting 10T wires will damage the blade - use the blade of the wire stripper instead
brisurgical.com
PTFE-Coated Stainless Steel Wire, 10T (Bare Diameter .010 in) Sigmund Cohn-Medwire 316SS10T
www.sigmundcohn.com
PTFE-Coated Stainless Steel Wire, 3T (Bare Diameter 0.003 in) Sigmund Cohn-Medwire 316SS3T
www.sigmundcohn.com
Razor Blade Any To strip 1 mm from prongs of bipolar electrode
Relia-Tac Socket Contact Pin, Male Cooper Interconnect 220-P02-100 See Allied Electronics Cat # 70144761
www.alliedelec.com
Tweezers, High Precision, Serrated, 4 3/4 in Electron Microscopy Sciences 78314-00D To grasp 10T wire firmly while stripping PTFE with smooth tweezers
www.emsdiasum.com
Tweezers, High Precision, Smooth, 4 3/4 in Electron Microscopy Sciences 78313-00B
www.emsdiasum.com
Tweezers, Ultra Fine Tips, 4 3/4 in Electron Microscopy Sciences 78510-0 To strip 1 mm of PTFE from one end of 3T wire; grasp shielded portion with smooth tweezers
www.emsdiasum.com
Wire Stripper, 16-26 AWG Any Use the blade end to cut micro strips
Name Company Catalog Number Comments
Eyelid Surgery
Surgical Instruments (High Quality Stainless Steel)
2 x Dressing Forceps, 4 in Serrated Biomedical Research Instruments 30-1205 Can be substituted; extra forceps for grasping electrodes/screws outside of surgery tray
brisurgical.com
Dressing Forceps, 3 in Serrated Biomedical Research Instruments 30-1200 Can be substituted
brisurgical.com
Instrument Tray Biomedical Research Instruments 24-1355 Can be substituted
brisurgical.com
Knife Handle No. 3, 5 in Biomedical Research Instruments 26-1000 Can be substituted
brisurgical.com
Micro Dissecting Forceps, 3.5 in, Fine Points Biomedical Research Instruments 10-1630 Can be substituted
brisurgical.com
Micro Dissecting Forceps, 3.5 in, Smooth Platform (0.3 x 5 mm) Biomedical Research Instruments 10-1720
brisurgical.com
Micro Dissecting Scissors, 3.5 in, Extremely Delicate, 15 mm Blades Biomedical Research Instruments 11-2000 Can be substituted
brisurgical.com
Plain Splinter Forceps, 3.5 in  Biomedical Research Instruments 30-1600 Can be substituted
brisurgical.com
#10 Stainless Steel Surgical Blade for #3 Handle, Sterile Any Can be substituted
0-80 x 0.125 in Stainless Steel Screws Plastics One, Inc. 0-80 x 0.125 Can be substituted
www.plastics1.com
Alcohol Prep Pads, Sterile Fisher Scientific 22-363-750 [Fisher Scientific Can be substituted
www.fishersci.com
Betadine Povidone-Iodine Purdue Frederick Co. 6761815101 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Betadine Povidone-Iodine Prep Pads Moore Medical 19-898-946 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Cotton-Tipped Swabs, Autoclavable Any Typically 7.6 cm or 15.2 cm length
Drill Bit for Pin Vise, #55 (0.052 in) Any Metal should resist rusting and corrosion
Gauze Pads, 2 in x 2 in Fisher Scientific 22-362-178 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
General Purpose Latex/Nitrile/Vinyl Gloves Any
Glass Bead Sterilizer Any Sterilize instruments between surgeries
Heated Water Therapy Pump w/ Pads x 2 Gaymar TP-500 Can be substituted; separate pumps are recommended - 1 for surgery, 1 for recovery
Hypodermic Needles 26G x 3/8 in, Sterile Any
Isoflurane Vedco NDC 50989-150-12 Manfacturer can be substituted; veterinary approval may be required
Isoflurane Vaporizer System, Tabletop, Non-Rebreathing Parkland Scientific V3000PK Can be substituted
www.parklandscientific.com
Jewelers Screwdriver w/ 1.8-2 mm Blade Any Metal should resist rusting and corrosion
Ortho-Jet BCA Package (Dental Cement) Lang Dental B1334 Contains powder (1 lb) and liquid
www.langdental.com
Oxygen Tank with Pressure Regulator, Large Local supplier
Porcelain Crucible, High-Form, Glazed, 10 ml CoorsTek, Inc. 07-965C [Fisher Scientific] Can be substituted with Fisher FB-965-I Wide-Form Crucible
www.fishersci.com
Puralube Veterinary Ophthalmic Ointment, Sterile Henry Schein Company NC0144682 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Quatricide PV-15 Pharmacal PV-15 Antimicrobial disinfectant; can be substituted
www.pharmacal.com
Rat Gas Anesthesia Masks for Stereotaxic Surgery  Stoelting Company 51610
www.stoeltingco.com
Rat Stereotaxic Apparatus w/ Ear Bars (45 Degree) Any 45 degree bars are recommended to prevent damaging eardrums
Roboz Surgical Instrument Milk Roboz Surgical NC9358575 [Fisher Scientific] Can be substituted; for lubricating instruments during autoclaving
www.fishersci.com
Rodent Hair Trimmer Any
Sodium Chloride Fisher Scientific S641-500 [Fisher Scientific] To make 0.9% saline; reagent grade; USP
www.fishersci.com
Stainless Steel Microspatula (Blade: 0.75 L x 0.18 in. W) Fisher Scientific 21-401-15 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Starrett Pin Vise, 0.000 in - 0.055 in Any Nickel-plated or equivalent recommended to resist rusting and corrosion
Sterile Surgical Gloves Any
Sterilization Wraps, 20 in x 20 in, Autoclavable Propper Manufacturing 11-890-8C [Fisher Scientific] Useful for wrapping autoclavable supplies and on sterile field during surgery
www.fishersci.com
Surgical Drape, Sterile/Autoclavable Any May need to cut to size for rats
Surgical Gown* Any *If required by IACUC
Surgical Mask Any
Tuberculin Syringes, Sterile, 1.0 ml Any
Weigh Scale Any Should have good resolution (in gram units)
Name Company Catalog Number Comments
Eyeblink System and Components (assuming 4-rodent system)
5 Channel Commutator x 4 Plastics One, Inc. SL2 + 3C
www.plastics1.com
Bipolar Electrode Cable, Dual 305 x 4 Plastics One, Inc. 305-305 80CM TT2 (C) Provides plug end to bipolar electrode on rat and to commutator; must be modified
www.plastics1.com
Cable, 5 Channel, Shielded, 26 AWG x 4 Any To fabricate commutator cable; this must be made from scratch
Chamber for Operant Test Box (Inside: 24 H x 23 W x 14 D in) x 4 Med-Associates Can be substituted; inner dimensions should fit operant test box comfortably, with room for acoustical foam; fit with fan - 55-60 dB
www.med-associates.com
Eyeblink System and Software JSA Designs N/A Proprietary and customized for research lab
Heat Shrink Tubing (3/16 in, 1/4 in, 3/8 in, 1/2 in Diameters) Any To protect modified commutator cable soldered ends and splices
Melamine Triple Peak Acoustical Foam w/Black Hypalon (24 x 48 in) McMaster-Carr 9162T5 Can be substituted; cut to fit 4 housing chambers
www.mcmaster.com
Operant Test Box (Exterior 12.5 L x 10 W x 13.5 in H), Complete x 4 Med-Associates ENV-007 Custom Package With stainless steel grid floor and custom top (3 in hole in center for commutator cable)
www.med-associates.com
Oscilloscope (Optional) Any Recommended minimum specs: 200 MHz analog bandwidth, 1 GS/s real-time sampling, 4 channels; see www.picotech.com
/td>
Piezo Tweeters (Speakers) x 4 (7 x 3 in) MCM Electronics 53-805 Must match frequency range specifications for eyeblink system (2500 Hz - 25 KHz)
www.mcmelectronics.com
Soldering Station, Solder, Flux, Tinner Any For soldering 26 AWG cables to female sockets (that fit male relia-tac contact pins) and bipolar plugs
Stimulus Isolators x 4 WPI International A365 These units run on 16-9V alkaline batteries; a suitable rechargeable version (A365R) is available
www.wpiinc.com
Tripolar Electrode Cable for SL3C Commutator x 4 Plastics One, Inc. 335-335 80cm TT3 C Provides plug end to EMG headstage on rat and to commutator; must be modified
www.plastics1.com
USB LED Lights x 4 Any USB-based lights do not cause electrical "noise" with the EMG signals from the rats
www.plastics1.com
Webcams x 4, Surveillance Software Any
PC Computer Running MS Windows OS Any

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References

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Eyeblink Neuroscience numéro 126 conditionnement hippocampe troubles du spectre de l’alcoolisation fœtale apprentissage mémoire cervelet
L’utilisation de Trace Eyeblink conditionnement de classique pour évaluer le dysfonctionnement hippocampique dans un modèle de Rat de Fetal Alcohol Spectrum Disorders
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Tran, T. D., Amin, A., Jones, K. G., More

Tran, T. D., Amin, A., Jones, K. G., Sheffer, E. M., Ortega, L., Dolman, K. The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders. J. Vis. Exp. (126), e55350, doi:10.3791/55350 (2017).

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