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Medicine

쥐 왼쪽 앞쪽에 내림차순 (LAD) 관상 동맥 결찰 : 심근 경색에 대한 개선 및 단순화 된 모델

Published: April 2, 2017 doi: 10.3791/55353
* These authors contributed equally

Abstract

허혈성 심장 질환 (IHD), 급성 관상 동맥 증후군 (ACS)는 미국에서 사망의 주요 원인 중 하나입니다. IHD는 산소의 감소 및 심장 근육의 괴사 계속되는 결과 심장에 혈액 공급이 감소 특징으로한다. MI 모델은 단기 허혈 - 재관류 모델과 장기 영구 결찰 모델로의 사용에 대한 인기를 얻고있다. 아래, 우리는 LAD의 영구 결찰을위한 신뢰할 수있는 방법을 설명합니다. 마우스 유전 공학 기술이 더 진보되고, 품질 쥐의 수술 도구의 증가 가용성으로, 마우스는 MI 수술에 대한 인기 모델이되고있다. 우리의 외과 모델 마우스의 빠른 복구를 위해 쉽게 되돌릴 수 마취제의 사용을 포함; 기관 절개술을 포함하지 않고 최소 침습 기관 내 삽관; 상기 가슴 절개 부가 만들지 않고 원래 개흉술 사이트를 통해 천자는 그대로효과적으로 흉강의 과도한 혈액과 공기를 제거하고, 일부 다른 방법으로 수행. 이 방법은 비교적 급격히 외과 수술 합병증 및 사망률 감소 및 재현성을 개선하는 다른 방법에 비해 덜 침습적이다.

Introduction

관상 동맥 질환, 또는 ACS, 가장 널리 심혈관 이벤트 2020 년 1 이환율과 전세계 사망의 주요 원인으로 간주됩니다. ACS의 원인으로 인해 심장 조직이 혈액 흐름을 감소 블록 또는 관상 동맥 경화성 플라크의 파열에 심근 혈전증의 존재이다. 따라서, 예컨대 심근 경색 (MI) 3, 4, 급성 심근 허혈의 존재와 일치하는 임상 적 징후가있다. MI는 심실 기능 부전과 심부전 5, 6으로 이어질 수있는 심근의 질량 손실과 병적 인 심실 리모델링에 진행에 연결됩니다.

IHD을 연구하는 가장 효과적인 방법 중 하나는 동물 모델에서 인간의 심근 경색을 모방하는 것이 었습니다. 이것은 LAD의 결찰에 의해 달성된다마우스. 이 모델을 사용하여, 우리는 마음이 허혈성 심질환으로 인한 손상으로부터 보호 할 수있는 방법을 연구한다.

지난 10 년간, 연구자들은 쥐에 쥐의 변화를 포함하여, 작은 동물에 더 큰 동물 모델을 사용하는 이동했다. 작은 마우스 모델은 작은 크기를 포함하여 많은 이유, 대형 쓰레기의 크기, 유지하기 위해 저렴한 비용, 짧은 임신 기간뿐만 아니라 형질 전환 유전자 녹아웃 모델 (7)의 넓은 가용성에 대한 선호되기 시작한다. 마우스는 작은 규모이지만, 특별히 그들을 위해 디자인 된 새로운 수술 도구이 개발에 도움을했다. 우리의 방법은 새로운 수술 도구를 사용합니다.

여러 가지 방법이 침입 기관 절개술을 구현하는 동안, 우리는 기관 내 삽관의 덜 침습적 인 방법을 사용합니다. 구강 인두의 오버 헤드 조명을 사용하여, 우리는 t을위한 안전하고 덜 충격적인 경험을 제공, 어떤 절개를 만들지 않고 삽관그는 동물. 마우스는 인공 호흡기에 배치하고, 전체 과정 동안 이소 플루 란에 보관됩니다. 이 중단되면 동물이 마취에서 회복하기 때문에 약물에 의해 생산 마취의 짧은 기간에, 그것은 단지 몇 분 정도 걸립니다. 우리의 외과 모델은 또한 최소 침습 천자가 포함되어 있습니다. 인장 기흉 : 일본어 개흉술을 통해 천자를 사용 흉강 혈액 및 과잉 공기의 제거는 조심 LAD 결찰하는 일반적인 수술 후 합병증을 해결했다. 다른 방법 - 하나 천자-했다 굴복 적은 수술 합병증을위한 기관 절개술에 대한 다른에 사용되는 두 개의 추가 절개에 대한 필요성을 제거하고 크게 사망률을 감소시켰다이 방법.

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Protocol

이 동물 프로토콜을 검토하고로드 아일랜드 병원의 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)에 의해 승인되었습니다.

1. 마취 및 삽관

  1. 수술 후 진통제의 복용량을 계산하기 위해 마우스의 무게를.
  2. 유도 챔버에 마우스를 넣고 9 4 % 이소 플루 란을 전달 - 걸쳐 동물 모니터링 10 분. 상기 장치는 약 250 ℃로 예열 할 수 있도록 핫 비드 살균기 켜기. 20 분 - 예열은 15 일이 소요됩니다.
  3. 마우스 약 32 호흡 / 분의 호흡 속도 마취 깊이 평면에 도달하면, 스티로폼 보드에 마우스 앙와위 배치 오픈 입을 보유하는 상부 앞니에 따라 고정하는 탄성 밴드를 사용한다. 발가락 핀치를 수행하여 진정 작용을 확인합니다. 구강 인두가 가시화 될 수 있도록 마우스보다 높은 강도 조명을 배치합니다.
  4. 턱과 다른 쌍을 열 곡선 집게를 사용하여집게의 길 밖으로 혀를 들어 올립니다. 또는 약간 마우스의 몸 눈높이 아래에 위치하면서 삽관해야합니다. 수술 돋보기를 사용하는 것이 좋습니다.
  5. 성대의 개폐를 시각화합니다. 개방되면, 삽입 20 게이지, 1-에 무딘 팁 니들 도입기와 정맥 카테터. 기관 개방 도관을 안내하지만, 기관에 바늘을 삽입 방지하기 위해 바늘을 사용한다. 정확한 위치의 확인은 플라스틱 전송 피펫을 사용하여 수행 할 수 있습니다.
  6. 가열 장치를 구비 한 조작면에 삽관 마우스 이동. 150 μL / 스트로크의 행정 용적 / 분 130 스트로크의 스트로크 속도 설정 작은 설치류 호흡기 마우스를 연결한다.
  7. 2.5 %의 이소 플루 란을 제공합니다. 양자 가슴 상승에 대한 확인하여 삽관을 확인합니다. 발가락 핀치를 수행하여 마취를 확인합니다. 완전히 마취되기 위해 인공 호흡기에 10 분 - 마우스는 5 필요할 수 있습니다.

  1. 인공 호흡기와 IV 카테터 사이의 연결 부위에서 삽관 튜브 아래 테이프. 사지 아래 테이프. 눈에 멸균 윤활 방울을 놓습니다.
  2. 전기 면도기와 흉부의 복부 왼쪽 트림. 건조 와이프와 면도 모피를 먼지와 멸균 면봉을 사용하여 제모 크림의 작은 레이어를 적용합니다. 45 초 - 크림은 약 30 모낭과 접촉을 유지해야한다.
  3. 크림 프로세스 동안 담가 Betadine 가득 세 1.5mL 용량 튜브에 세 멸균 면봉을 놓는다. 증류수에 적신 헝겊을 사용하여 부드럽게 크림 및 모피을 닦아.
  4. 주변에 중심에서 이동하는 원 운동의 청소, Betadine 멸균 70 % 이소프로판올 준비 패드 교번 수술 부위 세번 세척. 마우스의 수술 필드 위에 분기 크기의 구멍이있는 멸균 드레이프를 놓습니다.
  5. MOUS 주변 지역을 청소70 % 에탄올로 전자. 한 번 더 발가락 핀치와 마취를 확인합니다.

3. LAD 내고

  1. 대략 20 초 동안 250 ℃로 예열 된 핫 비드 멸균기에서 멸균 수술 도구를 놓는다. 멸균 멸균 된 수술 용 드레이프에 살균 장비를 놓습니다. 돈 수술 장갑.
  2. 부드럽게 저명한 칼 모양의 연골의 왼쪽 지점에서 약 5 mm의 피부를 들어 올려 좋은 팁 집게를 사용합니다. 흉골의 수준으로, 위쪽이 시점에서 피부에 수직 절개를 만들기 위해 10 번 블레이드와 수술 메스를 사용합니다.
  3. 부드럽게 피부와 근육 층을 분리 곡선 집게를 사용합니다. 피부 절개 다음, 근육 층을 엽니 다. 근육 층, 절개의 양쪽에 하나를 통해이 5-0 폴리 프로필렌 봉합사를 삽입하고 근육 층이 열려 개최 클램프 일시적으로 봉합을 고정합니다.
  4. 다음, 확인하고 세 번째 늑간 공간에서 절개를 만드는흉곽의 자연 각도. 마우스의 왼쪽 사지에서 테이프를 제거하고 테이프로 오른쪽 뒷발에 자사의 뒷면 왼쪽 발을 고정합니다. 테이프의 긴 조각을 잘라 약간 상승 된 위치에 운영 표면의 왼쪽 앞발을 고정합니다. 70 % 에탄올로 장갑을 청소합니다.
  5. 부드럽게 3 번째와 4 번째 갈비뼈를 벌리 견인기를 사용합니다. 약 1 × ½에있어서, 멸균 거즈의 작은 부분을 절단하고, 0.9 % 멸균 식염수에 담근다. 여분의 염분을 꽉 잡고 조심스럽게 절차를 수행하는 동안 실수로 폐 손상을 방지하기 위해 왼쪽 폐에 거즈를 삽입하는 집게를 사용합니다.
  6. 부드럽게 집게로 얇은 심낭을 제거합니다.
  7. 멸균 면봉 떨어져면 소량의 눈물과 작은 공로를 굴립니다. 멸균 0.9 % 식염수에이 목화 공을 찍어 부드럽게 동맥을 감사하는 마음의 표면에 면봉. 부드럽게 위쪽 왼쪽 귓바퀴를 밀어에서 관상 동맥를 찾습니다일 Neath.
  8. LAD를 식별하고 LAD 하에서 8-0 나일론 봉합사를 전달; 이 완전한은 결찰을 확보하기 위해 발생합니다. 결찰에 성공하면 합자 의지 희게에서 좌심실의 원위부.
  9. 집게를 사용하여 이전에 삽입 된 거즈를 제거하고 부드럽게 견인기를 제거합니다. 개흉술을 통해 개구 흉강으로 25 게이지 바늘에 부착 된 6에서 25 게이지 플렉시블 튜브를 삽입한다. 왼쪽 폐 위의 공간에 튜브의 2 - 약 1 사전. 부정사 위치에 마우스를 반환하고 70 % 에탄올로 장갑을 청소합니다.
  10. 장소에 가슴 튜브를 유지, 흉곽을 닫습니다 간단한 중단 패턴에서 5-0 폴리 프로필렌 봉합사를 사용합니다. 열린 근육 층을 고정하는 두 개의 봉합사를 제거합니다. 다시 자리에 가슴 튜브를 유지, 근육 층을 닫습니다 간단한 연속 패턴에서 5-0 폴리 프로필렌 봉합사를 사용합니다.
  11. 흉관의 25 게이지 바늘로 1 ml 주사기를 첨부. 부드럽게 런지에 위쪽으로 당겨R 동시에 서서히 집게 흉강에서 흉관 추출있다. 이 단계에서 달리 기흉 흉강 및 결과에 포획 될 것이다 과잉 공기와 혈액을 제거로 천천히 튜브를 추출한다.
  12. 주사기가 가득 차면, 바늘에서 주사기를 분리하고 폐기물 비커 또는 싱크에 폐기물 폐기하십시오. 가슴 튜브가 완전히 추출 될 때까지이 과정을 계속합니다. 가슴이 밀봉되어 있는지 확인합니다.
  13. 1.5 %로 이소 플루 란을 줄이십시오. 간단한 중단 패턴에서 4-0 폴리 프로필렌 봉합사로 피부를 닫습니다. 오프 이소 플루 란 기화기를 돌립니다.
  14. 복강 내 (IP) 주입을 통해 0.9 % 식염수 중 0.1 ㎎ / ㎖의 부 프레 노르 핀을 투여. 국소 절개 0.9 % 식염수에 2 ㎎ / ㎖ 부피 바카 2 ㎎ / ㎖ 리도카인을 적용한다. 마우스의 체중을 식염수 양을 스케일링, 피하 주사를 통하여 0.9 % 식염수 500 μL - 200 사이를 관리.
  15. 된 관 후 5 분을 기다립니다통증 약물을 stering은 삽관 튜브에서 마우스를 제거합니다. 이 인공 호흡기 오프 전환에 도움이됩니다.
    1. 마우스가 인공 호흡기 떨어져 한 번 양자 가슴 상승이없는 경우, 바늘 압축 해제를 수행합니다. 이 저항의 급격한 감소에 의해 표시 흉강을 입력 할 때까지이를 위해, 25 게이지 바늘 및 멸균 3 번째 및 4 번째의 리브 사이를 1ml 주사기를 소개한다. 과잉 공기를 제거하기 위해 플런저를 부드럽게 잡아 당깁니다.
  16. 마우스가 적절한 양자 간 호흡 속도와 깊이를 보여주고 발가락 핀치에 응답 할 때, 가열 램프 아래에 깨끗한 복구 케이지에서 마우스를 놓습니다. 20 분 - 15 층류 후드에서 모니터링, 습기 음식과 물 병 마우스를 제공합니다. 과장된 호흡 노력, 과도한 출혈, 또는 기타 잠재적으로 생명을 위협하는 합병증에 대한 모니터링합니다.
  17. 앞으로 3 일 들어, IP를 통해에서 0.1 ㎎ / ㎖ 프레 노르 핀 진통제를 투여하루에 두 번 배제 력. 매일 마우스를 모니터합니다.

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Representative Results

생쥐 이십팔일 수술 후 안락사되고, 마음은 수확을 조사하고 있습니다. 75 ㎎ / ㎏의 케타민 및 5 - - 10 밀리그램 / kg 자일 라진 마우스에게 50 마취. 동물이 충분한 마취되면, 흉강을 개방하고, 23 게이지 바늘을 사용하고, 차가운 염화칼륨 (KCL, 30 mM)을 심장의 후부 기저 영역으로 주입된다. 심장은 이완기에서 체포된다. 결찰의 추가 검증을 위해, 마음은 동물에서 제거되고 4 % 파라 포름 알데히드를 주입 ​​한 후 1 % 에반의 블루 염료된다. 그림 1은 허혈성 좌심실에서 에반의 블루의 부족을 보여줍니다. 그림 2는 적절한 기관 내 삽관 설정을 보여줍니다. 봉합 근육층 3 디스플레이 초기 절개 부위에서 천자 용 흉관의 위치도는 C에서 공기를 추출하기 전에 상기 튜브 주위에 폐쇄hest 공동. 트리 크롬 염색 경색 영역 안의 콜라겐의 증가 (도 4)을 나타낸다.

그림 1
그림 1 : 에반의 블루 사출. 에반의 블루 주입 좌심실 경색 지역에 국한 허혈성 조직에서 염료의 부족을 보여준다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

그림 2
그림 2 : 기관 내 삽관. 적절한 기관 내 삽관 설정의 데모. 수술 돋보기를 착용 운영자는 마우스와 눈높이에 앉아있다. 고강도 일루미네이터는 O를 transilluminating은 기관 영역에 하향 집중ropharynx. 탄성 밴드는 운전자가 곡선 포셉 입을 열고 있도록 상부 앞니 뒤에 걸려있다. 곡선 집게 명확한 시각화 측면 혀를 유지하기 위해 사용된다. 성대의 개폐가 가시화되는 동안 무딘 팁 니들 도입기와 정맥 카테터 삽입술 캐 뉼러가 약간 상향 각도로 전진된다. 열고 삽관을 시도하기 전에 폐쇄 성대의 시각화는 성공적인 삽관을위한 중요한 포인트 중 하나입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

그림 3
그림 3 : 흉강 천자. 원래 절개 사이트에 삽입 천자에 사용되는 흉관의 배치. 근육층이 봉합 주위 폐쇄흉강 내 공기 튜브 전에 주사기로 추출하고 흉관 제거한다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

그림 4
그림 4 : 트리 크롬 염색. 왼쪽 패널 : 제어, 비 LAD-결찰 마음. 오른쪽 패널 : LAD-결찰, 경색 심장. Biebrich 진홍색 산 푹신 용액 포스 / 포스 폰산 용액, 아닐린 블루를 사용한 트리 크롬 염색 (메이슨)은 횡단 좌심실 경색 부위에 섬유화에 대한 마커로서 증가 된 콜라겐 (파란색)을 보여준다. 바 = 500 μm의. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

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Discussion

실험실에서 MI 모델의 사용이 증가, 설명 된 절차는 수술 후 통증과 불편을 최소화하면서 마우스의 효율성과 생존율을 높이기 위해 노력한다. 이 프로토콜은 LAD의 결찰 과정의 다양한 측면에 많은 개선함으로써 사망률을 최소화하기 위해 노력하고 있습니다. 몇 가지 차이점이 있습니다. 때문에 마취의 그 이상 기간의 이익을 위해, 유도 이소 플루 란과 함께 케타민과 자일 라진을 활용 일부 쥐의 삽관 연구는 사망률이 8 증가 보여 주었다. 우리의 방법은 크게 약물 관련 합병증의 가능성을 감소 유도에만 이소 플루 란을 사용합니다. 또 다른 유사한 LAD 결찰 프로토콜은 확장 된 복구 시간 및 정확한 교육을 9 증가의 필요성을 생산하는 기관 절개술을 포함한다. 우리가 여기에서 설명하는 절차는 모르겠지만 결과적으로 기관 내 삽관의 비 침습적 방법을 이용WER 사망률 및 결과의 높은 재현성. 또한, 오히려 단지 전기 면도기를 사용하는 것보다, 우리의 절차도보다 1 분에 무균 영역의 완전히 명확 시각화를 제공 털 제거 제모 크림을 사용합니다.

또 다른 주요 차이점은 이전이 아니라 이후의 초기 절개를 발생하는 마우스의 재배치입니다. 마우스가 누운 상태에서 절개를 만들기 때문에 결과의 높은 재현성 결과, 같은 칼 모양의 연골로 랜드 마크의보다 직접적이고 정확한 시각화 할 수 있습니다. 우리의 방법은 오히려 관리 출혈 의원 화상과 감염의 위험을 감소시키는 cauter보다 멸균 면봉을 사용합니다. 외에도 이러한 차이에서의 천자의 흉관 삽입은 우리의 방법은 튜브를위한 새로운 절개를 만드는 포함하지 않기 때문에, 특히 주이다. 오히려, 다시, 이전의 절개 부에 튜브를 삽입 감소 포함 MOR관련된 사망률. 우리는 또한 설명하는 절차는 다음과 같습니다 (1) 견인기의 사용, 관상 동맥의보다 정확하고 안정적인 시각화를 가능하게; (2) 절차를 수행하는 동안 흉강으로 멸균 거즈의 삽입함으로써 인성 폐 손상의 위험을 감소시키는 단계; 양쪽에 도시 된 절차 다음 염수 (3) 투여의 복구 시간을 단축하고 저체온증 방지한다.

우리가 영구적 결찰 모델을 설명하지만,이 절차는 급성 MI 모델을 수정할 수 있습니다. 심장 조직의 재관류 7 다음에 60 분의 허혈 - 재관류 허혈로 설명 급성 MI 모델은 30를 의미한다. 허혈 및 재관류 2 % 트리 페닐 테트라 졸륨 클로라이드 (TTC) (10)의 염색 후 다른 방법은 경색 크기 또는 위험 영역을 평가. TTC 염색은 허혈 후 살아있는 조직을 염색 할 수있는 능력을 기반으로인한 심장 조직 내에 존재하는게나. 이 효소함으로써 경색 영역 (11)의 윤곽, 불용성 적색 성분으로 가용성 성분을 변환한다. 급성 MI 모델은 심근 허혈 (10)의 사건을 해명하기위한 유용한 도구가 될 수있다, 따라서 인간의 심장 질환의 발생 메커니즘을 모방 할 수 있습니다. 젊은이 결찰은 조직 색상의 즉각적인 변화를 관찰 멜라닌을 유도하는이 방법에 대한 이점을 제공함으로써 확인할 수 있습니다. 이 고가의 장비의 사용을 포함하고 모든 실험실에 가능하지 않을 수 있지만 성공적인 결찰을 확인하는 또 다른 방법은, 심전도의 사용이다.

전술 한 바와 같이, 마음을 수확 후 결찰을 확인하는 몇 가지 간단하고 저렴한 분자 기술이있다. 위 두 기술은 에반의 블루 염색 및 트리 크롬 염색입니다. 에반의 블루 염료 직접 AO의 아치에 주입혈류의 부족이있을 경우 RTA는 나타내는. 이 모델의 성공과 관상 동맥 폐색의 정도를 측정 할 수 있는지 여부를 테스트하기 위해 마음을 수확 후 즉시 채용 신속하고 효율적인 방법입니다. 트리 크롬 염색의 경우, 마음은 면역 조직 화학 염색을 실시 한 후 구분되어야합니다. 트리 크롬 염색 후 허혈성 섬유 성 지역 또는 만성 허혈에 의해 영향을받는 심장 영역을 표시 할 수 있습니다. 수술 후 생쥐 (2)의 주입 - 5-에 티닐 -2'- 데 옥시 우리 딘 (EDU), 티미 딘에 대한 아날로그와 희생 전에 24 시간 이내, 특히에서 허혈 DNA 복제 및 세포 증식의 지역을 표시하기위한 효과적인 방법 혈관 재생 (12)을 포함하는 연구.

일반적으로, LAD 결찰 연구의 한계 부정맥, 출혈, 기흉의 존재로 인해 주로 수술 사망률의 발생을 포함한다. 효과적인 천자, 재치HOUT 추가 흉부 절개 (현재의 방법에 기재되어 있음), 및 적절한 수술 치료 동물에서 이환율과 사망율을 방지하기 위해 필요하다. 수술 후 저체온증의 매우주의 깊은 모니터링도 중요하다. (기관 절개술 및 흉강 천자 용) 목 및 가슴 절개의 수의 감소는 생존율을 개선하는 데 도움이됩니다 현재의 방법으로 설명했다. 본 명세서에 기재된 주사 수술 전 마취제의 회피는 동물의 수술 후 회복을 개선하는 것이다.

높은 재현성을 얻기 위해, LAD 결찰 모델은 엄격한 훈련과 경험이 필요합니다. 운영자는 재현성 마음의 원하는 부위에 경색을 할 수있는 능력을 얻기 위해 수술의 몇 주를 수행 할 필요가있다. 교육과 경험은 성공적인 LAD의 결찰 생존 수술에 대한 두 가지 중요한 요소입니다.

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
High-Intensity Light Source Harvard Apparatus 72-0215
SurgiSuite Operating Platform Kent Scientific Corporation SurgiSuite Uses a rechargeable, battery-operated far infrared warming pad. Charge overnight before surgery. 
SurgiSuite LED Lighting Kit Kent Scientific Corporation SURGI-5003
Hot Bead Sterilizer Fine Science Tools 18000-45 Preheating takes 15 - 20 min. Instruments take 20 s to sterilize.
Small Rodent Anesthesia System VetEquip Inc. 901810
Isofluorane Piramal Enterprises 66794-017-10
Buprenorphine Rhode Island Hospital Pharmacy NDC 12496-0757-1, 12496-0757-5
Surgical Loupes Roboz RS-6687
Small Rodent Ventilator Harvard Apparatus 73-0043
Lubricating Drops Thermo Fisher Scientific 19-898-350
Electric Razor Kent Scientific Corporation CL 9990-1201
Hair Removal Cream Nair
Medical Tape Thermo Fisher Scientific 18-999-380
Betadine Thermo Fisher Scientific 19-027136
70% Isopropanol Wipes Thermo Fisher Scientific 22-363-750
Surgical Drapes Braintree SP-TS
Surgical Gloves Thermo Fisher Scientific 18999102D
5-0 Polypropylene Sutures  Ethicon 8630G
8-0 Nylon Sutures Fine Science Tools 12051-08
Platinum-Cured Tubing Harvard Apparatus 72-1042  0.3 mm inside diameter x 0.6 mm outside diameter
0.9% Saline Thermo Fisher Scientific 19-310-207
4-0 Polypropylene Sutures Ethicon 8631G
1 CC Syringe with 25-Gauge Needle  Thermo Fisher Scientific 14-826-100
Scissors Kent Scientific Corporation INSS600225
Forceps Kent Scientific Corporation INS700100
Cotton Swabs Thermo Fisher Scientific 23-400-118
IV Catheter, 20-Gauge Thermo Fisher Scientific  NC9892181
Retractor Kent Scientific Corporation INS 750369
Forceps Fine Science Tools 11003-12
Dissecting Forceps, Straight Kent Scientific Corporation INS 700101
Dissecting Forceps, Curved Kent Scientific Corporation INS 700103
Hemostatic Forceps, Straight Kent Scientific Corporation INS 750451
Hemostatic Forceps, Curved Kent Scientific Corporation INS 750452
Tissue Forceps Kent Scientific Corporation INS 700131
Needle Holder Kent Scientific Corporation INS 600109
Scissors  Kent Scientific Corporation INS 600225

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References

  1. Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. New directions for protecting the heart against ischaemia-reperfusion injury: targeting the Reperfusion Injury Salvage Kinase (RISK)-pathway. Cardiovasc Res. 61 (3), 448-460 (2004).
  2. Roffi, M., et al. 2015 ESC Guidelines for the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation. Eur Heart J. 37 (3), 267-315 (2015).
  3. Kumar, A., Cannon, C. P. Acute Coronary Syndromes: Diagnosis and Management, Part I. Mayo Clin Proc. 84 (10), 917-938 (2009).
  4. Eitan, A., Nikolsky, E. Antithrombotic therapy in patients with acute coronary syndromes: how to make the right choice. Minerva Med. 104 (4), 357-381 (2013).
  5. Abbate, A., Bussani, R., Amin, M. S., Vetrovec, G. W., Baldi, A. Acute myocardial infarction and heart failure: role of apoptosis. Int J Biochem Cell Biol. 38 (11), 1834-1840 (2006).
  6. Zheng, Z., et al. Nebivolol protects against myocardial infarction injury via stimulation of beta 3-adrenergic receptors and nitric oxide signaling. PLOS ONE. 9 (5), 98179 (2014).
  7. Tarnavski, O., et al. Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies. Physiol Genomics. 16 (3), 349-360 (2004).
  8. Buitrago, S., Martin, T. E., Tetens-Woodring, J., Belicha-Villanueva, A., Wilding, G. E. Safety and Efficacy of Various Combinations of Injectable Anesthetics in BALB/c Mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 47 (1), 11-17 (2008).
  9. Kolk, M. V., et al. LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction. J Vis Exp. (32), e1438 (2009).
  10. Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. H., McConnell, B. K. Acute myocardial infarction in rats. Journal of visualized experiments : J Vis Exp. (48), (2011).
  11. Ferrera, R., Benhabbouche, S., Bopassa, J. C., Li, B., Ovize, M. One hour reperfusion is enough to assess function and infarct size with TTC staining in Langendorff rat model. Cardiovasc Drugs Ther. 23 (4), 327-331 (2009).
  12. Zeng, C., et al. Evaluation of 5-ethynyl-2'-deoxyuridine staining as a sensitive and reliable method for studying cell proliferation in the adult nervous system. Brain Res. 1319, 21-32 (2010).

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Reichert, K., Colantuono, B.,More

Reichert, K., Colantuono, B., McCormack, I., Rodrigues, F., Pavlov, V., Abid, M. R. Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction. J. Vis. Exp. (122), e55353, doi:10.3791/55353 (2017).

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