Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Yeniden Arterialized sıçan kısmi karaciğer nakli bir vivo içinde gemi odaklı % 70 ile Hepatectomy

Published: April 8, 2018 doi: 10.3791/56392
Automatic Translation
1, 2, 3, 3, 4, *1, *3
1Department of Surgery, The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, 2Reproductive Center, The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, 3Department of Transplantation, The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, 4Department of Surgery, Perelman School of Medicine at the University of Pennsylvania
* These authors contributed equally

Summary

Burada, yeniden arterialized sıçan kısmi karaciğer nakli ile ilgili bir protokol sunulmuştur. Özellikle, % 70 karaciğer rezeke vivo içinde gemi odaklı hepatectomy Güncellenme Zamanı bir tekniğin kullanmaktı. Hepatik arter bir uç-yan şekilde yeniden. Manşet tekniği infrahepatic vena cava anastomoz süresini kısaltmak için güncellenmiştir.

Abstract

Bölünmüş karaciğer nakli ve yaşam karaciğer bağışı karaciğer transplantasyonu klinikte karaciğer organları daha verimli bir şekilde kullanmak için geliştirilmiştir. Bu cerrahi arkasında mekanizması daha iyi anlamak için bir sıçan kısmi karaciğer transplantasyonu (PLTx) modeli ilgili cerrahi çalışmalar için kurulmuştur. Sıçan PLTx modeli karmaşıklığı nedeniyle, ayrıntılı açıklamalar ile bir protokol gereklidir. Bir makale yayınlanan daha önce % 50 sıçan PLTx ulaşmak için ex vivo hepatectomy kullanıldığı bir protokol bildirdi. Bu iletişim kuralı aksine, biz bir vivo içinde % 70 hepatectomy ile yeniden arterialized bir PLTx tanıttı. Güncellenme Zamanı bir gemi odaklı hepatectomy sıçan mikrocerrahi yordamı iyileştirmek için PLTx dahil oldu. Portal damarları ve hepatik arter sol yan lob ve medyan LOB tek tek parçalara ve böylece kalan karaciğer güdük kanama olasılığını azaltarak karaciğer parankimi kaldırılmasını önce bakmaksızın. Ayrıca, ortak hepatik arter ile genişlemiş uygun hepatik arter arasındaki bir uç-yan gemi anastomoz hepatik arter yeniden arterialize için kullanılmaya başlandı. Bu uç-yan gemi anastomoz tekniği kullanarak, anastomoz çapını, böylece el dikiş zorluğu azalan ve anastomoz a_ılabilinirse yüksek orandaki Bakımı genişletilmiştir. Ayrıca, infrahepatic vena kava manşet anastomoz biraz güncellenmiştir. Bir alıcının vena kava çevresinde çevresel karaciğer parankimi bir bölümünü vasküler Lümen üç boyutlu şeklini korumak için manşet anastomoz sırasında korundu. Karaciğer parankimi bu bölümünü anastomoz tamamlandıktan sonra kaldırıldı. Bu değişiklik ile kalış dikiş yerleşimini içeren adım, ihmal böylece daha da manşet anastomoz zaman kısaltma. Sıçan PLTx bu iletişim kuralını kullanarak, bir düşük karaciğer enzim düzeyi, sağlam bir karaciğer lobular mimari ve yüksek sağkalım oranı mikrocerrahi sonra elde edildi.

Introduction

Şu anda, bağışlanan karaciğer organ sayısı ile bağışlanan bir karaciğer için bekleyen hasta sayısı arasında büyük farklılık yoktur. Karaciğer organ sıkıntısı küresel bir sorundur. Donör havuzu genişletin, karaciğer transplantasyonu (LTx) ve canlı donör LTx bölmek için kısmi bir karaciğer nakli1olarak kullanmak için geliştirilmiştir.

Kısmi karaciğer transplantasyonu (PLTx) arkasında mekanizması daha fazla araştırmak için kurulan2,3,4,5ilgili hayvan modelleri olmuştur. Fare PLTx, karaciğer lobları canlı donör LTx koşulları taklit ve LTx, sırasıyla, insanda bölmek için rezeke vivo içinde ve ex vivo vardır. Bir kağıt olarak Görüntülenmiştir deneyler günlük Yayınlanan % 50 ispiyoncu PLTx ex vivo hepatectomy5kullanarak içeren detaylı bir protokol sundu. Ancak, bir vivo içinde hepatectomy bir fareyle PLTx henüz görüntülenmeyecektir literatürde bildirilmemiştir.

Vivo ve ex vivo hepatectomies arasındaki fark yanı sıra, bir hepatectomy sahne tekniği de sonucunu PLTx. şu anda, PTLx sıçan kullanarak birçok cerrahi çalışmalarda belirlemede önemli bir rol oynar model, karaciğer lobları karaciğer LOB2,3,6,7,8,9Transpediküler basit bir ligasyonu koyduktan sonra rezeke. Ancak, rezeksiyon farklı karaciğer lobları olarak tüm karaciğer lobları için uygun değildir önce basit bir ligasyonu yerleştirerek farklı şekil ve boyutlarda vardır. Medyan LOB basit bir ligasyonu üssünde vena kava, sonunda kısmi karaciğer nakli10,11çıkış etkileyebilecek bir daralma neden bir yüksek risk taşır. Bu nedenle, fare hepatik anatomi bilgisine dayalı bir güncelleştirme hepatectomy tekniği sıçan PTLx alanında gereklidir.

Bu çalışmada açıklanan protokolünde Güncellenme Zamanı bir gemi odaklı % 70 hepatectomy sıçan PLTx yordam dahil oldu. Portal damarları ve hepatik arter sol yan lob (LLL) ve medyan LOB (ML) disseke ve ayrı ayrı karaciğer parankimi kaldırılmasını önce ayrıldı. O zaman, LLL ve ML hepatik damar dikiş piercing tarafından tane. Bireysel d ve birden çok delici dikiş yerine kullanarak tarafından basit bir ligasyonu yerleştirerek, ML kalıntısı güdük vena kava yayılmış başardı. Bu nedenle, cerrahi ligasyonu tarafından neden infrahepatic vena kava daralma kaçınılması. Ayrıca, tıkanıklığı karaciğer parankimi kaldırılması böylece deneyler11kan kaybı etkisi en aza indirerek kalan karaciğer stump, kanama oranı azalmıştır önce bireysel d tarafından LLL ve ML kan arz.

Microsurgeons için bir karaciğer nakli uygun hepatik arter (PHA) bu geminin son derece küçük çaplı nedeniyle yeniden oluşturmak için önemli bir sorundur. LTx yeniden arterialization gerçekten gerekli olup olmadığı sorusu hala tartışma12,13,14altında olsa da, hepatik arter yeniden inşa için sayısız mikrocerrahi teknikleri önerilen14 olmuştur . Burada, bir uç-yan şekilde genişlemiş PHA ortak hepatik arter (CHA) anastomoses karaciğer nakli yeniden arterialization bir roman tekniği tanıtmak. Bu uç-yan tekniği kullanarak, iki hepatik arterler daha büyük çaplı bir anastomoz ile bağlanır. Anastomoz çapı daha büyük olduğunu, el dikiş daha kolay gerçekleştirmek için ve büyük anastomoz a_ılabilinirse iyileşme olur.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Tüm yordamları kemirgen cerrahi Wenzhou Tıp Üniversitesi hayvan ilke ve refahı Komitesi 15tarafından onaylanmış yönergeleri takip etti.

1. hayvanlar

  1. Bağış ve alıcıların 250-350 g ağırlığında erkek Lewis rats kullanın.

2. ameliyat çevre

  1. 7 X 20 X arasında değişen bir büyütme ile cerrahi mikroskop altında tüm mikrocerrahi yordamları gerçekleştirin. Operasyonda kullanmadan önce tüm cerrahi aletler sterilize.
    Not: Ameliyathane ve ameliyat masasına temiz ancak değil steril değildir.

3. temel mikrocerrahi manevralar

  1. Ücretsiz, incelemek ve gemi seferber.
    1. İlk olarak, düz mikro-forseps çevreleyen doku gemide kaldırmak için kullanın.
    2. İkinci olarak, tekrar tekrar ve yavaşça açıp öyle ki iyi ipuçları kesmek ve çevreleyen doku geminin ön duvarında soyma eğri mikro-forseps ipuçları kapatın.
    3. Üçüncü olarak, düz mikro-forseps kelepçe ve arka alan açığa çıkaracak olan gemi Asansör için kullanın. Sonra gemi posterior duvarda çevreleyen doku soyma için eğri mikro-forseps ipuçlarını kullanın. Son olarak, herhangi bir çevreleyen doku bağlı olmadan kel bir gemi sunulmalıdır.
  2. Bölmek veya çift ligate ve bir gemi veya doku bölün.
    1. İlk olarak, gemi veya iki mikro-forseps16kullanarak doku üzerinde iki kare knot kravat. İkinci olarak, gemi veya mikro-makas kullanarak iki kare düğümleri arasındaki doku kesti.

4. kol ve safra Stent hazırlanması

  1. Portal ven kelepçelerin olun ve infrahepatic vena kava 12'lik ve 14'lük intravenöz Kateterler, sırasıyla, safra stent kullanılan kullanırken bir 22'lik intravenöz kateter. Kelepçeleri bir vücut parçası ve kolu bölümü oluşur. Bir silindir başlı kol düğmesi (şekil 1) gemi duvara güvenliğini sağlamak için vücut parçası üzerinde kullanın.

5. anestezi ve fareler fiksasyonu

  1. Yavaşça Lewis fare ile %5 isoflurane inhalasyon anestezi ikna etmek için 0,5 L/dak oksijen ile karışık bir indüksiyon kutuya koyun. Aşırı dozda isoflurane tarafından neden beklenmedik ölümü önlemek için fareyi solunum sıklığını izlemek. İsoflurane 2 anestezi değiştirirken, fareyi ağrı uyarmaya yanıt vermiyor % konsantrasyon azaltmak.
  2. Steril cerrahi hasır havlu tarafından örtülü bir 30 cm x 30 cm meşe tahta fare taşımak ve fare sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Medial bant kullanarak fare dört ekstremitelerin kravat ve daha sonra kaseti dört raptiye ile düzeltmek. % 70 alkol kullanarak cilt dezenfekte zaman ve iodophors üç kez.

6. donör işlemi

  1. Operatif alan açığa
    1. Enine küçük bir insizyon attım bir elektrik coagulator kullanarak bilateral inferior epigastrik damarları transect için üst karın bölgesinde kesti.
    2. Cerrahi makas kullanarak üst karın üzerinde kostal kenar boşluğu yakın enine kesi genişletir.
    3. Ters ve üst karın duvarı ve xiphoid süreci, sırasıyla, kafatası tarafına düzeltin.
    4. Bağırsak karın boşluğu iki ıslak pamuk çubuğu ile dışarı taşıyın. Gazlı bez ıslak bir parça kullanılarak bağırsak kapsar.
  2. Ligament kesme ve suprahepatic vena kava (SHVC) düzeltme
    1. Sırayla kestim falciformal bağ, koroner bağ ve üçgen bağ.
    2. Ücretsiz soldaki diyafragmatik mikro-forseps kullanarak diyaframdan damar. O zaman, çift 6-0 ipek sütür kullanarak ligate.
      Not: Bu adımda bu ven bölün değil.
    3. Ücretsiz aşağı kaudat LOB ve hepatoesophageal bağ ve Arter için mikro-makas kullanma belgili tanımlık gastrohepatic kiriş kesti.
  3. LLL ve ML kan akımı rezeksiyon (Şekil 2) önce occluding
    1. İlk olarak, kıvrımlı pensler LLL ve sol medyan LOB (hayatımı seviyorum) parankimi verir PV ortak gövde arka duvarına dikkatle incelemek için kullanın. İkinci olarak, çift ligate ve karşılık gelen safra kanalını ve hepatik arter ile birlikte bölün.
    2. İncelemek ve bu damar yakından karaciğer parankimi bağlıdır çünkü RML PV yavaşça ayırın.
      Not: 14 X büyütme önerilir. PV RML BD yakın sağ üst LOB zarar değil.
    3. Hepatik arter ve safra kanalını RML PVs arasında yer alan RML, tanımlamak ve hayatımı seviyorum. Çift ligate ve hepatik arter ve 6-0 ipek sütür kullanarak RML safra kanalını bölün.
      Not: LLL ve ML renkten koyu Kızıl, yani kızıl bir değişiklik başarılı tıkanıklığı kan akımı bir göstergesidir. Vasküler anatomisi hakkında eksiksiz bilgisi belirlenmesi ve karşılık gelen gemiler dissekan için esastır. Sıçan bir önceki çalışmada açıkça karaciğer anatomi korozyon yayınları10tarafından resimli.
  4. LLL sanıyordum
    1. Bir çevresel 3-0 ipek sütür sol yanal hepatik ven kan akışının doldurmak kullanarak LLL Transpediküler ligate. Mikro-makas kullanırken, Karaciğer karaciğer kitle kaldırmak için ligasyonu hemen yukarıda kesmek.
  5. Aşk hayatım sanıyordum
    1. Sivrisinek Kan durdurucu sargı forseps medyan yarığın (şekil 3A) yerleştirilen tarafından sol medyan hepatik ven kelepçe. Tüm karaciğer parankimi aşk hayatımı hemen üzerindeki mikro-makas kullanarak forseps kaldırmak.
    2. Yer altında hemen sol medyan hepatik çevreleyen forseps karaciğer parankimi nüfuz delici dikiş damar. Sonra bir kare forseps serbest bırakmadan önce ligate için düğüm.
    3. Başka bir iki delici dikiş açık belgili tanımlık kesme aşk geri kalanı benim hayatı çevreleyen forseps altında yerleştirin. O zaman, belgili tanımlık kesme kalan kapatmak için iki kare knot kravat. Yayın için kanama kontrol etmek için sivrisinek Kan durdurucu sargı forseps.
  6. RML (şekil 4) sanıyordum
    1. Sivrisinek Kan durdurucu sargı forseps RML SHVC (şekil 4B) için 0.5 cm uzaklıkta temelini çevreleyecek biçimde yerleştirin. O zaman, çapraz-kelepçe şu medyan hepatik ven doldurmak için sivrisinek Kan durdurucu sargı forseps kullanarak Bankası.
    2. Mikro-makas kullanarak, tüm RML forseps üst yüzeyi boyunca karaciğer parankimi kaldırmak. Çok sade ve ince güdük bir pipet bırakarak forseps, yüzeye yakın çalışmak emin olun.
    3. Orta medyan hepatik çevreleyen için yer altında forseps karaciğer parankimi delici ilk delici dikiş damar. Sonra bir kare orta medyan hepatik ven ligate için düğüm. Aynı yöntemi kullanarak şu medyan hepatik ven ligate ikinci delici dikiş yerleştirin. Başka bir iki delici dikiş 6.5.2 açıklamasında takip kesi geri kalanını yakın yerleştirin.
  7. İnfrahepatic vena kava (IHVC) düzeltme
    1. IHVC ortaya çıkarmak için retroperitoneum kesmiş. Eğri mikro-forseps ücretsiz olarak IHVC ve çevreleyen doku üzerinden Sağ renal ven için kullanın. İncelemek ve arka IHVC içine akmak şu adrenal ven ligate.
    2. Doğru nefrektomi Sağ renal ven ve IHVC üzerine kol daha sonraki bir adımda yüklemek için yeterli damar uzunluğu kaydetmek için sağ renal arter birleştirilmesi (ligasyon) sonra gerçekleştirin.
  8. Safra stent yükleme
    1. Ortak safra kanalını (CBD) mikro-forseps kullanarak ilk karaciğer hilus seferber. Pilor damarın çapraz noktada CBD ve 6-0 ipek dikiş kullanarak CBD ligate.
    2. CBD ligasyonu proksimal tarafındaki ön duvarında enine bir kesi kesti. 22'lik intravenöz kateter yolu ile belgili tanımlık kesme CBD Lümen içine yapılan safra stent, yerleştirin. Bir çevresel ile safra stent 6-0 ipek sütür güvenli. Transect CBD arasında iki 6-0 ipek sütür.
  9. PV kırpma
    1. 6-0 ipek dikiş PV için distal kullanarak Pilor ven ligate. Ardından, 7-0 polipropilen sütür PV yakın kullanarak Pilor ven ligate. Bu iki d arasında Pilor ven transect. Çift ligate ve splenik ven aynı şekilde bölün.
      Not: 7-0 polipropilen sütür ligate 6-0 ipek sütür ile kıyasla daha küçük bir tüp ligasyonu düğüm yapın yapabilmesi için kullanın. Büyük bir düğüm son adımda manşet kurulumu ile girişime neden olabilir. Pilor ven ve splenik ven damar duvarına ince, bu yüzden nazik manipülasyonlar sırasında diseksiyon gereklidir. Daha fazla teknik açıklamaları ve illüstrasyonlar anatomi ve Pilor ven ve splenik ven bölme hakkında daha önce yayımlanmış bir makaleye işlem17önce okunmalıdır.
  10. Ortak hepatik arter (CHA) bağlı olan Temizleme taşları
    1. Dikkatle CHA ve onun iki bifurcations, PHA ve gastroduodenal arter (GDA), iki mikro-forseps kullanarak çevre dokudan ücretsiz. Çift GDA CHA çatallanma, 6-0 ipek sütür kullanarak GDA ligate.
  11. Heparinizing ve karaciğer nakli Ventriküler
    1. 50 IU salin penis damar yolu ile 1 ml heparin enjekte. Sistemik heparinization elde etmek 5 dakika bekleyin.
    2. Çapraz-kelepçe PV, IHVC ve hepatik kan akımı doldurmak için üç eğri mikro-serrefines kullanarak CHA. Küçük bir insizyon attım bir 22'lik kateter eklemek için PV ön duvarında gerçekleştirin. Kısmi karaciğer nakli 20 cmH2O. baskısı altında kateter yolu ile 4 ° C'de salin ile sıvı
    3. Hızla kesik göğüs boşluğuna ve İntratorasik vena cava kan ve perfusate boşaltmak için Cerrahi makas kullanarak açın. Perfüzyon tüm kısmi karaciğer grefti rengini düzgün sarı hale gelene kadar sakın durma.
  12. Kısmi karaciğer nakli explanting
    1. Mikro-makas kullanarak iki d (açıklandığı 6.2.2) arasında sol diyafragmatik ven transect.
    2. Daha sonra damar uzunluğu mümkün olduğunca tutmaya SHVC diyafram yakın transect. Mikro-makas kullanarak splenik ven düzeyinde PV transect. GDA çift d arasında bölmek ve çölyak gövde yakın CHA transect.
    3. 6-0 ipek ligasyonu 6.7.2 içinde yer distal tarafındaki adrenal damarları transect. Cerrahi makas kullanırken sol renal ven düzeyinde IHVC transect.
    4. Tüketim ve transfer arka-tablo çanak (30 mm kültür çanak) kısmi karaciğer serum 4 ° C'de dolu

7. geri-tablo işlemi (greft hazırlık)

  1. Vasküler kelepçeleri (şekil 5) yükleme
    1. PV bir 12-gauge intravenöz kateter mikro-forseps kullanarak yapılan bir manşet Lümen üzerinden çek. Geçici olarak tamir manşet kolu ve birlikte bir damar kıskacı kullanılarak PV. Manşet dış yüzeyi kapsayacak şekilde PV damar duvar çıkar. Gemi duvar ve kol sirkumferansiyel 6-0 ipek sütür ile pozisyonda güvenli.
      Not: geminin büküm değil. Manşet kolu saat 12 yönünde tutulmalıdır.
    2. 7.1.1 yer alan açıklamalar takip IHVC manşet yükleyin.
  2. SHVC üzerine iki konaklama dikiş iyileştirilir
    1. SHVC gemi duvar nüfuz üzerinden dışında için iki kullanarak içinde 7-0 polipropilen 03: 00 ve 09: 00 yön, sırasıyla tasarlamak.
      Not: bir düğüm kravat değil.
  3. Dokuları koruyarak
    1. Kısmi karaciğer grefti arka-tablo işlemi sonra korunmasına ilişkin 4 ° C'de serum içinde bırakın.

8. alıcı işlemi

  1. 6.1 6.2 ve operatif bu alanın ortaya çıkarmak için alıcı içinde doğru nefrektomi dışında 6,7 yordamlarda ligament transect ve damarlara trim yineleyin.
  2. IHVC, safra kanalını, hepatik arter ve alıcının portal ven hazırlanıyor
    1. İlk olarak, sağ renal ven aşağı IHVC bölümünü seferber. İkinci olarak, 6-0 ipek dikiş kullanarak şu adrenal damarları ligate. Üçüncü olarak, mikro-forseps kullanarak ilk karaciğer hilus üzerinden CBD seferber.
      Not: CBD çevresinde yağ dokusunda kapalı döşeme değil.
    2. 6-0 ipek dikiş kullanarak Çift Kişilik ligasyonu sonra karaciğer hilus içinde çatallanma ilk, CBD transect. O zaman, mikro-makas 6-0 ipek dikiş kullanarak Çift Kişilik ligasyonu sonraki kullanarak PHA transect. Karaciğer hilus üzerinden PV Pilor ven için bölümünü seferber.
  3. Karaciğer arkası seferber
    1. Alıcının sol tarafında iki pamuk çubuğu kullanarak karaciğer geri çek. Sonra karaciğer arka belgili tanımlık kiriş SHVC şu adrenal ven bir önceki görüntülenmeyecektir makale18' açıklandığı gibi kesti. Bundan sonra bir lastik bant SHVC arka uzayda tanıtmak.
  4. Aletleri ve malzemeler anhepatic aşamasında hazırlanması
    1. Tüm aletler ve malzemeler anhepatic aşamasında, kavisli iğne ile 5 mL şırınga gibi gerekli kullanılabilirliği, mikro-makas, mikro-iğne tutucu, mikro-forseps, iki mikro-hemostatik forseps, iki 7-0 polipropilen sütür ve 6-0 yeniden denetle İpek suture maddi.
      Not: malzeme ve aletleri için arama anhepatic faz uzatmak.
  5. Alıcının karaciğerde bilincin
    1. Çapraz-kelepçe IHVC hemen bir gemi kelepçe ve PV hemen üstündeki Pilor damar kullanarak renal ven yukarıda. Kayıt anhepatic faz PV üzerinde kelepçe yayımlanıncaya kadar bu andan itibaren süresi.
    2. İsoflurane %0,5 konsantrasyon hemen azaltın.
    3. SHVC ve diyafram tarafından önceden ayarlanmış lastik bant aşağı çekin. Diyafram ile birlikte SHVC için 0.5 cm mesafe bakımı bir Bulldog kelepçe kullanarak İntratorasik vena kava bölümlerini kelepçe.
      Not: fareyi akciğer kelepçe değil.
    4. Mikro-makas kullanılarak, mümkün olduğunca vasküler duvar tutmak için dikkatli bir şekilde karaciğer parankimi üst kenarı boyunca SHVC damar duvarına kesme.
    5. Mikro-makas kullanarak karaciğer hilus ilk çatallanma, PV transect. O zaman, inferior vena kava sağ inferior LOB parankimi yerine vena kava çevresinde çevresel karaciğer parankimi bırakarak damar duvarında transect. Kesme kenarı sağ inferior LOB olarak 4 mm için IHVC unutmayın. Gemilerin transecting sonra bütün karaciğer karın boşluğu dışına taşıyın.
  6. SHVC yeniden yapılandırma
    1. Kısmi karaciğer grefti karın boşluğu orthotopically yerleştirin. SHVC içinde için dışında iki önceden ayarlanmış kal dikiş kullanarak 03: 00 ve 09: 00 yön boyunca damar duvarı delip. Bir düğüm kendi amaçları ile içine bağlılar sonra sağ ve sol iki konaklama dikiş çek.
    2. Sağ kalmak dikiş iğne damar Lümen tanıtmak için saat 3'te yönde SHVC gemi duvardan dışarı için iç düğüm yakın pierce.
    3. Saat 9 yönüne saat 3 yönden Lümen damar içinde çalışan dikiş tarafından SHVC arka duvarına anastomose.
    4. Saat 9 yönüne köşesinde, gemi duvardan içeri için dışarıda iğne damar lümen dışarı tanıtmak için düğüm yakın pierce.
    5. Bu dikiş 3 saat 9'dan yönden Lümen vasküler dışında çalışan dikiş kullanarak ön duvar anastomose kullanmak yönünde yön. Son olarak, dikiş, kendi son ile 3 kez kravat (şekil 6).
      Not: 3-5 mL serum dışarı hava kabarcıkları önce son 2-3 dikiş zorlamak için yeniden oluşturulan SHVC Lümen enjekte. SHVC anastomoz daha ayrıntılı bir açıklama-ebilmek bulunmak içinde belgili tanımlık eşya tarafından Delriviere vd. 19.
  7. PV yeniden yapılandırma
    1. PV alıcının 7.2 açıklamasında takip sonunda iki 7-0 polipropilen kalış dikiş yerleştirin. İki konaklama dikiş damar duvar genişletmek için ters yönde çek. İki mikro-sivrisinek Kan durdurucu sargı forseps kullanarak iki konaklama dikiş düzeltmek.
    2. Hava kabarcıkları zorlamak için alıcının PV vasküler Lümen içine yaklaşık 1 mL serum enjekte. Hızlı bir şekilde alıcının mikro-forseps kullanarak açıldığında zorlamak için PV vasküler Lümen portal ven manşet takın. Çevresel 6-0 ipek dikiş kullanarak manşet anastomoz güvenli. Çapraz-kelepçe CHA.
  8. Reperfüzyon karaciğer nakli için
    1. SHVC ve PV kıskaçları sağlanması karaciğer nakli için sırada. Anhepatic faz zamanını kaydetmek. Anastomoz kanama için kontrol edin. İsoflurane fare tepki ağrı uyarılması için göre % 1-2 konsantrasyonu artırmak.
  9. IHVC yeniden yapılandırma
    1. 1 mL serum fizyolojik içinde hava kabarcıkları zorlamak için alıcının IHVC vasküler Lümen içine enjekte. Manşet sirkumferansiyel karaciğer parankimi (Şekil 7) tarafından desteklenen IHVC silindirik vasküler Lümen içine yerleştirin. 6-0 ipek sütür IHVC arka uzayda tanıtmak. Hızlı bir şekilde 6-0 ipek dikiş kullanarak manşet anastomoz güvenli.
    2. İki gemi kıskaçları perfüzyon yeniden başlatmak için IHVC içinde. Çevredeki karaciğer parankimi dikkatle mikro-makas kullanarak sirkumferansiyel ipek dikiş yukarıda kapalı döşeme.
  10. Hepatik arter yeniden yapılandırma
    1. Karaciğer grefti CHA damar duvar nüfuz üzerinden dışında için iki kullanarak içinde 11-0 polipropilen 03: 00 ve 09: 00 yön, sırasıyla tasarlamak. İki eğri mikro-serrefines kullanan alıcı CHA ve GDA kan akışında doldurmak.
    2. Mikro-makas kullanarak vasküler Lümen ortaya çıkarmak için alıcının kendi kök, PHA transect. Karaciğer grefti CHA çapı boyuna karşılamak için gemi duvar parçası kesme tarafından alıcının PHA vasküler Lümen büyütmek.
    3. Karaciğer nakli için genişlemiş PHA CHA bir uç-yan şekilde SHVC anastomoz (8.6.2-8.6.7) açıklanan çalışan dikiş tekniği kullanılarak anastomose.
      Not: Ayrıntılı çizimler Huang ve ark14tarafından makalesinde bulunabilir.
  11. CBD yeniden yapılandırma
    1. Bağırsak, safra kanalını iki ucu arasındaki uzaklığı azaltmak için karın boşluğu içine geri taşıyın. Alıcının safra kanalı ön duvarında enine bir kesi gerçekleştirin.
    2. Kısmi karaciğer grefti safra stent alıcının enine kesi ile safra kanalı Lümen içine eklemek için aşağı çekin. 6-0 sirkumferansiyel ipek dikiş kullanarak stent güvenli.
    3. İki 6-0 sirkumferansiyel ipek dikiş safra kanalını anastomoz gerilimi azaltmak için birbirine bağla.
  12. Karın kapanış
    1. Karın içinde iki kat 3-0 ipek sütür çalışan dikiş deseni kullanarak kapatın.

9. ameliyat sonrası tedaviler (analjezi ve antibiyotik)

  1. Tüm alıcılar ile 0.1 mg/kg buprenorfin subkutan tedavi. Sefuroksim (16 mg/kg) subkutan yanı sıra analjezik ilacı vermek. Musluk suyu ve standart laboratuvar fareler ad libitumiçin hayvan yemek sunuyoruz.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Toplamda, bu iletişim kuralını kullanan syngeneic arterialized sıçan PLTx 31 olgu tamamlandı. Tüm alıcıların gözlem kıyamete kadar hayatta kaldı. Vücut ağırlığı alıcıları ile ameliyat sonrası (POD) 4 gün sonra geri başladı. Vücut ağırlığı eğimi normal Lewis ispiyoncu yakın POD hangi dolaylı olarak alıcı kurtarılması ima 6'dan sonra (şekil 8) olduğunu. Histolojik olarak, safra kanalını hafif bir proliferasyon alan kimse içinde gözlendi ve karaciğer lobular mimari alıcıların bozulmamıştı. Hiçbir nekroz veya açık sinüsoidal dilatasyon (Şekil 9) gözlenmiştir. Alanin aminotransferaz (ALT) serum düzeyi POD 30 (şekil 10) normal sınırlarda idi. Hiçbir durumda sarılık tarafından neden sarı idrar safra stent a_ılabilinirse gösteren hangi günlük yatak takımları kafes kontrol ederek belirtildi, bu alan kimse içinde tespit edildi. POD 30 bilirubin normal serum düzeyini daha da safra kanalını (Şekil 11) başarılı yeniden inşası doğruladı. Hepatik arter a_ılabilinirse PHA Proksimal Anastomoz tarafında fedakarlık sırasında transecting tarafından kontrol edildi. PHA kanama anastomoz a_ılabilinirse ima alıcıların, toplamda gözlendi. Tüm bu sonuçları karaciğer nakli de görev önerdi.

Anhepatic faz ortalama süresi olduğunu 23.03 ± 2.3 min. IHVC manşet anastomoz sadece 2.05 ± 0,71 dk. ile karşılaştırıldığında manşet anastomoz ile PV, kalış dikiş yerleştirerek adım kurtardı IHVC manşet anastomoz aldı ve böylece daha fazla anas kısaltılmış 4,68 ± 0,77 min, PV manşet anastomoz aldı tomosis zaman (Tablo 1).

ML kalıntısı güdük % 70 hepatectomy sırasında kanama iki olgu gemi odaklı hepatectomy 31 olgular arasında gözlendi. Önceki bir denemede ML kalıntısı güdük kanama 8 dışarı-in 18 gemi odaklı hepatectomy (şekil 12) parankimi koruyarak durumlarda gözlendi. Bu sonuç ML kalan karaciğer güdük gemi odaklı % 70 hepatectomy kullandıktan sonra kanama daha düşük bir hız gösterilir.

Figure 1
Resim 1 . Manşet ve safra stent.
(A, C) Kelepçeleri boyutu. (B) silindir başlı veresiye. (D) vücut parçası ve manşet parçası tanıtıcı. (E) (a) IHVC kol; (b) PV manşet. (F) safra stent. Ölçek çubuğu 5 mm. = Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 2
Resim 2 . LLL ve ML kan temini doldurmak için.
(A) PV, hepatik arter ve safra ortak gövde LLL koli ve hayatımı seviyorum.
(B) LLL renk değişikliği ve ortak gövde transecting sonra hayatımı seviyorum.
(C) RML portal ven.
(D) Tüm PVs, hepatik arter ve safra kanalları LLL ve ML kopuk.
Ölçek çubuğu 5 mm. kısaltmalar =: sol yan lob, ML medyan LOB, LLL seviyorum benim yaşam sol medyan LOB, RML şu medyan LOB, RSL sağ üst LOB, RIL sağ inferior LOB, SCL üstün kaudat LOB. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 3
Şekil 3 . Sol medyan LOB çıkarabileceğim için.
(A) karaciğer kitle aşk hayatımı hemen üstündeki forseps çıkarabileceğim.
(B) yer üstünde belgili tanımlık kesme üç delici dikiş. (Image 1)
Ölçek çubuğu 5 mm. kısaltmalar =: RML medyan LOB, RSL şu üstün sağ LOB, RIL sağ alt LOB, SCL üstün kaudat LOB. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 4
Şekil 4 . Şu medyan LOB (RML) çıkarabileceğim için.
(A) RML tabanı.
(B) Sivrisinek hemostaz forseps RML tabanı etrafında yerleştirin.
(C) RML karaciğer parankimi hemen üstündeki forseps çıkarabileceğim.
(D) Kalan karaciğer doku düz ve ince tabakası üzerinde SHVC bırakın.
Ölçek çubuğu 5 mm. kısaltmalar =: ML medyan LOB, RSL sağ üst LOB. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 5
Şekil 5 . Manşet yüklemek için.
(A) bir manşet Lümen ile PV çek.
(B) manşet kolu ve PV birlikte bir gemi kelepçe tarafından tamir.
(C) Evert PV vasküler duvar manşet dış yüzeyi kapsayacak.
(D) vasküler duvar ve kol pozisyonda güvenli.
Ölçek çubuğu 5 mm. = Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 6
Şekil 6 . SHVC birleştirmeye.
(A & B) İki konaklama dikiş sağ ve sol, sırasıyla çek.
(C) Anastomose posterior duvar vasküler Lümen içinde çalışan dikiş tarafından SHVC.
(D) SHVC vasküler lümen dışarı ön duvarına anastomose.
Ölçek çubuğu 5 mm. = Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 7
Şekil 7 . IHVC birleştirmeye.
(A) bir silindirik vasküler Lümen alıcı IHVC.
(B) IHVC manşet anastomoz güvenli.
(C) reperfüzyon başlatın.
(D) çevreleyen karaciğer parankimi sirkumferansiyel ipek dikiş yukarıda kapalı trim.
Ölçek çubuğu 5 mm. kısaltmalar =: PV portal ven, IHVC aşağı infrahepatic vena kava, RIL sağ alt LOB. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 8
Şekil 8 . Ameliyat sonrası vücut ağırlığı kurtarma.
Vücut ağırlığı alıcılar ile ameliyat sonrası 4 gün sonra geri başladı. Vücut ağırlığı eğimi olan dolaylı olarak alıcı kurtarılması ima Lewis sıçan ameliyat sonrası gün 6, sonra yakın olduğunu.

Figure 9
Şekil 9 . 30 gün sonra karaciğer grefti Histoloji.
Histoloji, safra kanalını hafif bir proliferasyon alıcılar gözlendi ve karaciğer lobular mimari alıcılarının bozulmamıştı. Hiçbir nekroz veya açık sinüsoidal dilatasyon (400 X) gözlenmiştir. Ölçek çubuğu = 20 um Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 10
Şekil 10 . ALT. serum düzeyi
ALT serum düzeyi POD 30 normal sınırlarda idi. (**, P < 0,05).

Figure 11
Şekil 11 . Serum bilirubin düzeyi.
Bilirubin POD 30 serum düzeyi normal Lewis ispiyoncu karşılaştırılabilir (P > 0.05).

Figure 12
Şekil 12 . Kanama oranları farklı yöntemlerinden birini hepatectomy.
ML kalan karaciğer güdük kanama daha düşük bir oranı gemi odaklı % 70 hepatectomy kullanarak yönteminde gözlendi.

Yordamlar Karaciğer Temizleme SHVC anastomoz PV anastomoz IHVC anastomoz Anhepatic zaman
Süre (dakika) 2.62±0.46 15.73±2.05 4.68±0.77 2.05±0.71 23.03±2.30
Veri Mean±SD içinde ifade edildi

Tablo 1. Bireysel cerrahi işlemler zaman anhepatic aşamasında

Table 2
Tablo 2. Sıçan PLTx iki görüntülenmeyecektir protokol arasındaki fark. Bu tablo daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.


Ek materyalleri

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Sıçan PLTx yüksek maliyet ve uzun süre20içinde bir eğitim programı ile sofistike bir mikrocerrahi işlemdir. Sıçan PLTx Protokolü karmaşıklığı araştırmacılar bu hayvan modeli kullanmasını engelledi. Tam boyutlu fare LTx ile karşılaştırıldığında, sıçan PLTx microsurgeon sadece bir nakli prosedürünün meydan aynı zamanda küçük bir hayvan karaciğer rezeksiyonu meydan sunar. Bu nedenle, tüm prosedürü ayrıntılı olarak açıklayan bir görüntülenmeyecektir mikrocerrahi bu karmaşık bir modeli oluşturmak için temel kuralıdır. Daha önce görüntülenmeyecektir bir makale Nagai vd tarafından bildirilen % 50 kısmi orthotopic LTx bir protokol hepatik arter yeniden yapılanma fareler5 (Tablo 2) mevcuttur. Bu iletişim kuralı için prosedürü klinik olarak benzer bir ex vivo hepatectomy kullanılan LTx bölme.

Split ile karşılaştırıldığında arka-tablo işlemi karaciğerde yarma yerine canlı donör kısmi karaciğer grefti donör LTx yaşayan LTx, resects. Vivo karaciğer rezeksiyonu daha fazla cerrahi işlemler, daha uzun portal hipertansiyon ve kısmi karaciğer nakli için daha sıcak iskemi yaralanma neden olabilir. Bu nedenle, birkaç in vivo hepatectomy kullanan modelleri ilgili çalışmalar6,8,21',22kurduk PLTx fare. Birçok iletişim kuralları basit ligasyonu Transpediküler veya taban2,3,6,8,21,23, sonra karaciğer LOB rezeksiyonu içerir. Ancak, farklı karaciğer lobları farklı şekiller vardır. Fareyi ML geniş bir yarı o çevreler vena kava10,24temel vardır. Basit bir ligasyonu ML tabanında kolayca yerleştirerek inferior vena sıkışıyor. Vena kava daralma önlemek için Madrahimov vd. geliştirilen dört delici sütür odasına parankimi yapıldıktan, ML kalıntısı güdük düz bırakarak sonra ML 2 adımda kaldırmak için bir parankimi koruyarak gemi yönelik hepatectomy 10. ancak, delici dikiş tarafından bakmaksızın karaciğer lobları PVs parankimi içinde gizli durumda. Eksik veya PV küçük dalları yaralanmasına neden kalan güdük kanama tamamen kaçınılmalıdır 11olabilir. Bizim iletişim kuralında, karşılık gelen PVs ve hepatik arterler daha önce disseke. Sonra kan akımı rezeke karaciğer LOB tek tek d rezeksiyon önce tarafından tıkandı. Bu nedenle, kalan güdük kanama oranı bizim Protokolü (şekil 10) kullanarak indirdi. Dört delici dikiş ML güdük içinde yerleştirme tekniği bizim iletişim kuralında hepatik damar değil PV ve hepatik arter ligate için istihdam edildi. Birden çok delici dikişler ve step-wise rezeksiyon kullanarak bu d ile kalan karaciğer güdük düz şekil, hangi vena kava daralma kaçınılması devam edildi.

IHVC imar için Kamada vd tarafından açıklanan manşet anastomoz için hafif bir değişiklik yapıldı 25. alıcının inferior vena kava parankimi sağ inferior LOB yerine bir çevresel karaciğer parankimi vena kava çevresinde yaptı IHVC gemi içinde geçmiş. Karaciğer parankimi vena kava çevresinde silindir şeklinde alıcının IHVC vasküler ucunun yerine düz bir şekli korumak yardımcı oldu. Bu nedenle, IHVC Lümen doğal olarak kalış dikişler ve forseps yardımı olmadan açıldı. Bu değişiklik konaklama dikiş yerleştirerek adım yardımcı oldu ve IHVC manşet alıcının vasküler Lümen içine ekleme kolaylaştırdı. Ayrıca, bu değişiklik böylece manşet anastomoz sırasında iki ucu arasındaki gerginlik azaltmak IHVC, damar uzunluğu uzun.

Hızlı vasküler anastomoz avantajı ile iki-manşet tekniği sık PV ve IHVC anastomosing sıçan orthotopic LTx kullanılır. Onun vd. PV, IHVC ve SHVC anastomose için üç-manşet tekniği içeren bir protokolü teklif bile. Ancak, manşet tekniği kendi dezavantajları da vardır. İlk olarak, sabit bir boyutu olan bir manşet mükemmel karşılık gelen gemi boyutunu sığamaz. Buna ek olarak, manşet tekniği kan akımı, tromboz ve yabancı cisim reaksiyonu manşet26daha yüksek insidansı sonuçlanan rahatsız ediyor. SHVC, fare, bir ana gemi yüksek kan akışı gösterir. Herhangi bir daralma veya biatriyal Trombus bu gemi şiddetli Postoperatif komplikasyonlara neden olabilir. Bu nedenle, bizim PLTx iletişim kuralında, fiziksel ayarı için mümkün olduğunca yakın anastomoz düzeltilmesi için sağlar SHVC yeniden oluşturmak için el dikiş tekniği kullanmak için seçin. Ancak, yüksek kaliteli SHVC anastomoz el dikiş tekniği ile tamamlanan yüksek mikrocerrahi beceri gerektirir. Yeni başlayanlar için Carrel'ın nirengi tekniği damarları 27anastomosing için tavsiye edilir. Bu tekniği kullanarak, üç kalış dikiş SHVC çevresi düzenli aralıklarla yerleştirilir. SHVC 3D şeklinde geri çeker tarafından bu üç dikiş boyunca SHVC stenoz üzerinden anastomoz sırasında engelleyebilirsiniz üç yöne kal korunur.

Karaciğer nakli yeniden arterialization tartışmalı bir konudur. Bize göre yeniden arterialization yüksek sağkalım oranı alıcının sağlamaya yönelik önemli bir adım değil, ama bu bir yüksek kaliteli karaciğer grefti sağlamaya yönelik önemli bir adım olabilir. Hepatik arter perfüzyon eksikliği sıçan LTx12, sonucunu etkilemez mi gibi fare LTx iki-manşet tekniği içeren geleneksel protokolünde hepatik arter, yeniden değil. Ayrıca, fare LTx bir önceki çalışma yeniden arterialization etkisi uzun vadeli greft hayatta kalma, histolojik değişiklikler, iskemik karaciğer hasarı ve erken İmmünolojik Aktivasyon Belirteçleri yolları13araştırmak için yapılmıştır. Araştırmacılar karaciğer greft yeniden arterialization hayatta kalma oranı veya İmmünolojik Aktivasyon derecesi üzerinde büyük bir etkisi olmadığı sonucuna vardı. Ancak, Huang vd tarafından bildirilen bir çalışmada yeniden o arterialization hepatectomy, özellikle çıkış28tıkanıklığı ile tabi karaciğer parankimi kurtarılması için önemli olduğunu göstermektedir. Sigara-arterialization kısmi karaciğer nakli ve karaciğer hasarı ağırlaştırılmış ve odak nekroz kurtarma gecikmiş. Bu nedenle, kısmi karaciğer nakli yeniden arterialization tavsiye edilir. Aşağıda gösterildiği gibi bir uç-yan anastomoz tekniği daha önce bizim yazarlar 14biri tarafından tanımlanmıştır hepatik arter yeniden oluşturmak için kullanılan. Bu teknik avantajı iki kalın arterler, CHA ve GDA yerine hepatik arter gelinen zorluğunu azaltır ve anastomoz açıklık oranı yüksek tutar ince PHA anastomose için bir seçimdir.

Klasik sıçan Kamada vd tarafından önerilen LTx protokol anhepatic faz 26 dk25' den daha uzun süren zaman hayatta hiçbir hayvan az 26 dk, sanki öyle ki anhepatic faz kontrol önerir. Bizim deneyim bu öneri ile tutarlı olsa da biz daha önce faz saat 26 dk uzun bir anhepatic ile bazı hayatta kalma durumları görülmektedir. Bize göre istikrarlı anhepatic faz cerrahi araştırma daha kısa anhepatic faz öncelik alır. Bizim grupta anhepatic faz tam olarak belirli bir süre içinde denetlenir. Önceden ayarlanmış anhepatic zaman sonuna kadar SHVC ve PV anastomoz çok daha önceden tamamlanmış rağmen anhepatic faz durdurmadım. Ancak, bir eğitim projesinde, daha kısa anhepatic faz teşvik edilmektedir.

Her ne kadar birçok yenilik eğitim faz kısaltın ve gereksiz işlemleri ortadan kaldırmak için yaptık, sıçan LTx ve PLTx hala karmaşık mikrocerrahi işlemleri20vardır. Bu nedenle, bir görüntülenmeyecektir yanı sıra, Plan--Check-eylem döngüsü dayalı bir step-wise eğitim yüksek sağkalım oranı ve yüksek işlem kalitesi ulaşmak için önemli protokoldür. Bu eğitim protokolü kullanarak ön deneyimlerimiz 40-73 işlemleri sıçan orthotopic LTx master için gerekli olduğunu gösterdi. Ek 9-13 işlemleri sıçan master için gerekli idi PLTx yeniden arterialized. Eğitim protokolü Czigány tarafından önerilen ve ark. 50-60 LTxs ana orthotopic LTx ve PLTx29için yeterli olduğunu iddia ediyor.

Bizim Plan--Check-eylem eğitim protokolü, kalite kontrol her eğitim adım ve her bireysel manipülasyon, özellikle böyle bir karmaşık modelinde vurguladı gerekir. Yüksek sağkalım oranı yüksek kaliteli yordam eşit değildir. Temsilcisi sonuçlarında mikrocerrahi kalitesini değerlendirmek için çeşitli kriterler, Histoloji, karaciğer enzim, vücut ağırlığı kurtarma, sarılık (serum bilirubin ve sarı idrar), anhepatic faz süresi ve açıklık, dahil olmak üzere listelenen Hepatik arter. Sadece tüm ölçütleri karşılandığında yüksek kalite elde edilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Tüm yazarlar ifşa etmek çakışan hiçbir ilgi alanlarına sahip.

Acknowledgments

Bu araştırma Ulusal Doğa Bilimleri Foundation of China (Grant No. 81501382) ve Zhejiang il doğal Bilim Vakfı Çin (Grant No tarafından desteklenmiştir LQ13H100003 ve LQ16H100002).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Surgical microscope Möller-Wedel, Germany 654359
Light source OSRAM (China) Lighting Co., Ltd 64627
Isoflurane Vaporizer MIDMARK Corporation VIP3000
Isoflurane Baxter Healthcare Corporation 40032609 For Inhalation anesthesia
Normal Saline Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. 716092103
Povidone Iodine Solution HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL H33021567 For disinfection
Hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J31020
Surgical scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd JC2116
Needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J32030
Dressing Forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J42020
Mosquito hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40340 For liver resection; For retracting the stay sutures. 
Micro-scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA1040
Micro needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA2060
Curved micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3061
straight micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3060
Micro hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3020
Bulldog clamp Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd XEC350
Vessel clamps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40160
Micro Serrefine-curved  Fine Science Tools, Inc 18055-05
Dacryosyrinx Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. 5# curve Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen
Sterilized gauze swabs Fuqing Health & Integral Medical 20230R
5mL syringe Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd 811932416
18G needles Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd 01-014 For fixing the upper abdomen wall
Intima II 22G intraveous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 383207y For making biliary stent; For infusing perfusate
7-0 polypropylene sutures Ningbo Medical Needle Co., Ltd 151026 For SHVC anastomsis
6-0 silk suture Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd 2650182 For ligation
Culture dish (100mm) Corning Incorporated 430165 used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. 
Culture dish (30 mm) Corning Incorporated 3296 As a vessel for organ preservation
Angiocath 12G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382277 For making a IHVC cuff
Angiocath 14G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382269 For making a PV cuff
Buprenorphine (hydrochloride) Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd H12020275 For analgesic
Cefuroxime sodium for injection Esseti FarmaceuticiS.r.l H20160013 As an antibiotics

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Yan, J. Q., Becker, T., Peng, C. H., Li, H. W., Klempnauer, J. Split liver transplantation: a reliable approach to expand donor pool. Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 4, 339-344 (2005).
  2. Xia, R., Emond, J. C. Orthotopic partial liver transplantation in the rat: a model of 70% hepatectomy and reduced size liver transplantation. Transplantation. 56, 1041-1043 (1993).
  3. Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. Fifty-percent partial liver transplantation in the rat. Transplantation. 62, 292-293 (1996).
  4. Foss, A., et al. Function of reduced-size liver transplant in the rat. Res Exp Med (Berl). 197, 91-99 (1997).
  5. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. J Vis Exp. , e4376 (2013).
  6. Sun, J., Qin, G., Wu, L., Wang, C., Sheil, A. G. Antigenic load and peripheral chimeric levels in entire and partial liver allograft recipients. Microsurgery. 21, 183-187 (2001).
  7. Ninomiya, M., et al. Deceleration of regenerative response improves the outcome of rat with massive hepatectomy. Am J Transplant. 10, 1580-1587 (2010).
  8. Yamanaka, K., et al. Effect of olprinone on liver microstructure in rat partial liver transplantation. J Surg Res. 183, 391-396 (2013).
  9. Wang, W., et al. Mesenchymal stem cells promote liver regeneration and prolong survival in small-for-size liver grafts: involvement of C-Jun N-terminal kinase, cyclin D1, and NF-kappaB. PLoS One. 9, e112532 (2014).
  10. Madrahimov, N., Dirsch, O., Broelsch, C., Dahmen, U. Marginal hepatectomy in the rat: from anatomy to surgery. Ann. Surg. 244, 89-98 (2006).
  11. Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28, 3-11 (2008).
  12. Kamada, N., Sumimoto, R., Kaneda, K. The value of hepatic artery reconstruction as a technique in rat liver transplantation. Surgery. 111, 195-200 (1992).
  13. Steger, U., Sawitzki, B., Gassel, A. M., Gassel, H. J., Wood, K. J. Impact of hepatic rearterialization on reperfusion injury and outcome after mouse liver transplantation. Transplantation. 76, 327-332 (2003).
  14. Huang, H., et al. A novel end-to-side anastomosis technique for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation to accommodate size mismatches between vessels. Eur Surg Res. 47, 53-62 (2011).
  15. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J.Invest Surg. 22, 445-451 (2009).
  16. Johnson, A. J., Stulting, R. D. Ophthalmic Microsurgical Suturing Techniques. Macsai, M. S. , Springer. Berlin Heidelberg. 21-28 (2007).
  17. Delriviere, L., et al. Detailed modified technique for safer harvesting and preparation of liver graft in the rat. Microsurgery. 17, 690-696 (1996).
  18. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. J Vis Exp. , (2012).
  19. Delriviere, L., et al. Technical details for safer venous and biliary anastomoses for liver transplantation in the rat. Microsurgery. 18, 12-18 (1998).
  20. Jin, H., et al. Preliminary experience of a PDCA-cycle and quality management based training curriculum for rat liver transplantation. J Surg Res. 176, 409-422 (2012).
  21. Selzner, N., Selzner, M., Tian, Y., Kadry, Z., Clavien, P. A. Cold ischemia decreases liver regeneration after partial liver transplantation in the rat: A TNF-alpha/IL-6-dependent mechanism. Hepatology. 36, 812-818 (2002).
  22. Tanaka, H., Hashizume, K., Enosawa, S., Suzuki, S. Successful transplantation of a 20% partial liver graft in rats: a technical innovation. J Surg Res. 110, 409-412 (2003).
  23. Bockhorn, M., et al. Erythropoietin treatment improves liver regeneration and survival in rat models of extended liver resection and living donor liver transplantation. Transplantation. 86, 1578-1585 (2008).
  24. Martins, P. N., Neuhaus, P. Surgical anatomy of the liver, hepatic vasculature and bile ducts in the rat. Liver Int. 27, 384-392 (2007).
  25. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  26. Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplant.Proc. 37, 185-188 (2005).
  27. Wain, R. A. J., Hammond, D., McPhillips, M., Whitty, J. P. M., Ahmed, W. Surgical Tools and Medical Devices. Ahmed, W., Jackson, M. J. , Springer International Publishing. 545-562 (2016).
  28. Huang, H., et al. Hepatic arterial perfusion is essential for the spontaneous recovery from focal hepatic venous outflow obstruction in rats. Am J Transplant. 11, 2342-2352 (2011).
  29. Czigany, Z., et al. Improving Research Practice in Rat Orthotopic and Partial Orthotopic Liver Transplantation: A Review, Recommendation, and Publication Guide. Eur Surg Res. 55, 119-138 (2015).

Tags

Tıp sayı: 134 karaciğer nakli hepatectomy yeniden arterialization sıçan hepatik damar kısmi karaciğer nakli gemi odaklı manşet anastomoz
Yeniden Arterialized sıçan kısmi karaciğer nakli bir <em>vivo içinde</em> gemi odaklı % 70 ile Hepatectomy
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chen, X., Yu, R., Xu, Z.,… More

Chen, X., Yu, R., Xu, Z., Zhang , Y., Liu, C., Chen, B., Jin, H. Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy. J. Vis. Exp. (134), e56392, doi:10.3791/56392 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter