Summary
상연 hepatectomy에 대 한 연결 간 파티션 및 포털 정 맥 결 찰을 사용 하 여 빠른 간 비 대를 유도 (ALPPS) 경계선 불과하다 간 종양의 절제에 대 한 제안 되었습니다. 이 모델 급속 한 비 대에 관여 하는 메커니즘을 명료 하 고 홍보 또는 중생의 가속을 차단 하는 약물의 테스트 있습니다.
Abstract
최근 임상 데이터 기본 및 전이성 간 종양에 대 한 적극적인 수술 접근을 지원합니다. 대 장 간 전이, 같은 일부 표시에 대 한 간 조직의 양을 남기고 후 간 절제술의 큰 resectability 또는 여러 간 종양의 주요 제한 요인이 되고있다. 기능 조직의 최소한의 금액은 게시물 hepatectomy의 심각한 합병증을 피하기 위해 필요 높은 사망률 및 사망에는 간 경화. 절제술 전에 예비 잔해의 간 성장 유도 간 수술, 중재 방사선에 의해 문맥 색전술의 형태로 또는 포털 정 맥 결 찰 절제술 전에 몇 주의 형태로 더 설립 되는. 최근에, 그것은 보이지 않고 간 재생 더 광범위 하 고 급속 한, parenchymal transection 포털 정 맥 결 찰 첫 번째 단계에서 그리고, 대기, (연결 간 파티션 두 번째 단계에서 수행 하는 절제의만 1 주일 후에 추가 될 때 그리고 무대 hepatectomy 위한 포털 정 맥 결 찰 = ALPPS). ALPPS는 급속 하 게 인기 끌고있다, 전세계 하지만 그것의 높은 수술 사망률에 대 한 비판을 받아왔다. 이 절차에 의해 유도 된 가속 및 광범위 한 성장의 메커니즘 잘 이해 하지는. 동물 모델에서 ALPPS 가속된 간 재생의 생리 및 분자 메커니즘을 탐구 개발 되었습니다. 이 프로토콜 가속된 중생의 기계적 탐사를 허용 하는 쥐 모델을 제공 합니다.
Introduction
간 잔해의 크기는 간 종양의 resectability를 제한합니다. 1 일반 때 보다 25% 간 조직에 남아, 환자는 전체 유기 체 ("너무 작은 크기 증후군")에 대 한 대사 기능 부족으로 인해 급성 간부에서 죽음의 위험이 증가 합니다. 2 이 게시물-hepatectomy 간부 간 절제 후 가장 치명적인 합병증 이다. 따라서 임상 포털 정 맥의 흐름을 조작 하 여 간 절제술 전에 간 재생을 유도 하려고 합니다. 3 그것은 발견, 포털 정 맥 차단 되 면 문맥 흐름과 나머지 부분 느린 속도로 성장 하기 시작 크기에 최대 60%까지 증가 수 있습니다. 4 수술 결 찰5 또는 중재 포털 정 맥 폐색 둘 다 임상으로 설립 되었습니다. 4 볼륨 및 간 기능에 증가 신뢰할 수 있는, 하지만 간 포털 폐색 되 면 약 1/5만의 성장 율 부분 hepatectomy 후 나머지 간의 성장에 비해. 6
간 절제 후 훨씬 더 빠른 속도로 재생할 수 있습니다 비록 간 성장 하는 데 필요한 시간 주에 달입니다. 따라서, 간 그것의 부분의 제거 후 정상 기능을 다시 성장 하는 유일한 기관입니다. 7 유사한 속도로 간 재생을 유도 하는 부분 hepactectomy 개발 되었다 후 외과 의사의 그룹에 의해 누가 폐색 사이 transection 추가 발견 하 고 간 비 가려진 부분 유도 간 새로운 절차. 간 절제 후 하지만 절제술 이전에와 같은 성장 속도로 비 대. 9 절차는 주 내에서 광범위 한, 주로 unresectable, 간 종양의 절제를 수 있는 미래에 간 주 남은 내 80%의 급속 한 비 대를 시작 합니다. 프로시저를 호출할 "상연 hepatectomy 위한 관련 시키기 간 파티션 및 포털 정 맥 결 찰 ALPPS =" 전 세계에 걸쳐 급속 하 게 인기가 되었다. 10 여러 보고서는 새로운 기술,11 동안 복잡 한 수술은 또한 그것의 높은 합병증 비율에 대 한 비판에 의해 달성 경계선 불과하다 간 종양의 resectability의 확장을 지원 합니다. 12 , 13
쥐의 개발 및도 느리고 급속 한 비 대의 대형 동물 모델에 약물 효과 테스트를 더 나은 조직학 특성화 및 메커니즘의 이해 하 고 2012 년에 ALPPS의 출간 이후 시도는 동물에서 간 조직의 다른 성장 속도입니다. 첫 번째 동물 모델 개발 쥐 모델이 이었습니다. 이 모델에서 오른쪽 중간 엽의 왼쪽된 부분 사이의 parenchymal transection 후 급속 한 비 대 오른쪽 중간 엽의 재생을 가속. 14 다른 모델 마우스의 뒷부분에 소개 되었다. 이 모델에서는 왼쪽된 측면 엽 절제 했다 그리고 문맥 분 지 왼쪽된 중간 엽 제외 하 고 간 모든 엽을 연결 했다. 15 한편 돼지에서 ALPPS의 대형 동물 모델가지고 설명 뿐만. 16
흐름 변경 및 문맥, 관류 및 간 조직에의 산소 압력 같은 생리 적 메커니즘의 연구에 대 한 쥐 모델 쥐에서 ALPPS의 모델에 우량 하다. Murine 모델 쥐의 또 다른 장점은 쥐 모델에는 왼쪽된 측면 엽, ALPPS의 간 절제술의 효과 오염 시킬 수 있습니다15 의 절제에 대 한 필요성입니다. 쥐 모델에 반대로 감소 하지 않습니다 간 세포 질량. 돼지 모델 성장 엽으로 바로 후부 엽을 사용 하지만 돼지 간은 매우 lobulated. 따라서, 그것은 바로 후부와 오른쪽 앞쪽 엽 사이 이미 얇은 조직 브리지 transection 비행기를 만들 어렵다. 대조적으로, 쥐에서 중간 엽 포털 정 맥 각에서 별도로 제공 하는 두 부분으로 구성 하 고 parenchymal transection 비행기 microsurgical 기술을 사용 하 여 두 사이 쉽게 만들 수 있습니다. 작은 동물 컴퓨터 단층 촬영 (CT) 또는 자석 공명 영상 (MRI)의 유용성 수 혼자 포털 정 맥 결 찰 및 포털 정 맥 결 찰 및 추가 transection 사이 체적 증가의 매우 정확한 정량화는 중요 한 대 한 어떤 급속 한 간 비 대 모델의 유효성 검사.
여기에 제시 된 프로토콜 수술 기법 및 체적 검증 및 포털 정 맥 결 찰과 함께 transection, 포털 정 맥 결 찰 후 느리고 급속 한 비 대의 모델의 생리 적 특성에 사용 되는 절차에 설명 합니다. 쥐에서 각각.
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Protocol
이 프로토콜에서 모든 실험 취리히, 스위스의 구획의 수의 당국에 의해 승인 했다 (60/2014 번). 또한, 모든 실험 단계 수행한 동물 실험에 대 한 지침의 엄격한 준수 스위스 아카데미 의료 과학 (SAMS) 및 지침의는 연맹의 유럽 실험실 동물 과학 협회 (FELASA) .
1. 축산, 수술 실 장비 및 악기, 마 취
- 12/12 h 명암 주기에서 표준 병원 체 자유로운 조건에서 통풍이 연습장에 250-300 g의 무게로 남성 Wistar 쥐를 유지. 게 동물 무료로 음식과 물 22 ±의 온도에서 1 ° c.
- Isoflurane 30 5 vol %로 플러시는 상자에서 마 취 유도 s (그림 1A), 동물 깊은 마 취 될 때까지 3 vol %의 isoflurane 농도 옵니다. 발가락-핀치 반사에 의해 마 취의 수준을 확인 합니다.
- 0.02 mg/kg 매 12 h 48 h에 대 한 수술 후 단계에서 다음 과적 동안 buprenorphine (0.01 mg/kg)를 적용 하는 진통 피하 사용 하 여 제공 합니다.
- 동물 들은 자발적으로 호흡 가스 혼합물의 산소에서 1.0-2.5 집 %isoflurane 노출 작업 장소에 전송 (흐름: 600 mL/min).
- 동물의 눈을 닫고 연 고를 사용 하 여 눈을 보호 합니다. 5 mL 식 염 수를 피하 주사, 복 부의 각 측에 그것의 뒤에 0.1 mg 아트로핀.
- 수술 방에 미세 수술 현미경을 사용 하 여 수행 합니다.
- 쥐의 주 둥이 통해 푸시됩니다 라텍스 막 (그림 1B)의 구성 된 환기 마스크를 사용 하 여 휘발성 마 취 동물 유지. 수정 테이프 (그림 1B)와 사지.
- 옆 테이블에 살 균 방식에서 수술 악기 배치: 염 분 및 Betadine 젖은 스폰지 (그림 2A), 복 부 복 부 벽 및 칼가 위, Adson의 철회에 대 한 3-0 봉합 뿐만 아니라 견인 기 (그림 2B) 벽 집게, 바로 팁 microforceps 좋은 곡선 및 미리 결 찰 절차 (그림 2C)에 대 한 6-0 실크 넥타이 잘라.
- 간 실질의 transection 튀어나와 비 바이 폴라 microforceps를 사용 합니다. 복 벽과 피부 SH 1 바늘과 5-0 슨 (그림 2D) 3-0 비단 봉합을 사용 하 여 닫습니다. 바이 폴라 집게를 사용 하 여 hemostasis에 대 한.
2입니다. 수술의 시작
- 성 기에 있는 칼에서 작은 동물 머리 깎기로 동물의 복 부는 중간의 2 cm 지역 측면을 면도. 철저 하 게 머리를 제거 합니다.
- 3 번 betadine 젖은 스폰지와 함께이 지역 소독.
- 중간 절 개는 피부에 대 한 메스를 사용 하 여 수행 하 고 복 부를 수술가 위를 사용 하 여.
- 오른쪽 및 왼쪽된 복 부 벽과 3-0 비단 봉합 (그림 3A)와 칼을 철회.
- 위, 결 장 및 작은 창 자 작은 와이어 견인 기 (그림 3B)와 쥐의 hepatoduodenal 인 대에서 철회.
3. 포털 정 맥 결 찰 (PVL)
- 복 부와 작은 창 자 (그림 3B)의 측면 철회 하 여 포털 정 맥 및 그것의 분 지를 액세스할.
- microforceps와 함께 복을 따기와 천천히 medially 필 링 퉁 명 스럽게 포털 정 맥을 해 부.
-
다음 순서로 (그림 3C) 밖으로 문맥 분 지 부: (1) 바로 후부 지점, (2) 왼쪽 측면 왼쪽된 중간 지점, 그리고 (3) 꼬리가 지점.
- 첫째, 복 범위에서 직접 실행 하는 간 엽에 작은 동맥 가지를 찢 어 하지 않도록 작은, 너무 활기찬 움직임으로 복을 벗기다.
- 일단 주요 포털 정 맥 걸치기 느린 앞으로 밀기와 분기를 둘러싸 자 고 확산 움직임 그리고 풀 6-0 실크의 1 cm 조각 각각 포털 정 맥 분기 주위 넥타이 그것을 위하여.
-
바로 후부 엽 분 지 선 (그림 3C) 바로 후부 분기의 기술적인 어려움 바로 후부 엽 하 동맥 바로 후부 문맥 분 지에 걸쳐 실행 하는 사실에서 이루어져 있다.
- Cranially 곡선된 microforceps와 오른쪽 문맥 분 지를 폭로 복 함께 동맥을 당겨.
- 위하여 사전 커트로 바로 후부 엽 지점 6-0 실크 넥타이. 바로 후부 엽 포털 정 맥 출혈은 일단 눈에 띄게 창백한 돈다.
- 주위를 돌고 있는 동안 저항에 대 한 추진 하지 마십시오 동맥 또는 포털 정 맥을 찢 어 방지 하기 위해. 출혈의 경우 멸 균 면봉으로 1 분 이상에 대 한 압력을 적용 하 고 재평가. 출혈이 멈추지 않으면, 동물을 희생.
-
(내 인생을 사랑) 왼쪽된 측면 (LLL) 및 왼쪽된 중간 엽 선 분기. 이 가지는 하나의 일반적인 트렁크. (그림 3C)입니다. 왼쪽된 중간 엽 지점 문맥은 LLL의 실질 내에서 발생합니다.
- 내 인생 지점 사용 하 여 함께 사전 컷 6-0 실크 넥타이 LLL와도 사랑에 지도 문맥 선
- LLL로 이어지는 동맥에 부상을 방지 하 고 복 층 내에서 실행 하는 내 인생을 사랑. 로 복은 벗 겨 다시 신중 하 게, 그들은 그대로 있어. 내 인생 돌아 가시 사랑과 LLL 가지 출혈 되 면 창백.
-
꼬리가 엽 지점 (그림 3C) 선 쥐에 별도 꼬리가 돌출부 다소로 이어지는 문맥 걸립니다 주요 문맥에서 distally medially 주요 포털 정 맥에서 오른쪽 엽 분기의 이륙 (하지 엄격히 inferiorly 에서처럼 인간이 나 큰 동물).
- 그것을 밖으로 해 부하 고 복 플러스 담 즙 덕트와 동맥 주요 포털 정 맥에서 위로 들어올려 둘러싸 자.
- 옆에서 오는 곡선된 microforceps와 꼬리가 문맥 분기를 둘러싸십시오. 두 개의 꼬리가 돌출부 꼬리가 엽 지점 6-0 실크로 출혈은 일단 눈에 띄게 창백 하 고, 설정 합니다.
- 이 3 개의 문맥 분 지 매 이끌어 낸다 독점 문맥 관류의 오른쪽 중간 엽 (RML), 오른쪽과 왼쪽 중간 엽 간의 뚜렷한 경계선으로 표시 됩니다.
4. 포털 정 맥 결 찰 Transection (PVL + T)와
- RML 사이 분계선 따라 transection 수행 하 고 PVL (그림 3D) 후 내 인생을 사랑.
- 아주 좋은 신경외과 팁과 비 고정 양극은 집게를 사용 하 여 휴전선 1 mm 열화 스트립 만드는 간 조직 precauterize.
- 가 위를 사용 하 여 precauterized 조직을 조심 스럽게 잘라. transection의 깊이 제대로 평가 하기 매우 어렵습니다. 목표는 쥐에 intrahepatically 실행 가능한, 베 나 카바에 가까운 얻는 것입니다. 베 나 정 맥의 상해는 일반적으로 멈출 수 없어 광범위 한 출혈에 의해 동반 됩니다.
- 부상의 경우에 면봉을 사용 하 여 부드러운 압력을 적용 하지만 경우에 출혈이 멈추지 않으면 3-4 분 이내, 동물을 희생. 베 나 카바 봉합을 사용 하 여 복구 시도 일반적으로 성공 하지. 쥐 색 전 증, 때때로 발생 하 고 심장 마비로 이어질 수 있는 공기에 매우 민감합니다.
5. 자가 측정 문맥 압력 및 볼륨 흐름
- 압력 모니터 (그림 4A)에 연결 된 G30 바늘으로 직접 cannulation에 의해 문맥 압력을 평가 합니다.
- 2 m m 볼륨 흐름 프로브 옆으로 배치를 사용 하 여 포털 볼륨 흐름 2 분 이상 (그림 4B)의 직접 측정에 대 한 흐름 장치에 연결 합니다. 컴퓨터 디스플레이에 표시 된 대로 안정적인 측정 품질만 레코드 데이터입니다.
- 즉 3 개의 문맥 분 지 또는 3 개의 문맥 분 지 떨어져 매 플러스 parenchymal transection 수행의 매 해당 프로시저를 정의 하는 단계의 그룹 후 문맥 흐름과 압력을 별도로 평가 사랑과 RML 사이 내 인생.
6. 마지막 단계는 수술의
- 작은 창 닫기 전에 복 부 구멍에 제대로 배치는 다는 것을 확인 하십시오.
- SH-1 바늘으로 복 막과 복 벽 3-0 비단 봉합을 닫습니다.
- 마지막으로 슨 5-0를 사용 하 여 피부 봉합.
- 다시 피부를 소독.
- 적용 다시 5 mL 염 피하 피하 조직 측면으로는 복 부.
7. 간 Volumetry 쥐 작은 동물 CT를 사용 하 여
- 첫 번째 CT 영상 이전 24 시간 G26 정 맥 카 테 터를 통해 꼬리 정 맥에 대조 대리인의 200 μ를 삽입할.
- 마이크로 CT를 사용 하 여 쥐를 스캔. 전신 마 취를 유도 하는 유리 상자에 동물을 배치 (처음 30 5 vol %로 플러시 s, 뒤에 2-3 vol %의 isoflurane 농도 동물 마 취 튜브 시스템을 통해 스캔을 통해 그것을 유지). 최적의 이미지 품질에 대 한 동물의 호흡으로 CT 스캔을 동기화 합니다.
- 디지털 이미징 및 통신 의학 (DICOM) 파일에 내보내고 이미징 플랫폼 OsiriX 8.0 공개 소프트웨어를 사용 하 여 분석. "닫힌된 다각형" 도구를 사용 하 여 간에서 나노 대비의 radiodensitiy에 따라 엽 테두리를 그릴 관심 (ROI) 메뉴의 영역을 사용 하 여 부분 간 볼륨 (Schadde 외. 그림 2A 참조 계산을 17)
- 표준 모델에 간 3 일 이상 성장과 볼륨 증가 평가 하기 위해 CT 검사를 매일 얻을 수 있습니다.
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Representative Results
두 개의 다른 수술 절차 포털 정 맥 결 찰 (PVL) 및 PVL transection (PVL + T) 결과 분명히 다른 성장 속도 론. PVL 유도, 3 일 이내 중간 볼륨 증가 반면 PVL + T에 훨씬 더 큰 오른쪽 중간 엽 (RML) 수 본 (그림 5). 이 매일 volumetry에 의해 확인할 수 있습니다. RML의 볼륨 PVL, 3 일 이내 PVL + 토니17 세 배 하는 동안 대략 복식
포털 정 맥에서 흐름 측정 공개는 PLV에 또한 PVL + T 감소 흐름 영역에도 불구 하 고 안정적인 흐름 (Schadde 외. 그림 3A 참조 17). 이것은 전체 포털 혈 볼륨 "포털 hyperflow"를 그로 인하여 발생 하는 이전 간 실질의 약 26%를 통해 감독 이다.
포털 정 맥 내부의 압력 측정 5 mmHg에 PVL PVL + T (Schadde 외. 그림 3B 참조 9 mmHg의 의미 문맥 압력의 심각한 증가 보여 17). 이것은 가능성이 포털 hyperflow의 결과 이다. 간 조직의 볼륨 감소 하지 때문에 급성 포털 압력 증가, 혼자 transection 되지는지 않습니다. 17 반복 측정 표시는 압력 증가 24 h.17 안정적으로 유지
그림 1 : 마 취. (A) 동물에 대 한 마 취를 유도 하기 위해 isoflurane (5 vol %)와 상자 홍 조, 후 isoflurane이 증발된 (600 mL 산소/min) 전신 마 취의 유지 보수에 대 한. (B) 동물 운영 현미경 균 작동 표면에 집착 하는. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2 : 살 균 장비. (A) 노출 및 철회에 대 한 살 균 촉촉한 스폰지. (B) 미니-트랙터 고무 밴드에 연결 된 와이어. (C) 양극 겸 자, 포츠가 위; 곡선된 microforceps, 직선 microdissectors 문맥 분 지의 해 부에 사용 됩니다. (D) 더 큰가 위, 바늘 홀더 및 바늘와 폐쇄에 사용 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3 : 해 부. (A)는 복 부와는 칼의 면 중간 개복 술 후 3-0 비단 봉합 제거 됩니다. (B) 위장을 축소 하 여 크고 작은 창 자 쥐에 간 hilum gastroduodenal 인 옆으로 노출 될 수 있습니다. (C) 포털 정 맥 결 찰 (PVL), 오른쪽 엽 (1), 포털 정 맥 분기에서에서 왼쪽된 측면 엽 (2)와 (3) 꼬리가 돌출부는 6-0 실크 넥타이 (왼쪽)와 출혈. PVL transection (PVL + T)와,에서 또한, 오른쪽 중간 엽 (RML)과 왼쪽된 중간 엽 (내 인생을 사랑) 사이 허 혈 성 분계선은 transected (오른쪽). (D) 사진은 사랑 사이 뚜렷한 경계선 내 인생과 RML (왼쪽)입니다. 이 라인은 transection PVL + T (오른쪽) 대 한 바이 폴라 microforceps를 사용 하 여에 대 한 따 랐 다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4 : 문맥 압력 및 볼륨 흐름의 자가 측정. (A) 절차 동안, 바늘 압력 트랜스듀서 노출된 포털 정 맥에 삽입 됩니다. (B)는 2 m m 볼륨 흐름 조사는 주요 포털 정 맥에서 볼륨 흐름을 측정 하는 데 사용 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 5 : 간 Volumetry. PVL 혼자 후 보다 PVL + T 후 크기에 더 간 증가 합니다. 디지털 이미징 및 통신 의학 (DICOM) 파일 쥐 마이크로 CT 스캐너로 획득 하 고 이미징 플랫폼 공개를 사용 하 여 수행 하는 일일 volumetry를 그림입니다. 차이점은 축 이미지에 분명, 양적 volumetry 이전 보고서17의 경우, 수행 보여준다 성장 속도에 큰 차이. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
이 프로토콜 PVL + T, 그 대략 PVL 혼자에 비해 3 일 이내 볼륨 증가 두 배로 의해 유도 된 그것의 급속 한 비 대와 ALPPS의 동물 모델을 제공 합니다. 17 오른쪽 중간 간 엽 중간 간 엽 그림 1 에서 같이 왼쪽 및 오른쪽 측면, 두 개의 별도 포털 혈관에 의해 공급 한 연속 parenchymal 질량은 때문에 성장에 대 한 모델 간 엽으로 사용 되는 최근 게시 된 작품입니다. 17 다른 보고서에 비해, 모델 몇 가지 장점을 제공 합니다. 해부학, 최고의 중간 엽의 선택 있도록 transection 및 그로 인하여 부수적인 흐름의 말살 한 연속 parenchymal 질량으로 인간의 간을 나타냅니다. 왼쪽된 중간 엽을 포털 정 맥의 분기 (내 인생을 사랑) 내 왼쪽된 측면 엽 (LLL) 수 사랑의 결합된 결 찰에 대 한 내 인생과 LLL.
다양 한 쥐 왔다 고 ALPPS에 대 한 하나의 murine 모델 개발 및 설명. 18 많은 쥐 모델19,20 와 설명만 마우스 모델15 간 대량 감소를 요구 한다. 대량 감소 실행할 수 없는 향상 된 비 독립적으로. 이것은 달리 우리의17 과 유사한 쥐 모델 이다. 14 , 21 , 22 , 23 murine 모델의 장점은 유전자 변형된 동물의 사용을 수 있습니다. 또는 이러한 작은 동물 모델, 돼지 모델 개발 되었습니다,16 인간 처럼 비슷한 수술 기법을 사용 하 고 비슷한 성장 속도 결과로. 이 아마 가장 비슷한 인간의 수술 사실에도 불구 하 고 작은 동물 모델 여전히 그들은 빠르고 매우 중요 있을 수 있습니다, 쉽게 수행, 그룹 마다 동물의 많은 수를 허용 하 고 더 적은 비용.
순수, 쥐 모델 마우스 모델 보다는 더 쉽게 혈액 흐름, 담보 및 산소의 연구를 허용합니다. 이 연구는 간, 즉 CT volumetry 볼륨 변화를 평가 하기 위해 인 간에 있는 임상 사용 하는 동일한 방법론을 사용 하는 첫번째. 일부 다른 연구, 제어 그룹 (예: ALPPS24의 돼지 모델에서) 포함 하지 아직 가정 ALPPS 성장 속도 론, 달리 우리 PVL PVL + T와 비교 하 여 비 대를 확인. PVL 아래는 RML 3 일 이내에 두 배로, 하는 동안 PVL + T 비를 크게 증가 합니다. 추가 transection 3 일 후 비 대의이 가속 정확 하 게 반영 46% 볼륨 증가 PVE와 10 일 후에 첫 번째 큰 ALLPS 레지스트리 보고서 ALPPS 86% 증가 대 한 대규모 메타 분석에 보고는 인간의 조건 202 환자. 25 두 쥐 절차 PVL + T 및 인간 ALPPS 두 프로시저 형식에 대 한 그들의 각각 시간 프레임에 달성 하는 비의 금액을 두 번.
이 프로토콜 내에서 중요 한 단계 PVL에 PVL + t. 중간 엽의 transection 문맥 분 지의 해 부를 포함 문맥 분 지의 해 부 기간 동안 전체 hepatoduodenal 인 대를 취재 하는 복 막의 얇은 층을 방해 하 고 저항에 대 한 악기를 밀어 하지 중요 하다. 문맥에서 실수로 눈물 면봉,를 사용 하 여 압력에 의해 중지 될 수 있습니다 하지만 돌이킬 수 고는 동물의 희생을 요구 수 있습니다. 일반적으로, 그것은 강조 되어야 한다, 때문에이 연구 결과 및 원인 동물의 고통을 불필요 한 변경할 수 있습니다 동물 이상의 동물의 혈액 양의 약된 10%의 혈액 손실 로부터 고통 연구에서 제외 될 해야 합니다.
중간 엽의 transection 괜 찮 실버 양극 겸 자 고 물 떨어지는, 한가 위를 사용 하 여 cauterized 조직의 간단한 절단 뒤 충분 일 분을 사용 하 여 간 조직의 주의 열화에 의해 얻을 수 있습니다. transection 베 나 정 맥 출혈과 베 나 정 맥으로 공기 색 전 증을 피하기 위해 설치류에서 간 내부 실행 발생 하기 전에 중지 해야 지. 폐 순환으로 공기의 항목 쥐에 갑자기 심장 마비로 이끌어 낸다.
이 프로토콜의 문제 해결, 동물에 대 한 생리 적인 스트레스를 증가 하는 모든 수정 포함 될 수 있습니다 oversedation, 저체온증에 의해 유도 된 저 혈압 등 혈액 손실 및 너무 긴 수술 시간 증가. 이 프로토콜은 잘 쥐 같은 다른 설치류 종에 대 한 수정할 수 있습니다. 우리는 성공적으로 C57BL/6 쥐 (데이터 표시 되지 않음)에서이 프로토콜에서 설명 하는 기법을 수행 했습니다.
이 프로토콜의 한계는 느린 비; 대 급속 한의 메커니즘을 연구 하는이 프로토콜의 독점 사용 따라서 "ALPPS" 절차, hypertrophied 간 제외한 모든 deportalized 간 조직의 절제의 두 번째 단계는이 프로토콜에서 설명 되지 않은. 그러나이 절제 쉽게 얻을 수 있습니다 다음 봉합 결 찰 그리고는 위를 사용 하 여 간 엽의 제거를 사용 하 여 설치류에서 간 절제술의 표준 기술.
전반적으로,이 현재 모델 실험을 elucidating 급속 한 간 비 대의 메커니즘 및 약물과 개입의 테스트를 수 있습니다. 이 모델을 사용 하 여, 최근에 보였다는 빠른 있으 나 비는 RML의 hypoxia prolyl hydroxylase 억제제, 내 플레이 신호는 hypoxia 제안에 중요 한 역할을 사용 하 여 신호와 함께에서 포털 정 맥 결 찰에 의해 또한 유도 될 수 있다는 간 성장 속도 변조 테스트를 마약 처럼 prolyl hydroxylase 억제제 간 재생을 가속 수 있습니다 추가 해야 합니다. 17 , 26 이 모델의 미래 응용 전통과 소설 화학요법 에이전트의 역할을 테스트 수와 간 재생의 가속에 그들의 효과 추가 해명 수 있습니다 있을 수 있습니다. 또한 예 사용 하 여 indocyanine 녹색 (ICG) 또는 간담 iminodiacetic 산 성 (히) scintigraphy 쥐에 궁극적으로 느리고 급격 한 체적 변화의 맥락에 넣어 해야 합니다 때문에 간 기능을 공부 하는 기회를 제공 하는 모델 간 기능부터 기능 간 재생 간 볼륨 보다 더 중요 하다. 27 , 28 ICG29 와 히 다 scintigraphy30,31 ALPPS 환자의 평가 지금까지 거쳤습니다 회고전 코 호트 연구에서 하지만이 아직도 질문에 응답 하기 위한 매우 중요 한 도구 있을 수 있습니다. 볼륨 또는 기능 변경 여부는 비슷하거나 빠른 간 재생에 비슷하지입니다.
요약, 우리는 신속 하 고 느린 간 재생, 재생 간 수술에서 미래 연구 수 있도록 잘 분류 하 고 표준화 모델 제시.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
저자 아무 승인 있다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Isoflurane, 250 mL bottles | Attane, Piramal, Mumbai, India | LDNI 22098 | Standard vet. equipment |
| Tec-3 Isofluorane Vaporizer | Ohmeda, GE-Healthcare, Chicago, IL | not available anymore | Standard vet. equipment |
| Buprenorphine (Temgesic) | Indivior, Baar, Switzerland | 7680419310353 | GTIN-number |
| Vitamine A ointment | Bausch&Lomp, Zug, Switzerland | 7680223980247 | GTIN-number |
| Atropine sulfate 0.5 mg/mL | Sintetica SA, Mendrisio, Switzerland | 7680565330045 | GTIN-number |
| Microsurgery microscope | Olympus, Tokio, Japan | SZX10 | Standard vet. equipment |
| Betadine | Mundipharma, Basel, Switzerland | 7680342821377 | GTIN-number |
| Sponges | Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany | NK83.1 | Mini-sponges |
| Abdominal Wall retractors | N/A | N/A | Self-made from paper clips and Q-Tips |
| 3-0 silk | Ethicon, Sommerville, NJ | K872H | Standard surgical |
| Scissors | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 503371 | Standard microsurgical |
| Adson forceps | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 501244-G | Standard microsurgical |
| Fine tips microforceps | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 501976 | Tips need to be polished regularly |
| Curved fine tips microforceps | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 504513 | Essential to go around the portal vein branches |
| 6-0 LOOK black braided silk | Surgical Specalities Corporation, Wyomissing, PA | SP114 | Spool, precut prior to the procedure |
| 2-0 silk sutures | Ethicon, Sommerville, NJ | K833 | Standard surgical |
| 5-0 maxon sutures | Covidien, Dublin, Ireland | 6608-21 | Standard surgical |
| Bipolar microforceps | Sutter, Freiburg, Germany | 780148SGS | Essential for parenchymal transection |
| Q-tips small | Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany | EH11.1 | Standard surgical |
| Q-tips big | Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany | XL54.1 | Standard surgical |
| G30 needle | Terumo, Tokyo, Japan | NN-3013R | Standard anesthesia equipment |
| 2 mm volume flow probe | Transonic Systems, Ithaca, NY | MA-2PS | Smallest available probe for HAT-311 flow meter |
| Transonic flow meter | Transonic Systems, Ithaca, NY | HAT-311 Transsonic flow QC meter | One of the first generation flow flow meters for surgery |
| ExiTron nano 12,000 | Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Germany | 130-095-698 | Nanomoloecular contrast medium that opacifies liver and spleen |
| G26 intravenous catheter | Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ | 391349 | Standard anesthesia equipment |
| Quantum FX MicroCT | Perkin Elmer, Waltham, MA | N/A | Standard small animal CT scanner at the institute of physiology, University of Zürich |
| OsiriX 8.0 | Pixmeo Sarl, Geneva, Switzerland | N/A | Public domain software : www.pixmeo.com |
References
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