कई देशों में मानव trichinellosis की रोकथाम के लिए दुनिया भर में पाचन, जिनमें से चुंबकीय उत्तेजक विधि स्वर्ण मानक माना जाता है की विधियों द्वारा अतिसंवेदनशील जानवरों से पेशी के नमूनों की प्रयोगशाला परीक्षा के आधार पर किया जाता है।
Trichinellosis मनुष्यों में एक दुर्बल करने वाली बीमारी है और जीनस त्रिचिनेल्ला के निमेटोड लार्वा से संक्रमित जानवरों का कच्चा या अधपका मांस की खपत के कारण होता है। मानव में संक्रमण के सबसे महत्वपूर्ण स्रोतों में दुनिया भर में खेल मांस और सूअर का मांस या पोर्क उत्पादों रहे हैं। कई देशों में, मानव trichinellosis की रोकथाम के अतिसंवेदनशील पशु शवों से पेशी के नमूनों की कृत्रिम पाचन के माध्यम से संक्रमित पशुओं की पहचान पर आधारित है।
वहाँ मांस के पाचन लेकिन चुंबकीय उत्तेजक विधि स्वर्ण मानक माना जाता है के आधार पर कई तरीके हैं। इस विधि को पेशी के नमूने और बाद निस्पंदन और अवसादन कदम के enzymatic पाचन के बाद माइक्रोस्कोपी द्वारा त्रिचिनेल्ला लार्वा का पता लगाने के लिए अनुमति देता है। हालांकि इस पद्धति विशेष और महंगे उपकरण की आवश्यकता नहीं है, आंतरिक नियंत्रण नहीं किया जा सकता। इसलिए, कड़े गुणवत्ता प्रबंधन Applie किया जाना चाहिएपरीक्षण के दौरान घ। वर्तमान कार्य के उद्देश्य के बारे में विस्तृत हैंडलिंग निर्देश और विश्लेषकों के विधि, परजीवी के लिए यूरोपीय संघ के संदर्भ प्रयोगशाला और त्रिचिनेल्ला के लिए जर्मनी की राष्ट्रीय संदर्भ प्रयोगशाला के अनुभव के आधार पर की महत्वपूर्ण नियंत्रण अंक प्रदान करना है।
जीनस त्रिचिनेल्ला के नेमाटोड मांसभक्षी और omnivore स्तनधारी, पक्षी, सरीसृप और दुनिया भर की धारीदार मांसपेशियों में पता लगाया जा सकता है। ये जूनोटिक नेमाटोड सूअर, घोड़े से मनुष्य जब कच्चे या अर्द्ध कच्चे मांस और मांस उत्पादों व्युत्पन्न तक पहुँच सकते हैं, और इस खेल जानवरों किया जाता है। इस जॉनोसिस pathognomonic संकेत और लक्षण, जैसे दस्त, बुखार, periorbital शोफ और मांसलता में पीड़ा और ऐसे मायोकार्डिटिस, thromboembolic रोग और इन्सेफेलाइटिस 1 के रूप में संभव जटिलताओं की विशेषता मानव में एक गंभीर बीमारी हो सकती है।
त्रिचिनेल्ला spiralis जंगली और घरेलू पशुओं में त्रिचिनेल्ला संक्रमण का सबसे व्यापक etiological एजेंट है और दुनिया भर में मानव में संक्रमण का सबसे कारण बनता है। यूरोप, उत्तर और पश्चिम अफ्रीका और पश्चिमी एशिया में, त्रिचिनेल्ला britovi मानव में संक्रमण का एक और स्रोत है। इसके अलावा, दस अन्य taxa कम आमतौर पर प्रेरणा के रूप में रिपोर्ट कर रहे हैं मानव रोग के और एजेंटों, दुनिया के विभिन्न क्षेत्रों में पाए जाते हैं आमतौर पर जंगली जानवरों 2 में। इस तरह के जंगली सूअर, भालू, वालरस और रीछ के रूप में जंगली जानवरों के अलावा, सूअर का मांस दुनिया भर में मानव संक्रमण का सबसे महत्वपूर्ण स्रोत का प्रतिनिधित्व करता है।
Trichinellosis को रोकने के लिए सबसे अच्छा तरीका कच्चे मांस उत्पादों के खाने से परहेज करने के लिए और किसी भी मांस, सुरक्षित तापमान (करने के लिए विशेष रूप से खेल मांस पकाने के लिए है> 65 डिग्री सेल्सियस 1 मिनट के लिए, यानी गुलाबी से मांस का रंग भूरा करने के मूल में बदलने के लिए मांस उत्पाद) 3। यूरोपीय संघ और यूएसडीए सूअर का मांस उत्पादों है कि मांस 4, 5 में टी spiralis लार्वा को मारने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है के लिए ठंड और खाना पकाने के समय और तापमान निर्दिष्ट किया है। इसके अलावा, मांस और मांस उत्पादों में त्रिचिनेल्ला की निष्क्रियता के लिए सिफारिशें Trichinellosis पर अंतरराष्ट्रीय आयोग द्वारा प्रकाशित किए गए थे"xref"> 6। यूरोप में, वाणिज्यिक स्वाइन झुंड जहां त्रिचिनेल्ला संक्रमण का खतरा नगण्य है में नियंत्रित आवास की स्थिति की शुरूआत करने के लिए इसके अलावा, मानव trichinellosis की रोकथाम के अतिसंवेदनशील जानवरों 4 से पेशी के नमूनों की प्रयोगशाला परीक्षा के आधार पर किया जाता है।
खाद्य सुरक्षा के प्रयोजनों के लिए, पाचन assays मांस 3, 7 में त्रिचिनेल्ला लार्वा के प्रत्यक्ष पता लगाने के लिए केवल विश्वसनीय प्रक्रियाओं हैं। यहां तक कि अगर वहाँ पाचन परख के कई रूप हैं, चुंबकीय उत्तेजक विधि अंतरराष्ट्रीय स्तर पर स्वीकार किए जाते हैं संदर्भ विधि 3, 4, 7 है। इस परख धारीदार मांसपेशियों के ऊतकों में त्रिचिनेल्ला लार्वा का पता लगाने पर आधारित है। पेशी के नमूनों की enzymatic पाचन और बाद निस्पंदन और अवसादन कदम, त्रि के बादchinella लार्वा माइक्रोस्कोपी द्वारा पहचाने जाते हैं। व्यापार दायित्वों और राष्ट्रीय कानून पर निर्भर करता है, वहाँ चुंबकीय उत्तेजक विधि के सामान्य प्रोटोकॉल में छोटे बदलाव की एक भीड़ हैं। इधर, तकनीकी जानकारी यूरोपीय संघ की आवश्यकताओं 4, आईएसओ विनिर्देशों 8, आईसीटी के दिशा निर्देशों के 6, और परजीवी (EURLP) के लिए यूरोपीय संघ के संदर्भ प्रयोगशाला के अनुभव और त्रिचिनेल्ला के लिए जर्मन संदर्भ प्रयोगशाला पर आधारित होते हैं।
हालांकि चुंबकीय उत्तेजक विधि आसानी से किया जा सकता है, सख्ती से तकनीकी जानकारी का पालन नहीं करने के लिए अपर्याप्त संवेदनशीलता की ओर जाता है, इस प्रकार उपभोक्ता स्वास्थ्य को खतरे में डाल। महत्वपूर्ण नियंत्रण अंक ऊपर पाठ में प्रकाश डाला गया है। इसके अलावा, उचित उपकरणों के उपयोग के परीक्षण के सफल परिणाम के लिए महत्वपूर्ण है। सभी जहाजों सिलिकॉन के साथ लेपित सतह के लिए लार्वा का पालन कम करने के लिए कांच और पिपेट सुझावों में से किया जाना चाहिए।
पाचन विधि की संवेदनशीलता की मांसपेशियों में लार्वा घनत्व और जांच की मांसपेशियों में नमूना की मात्रा पर निर्भर करता है। 3 में से एक लार्वा घनत्व के लिए – मांसपेशियों के ऊतकों के 5 एलपीजी, 100% की संवेदनशीलता की सूचना मिली थी, लेकिन 1 एलपीजी नीचे संवेदनशीलता 40% 13 को गिरा दिया। परीक्षण किया मेजबान जानवरों की प्रजातियों पर निर्भर करता है, परीक्षा की संवेदनशीलता इस्तेमाल नमूना की राशि में वृद्धि से सुधार किया जा सकता है। मैंवन्य जीवन में nfection बोझ आम तौर पर कम है, इसलिए बड़े नमूनों आकार 14 उपयोग किया जाता है। Predilection साइटों को भी मेजबान जानवरों के बीच बदलती हैं। इधर, कुछ मांसपेशियों के ऊतकों के निचले पाचनशक्ति जीभ को ध्यान में रखा जाना चाहिए जैसे, जो भी बड़ा नमूना में परिणाम कर सकते हैं आकार 15।
इसके अलावा, यह समझने के लिए कि चुंबकीय उत्तेजक विधि आंतरिक नियंत्रण शामिल नहीं है महत्वपूर्ण है। इसलिए, प्रलेखन के नमूने में से गुणवत्ता आश्वासन प्रबंधन सही और सटीक परिणाम प्राप्त करने के लिए आवश्यक है। प्रयोगशाला प्रदर्शन की गुणवत्ता मांसपेशियों के नमूनों में त्रिचिनेल्ला लार्वा पता लगाने के लिए दक्षता परीक्षण में प्रत्येक विश्लेषक का नियमित रूप से भागीदारी से निगरानी की जानी चाहिए।
विधि के आगे सीमाएं हैं कि माइक्रोस्कोपी द्वारा पेशी लार्वा के अंतिम चरण पहचान अत्यधिक व्यक्तिपरक और hea हैvily की जांच के विश्लेषक द्वारा लार्वा आकृति विज्ञान के ज्ञान पर निर्भर है।
इस समस्या को नाकाम करने के लिए एक दिलचस्प विकल्प विधि चुंबकीय उत्तेजक विधि / फिल्टर अलगाव एक लेटेक्स समूहन परीक्षण द्वारा लार्वा का पता लगाने के द्वारा पीछा करने पर है। हालांकि, यूरोपीय संघ के विधान के अनुसार इस पद्धति केवल घरेलू सूअर का लेकिन जो जानवरों के संक्रमण का खतरा अधिक होता है के लिए नहीं मांस के परीक्षण के लिए बराबर इस तरह के जंगली सूअर 4 के रूप में माना जाता है। मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के साथ लार्वा प्रतिजन की पहचान परीक्षण अधिक उद्देश्य बनाता है, लेकिन प्रयोगशाला मांस 16 के ग्राम प्रति लार्वा की संख्या निर्धारित करने की संभावना से इनकार करते हैं।
चुंबकीय उत्तेजक विधि के आगे रूपों यंत्रवत् सहायता प्रदान की जमा नमूना पाचन विधि / अवसादन तकनीक, यंत्रवत् सहायता प्रदान की जमा नमूना खुदाई में शामिलestion विधि / फिल्टर अलगाव तकनीक पर, और अप करने के लिए 35 ग्राम तकनीक की जमा नमूने के लिए स्वत: पाचन विधि। इन तकनीकों में सभी मांस और दृश्य और त्रिचिनेल्ला लार्वा की गिनती के कृत्रिम पाचन पर आधारित है, लेकिन निस्पंदन और अवसादन चरणों के लिए इस्तेमाल किया उपकरणों में अलग कर रहे हैं।
पृथक लार्वा आगे एक आणविक परीक्षण (जैसे, मल्टीप्लेक्स पीसीआर) 17 प्रजातियों के स्तर पर पहचाना जा सकता है। यूरोपीय संघ के कानून के अनुसार, सभी सकारात्मक नमूने त्रिचिनेल्ला प्रजातियों निर्धारण के लिए राष्ट्रीय संदर्भ प्रयोगशाला करने के लिए या EURLP करने के लिए भेजा जाना चाहिए।
The authors have nothing to disclose.
हमारा अनुरोध है उत्कृष्ट तकनीकी सहायता और समर्थन के लिए धन्यवाद सबीन Reckinger।
Knife,Scissors, Tweezers | Cutting samples and removing non-digestible tissue | ||
Blender | With a sharp chopping blade | ||
Magnetic stirrer | With thermostatically controlled heating plate | ||
Stirring Rod | Teflon-coated, approximately 5 cm long | ||
Conical glass separation funnel | Capacity of at least 2 litres, preferably fitted with Teflon safety plugs. The width should not be larger than 55% of the length to allow a good larva sedimentation | ||
Stands, rings and clamps | |||
Sieve | Mesh size 180 microns, external diameter 11 cm, with stainless steel mesh | ||
Funnel | Internal diameter not less than 12 cm, to support the sieves | ||
Glass beaker | Capacity 3 litres | ||
Glass measuring cylinder | Capacity 50 to 100 ml, or centrifuge tube | ||
Stereo-microscope | With a substage transmitted light source of adjustable intensity or trichinoscope with a horizontal table | ||
Petri dishes | 9 cm diameter, marked on their undersides into 10 × 10 mm square examination areas using a pointed instrument or a larval counting basin for the tricinoscope | ||
Aluminium foil | Alternatively a lid to cover the beakers | ||
25 % hydrochloric acid | |||
Pepsin | Strength: 1:10 000 NF (US National Formulary) corresponding to 1:12 500 BP (British Pharmacopoeia) and to 2 000 FIP (Fédération internationale de pharmacie), or stabilised liquid pepsin with minimum 660 European Pharmacopoeia units/ml | ||
Ethanol | 70-90% ethyl alcohol | ||
Tap water | Heated to 46-48 °C before use | ||
Balance | Accurate to at least 0.1 g | ||
Metal tray | Capacity 10 to 15 litres, to collect the remaining digestive juice | ||
Pipettes and pipette holder | Different sizes (1, 10 and 25 ml) | ||
Thermometer | Accurate to 0.5 °C, temperature range at least from 20 ° C to 70 ° C | ||
Siphon | For tap water |