Introduction
Lo sviluppo di nuove strategie di affinamento per i topi di laboratorio è un compito impegnativo che contribuisce alla realizzazione delle 3R (sostituzione, riduzione e perfezionamento) della scienza degli animali da laboratorio 1. I miglioramenti nel settore della raffinazione possono ulteriormente contribuire al benessere dei milioni di animali che vengono utilizzati per scopi sperimentali. Pertanto, ricerca intensiva è necessaria nel settore. Questo è anche un obiettivo definito di direttiva 2010/63 dell'Unione Europea. Direttiva 2010/63 / UE sottolinea che l'esperienza di vita degli animali da laboratorio deve essere migliorato e che "gli stabilimenti devono istituire un programma di adattamento e addestramento adeguati agli animali, le procedure e la lunghezza del progetto" (articolo 3.7) 2.
Animali da laboratorio possono sperimentare molte situazioni di stress mentre vengono tenuti e allevati per esperimenti. Solitamente, l'interazione tra la manodoperatopi Atory e le persone responsabili è piuttosto limitata. Pertanto, un rapporto di fiducia non può svilupparsi. Questo può suscitare maggiore ansia e stress in reazione al trattamento, che è dannoso per il comportamento e fisiologia, e quindi, il benessere degli animali di 3, 4, 5, 6. Inoltre, routine eseguito le procedure di laboratorio, come la gestione generale, moderazione, e il sangue o il prelievo dei tessuti può provocare risposte allo stress, che possono essere esaminati misurando diversi parametri, come gli ormoni o comportamenti 7, 8 stress. E 'stato dimostrato che i programmi di trattamento possono efficacemente diminuire l'ansia verso il ricercatore in roditori da laboratorio 9, 10, 11. programmi di movimentazione può quindi migliorare gli animali 'condizioni e potrebbero contribuire notevolmente al benessere degli animali 5.
L'obiettivo di questo studio è quello di introdurre la formazione rinforzo positivo per i topi, come un programma di gestione specifica. formazione rinforzo positivo è una forma di condizionamento operante, che dà al ricercatore un mezzo per plasmare il comportamento degli animali. Quando l'animale esegue un comportamento desiderato, è seguito da uno stimolo positivo (qui, un premio alimentare). L'intenzione è che l'animale collega il premio al rispettivo comportamento. Il clicker training è una forma di formazione rinforzo positivo con un rinforzo secondario condizionata, il "click" suono di un clicker, ed è stato dimostrato per rafforzare uno specifico comportamento 12.
Più in particolare, il suono del click funge da "ponte di tempo" tra il comportamento e il prossimo premio 13. Il trainer scatta proprio quando l'animale esegue la desideratacomportamento, senza alcun tempo di ritardo 14, e quindi presenta la ricompensa cibo. Questo rafforza il comportamento premiati, che sarà eseguita con una frequenza più alta. Il clicker training è ampiamente usato con gli animali da compagnia e si è fatto strada nella scienza degli animali da laboratorio, dove è stato implementato con successo con i primati non umani 13, 15, 16. Come i topi imparano piuttosto rapidamente quando provocati con paradigmi condizionamento operante, l'introduzione di un secondo rinforzo non deve affaticare le loro capacità cognitive 5, 17, 18, 19.
Con l'introduzione di clicker training per la tenuta dei topi, permettiamo ai topi per sperimentare l'arricchimento cognitivo. La progettazione di arricchimento conoscitivo deve consentire i topi di utilizzare le loro capacità cognitive per solve problemi e per ottenere il controllo sul proprio ambiente di 20, 21. Diversi studi con diverse specie dimostrano l'impatto positivo di arricchimento conoscitivo sul benessere degli animali in cattività 22, 23, 24. Migliorare la capacità degli animali di affrontare con successo le sfide ambientali contribuisce al loro benessere 25, 26.
Inoltre, se gli animali sperimentano bassi livelli di stress durante la loro vita, sono meno inclini a sviluppare strategie di coping dannosi quando si confronta con fattori di stress che si verificano nella ricerca biomedica. Così, l'attuazione coerente di arricchimento conoscitivo può contribuire ad una omogeneizzazione dei fenotipi dei soggetti. Ciò contribuirà al principio 3R di riduzione, si può ridurre il numero di soggetti richiesteper soddisfare i requisiti statistici 27.
Con lo sviluppo di un protocollo affidabile che può essere facilmente integrato nella routine quotidiana di mantenere topi di laboratorio, siamo in grado di migliorare sostanzialmente la loro esperienza di vita di benessere.
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Protocol
Etica Dichiarazione: Il trattamento dei topi e le procedure sperimentali sono state condotte in conformità europeo, nazionale, e le linee guida istituzionali per la cura degli animali.
NOTA: Il protocollo include cinque giorni di interventi (dal lunedì al Venerdì), con interruzioni durante i fine settimana (sabato e domenica). Il protocollo può essere facilmente adattato per soddisfare esigenze specifiche.
1. Determinare una ricompensa adatta come seconda Reinforcer
Nota: utilizzare ricompense alimentari, come il cibo sottovuoto o animale che soddisfa gli standard di sicurezza alimentare. Ad esempio, diversi tipi di noci, cioccolato, orsetti gommosi, o frutta secca sono adatti.
- Inserire una piccola scatola di Petri con diverse ricompense alimentari (pezzi di 0,5 cm 3) nella casa-gabbia (figura 1).
- Dopo 10 minuti, verificare la presenza di avanzi.
- Se tutti i premi sono mangiati dopo 10 min, ridurre l'intervallo di tempo fino a quando una preferenza può essere stimato.
- Nei giorni 4 e 5 (ad esempio, ThursdaY e Venerdì), aggiungere piccole quantità di preferito () ricompensa "vincitore" per la casa-gabbia di stabilire un vezzo di tutti i topi in gabbia per la ricompensa.
- Se i topi non sono abituati alle gallerie del mouse, aggiungere un tunnel per la gabbia (almeno 2 giorni prima di iniziare l'allenamento, ad esempio, durante il fine settimana).
- Ripetere i passaggi 1,2-1,4 per 3 giorni consecutivi (ad esempio, Lunedi al Mercoledì).
Formazione 2. Clicker
- I preparativi per ogni sessione di allenamento
NOTA: Ogni volta che un mouse deve essere innalzato in questo protocollo, sollevarlo in modo calmo e gentile. Mettere una mano sotto il mouse per sollevarlo. Durante le prime volte, i topi potrebbe essere agitato, ma il processo di assuefazione sarà terminato dopo alcuni giorni. Se questo passaggio crea difficoltà, è utile fare riferimento al protocollo per "cupping sulla mano aperta" 28.- Preparare una gabbia di una lettiera.
- Transfer la gabbia del mouse in formazione in un posto tranquillo.
- Preparare la ricompensa e hanno un timer e la combinazione bastone clicker / target pronto.
NOTA: se i topi sono abituati alla manipolazione e hanno già un rapporto di fiducia con lo sperimentatore, i topi possono essere alimentati a mano. Altrimenti, collegare il premio ad un bastone o pinze in modo tale che i topi possono mantenere una distanza dal sperimentatore. - Rimuovere tutti gli oggetti dalla casa-gabbia, che ora serve come l'area di formazione (ad esempio, le case del mouse, materiale costruzione del nido, ecc.).
- Trasferire i compagni gabbia per gabbia preparata.
- Regole generali che si applicano per tutte le sessioni di allenamento
NOTA: Le seguenti regole generali si applicano per tutte le sessioni e non saranno menzionati di nuovo in tutto il protocollo.- Addestrare ogni mouse per 5 min. Si alternano tra la formazione 30-s e 15-s periodi di pausa.
- Sia il mouse rosicchiare sul premio non più di un secondo. Poi, prendere il bastone (con la ricompensa) fuori dalla gabbia.
- Eseguire il seguente modello di premiare:
1 - 10 spettacoli di comportamento: premiare ogni volta.
11-21 prestazioni di comportamento: premiare ogni seconda volta.
Dal 22 prestazioni di comportamento: premiare ogni terza volta. - Dopo 4 minuti di allenamento, prossima rappresentazione del comportamento desiderato è rinforzata da un premio jackpot. Lasciare che il mouse per rosicchiare presso la ricompensa cibo tre volte più a lungo rispetto a prima.
- sessione di Training Day 1: "Collegare il rinforzo secondario con il premio cibo"
- Impostare il timer di 5 minuti, premere start, e aggiungere il tunnel del mouse per la casa-gabbia.
NOTA: Approfittate delle thigmotaxis innate dei topi e posizionare il tunnel accanto a un muro (Figura 2). Per le prime sessioni, questo aumenterà la probabilità del mouse entrare nel tunnel. - Attendere fino a quando il mouse ispeziona il tunnel. Appena il mouse entra nel tunnel, clicca e presentare il premio alla fine del tunnel.
- Lasciate che l'alimentazione del mouse sul premio mentre era seduto nel tunnel.
- Clicca continuamente per 15 s mentre il mouse è seduto nel tunnel.
- Non appena il mouse lascia il tunnel, tornare al punto 3.2.
- Impostare il timer di 5 minuti, premere start, e aggiungere il tunnel del mouse per la casa-gabbia.
- sessione di allenamento Giorni 2-5: "che attraversa un tunnel"
- Impostare il timer di 5 minuti, premere start, e aggiungere il tunnel del mouse per la casa-gabbia.
- Non appena il mouse entra nel tunnel, scegliere e presentare il premio alla fine del tunnel.
- Finché il mouse è nel tunnel, scegliere e presentare immediatamente il premio nella stessa maniera.
- Ripetere questa operazione per i prossimi 30 s, e quindi sospendere per 15 s per prendere il tunnel fuori dalla gabbia.
- Aggiungere nuovamente il tunnel e scegliere immediatamente quando il mouse rientra tunnel.
- Presentare la ricompensa alla fine del tunnel.
- Lasciare che il mouse per rodere per un massimo di 1 s. Togliete la ricompensa.
- Non appena inizia topo rientrino nel tunnel stesso, presentare il premio di fronte alla fine del tunnel (Figura 3).
- Allenamento Settimana 2: "A seguito di un bastone di destinazione"
- Impostare il timer per 5 min, premere start, e posizionare il globo alla fine del bastone di destinazione nella gabbia.
- Non appena il mouse mostra interesse nel globo, scegliere e presentare il premio accanto al globo (figure 4 e 5).
- Premiare il mouse solo dopo che tocca il mondo con il suo naso.
- Quando il mouse è collegato l'azione eseguita per la ricompensa, cambiare la posizione del globo durante la sessione di allenamento (Figura 6).
- Attendere che il mouse per rispondere a questa ultima sfida.
- Posizionare il globo nella gabbia.
- Poco prima il mouse tocca il globo, lentamente e con attenzione cambiare la posizione del globo da 1 cm. Fare clic e premiare se il mouse ha attraversato la distanza e tocca il globo.
- Ripetere questa procedura fino a quando il mouse segue in modo affidabile.
- Lentamente aumentare la distanza con il mouse deve attraversare.
- settimana Allenamento 3: "Dopo il bastone di destinazione a portata di mano dello sperimentatore"
- Mettere una mano nella gabbia di formazione mentre si tiene la combinazione bastone clicker / target e la ricompensa con l'altra mano.
- Impostare il timer per 5 min, premere start, e posizionare il globo alla fine del bastone destinazione successiva alla mano.
- Non appena il mouse mostra interesse per il mondo, fare clic e presentare il premio accanto al globo.
- Non appena il mouse ha incontrato questa sfida, spostare il pianeta diversi passi più vicino alla mano.
- Posizionare il globo sul palmo della mano. Fare clic e premiare mentre il mouse è seduto sul palmo della mano (Figura 7).
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Representative Results
Il primo e anche uno dei passi più importanti è la determinazione di un adeguato premio in cibo. Pertanto, i topi sono stati proposti diversi tipi di noci, una soluzione di zucchero, marmellata, e diversi tipi di cioccolato in una capsula di Petri (Figura 1). Nella nostra esperienza, i topi hanno mostrato una preferenza evidente per il cioccolato bianco. Quindi, abbiamo usato il cioccolato bianco per tutti gli altri processi di formazione.
La formazione attuale è stato realizzato con una coorte di 12 BALB / c topi inbred di ciascun sesso. Tutti i topi erano molto interessati alla formazione. Per la valutazione del successo della formazione, abbiamo controllato per la corretta esecuzione del comportamento desiderato: "dopo il bastone di destinazione" (Figura 4). La stragrande maggioranza dei topi-tutti i formati topi di sesso femminile e 83% dei maschi topi-seguito il bastone di destinazione (Figura 8). topi femmina visualizzato un elevatoER motivazione per la formazione in generale ed eseguito il relativo comportamento con una frequenza più alta in tutte le sessioni di allenamento. Dopo aver completato 4 giorni di formazione, topi di sesso femminile ha seguito il bastoncino di destinazione con una media di 64 volte per 5 minuti, mentre topi maschi visualizzato questo comportamento solo 50 volte per 5 min. In 5 min, il task "seguente al palmo della mano" è stata effettuata in media 55 volte da topi femmina e 35 volte da topi maschi (Figura 9).
Per verificare se la formazione ha avuto un effetto positivo sul benessere dei topi addestrati, abbiamo valutato la tolleranza alle manipolazioni dopo aver completato la formazione. Pertanto, abbiamo analizzato comportamenti legati all'ansia mentre i topi sono stati trattenuti singlehandedly (cioè, afferrare la collottola e la base della coda con una mano) per 15 s. sono stati registrati spontanea minzione, la defecazione e la vocalizzazione. Un coho inesperto ma delicatamente maneggiatort di 12 BALB / c topi inbred di ciascun sesso servito come gruppo di controllo. topi allenati hanno mostrato una frequenza significativamente inferiore di comportamenti legati ansia rispetto ai topi non addestrati. (Figura 10). Risultati simili sono stati ottenuti quando la registrazione vocalizzazione legata alla movimentazione durante l'esecuzione del Morris Water Maze Test (figure 11 e 12). I topi addestrati squitti significativamente inferiore rispetto ai topi non addestrato (Figura 11) e il numero totale di cigolii per cigolio topo era significativamente ridotta. Per valutare ulteriormente questo problema, abbiamo analizzato il comportamento di galleggiamento durante il Morris water maze test. comportamento galleggiante durante il Morris water maze test è descritto come periodi di tempo in cui i topi non sono il nuoto, ma sono semplicemente galleggiano sulla superficie. Questo comportamento Floating depressione legati si rivelò essere significativamente ridotto nel gruppo allenato (Figura 12).
Figura 1. Presentazione di premi possibili. Sei posizioni per la presentazione delle ricompense sono contrassegnati in una capsula di Petri.
Figura 2. Posizione del mouse Tunnel. Per migliorare la probabilità del mouse entrare nel tunnel, il tunnel è collocato vicino ad una parete della gabbia. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Figura 3. Presentazione del Premio. La posizione appropriata per presentare il premio all'esterno dell'estremità del tunnel è mostrato. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Figura 4. successo formativo. Un mouse addestrato segue il bastone di destinazione, mentre in formazione. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Figura 5. gratificante. Un mouse viene premiata accanto al bastone di destinazione durante la sessione di allenamento. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Figura 6. Posizioni alternata destinazione Stick nella seconda settimana di formazione. Le posizioni del bastone di addestramento sono indicati in questo disegno schematico. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Figura 7. successo formativo. Un topo ha seguito il bastoncino bersaglio sulla mano del formatore. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Figura 8. Il successo del protocollo di allenamento. Una coorte di 12 BALB / c topi ceppo inbred di ciascun sesso è stato addestrato. Entro la fine della sessione di formazione di una settimana 2: "A seguito di un bastone di destinazione," tutti i topi di sesso femminile e il 83% dei topi maschi ha superato con successo la sfida. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Figura 9. Ripetizioni di comportamento rispettivi dopo una settimana di formazione. Una coorte di 12 BALB / c nei topi allevati di ciascun sesso è stato addestrato. L'ultimo giorno della sessione di allenamento settimana 2: "A seguito di un bastone di destinazione" e 3: "Dopo il bastone bersaglio alla mano", le ripetizioni del rispettivo comportamento sono stati contati nel corso di una sessione di allenamento a 5 min. In entrambe le settimane, DISPL topi di sesso femminileAyed il comportamento rinforzato con una frequenza significativamente più alta rispetto ai topi di sesso maschile ( "bastone di destinazione": 63.92 ± 3.72, p = 0,0300; "On mano": 54.92 ± 4.01, p = 0,0069). La frequenza del comportamento rafforzata non variava significativamente nei topi femmina da seconda settimana tre settimana. Tuttavia, topi maschi ha mostrato una significativa diminuzione ripetizioni di settimana 2-3 settimane ( "bastone di destinazione": 50,42 ± 4,48; "On mano": 35.92 ± 5; p = 0,0408). A Mann-Whitney U-test è stato eseguito. I risultati dei dati sono stati espressi come media ± SEM prega di cliccare qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Figura 10. Mostrato Comportamento Innescato da Scruff Holding. Una coorte di 12 BALB / c topi inbred di ogni s ex si è formato seguendo il protocollo clicker training. Una coorte non addestrato, ma delicatamente maneggiato di 12 BALB / c topi inbred di ciascun sesso servito come gruppo di controllo. I topi sono stati trattenuti singlehandedly (cioè, afferrare la collottola e la base della coda con una mano) per 15 s. minzione spontanea, defecazione, e la vocalizzazione sono stati registrati. C'era una profonda differenza tra il comportamento visualizzata del formato e del gruppo di controllo. topi addestrati visualizzati tutti i comportamenti con una frequenza significativamente più basso rispetto ai topi non addestrati. ( "Minzione": p <0.001; "defecazione": p <0.001; "Vocalizzazione": p <0.001). A Mann-Whitney U-test è stato eseguito. Le colonne sono espressi come percentuale di tutti i topi testati. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Figura 8 "src =" / files / ftp_upload / 55415 / 55415fig11.jpg "/>
Figura 11. visualizzata comportamenti Nel corso del Morris water maze test. Una coorte di 12 BALB / c topi inbred di ogni sesso è stato addestrato seguendo il protocollo clicker training. Una coorte non addestrato, ma delicatamente maneggiato di 12 BALB / c topi inbred di ciascun sesso servito come gruppo di controllo. Un Morris water maze test è stato eseguito con tutti i topi dopo la terza settimana di formazione. sono stati registrati galleggiante comportamento e vocalizzazione legati alla manipolazione. comportamento galleggiante si è verificato significativamente inferiore nei topi addestrati (p <0.001). Inoltre, vi era una profonda differenza nella vocalizzazione del formato e del gruppo di controllo. topi addestrati cigolava molto meno quando vengono maneggiati rispetto ai topi del gruppo di controllo non allenato (p <0.001). A Mann-Whitney U-test è stato eseguito. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Figura 12. La prevalenza di Squeaks per mouse. Una coorte di 12 BALB / c topi inbred di ogni sesso è stato addestrato seguendo il protocollo clicker training. Una coorte non addestrato, ma delicatamente maneggiato di 12 BALB / c topi inbred di ciascun sesso servito come gruppo di controllo. Un Morris water maze test è stato eseguito con tutti i topi dopo la terza settimana di formazione. Vocalizzazione legati alla movimentazione dei topi è stato registrato. i topi non addestrato squittì significativamente più spesso rispetto ai topi addestrati. i topi non addestrato visualizzata vocalizzazione 1.167 ± 0,7 volte e topi non addestrato 4.071 ± 0,83 volte. Una t-test spaiato con correzione di Welch è stata eseguita. I risultati dei dati sono stati espressi come media ± SEM prega di cliccare qui per vedere una versione più grande di questa figura. <p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1">
Figura 13. Ulteriori applicazioni. Un mouse sta seguendo un bastone obiettivo di attraversare un ponte da una gabbia all'altra. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
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Discussion
L'effettiva attuazione del protocollo di clicker training con una coorte di 12 BALB / c topi inbred di ogni sesso ha dimostrato di essere semplice. Precedenti studi hanno confermato l'efficacia del clicker training con diverse specie, e abbiamo esteso questo per topi. Poiché i topi sono i mammiferi più bassi sviluppati tra gli animali da laboratorio, le loro capacità sono spesso sottovalutati. Pertanto, l'aspetto più sorprendente di dati è che successo addestramento potrebbe essere realizzato con quasi tutti i topi.
Un passo fondamentale all'interno di questo protocollo è la tempistica del secondo rinforzo, che è molto importante per stabilire una connessione tra il comportamento visualizzato e l'armatura. Poiché i topi sono molto agitato, è un po 'difficile da marcare una performance esatto mentre sono scampering intorno. Il più esperto l'allenatore è, il successo addestramento più veloce può essere raggiunto. Abbiamo osservato che i topi imparato abbastanza rapidamente, anche con il treno inespertiERS. Anche piccoli errori possono essere compensati nel corso del protocollo clicker training. Le fonti comuni di errore inclusi rinforzare un comportamento sbagliato e una mancanza di interesse per il premio di cibo dopo aver fatto clic.
Un fattore incontrollabile è il carattere individuale di ogni mouse. Sebbene questo studio è stato eseguito con topi inbred, nati e cresciuti nelle stesse condizioni, sviluppano una varietà di caratteri diversi. A causa di precedenti ricerche e dei nostri dati empirici, sappiamo che questo include i gusti diversi, diverse espressioni di appetito, e diverso comportamento di esplorazione 29, 30. Il primo passo fondamentale è stato quello di trovare una ricompensa in cibo adeguato. I topi sono stati offerti diversi tipi di noci, una soluzione di zucchero, marmellata, e diversi tipi di cioccolato. Ai topi in questo studio, cioccolato bianco si è rivelato il premio più appropriata. Il successo di questo protocollo dipende interest dei topi nella formazione. Se qualsiasi altra cosa suscita il loro interesse più, la formazione raggiunge i suoi limiti. L'apparecchiatura più che è stato aggiunto alla gabbia per soddisfare una sessione di allenamento, tanto meno i topi hanno partecipato alla formazione. L'eliminazione di tutti gli elementi che attirano l'attenzione del circostante è essenziale (ad esempio, lasciando anche una piccola quantità di lettiera nella gabbia per evitare che i topi da tane). A volte i topi guadagnano più interesse per la formazione, dopo una assuefazione al nuovo ambiente per alcuni minuti.
Protocolli di trattamento delicato sono già stati determinati a beneficio del benessere dei topi quando trattati amichevolmente 9, 10, 11. I risultati di questo studio indicano che un rapporto uomo-animale vicina contribuisce alla tolleranza mouse per trattamenti. Sotto la manipolazione, animali addestrati visualizzati minor numero di comportamenti legati all'ansia (i.E., minzione, defecazione, e la vocalizzazione) 31. Nel Morris water maze test, i topi non addestrati ma delicatamente trattati espresso una significativamente più alta prevalenza di comportamento galleggiante. Topi addestrati visualizzati meno di questo comportamento depressione legati 32. Si potrebbe sostenere che i risultati positivi sono dovuti ad un aumento del benessere nei topi addestrati.
Un limite di questo studio è che solo ceppo di topi inbred stato studiato. A causa delle differenze di comportamento elevati tra i diversi ceppi di topi, ceppi inbred aggiuntivi, così come i ceppi outbred, devono essere esaminati 29. In ulteriori studi, informazioni supplementari su benessere del mouse, come ad esempio un intero batteria comportamentale, dati fisiologici (ad esempio, i livelli di corticosterone), o l'impatto della formazione sullo sviluppo del cervello, deve essere raccolto.
Ulteriori applicazioni di clicker training potrebbero aiutare in il miglioramento delle condizioni igienico-sanitarie nelle strutture di animali. Applicando il protocollo clicker training, siamo riusciti a insegnare topi per seguire un bastone bersaglio e attraversare un ponte da una gabbia all'altra (Figura 13). Se questa tecnica viene perfezionata, fa uso gabbia cambia inutili. Inoltre, i topi potrebbero eventualmente essere addestrati a camminare volontariamente su apparecchiature di misura (ad esempio, la scala o aree comportamentali). Ciò potrebbe fornire una protezione affidabile contro la trasmissione della malattia anthropozoonotic, come il contatto diretto con gli animali non sarà più necessario.
Formazione rinforzo positivo è altamente raccomandato per gli animali in cattività, in quanto contribuisce alla loro salute mentale 33. Se i topi sperimentano un elevato livello di benessere, mostrano alcune strategie di coping individualmente diverse. addestramento Clicker, quindi, fornisce un contributo notevole alle 3R, come lavoro precedente dimostra che una riduzione variabilità di topi fenotipi porta ad un ridotto numero di animali necessari per soddisfare i requisiti statistici 27. Questo studio ha dimostrato che il clicker training nei topi è strettamente correlato con una ridotta timore di interazioni uomo-topo e partite i risultati osservati in studi precedenti con specie diverse 34. Il clicker training ha ulteriori potenzialità, in quanto potrebbe essere considerato un arricchimento conoscitivo. L'ampia attuazione della formazione rinforzo positivo in strutture animali di laboratorio potrebbe dare un valido contributo al principio 3R, come si affina la conservazione e la ricerca biomedica di topi.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Lid for open housing | Tecniplast | GM500LID117 | |
| SealSAfe Plus top for open housing | Tecniplast | GM500400SU | |
| Type II long, filter top cages | Tecniplast | GM500PFSPC | |
| Aspen bedding material | Lab & Vet Service GmbH | H0234-300 | Environmental enrichment |
| Red polycarbonate Mouse House | Tecniplast | ACRE011 | Environmental enrichment |
| Tissue papers | Tork, SCA Hygiene Products GmbH | 290179 | Environmental enrichment |
| Food - ssniff M-H Extrudat | ssniff | V1126-000 | ad libitum |
| Target Stick with Clicker | Trixie | 2282 | |
| PVC Tube (Tunnels) | Thyssen Krupp | RTPVCU04003005 | |
| White Chocolate/ white chocolate cream | Company doesn't matter, preferable organic quality | ||
| Forceps | FineScienceTools | e.g. 11150-10 | Or any other tool to fixate chocolate |
| Prism Version 6.0 for Windows | GraphPad Software |
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