Summary
Denne video artikkelen inneholder en detaljert demonstrasjon av prosedyrer må kunne fjerne bukspyttkjertelen fra mus ved disseksjon for histologiske analyse og metabolske profilering.
Abstract
Vi har vært å undersøke den bukspyttkjertelen bestemt transkripsjon faktor, 1a grobunn-recombinase; LOX-stopp-lox-Kristen rotte sarkomspesialitet, glysin til aspartic syre på 12 codon (Ptf1agrobunn / +; LSL-KrasG12D / +) mus belastning som modell av menneskelig bukspyttkjertelkreft. Målet med våre nåværende studier er å identifisere romanen metabolske biomarkers av bukspyttkjertelkreft progresjon. Vi har utført metabolske profilering av urin, avføring, blod, og bukspyttkjertelen vev ekstrakter, samt histologiske analyser av bukspyttkjertelen å iscenesette kreft progresjon. Musen bukspyttkjertelen er ikke et veldefinert solid organ som i mennesker, men er en diffusely distribuert mykt vev som ikke er lett identifisert av personer ukjent med musen innvendig anatomi eller enkeltpersoner som har liten eller ingen erfaring utfører musen orgel disseksjoner. Formålet med denne artikkelen er å gi en detaljert steg klokt visuell demonstrasjon lede nybegynnere i fjerning av musen bukspyttkjertelen ved disseksjon. Denne artikkelen bør være spesielt nyttig for studenter og etterforskere ny forskning som krever høsting av musen bukspyttkjertelen av disseksjon metabolske profilering eller histologiske analyser.
Introduction
Musen har dukket opp som en viktig dyr modell av menneskelig bukspyttkjertelkreft1,2. I Ptf1agrobunn / +; LSL-KrasG12D / + musemodell, Kristen rotte sarkomspesialitet (K-Ras) oncogene er aktivert i bukspyttkjertelen, resulterer i initiering av precancerous lesjoner i bukspyttkjertelen, kjent som bukspyttkjertelen intraepithelial neoplasias (PanINs), at fremgangen å bukspyttkjertelen ductal adenocarcinomas, ofte referert til som PDACs3. Mus modell systemet gir en av de beste tilgjengelige dyr modellene for menneskelig bukspyttkjertelkreft4,5, fordelen som PanINs oppstår i de første fem månedene av livet og ofte fremdriften til PDAC innenfor en enkelt år4,5, mens bukspyttkjertelkreft oppstår oftest hos mennesker 60-70 år.
Utvinning av bukspyttkjertelen av disseksjon fra Ptf1agrobunn / +; LSL-KrasG12D / + mus på ulike aldre gir detaljert langsgående histologiske undersøkelse av hudkreft i bukspyttkjertelen, alt fra de tidligste stadiene av PanIN gjennom progresjon til PDAC3,4 , 5. høsting bukspyttkjertelen i alder fra fem til femten måneder kan også brukes til å forberede vev ekstrakter som karakteriserer globale endringer i bukspyttkjertelen4 stoffskifte som oppstår under overgangen fra sunn til syke vev 6,7.
Denne artikkelen presenterer en komplett visuell guide av trinn kreves for å utføre en mus bukspyttkjertelen utvinning og gir retningslinjer for lagring av en bukspyttkjertelen for videre analyse. Denne guiden vil være like verdifulle for personer som utfører forskning på andre bukspyttkjertelen sykdommer, inkludert type I diabetes, og bør være spesielt nyttig for studenter og etterforskere ny forskning innvolvere høsting av musen bukspyttkjertelen ved hjelp disseksjon metabolske profilering eller histologiske analyser.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
prosedyrer utført i videoen og beskrevet nedenfor er godkjent av institusjonelle Animal Care og bruk Committee (IACUC) ved Miami University.
1. forberedelse og stimulans Test
- etablere to forskjellige områder for den kirurgiske prosedyren, drifts tabellen og tabellen etter operasjon. Avholde begge områder med alle materialer og bestikk er nødvendig.
- Scenen operativsystemet tabell under ventilerte hette. Ordne tabellen med utstyret i en måte som tillater kontinuerlig og uhindret ytelsen til prosedyren.
- Opprette en postoperative tabell i samme rom og nær hovedtabellen operasjon. Opprettholde begge tabellene som sterile miljøer gjennom prosedyren.
- Sted følgende leverer i drifts tabellen: en glasskrukke med lokk, en 15 mL tube, ett par kirurgisk saks, en klem flaske med 70% etanol, to skum boards, to tang, to 1 mL 21 gauge sprøyter, to 50 mL rør, en sentrifuge rør , en kryogene flaske, fire kirurgisk pads, ti pinner, en dispenser med sterilisering våtservietter og en beholder.
- Plasserer følgende rekvisita i tabellen etter operasjon: en analytical balanse, en 4 L dewar av flytende nitrogen, en grunne bred munn dewar, en flytende microtube rack, ett par kirurgisk saks, to tang, fire kryogene hetteglass og en dispenser av sterile våtservietter.
- Fylle en 50 mL og en 15 mL tube til 75% volum med formalin.
- Med en nål i hvert hjørne, påføre en kirurgisk pad til en omtrentlig 30 cm x 30 cm skum bord som disseksjon styret. Bruke de gjenværende fire pinnene under operasjonen. Forberede en mindre skum bord med en kirurgisk pute å overføre organer til tabellen post-op.
Advarsel: Isoflurane (99,9%) er et giftig kjemisk, og bør brukes i ventilen hette for å sikre maksimal grad av sikkerhet fra renovering av avfall bedøvende gass 8. Ytterligere informasjon om risikoen til forskere knyttet til bruk av åpen-slipp-metoden ved hjelp av isoflurane kan finnes i en artikkel av Taylor og Mook 8. - Plasserer en kirurgisk pute i glasskrukke og suge med noen dråper isoflurane (99,9%) og plassere et papirhåndkle over toppen for å unngå direkte kontakt av musen med isoflurane. Likeledes bruker en kirurgisk styreplate til linje gjenværende røret og suge med noen dråper isoflurane og plassere en ekstra pad over toppen for å unngå direkte kontakt mellom musen og isoflurane.
- Pour flytende nitrogen i grunne bredt munnen dewar til maksimal fylle linje nås.
- Sted musen valgt for disseksjon i av bedøvelsen kammer, dvs glasskrukke med en pute fuktet med noen dråper isoflurane (99,9%) dekket med lokket, i ~ 1 min.
Merk: Denne gangen varierer fra mus til mus. Når musen er bevisstløs, fjerne den fra kammeret og plassere den på drift brettet. - Plasser musen slik at den ligger ventral side opp og med hodet peker fra forskeren. Plasser hodet inne i røret med en kirurgisk pad fuktet med noen dråper isoflurane (99,9%), og utføre en stimulans test av en fot knipe for å sikre at musen ikke svarer på stimuli.
- Hvis testen mislykkes, og musen svarer på foten knipe prøve, gjentar du trinn 1.8.
2. Første snitt, hjertet punktering og Euthanasia
- Pin lemmer av musen til kirurgisk skum bord og våt ventrale siden av musen med 70% etanol.
- Klype pels/huden nær urethral åpningen med tang og trekk litt oppover. Gjøre et snitt med kirurgisk saksen gjennom bukhulen fra urethral åpningen, opp midtlinjen og endte på haken.
- Nær startpunktet for den opprinnelige snittet, ta en side av pels/huden med tang og gjøre en annen snitt med saksen nedover og diagonalt mot tilbake labben.
- Gjenta dette på samme måte på motsatt side.
Merk: Pels/huden kan være låst for å lage en bredere åpning, men kreves ikke.
- Finne hjertet og fjerne pericardium som sac rundt hjertet, å unngå tilstopping av sprøytenålen.
- Forstå pericardium med tang og klippe den med saksen. Utføre hjertet punktering av nøye setter inn sprøytenålen i det bankende hjertet og sakte begynner å trekke stempelet.
- For optimal blod samling, bruker stempelet til nålen å etterligne pumping action av hjertet og unngå tegning for fort.
Merk: Vanligvis ca 1 mL blod kan samles. - Etter fullført samlingen blod, fjerne blodet i sentrifuge rør og kast av i beholderen.
- Etter hjertet punktering er utført, utføre euthanasia ved å fjerne vedlegg koble hjertet.
Merk: Heparin, en anti-koagulere, ble ikke lagt til sprøyten i denne fremgangsmåten før hjertet punktering å la blodet å koagulere for serum samling i denne konkrete studien. Men hvis hun ønsket å forhindre blodpropp å samle plasma, heparin kan legges til sprøyten før hjertet punktering.
- Hvis studien omfatter genotyperingteknologi av musen, bekkasin en del av øret med saksen og plasser i en sentrifuge rør på en genotype bekreftelse.
3. bukspyttkjertelen utvinning
- finne magen på venstre side av musen. Start forsiktig (for å unngå rive) skille bukspyttkjertelen fra mage og duodenum ved hjelp av to tang.
Merk: Når demontering bukspyttkjertelen fra magen og tarmene, er det svært viktig at tang brukes forsiktig å veilede bukspyttkjertelen vev fra organer og for å ikke knuse eller rive bukspyttkjertelen med tang.- Fortsett å skille bukspyttkjertelen fra tynntarm jejunum og ileum delene, og til slutt fra caecum i tykktarmen.
- Caecum, flytte tang og fortsette separasjon av bukspyttkjertelen langs resterende kolon mot endetarmen.
Merk: På dette punktet, er det praktisk å kutte og fjerne delen fra magen til regionen kolon umiddelbart foran endetarmen. - Finn bukspyttkjertelen og festet milten. Skyv bukspyttkjertelen mot høyre side av musen. Separate gjenværende forbindelsene mellom bukspyttkjertel og bryst hulrom med tang fullt koble bukspyttkjertel og tilgrensende milten.
- Fjern bukspyttkjertelen og sprer det ut for undersøkelse. La milten knyttet til bukspyttkjertelen identifikasjonsnummer.
- Fjern alle bindevev, fett og hvem vev fra bukspyttkjertelen.
Merk: Dette vevet er hvitere i farger og dermed kan være enkelt å skille fra bukspyttkjertelen vev som er lyserød farge. Dette er spesielt viktig hvis hele bukspyttkjertelen må fjernes. Hvis for eksempel bukspyttkjertelen må veies og forhold til kroppsvekt eller mellom grupper av dyr. I Ptf1a grobunn / +; LSL-Kras G12D / + musemodell, spesielt i de eldre månedene, hard bukspyttkjertelen bindevev kan være til stede. I dette tilfellet må forsiktig fjerning av bukspyttkjertelen være gjennomført som tarmen kan være sammenflettet i tumor vev. I avanserte tilfeller unormal milten og leveren vev kan også være til stede.
- Fjern alle bindevev, fett og hvem vev fra bukspyttkjertelen.
- Eventuelt fjerne andre organer på dette punktet.
4. datainnsamling og lagring
- etter ekstraksjon av organer, flytter prøvene til postoperativ for bevaring.
- Veier hvert organ og plassere dem i deres respektive kryogene hetteglass.
Merk: langs viddh massen av hver prøve, eventuelle uregelmessigheter som skal registreres for fremtidig referanse. - Når de er veid, plassere dem i flytende nitrogen for snapin frysing.
- Etter snap frysing, lagre organer ved-80 ° C for langtidslagring.
- Plasser formalin lagret eksemplene på benk toppen over natten, og neste morgen endre deres løsning fra formalin til 70% etanol.
Merk: Disse prøvene skal lagres på 4 ° C for langtidslagring. - For langtidslagring, fryse blod og øret slag på-80 ° C.. Serum samling fra blodet, Tillat blodet koagulere i 30 min så sentrifuge det. Fjern delen serum bruker en pipette, og deretter lagre på-80 ° C.
5. Rydd opp
- Sanitize alle dissection verktøy med sterilisering kluter. Cap røret med isoflurane gjennomvåt kirurgisk pad. Erstatt kirurgisk puten ombord skum med en frisk kirurgisk pad. Kast delene av musen var ikke innsamlet per anlegget ' s dyr disposisjon politikk.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Figur 1 viser en oversikt over driftsområdet miljø og figur 2 viser modulen stolpe operasjon. Mens denne innstillingen gir minimalt med utstyr og staging, enkeltpersoner kan velge å endre dette for å passe individuelle behov. Protokollen skal optimaliseres i henhold til behovene til eksperimentet. Denne prosedyren utføres på en måte som avslutter livet til en mus, krever skikkelig euthanization9. Når forskeren er klar, er musen plassert i kammeret anestesi med isoflurane-gjennomvåt pads (Figur 3).
Når musen er bevisstløs, fjerne musen og plassere det dorsal side på brettet. En tå-klype prosedyre skal utføres for å sikre at musen ikke svarer til smerte (Figur 4). Bruke 70% etanol å sterilisere området opprinnelige snitt. Terminal blod trekningen skal gjennomføres først før bukspyttkjertelen fjerning, å sikre tilstrekkelig blod henting. Før blod fjerning, bør pericardium fjernes for å forhindre tilstopping av 21 G nålen åpning. Etter fullfører terminal blod hjertet er løsrevet som sekundær euthanasia og bukspyttkjertelen fjernes deretter.
Begynn med å finne magen, som gir et godt utgangspunkt for bukspyttkjertelen fjerning (figur 5). Merk: Utvise forsiktighet bør utvises under fjerning av bukspyttkjertelen, som er en delikat og skjør vev, og derfor alle operasjoner skal utføres med mild kraft. Ved hjelp av pinsett, begynner dissection ved å begynne å trekk forsiktig bukspyttkjertelen fra magen og fortsetter å skille bukspyttkjertelen vev fra ytre foring av gastrointestinal (GI) skrift arbeider fra magen til tolvfingertarmen, jejunum og ileum ( Figur 6). Når caecum er nådd, oppnås lettere fjerning av bukspyttkjertelen av reposisjonering tang slik at en tang holder caecum og andre tang til å fortsette å skille bukspyttkjertelen fra tykktarmen (figur 7). Etter fjerning fra tykktarmen, bukspyttkjertelen er plassert på høyre side av musen og eventuelle gjenværende vedlegg er kuttet()Figur 8).
Bukspyttkjertelen bør være fanned ut for inspeksjon og noe unormalt skal registreres (figur 9). I Ptf1agrobunn / +; LSL-KrasG12D / + mus belastning, bukspyttkjertel kan inneholde en herdet svulst (Figur 10). Andre organer bør også undersøkes for potensielle metastasering. Når bukspyttkjertelen er fjernet, det vurderes og vekten registrert. En del av bukspyttkjertelen skal snapin-frosset i flytende nitrogen for fremtidige metabolske profilering analyse eller andre testing og en del av bukspyttkjertelen plasseres i formalin for fremtidige histologiske analyse. Figur 11 viser første lagring av ulike organer samlet inn fra dissection for bruk i senere analyse. Organer samlet av disseksjon og lagret for videre studier avhenger av målene i personlige forskeren.
Vev og blod prøver kan brukes for histologiske analyser og metabolske profilering. Et eksempel på histologiske analyse av bukspyttkjertelen vev er vist i Figur 12. Metabolske profilering kan gjennomføres på snapin-frosne vevsprøver og blodprøve. Representant kjernefysiske magnetisk resonans spektroskopi (NRM) spektra av hydrofile og hydrofobe komponentene i bukspyttkjertelen vev ekstrakter er vist i figur 13A og 13B, henholdsvis. Et representativt NMR spekter samlet på et serum utvalg forberedt fra blod samlet samtidig med en terminal blod tegne prosedyre er vist i figur 14.
Figur 1 : Regi av opererer området. Generelle oppsettet av riktig verktøy og driftsforhold for dissection. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2 : Iscenesettelse av post-drift. Generelle oppsettet av riktig verktøy og driftsforhold for postoperativ prosedyrene. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3 : Anestesi Chamber. Riktig miljø for anestesi via isoflurane. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4 : Stimulans eksamen. Stimulans test utført på mus før den opprinnelige snittet å sikre smerte eller ubehag er ikke blir holdt. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 5 : Begynnelsen fjerning av bukspyttkjertelen. Retningen til musen og indikerer første utvinning av bukspyttkjertelen, stedet angitt av tang. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 6 : Bukspyttkjertelen utvinning langs tarmen. Prosessen med å isolere bukspyttkjertelen fra mage-tarmkanalen. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 7 : Bukspyttkjertelen fjerning av Caecum. Omplassering av Tang når caecum er nådd. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 8 : Bukspyttkjertelen fjerning. Plass bukspyttkjertelen på høyre side av musen. Eventuelle gjenværende vedlegg bør kuttes for å fullstendig fjerne bukspyttkjertelen. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 9 : Bukspyttkjertelen eksamen. Bukspyttkjertelen med vedlagte milt undersøkt etter fjerning av musen. Milt er pilens loddrett, og bukspyttkjertelen angis av den vannrette pilen. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 10 : Bukspyttkjertelen eksamen. Bukspyttkjertelen med vedlagte milten vises en bukspyttkjertelen svulst undersøkt etter fjerning av musen. Milt er pilens loddrett, og bukspyttkjertelen angis av den vannrette pilen. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 11 : Lagring av organer fjernet. Oppbevaring av organer og prøver samlet, forberedt for langtidslagring og fremtidige analyser. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 12 : Histologiske analyse av bukspyttkjertelen vev. Hematoxylin og eosin farget bilder fra bukspyttkjertelen vev. A) normal bukspyttkjertelen vev fra en Ptf1agrobunn /-; LSL-KrasG12D /- kontroll musen. B) PanIN vev fra bukspyttkjertelen av en Ptf1agrobunn / +; LSL-KrasG12D / + studie musen. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 13 : Metabolske profilering analyse. Endimensjonal proton kjernefysiske magnetisk resonans spektroskopi (NRM) spektra av A) hydrofile og B) hydrofobe komponenter av bukspyttkjertelen vev ekstrakter etter vev homogenisering og utsatt for kloroform/metanol utvinning. NMR spekter anskaffet på 850 MHz og er egnet for bruk i metabolske profilering analyser. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 14 : Representant NMR spekter av Serum. Blodet samlet av terminal blod tegne kan brukes for metabolske profilering analyse. Dette spekteret viser en typisk endimensjonal proton 850 MHz NMR spekter samlet på serum fra en terminal blodprøve for uavgjort. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Betydning når det gjelder eksisterende metoder
Mens andre uformelle videoer av musen disseksjoner finnes, denne video artikkelen inneholder den første profesjonell kvaliteten, fagfellevurdert, visuell demonstrasjon av alle detaljerte trinn kreves for utvinning og høsting av musen bukspyttkjertelen av disseksjon10 . Med bukspyttkjertelen blir en viktigste organ for metabolsk aktivitet og insulin tillater produksjon, disseksjon og høsting av bukspyttkjertelen bevaring av fysiologiske egenskaper11. Av aisolering bukspyttkjertelen, kan fremtidige analyser utføres på prøven. Denne fremgangsmåten gjør at sammenligning og studiet av interaksjoner fra andre vev innenfor den samme organismen innen samme tidsramme.
Begrensninger av teknikken
Den største begrensningen av denne prosedyren er oppsigelse av musen er liv, og dermed hindre langsgående samling og utvalg av flere fra samme musen. For å analysere trender relatert til alder, kjønn eller andre mengdebenevnelser, må en cross-sectional befolkning implementeres, som vi har gjort i vår studie av metabolske biomarkers på kreft i bukspyttkjertelen. En annen begrensning av denne protokollen er manglende evne til å stoppe prosedyren. Når euthanization er aktivert, må prosedyren utføres i sin helhet.
Avgjørende skritt i protokollen
Kjøring av stimulans testen ved pinching bakben labben av musen er avgjørende for å sikre at musen får Human behandling. Hvis musen ikke reagerer på denne stimulans, kan deretter prosedyren gjennomføres som planlagt. Imidlertid skal bør musen vise distressed svar som følge av stimulans testen, musen returneres til anestesi chamber for en ekstra periode av tid og testen gjentatt til en reaksjon på stimulans testen ikke er observert12.
Tilsvarende den terminal hjertet punktering etterfulgt av fjerning av tilkoblinger til hjertet straks den terminal blodprøve samles som en sekundær metode for euthanasia sikrer musa Human offer. For å sikre en effektiv blod tegne, bør forskeren bruke en pumping bevegelse med sprøyten som ligner på pulsen musen, slik at maksimal innsamling av blod for analyse.
Endringer og feilsøking
Bytte organer fra formalin til 70% etanol løsninger forbereder organer for innebygging prosessen kreves for histologiske analyse. Ulike løsninger kan være nødvendig bør forskeren velge å utføre andre eksperimenter med organer. Før analyse er det viktig å begrense alle potensielle tiner organer lagret i-80 ° C-fryser for å bevare det organ integritet.
Bruk av Ptf1agrobunn / +; LSL-KrasG12D / + musemodell reduserer forekomsten av ikke-bukspyttkjertelen primære svulster og sykdommer13. Dermed er det viktig å merke seg eventuelle uregelmessigheter som tilsynelatende bukspyttkjertelen eller andre organer i disseksjon og samling av vevsprøver for analyse.
Framtidige applikasjoner
Høsting av musen bukspyttkjertelen av disseksjon gjør at flere typer analyse utføres på samme prøven. De mest populære av disse inkluderer, men er ikke begrenset til, fluorescens mikroskopi, hematoxylin og eosin histology, immunohistochemistry, massespektrometri og kjernefysiske magnetisk resonans spektroskopi6,7, 14 , 15. sykdommer som diabetes, pankreatitt og bukspyttkjertelkreft kan studeres ved hjelp av metodene ovenfor16.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne ikke avsløre.
Acknowledgments
MAK anerkjenner støtte for dette arbeidet fra National Institutes of Health National Cancer Institute støtte nummer - 1R15CA152985-01A1. Dette prosjektet har også blitt støttet av Miami universitetet Undergraduate Research Award programmet, Miami University doktorgrad-lavere mulighetene for stipendprogram og Miami University sommer Scholars Program.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Glass Jar | Corning | 3140-150 | The glass jar used in the video has been discontinued. This is its replacement. |
| Lid of Glass Jar | Corning | 9985-150 | The glass jar lid used in the video has been discontinued. This is its replacement. |
| 15 mL Falcon Tubes | Fisher Scientific | 339650 | |
| Surgical Scissors | Fisher Scientific | 9201 | |
| Squeeze bottle | Fisher Scientific | 03-409-10DD | |
| 100% Ethanol | Fisher Scientific | 22-032-103 | |
| Formalin | Fisher Scientific | 245-684 | |
| Foam Boards | Therapak | 562908 | |
| Forceps | Fisher Scientific | 200205SHN | |
| 1 mL 21G Syringes | BD Biosciences | 309624 | |
| 50 mL Falcon Tubes | Fisher Scientific | 339652 | |
| 2.0 mL Microcentrifuge Tubes | Fisher Scientific | 02-681-258 | |
| Surgical Pads | Fisher Scientific | S67011 | |
| T-Pins Length: 2" | Advance Store Products | X32T-05 | |
| Sterilizing Wipes | Professional Disposables International Inc. | Q85084 | |
| Sharps Container | Fisher Scientific | 14-827-122 | |
| Analytical Balance | Marshall Scientific | ME-AE200 | |
| 4L Dewar | Taylor-Wharton | 4LD | |
| Shallow Wide Mouth Dewar | Fisher Scientific | F3087-V | |
| Floating Microtube Rack | VWR | 60986-100 | |
| Cryogenic Vial 1.2 mL, Sterile | Fisher Scientific | 10-500-25 | |
| Isothesia (Isoflurane) | Henry Schein Animal Health | 050033 | |
| Liquid Nitrogen | Wright Brothers | NIT-60-XX | |
| Mouse Kras Strain | The Jackson Laboratory | OO8179 | |
| Mouse Cre Strain | MMRRC | OOO435-UNC |
References
- Fesinmeyer, M. D., Austin, M. A., Li, C. I., De Roos, A. J., Bowen, D. J. Differences in Survival by Histologic Type of Pancreatic Cancer. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 14 (7), 1766-1773 (2005).
- Jackson-Grusby, L. Modeling cancer in mice. Oncogene. 21 (35), 5504-5514 (2002).
- Heid, I., et al. Early requirement of Rac1 in a mouse model of pancreatic cancer. Gastroenterology. 141 (2), 719-730 (2011).
- Hingorani, S. R., et al. Preinvasive and invasive ductal pancreatic cancer and its early detection in the mouse. Cancer cell. 4 (6), 437-450 (2003).
- Shi, C., et al. KRAS2 Mutations in Human Pancreatic Acinar-Ductal Metaplastic Lesions Are Limited to Those with PanIN Implications for the Human Pancreatic Cancer Cell of Origin. Mol Cancer Res. 7 (2), 230-236 (2009).
- LaConti, J. J., et al. Distinct serum metabolomics profiles associated with malignant progression in the KrasG12D mouse model of pancreatic ductal adenocarcinoma. BMC Genomics. 16 (1), 1-10 (2015).
- Ludwig, M. R., et al. Surveying the serologic proteome in a tissue-specific kras(G12D) knockin mouse model of pancreatic cancer. Proteomics. 16 (3), 516-531 (2016).
- Taylor, D. K., Mook, D. M. Isoflurane Waste Anesthetic Gas Concentrations Associated with the Open-Drop Method. J Am Assoc Lab Anim Sci. 48 (1), 61-64 (2009).
- Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. Blood sample collection in small laboratory animals. J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).
- Li, D. S., Yuan, Y. H., Tu, H. J., Liang, Q. L., Dai, L. J. A protocol for islet isolation from mouse pancreas. Nature Protocols. 4 (11), 1649-1652 (2009).
- Auer, H., et al. The effects of frozen tissue storage conditions on the integrity of RNA and protein. Biotech Histochem. 89 (7), 518-528 (2014).
- Ma, J., Leung, L. S. Limbic System Participates in Mediating the Effects of General Anesthetics. Neuropsychopharmacology. 31, 1177-1192 (2006).
- Ijichi, H., et al. Aggressive pancreatic ductal adenocarcinoma in mice caused by pancreas-specific blockade of transforming growth factor-β signaling in cooperation with active Kras expression. Genes Dev. 20 (22), 3147-3160 (2006).
- Abiatari, I., et al. Moesin-dependent cytoskeleton remodelling is associated with an anaplastic phenotype of pancreatic cancer. J Cell Mol Med. 14 (5), 1166-1179 (2010).
- Goodpaster, A. M., Romick-Rosendale, L. E., Kennedy, M. A. a Statistical significance analysis of nuclear magnetic resonance-based metabonomics data. Analytical biochemistry. 401, 134-143 (2010).
- Yadav, D., et al. Idiopathic Tumefactive Chronic Pancreatitis: Clinical Profile, Histology, and Natural History After Resection. Clin Gastroenterol Hepatol. 1 (2), 129-135 (2003).
