Здесь мы показываем, протокол стандартизировать процедуры отбора проб установленным свинину модели острого инфаркта миокарда с целью увеличить ее поступательное значение в понимании повреждения миокарда ишемия/реперфузия патофизиологии и проверить роман наркотиков кандидатов.
Миокардиальной ишемии-реперфузии (I / R) травмы способствует почти половина из области некротические после инфаркта миокарда. На сегодняшний день, есть нет утвержденной наркотиков для предотвращения или сокращения миокарда я / R травмы. Изучение и понимание патофизиологических механизмов миокарда я / R травмы необходимо разработать успешного лечения. Большие эксперименты на животных являются важным шагом в трансляционной методов. Установлены и описаны себя и других свинину модель острого инфаркта миокарда. Мы стремились улучшить значение модели, сосредоточив внимание в деталях на методы отбора проб для использования в будущих экспериментах. Кроме того мы подчеркиваем небольшие, но важные шаги, которые могут повлиять на качество конечных результатов. Чтобы имитировать клинических положение миокарда я / R травмы, катетер перкутанеус коронарным вмешательством (PCI) был вставлен в левой передней нисходящей коронарной артерии (LAD) наркотизированных свиньи. ° ° °, Эта модель имитирует острого инфаркта миокарда и PCI лечения людей с возможностью точного определения области на риск а также некротические- и жизнеспособной ишемии тканей. Здесь была использована модель, чтобы исследовать эффект ингибитор бициклических пептидные FXIIa. Модели также могут быть изменены чтобы позволить больше реперфузии раз изучить позднее последствия инфаркта миокарда.
Ишемическая болезнь сердца, в частности острый инфаркт миокарда (MI), является основной причиной смерти в развитых странах 1. Сегодня стандартное лечение ми является перкутанеус коронарным вмешательством (PCI), лечение катетер шар. Одним из важных факторов, которые влияет на качество жизни и прогноз у пациентов после PCI-лечение острых ми является размер миокарда. Сокращение размера может иметь большое влияние на пациента выживания и прогноз 2. Миокарда ишемии/реперфузии (I / R) травмы имеет значительное влияние на размер миокарда, поэтому одна из главных целей в области сердечно-сосудистых исследований для предотвращения или сокращения миокарда я / R травмы 3. Точные механизмы I / R травмы находятся в стадии расследования 4. Активация плазмы каскады и эндотелиальных клеток являются отличительными чертами я / R травмы 5. Активация системы коагуляции является явно участвуют 6,7. Недавно была показана роль FXII, как ранние вверх по течению пептид, участвующих в контактная фаза активации коагуляционного каскада, в FXII выбить крысы модель мозга я / R травмы 8. Проверка этих результатов в свинину модели представляет собой важный шаг в клинической перевод. Таким образом, мы проводим тестирование ингибитор FXIIa Роман бициклических (80 кДа протеазы) в контексте миокарда я / R травмы в ходе экспериментального исследования.
Животные модели, которые имитируют клинической ситуации острой ми и PCI лечения, имеют важное значение для улучшения нашего понимания патофизиологии миокарда я / R травмы и опробовать новые методы лечения. Свиньи представляют собой хороший животных модель для клинических миокарда я / R травмы. Это не только потому, что их сердца очень похожи на человеческие сердца по анатомии и коронарное кровообращение, но они также показывают аналогичные патофизиологические реакции миокарда ишемии и реперфузии 9,10. Другие модели, такие как мыши и крысы не выполнить эти критерии и показывают существенные различия по сравнению с человеческого сердца 11,12, тогда как собаки например, имеют много больше залога коронарных сосудов по сравнению с людьми 13.
Свинину острого инфаркта миокарда модель широко используется в сердечно-сосудистых исследований расследовать, ишемическая болезнь сердца, включая миокарда я / R травмы 14,,1516,17. Последний является воспалительные состояния, из-за которых минимизации воспалительной реакции, относящиеся к стернотомии или торакотомии, используемых в открытом грудной хирургии имеет важное значение. Закрытые грудь модели, с помощью клинических условиях ангиографии C-рука преодолевает эту проблему. Кроме того одним из наиболее важных моментов является наш протокол обеспечивает точное различие между ишемической (зона риска, AAR) и не ИБС областей левого желудочка (площадь не риску, НРУ) таким образом, чтобы размер infarct (ишемический некротических тканей, НИТ) можно следует точно определить. Наша цель этого документа заключается в четко определить воспроизводимые методологии свинины миокарда я / R травмы модель, в частности в отношении выборки ткани миокарда, что позволит обеспечить более точный анализ молекулярных механизмов я / R травмы и четкое представление о последствиях новых лекарств.
Миокарда я / R травмы имеет значительное влияние на размер окончательного инфаркте, которая непосредственно переводится на прогноз пациента после острого инфаркта миокарда3. Понимание патофизиологии миокарда я / R травмы является первым шагом, чтобы уменьшить или предотвр?…
The authors have nothing to disclose.
Авторы хотели бы отметить профессор Кристиан Heinis ингибитор FXIIa и соответствующего элемента управления. Мы также выражаем благодарность Ольгики Beslac, д-р Даниэль Mettler и Кей Nettelbeck от блока экспериментальной хирургии, Департамент биомедицинских исследований, Университет Берн для технической поддержки. Селин Guillod и Маттиас Rausch от Департамента для диагностики, Interventional и педиатрической рентгенологии, больницы университета Берн, Inselspital оказали поддержку с рентгеновского оборудования и техники. Этот проект финансировался Швейцарский Национальный научный фонд проекта № 320030_156193. Мы хотели бы также поблагодарить г-н Reto Haenni от коммуникации и маркетинга, госпиталь университета Берн, Inselspital для видеозаписи наш эксперимент.
ABL 90 Flex, blood gas analyser | Radiometer | – | Blood gas analysis (BGA) |
ACT Plus | Medtronic | – | Activated clotting time |
Atropin | Sintetica | – | Atropinum Sulfas, 0,5mg/ml |
Balance (20-500 Kg) | NAGATA Scale, Tiwan | HTB/HTR | Alternative products can be used |
Balance (21-4200 g) | Mettler toledo, Switzerland | MS4002SDR | Alternative products can be used |
Blood collection tubes: EDTA, citrate and serum | S-Monovette, Nuembrecht, Germany | 05.1167.001, 05.1071.001 and 05.1557.001 respectively |
Alternative products can be used |
BV Pulsera mobile C-arm | Philips | – | Alternative products can be used |
Centrifuge | Labcare, UK | ALC PK120R | Alternative products can be used |
Defibrillator Lifepak 12 | Medtronic | – | Alternative products can be used |
Dextran from Leuconostoc mesenteroides | Sigma-Aldrich, Germany | D3759 | Average M.wt 48000-90000 |
Digital single lens reflex camera | Sony, Thailand | DSLR-A500/A550 | Alternative products can be used |
Dissecting forceps | Alternative products can be used | ||
EMPIRA RX PCI dilatation catheter | Cordis, Johnson&Johnson, USA | 85R15300S | Diameter 3 mm, length 15 mm, Alternative products can be used |
EMPIRA RX PCI dilatation catheter | Cordis, Johnson&Johnson, USA | 85R15350S | Diameter 3.5 mm, length 15 mm, Alternative products can be used |
Evans Blue | Sigma-Aldrich, Germany | E2129 | Toxic |
Fabius GS premium respirator | Dräger, Lübeck, Germany | – | Anesthesia work station, Alternative products can be used |
Fentanyl | Inselspital ISPI | – | Fentanyl 2500mcg/50ml |
Formaldehyde | Pathology Institute, Bern University | SI148701 | Alternative products can be used |
FXIIa inhibitor | Provided by Prof. Christian Heinis' laboratory in EPFL | Novel bicyclic peptide | |
Galeo, coronary guidewire | Biotronik, Germany | 125497 | Alternative products can be used |
Guidance catheter | Boston Scientific, Florida, USA | 34356-06 | 6F (100 cm, EB3.75). Alternative products can be used |
Heparin Sodium | Drossapharm, Basel, Switzerland | – | Liquemin, 25000 U.I./5 ml |
High end electrosurgery | BOWA, Germany | ARC 400 | Electrical source for blood suction. Alternative products can be used |
Hydro-Guardmini breathing filter | Intersurgical, Lithuania | 1745000 | Filters |
Image J | National Institute of Health, USA | 1.47v | Alternative products can be used |
Inflation device, Atrion QL2530 | Atrion medical product, Alabama, USA | 96402 | Alternative products can be used |
IntelliVue MP 70 | Philips, Boeblingen, Germany | – | Monitor (ECG, heart rate, blood presure and body temperature). Alternative products can be used |
KCl | Sintetica SA | – | Potassium chloride 15% |
Ketamine | Vetoquinol | – | Narketan, 1ml/100mg |
LR-ACT | Medtronic | 402-01 | ACT special syringes |
Midazolam | Roche | – | Dormicum, 5mg/ml |
Monopolar scalpel | Alternative products can be used | ||
Needle holder | Alternative products can be used | ||
High resolution camera, PathStand Macro Imaging Stand for Grossing | Spotimaging, USA | 1080 p HD resolution. Alternative products can be used | |
PBS | In-house preparation | – | Alternative products can be used |
Peripheral venous cannula, 18 G | Alternative products can be used | ||
PowerLab 4/35 data acquisition system | Adinstruments, Spechbach, Germany | – | |
Rotamax120T | Heidolph, Germany | 544-41200-00 | Shaker. Alternative can be used |
Rüschelit-Super Safety Clear Tube | Teleflex, Dublin, Irland | 112480 | Air way tubing, Alternative products can be used |
Safe Pico Aspirator Syringes | Radiometer | 956-622 | BGA special syringes |
Saline | Sintetica Bioren | – | NaCl 0,9%. Alternative products can be used |
Sevorane 1.5% | AbbVie AG | – | Sevorane 250ml 100% |
Sheath | Cordis, Johnson&Johnson, USA | 504-607 A | AVANTI + / 7 F, Alternative products can be used |
Space infusion pump | B.Braun Medical AG, Germany | – | For infusion of fentanyl. Alternative products can be used |
SPR-350 (Millar catheter) | Adinstruments, Texas, USA | 840-8166 | MIKRO-TIP, 5F, 120 cm |
Sternotomy saw | Alternative products can be used | ||
Sutures | ETHICON, Johnson&Johnson, USA | Y3110H | Monocryl 3-0 SH-1 Plus. Alternative products can be used |
Syringes (20, 10 and 5 mL) | CODAN,Baar, Switzerland | 62.7602, 62.6616, 62.5607 respectively |
Used to inject anesthetic materials intramuscularly or directly into the central venous line. Also to inject heparin or FXIIa or the respective control. Alternative products can be used |
Thorax spreader | Alternative products can be used | ||
Tissue-tek | SAKURA, Netherlands | 4583 | O.C.T. compound |
Vascular forceps | Alternative products can be used | ||
Xenetix 300 contrast media | Guerbet, Zürich, Switzerland | – | Lobitridol, 300 mg iodide/ml |
Xylazine | Vetoquinol | – | Xylapan, 20mg/1 mL |
2,3,5-Triphenyltetrazolium choride | Sigma-Aldrich, Austria | T8877 | |
500 μL tubes (eppendorf) | Trefflab, Switzerland | 96.08185.9.03 | Alternative products can be used |