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Neuroscience

태아 알코올 스펙트럼 장애의 쥐 모델에서 Hippocampal 기능 장애를 평가 하기 위해 추적 Eyeblink 클래식 컨디셔닝의 사용

Published: August 5, 2017 doi: 10.3791/55350

Summary

추적 eyeblink 클래식 컨디셔닝 (ECC) 평가 하는 데 사용 되었다 hippocampal 종속 연관 학습 했다 성인 쥐에 투여 초기 신생아 두뇌 개발 하는 동안 알코올의 높은 농도 (11.9 %v / v). 일반적으로, ECC 절차는 많은 심리적, 생물 의학 설정을 통해 뇌 기능 장애를 탐지 하기 위한 사운드 진단 도구입니다.

Abstract

신생아 쥐 관리 되었다 4-9, 산 후 시절 에틸 알코올 (11.9 %v / v)의 상대적으로 높은 농도 태아 뇌 조직의 급속 한 변화를 겪 습 비슷합니다 시간 가속 인간의 세 번째 임신 기간 중 발생 하는 뇌 변경. 태아 알코올 스펙트럼 장애 (FASDs)의이 모델 생산 양과-술자리 일부 임산부 알콜에 나타나는 패턴을 흉내 낸 심각한 뇌 손상. 우리 추적 eyeblink 클래식 컨디셔닝 (ECC), 일반적으로 알코올 노출 성인 자손에 본 장기 hippocampal 기능 장애를 평가 하기 위해 연관 학습의 더 높은 순서 이체를 사용 하 여를 설명 합니다. 나이의 90 일, 설치류 수술 기록 준비 되었고 자극 전극 측정 시 (EMG) 왼쪽된 눈 꺼 풀 근육에서 활동을 깜박 하 고 가벼운 충격 후부 왼쪽된 눈에 각각 전달. 5 일 복구 기간 후, 그들은 추적 연관 학습의 차이점 알코올 노출와 쥐 제어를 결정 하는 ECC의 6 회를 받았다. 추적 ECC 수정할 수 있는 쉽게 같은 장비 및 소프트웨어를 사용 하 여 서로 다른 신경 시스템 평가 될 수 있다 그래야 많은 가능한 ECC 절차 중 하나입니다. ECC 절차 일반적으로 서로 다른 뇌 시스템 및 두뇌를 모욕 하는 다른 조건에 신경 병리학을 탐지 하기 위한 진단 도구로 사용할 수 있습니다.

Representative Results

Eyeblink 소프트웨어는 다양 한 유형의 측정 데이터의 크고 포괄적인 세트를 제공 수 있습니다. 간결, 우리는이 연구에서 보고 대표 결과 학습 및 성능에 대 한 적응형 CR 비율, 적응형 CR 진폭, UR 비율 및 UR 진폭을 포함 하는 측정. 적응형 CR 기간 추적 ECC50,,5152중 해 마에서 향상 된 시 냅 스가 소성의 결과로 반복된 훈련을 통해 잘 초과 eyeblink 응답의 인수를 나타내는 선택 되었다. 통해 UR 대책 여부에 신생아 알코올 유발 학습 적자 추적 ECC 동기 또는 모터 차이 보다는 학습 치료 그룹 간의 차이 알 수 있습니다-우리 연관 학습 중단 또는 충격에 응답 중단 했다 명료 하 선정 됐다. 각 측정값에 대 한 데이터 반복 측정 요소로 세션 ANOVAs 혼합 2 (섹스) x 3 (Neonatal 그룹) x 6 (세션)을 사용 하 여 분석 되었다. 신생아 치료 위한 중요 한 주요 효과 했다 Tukey의 포스트 hoc 테스트를 사용 하 여 분석 하 고 중요 한 상호 작용은 간단한 효과 테스트를 사용 하 여 분석 되었다. 모든 통계 분석 0.05의 최소한 알파를 사용 하 여 실시 했다 및 그래프에 결과 평균 ± SEM.

적응형 CR 비율 측정부터, ANOVA 신생아 그룹, F(2,21)의 중요 한 주요 효과 표시 11.69, p = < 0.001, 하지만 섹스의 중요 한 주요 효력이 없다 (p = 0.71) 또는 이러한 요소 사이의 중요 한 상호 작용 (p = 0.20). CR 비율 적응 훈련, F(5, 105)의 6 개의 세션에 걸쳐 증가 예상 대로 81.15, p = < 0.001, 그리고 신생아 그룹 간의 차이 일정 수준의 세션, F(10, 105)에 의존 했다 4.58, p = < 0.001. 전혀 다른 중요 한 상호 작용 세션 요소를 포함 했다. 마찬가지로 적응 CR 진폭, 거기 했다 다시 신생아 그룹, F(2,21)의 중요 한 주요 효과 22.32, p = < 0.001, 하지만 섹스의 중요 한 주요 효력이 없다 (p = 0.21) 또는 이러한 요소 사이의 중요 한 상호 작용 (p = 0.48). CR 진폭 또한 훈련, F(5, 105)의 6 개의 세션에 걸쳐 크게 증가 59.27, p = < 0.001, 그리고 신생아 그룹 간의 차이 일정 수준의 세션, F(10, 105)에 의존 했다 4.31, p = < 0.001. 전반적으로, 두 CR 조치 그룹 의미와 훈련의 다른 세션에서 크게 구분이 의미 간의 중요 한 차이 보였다. 확인 하려면 그룹 크게 달랐다, Tukey의 포스트 hoc 테스트는 알코올 intubated (AI) 쥐 수행 크게 악화 (UC) unintubated-제어 및 가짜 intubated (SI) 쥐 보다 두 CR 조치에 나타났다 (p < 0.01 CR 비율; p < CR 진폭 0.001)는 서로 다를 하지 않았다 (p> 0.05). 간단한 효과 테스트 AI 쥐 CRs 세션 2에서 시작 하 고 세션 6 들고 UC와 시 쥐에 비해 인수에 더 크게 손상 되었다 확인 두 CR 조치에 대 한 상호 작용 세션 x 상당한 Neonatal 그룹에 수행 (모든 p< 0.05)는 6 개의 세션에 걸쳐 서로 다 하지 않았다. 유일한 예외는 적응형 CR 진폭 시 쥐 세션 3까지 AI 쥐에서 크게 다를 시작 하지 않았다 했다. 이러한 결과 그림 5A, 5B에 표시 됩니다.

섹스, 신생아 그룹, 또는 세션 요소와 이러한 요소의 상호 작용 통해 UR 대책에 상당한 차이가 있었다. 이러한 부정적인 결과 표시 각 그룹은 동등 하 게, 충격 eyeblink 응답 우리 방출할 수 동기 또는 모터 차이 (그림 6A, 6B) 점멸에 의해 영향을 학습 적자 AI 쥐에서 관찰 되지 않았습니다.

Figure 5
그림 5 : 추적의 인수 조건 응답 (평균 ± SEM). 초기 알콜 노출 (AI 그룹) 적합 조건 반응 (CR) 비율 (A)와 (B) 진폭의 인수를 크게 영향을 받습니다. 추적 ECC는 본질적으로 얻기 어렵다, 따라서 조치는 모든 그룹-지연 ECC에 대 한 상대적으로 낮은, 백분율 FASD21,53의 설치류 모델에서 80-85%에 도달할 수 있습니다. 그럼에도 불구 하 고, 추적 ECC 절차는 쉽습니다 알코올 효과 초기 두뇌 발달 동안에 해 마, 부담 스러운 더 많은입니다. p 를 = < 0.05, * * p = < 0.01, * * * = p < UC 및 AI 쥐; 사이 0.001 샘플 크기는 괄호에 제공 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 6
그림 6 : Unconditioned 응답 (± SEM을 의미)의 인수. Eyeblink 성능 (UR 비율과 UR 진폭) 그룹 중 크게 다른 아니었다. 차이의 부족 수집 훈련 중에 사용 하는 충격 강도 차동 AI 쥐 동기 부여를 변경 하지 않았다 또는 그들의 생산 능력을 방어 깜박 모두 제어 그룹 (UC 및 SI)에 비해 충격에 대 한 응답을 나타냅니다. 샘플 크기는 괄호에 제공 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Discussion

출생 후 일 4-9 중 에틸 알코올을 받은 신생아 쥐 새끼 추적 eyeblink 성인에서 장애를 컨디셔닝 전시. 이러한 연구 결과 알코올 hippocampal 기능에 해로운 효과 지속으로 기형 발생 물질은 아이디어를 지원 합니다. 전반적으로, 조건 응답 추적 절차에 있던 두 컨트롤 그룹에 있는 쥐에 비해 알코올에 노출 된 쥐를 위해. 알코올에 노출 된 쥐에 연관 학습 장애 동기 또는 모터 차이 의해 영향을 받지 했다 (., 깜박이 충격 미국 강도 차이가).

추적 ECC elucidating 도전 유도 hippocampal neuropathology에 대 한 유용한 진단 도구입니다, 하는 동안이 메서드의 결과 적절 한 문맥에 배치 되어야 합니다. 첫째,이 데모의 핵심 절차 요소 개발 두뇌 하 시 활동의 기록을 허락 한다 충격, 위에서 언급 한 하드웨어, 그리고 관심의 인지 기능을 평가 하는 학습 패러다임을 사용 하 여 후속 동물 테스트의 외과 이식 전극 하드웨어의 제작에 대 한 취약성의 알려진된 창 동안 알코올의 대상된 배달 관련. 과정에서 각 단계에서 해야 합니다 주의 쥐 주제에 의도 하지 않은 불필요 한 피해를 발생 하지 하 고 그들의 건강 징후를 정기적으로 모니터링 합니다. 그들의 행동 결과 인지 "창"을 제공, 정확 하 게는 심리적 구조 설명 때 그들의 건강 알코올 주입, 하드웨어 결함, 또는 수술 주입을 포괄 하는 실험적인 오류에 의해 손상 되지. 따라서, 연구 과정에서 절차 상의 각 요소 간에 발견에 ECC에서 결과 추정 수 있도록 사운드 방식으로 구현 되어야 합니다. 둘째, ECC 패러다임 연관 학습의 본질에 통찰력을 제공 하지만 해야 합니다 주의 하지이 접근을 사용 하 여 결과 확장 하 고 광범위 하 게 다른 인지 도메인-작업 메모리, 단기/장기 기억, 의식-등을 돌리다 한 실험적인 디자인으로 ECC 연구 내에서이 도메인의 일부 일 면을 통합 했다 하지 않는 한. 예를 들어이 데모 추적 ECC 학습의 수집 단계를 검사 하지만 그들은 훈련을 완료 한 후 쥐에 메모리 보존을 조사 하지 않았다. 메모리는 이렇게 학습 이외에 평가 해야 하는 독립적인 심리적 프로세스입니다. 디자인, 하나 중 단기 또는 장기 메모리 능력을 평가 하기 위해 메모리 보존 간격을 통합할 수 있습니다. 셋째, 병렬 메모리 시스템54 동작을 동기, 경험, 그리고 호르몬 요인 함께 동시에 작동 하지 않을 수 있습니다 인정 (ECC) 동안 연관성은 이해 하지만 "좋은" 또는 "가난한" 학습에 대해 공개 하는 많은 프로세스 중 하나에 대 한 필수적입니다. 마지막으로, 추적 ECC 아니다 순전히 hippocampal 종속 작업, 다른 뇌 영역 크롬의 몇 가지 구성 요소를 중재할 수 있습니다. 따라서, 다른 신경 회로 및 자극 매개 변수를 연구에 활용, 의미 개별 결과에 따라 때에 고려 한다 유형 사이 상호 작용의 이해. 소 뇌, 예, 또한 추적 ECC, 어디 그것 영향 CR와 타이밍, 특히 ISI는 짧은 기간에 크롬의 지형 특성에 기여. 추적 ECC 긴 추적 간격 (1000 ms), 테스트는 인간 소 뇌 손상에 영향을 받지 않습니다 하지만 그는 짧은 추적 간격 (400 ms)34에 영향을. 또한, 마우스에 이전 대상 및 중간 agranular 영역을 대상으로 등 쪽 내측 전 두 엽 피 질 (mPFC)의 양측 병 변 비슷한 결과46를 생산 하는 토끼에서 꼬리 mPFC의 파괴 하는 동안 추적55, CRs 인수를 방지 합니다. 이러한 연구 결과 또한 고려 소 뇌-뇌 전 두 엽 기여에 종 차이 줄기 추적 ECC와 같은 구동된 연관 학습의 중요성을 강조. 성인 500 ms 추적 CRs의 PD 4-9에 부정적인 영향을 중 신생아 알코올 노출 쥐이 연구 등에서47,56, 이것은 하지 알콜 (5 g/kg)57, 알코올에 노출 된 쥐에 추적 장애 추적 간격의 기간에 따라 달라 집니다 제안의 상대적으로 높은 복용량에 도전 하는 경우에 300 ms 추적 간격을 경험 하는 신생아 알코올에 노출 된 쥐에 대 한 같은 경우.

본이 연구에서는 해 마 신경 관련 손상 장애 추적 CRs의 취득에 의해 반영 된 전시 vitally 중요 추적 ECC, 중재에 대 한 신생아 알콜 노출에 의해 도전 되 고 강조 했다. 그러나 그것은,, 소 뇌-뇌 줄기 회로, 특히 interpositus 핵, ECC, 수집, 식, ECC 작업 포함 추적 ECC36,40,55,,5859의 종류에 따라 CR의 지형 기능 등의 다양 한 측면에 대 한 필수적입니다 경고 해야 합니다. 실제로,이 신경 회로 추적 ECC60등 ECC의 더 높은 순서 형태 동안 CRs의 식 구동을 위한 해 마와 상호 작용 합니다. 여부 알코올 노출 초기 두뇌 발달 동안 구체적으로 영향을 미치는 hippocampal 기능 추적 ECC에에서 완전히 명확 하지 않습니다. 많은 다른 두뇌 지구는 mPFC, 소 뇌, 그리고 해 마18,19,23,47,,6162를 포함 하 여 초기 알코올 모욕에 취약 하 고 알코올 많은 ECC 절차에 걸쳐 이러한 구조를 다양 한 각도 변화, 하지만 기능적으로 중요 한 차이의 기능 방해 매우 높습니다. 추적 ECC 연구에서 결과의 해석에 관한 함정, 불구 추적 CRs의 성공적인 인수 표시 되었습니다 적어도 그대로 해 마에 의존 하는 동물 병 변 연구42,44,63,,6465에 의해 지원. 이 프로시저는 추적 조건 때문에, 기본 신경 회로 훨씬 더 나은 응답을 발달 알코올 노출 사이의 링크 모리스 물 미로에 장소 학습 등 다른 hippocampal 종속 작업 보다 소설 개체 인식, 이해 위한 매우 귀중 한 접근에 따라서 남아 있다 및 콘텐츠 및 컨디셔닝 공포 추적.

"시험" 인식, 행동 방법으로 ECC 발달 neuroteratology의 분야에서 광범위 한 적용을 있다. 실제로, 우리의 실험실에서 최근 연구 결과 개발 해 마는 다른 중재 전략18,47에 의해 완화 될 수 있습니다 알코올 효과에 매우 민감한 개념 지원. 여기에 주요 장점은 그 알코올 유발 추적 ECC 학습 적자의 더 나은 이해, 그들은 수 있습니다 연관 학습-외부 기반 hippocampal 기능에서 다른 문제의 예측 같은 hippocampal neurocircuitry에 의해 중재 될 것으로 알려져 특히 그입니다.

응용 프로그램 추적 ECC 및 그것의 다른 변종 (예를 들어, 지연, 반전, 차별, 복합) neurobiological 메커니즘 및 신경 시스템 연관 학습에 관련 된 명료 하의 태아 알코올 연구의 분야를 넘어 확장할 수 있습니다. 예를 들어이 패러다임에 인간의 경우 정신 분열 증66,67같은 정신 조건, 알 츠 하이 머 병68,69, 같은 신경 퇴행 성 질환의 동물 모델 및 약물 남용70,,7172의 많은 관심을 받았습니다. Neurocognitive 기능 부전을 평가 하는 연구 방법으로 그 혜택은 따라서 신경 과학을 비롯 한 많은 심리적, 생물 의학 분야에 걸쳐 분명 있습니다.

Disclosures

저자는 공개 없다.

Acknowledgments

이 작품은 지원 교부 금에 의해 TDT에서는 알콜 음료 의료 연구 재단 (ABMRF).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Neonatal Alcohol Exposure
190 Proof Ethyl Alcohol (USP) Pharmco-AAPER 225-36000 [ECU Medical Storeroom] Can be substituted; should be USP; avoid using 200 proof ethyl alcohol
Container/Basket for Pups Any
Corn Oil Any Food grade
Heated Water Therapy Pump w/ Pads Gaymar TP-500 To keep pups warm; can be substituted
Hypodermic Needles 22G x 1 in, Sterile Any
Hypodermic Needles 30G x 1/2 in, Sterile Any
Isopropyl Alcohol 70% EMD Millipore PX1840-4 [Fisher Scientific] Can be substituted; reagent grade
www.fishersci.com
Long-Evans Rats (Female and Male Breeders) Charles River Laboratories N/A [ECU Dept. of Comparative Medicine] Age and weight need to be specified; pricing varies by these factors
www.criver.com
Micro Dissecting Scissors, 3.5 in, 23 mm Blades Biomedical Research Instruments 11-2200 For cutting PE tubing
brisurgical.com
Polyethylene 10 Tubing (0.011 in. I.D.; 0.024 in. O.D.) BD Diagnostic Systems 22-204008 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Polyethylene 50 Tubing (0.023 in. I.D.; 0.038 in. O.D.) BD Diagnostic Systems 22270835 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Regulated water heater or baby milk bottle warmer Any Optional; helps with warming up cold milk solutions
Tuberculin Syringes, Sterile, 1.0 ml Any
Tuberculin Syringes, Sterile, 10 ml Any Can be used to draw out ethyl alcohol or use appropriate size micropipet
Weigh Scale Any Should have good resolution (in gram units)
Name Company Catalog Number Comments
EMG Headstage Fabrication and Bipolar Electrode Modification
Bipolar Electrode, 2 Channel SS Twisted Plastics One, Inc. MS303/2-B/SPC  ELECT SS  2C TW .008" Must specify custom length of 20 mm below pedestal
www.plastics1.com
Centi-Loc Strip Socket Insulator (aka, Micro Strip) ITT Cannon / ITT Interconnect Solutions CTA4-IS-60* or CTA4-1S-60* *Depends on vendor; see www.onlinecomponents.com or www.avnetexpress.avnet.com
Dental Pliers, Serrated CMF Medicon 390.20.05 Can be substituted; use to crimp wires to male contact pins
www.medicon.de
Micro Dissecting Scissors, 3.5 in, 23 mm Blades Biomedical Research Instruments 11-2200 Only use to cut 3T wires; cutting 10T wires will damage the blade - use the blade of the wire stripper instead
brisurgical.com
PTFE-Coated Stainless Steel Wire, 10T (Bare Diameter .010 in) Sigmund Cohn-Medwire 316SS10T
www.sigmundcohn.com
PTFE-Coated Stainless Steel Wire, 3T (Bare Diameter 0.003 in) Sigmund Cohn-Medwire 316SS3T
www.sigmundcohn.com
Razor Blade Any To strip 1 mm from prongs of bipolar electrode
Relia-Tac Socket Contact Pin, Male Cooper Interconnect 220-P02-100 See Allied Electronics Cat # 70144761
www.alliedelec.com
Tweezers, High Precision, Serrated, 4 3/4 in Electron Microscopy Sciences 78314-00D To grasp 10T wire firmly while stripping PTFE with smooth tweezers
www.emsdiasum.com
Tweezers, High Precision, Smooth, 4 3/4 in Electron Microscopy Sciences 78313-00B
www.emsdiasum.com
Tweezers, Ultra Fine Tips, 4 3/4 in Electron Microscopy Sciences 78510-0 To strip 1 mm of PTFE from one end of 3T wire; grasp shielded portion with smooth tweezers
www.emsdiasum.com
Wire Stripper, 16-26 AWG Any Use the blade end to cut micro strips
Name Company Catalog Number Comments
Eyelid Surgery
Surgical Instruments (High Quality Stainless Steel)
2 x Dressing Forceps, 4 in Serrated Biomedical Research Instruments 30-1205 Can be substituted; extra forceps for grasping electrodes/screws outside of surgery tray
brisurgical.com
Dressing Forceps, 3 in Serrated Biomedical Research Instruments 30-1200 Can be substituted
brisurgical.com
Instrument Tray Biomedical Research Instruments 24-1355 Can be substituted
brisurgical.com
Knife Handle No. 3, 5 in Biomedical Research Instruments 26-1000 Can be substituted
brisurgical.com
Micro Dissecting Forceps, 3.5 in, Fine Points Biomedical Research Instruments 10-1630 Can be substituted
brisurgical.com
Micro Dissecting Forceps, 3.5 in, Smooth Platform (0.3 x 5 mm) Biomedical Research Instruments 10-1720
brisurgical.com
Micro Dissecting Scissors, 3.5 in, Extremely Delicate, 15 mm Blades Biomedical Research Instruments 11-2000 Can be substituted
brisurgical.com
Plain Splinter Forceps, 3.5 in  Biomedical Research Instruments 30-1600 Can be substituted
brisurgical.com
#10 Stainless Steel Surgical Blade for #3 Handle, Sterile Any Can be substituted
0-80 x 0.125 in Stainless Steel Screws Plastics One, Inc. 0-80 x 0.125 Can be substituted
www.plastics1.com
Alcohol Prep Pads, Sterile Fisher Scientific 22-363-750 [Fisher Scientific Can be substituted
www.fishersci.com
Betadine Povidone-Iodine Purdue Frederick Co. 6761815101 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Betadine Povidone-Iodine Prep Pads Moore Medical 19-898-946 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Cotton-Tipped Swabs, Autoclavable Any Typically 7.6 cm or 15.2 cm length
Drill Bit for Pin Vise, #55 (0.052 in) Any Metal should resist rusting and corrosion
Gauze Pads, 2 in x 2 in Fisher Scientific 22-362-178 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
General Purpose Latex/Nitrile/Vinyl Gloves Any
Glass Bead Sterilizer Any Sterilize instruments between surgeries
Heated Water Therapy Pump w/ Pads x 2 Gaymar TP-500 Can be substituted; separate pumps are recommended - 1 for surgery, 1 for recovery
Hypodermic Needles 26G x 3/8 in, Sterile Any
Isoflurane Vedco NDC 50989-150-12 Manfacturer can be substituted; veterinary approval may be required
Isoflurane Vaporizer System, Tabletop, Non-Rebreathing Parkland Scientific V3000PK Can be substituted
www.parklandscientific.com
Jewelers Screwdriver w/ 1.8-2 mm Blade Any Metal should resist rusting and corrosion
Ortho-Jet BCA Package (Dental Cement) Lang Dental B1334 Contains powder (1 lb) and liquid
www.langdental.com
Oxygen Tank with Pressure Regulator, Large Local supplier
Porcelain Crucible, High-Form, Glazed, 10 ml CoorsTek, Inc. 07-965C [Fisher Scientific] Can be substituted with Fisher FB-965-I Wide-Form Crucible
www.fishersci.com
Puralube Veterinary Ophthalmic Ointment, Sterile Henry Schein Company NC0144682 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Quatricide PV-15 Pharmacal PV-15 Antimicrobial disinfectant; can be substituted
www.pharmacal.com
Rat Gas Anesthesia Masks for Stereotaxic Surgery  Stoelting Company 51610
www.stoeltingco.com
Rat Stereotaxic Apparatus w/ Ear Bars (45 Degree) Any 45 degree bars are recommended to prevent damaging eardrums
Roboz Surgical Instrument Milk Roboz Surgical NC9358575 [Fisher Scientific] Can be substituted; for lubricating instruments during autoclaving
www.fishersci.com
Rodent Hair Trimmer Any
Sodium Chloride Fisher Scientific S641-500 [Fisher Scientific] To make 0.9% saline; reagent grade; USP
www.fishersci.com
Stainless Steel Microspatula (Blade: 0.75 L x 0.18 in. W) Fisher Scientific 21-401-15 [Fisher Scientific] Can be substituted
www.fishersci.com
Starrett Pin Vise, 0.000 in - 0.055 in Any Nickel-plated or equivalent recommended to resist rusting and corrosion
Sterile Surgical Gloves Any
Sterilization Wraps, 20 in x 20 in, Autoclavable Propper Manufacturing 11-890-8C [Fisher Scientific] Useful for wrapping autoclavable supplies and on sterile field during surgery
www.fishersci.com
Surgical Drape, Sterile/Autoclavable Any May need to cut to size for rats
Surgical Gown* Any *If required by IACUC
Surgical Mask Any
Tuberculin Syringes, Sterile, 1.0 ml Any
Weigh Scale Any Should have good resolution (in gram units)
Name Company Catalog Number Comments
Eyeblink System and Components (assuming 4-rodent system)
5 Channel Commutator x 4 Plastics One, Inc. SL2 + 3C
www.plastics1.com
Bipolar Electrode Cable, Dual 305 x 4 Plastics One, Inc. 305-305 80CM TT2 (C) Provides plug end to bipolar electrode on rat and to commutator; must be modified
www.plastics1.com
Cable, 5 Channel, Shielded, 26 AWG x 4 Any To fabricate commutator cable; this must be made from scratch
Chamber for Operant Test Box (Inside: 24 H x 23 W x 14 D in) x 4 Med-Associates Can be substituted; inner dimensions should fit operant test box comfortably, with room for acoustical foam; fit with fan - 55-60 dB
www.med-associates.com
Eyeblink System and Software JSA Designs N/A Proprietary and customized for research lab
Heat Shrink Tubing (3/16 in, 1/4 in, 3/8 in, 1/2 in Diameters) Any To protect modified commutator cable soldered ends and splices
Melamine Triple Peak Acoustical Foam w/Black Hypalon (24 x 48 in) McMaster-Carr 9162T5 Can be substituted; cut to fit 4 housing chambers
www.mcmaster.com
Operant Test Box (Exterior 12.5 L x 10 W x 13.5 in H), Complete x 4 Med-Associates ENV-007 Custom Package With stainless steel grid floor and custom top (3 in hole in center for commutator cable)
www.med-associates.com
Oscilloscope (Optional) Any Recommended minimum specs: 200 MHz analog bandwidth, 1 GS/s real-time sampling, 4 channels; see www.picotech.com
/td>
Piezo Tweeters (Speakers) x 4 (7 x 3 in) MCM Electronics 53-805 Must match frequency range specifications for eyeblink system (2500 Hz - 25 KHz)
www.mcmelectronics.com
Soldering Station, Solder, Flux, Tinner Any For soldering 26 AWG cables to female sockets (that fit male relia-tac contact pins) and bipolar plugs
Stimulus Isolators x 4 WPI International A365 These units run on 16-9V alkaline batteries; a suitable rechargeable version (A365R) is available
www.wpiinc.com
Tripolar Electrode Cable for SL3C Commutator x 4 Plastics One, Inc. 335-335 80cm TT3 C Provides plug end to EMG headstage on rat and to commutator; must be modified
www.plastics1.com
USB LED Lights x 4 Any USB-based lights do not cause electrical "noise" with the EMG signals from the rats
www.plastics1.com
Webcams x 4, Surveillance Software Any
PC Computer Running MS Windows OS Any

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References

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신경 과학 문제 126 Eyeblink 조절 해 마 태아 알코올 스펙트럼 장애 학습 기억 소 뇌
태아 알코올 스펙트럼 장애의 쥐 모델에서 Hippocampal 기능 장애를 평가 하기 위해 추적 Eyeblink 클래식 컨디셔닝의 사용
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Tran, T. D., Amin, A., Jones, K. G., More

Tran, T. D., Amin, A., Jones, K. G., Sheffer, E. M., Ortega, L., Dolman, K. The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders. J. Vis. Exp. (126), e55350, doi:10.3791/55350 (2017).

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