इस प्रोटोकॉल में ड्रॉसोफिला सीखने और मेमोरी परख का वर्णन किया गया है जिसे प्रणोदन कंडीशनिंग कहा जाता है। यह क्लासिक परख एक गैर-ग्रहणशील महिला द्वारा यौन अस्वीकृति के बाद पुरुष प्रेमी व्यवहार को कम करने पर आधारित है। व्यवहारिक प्लास्टिक की इस प्राकृतिक रूप का इस्तेमाल सीखने, अल्पकालिक स्मृति और दीर्घकालिक स्मृति परीक्षण के लिए किया जा सकता है।
फोल मक्खी, ड्रोसोफिला मेलेनोगास्टर जैसे मॉडल जीवों में सरल व्यवहारिक assays के उपयोग के माध्यम से सीखने और स्मृति अंतर्निहित आणविक तंत्र में कई अंतर्दृष्टि को स्पष्ट किया गया है। मानव संज्ञानात्मक विकार, जैसे कि बौद्धिक विकलांगता (आईडी) और आत्मकेंद्रित के साथ जुड़े जीन में उत्परिवर्तन से उत्पन्न संज्ञानात्मक घाटे के मूलभूत न्यूरोबोलॉजी को समझने के लिए ड्रोसोफिला उपयोगी है। यह काम ड्रॉसोफिला में एक क्लासिक प्रतिमान का उपयोग करके प्रशिक्षण सीखने और मेमोरी के लिए एक पद्धति का वर्णन करता है जिसे प्रणोदन कंडीशनिंग के रूप में जाना जाता है। पुरुष आसानी से पहचाने जाने योग्य व्यवहारों की एक विशिष्ट पद्धति का उपयोग करते हुए न्यायालय की महिलाएं मंगाते हैं परिष्कृत मादाएं संभोग के लिए ग्रहणशील नहीं होती हैं और पुरुष के संभोग प्रयासों को अस्वीकार कर देगी। इस अस्वीकृति के जवाब में पुरुष मर्द उनके प्रेमी व्यवहार को कम करते हैं। प्रेमालाप व्यवहार में इस सीखा कमी को समय-समय पर मापा जाता है, जो शिक्षा और स्मृति के एक संकेतक के रूप में काम करता है। मूल अंकइस परख का शास्त्रीय आउटपुट प्रेसीडेंट इंडेक्स (सीआई) है, जिसे एक पुरुष 10 मिनट के अंतराल के दौरान नौकरी के समय के प्रतिशत के रूप में परिभाषित करता है। लर्निंग इंडेक्स (एलआई) सीआई की रिश्तेदार कमी मक्खियों में है, जो कि पिछली सोशल मुठभेड़ों के साथ भोले मक्खियों की तुलना में किसी प्रत्याशी महिला के सामने खुलती हैं। जीनोटाइप के बीच लिसा की सांख्यिकीय तुलना के लिए, बूटस्ट्रैपिंग के साथ एक यादृच्छिक परीक्षण प्रयोग किया जाता है। यह वर्णन करने के लिए कि कैसे सीखने और स्मृति से संबंधित जीन की भूमिका को संबोधित करने के लिए परख का उपयोग किया जा सकता है, डायहाइड्रोक्सियासेट फॉस्फेट एसीएलट्रांसफेरस ( धाप-एट ) के पैन-न्यूरोनल पछाड़ना को यहां वर्णित किया गया था। धोप-एट , ग्लिसरोनफोस्फेट ओ-एसीएलट्रांसफेरस ( जीएनपीटी ) के मानव यांत्रिकी , rhizomelic chondrodysplasia punctata प्रकार 2 में शामिल है, एक आटोसॉमल-अपस्मात्मक सिंड्रोम जिसमें गंभीर आईडी होती है। कोर्टशिप कंडीशनिंग परख का उपयोग करना, यह निर्धारित किया गया था कि ढाप-ए पर दीर्घकालिक स्मृति के लिए आवश्यक है, लेकिन इसके लिए नहींअल्पकालिक स्मृति। यह परिणाम अंतर्निहित आणविक तंत्र की आगे की जांच के लिए आधार के रूप में कार्य करता है।
सीखने और स्मृति के अंतर्गत आणविक तंत्र कई प्रजातियों में संरक्षित होते हैं। घ्राण सीखने और स्मृति में दोषों के लिए ड्रोसोफिला मेलेनोगास्टर उत्परिवर्ती लाइनों की अग्रणी काम स्क्रीनिंग सीखने और स्मृति 1 की प्रक्रियाओं में प्रमुख आणविक अंतर्दृष्टि प्रदान की गई है। इन अध्ययनों ने सीखने और मेमोरी में शामिल पहले जीनों में से कुछ की पहचान की है, जैसे कि रूटाबागा 2 , स्ममेसियस 3 , और डून 4 , चक्रीय एडेनोसिन मोनोफोस्फेट (सीएएमपी) सिग्नलिंग 5 के लिए एक महत्वपूर्ण भूमिका का खुलासा करते हुए।
मेमोरी म्यूटेंट के लिए प्रारंभिक आनुवंशिक स्क्रीन मुख्य रूप से घृणास्पद कंडीशनिंग के जरिये आयोजित किए गए थे। हालांकि, सीखने और स्मृति के अन्य रूपों को मापने के कई तरीके समय के साथ उभरे हैं। सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किए जाने वाले सीखने और स्मृति मानदंडों में से एक और यहाँ वर्णित परख को सी के नाम से जाना जाता हैभारतीयता कंडीशनिंग, जिसे पहली बार सीगल और हॉल 6 द्वारा वर्णित किया गया था और बाद में 7 , 8 , 9 के कई अन्य शोध समूहों द्वारा परिष्कृत किया गया था। कंट्रीशिप कंडीशनिंग एक विशिष्ट फेरोमोन, सीआईएस- वेजेनएसी एसीटेट (सीवीए) की उपस्थिति पर निर्भर होती है, जो मादा पेट पर होती है, जो संभोग के दौरान पुरुष द्वारा जमा होती है। मादा पेट पर सीवीए संवेदना स्वाभाविक रूप से प्रेमालाप व्यवहार को कम करती है, और जब महिला द्वारा अस्वीकृति के कार्य के साथ युग्मित किया जाता है, तो पुरुष प्रणोदन कम करने पर सीवीए का प्रभाव नाटकीय रूप से बढ़ा है। इस परख के पुरुष मक्खियों की प्रतिक्रिया आसानी से अपने अलग प्रत्याहार व्यवहार को देखकर मात्रा निर्धारित की जा सकती है, जो पंथ को हिलाने, मारने और हिलाने, मारना, और संभ्रम 10 ( चित्रा 1 ए ) का प्रयास करने की दिशा में और उसके पीछे माहिर होने और उसके पीछे की जाने वाली विशेषता है। पुरुष मक्खियों को सीखते हैं ग्रहणशील कुंवारी और गैर-ग्रहणशील महिलाएं 11 के बीच , और यौन अस्वीकार किए जाने के बाद, वे 9 दिनों तक 8 दिनों तक गैर-अनुज्ञेय महिलाओं के प्रति प्रारम्भिक व्यवहार कम दिखाते हैं। इस प्राकृतिक व्यवहार का इस्तेमाल सीखने, अल्पावधि मेमोरी (एसटीएम), और दीर्घावधि स्मृति (एलटीएम) 8 , 9 , 12 के आधार पर तंत्र को स्पष्ट करने के लिए किया जा सकता है। लर्निंग को परिभाषित किया जाता है कि प्रशिक्षण अवधि के दौरान प्रसूति व्यवहार में तत्काल कटौती होती है और इसे अक्सर तत्काल स्मरण मेमोरी के रूप में संदर्भित किया जाता है, मादा 6 , 8 के एक्सपोजर के बाद 0 – 30 मिनट मापा जाता है। एसटीएम को प्रशिक्षण के बाद 30 मिनट और 1 घंटे के बीच मापा जाता है, जबकि एलटीएम को अक्सर 8 ( चित्रा 1 बी ) प्रशिक्षण के बाद 24 घंटे मापा जाता है। एसटीएम 1-एच प्रशिक्षण अवधि का उपयोग करके प्रेरित किया जा सकता है, लेकिन यह केवल 2-3 घंटे तक रहता हैS = "xref"> 6 , 8 अधिकतर सीखने के सिद्धांतों में, एलटीएम केवल दोहराए जाने वाले प्रशिक्षण के स्थान से प्रेरित हो सकते हैं। मैकब्राइड एट अल (1 999) 8 ने दिखाया कि एक घंटे के प्रशिक्षण सत्र से प्रेरित 2-3 एच के विपरीत, तीन स्थान, 1-एच प्रशिक्षण सत्र, 9 दिनों तक के लिए प्रेमालाप स्मृति कायम करने के लिए पर्याप्त थे। मैकब्राइड एट अल 8 ने यह भी दिखाया कि एक 5-एच प्रशिक्षण सत्र ने 9 दिन तक एक समान एलटीएम प्रतिक्रिया का उत्पादन किया। इस 5-एच अवधि के दौरान मक्खियों ने निरंतर अदालत नहीं किया है, एक प्रशिक्षण सत्र में एलटीएम को प्रेरित करने के लिए अपने स्वयं के प्रशिक्षण के लिए अपने स्वयं के प्रशिक्षण का निर्माण किया। यह एक व्यावहारिक दृष्टिकोण से बहुत महत्वपूर्ण है, जिसकी आसानी से इस परख का उपयोग एलटीएम की जांच के लिए किया जा सकता है। वर्तमान प्रोटोकॉल मुख्य रूप से एलटीएम 11 , 12 के लिए 7-एच के एकल प्रशिक्षण सत्र का उपयोग करते हैं। कई अध्ययनों ने अलग-अलग जांच की हैउत्परिवर्ती परिस्थितियां जो प्रेम प्राप्ति सीखने के विभिन्न पहलुओं में विशिष्ट दोष हैं। उदाहरण के लिए, मशरूम का शरीर पृथककरण एसटीएम और एलटीएम को प्रभावित करता है, लेकिन 8 सीखना नहीं है एमानेसियस जीन में उत्परिवर्तन, जिसे पहली घंटिका कंडीशनिंग 3 का उपयोग करके स्मृति के एक विशिष्ट नियामक के रूप में परिभाषित किया गया था, एसटीएम पर असर पड़ता है लेकिन सीखने में नहीं 6 । अनुवाद नियामक orb2 (oo18 आरएनए-बाध्यकारी (orb) सीपीईबी 2 सबफ़ैमिली) और ईसीडीसोन का विशेष रूप से प्रभावी एलटीएम 9 , 13 प्रभाव का विघटन। इस प्रकार, प्रेरणशक्ति कंडीशनिंग सीखने और स्मृति के विभिन्न चरणों में अंतर्निहित तंत्रों काटना करने के लिए एक उपयोगी प्रतिमान है।
यह काम एक अनुकूलित प्रयोगात्मक सेटअप को दर्शाता है जो कि प्रणोदन कंडीशनिंग के अपेक्षाकृत उच्च-थ्रुथपुट परीक्षण की अनुमति देता है। इसके अलावा, यह एक सांख्यिकीय विश्लेषण स्क्रिप्ट का वर्णन करता है और परख के महत्वपूर्ण कारकों पर चर्चा करता है। यह sh हैयहां ही है कि ड्रोसोफिला जीन डाइहाइड्रोक्सिसेट फोसफाइट एसीएलट्रांसफेरेज ( धाप-एट ) एलटीएम के लिए न्यूरॉन्स में आवश्यक है, लेकिन एसटीएम के लिए नहीं। इस जीन के मानव यास्वाणु , ग्लिसरीफॉस्फेट ओ-एसीएलट्रांसफेरस ( जीएनपीएटी ), रेजोमोमेलिक चॉन्ड्रोडाइस्प्लेसिया पेक्टाटा टाइप 2 14 में बदल जाता है , एक बौद्धिक विकलांगता, बरामदगी और कई अन्य नैदानिक लक्षणों की विशेषता आटोसॉमल-अपस्मिक विकार 15 । इस संदर्भ में, प्रारम्भिकरण कंडीशनिंग को प्रयोगशालाओं के अध्ययन के लिए एक आधार प्रदान करने, सीखने और स्मृति में मानव रोग जीनों की भूमिका को कार्यात्मक रूप से मान्य करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।
ड्रॉसोफिला में सीखने और मेमोरी के विश्लेषण के लिए प्रीपेडशिप कंडीशनिंग परख क्लासिक प्रतिमान है। यहां प्रस्तुत प्रोटोकॉल 6 6 , 7 , 8 , 9 के अनुसार वर्णित सामान्य पद्धति का अनुसरण करता है , लेकिन व्यावहारिक दिशानिर्देश, विशेष उपकरण, और एक डेटा विश्लेषण स्क्रिप्ट 9 , 12 को यादृच्छिक परीक्षण के लिए अद्वितीय पहलुओं को शामिल करता है। इस प्रोटोकॉल का प्रयोग करना, पुरुषों के एकत्र और प्रशिक्षित करने के लिए 96-अच्छी तरह से फ्लैट-नीचे वाले ब्लॉकों ( चित्रा 2 ए ) का उपयोग करके समानांतर में बड़ी संख्या में मक्खियों का विश्लेषण करना संभव है। ब्लॉकों को पीसीआर चिपकने वाली फिल्म के साथ बंद कर दिया जाता है, जिससे मक्खियों को आसानी से सुलभ हो जाता है जब आवश्यक हो। इसके अतिरिक्त, यहां वर्णित अनूठी प्रेमालाप कक्षों को लगभग दो-आयामी अंतरिक्ष में 18 पुरुष और महिला जोड़े की एक साथ युग्मन के लिए अनुमति दी जाती है।वीडियो विश्लेषण के लिए इष्टतम कस्टम-डिज़ाइन किए गए प्रियाराधन कक्षों का उपयोग करना आसान है, और एक इमारत योजना प्रदान की गई है ( फ़ाइल एस 1 , चित्रा 2 डी )। वीडियो प्रोटोकॉल के अधिग्रहण के लिए परीक्षण विषयों को इकट्ठा करने के लिए उपयोग की जाने वाली संस्कृतियों की स्थापना से यह प्रोटोकॉल लगभग 20 दिन ( तालिका 1 ) लेता है। वीडियो डेटा के विश्लेषण के लिए अतिरिक्त समय की आवश्यकता है। हमारे अनुभव में, एसटीएम परख बहुत ही मजबूत है। एलटीएम परख भी काफी मजबूत है, लेकिन यह पर्यावरणीय परिवर्तनों को उलझाने के प्रति अधिक संवेदनशील है और इसलिए गुरु के लिए अधिक मुश्किल हो सकता है।
पशु व्यवहार काफी चर हो सकता है इसलिए, इस भिन्नता को कम करने के लिए प्रोटोकॉल में महत्वपूर्ण कदम देखभाल के साथ किए जाने चाहिए। सबसे पहले, आकांक्षी ( चित्रा 2 बी ) का कोमल उपयोग तनाव को कम करेगा जो किसी न किसी प्रकार से निपटने या बहुत दृढ़ता से उड़ाने से लगाया जा सकता है। व्यक्ति को स्थानांतरित करने का सुझाव दिया गया तरीकाएस्पिरेटर से मक्खियों को नकारात्मक जियोटेक्सिस का उपयोग करना है जैसे-जैसे मक्खियों को चलना पड़ता है, वैसे ही एस्पिरेटर की टिप को आसानी से इंगित कर सकते हैं; मक्खी टिप तक पहुंचने से पहले, एक कोमल झटका उड़ने के लिए पर्याप्त है। इसके अतिरिक्त, पुरुषों को परीक्षण से पहले प्रलय कक्षों में जाने के लिए, एक झटका अक्सर आवश्यक नहीं है
एक और महत्वपूर्ण कदम है पुरुष परीक्षण विषयों का संग्रह और उत्पादन। जब सभी बहुत युवा और सामाजिक रूप से भोले होते हैं, तब सभी पुरुषों को इकट्ठा किया जाना चाहिए। यह एक्लूसन के चरम समय (चरण 5.2) के दौरान लगातार संग्रह द्वारा प्राप्त किया जा सकता है। अगर इस तंग समय सीमा में पुरुषों को एकत्रित नहीं किया जाता है, तो वे शुरुआती सामाजिक संपर्क कर सकते हैं, जिसके परिणामस्वरूप सीआई में खराब सीख या उच्च परिवर्तनशीलता हो सकती है। पुरुष परीक्षण विषयों का एक और पहलू जिनका मूल्यांकन किया जाना चाहिए, आनुवांशिक पृष्ठभूमि है विभिन्न आनुवंशिक पृष्ठभूमि अलग-अलग स्तरों के भोले प्रेम प्रसंग प्रदर्शित करेंगे और यह सामान्य गतिविधि या गतिरोध की क्षमता में भिन्न हो सकती है। जब कंपाकई जीनोटाइप करें, आनुवंशिक पृष्ठभूमि के संबंध में सावधानी बरतने के लिए इन भ्रामक कारकों से बचने के लिए लाइट स्कोर को प्रभावित कर सकते हैं इसके अतिरिक्त, सीआई डेटा का वितरण सावधानीपूर्वक मूल्यांकन किया जाना चाहिए। सीआई डेटा जीनोटाइप या अन्य पर्यावरणीय कारकों के आधार पर पैरामीट्रिक और गैर-पैरामीट्रिक दोनों हो सकता है। कुछ मामलों में, अगर सीआई का वितरण नाटकीय तौर पर सामान्य वितरण से दूर हो जाता है, तो लीड्स की गणना के लिए माध्य की बजाय औसत सीआई का उपयोग करना बेहतर हो सकता है। हालांकि, हमारे अनुभव में, औसत या माध्य सीआई का उपयोग डेटा के सांख्यिकीय व्याख्या में कोई अंतर नहीं करता है, और माध्य सीआई का उपयोग साहित्य में आम बात है।
सफल प्रत्यायन कंडीशनिंग के लिए, प्रत्याशित महिलाओं द्वारा पुरुष प्रणोदन प्रयासों की सक्रिय अस्वीकृति प्रशिक्षण अवधि के दौरान महत्वपूर्ण है। यह सुनिश्चित करना महत्वपूर्ण है कि इस परख में प्रयुक्त महिलाएं कुशलतापूर्वक विकसित हुईं और ये हैंइस प्रकार संभोग की अनुमति नहीं है। चरण 4 में तैयार किए गए संभोग शीशियों में इस परिस्थिति की स्थापना की जाती है, जहां पुरुष और महिलाएं 4 दिन ( टेबल 1 ) के लिए इकट्ठी होती हैं। इसके बाद, वीडियो परीक्षण करने और प्रशिक्षण के दौरान पुरुष-महिला जोड़े को देखकर नियमित परीक्षण द्वारा संभोग किया जा सकता है। यदि संभोग होता है, तो कई उपाय हैं जो पूर्वस्थ महिलाओं की तैयारी के दौरान लिया जा सकता है। सबसे पहले, प्रत्याशित महिलाओं को इष्टतम प्रजनन शर्तों के तहत पेश किया जाना चाहिए। शीशियों को संभावित संभोग सतहों को बढ़ाने के लिए खमीर पेस्ट और एक जोड़ फिल्टर पेपर के साथ पूरक किया जा सकता है। यहां वर्णित शर्तों के तहत मक्खियों के ऊष्मायन से पहले की स्थिति में मजबूत महिलाओं का उत्पादन हुआ है, लेकिन यह अलग-अलग प्रयोगशालाओं में भिन्न हो सकता है और विभिन्न आनुवांशिक नस्लों के इस्तेमाल से भिन्न हो सकता है। इसलिए, ऊष्मायन समय और परिस्थितियों को बदलकर पिछला महिलाओं की पीढ़ी को अनुकूलित करने के लिए आवश्यक हो सकता है।
प्रेमालाप व्यवहार का मात्राकरण हैइस प्रोटोकॉल में एक और महत्वपूर्ण कदम यह विशिष्ट सॉफ्टवेयर प्रोग्राम 9 या मैन्युअल रूप से स्वचालित रूप से किया जा सकता है स्वचालित मात्रा का ठहराव तेजी से और, सिद्धांत रूप में, निष्पक्ष है। कई कार्यक्रम 21 , 22 , 23 प्रकाशित किए गए हैं; हालांकि, वे उपयोग करने के लिए सरल नहीं हैं, अक्सर विशेष वीडियो प्रारूपों और उन्नत कम्प्यूटेशनल कौशल की आवश्यकता होती है। मैनुअल मात्रा का ठहराव आसान और सटीक है, लेकिन यह बेहद श्रम गहन और व्यक्तिगत परिवर्तनशीलता और पूर्वाग्रह के अधीन है। यह ज़रूरी है कि यह प्रोटोकॉल वीडियो प्रारूपण की आवश्यकताओं को पूरा न करें जो सीआई के स्वचालित मात्रा का ठहराव के लिए आवश्यक हो। मैनुअल क्वांटिफिकेशन के लिए, किसी भी सरल वीडियो रिकॉर्डिंग डिवाइस का उपयोग करें, जिसमें प्रेरकता व्यवहार को सही ढंग से निरीक्षण करने के लिए पर्याप्त गुणवत्ता वाला वीडियो तैयार करने की क्षमता है। स्वचालित मात्रा का ठहराव के लिए, वहाँ अलग अलग संभावना होगीउपयोग किए गए सॉफ़्टवेयर के आधार पर आवश्यकताओं, और स्वचालित मात्रा का ठहराव वांछित होने पर प्रयोक्ताओं को यह अच्छी तरह से जांच करनी चाहिए।
मक्खियों के आनुवंशिक हेरफेर के लिए उपलब्ध व्यापक टूल के संयोजन में, प्रेरणशक्ति कंडीशनिंग परख एक मजबूत पढ़ाता प्रदान करता है जिसका इस्तेमाल आणविक तंत्रों और सीखने और स्मृति में शामिल न्यूरॉनल नेटवर्क काटना करने के लिए किया जा सकता है।
The authors have nothing to disclose.
हम ड्रोसोफिला नस्लों को प्रदान करने के लिए वियना ड्रोसोफिला संसाधन केंद्र को स्वीकार करते हैं। इसके अतिरिक्त, इस अध्ययन में ब्लूमिंगटन ड्रोसोफिला स्टॉक सेंटर (एनआईएच P40OD018537) से प्राप्त स्टॉक का उपयोग किया गया था। इस शोध को यूरोपीय संघ के एफपी 7 बड़े पैमाने पर एकीकृत नेटवर्क जेनकोडी के के के, एचवीबी और एएस और एनएसईआरसी डिस्कवरी और सीआईएचआर परियोजना अनुदानों द्वारा जेएमके को समर्थन प्रदान किया गया था।
P{KK101437}VIE-260B | VDRC | 101437 | Dhat-at-RNAi in 60100 background |
P{KK108109}VIE-260B | – | – | Control-RNAi in 60100 background (gift from K. Keleman) |
w+, UAS-dcr2/yhh;;elav-Gal4 (III) | – | – | panneuronal driver line |
Containers for plant tissue culture | VWR | 960177 | 175 mL plastic vials |
Folded filters | Whatman | 10311643 | Filter paper to enlarge area flies can pupate on |
Flat-bottom blocks (96-wells) | Qiagen | 19579 | Used for housing blocks |
MicroAmp Clear Adhesive Film | Applied Biosystems | 4306311 | PCR adhesive film as lid on flat-bottom blocks |
Razor blade | – | – | Any sharp will do |
Needle | – | – | 0.8 mm diameter |
Aspirator | – | – | Cut a 1mL pipet tip with scissors in order to have two pieces. The narrow tip of the pipettip is placed as fly entrance in a ~80 cm flexible hose. To prevent a fly from getting in the hose, a normal piece of cotton or small mesh gaze is placed in between the tip and the hose. The other half of the pipettip can be used as mouth piece at the end of the hose. |
Courtship chambers | – | – | file S1 can be opened with indicated CAD software |
Camcorder | Sony | – | camera specification: >4M pixels, full HD. For manual quantification, any simple video recording device has the potential to produce a video of sufficient quality to observe courtship behavior accurately. For automated quantification, there will likely be different requirements depending on the software to be used, and users should investigate this thoroughly if automated quantification is desired. |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
power food | |||
Agar | Sigma | A7002 | |
Yeast | Bruggeman | – | |
Yeast extract | MP biomedicals | 0210330391 | |
Peptone | Sigma | P6838 | |
Sucrose | Sigma | S9378 | |
Glucose | Sigma | G7021 | |
MgSO4 | Sigma | M2643 | |
CaCl2 | Merck | 1023780500 | |
Methylparabene (CAUTION) | Sigma | H5501 | |
Propionic acid (CAUTION) | Sigma | P1386 | |
Demineralized water | – | ||
Yeast paste | – | yeast grains and water mixture in a 1:1 ratio | |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
normal food | |||
Agar | MP biomedicals | 215017890 | |
Yeast | bruggeman | – | |
Corn flour | de Molen | – | |
Sugar | de Molen | – | |
Methylparabene (CAUTION) | Sigma | H5501 | |
Propionic acid (CAUTION) | Sigma | P1386 | |
Demineralized water | – |