Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Re Arterialized rotte delvis lever Transplantation med en i vivo fartøj-orienterede 70% Hepatectomy

Published: April 8, 2018 doi: 10.3791/56392
* These authors contributed equally

Summary

Her, er en protokol, der involverer re arterialized rotte delvis levertransplantation præsenteret. Specifikt, var 70% leveren resektion i vivo ved hjælp af en opdateret teknik af fartøj-orienterede hepatectomy. Leverens arterie blev rekonstrueret i en afslutning-til-side måde. Manchet teknik blev ændret for at forkorte den anastomose tid infrahepatic vena cava.

Abstract

Split levertransplantation og levende lever donor lever transplantation blev udviklet i klinikken til at udnytte lever organer i en mere effektiv måde. For bedre at forstå mekanismen bag disse kirurgiske procedurer, grundlagt en rotte delvis levertransplantation (PLTx) model for relevante kirurgiske undersøgelser. På grund af kompleksiteten af rotte PLTx model kræves en protokol med detaljerede beskrivelser. En artikel offentliggjort tidligere rapporteret en protokol, hvori ex vivo hepatectomy blev brugt til at opnå 50% rotte PLTx. I modsætning til denne protokol indført vi en ny arterialized PLTx med en i vivo 70% hepatectomy. En opdateret fartøj-orienterede hepatectomy blev indlemmet i rotte PLTx at forfine den microsurgical procedure. Portal vener og hepatiske arterier af venstre laterale lap og den mediane lap var individuelt dissekeret og forbundet inden fjernelse af leveren parenkym, dermed mindske sandsynligheden for blødning i rest lever stump. Derudover blev en ende-til-side fartøj anastomose mellem den fælles hepatiske arterie og den udvidede korrekte hepatisk arterie indført for at re arterialize leverens arterie. Ved hjælp af denne ende-til-side fartøj anastomose teknik, blev diameteren af anastomose udvidet, dermed mindske vanskelighederne ved hånd sutur og opretholde et høj rate af Anastomotiske passage. Derudover blev manchet anastomose infrahepatic vena cava ændret en smule. En del af omkredsen lever parenkym omkring vena cava fra en tjenestemodtager var bevaret under Manchet anastomose at opretholde den tredimensionale form af vaskulære lumen. Denne del af leveren parenkym blev fjernet efter endt anastomose. Med denne ændring, var de trin, der omfatter placering af ophold suturer udeladt, dermed yderligere afkortning manchet anastomose tid. Ved hjælp af denne protokol af rotte PLTx, blev en lav leverenzym niveau, en intakt lever dråbeformede arkitektur og en høj overlevelse opnået efter mikrokirurgi.

Introduction

I øjeblikket, er der en stor uoverensstemmelse mellem antallet af donerede lever organer og antallet af patienter, der venter på en donerede leveren. Eksperterne lever organmangel er et globalt problem. At udvide donor pool, split levertransplantation (LTx) og levende donor LTx blev udviklet for at bruge en delvis lever som en graft1.

For at yderligere for at undersøge mekanismen bag delvis levertransplantation (PLTx), har relevante dyremodeller været etableret2,3,4,5. I rotte PLTx er de lever fliger resektion i vivo og ex vivo til efterligner betingelserne for den levende donors LTx og opdele LTx, henholdsvis i human. En blev offentliggjort i Journal af visualiseret eksperimenter præsenteret en detaljeret protokol med en 50% rotte PLTx ved hjælp af en ex vivo hepatectomy5. Dog er en rotte PLTx med en i vivo hepatectomy ikke endnu blevet rapporteret i de visualiseret litteratur.

Ud over forskellen mellem i vivo og ex vivo hepatectomies spiller teknik til at udføre en hepatectomy, selv også en vigtig rolle ved fastsættelsen af resultatet af PLTx. i øjeblikket, i mange kirurgiske undersøgelser ved hjælp af rotte PTLx model, leveren lapper var resektion efter at placere en enkelt ligatur på pedicle i leveren lap2,3,6,7,8,9. Dog placerer en enkelt ligatur før resektion ikke er egnet til alle lever fliger, som forskellige leveren lapper har forskellige former og størrelser. En enkelt ligatur i bunden af den mediane lap bærer en høj risiko for at forårsage en forsnævring af vena cava, der i sidste ende kan påvirke udstrømning af delvis lever graft10,11. Derfor kræves en opdatering hepatectomy teknik baseret på kendskab til rotte hepatisk anatomi i feltet i rotte PTLx.

I den protokol, der er beskrevet i denne undersøgelse, blev en opdateret fartøj-orienterede 70% hepatectomy indlemmet i proceduren i rotte PLTx. Portal vener og hepatiske arterier af venstre laterale lap (LLL) og median lap (ML) var dissekeret og opdelt individuelt før fjernelse af leveren parenkym. Derefter, de hepatiske vener LLL og ML blev forbundet af piercing suturer. Ved bruger individuelle ligations og flere piercing suturer snarere end at placere en enkelt ligatur, var rest stumpen af ML i stand til at sprede over vena cava. Dermed undgik forsnævring af infrahepatic vena cava forårsaget af en kirurgisk ligatur. Derudover okklusion af blodforsyningen LLL og ML af enkelte ligations før fjernelse af leveren parenkym faldt antallet af blødning i rest lever stump, derved at minimere påvirkning af blodtab eksperimenter11.

For microsurgeons er det en stor udfordring at rekonstruere den korrekte hepatisk arterie (PHA) af en lever graft på grund af den ekstremt lille diameter på dette fartøj. Selv om spørgsmålet om, hvorvidt fornyet arterialization i LTx er virkelig nødvendigt er stadig under debat12,13,14, har talrige microsurgical teknikker til genopbygge leverens arterie været foreslået14 . Her indfører vi en ny teknik til fornyet arterialization af leveren graften, som anastomoser den fælles hepatiske arterie (CHA) til den udvidede PHA i en afslutning-til-side måde. Ved hjælp af denne ende-til-side teknik, er to hepatiske arterier forbundet med en anastomose med en større diameter. Jo større diameteren af anastomose er, den lettere hånd suturering er at udføre og jo større forbedring i passage af anastomose bliver.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle procedurerne fulgt retningslinjerne i gnavere kirurgi godkendt af Wenzhou medicinske universitet dyr politik og Velfærdsudvalget 15.

1. dyr

  1. Brug mandlige Lewis rotter vejer 250-350 g som donorer og modtagere.

2. udløsende miljø

  1. Udføre alle microsurgical procedurer under en kirurgisk mikroskop med spænder fra 7 X 20 X forstørrelse. Sterilisere alle kirurgiske instrumenter før brug i drift.
    Bemærk: Operationsstuen og operationsbordet er ren men ikke sterile.

3. grundlæggende Microsurgical manøvrer

  1. Gratis, dissekere og mobilisere fartøjet.
    1. Brug først lige mikro-pincet til at løfte det omgivende væv på fartøjet.
    2. Andet, gentagne gange og forsigtigt åbne og lukke den buede mikro-pincet tips sådan, at de fine tips kan skære åbne og skræl det omgivende væv på den forreste væg af fartøjet.
    3. For det tredje brug lige mikro-pincet klemme og løfte fartøj for at udsætte den bageste plads. Brug derefter tips af den buede mikro-pincet til at skrælle det omgivende væv på den bageste væg af fartøjet. Endelig, en skaldet fartøj uden omkringliggende væv tilsluttet bør fremlægges.
  2. Give eller dobbelt ligate og dele et fartøj eller væv.
    1. Først, binde to square knob på fartøjet eller væv ved hjælp af to mikro-pincet16. Andet, afbrød fartøj eller væv mellem de to square knob ved hjælp af mikro-saks.

4. forberedelse af manchetten og galde Stent

  1. Gøre manchetter i portåren og infrahepatic vena cava med 12-gauge og 14-gauge intravenøse katetre, henholdsvis, mens den galde stent bruges er en 22-gauge intravenøse kateter. Manchetter består af en del af kroppen og håndtag del. Brug en fillister på del af kroppen til at sikre karvæggen på cuff (figur 1).

5. anæstesi, og fiksation af rotter

  1. Anbring forsigtigt Lewis rotte i en induktion boks med 5% isofluran blandet med 0,5 L/min ilt til at fremkalde inhalation anæstesi. Overvåge respiratorisk hyppigheden af rotte at forhindre uventet dødsfald forårsaget af en overdosis af isofluran. Reducere koncentrationen af isofluran til 2% for at opretholde anesthesia når rotten ikke reagerer på smerte stimulation.
  2. Flytte rotten til en 30 cm x 30 cm eg plank er omfattet af en steriliseret kirurgisk mat håndklæde, og placere rotten i en liggende stilling. Binde fire lemmer af rotte ved hjælp af mediale tape, og efterfølgende lave båndet med fire thumbtacks. Desinficer huden med 70% alkohol, en tid og iodophors tre gange.

6. donor drift

  1. Udsætter den udløsende felt
    1. Skær et lille tværgående snit på den øvre del af maven til at Transekttællinger de bilaterale ringere epigastriske fartøjer ved hjælp af en elektrisk coagulator.
    2. Udvide den tværgående snit tæt på costal margenen på øvre del af maven ved hjælp af kirurgiske saks.
    3. Vende og lave den øvre del af maven væggen og formet som et sværd proces, henholdsvis til den kranielle side.
    4. Flytte tarmen ud af bughulen med to våde bomuld pinde. Dække tarmen ved hjælp af en våd stykke gaze.
  2. Afskære ledbånd og trimning suprahepatic vena cava (SHVC)
    1. Afskære falciformal ligament, koronar ligament og trekantede ledbånd i rækkefølge.
    2. Gratis venstre diafragma vene fra mellemgulvet ved hjælp af mikro-pincet. Derefter, dobbelt ligate det ved hjælp af 6-0 silke suturer.
      Bemærk: Ikke Opdel denne vene i dette trin.
    3. Afbrød gastrohepatiske ligament ved hjælp af mikro-saks til gratis den ringere spiegelske lap og hepatoesophageal ligament og arterie.
  3. Tilstoppe blodforsyning af LLL og ML før resektion (figur 2)
    1. Brug først buet pincet skal omhyggeligt dissekere den bageste væg af den fælles stammen af PV, der leverer LLL og venstre median lap (elsker mit liv) fra parenkym. For det andet dobbelt ligate og deler det med tilsvarende galdegang og hepatisk arterie sammen.
    2. Dissekere og opdele PV af RML forsigtigt, fordi denne vene overholder nøje de lever parenkym.
      Bemærk: 14 X forstørrelse anbefales. Ikke såre PV af lige superior lap, som er tæt på PV af RML.
    3. Identificere hepatisk arterie og galdegang af RML beliggende mellem PVs af RML og elsker mit liv. Dobbelt ligate og opdele hepatisk arterie og galdegang af RML ved hjælp af 6-0 silke suturer.
      Bemærk: En ændring i farve af LLL og ML fra rød til mørk rød er en indikator for vellykket okklusion af blodforsyningen. Indgående kendskab til de vaskulære anatomi er vigtigt at identificere og dissekere de tilsvarende fartøjer. En tidligere undersøgelse i rotte klart illustreret den hepatiske anatomi af korrosion kaster10.
  4. Resecting af LLL
    1. Ligate pedicle af LLL bruger en omkredsen 3-0 silke sutur til at occlude blodgennemstrømning af venstre lateral leverens vene. Ved hjælp af mikro-saks, klippe leveren umiddelbart over ligatur fjerne lever massen.
  5. Resecting kærlighed mit liv
    1. Klemme venstre median leverens vene af myg hæmostatisk pincet placeret langs den mediane revne (figur 3A). Fjerne alle de lever parenkym af kærlighed mit liv umiddelbart ovenfor pincet ved hjælp af mikro-saks.
    2. Sted en piercing sutur, der trænger ind i leveren parenkym umiddelbart under pincet omkring venstre medianen hepatisk vene. Derefter binde en firkantede knude for at ligate det før slippe pincet.
    3. Placer en anden to piercing suturer under pincet til surround resten af åbne snit af kærlighed mit liv. Derefter binde to square knob for at lukke resten af snittet. Frigive myg hæmostatisk pincet til at tjekke for blødninger.
  6. Resecting RML (figur 4)
    1. Placer myg hæmostatisk pincet til at omgive bunden af RML i en afstand af 0,5 cm til SHVC (figur 4B). Derefter, cross-klemme base ved hjælp af myg hæmostatisk pincet til at occlude det lige median leverens vene.
    2. Ved hjælp af mikro-saks, fjerne alle de lever parenkym af RML langs den øvre overflade af pincet. Vær sikker på at arbejde meget tæt på overfladen af pincet, forlader en plain og tynde stump af ML.
    3. Sted den første piercing sutur gennemtrængende den lever parenkym under pincet til at omgive den midterste median hepatisk vene. Derefter binde en firkantede knude for at ligate den midterste median leverens vene. Placer den anden piercing sutur for at ligate den lige median leverens vene efter samme metode. Placer en anden to piercing suturer tæt på resten af snit efter beskrivelsen i 6.5.2.
  7. Trimning infrahepatic vena cava (IHVC)
    1. Skære åbne retroperitoneum for at afdække IHVC. Bruge buede mikro-pincet til gratis IHVC og højre nyre-vene fra det omgivende væv. Dissekere og ligate den højre binyre vene, som afløb i IHVC bagfra.
    2. Udføre en højre nephrectomistatus efter ligating højre nyre-vene og lige nyrearteriestenose gemme nok vaskulære længde for at installere manchet på IHVC i et senere trin.
  8. Installere den galde stent
    1. Mobilisere fælles galdegang (CBD) fra den første hepatisk hilum ved hjælp af mikro-pincet. Ligate CBD på tværs-punkt af pylorus venen og CBD ved hjælp af en 6-0 silke sutur.
    2. Skære et tværgående snit på den forreste væg af CBD på den proksimale side af ligation. Indsæt en galde stent, gjort af en 22-gauge intravenøse kateter, til lumen af CBD via indsnittet. Sikre den galde stent med en omkredsen 6-0 silke sutur. Transekttællinger CBD mellem de to 6-0 silke suturer.
  9. Trimning PV
    1. Ligate pylorus venen ved hjælp af en 6-0 silke sutur distalt for PV. Næste, ligate pylorus venen ved hjælp af en 7-0 polypropylen sutur tæt på PV. Transekttællinger pylorus venen mellem disse to ligations. Dobbelt ligate og opdele den milt vene på samme måde.
      Bemærk: Brug en 7-0 polypropylen sutur til ligate fartøj for at gøre en mindre ligatur knude sammenlignet med 6-0 silke sutur. En stor knude kan interferere med manchet installation i sidste trin. Den vaskulære væg pylorus vene og milt vene er tynd, så blid manipulationer er vigtigt under dissektion. En tidligere udgivet artikel med mere tekniske beskrivelser og illustrationer om dissekere og dividere pylorus vene og milt vene bør læses før operation17.
  10. Trimme den fælles hepatiske arterie (CHA)
    1. Omhyggeligt gratis CHA og dens to bifurcationer, PHA og gastroduodenale arterie (GDA), fra det omgivende væv ved hjælp af to mikro-pincet. Dobbelt ligate GDA ved hjælp af 6-0 silke suturer ved tvedeling af CHA at GDA.
  11. Heparinizing og perfusing lever graften
    1. Injicere 50 IE heparin i 1 mL saltvand via den penile vene. Vente på 5 min at opnå systemisk heparinization.
    2. Cross-klemme PV, IHVC og CHA med tre buede mikro-serrefines til at occlude nedsat blodgennemstrømning. Udføre en lille snit på den forreste væg af PV indsætte en 22-gauge kateter. Perfuse delvis lever graften med saltvand ved 4 ° C via kateter under et tryk på 20 cmH2O.
    3. Hurtigt åbne cut brysthulen og intrathoracic vena cava ved hjælp af kirurgiske saks til at dræne ud blod og perfusate. Stop ikke perfusion, indtil farven på hele delvis lever graften bliver ensartet gul.
  12. Explanting delvis lever graften
    1. Transekttællinger venstre diafragma vene mellem de to ligations (beskrevet i 6.2.2) ved hjælp af mikro-saks.
    2. Næste, Transekttællinger SHVC tæt på mellemgulvet for at holde den vaskulære længde så længe som muligt. Transekttællinger PV på niveau med milt venen ved hjælp af mikro-saks. Opdele GDA mellem de dobbelte ligations, og Transekttællinger CHA tæt på cøliaki stammen.
    3. Transekttællinger de adrenal fartøjer i distale side 6-0 silke ligatur placeret i 6.7.2. Transekttællinger IHVC på niveau med den venstre nyre-vene ved hjælp af kirurgiske saks.
    4. Punktafgifter og overføre delvise leveren til en back-tabel parabol (30 mm kultur parabol) fyldt med saltvand ved 4 ° C.

7. back-tabel drift (Graft forberedelse)

  1. Installere de vaskulære manchetter (figur 5)
    1. Trække PV gennem lumen af en manchet lavet med en 12-gauge intravenøse kateter ved hjælp af mikro-pincet. Midlertidigt fastsætte manchet håndtag og PV sammen ved hjælp af et fartøj klemme. Evert PV karvæggen til dækning af den ydre overflade af manchetten. Sikre karvæggen og manchet i position med en omkredsen 6-0 silke sutur.
      Bemærk: Ikke vride fartøjet. Manchet håndtag bør holdes i retningen 12 klokken.
    2. Installere IHVC cuff efter beskrivelser i punkt 7.1.1.
  2. Foruddefinere to ophold suturerne på SHVC
    1. Trænge ind i karvæggen af SHVC fra at inde ved hjælp af to 7-0 polypropylen suturer langs 3 klokken og 9 klokken retninger, henholdsvis.
      Bemærk: Ikke bind en knude.
  3. Bevare graften
    1. Fordyb delvis lever graften i saltvand ved 4 ° C for bevarelse efter handlingen back-tabel.

8. modtagende drift

  1. Gentag procedurer i 6.1-6.2 og 6.7, bortset fra den højre nephrectomistatus i modtageren til at afsløre feltet operative Transekttællinger ledbånd og trim fartøjerne.
  2. Forberedelse af IHVC, galdegang, hepatisk arterie og portal vene i modtageren
    1. Først, mobilisere del af IHVC ned til højre nyre-vene. Andet, ligate højre binyre fartøjerne ved hjælp af en 6-0 silke sutur. For det tredje, mobilisere CBD fra første hepatisk hilum ved hjælp af mikro-pincet.
      Bemærk: Ikke trim off fedtvævet omkring CBD.
    2. Transekttællinger CBD på den første bifurcation i hepatisk hilum efter dobbelt ligatur ved hjælp af en 6-0 silke sutur. Derefter, Transekttællinger PHA ved hjælp af mikro-saks efter den dobbelt ligatur ved hjælp af en 6-0 silke sutur. Mobilisere del af PV fra hepatisk hilum til pylorus vene.
  3. Mobilisere den bageste del af leveren
    1. Trække modtageren lever til den venstre side ved hjælp af to bomuld pinde. Derefter afbrød ligament i den bageste del af leveren fra SHVC til højre binyre vene som beskrevet i en tidligere visualiseret artikel18. Efter dette, indføre et elastik igennem den back plads af SHVC.
  4. Forberede de instrumenter og materialer under anhepatic fasen
    1. Kontroller tilgængeligheden af alle instrumenter og materialer, der kræves i anhepatic fasen, såsom en 5 mL sprøjte med en buet nål, mikro-saks, mikro-nål holder, mikro-pincet, to mikro-hæmostatisk pincet, to 7-0 polypropylen suturer og 6-0 silke suture klæde.
      Bemærk: Søgning efter materialer eller instrumenter kan forlænge anhepatic fasen.
  5. Udtagelse leveren i modtageren
    1. Cross-klemme IHVC umiddelbart over nyre-vene ved hjælp af et fartøj klemme og PV umiddelbart over den pylorus vene. Registrere varigheden af anhepatic fasen fra dette øjeblik indtil klemmen på PV er frigivet.
    2. Reducere koncentrationen af isofluran til 0,5% straks.
    3. Træk SHVC og mellemgulvet af den forudindstillede elastik. Klemme delene af mellemgulvet sammen med den intrathoracic vena cava ved hjælp af en Bulldog klemme, opretholde en afstand på 0,5 cm til SHVC.
      Bemærk: Ikke klemme lungen i rotten.
    4. Brug mikro-saks, skåret karvæggen af SHVC forsigtigt langs den øverste kant af leveren parenkym at holde vaskulære væggen så længe som muligt.
    5. Transekttællinger PV på den første bifurcation i hepatisk hilum ved hjælp af mikro-saks. Derefter, Transekttællinger den ringere vena cava i parenkym af lige ringere lap og ikke i karvæggen, forlader den omkredsen lever parenkym omkring vena cava. Holde forkant i den højre ringere lap i en afstand af 4 mm til IHVC. Efter transecting fartøjer, skal du flytte hele leveren ud af bughulen.
  6. Rekonstruere SHVC
    1. Placer den delvise lever graft i bughulen orthotopically. Gennembore karvæggen af SHVC fra inde til udenfor langs de 3 klokken og 9 klokken retninger ved hjælp af to forudindstillede ophold suturer. Trække to ophold suturer til højre og venstre, efter at de er bundet til en knude med deres egne formål.
    2. Gennembore SHVC karvæggen fra at inde tæt på knuden i 3 klokken retning at indføre nålen i den rigtige ophold sutur i vaskulære lumen.
    3. Anastomose den bageste væg af SHVC af en kørende sutur inde den vaskulære lumen fra retningen 3 klokken 9 klokken retning.
    4. På hjørnet af 9 klokken retning, gennembore karvæggen fra inde til uden for tæt på knuden at indføre nålen ud af vaskulære lumen.
    5. Brug denne sutur til anastomose den forreste væg ved hjælp af en løbende sutur uden for den vaskulære lumen fra retningen 9 klokken 3 det klokken retning. Endelig, binde sutur med sin egen ende 3 gange (figur 6).
      Bemærk: Tilføre lumen af den rekonstruerede SHVC at tvinge ud luftbobler før sidst 2-3 sting 3-5 mL saltvand. En mere detaljeret beskrivelse af SHVC anastomose kan findes i artiklen af Delriviere et al. 19.
  7. Rekonstruere PV
    1. Placer to 7-0 polypropylen ophold suturer i slutningen af PV af modtageren efter beskrivelsen i 7.2. Trække to ophold suturer i den modsatte retning til at udvide karvæggen. Lave to ophold suturer ved hjælp af to mikro-myg hæmostatisk pincet.
    2. Tilføre den vaskulære lumen af PV i modtageren til at tvinge ud luftbobler ca. 1 mL saltvand. Hurtigt indsætte portåren manchet i vaskulære lumen af PV i modtageren til at tvinge når det åbnes ved hjælp af mikro-pincet. Sikre manchet anastomose ved hjælp af en omkredsen 6-0 silke sutur. Cross-klemme CHA.
  8. Reperfusion til leveren transplantat
    1. Release klemmer på SHVC og PV i rækkefølge for at reperfuse lever graften. Registrere tidspunktet for anhepatic fasen. Tjekke for blødninger af anastomose. Øge koncentrationen af isofluran til 1-2% Ifølge rotten reaktion på smerte stimulation.
  9. Rekonstruere IHVC
    1. Indsprøjte 1 mL saltvand i det vaskulære lumen af IHVC i modtageren til at tvinge ud luftboblerne. Indsæt manchetten i cylindrisk vaskulære lumen af IHVC, som understøttes af den omkredsen lever parenkym (figur 7). Indføre et 6-0 silke sutur gennem den back plads af IHVC. Sikre hurtigt manchet anastomose ved hjælp af en 6-0 silke sutur.
    2. Frigive to fartøj klemmerne i IHVC til at genstarte perfusion. Trim off den omkringliggende lever parenkym omhyggeligt over omkredsen silke sutur ved hjælp af mikro-saks.
  10. Genopbygge leverens arterie
    1. Trænge ind i karvæggen af CHA i leveren graften fra at inde ved hjælp af to 11-0 polypropylen suturer i 3 klokken og 9 klokken retninger, henholdsvis. Occlude blodgennemstrømning på CHA og GDA i modtageren ved hjælp af to buede mikro-serrefines.
    2. Transekttællinger PHA af modtageren ved roden til at udsætte den vaskulære lumen ved hjælp af mikro-saks. Forstørre den vaskulære lumen af PHA i modtageren ved at skære en del af karvæggen på langs til at rumme diameteren af CHA i leveren graften.
    3. Anastomose CHA af leveren graften til den udvidede PHA i en afslutning-til-side måde ved hjælp af løbende Sutur teknik beskrevet for SHVC anastomose (8.6.2-8.6.7).
      Bemærk: Detaljerede illustrationer kan findes i artiklen af Huang mfl14.
  11. Rekonstruere CBD
    1. Flytte tarmen tilbage ind i bughulen at mindske afstanden mellem de to ender af galdegang. Udføre en tværgående snit på den forreste væg af galdegang i modtageren.
    2. Trække den galde stent i delvis lever graften ned for at indsætte det i lumen af galdegang i modtageren via tværgående snit. Sikre stent ved hjælp af en 6-0 omkredsen silke sutur.
    3. Binde de to 6-0 omkredsen silke suturer i galdegang til hinanden for at mindske spændingen i anastomose.
  12. Lukning af maven
    1. Tæt på maven i to lag med 3-0 silke sutur i løbende sutur mønster.

9. postoperative behandlinger (analgesi og antibiotika)

  1. Behandle alle modtagere med 0,1 mg/kg buprenorphin subkutant. Administrere cefuroxim (16 mg/kg) subcutaneously ud over de smertestillende stof. Tilbyde postevand og standard laboratorium animalsk chow til rotter ad libitum.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

I alt blev 31 tilfælde af syngeneic arterialized rat PLTx afsluttet ved hjælp af denne protokol. Alle modtagernes overlevede indtil udgangen af observationsperiodens. Kropsvægt modtagernes begyndte at inddrive efter postoperative dag (POD) 4. Hældningen af kropsvægten var tæt på en normal Lewis rotte efter POD 6 (fig. 8), som indirekte stiltiende inddrivelse af modtageren. Histologisk, en lille spredning af galdegang blev observeret hos modtagerne, og den lever dråbeformede arkitektur af modtagerne var intakt. Ingen nekrose eller indlysende sinusformet dilatation blev observeret (figur 9). Serum var alanin aminotransferase (ALT) inden for normalområdet på POD 30 (figur 10). Ingen tilfælde af gul urin forårsaget af gulsot blev observeret i disse modtagere, som blev angivet ved at kontrollere buret sengetøj hver dag, med angivelse af passage af galde stenten. Den normale serum niveau af bilirubin på POD 30 bekræftet yderligere vellykket genopbygningen af galdegang (Figur 11). Passage af leverens arterie blev kontrolleret af transecting PHA på den proksimale side af anastomose under offer. Blødning fra PHA blev observeret i alle modtagere, antyde passage af anastomose. Alle disse resultater foreslog, at de lever podninger fungerede godt.

Den gennemsnitlige varighed af anhepatic fasen var 23,03 ± 2,3 min. Manchet anastomose af PV tog 4,68 ± 0,77 min, mens manchet anastomose af IHVC tog kun 2.05 ± 0.71 min. sammenlignet med manchet anastomose af PV, manchet anastomose af IHVC gemt trin af markedsføring ophold suturer og dermed yderligere forkortet anas tomosis tid (tabel 1).

To tilfælde af blødning i rest stumpen af ML under 70% hepatectomy blev observeret blandt de 31 tilfælde af fartøj-orienterede hepatectomy. I et tidligere eksperiment, blev blødning i rest stumpen af ML observeret i 8 ud af 18 tilfælde af bevarelse af parenkym fartøj-orienterede hepatectomy (figur 12). Dette resultat er angivet en lavere sats på blødning i rest lever stumpen af ML efter at have brugt fartøj-orienterede 70% hepatectomy.

Figure 1
Figur 1 . Manchetter og galde stent.
(EN, C) Størrelsen af manchetter. B fillister på manchetten. (D) den del af kroppen og håndtag del af manchetten. (E) (en) IHVC manchet; b PV manchet. F biliær stent. Skalalinjen = 5 mm. venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 2
Figur 2 . At occlude blodforsyning af LLL og ML.
(A) Den fælles stammen af PV, hepatisk arterie og bile duct af LLL og elsker mit liv.
(B) Misfarvning af LLL og elsker mit liv efter transecting den fælles stammen.
(C) Portalen vene af RML.
(D) Alle PVs, hepatiske arterier og galdeveje LLL og ML blev transected.
Skalalinjen = 5 mm. forkortelser: LLL forlod laterale lap, ML median lap, elsker mit liv venstre median lap, RML lige median lap, RSL lige superior lap, RIL lige ringere lap, SCL superior spiegelske lap. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 3
Figur 3 . Til resect venstre median lap.
(A) resect lever masse kærlighed mit liv umiddelbart over pincet.
B pålægge snit tre piercing suturer. (Image 1)
Skalalinjen = 5 mm. forkortelser: RML lige median lap, RSL lige superior lap, RIL lige ringere lap, SCL superior spiegelske lap. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 4
Figur 4 . Til resect den lige median lap (RML).
(A) Base af RML.
(B) Placer myg hæmostase pincet rundt i bunden af RML.
(C) Resect RML lever parenkym umiddelbart over pincet.
(D) Forlade et almindeligt og tynde lag af rest leveren væv på SHVC.
Skalalinjen = 5 mm. forkortelser: ML median lap, RSL lige superior lap. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 5
Figur 5 . At installere manchetten.
(A) træk PV gennem lumen af en manchet.
B fastsætte manchet håndtag og PV sammen af et fartøj klemme.
C Evert PV vaskulære væg til at dække den ydre overflade af manchetten.
D sikre vaskulære væggen og manchet i position.
Skalalinjen = 5 mm. venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 6
Figur 6 . At rekonstruere SHVC.
(A & B) Trække to ophold suturer til højre og venstre, henholdsvis.
C anastomose den bageste væg af SHVC af en kørende sutur i vaskulære lumen.
(D) anastomose den forreste væg af SHVC ud af den vaskulære lumen.
Skalalinjen = 5 mm. venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 7
Figur 7 . At rekonstruere IHVC.
(A) en cylindrisk vaskulære lumen af IHVC i modtageren.
(B) sikre manchet anastomose af IHVC.
(C) start reperfusion.
(D) trim off den omkringliggende lever parenkym ovenfor omkredsen silke sutur.
Skalalinjen = 5 mm. forkortelser: PV Vena, IHVC ringere infrahepatic vena cava, RIL lige ringere lap. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 8
Figur 8 . Postoperative organ vægt opsving.
Kropsvægt modtagere begyndte at inddrive efter postoperative dag 4. Hældningen af kropsvægten var tæt på en normal Lewis rotte efter postoperative dag 6, som indirekte stiltiende inddrivelse af modtageren.

Figure 9
Figur 9 . Histologi af leveren graft efter 30 dage.
I histologi, en lille spredning af galdegang blev observeret i modtagere og modtagere lever dråbeformede arkitektur var intakt. Ingen nekrose eller indlysende sinusformet dilatation blev observeret (400 X). Skalalinjen = 20 um venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 10
Figur 10 . Serum niveau af ALT.
Serum niveau af ALT var inden for normalområdet på POD 30. (**, P < 0,05).

Figure 11
Figur 11 . Serum niveau af bilirubin.
Serum niveau af bilirubin på POD 30 var sammenlignes med en normal Lewis rotte (P > 0,05).

Figure 12
Figur 12 . Blødning satser for forskellige metoder til hepatectomy.
En lavere sats på blødning i rest lever stumpen af ML blev observeret i metoden ved hjælp af fartøj-orienterede 70% hepatectomy.

Procedurer Fjernelse af leveren SHVC anastomose PV anastomose IHVC anastomose Anhepatic tid
Tid (minutter) 2.62±0.46 15.73±2.05 4.68±0.77 2.05±0.71 23.03±2.30
Data blev udtrykt i Mean±SD

Tabel 1. Tidspunktet for individuelle kirurgiske procedurer i anhepatic fase

Table 2
Tabel 2. Forskellen mellem to visualiseret protokoller i rotte PLTx. Venligst klik her for at se en større version af denne tabel.


Supplerende materialer

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Rotte PLTx er en sofistikeret microsurgical procedure med et træningsprogram, som er høje i omkostninger og lang varighed20. Kompleksiteten af rotte PLTx protokol har forhindret forskere i at anvende denne dyremodel. Sammenlignet med fuld størrelse rotte LTx, præsenterer rotte PLTx microsurgeon, ikke kun med udfordring af en transplantation procedure, men også med udfordring af leveren resektion i et lille dyr. Derfor, en visualiseret microsurgical protokol beskriver hele proceduren i detaljer er afgørende for oprettelse af dette kompleks model. En tidligere visualiseret artikel rapporteret af Nagai et al. præsenteret en protokol af 50% delvis orthotopic LTx med nedsat arteriel rekonstruktion i rotter5 (tabel 2). Denne protokol anvendes en ex vivo hepatectomy, som er klinisk ligner proceduren for split LTx.

Sammenlignet med split resects LTx, levende donor LTx delvis lever graften fra den levende donor i stedet opdele leveren i handlingen back-tabel. I vivo lever resektion kan føre til flere kirurgiske manipulationer, længere portal hypertension og endnu mere varm iskæmi skader til delvis lever graften. Dermed rotte flere PLTx modeller udnytter i vivo hepatectomy har været etableret i relevante undersøgelser6,8,21,22. Mange protokoller indebærer resektion af de lever lapper efter simpel ligatur på pedicle eller base2,3,6,8,21,23. Forskellige leveren fliger er dog forskellige figurer. ML af rotten har en bred base at semi-omgiver vena cava10,24. Placere en enkelt ligatur i bunden af ML nemt bremsende den ringere vena. For at undgå konstriktion af vena cava, udviklet Madrahimov et al. en bevarelse af parenkym fartøj-orienterede hepatectomy for at fjerne ML i 2 trin efter fire piercing suturer i parenkym blev foretaget, forlader rest stumpen af ML flad 10. dog PVs af de lever kamre forbundet af piercing suturer var skjult i parenkym. Blødning i rest stub forårsaget af mangler eller skade de små grene af PV kunne ikke være helt undgået 11. I vores protokol, var den tilsvarende PVs og hepatiske arterier yderligere dissekeret først. Derefter var blodforsyning af de resektion lever lapper individuelt tilstoppet af ligations før resektion. Derfor, satsen for blødning i rest stub var sænket ved hjælp af vores protokol (figur 10). Teknikken med at placere fire piercing suturer i stumpen af ML blev også ansat i vores protokol til ligate de hepatiske vener, men ikke PV og hepatiske arterier. Med disse ligations ved hjælp af flere piercing suturer og en trinvis resektion, blev den flade form af rest lever stumpen opretholdt, som undgik konstriktion af vena cava.

Genopbygningsagentur IHVC foregik en mindre ændring til cuff anastomose beskrevet af Kamada et al. 25. den ringere vena cava af modtageren var transected i parenkym lige ringere-lap i stedet for på IHVC fartøj, som efterlod en omkredsen lever parenkym omkring vena cava. Den lever parenkym omkring vena cava hjalp en cylindrisk form af kar slutningen af IHVC af modtageren ikke en flade form. Lumen af IHVC åbnede derfor naturligt uden hjælp fra ophold suturer og pincet. Denne ændring hjulpet med at redde trin af markedsføring ophold suturer og lettet indsættelse af IHVC cuff i vaskulære lumen af modtageren. Desuden, denne ændring langvarig vaskulære længden af IHVC, hvorved spændingen mellem de to ender under Manchet anastomose.

Med fordel af hurtig vaskulære anastomose bruges to-cuff teknik ofte i rotte orthotopic LTx for anastomosing PV og IHVC. Miyata et al. foreslået endnu en protokol, der involverer en tre-cuff teknik for at anastomose PV, IHVC og SHVC. Manchet teknik har imidlertid også sine ulemper. Først, en manchet med en fast størrelse ikke passer perfekt ind på størrelse med de tilsvarende fartøj. Derudover forstyrrer manchet teknik blodgennemstrømningen, hvilket resulterer i en højere forekomst af blodpropper og fremmedlegeme reaktion på manchetten26. SHVC, en vigtigste fartøj i rat, viser høj blodgennemstrømning. Enhver konstriktion eller blodpropper i dette fartøj kan forårsage alvorlige postoperative komplikationer. Derfor, i vores PLTx protokollen, vi vælger at bruge hånd Sutur teknik til at genopbygge SHVC, som giver mulighed for justering af anastomose så tæt som muligt til de fysiske rammer. Høj kvalitet SHVC anastomose afsluttet ved hånd Sutur teknik kræver imidlertid høj microsurgical færdighed. For begyndere anbefales Carrels triangelhandel teknik til anastomosing fartøjer 27. Ved hjælp af denne teknik, er tre ophold suturer placeret med jævne mellemrum omkring omkredsen af SHVC. 3D form af SHVC vedligeholdes af tilbagetrækningskraften disse tre bo suturer langs tre retninger, som kan forhindre SHVC fra stenose under anastomose.

Re arterialization af leveren podekvisten er et kontroversielt emne. I vores udtalelse, re arterialization er ikke det vigtigste skridt for at sikre en høj overlevelsesraten for modtageren, men det kunne være det vigtigste skridt for at sikre en høj kvalitet lever graft. I den traditionelle protokol af rotte LTx involverer to-cuff teknik, var leverens arterie ikke rekonstrueret, som manglen perfusion af leverens arterie ikke påvirkede resultatet af rotte LTx12. Desuden, en tidligere undersøgelse på musen LTx blev udført for at undersøge effekten af re arterialization på langtidsoverlevelse graft, histologiske forandringer, iskæmisk leverskader og tidlige immunologiske aktivering veje13. Forskerne konkluderede, at de re arterialization af leveren grafts ikke havde en større indflydelse på overlevelsesraten eller graden af immunologiske aktivering. Et nyere studie af Huang et al. antyder imidlertid at re arterialization er vigtigt for genopretningen af leveren parenkym udsat for hepatectomy, især med obstruktion af udstrømning28. Ikke-arterialization af den delvise lever graft forværret leverskader og forsinket gendannelse fra fokal nekrose. Derfor anbefales re arterialization af delvis lever graften. Som illustreret her, var en ende-til-side anastomose teknik bruges til at rekonstruere den hepatiske arterie, som tidligere var beskrevet af en af vores forfattere 14. Fordelen ved denne teknik er valg til anastomose to tykke arterier, CHA og GDA, snarere end den tynde PHA, som reducerer er vanskeligheden at rekonstruere den hepatiske arterie og fastholder en høj sats for passage af anastomose.

Den klassiske rotte LTx protokol som Kamada et al. foreslået antyder, kontrollerer anhepatic fasen, så det er mindre end 26 min, som intet dyr overlevede, da anhepatic fasen varede længere end 26 min25. Vores erfaring er i overensstemmelse med dette forslag, selv om vi tidligere observeret flere overlevelse tilfælde med en anhepatic fase tid længere end 26 min. Efter vores mening har en stabil anhepatic fase forrang over en kortere anhepatic fase i kirurgisk forskning. I vores gruppe styres anhepatic fasen nøjagtigt til inden for en bestemt tid. Anhepatic fasen er ikke stoppet indtil at forudindstillede anhepatic er nået, selv om anastomose af SHVC og PV kunne udføres langt tidligere. Men i et uddannelsesprojekt, en kortere anhepatic fase opfordres.

Selv om mange forbedringer har gjort forkorte uddannelse fase og fjerne unødvendige operationer, er rotte LTx og PLTx stadig komplekse microsurgical operationer20. Derfor, ud over en visualiseret protokol, en trinvis uddannelse protokol baseret på Plan--Check-Action cyklussen er vigtigt for at opnå en høj overlevelsesrate og høj operation kvalitet. Vores foreløbige erfaringer i at bruge denne uddannelse protokollen viste, at 40-73 operationer var nødvendige at beherske rotte orthotopic LTx. En yderligere 9-13 operationer var forpligtet til at mestre rotten re arterialized PLTx. Uddannelse protokollen foreslog af Czigány et al. hævder, at 50-60 LTxs er tilstrækkelige til at mestre orthotopic LTx og PLTx29.

I vores Plan--Check-Action uddannelse protokollen, skal kvalitetskontrol på hver uddannelse skridt og i hver enkelte manipulation understreges, især i sådan en kompliceret model. En høj overlevelse er ikke ensbetydende med en høj kvalitet procedure. I de repræsentative resultater, flere kriterier for evaluering af kvaliteten af mikrokirurgi blev noteret, herunder histologi, leverenzym, kroppen vægt opsving, gulsot (serum bilirubin og gul urin), varigheden af anhepatic fasen og passage af de hepatisk arterie. Høj kvalitet opnås kun når alle kriterier er opfyldt.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Alle forfattere har ingen modstridende interesser at videregive.

Acknowledgments

Denne forskning blev støttet af National Natural Science Foundation of China (Grant nr. 81501382) og Zhejiang provinsens Natural Science Foundation of China (Grant nr. LQ13H100003 og LQ16H100002).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Surgical microscope Möller-Wedel, Germany 654359
Light source OSRAM (China) Lighting Co., Ltd 64627
Isoflurane Vaporizer MIDMARK Corporation VIP3000
Isoflurane Baxter Healthcare Corporation 40032609 For Inhalation anesthesia
Normal Saline Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. 716092103
Povidone Iodine Solution HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL H33021567 For disinfection
Hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J31020
Surgical scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd JC2116
Needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J32030
Dressing Forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J42020
Mosquito hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40340 For liver resection; For retracting the stay sutures. 
Micro-scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA1040
Micro needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA2060
Curved micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3061
straight micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3060
Micro hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3020
Bulldog clamp Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd XEC350
Vessel clamps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40160
Micro Serrefine-curved  Fine Science Tools, Inc 18055-05
Dacryosyrinx Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. 5# curve Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen
Sterilized gauze swabs Fuqing Health & Integral Medical 20230R
5mL syringe Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd 811932416
18G needles Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd 01-014 For fixing the upper abdomen wall
Intima II 22G intraveous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 383207y For making biliary stent; For infusing perfusate
7-0 polypropylene sutures Ningbo Medical Needle Co., Ltd 151026 For SHVC anastomsis
6-0 silk suture Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd 2650182 For ligation
Culture dish (100mm) Corning Incorporated 430165 used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. 
Culture dish (30 mm) Corning Incorporated 3296 As a vessel for organ preservation
Angiocath 12G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382277 For making a IHVC cuff
Angiocath 14G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382269 For making a PV cuff
Buprenorphine (hydrochloride) Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd H12020275 For analgesic
Cefuroxime sodium for injection Esseti FarmaceuticiS.r.l H20160013 As an antibiotics

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Yan, J. Q., Becker, T., Peng, C. H., Li, H. W., Klempnauer, J. Split liver transplantation: a reliable approach to expand donor pool. Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 4, 339-344 (2005).
  2. Xia, R., Emond, J. C. Orthotopic partial liver transplantation in the rat: a model of 70% hepatectomy and reduced size liver transplantation. Transplantation. 56, 1041-1043 (1993).
  3. Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. Fifty-percent partial liver transplantation in the rat. Transplantation. 62, 292-293 (1996).
  4. Foss, A., et al. Function of reduced-size liver transplant in the rat. Res Exp Med (Berl). 197, 91-99 (1997).
  5. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. J Vis Exp. , e4376 (2013).
  6. Sun, J., Qin, G., Wu, L., Wang, C., Sheil, A. G. Antigenic load and peripheral chimeric levels in entire and partial liver allograft recipients. Microsurgery. 21, 183-187 (2001).
  7. Ninomiya, M., et al. Deceleration of regenerative response improves the outcome of rat with massive hepatectomy. Am J Transplant. 10, 1580-1587 (2010).
  8. Yamanaka, K., et al. Effect of olprinone on liver microstructure in rat partial liver transplantation. J Surg Res. 183, 391-396 (2013).
  9. Wang, W., et al. Mesenchymal stem cells promote liver regeneration and prolong survival in small-for-size liver grafts: involvement of C-Jun N-terminal kinase, cyclin D1, and NF-kappaB. PLoS One. 9, e112532 (2014).
  10. Madrahimov, N., Dirsch, O., Broelsch, C., Dahmen, U. Marginal hepatectomy in the rat: from anatomy to surgery. Ann. Surg. 244, 89-98 (2006).
  11. Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28, 3-11 (2008).
  12. Kamada, N., Sumimoto, R., Kaneda, K. The value of hepatic artery reconstruction as a technique in rat liver transplantation. Surgery. 111, 195-200 (1992).
  13. Steger, U., Sawitzki, B., Gassel, A. M., Gassel, H. J., Wood, K. J. Impact of hepatic rearterialization on reperfusion injury and outcome after mouse liver transplantation. Transplantation. 76, 327-332 (2003).
  14. Huang, H., et al. A novel end-to-side anastomosis technique for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation to accommodate size mismatches between vessels. Eur Surg Res. 47, 53-62 (2011).
  15. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J.Invest Surg. 22, 445-451 (2009).
  16. Johnson, A. J., Stulting, R. D. Ophthalmic Microsurgical Suturing Techniques. Macsai, M. S. , Springer. Berlin Heidelberg. 21-28 (2007).
  17. Delriviere, L., et al. Detailed modified technique for safer harvesting and preparation of liver graft in the rat. Microsurgery. 17, 690-696 (1996).
  18. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. J Vis Exp. , (2012).
  19. Delriviere, L., et al. Technical details for safer venous and biliary anastomoses for liver transplantation in the rat. Microsurgery. 18, 12-18 (1998).
  20. Jin, H., et al. Preliminary experience of a PDCA-cycle and quality management based training curriculum for rat liver transplantation. J Surg Res. 176, 409-422 (2012).
  21. Selzner, N., Selzner, M., Tian, Y., Kadry, Z., Clavien, P. A. Cold ischemia decreases liver regeneration after partial liver transplantation in the rat: A TNF-alpha/IL-6-dependent mechanism. Hepatology. 36, 812-818 (2002).
  22. Tanaka, H., Hashizume, K., Enosawa, S., Suzuki, S. Successful transplantation of a 20% partial liver graft in rats: a technical innovation. J Surg Res. 110, 409-412 (2003).
  23. Bockhorn, M., et al. Erythropoietin treatment improves liver regeneration and survival in rat models of extended liver resection and living donor liver transplantation. Transplantation. 86, 1578-1585 (2008).
  24. Martins, P. N., Neuhaus, P. Surgical anatomy of the liver, hepatic vasculature and bile ducts in the rat. Liver Int. 27, 384-392 (2007).
  25. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  26. Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplant.Proc. 37, 185-188 (2005).
  27. Wain, R. A. J., Hammond, D., McPhillips, M., Whitty, J. P. M., Ahmed, W. Surgical Tools and Medical Devices. Ahmed, W., Jackson, M. J. , Springer International Publishing. 545-562 (2016).
  28. Huang, H., et al. Hepatic arterial perfusion is essential for the spontaneous recovery from focal hepatic venous outflow obstruction in rats. Am J Transplant. 11, 2342-2352 (2011).
  29. Czigany, Z., et al. Improving Research Practice in Rat Orthotopic and Partial Orthotopic Liver Transplantation: A Review, Recommendation, and Publication Guide. Eur Surg Res. 55, 119-138 (2015).

Tags

Medicin spørgsmål 134 levertransplantation hepatectomy re arterialization rat hepatisk fartøj delvis lever graft fartøj orienteret manchet anastomose
Re Arterialized rotte delvis lever Transplantation med en <em>i vivo</em> fartøj-orienterede 70% Hepatectomy
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chen, X., Yu, R., Xu, Z.,More

Chen, X., Yu, R., Xu, Z., Zhang , Y., Liu, C., Chen, B., Jin, H. Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy. J. Vis. Exp. (134), e56392, doi:10.3791/56392 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter