Grabación de la presión intracavernosa para evaluar la función eréctil en roedores

Summary

Grabación de la presión intracavernosa (PIC) es un método importante para evaluar la función eréctil de animales de experimentación. Aquí, se demuestra un protocolo detallado para el procedimiento de grabación de ICP catheterizing el pene de muslos y luego eléctricamente estimulando los nervios cavernosos en ratas.

Abstract

La disfunción eréctil (ED) se define como la incapacidad para lograr o mantener una erección del pene, y esto se ha convertido en un frecuente trastorno sexual masculino. Roedores son empleados por muchos estudios para investigar la fisiología, patología de la función eréctil. La función eréctil en roedores puede evaluarse mediante la medición de la presión intracavernosa (PIC). En la práctica, la ICP puede controlarse después de la estimulación eléctrica de los nervios cavernosos (CNs). La presión arterial de la arteria carótida (la presión arterial media) se utiliza como referencia para ICP. Mediante ICP protocolos de grabación, muchos parámetros clave de la función eréctil pueden medirse de la curva de respuesta ICP. La medición de ICP proporciona más información que el test de erección peneal inducido por apomorfina y es más barata que el monitoreo telemétrico del pene del spongiosum de la recopilación de corpus, haciendo este método el más popular para evaluar la función eréctil. Sin embargo, en comparación con la prueba realizada fácilmente inducida por la APO la función eréctil, exitosas grabaciones de ICP requieren atención al detalle, práctica y adhesión al método de operación. En este trabajo, una introducción a la grabación de la ICP en las ratas se proporciona como complemento al procedimiento eficientemente.

Introduction

Se define como la incapacidad para lograr o mantener una erección del pene y se ha convertido en un trastorno sexual masculino común¹. Animales de experimentación se utilizan y proporcionan modelos reproducibles para investigar la función eréctil². Durante mucho tiempo, varios modelos de animales más grandes se han empleado para la investigación de la función eréctil^3,4,5. Aunque los roedores son relativamente pequeños en comparación con otros animales, también se utilizan para el estudio de la disfunción eréctil masculina debido a que varias ventajas⁶. En primer lugar, las características sexuales morfológicas y funcionales de los seres humanos son recapituladas en roedores. En segundo lugar, en comparación con animales más grandes en estudios de ED, los roedores son más económicos comprar, casa y mantener. Modelos de roedores genéticamente modificados, tercer proporcionan ventajas en reproducibles y posteriores estudios conductuales y neurofisiológicos. Por lo tanto, roedores se han convertido rápidamente en los animales primarios utilizados en el estudio de la disfunción eréctil masculina.

Beneficiándose de un fondo genético puro y condiciones de cultivo constantes, modelos de roedores han proporcionado datos consistentemente reproducible^5,6,7,8. Entre los numerosos estudios disponibles relacionados con muchos aspectos de las funciones eréctiles, la apomorfina (APO)-respuesta eréctil inducida y la prueba de respuesta inducida por la estimulación eléctrica ICP son los métodos más ampliamente utilizados que reflejan confiable eréctil función^9,10,11,12. La prueba de la función eréctil inducida por APO, desarrollada por Heaton et al. ¹³, es un bioensayo que utiliza el fenómeno de que la administración de apomorfina en ratas provoca erecciones y bostezos. Como una estable, fácil y no invasiva-bioensayo para evaluar la función eréctil, la prueba de APO-inducida de la función eréctil es ampliamente utilizada en muchos estudios. Sin embargo, este ensayo no refleja adecuadamente la calidad de erecciones o los cambios dinámicos en el flujo sanguíneo asociado con una respuesta eréctil¹⁴. Las mediciones de la PIC inicialmente fueron desarrolladas por Quinlan et al. ¹⁵. en este método, se coloca un catéter en la arteria carótida para medir la presión arterial sistémica, y otro catéter se inserta en los cuerpos cavernosos crus para grabar el PIC. Antes o durante el ICP de grabación, un agente vasoactivo o estimulación de campo eléctrico del ganglio pélvico mayor (MPG) o CN fueron dados a menudo a las ratas¹⁴. Este ensayo ha sido una herramienta confiable para la evaluación de las terapias y medicamentos para la disfunción eréctil y es probable que se utilizará como método de evaluación vital en el futuro⁶.

En comparación con la prueba realizada fácilmente inducida por la APO la función eréctil, exitosas grabaciones de ICP requieren atención al detalle, práctica y adhesión al método de operación. Por lo tanto, presentamos una descripción detallada de cómo realizar la grabación de ICP.

Protocol

Tres meses y 18 meses en el presente estudio se utilizaron ratas Sprague-Dawley. Todos los animales se manejaron con arreglo a las directrices de los NIH para el cuidado y uso de animales de laboratorio. Procedimientos con sujetos animales fueron aprobados por el cuidado de Animal institucional local y Comité de ética, con un esfuerzo para minimizar el sufrimiento de los animales. Los protocolos fueron aprobados por el cuidado institucional del Animal y el Comité uso (IACUC) en la Universidad de tecnología de Nanjing…

Representative Results

Numerosos estudios han demostrado que la disfunción eréctil en personas de edad los varones se está convirtiendo en un problema común. Sin embargo, tratamiento médico es limitado en el manejo de envejecimiento relacionados con ED16. En modelos de roedores de ED relacionados con el envejecimiento, muchas terapias son probadas en la función eréctil de ratas envejecidas. Como hemos introducido anteriormente, la prueba de grabación de ICP podría usarse para di…

Discussion

Como una medida directa de la función eréctil, el ICP es un método fiable¹⁴. Permite la adquisición de los datos en basal ICP, pico ICP, ICP, tiempo al tiempo de erección y detumescencia, duración de la respuesta, etceterade la meseta. Además de estas directas parámetros medidos, hay algunos otros parámetros de índice: (1) “T80”, el tiempo para alcanzar el 80% del pico de ICP; (2) “D20”, el tiempo para disminuir al 20% del pico de ICP; (3) “ΔT80”, la tasa de aumento en la presi…

Materials

Animal
Rats			Strain: Sprague-Dawley Age: 2-3 month
Rats			Strain: Sprague-Dawley Age: 15-18 month
Name	Company	Catalog Number	Comments
Reagents			formula
Saline	Sigma-Aldrich, S7653		dissolve 8.5 gram sodium chloride in distilled water
Pentobarbital sodium solution	Sigma-Aldrich, P3761		dissolve 1 gram in 100 ml saline
Povidone-iodine	BTP Pharmaceutical Co. Limited		10% (V/V)
Ethanol	China National Pharmaceutical Group Corporation (SINOPHARM)		70% (V/V)
Heparin	Sigma-Aldrich, H3149		dissolve 20000U heparin in 100 ml saline
Name	Company	Catalog Number	Comments
Materials
Hypodermic needle	Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd.	23G
Syringe	Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd	10 ml
Three-way stopcock	Chengdu Instrument factory	TSK 01
Electrode	Chengdu Instrument factory	JST-1
Catheter tube	Chengdu Instrument factory	PE-10, PE-50
Operating scissors	Shanghai operation equipment factory	J22010, J22020
Ophthalmic operating scissors	Shanghai operation equipment factory	Y00010, Y00020
Ophthalmic forceps	Shanghai operation equipment factory	JD1010, JD1020
MicroScissors	World Precision Instruments	WAA260
silk suture	Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd.	5-0
Name	Company	Catalog Number	Comments
Equipment
Stimulator	Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H)		15 Hz, 5 ms pulse, 5 V, 60 s duration and 5 minutes interval
Multichannel signal collection processing system	Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H)		Blood pressure model
Pressure transducer	Beijing Xin Hang Xing Ye Technology Trading Company Limited (model YP100)		40KPa