Summary
Karaciğer bölümü ilişkilendirme ve Portal ven ligasyonu için aşamalı hepatectomy kullanarak hızlı karaciğer hipertrofisi inducing (ALPPS) sınır çizgisi çevrimsel karaciğer tümörü rezeksiyonu için teklif edildi. Bu model mekanizmalar hızlı hipertrofisi yer aydınlatmak ve teşvik veya rejenerasyon ivme engellemek uyuşturucu testi sağlar.
Abstract
Son klinik veri birincil ve metastatik karaciğer tümörleri için saldırgan bir cerrahi yaklaşım destekler. Karaciğer rezeksiyonu büyük resectability veya birden fazla karaciğer tümörleri ana sınırlayıcı bir faktör haline gelmiştir sonra kolorektal karaciğer metastaz gibi bazı göstergeler için karaciğer dokusu miktarını geride bıraktı. Fonksiyonel doku az sayıda yazı hepatectomy ciddi komplikasyonu önlemek için gerekli olan yüksek morbidite ve mortalite Karaciğer yetmezliği. Karaciğer rezeksiyonu önce olası kalan büyümenin inducing daha karaciğer cerrahisi, ya portal ven embolizasyon Girişimsel radyologlar tarafından şeklinde veya portal ven ligasyonu rezeksiyon önce birkaç hafta şeklinde kurulan haline. Son zamanlarda, bu portal ven ligasyonu ilk aşamada ve sonra bekleyen, ikinci aşamada (ilişkilendirme karaciğer bölümü yapılan rezeksiyon sadece bir hafta sonra parenkima transeksiyon eklendiğinde karaciğer rejenerasyonu daha kapsamlı ve hızlı, gösterildi ve Portal ven ligasyonu aşamalı hepatectomy için ALPPS =). ALPPS hızlı bir şekilde dünya çapında popüler oldu ama onun yüksek perioperatif mortalite için eleştirdi. Bu yordam tarafından indüklenen hızlandırılmış ve geniş büyüme mekanizması iyi anlaşılmış değil. Hayvan modelleri için fizyolojik ve moleküler mekanizmaları ALPPS hızlandırılmış karaciğer rejenerasyonu için keşfetmek için geliştirilmiştir. Bu iletişim kuralı hızlandırılmış rejenerasyon mekanik keşif izin veren bir fare modeli sunar.
Introduction
Karaciğer tümörleri resectability karaciğer kalıntısı boyutunu sınırlar. 1 . genel, ne zaman daha az %25 karaciğer dokusu geride, hasta için ("boyutu sendromu için çok küçük") tüm organizmanın metabolik fonksiyon eksikliği nedeniyle akut Karaciğer yetmezliği nedeniyle ölüm riski. 2 bu yazı-hepatectomy Karaciğer yetmezliği olan karaciğer rezeksiyonundan sonra en yıkıcı komplikasyon. Bu nedenle klinisyenler karaciğer rezeksiyonu önce karaciğer rejenerasyonu portal ven akışının manipüle ederek ikna etmek için çalıştık. 3 bir kez portal ven tıkandı, portal ven akışı ile kalan kısmını yavaş bir hızla büyümeye başlar ve böylece boyutu % 60 kadar artırabilir, bulundu. 4 cerrahi tüp ligasyonu5 veya Girişimsel portal ven oklüzyonu hem de klinik olarak kurulmuştur. 4 birim ve karaciğer fonksiyon artış güvenilirdir ama karaciğer portal tıkanıklığı yalnızca yaklaşık beşte biri sonra büyüme hızının kısmi hepatectomy sonra kalan karaciğer büyümesine göre. 6
Karaciğer büyümesi gereken süreyi hafta ay olmasına rağmen karaciğer rezeksiyonu sonra çok daha hızlı bir oranda yeniden oluşturabilirsiniz. Bu nedenle, karaciğer normal işlevine bir parçası çıkarıldıktan sonra büyüyen tek organdır. 7 kısmi hepactectomy geliştirilmiştir sonra cerrahlar bir grup tarafından kim transeksiyon tehlikesi arasında ekleyen bulundu ve karaciğer karaciğer tıkandı parçası indükler gibi benzer bir hızda karaciğer rejenerasyonu inducing bir roman yordamı aynı büyüme oranı karaciğer rezeksiyonu sonra ancak önce rezeksiyon pituiter. 9 geniş, öncelikle unresectable, karaciğer tümörü rezeksiyonu bir hafta içinde sağlayan bir hafta içinde belgili tanımlık gelecek karaciğer kalan % 80'lik hızlı hipertrofisi yordamı başlatır. Yordamı çağrıldı "Associating karaciğer bölümü ve Portal ven ligasyonu aşamalı hepatectomy için ALPPS =" ve dünya çapında hızla popüler oldu. 10 birden çok rapor sınırda çevrimsel karaciğer tümörleri yeni teknik, karmaşık cerrahi işlem aynı zamanda yüksek komplikasyon oranını için eleştirildi iken11 tarafından elde resectability bir genişleme desteklenen. 12 , 13
Bir kemirgen gelişimi ve aynı zamanda yavaş ve hızlı hipertrofisi büyük hayvan modelleri 2012 daha iyi histolojik karakterizasyonu ve mekanizmaları anlayış izin vermek için ve ilaç etkileri üzerinde test etmek için ALPPS yayın beri çalışılmıştır hayvanlarda karaciğer dokusunun farklı büyüme oranları. Geliştirilen ilk hayvan model bir fare modeli oldu. Bu modelde, sağ ve sol kısmında medyan LOB arasında parenkima transeksiyon sonra hızlı hipertrofisi yenilenme şu medyan LOB hız. 14 farklı bir modeli daha sonra fareyi kullanılmaya başlandı. Bu modelde sol yan lob rezeke ve her LOB sol medyan LOB dışında karaciğer portal ven dallarına bağlıydı. 15 bu arada, büyük hayvan modellerinde ALPPS domuzlar de tarif edilmistir. 16
Akışı değişiklikleri ve portal ven, perfüzyon ve karaciğer doku oksijenasyonu basınç gibi fizyolojik mekanizmaları çalışma için fare modeli ALPPS modeli farelerde üstündür. Başka bir fareyi fare modeli üzerinde sıçan modelinde sol yan lob, karaciğer rezeksiyonu etkileri bu ALPPS ile kontamine15 rezeksiyon için hiçbir zorunluluk olduğunu avantajdır. Fare modeli buna ek olarak karaciğer azaltmaz hücre kütlesi. Bir domuz modeli sağ posterior LOB büyüyen LOB kullanır, ancak bir domuz ciğeriyle son derece loblu. Bu nedenle, bir transeksiyon uçak sağ arka ve sağ Ön lob arasında zaten ince bir doku köprü oluşturmak zordur. Buna ek olarak, medyan LOB Sıçanlarda bir portal ven tarafından her ayrı olarak sağlanan iki bölümden oluşur ve parenkimal transeksiyon uçağa kolayca mikrocerrahi yöntemlerle ikisi arasında oluşturulabilir. Önemli olduğu çok kesin miktar hacimsel büyüme portal ven ligasyonu yalnız ve portal ven ligasyonu ve eklendi transeksiyon arasında küçük hayvan Bilgisayarlı Tomografi (BT) ve/veya mıknatıs rezonans görüntüleme (MRG) kullanılabilirliği sağlar herhangi bir hızlı karaciğer hipertrofisi model doğrulamak için.
Burada sunulan Protokolü Cerrahi teknik ve hacimsel doğrulaması ve portal ven ligasyonu ve portal ven ligasyonu ile transeksiyon sonra yavaş ve hızlı hipertrofisi modelinin fizyolojik karakterizasyonu için kullanılan yordamlar açıklar, sırasıyla, sıçanlar.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Bu iletişim kuralı tüm deneyler Canton Zürih, İsviçre'nin hayvan hastalıklarıyla ilgili yetkililer tarafından kabul edildi (sayı 60/2014). Ayrıca, tüm deneysel adımlar hayvanlar ile deneyler yönergeler ile sıkı bir uyum Swiss Akademisi, Tıp Bilimleri (SAMS) ve yönergeleri, Federasyon, Avrupa laboratuvar hayvan bilim dernekler (FELASA) tarafından gerçekleştirilen .
1. hayvan yetiştirme, ameliyathane cihazları ve aletleri, anestezi
- Erkek Wistar rats bir ağırlığı 250-300 gr olan patojen ücretsiz standart koşullarda havalandırılmış kafeslerde 12/12 h açık/koyu döngüsünde tutun. Hayvanlar yiyecek ve su bir ortam sıcaklığı 22 ±, ücretsiz erişim sağlar 1 ° C.
- Anestezi nerede isoflurane temizlenen 5 vol % 30 ile bir kutu içinde neden s (şekil 1A), derin anestezi altında hayvandır kadar 3 vol % bir isoflurane konsantrasyon tarafından takip ettim. Anestezi düzeyini toe-çimdik refleks tarafından onaylayın.
- Subkutan kullanarak analjezi buprenorfin (0.01 mg/kg) 0,02 mg/kg tarafından her 12 h 48 h için ameliyat sonrası aşamasında takip cerrahi müdahale sırasında uygulanan sağlar.
- Nerede olduklarını kendiliğinden 1.0-2,5 vol % isoflurane oksijen gaz karışımı maruz nefes çalışma yere hayvan transferi (akış: 600 mL/dk).
- Hayvan gözlerini kapat ve gözlerini korumak için bir merhem kullanın. Subkutan 5 mL serum enjekte, karın, her tarafında yarısı 0.1 mg atropin tarafından izledi.
- Mikrocerrahi odasında cerrahi mikroskop kullanarak ameliyatı.
- Hayvan hangi aracılığıyla sıçan burun itilir bir lateks membran (şekil 1B), oluşan bir havalandırma maske kullanarak uçucu anestezi altında tutun. Ekstremitelerde bandı (şekil 1B) ile düzeltmek.
- Cerrahi aletler steril moda bir sehpa üzerinde düzenleme: süngerler (şekil 2A), karın serum ve betadin batırılmış yanı sıra 3-0 dikişler karın duvarı ve xiphoid, makas, Adson geri çekilmesi için ekartör (şekil 2B) duvar Forseps, ince ipuçları microforceps düz ve kavisli ve 6-0 ipek ligasyonu yordam (şekil 2C) için önceden bağını.
- Bipolar microforceps sigara yapışmasını karaciğer parankimi transeksiyon için kullanın. SH-1 iğne ve 5-0 Maxon (şekil 2B) ile 3-0 ipek sütür kullanarak cilt karın duvarı kapatın. İki kutuplu bir forseps hemostaz için kullanın.
2. cerrahi başlangıcı
- Genital xiphoid bir küçük hayvan saç kesme makinesi hayvanla karın orta hat bir 2 cm alan lateral ile tıraş. İyice tüylerden.
- Bu alan 3 kez betadin batırılmış sünger ile dezenfekte.
- Bir neşter cilt için kullanarak bir ensizyon gerçekleştirmek ve sonra karın açmak için Cerrahi makas kullanın.
- Sağ ve sol karın duvarı ve xiphoid 3-0 ipek sütür (şekil 3A) ile geri çek.
- Mide, kolon ve ince bağırsak kendi kendine yapılan küçük tel ekartör (şekil 3B) fareyle hepatoduodenal bağ üzerinden geri çek.
3. Portal ven ligasyonu (PVL)
- Portal ven ve dalları, mide ve ince bağırsak (şekil 3B) yanal retraksiyon tarafından erişim.
- Portal ven açık açık karın zarını microforceps ile tespit ve yavaş yavaş da peeling incelemek.
-
Portal ven dal (şekil 3 c) dışarı aşağıdaki sırada teşrih: (1) sağ posterior dal (2) birlikte, yanal ve sol medyan şube yaptı ve (3) kaudat dal.
- İlk olarak, küçük arter dalları için doğrudan Periton kapsamı altında çalıştırmak karaciğer lobları yırtılma önlemek için küçük, çok enerjik hamle ile karın zarını akasındaki.
- Bir kez ana portal ven soyulduğuna, dalları yavaş ileri iterek ile sarmak ve Yayilim hareketleri ve o zaman çekme 1 cm biteviye-in 6-0 ipek ilgili portal ven dal kravat ve bu ligate.
-
Şu posterior LOB şube ligate. (Şekil 3 c) Şu arka şube teknik zorluk arter sağ posterior LOB ile sağ posterior portal ven dal üzerinde çalıştığı gerçeği oluşur.
- Arter ile birlikte cranially karın zarını doğru portal ven dal eğri microforceps ile ortaya çıkarmak için çekin.
- Şu posterior LOB şube ön kesim ile 6-0 ipek kravat ligate. Portal ven bakmaksızın bir kez sağ posterior LOB gözle görülür soluk döner.
- Çember sırasında direnç karşı iterek önlemek arter veya portal ven yırtılması önlemek için. Kanama, durumunda bir steril pamuklu bez ile en az bir dakika için basınç uygulayın ve sonra yeniden değerlendirmek. Kanama durmuyor, hayvan kurban.
-
(Aşk hayatımı) sol lateral (LLL) ve sol medyan LOB ligate dalları. Bu dallardan bir ortak gövde var. (Şekil 3 c). Portal ven LLL parankimi içinde sol medyan LOB şube kaynaklanmaktadır.
- Portal ven hem LLL ve aşk da birlikte ön kesim 6-0 ipek kravat kullanarak benim hayat şube yol ligate.
- LLL için önde gelen damar yaralanmaları önlemek ve Periton katman içinde çalışan hayatımı seviyorum. Karın zarını geri dikkatle soyulmuş olduğu sürece, onlar bozulmamış kalmak. Dalları bakmaksızın bir kez hayatımı açmak gözle görülür LLL ve sevgi soluk.
-
Kaudat LOB şube (şekil 3 c) ligate. Biraz ayrı kaudat LOB Sıçanlarda lider portal ven ana portal ven klemple ve hemen sağ LOB şube kalkış ana portal ven üzerinden için kapalı alır (değil kesinlikle kasılır insanlar veya daha büyük hayvanlar gibi).
- Bunu incelemek ve karın zarını artı safra kanalını ve damar ana portal ven üzerinden yukarı kaldırarak sarmak.
- Kaudat portal ven dal yan yana gelen bir eğri microforceps ile sarmak. Kaudat LOB şube ile 6-0 ipek bakmaksızın kez iki kaudat LOB gözle görülür soluk açmak.
- Bu üç portal ven şube bağlama özel portal ven perfüzyon sağ ve sol medyan LOB arasında bir farklı sınır çizgisi tarafından görülebilir şu medyan LOB (RML), yol açar.
4. Portal ven ligasyonu ile transeksiyon (PVL + T)
- Transeksiyon RML arasında sınır hattı boyunca gerçekleştirmek ve PVL (şekil 3D) sonra hayatımı seviyorum.
- Manik depresif gümüş forseps sigara yapışmasını çok ince bir Nöroşirürji ipucu ile sınır hattı boyunca bir 1-mm Koterizasyon şerit oluşturma karaciğer dokusu precauterize için kullanın.
- Dikkatle precauterized doku kesmek için makas kullanın. Oldukça düzgün transeksiyon derinliği değerlendirmek zordur. Amaç vena intrahepatically çalışan fareler cava gibi mümkün olduğunca yakın elde etmektir. Vena kava yaralanması geniş kanama tarafından hangi genellikle değil durdurulabilir eşlik ediyor.
- Yaralanma durumunda hafif basınç bir pamuklu çubukla kullanarak geçerli, ancak 3-4 dk içinde kanama durmuyor, hayvan kurban. Vena kava dikiş kullanarak tamir girişimleri genellikle başarısız oldu. Fareler hava embolisi, zaman zaman ortaya çıkan ve kalp durması için yol çok duyarlıdır.
5. Portal ven basınç ve hacim akışının intraoperatif ölçüm
- Portal ven basınç basınç Monitörü (şekil 4A) bağlı G30 iğne ile doğrudan cannulation tarafından değerlendirmek.
- Portal ses akışı üzerinde 2 dk (şekil 4B) doğrudan ölçümü için akış aygıtına bağlı 2 mm ses akışı sonda yan yana yerleştirilen kullanın. Yalnızca kayıt verileri makine ekranda gösterildiği gibi istikrarlı ölçüm kalitesi ile.
- Portal ven akış ve basınç sonra üç portal ven şube veya üç portal ven dal uzakta-in bağlama ile birlikte parenkima transeksiyon gerçekleştirme uzakta-in bağlama Yani ilgili yordamı tanımlamak adımları grubu ayrı ayrı değerlendirmek RML ve aşk arasındaki hayatım.
6. son adımlar cerrahi
- İnce bağırsak kapanmadan önce karın boşluğunda düzgün yerleştirildiğinden emin olun.
- Karın zarını ve 3-0 ipek sütür ile karın duvarı SH-1 iğne ile kapatın.
- Son olarak deri Maxon 5-0 kullanarak dikiş.
- Cilt yeniden dezenfekte edin.
- Tekrar 5 mL serum fizyolojik subkutan karında subkutan doku lateral uygulanır.
7. karaciğer Volumetry küçük hayvan CT kullanarak Sıçanlarda
- 24 saat önce ilk CT görüntüleme kontrast ajanın 200 μL G26 intravenöz kateter aracılığıyla kuyruk damar içine enjekte.
- Mikro Tomografi fareler inceden inceye gözden geçirmek için kullanın. Hayvan genel anestezi ikna etmek için bir pleksiglas kutuya koyun (ilk 5 vol % 30 ile flush s, hayvan anestezi altında ve bir boru sistemi üzerinden tarama boyunca korumak kadar 2-3 vol % bir isoflurane konsantrasyon tarafından takip). En iyi resim kalitesi için CT taramasına hayvan solunum ile eşitleyin.
- Dijital görüntüleme ve iletişim Tıp (DICOM) dosyaları olarak dışa aktarmak ve kamuya açık platform OsiriX 8.0 Imaging kullanarak çözümleyebilirsiniz. Karaciğerde nanopartikül kontrast radiodensitiy temel LOB kenarlıkları çizmek ve faiz (ROI) menü bölgesi (Schadde vd. şekil 2A bakınız kısmi karaciğer birimleri hesaplamak için kullanın için "kapalı poligon" aracını kullanın 17)
- Standart modelde, 3 gün içinde büyümek ve günlük hacim artışı değerlendirmek için CT taramaları elde etmek için karaciğer izin.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
İki farklı cerrahi işlemler portal ven ligasyonu (PVL) ve PVL belirgin farklı büyüme Kinetik transeksiyon (PVL + T) sonucu ile. PVL orta hacim artışı 3 gün içinde PVL + T içinde daha büyük şu medyan LOB (RML) olabilir, ancak neden olmaktadır (şekil 5) gördüm. Bu günlük volumetry tarafından doğrulanabilir. PVL + T.17 ' üç katına ise RML hacmi yaklaşık PVL, 3 gün içinde iki katına
Portal ven ölçümlerde akışı ortaya PLV ve aynı zamanda PVL + T azaltılmış akışı alanında rağmen istikrarlı bir akış (bkz şekil 3A Schadde vd. 17). bu tüm portal kan ses akışını böylece "portal hyperflow" Neden önceki karaciğer parankimi yaklaşık % 26 yönlendirilir göstermektedir.
Basınç ölçüm portal ven içinde 5 mmHg demek portal ven baskısı 9 mmHg PVL ve PVL + T (Schadde vd. şekil 3B görmek için akut bir artış ortaya koymaktadır. 17). bu büyük olasılıkla portal hyperflow bir sonucudur. Karaciğer doku hacmi değil azalır bu yana transeksiyon yalnız akut portal basınç artışı, yol açmaz. Basınç artışı 24 h17 için kararlı kalır 17 tekrarlanan ölçümleri göster
Resim 1 : Anestezi. (A)anestezi hayvan için ikna etmek için isoflurane (5 vol %) ile bir kutu reçeteye göre sarf sonra isoflurane buharlaşmış (600 mL oksijen/dak) genel anestezi bakımı için olduğunu. (B) hayvanlar çalışma bir mikroskop altında steril bir çalışma yüzeyinde fiksasyonlu. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Resim 2 : Steril ekipmanları. (A)maruz kalma ve geri çekilmesi için steril nemli sünger. (B) Tel mini traktörler için lastik bantlar bağlı. (C) Bipolar forseps, Potts makas; eğri microforceps, düz microdissectors portal ven dal diseksiyon için kullanılır. (D) daha büyük makas, iğne sahipleri ve iğneler açılış ve kapanış için kullanılır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3 : Diseksiyon. (A)karın ve xiphoid tarafında 3-0 ipek sütür ile orta hat laparotomi sonra geri çekildi. (B) mide tarafından geri çeker, küçük ve büyük bağırsak yanal gastroduodenal bağ fareler ve karaciğer hilus maruz kalabilirler. (C) portal ven ligasyonu (PVL), sağ LOB (1), portal ven dal içinde sol yan lob (2) ve kaudat LOB (3) ile 6-0 ipek bağları (solda) tane. Transeksiyon (PVL + T) ile PVL içinde Ayrıca, şu medyan LOB (RML) ve sol medyan LOB (hayatımı seviyorum) arasında iskemik sınır hattı (sağda) kopuk. (D) fotoğraf aşk arasında farklı sınır hattı benim hayat ve RML (solda) gösterir. Bu satır için iki kutuplu bir microforceps (sağda) PVL + T için kullanarak transeksiyon takip eder. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4 : İntraoperatif ölçüm Portal ven basınç ve hacim akışının. (A)işlem sırasında maruz portal ven bir iğne basınç detektörler eklenir. (B) The 2 mm ses akışı sonda ses akışları ana portal ven ölçmek için kullanılır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5 : Karaciğer Volumetry. Daha fazla bilgi için boyutu PVL + T PVL yalnız sonra sonra karaciğer artar. Şekil dijital görüntüleme ve iletişim bir fare mikro CT tarayıcı ile elde edilen ve kamuya açık platform Imaging kullanarak Tıp (DICOM) dosyalarında üzerinde gerçekleştirilen günlük volumetry gösterir. Fark Aksiyal görüntülerde açık olmakla birlikte, nicel volumetry bir önceki rapor17' de gerçekleştirilen büyüme Kinetik önemli bir fark gösterir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu iletişim kuralı ile kabaca birim artış PVL yalnız göre 3 gün içinde iki katına PVL + T, indüklenen onun hızlı hipertrofisi ALPPS bir hayvan modeli sunar. 17 orta hepatik LOB şekil 1 ' de gösterildiği gibi iki ayrı portal damarları, solunda ve onun sağ tarafında tarafından sağlanan bir bitişik parenkima kütle olduğundan hepatik sağ orta LOB büyüyen karaciğer modeli LOB kullanılan bir son zamanlarda yayımlanmış çalışma. 17 diğer raporlara göre model bazı avantajlar sunuyor. Anatomik olarak, orta LOB en iyi seçimi insan karaciğer transeksiyon ve böylece obliterasyonu teminat akışı sağlayan bir bitişik parenkima kitle olarak temsil eder. Portal ven sol medyan LOB için dallanma (hayatımı seviyorum) içinde sol yan lob (LLL) aşk bir kombine ligasyonu için benim hayat ve LLL sağlar.
Ve ALPPS için bir fare modeli geliştirilmiş ve açıklanan çeşitli fare olmuştur. 18 birçok fare modelleri19,20 ve açıklanan sadece fare modeli15 karaciğer bir kitle azaltma gerektirir. Kitle azaltma gelişmiş hipertrofisi bağımsız olarak tetikleyebilir. Bu bizim17 ve benzer fare modelleri aksine. 14 , 21 , 22 , 23 fare bir modelin avantajı genetiği değiştirilmiş hayvanlar kullanımı olabilir. Alternatif olarak bu küçük hayvan modelleri için bir domuz modeli geliştirilmiştir, insanlarda olduğu gibi benzer bir cerrahi teknikle ve benzer büyüme oranları kaynaklanan16 . Bu muhtemelen en çok bir insan cerrahi işlem benzeyen Aslında rağmen küçük hayvan modelleri hala daha hızlı olduğu gibi çok önemli olabilir, Hayvanlar grubu başına daha fazla sayıda gerçekleştirmek daha kolay ve daha az maliyetlidir.
Fizyolojik olarak, fare modeli daha kolay bir fare modeli, kan akımı, collateralization ve oksijenlenme sağlar. Klinik olarak insanlarda karaciğer, yani CT volumetry cilt değişiklikleri değerlendirmek için kullanılan aynı yöntemi kullanan ilk çalışmadır. Kontrol grubu (örneğin ALPPS24, domuz modeli) içerir daha ALPPS büyüme Kinetik varsayalım değil, bazı diğer çalışmaları aksine, biz PVL PVL + T ile karşılaştırarak hipertrofisi geçerliliği. PVL altında RML içinde 3 gün içinde iki katına iken PVL + T hipertrofisi önemli ölçüde artırır. Bu ivme hipertrofisi eklenen transeksiyon tarafından 3 gün sonra tam olarak nerede bir % 46'sı birim artış büyük bir meta-analizde PVE ve ALPPS % 86 artış ilk büyük ALLPS kayıt defteri raporunda 10 gün sonra rapor edildi insan durumunun aynalar 202 hastaların. 25 her iki fare yordamı PVL + T ve insan ALPPS onların anılan sıraya göre zaman dilimlerini iki yordam türleri için elde hipertrofisi miktarını iki katına.
Bu iletişim kuralı içinde kritik adımlar PVL ve medyan LOB PVL + T. transeksiyon portal ven dal diseksiyon dahil Portal ven dal diseksiyon sırasında tüm hepatoduodenal bağ kapsayan karın zarını ince tabaka bozmaya ve aletleri direnci karşı itmek için değil önemlidir. Portal ven yanlışlıkla bir gözyaşı pamuk bezlerden yalnız, kullanarak basınç tarafından durdurulmuş olabilir ama onarılamaz olabilir ve hayvan kurban gerektirir. Genel olarak, It gerekir vurguladı, bir daha bir tahmini % 10'dan hayvanın kan hacmi, kan kaybından acı hayvanlar hariç tutulamaz bu çalışma, bu çalışma sonuçları ve neden hayvanların acı gereksiz değiştirebilir beri.
Medyan LOB transeksiyon dikkatli Koterizasyon karaciğer dokusunun ince gümüş iki kutuplu forseps ve damlama, bir makas kullanarak cauterized doku basit kesme tarafından takip yeterli tuz kullanarak elde edilebilir. Transeksiyon kemirgen masif kanama ve hava embolisi vena kava içine önlemek için karaciğerde içinde çalışır vena kava karşılaşmadan önce durdurulması lazım. Pulmoner dolaşım içine hava giriş ani kalp durması Sıçanlarda yol açar.
Bu iletişim kuralı sorun giderme hayvanlar için fizyolojik stres artırmak için neden tüm değişiklikleri içerebilir oversedation, hipotermi, bağlı hipotansiyon gibi kan kaybı ve çok uzun operatif kez arttı. Bu iletişim kuralı, fareler gibi kemirgen diğer türler için de değiştirilebilir. Bu iletişim kuralı (veri gösterilmez) C57BL/6 farelerde açıklanan tekniği başarıyla gerçekleştirdik.
Hızlı yavaş hipertrofisi karşı mekanizmaları incelemek için bu iletişim kurallarını özel kullanımı bu protokol kısıtlamasıdır; Bu nedenle "ALPPS" yordamı, rezeksiyon hypertrophied karaciğer hariç tüm deportalized karaciğer dokusunun ikinci aşamasında bu protokol için açıklanmıyor. Bu rezeksiyon ancak kolayca standart tekniği kullanarak dikiş ligasyonu ve daha sonra bir makas kullanarak karaciğer lobları kaldırılması Rodents, karaciğer rezeksiyonu takiben elde edilebilir.
Genel olarak, bu geçerli modeli hızlı karaciğer hipertrofisi mekanizması elucidating, ilaçlar ve müdahaleler test deneyleri verir. Bu modeli kullanarak, bu son zamanlarda bu hızlı gösterildi RML hipertrofisi de indüklenen tarafından portal ven ligasyonu birlikte hipoksi ile sinyal prolyl hidroksilaz inhibitörleri, oyunumu sinyal Bu hipoksi düşündüren önemli bir rol kullanma karaciğer büyüme Kinetik modülasyon. Prolyl hidroksilaz inhibitörleri karaciğer rejenerasyonu hızlandırmak ve daha fazla olması gerektiği gibi ilaçlar test. 17 , 26 gelecekteki uygulamalar bu modelin geleneksel ve yeni ilaçlar aracıları rolünün test edilebilir ve karaciğer rejenerasyonu ivme üzerindeki etkileri daha fazla aydınlatılmamıştır olabilir. Model aynı zamanda karaciğer fonksiyon Sonuçta yavaş ve hızlı hacimsel değişiklikler bağlamında koymayı karşılaşacağından indocyanine yeşil (ICG) veya hepatobiliary iminodiacetic asit (HIDA) Sintigrafisi de, fareler gibi kullanarak eğitim için bir fırsat sunuyor Karaciğer fonksiyon beri fonksiyonel karaciğer rejenerasyonu karaciğer ses daha daha önemlidir. 27 , 28 Değerlendirmeler ICG29 ve HIDA Sintigrafisi30,31 ALPPS hastalarda defa yalnızca geriye dönük kohort çalışmaları test edilmiş, ancak bunlar yine de soruya cevap için çok önemli araçlar birim veya işlev değişiklikleri benzer veya farklı hızlı karaciğer rejenerasyonu içinde olup olmadığı.
Özetle, biz gelecek çalışmalar rejeneratif karaciğer cerrahisi sağlayacak hızlı ve yavaş karaciğer rejenerasyonu, iyi karakterize ve standart modeli mevcut.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Yazarlar hiçbir katkıda bulunanlar var.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Isoflurane, 250 mL bottles | Attane, Piramal, Mumbai, India | LDNI 22098 | Standard vet. equipment |
| Tec-3 Isofluorane Vaporizer | Ohmeda, GE-Healthcare, Chicago, IL | not available anymore | Standard vet. equipment |
| Buprenorphine (Temgesic) | Indivior, Baar, Switzerland | 7680419310353 | GTIN-number |
| Vitamine A ointment | Bausch&Lomp, Zug, Switzerland | 7680223980247 | GTIN-number |
| Atropine sulfate 0.5 mg/mL | Sintetica SA, Mendrisio, Switzerland | 7680565330045 | GTIN-number |
| Microsurgery microscope | Olympus, Tokio, Japan | SZX10 | Standard vet. equipment |
| Betadine | Mundipharma, Basel, Switzerland | 7680342821377 | GTIN-number |
| Sponges | Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany | NK83.1 | Mini-sponges |
| Abdominal Wall retractors | N/A | N/A | Self-made from paper clips and Q-Tips |
| 3-0 silk | Ethicon, Sommerville, NJ | K872H | Standard surgical |
| Scissors | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 503371 | Standard microsurgical |
| Adson forceps | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 501244-G | Standard microsurgical |
| Fine tips microforceps | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 501976 | Tips need to be polished regularly |
| Curved fine tips microforceps | World precision instruments (WPI), Sarasota, FL | 504513 | Essential to go around the portal vein branches |
| 6-0 LOOK black braided silk | Surgical Specalities Corporation, Wyomissing, PA | SP114 | Spool, precut prior to the procedure |
| 2-0 silk sutures | Ethicon, Sommerville, NJ | K833 | Standard surgical |
| 5-0 maxon sutures | Covidien, Dublin, Ireland | 6608-21 | Standard surgical |
| Bipolar microforceps | Sutter, Freiburg, Germany | 780148SGS | Essential for parenchymal transection |
| Q-tips small | Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany | EH11.1 | Standard surgical |
| Q-tips big | Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany | XL54.1 | Standard surgical |
| G30 needle | Terumo, Tokyo, Japan | NN-3013R | Standard anesthesia equipment |
| 2 mm volume flow probe | Transonic Systems, Ithaca, NY | MA-2PS | Smallest available probe for HAT-311 flow meter |
| Transonic flow meter | Transonic Systems, Ithaca, NY | HAT-311 Transsonic flow QC meter | One of the first generation flow flow meters for surgery |
| ExiTron nano 12,000 | Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Germany | 130-095-698 | Nanomoloecular contrast medium that opacifies liver and spleen |
| G26 intravenous catheter | Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ | 391349 | Standard anesthesia equipment |
| Quantum FX MicroCT | Perkin Elmer, Waltham, MA | N/A | Standard small animal CT scanner at the institute of physiology, University of Zürich |
| OsiriX 8.0 | Pixmeo Sarl, Geneva, Switzerland | N/A | Public domain software : www.pixmeo.com |
References
- She, W. H., Chok, K. Strategies to increase the resectability of hepatocellular carcinoma. World J Hepatol. 7 (18), 2147-2154 (2015).
- Vauthey, J. N., et al. Standardized measurement of the future liver remnant prior to extended liver resection: methodology and clinical associations. Surgery. 127 (5), 512-519 (2000).
- Kinoshita, H., et al. Preoperative portal vein embolization for hepatocellular carcinoma. World J Surg. 10 (5), 803-808 (1986).
- van Lienden, K. P., et al. Portal Vein Embolization Before Liver Resection: A Systematic Review. Cardiovasc Intervent Radiol. , (2012).
- Kianmanesh, R., et al. Right portal vein ligation: a new planned two-step all-surgical approach for complete resection of primary gastrointestinal tumors with multiple bilateral liver metastases. J Am Coll Surg. 197 (1), 164-170 (2003).
- Nadalin, S., et al. Volumetric and functional recovery of the liver after right hepatectomy for living donation. Liver Transpl. 10 (8), 1024-1029 (2004).
- Michalopoulos, G. K., DeFrances, M. C. Liver regeneration. Science. 276 (5309), 60-66 (1997).
- Fulop, A., et al. Alterations in hepatic lobar function in regenerating rat liver. J Surg Res. 197 (2), 307-317 (2015).
- Schnitzbauer, A. A., et al. Right portal vein ligation combined with in situ splitting induces rapid left lateral liver lobe hypertrophy enabling 2-staged extended right hepatic resection in small-for-size settings. Ann Surg. 255 (3), 405-414 (2012).
- de Santibanes, E., Clavien, P. A. Playing Play-Doh to prevent postoperative liver failure: the "ALPPS" approach. Ann Surg. 255 (3), 415-417 (2012).
- Schadde, E., et al. Monosegment ALPPS hepatectomy: extending resectability by rapid hypertrophy. Surgery. 157 (4), 676-689 (2015).
- Dokmak, S., Belghiti, J. Which limits to the "ALPPS" approach? Ann Surg. 256 (3), e6 (2012).
- Aloia, T. A., Vauthey, J. N. Associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy (ALPPS): what is gained and what is lost? Ann Surg. 256 (3), e9 (2012).
- Yao, L., et al. Establishment of a rat model of portal vein ligation combined with in situ splitting. PLoS One. 9 (8), e105511 (2014).
- Schlegel, A., et al. ALPPS: from human to mice highlighting accelerated and novel mechanisms of liver regeneration. Ann Surg. 260 (5), 839-846 (2014).
- Croome, K. P., et al. Characterization of a porcine model for associating liver partition and portal vein ligation for a staged hepatectomy. HPB (Oxford). 17 (12), 1130-1136 (2015).
- Schadde, E., et al. Hypoxia of the growing liver accelerates regeneration. Surgery. 161 (3), 666-679 (2017).
- Moris, D., et al. Mechanistic insights of rapid liver regeneration after associating liver partition and portal vein ligation for stage hepatectomy. World J Gastroenterol. 22 (33), 7613-7624 (2016).
- Garcia-Perez, R., et al. Associated Liver Partition and Portal Vein Ligation (ALPPS) vs Selective Portal Vein Ligation (PVL) for Staged Hepatectomy in a Rat Model. Similar Regenerative Response? PLoS One. 10 (12), e0144096 (2015).
- Shi, H., et al. A preliminary study of ALPPS procedure in a rat model. Sci Rep. 5, 17567 (2015).
- Almau Trenard, H. M., et al. Development of an experimental model of portal vein ligation associated with parenchymal transection (ALPPS) in rats. Cir Esp. 92 (10), 676-681 (2014).
- Dhar, D. K., Mohammad, G. H., Vyas, S., Broering, D. C., Malago, M. A novel rat model of liver regeneration: possible role of cytokine induced neutrophil chemoattractant-1 in augmented liver regeneration. Ann Surg Innov Res. 9, 11 (2015).
- Wei, W., et al. Establishment of a rat model: Associating liver partition with portal vein ligation for staged hepatectomy. Surgery. 159 (5), 1299-1307 (2016).
- Tschuor, C., et al. Salvage parenchymal liver transection for patients with insufficient volume increase after portal vein occlusion - an extension of the ALPPS approach. Eur J Surg Oncol. 39 (11), 1230-1235 (2013).
- Schadde, E., et al. Early survival and safety of ALPPS: first report of the International ALPPS Registry. Ann Surg. 260 (5), 829-836 (2014).
- Harnoss, J. M., et al. Prolyl Hydroxylase Inhibition Enhances Liver Regeneration Without Induction of Tumor Growth. Ann Surg. , (2016).
- Olthof, P. B., et al. Comparable liver function and volume increase after portal vein embolization in rabbits and humans. Surgery. 161 (3), 658-665 (2017).
- Olthof, P. B., van Gulik, T. M., Bennink, R. J. Optimal use of hepatobiliary scintigraphy before liver resection. HPB (Oxford). 18 (10), 870 (2016).
- Lau, L., Christophi, C., Muralidharan, V. Intraoperative functional liver remnant assessment with indocyanine green clearance: another toehold for climbing the "ALPPS". Ann Surg. 261 (2), e43-e45 (2015).
- Cieslak, K. P., et al. Assessment of Liver Function Using (99m)Tc-Mebrofenin Hepatobiliary Scintigraphy in ALPPS (Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy). Case Rep Gastroenterol. 9 (3), 353-360 (2015).
- Truant, S., et al. Drop of Total Liver Function in the Interstages of the New Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy Technique: Analysis of the "Auxiliary Liver" by HIDA Scintigraphy. Ann Surg. 263 (3), e33-e34 (2016).
