Summary
Bu makalede genetiği pankreas kanseri farelerde yüksek çözünürlüklü ultrason kullanımı. Birincil amaç algılama ve endojen pankreas tümörleri değerlendirilmesi için ayrıntılı bir talimat sağlamaktır.
Abstract
LSI-KrasG12D / +; LSI-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre (KPC) fare modeli pankreas kanseri yeni tedaviler değerlendirmek için bir kurulmuş ve sık kullanılan transgenik modeli temsil eder. Tümör başlangıçlı 8 hafta ile birkaç ay arasında KPC modelindeki değişkendir. Bu nedenle, non-invaziv görüntüleme aygıtlarının ekran için tümör başlangıçlı ve tedaviye yanıt için izlemek için gereklidir. Bu sorunu gidermek için farklı yaklaşımlar son yıl içinde ortaya çıkmıştır. Yüksek çözünürlüklü ultrason invasiveness sigara, hızlı oturum süreleri ve yüksek görüntü çözünürlüğü olmadan radyasyona maruz kalma gibi büyük avantajları vardır. Ancak, ultrason farelerde önemsiz ve yeterli anatomik bilgi değildir ve pratik becerileri yüksek çözünürlüklü ultrason preklinik pankreas kanseri modellerinde başarıyla gerçekleştirmek için gereklidir. Aşağıdaki makale ile endojen pankreas kanseri modelleri belirli bir odak ile fare modellerinde abdominal ultrason için ayrıntılı bir uygulamalı rehber sunulur. Ayrıca, ortak hatalar ve nasıl önlenebileceği bir özetini sağlar.
Introduction
Genetiği fare modelleri kanser araştırma yeteneklerini yakından insan karsinojenezis1,2,3karmaşık doğası özetlemek için nedeniyle artan bir önem kazanmıştır. En sık kullanılan modelleri pankreas kanseri geliştirme eğitim için ilerleme ve terapötik yanıt bir Tümör baskılayıcı p534inactivation ile kombine Kras onkogen etkinleştiren bir mutasyon karakterize. Bu LSI-KrasG12D / +; LSI-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre (KPC) fare modeli taklit eden invaziv Karsinomu için önceden invazif pankreas İntraepitelyal Neoplazi (PanIN) lezyon üzerinden ilerleme step-wise. Phenotypically, neredeyse tüm fareler doğumdan sonra ilk altı ay içinde PDAC geliştirmek. Ancak, transplante modellerle karşılaştırıldığında, KPC modeli 8 hafta son derece değişken tümör başlangıcından birkaç ay4ortaya koymaktadır. Pankreas Tümörleri (5-9 mm çapında) belirli bir boyutu ulaştığınızda, hızla tümör büyümesini hızlandırır ve fareler preklinik denemeler5' te kayıtlı gerekir. Bu nedenle, tümör başlangıçlı ve tümör boyutu tam algılama preklinik çalışma lojistik ve tedavi takibi için gerekli bir önkoşuldur. Genel olarak, çeşitli yaklaşımlar gibi manyetik rezonans görüntüleme (MRG)6,7,8,9 veya yüksek çözünürlüklü ultrason tarama bilgisayarlı tomografi tümör tarama yapmak için istihdam ve Terapi10. Her teknik avantajları ve dezavantajları vardır. Her ne kadar MRI- veya bilgisayarlı tomografi (CT)-görüntüleme sağlar yüksek çözünürlüklü veri toplama yanı sıra doğru hacim hesaplama, uzun süreli sınav zamanı genel sedasyon altında olarak ve çok pahalı ekipman gereklidir ve sık izin vermez uzun bir süre boyunca tarama. Buna ek olarak, küçük hayvan Ultrasonografi fareler11karın patolojiler için ekran için istihdam kurulan bir yöntemidir. Görüntüleme bu yöntemin avantajları, kez, yüksek çözünürlükte tarama kısa ve doppler ultrason veya kontrast kullanma imkanı perfüzyon organların paralel görselleştirmek için ultrason (CEUS) gelişmiş. Ancak, anatomik bilgi, 3D hayal gücü ve tam pratik eğitimden gerçek görüntü yorumu için gereklidir.
Aşağıdaki makalede, yüksek çözünürlüklü ultrason KPC modeli kullanmak için detaylı bir protokol sağlanır. Ayrıca, standart ultrason görüntüleri tasvir ve araştırmacı için yönlendirme kolaylaştırmak için organ yapıları ile Etiketlenmiş.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Üniversitesi Tıp Merkezi Goettingen, Almanya (33.9-42502-04-15/2056) hayvan bakımı yönergeleri uyarınca protokolüdür. Panoları bireysel hayvan belirli gereksinimlerine bağlı olarak gözden geçirin, bazı iletişim kuralı adımlar buna göre değiştirilmiş olabilir.
1. abdominal palpasyonla KPC farelerin
- Gereksiz ultrason taramaları önlemek için muhtemelen intraabdominal bir lezyon ayı olabilir ve daha sonra abdominal ultrason geçmesi fareler tanımlamak için fare karın muayene et.
- Abdominal palpasyonla haftalık 8 hafta-in yaş KPC fare modeli başlayarak gerçekleştirin. Yüksek çözünürlüklü ultrason da transplante tümör modeller (örneğin, orthotopics) veya diğer genetik fare modelleri uygulanabilir.
Not: tümörlerin palpe önce tümör kinetik ve çalışma bağlı olarak (önleme çalışma, terapötik müdahale çalışması), algılama çok küçük tümörlerde (1-2 mm) monitör tümör başlangıç için uygun hedeftir.
- Abdominal palpasyonla haftalık 8 hafta-in yaş KPC fare modeli başlayarak gerçekleştirin. Yüksek çözünürlüklü ultrason da transplante tümör modeller (örneğin, orthotopics) veya diğer genetik fare modelleri uygulanabilir.
- Kafes ızgara üzerine fareyi getirin ve yavaşça fareyi kuyruğundan kaldırın ve karın hafifçe yukarı ve aşağı dizin ve sigara tamir el (şekil 1) başparmak ile giderek muayene et.
- Fareyi yumuşak palpasyonla kaldırabilir, yavaş yavaş basıncı artırarak devam edin. Daha büyük bir direnç üst ve alt karın kolayca tespit edilebilir. Bazen, sert dışkı yanlışlıkla bir tümör yorumlanabilir kitle.
2. çalışma alanı hazırlanması
- En az üç farklı çalışma birimleri için alan sağlamak: ön tarama alanını, sahne ve kurtarma kafes tarama. Gerekli malzeme Şekil 2' de tasvir.
- Ana çalışma plaka temiz (örneğin % 70 ile etanol) ve (şekil 3) tarama önce Isıtma platformunda geçiş. Birinci fare transfer edilmeden önce hedef sıcaklık 38-40 ° c ulaşacağından emin olun.
- Ultrason makinede geçiş ve elde edilen veriler (şekil 4) için yeni bir klasör oluşturun. B-mod ayarı karın görüntüleme için uygulanır. Ayrıca, karın dönüştürücü makinenin etkin bağlantı noktasına takılı olduğundan emin olun. Transduser baş çalışma sahne üstündeki montaj sistemi dönüştürücü kullanarak düzeltebilirsiniz.
- Bir kurtarma kafes bir ısıtma yüzeyi veya termal mat (veya kullanım Isıtma lambası) sonrası yordam termoregülasyon ve taranan farelerin hızlı iyileşme sağlamak için hazırlamak. Doku ince bir tabaka olarak yastık boğulma (şekil 5) riski ile yatak takımları, aspirasyon önlemek için bu kafesin dibinde koymak.
3. inhalasyon anestezi
- İndüksiyon odanın içine bir fare koyarak devam edin. Gaz taşıyıcı akışı (1 L/dak oksijen veya hava) için vana açıp isoflurane konsantrasyonu % 4, indüksiyon odasının yavaş yavaş artan bir doygunluk izin ayarlayabilirsiniz. (Etkin veya edilgen filtreleme) uygun isoflurane atma yerinde olduğundan emin olun. Yaklaşık 2-4 dakika sonra fare genellikle derin sedasyon altında olacaktır.
- Sedasyon çalışma Sahne Alanı'nda % 2 isoflurane burun konisi aracılığıyla yönetmek olarak korumak.
- Dikkatli bir şekilde hayvan indüksiyon odasından çalışma Sahne Alanı'na transfer. Burun konisi sürekli gaz akışı için kontrol edin. Fare burun burun konisi anestezi satır çıkış koymak. İlk tarama için düzenli sırtüstü pozisyon konumdur. Fare da pankreas baş veya kuyruk Tümörleri (şekil 6) görünürlüğünü artırmak için sağa veya sola yan yerleştirilebilir.
- Abdominal ultrason acı başınaolmasa da, bir ağrı ücretsiz durumu ve derin anestezik durum gösterge ayak çimdik testi gerçekleştirin. Fare hala etkin veya etkin bir şekilde hareket etme, retransfer ise hayvan geri tekrarlanan ve uzun süreli indüksiyon için indüksiyon odasında.
- Göz koruma merhem sıvı kaybı nedeniyle kornea yaralanmaları önlemek için kullanın.
- Anestezi sırasında bir izleme sistemi kullanın. Ancak, EKG ve rektal ısı düzenli olarak kullanılır abdominal ultrason taramak için. Önemlisi, fareler anestezi altında thermoregulate yeteneği kaybetmek. Bu nedenle, hipotermi veya solunum soluyarak veya apne gibi klinik belirtiler yakından gözlemlemek. Herhangi bir belirti açık dur isoflurane ve yer fare kurtarma kafeste hemen ise.
4. ultrason ayarları
- Ultrason sistemde üretici yönergelerine tarafından açıklandığı gibi geçin. Birincil ayarı aktive karın paketiyle genel görüntüleme koymak emin olun. Genellikle B modunda görüntüleme veri toplama standart olarak kullanılır.
- İyi görüntü kalitesi aşağıdaki parametrelerle ulaşmak: frekans 40 MHz, 2D-kazanç 25-30 dB, görüntü derinliği 10 mm, resim genişliği 10 mm, 3-6 mm arasında merkezi ile 3 odak alanı.
5. fare hazırlık
- Yapışkan bant kullanarak üst ve alt ekstremite düzeltmek. Hayvan fiksasyon (Şekil 7) nedeniyle herhangi bir yaralanma önlemek mümkün olduğunca dikkatli olun.
- Tüm karın kürk elektronik evde beslenen hayvan makası kullanarak kaldırın. Kürk doku nedeniyle göğüs kafesi kadar alt karin başlatın. Bu alanda deri yaralanmaları önlemek için oluşum xiphoideus , kendine iyi bak.
Not: Fare kürk ultrason dalgaları yansıtır ve görünürlüğü azalır. - Bir en iyi duruma getirilmiş cilt hazırlık ve kürk tümüyle kaldırılmasını gerçekleştirmek için depilatory krem kullanın. Krem pamuk İpuçları (şekil 8) kullanarak traş karın üzerine ince bir tabaka yönetmek. Krem kuru dokuların bol su baştan başa çıkarmak tüm artıkları (Şekil 9, şekil 10, Şekil 11) tarafından takip ile (30 s ya da sonra daha sonra kullanılan krem bağlı olarak) kaldırın. Krem kalıntıları deri ve mukozada tahriş sonra ultrason neden olabilir ve böylece sağlık etkileyebilir.
- Yeterli tarama sağlamak için ultrason jeli (şekil 12) karın üzerine bol koşullar geçerlidir. Genellikle, sıcak ultrason jeli hipotermi fare için en aza indirmek için kullanılır.
- El ile dönüştürücü kafasına ultrason jeli ince bir tabaka uygulayın. Bir test çentik dönüştürücü uç dokunarak gerçekleştirin. Dönüştürücü doğru konumlandırılmış bir sinyal sol üst tarafındaki vasıl belgili tanımlık perde görülebilir.
6. abdominal ultrason
- Firma basınç uygulayarak karın üzerine dönüştürücü ayarlayın. Fare karın ağır sıkıştırma için solunum veya dolaşım bozukluğu neden olabilir ve kaçınılmalıdır.
- Yukarı ve aşağı inceden inceye gözden geçirmek. Çerçeve çalışma platformu ve tekerlekleri x ekseni ve y ekseni için ayarlayın.
- İlk adım olarak her iki böbrek tanımlayın. Genellikle alt karın hyperechogenic homojen yapıları olarak görünürler. Bağlı vena renalis vena kava inferior (şekil 13) bu da daha fazla neden kolayca bulunabilir.
- Vena lienalis hizmet için pankreas Simgesel Yapı beden olarak kullanın. Vena renalis ve vena lienalisarasında ayrım yapmak için girişim. Vena lienalis tespiti pankreas tam olarak yerelleştirilebilir. Normal pankreas oldukça katı bir yapı (Şekil 14 ve şekil 15) daha karın boşluğu yoluyla yayılan bir membran var.
7. pankreas tümörü algılama ve birim değerlendirme
- Tüm çevresindeki yapılardan pankreas lezyonlar tanımlayın. Bunlar genellikle hypoechoic inhomogeneous yuvarlak veya uzun doku kitleler (şekil 16) görüntülenir. Tümör genellikle sert ve zor tarama baş tarafından birleştirilebilir. Dikkat, zaman zaman açıkça bir tümör ve ince bağırsak döngü arasında ayırt etmek zor olabilir. Pankreas tümörleri dikkat edilmelidir değil Bağırsak bağırsakların dikkat edin.
- Tümör algılama ekran yukarı ve aşağı bir izlenime toplam boyutu ve ultrason Kaliper kullanarak en büyük çapı ölçmek için. Uygun bir görüntü bulunduktan sonra ekran donma ve tam tümör boyutu belirlemek için ölçü aracını kullanın. Dikkat, daha sonra kullanmak bir tümör kuyruk, vücut veya pankreas başkanı lokalize olup olmadığını ayırt etmek önemli olacaktır.
- Modu yaşamayı değiştirmeden önce çalışma kaydetmek için resimleri kaydetmek emin olun. Dikkat, ayar tekerleği serbest ve ultrason sonda daha da fare karında basıldığında olabilir görüntü dondurma. Bu nedenle, donarak mode değiştirmeden önce sıkıştırma ayarı düzeltmek.
- İlk uçak ölçümü bitirdikten sonra tarama baş tarafından boyuna konumda (şekil 17) 90 ° döndürmek veya tümörlerin boyuna genişleme tespit etmek için onun yanına fare açmak. Bazı tümör yeterli görüş için farenin konumunu değiştirmek gerekebilir. Pankreas kuyruk tümörler için fareyi onun sağ tarafında (şekil 10 ve şekil 19), sol tarafında (Şekil 11 ve şekil 20) pankreas baş tümörler için yerleştirilebilir.
8. tümör Birim miktar
Not: Bir büyük amacı tüm çabaları, tümör biriminin doğru belirlenmesidir. Çeşitli teknikler kullanılabilir olmasına rağmen bir elipsoid formüle dahil olmak üzere bir hesaplama yöntemi Üniversitesi Tıp Merkezi Goettingen tercih edilir.
- Tüm üç daha önce elde edilen çapları ile donatılmış, karşılık gelen tümör (şekil 21) yaklaşık hacmi hesaplamak.
- Alternatif olarak, sonraki hacim hesaplama ve 3 3-d-yeniden yapılanma ile tümör bölgesinin bir otomatik tarama gerçekleştirmek için tarama kafasının bir motor sistemi kullanın.
9. kurtarma
- Tarama sonra dikkatli bir şekilde tüm yapışkan bandı çıkarın ve dikkatli bir şekilde çıkarın tüm ultrason jeli kuru doku ile.
- Dikkatle fare ( şekil 21) kurtarma kafesin içine aktarın. Herhangi bir kaplama doku solunum bozukluğu neden olabilir mouse´s yüze kaçının. Kurtarma için bir yan konum tercih edilmelidir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Ultrason görüntüleme insan hastalıkları fare modelleri birkaç önemli sorunu gidermek için kullanılan çok yönlü ve non-invaziv bir tekniktir. Tüm diğer görüntüleme yaklaşımlar büyük avantaj için yüksek üretilen iş, maliyet verimliliği, kısa edinme zaman ve gerçek zamanlı görüntüleme karşılaştırılır. Ancak, bu araç uzmanlık doğru yüksek kaliteli görüntüler oluşturmak için gerekir. Özellikle istenmeyen eserler olması durumunda genel olarak ultrason görüntüleme ile en az biraz tecrübe çok yararlıdır. Pankreas kanseri ile ilgili olarak tümör başlangıçlı, ilerleme ve tedaviye yanıt belirlemek için bu aracı sağlar. Ayrıca, farklı Çap ölçüm tarafından tümör birimin tam bir miktar zaman içinde sağlar. Bu çalışmada gösterir ve ayrıntılı olarak açıklar yüksek çözünürlüklü ultrason görüntüsü genetiği fare modelleri pankreas kanseri için bir tarama aracı olarak kullanmak.
Resim 1 : Abdominal palpasyonla. Sigara tamir el yordamı yavaşça yukarı ve aşağı hareket ettirerek Başlarken el hafifçe sabitleme kuyruğunu çeker. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Resim 2 : Alan tüm gerekli öğeleri genel bakış ile ön tarama. Cilt dezenfeksiyon (1), gazlı bez süngerler (2), % 70 isopropanol (3), ultrason jeli ile cam bağırsak (4), oftalmik merhem (5), doku mendil (6), tıbbi bant (7), su kabı (8), evde beslenen hayvan kesme makineleri (9) depilatory (10), küçük konteyner ile krem uygulamak için pamuk ipuçları göz jeli (11) merhem veya ultrason. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3 : Alan Isoflurane Buharlaştırıcı ile tarama. Çalışma Stage'le isoflurane Buharlaştırıcı (3) de dahil olmak üzere ayarlanabilir sonda tutucu (1), indüksiyon Odası (2). Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4 : Ultrason cihazı. Ultrason sistemi üç ultrason probları ve ilgili bağlantı noktalarına ile sağlanır. Klavye ve PC fare sistemi içinde bulunur. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5 : Kurtarma kafes. Kafesin altına ince bir doku ile hazırlanır ve tarama prosedürü sonra yeterli Isıtma için izin vermek için Önceden ısıtılmış. Sıcaklık santigrat (C °) gösterilir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 6 : Sabit fare çalışma sahnede. Fare sırtüstü pozisyonda çalışma Sahne Alanı'nda yer alıyor. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 7 : Evde beslenen hayvan kesme makineleri kullandıktan sonra traş fare. Karın kürk kesilir, ama hangi düzenli olarak el eşyaları neden saç daha küçük parçalar kalıcı. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 8 : Depilatory krem kullanımı. Depilatory krem traş bölgesindeki karın ince bir tabaka yönetmek. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 9 : Bir fare tamamen traş karın. Bol su tüm krem artıkları durulama için kullanılır, tümüyle kaldırılmasını kürk en iyi bir tarama yordam sağlar. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 10 : Fare sağ tarafında. Pankreas kuyruk tümör tarama için en iyi yönü. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 11 : Sol tarafında fare. Pankreas baş tümör tarama için en iyi yönü. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 12 : Fare karın ultrason sondası. Önlemek için çok fazla baskı kullanmak fare için herhangi bir yaralanma. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 13 : Ultrason görüntüsü şu karın kısmı Böbrek ve karaciğer için yakın ana geminin abdominal aort ve vena kava inferior gibi yapıların içinde yer alır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 14 : Sol karın kısmı ultrason resmini Sol böbrek ve dalak arasında pankreas membranöz yapısını bulunur bir dönüm noktası olarak vena lienalis org (sarı ok) çalışan ve yol gösterici bir yapı olarak kullanılabilir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 15 : Pankreas kenarlığını. (İçindekiler ile) mide pankreas (sarı ok) sol kenarlığını işaretler. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 16 : Tanımlayıcı pankreas tümörü. Sırtüstü konumu yuvarlak pankreas tümörü görünen bir hypodense ile çevresindeki normal doku kenarlığını ok gösterir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 17 : Boyuna konumu. Pankreas tümörü uzunluðunu belirlemek. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 18 : Pankreas tümörü boyuna taraması. Hava yoluyla neden müdahale oniki parmak bağırsağı dolu. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 19 : Fareyi sağ tarafında: pankreas kuyruk tümör Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 20 : Farenin sol: pankreas başı tümörü Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 21 : Tümör Birim miktar. Tüm üç çapları daha önce belirtilen iki tarama pozisyonlarda edinimi sonra hacim hesaplama yapılır. Bu nedenle, bir elipsoid formül kullanılır: 4/3 π/2 a * b/2 * c/2. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 22 : Kurtarma. Hayvan tarama kadar tamamen iyileşmiş bir ısıtma yüzeyi aktarıldıktan sonra fare göz beyaz göz merhem dikkat edin. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu iletişim kuralı ile pankreas tümörleri genetiği fare modellerinde yüksek çözünürlüklü abdominal ultrason Imaging'i kullanma miktarının için ayrıntılı bir açıklama sağlanmıştır. Son zamanlarda, Sastra ve ark. nasıl fare modelleri, ancak hazırlık ve tüm diğer adımları için önkoşul gösterildiği gibi11işleme hakkında görüntülenmeyecektir talimat pankreas tümörleri ölçmek için ayrıntılı bir açıklama yayınladı. Bu makale genel amacı farelerde yüksek çözünürlüklü ultrason için kapsamlı görsel bir kılavuz sağlamaktır.
Her ne kadar biz bizim açıklama genetiği farelerde endojen pankreas tümörleri üzerinde odaklanmak, bu yöntem de orthotopic nakli modeller için kullanılabilir. Orthotopic modeller için çok küçük tümörler kadar bile 1-2 mm tespit abdominally çekim hızı ve tümör başlangıçlı araştırmak için. Abdominal palpasyonla öznel ve yeniden oluşturulması güç olabilir gibi ultrason tarama da çok küçük pankreas tümörleri başlangıcı tespit için KPC modeli önceki palpasyonla olmadan uygulanabilir. Ayrıca, hava ile dolu ince bağırsak döngüler gibi karın yapıları bindirilmiş olabilir. Bu bağlamda, çalışma Sahne Alanı'nda hayvan konumunu değiştirmek yardımcı olabilir. Çoğu tümörler sırtüstü pozisyonda görüntülenmeyecektir; Ancak, bazı tümörler yalnızca fareyi onun sol tarafta (pankreas başı tümörü) veya sağ tarafta (pankreas kuyruk tümörler) yerleştirildiğinde algılanabilir. Böylece, yeterli bir fare konumlandırma verimli görünürlüğünü artırmak için önemlidir.
Karın organları veya anatomik değişkenlik yetersiz görünürlüğünü ortaya çıkabilir. Görünürlük ve ultrason görüntülerin çözünürlüğünü artırmak için parlaklık ve Karşıtlık ayarlarını hem de odak buna göre değiştirilmesi. Görüntü eserler hatalı/yanlış sonda, fare kürk eksik kaldırılmasını, ultrason jeli yetersiz miktarda veya fare karın ile probe yetersiz temas basıncı nedeniyle olabilir. Ayrıca, biraz sonda devirme görünürlük de önemli ölçüde artırabilir.
Ayrıca, tümör büyüme Kinetik boyuna küçük hayvan ultrason ile takip edilebilir. Tekniğin büyük avantajı düşük maliyeti (verilen bir ultrason makine durumu), hiçbir radyasyona maruz kalma, kısa scanning zaman ve böylece küçük zorlanma fareler için içerir. Boyuna kanser araştırmaları ışığında özellikle tekrarlanan tarama gerçekleştirmek kolay ve küçük hayvanlar sedasyon veya küçük hayvan BT veya MRI taramaları için gerekli olan anestezi uzun süreler, gerek kalmadan zorlar.
Daha güçlü ultrason sistemleri ile teknik gelişmeler şu anda geliştirilmiş çözünürlük ve giderek otomatik görüntü optimizasyon araçları, küçük hayvan, geliştirilmekte olan bu yana yüksek çözünürlüklü ultrason daha sık preklinik çeşitli kullanılacak disiplinleri içinde belgili tanımlık gelecek. Protokol içindeki kritik adımlar, karın organları ve damarları düzeltmek yanı sıra, doğru fare hazırlık ve konumlandırma içerir.
Yüksek çözünürlüklü ultrason genetik olarak algılama ve miktar pankreas Tümörlerinin için değerli bir araç olduğunu ve orthotopic fare modelleri. Diğer kurulan hayal teknikleri ile karşılaştırıldığında bu ultrason tabanlı yöntem hızlı oturum süreleri ve maliyet verimliliği birleştirir. Doğru satın alma ve ultrason resimleri yorumlanması doğru uygulamalı eğitim ve deneyim gerektirdiğinden bu video iletişim kuralı tüm yönleriyle pankreas kanseri modelleri için ayrıntılı bir kılavuz olarak hizmet vermektedir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Bu araştırma Deutsche Krebshilfe tarafından desteklenmiştir (Max Eder grup AN için: 110972), bir DGVS doktora tezi Bursu (SMB) ve bir Else-Kröner-Fresenius-Vakfı burs (RGG) Üniversitesi Tıp Merkezi Goettingen. Jutta Blumberg ve Ulrike Wegner uzman teknik destek için teşekkür ederiz. Biz de tüm hayvan teknisyenleri Üniversitesi Tıp Merkezi Goettingen fare tutmak için hayvan tesisinde teşekkür ederiz. Tüm deneyler Alman hayvan refahı düzenlemelere göre yapıldı.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Visual Sonics Vevo2100 High Resolution Ultrasound System, including imaging stage and anesthesia line | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11945 | |
| Vevo 2100 MicroScan Transducer MS-550-D (22-55MHz) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11874 | |
| Vevo Anesthesia System (anesthesia induction chamber with fresh and waste gas inlet) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-12055 | |
| Vevo Imaging Station (working stage with nose cone for anesthesia supply) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-11982 | |
| electronic pet clippers | Panasonic Marketing Europe, Germany | 5025232484324 | Panasonic ER-PA10-s |
| Labotect Hot plate | Labor tech Göttingen, Germany | 13854 | |
| eye cream (ophthalmic ointment) | Schülke&Mayr, Germany | 9080249 | |
| veterinary isoflurane | Abbvie, Germany | 4831867 | |
| depilatory cream | RB healthcare UK, United Kingdom | 8218535 | |
| 70% ethanol (v/v) in distilled water | TH. Geyer, Germany | 22941000 | |
| ultrasound gel | Asmuth, Germany | 13477 | |
| tissue wipes | Kimberly-Clark Germany, Germany | 7558 | |
| cotton tips | Meditrade, Germany | 75481116 | |
| glass bowl for ultrasound gel | ARC France, France | H1149 | |
| water bowl | W & P Trading Co., USA | B00K2P6PLQ | |
| gauze sponges | Fuhrmann, Germany | 960504 |
References
- Kersten, K., de Visser, K. E., van Miltenburg, M. H., Jonkers, J. Genetically engineered mouse models in oncology research and cancer medicine. EMBO Molecular Medicine. 9 (2), 137-153 (2017).
- Olive, K. P., Politi, K. Translational therapeutics in genetically engineered mouse models of cancer. (2), Cold Spring Harbor. 131-143 (2014).
- Westphalen, C. B., Olive, K. P. Genetically engineered mouse models of pancreatic cancer. The Cancer Journal. 18 (6), 502-510 (2012).
- Hingorani, S. R., et al. Trp53R172H and KrasG12D cooperate to promote chromosomal instability and widely metastatic pancreatic ductal adenocarcinoma in mice. Cancer Cell. 7 (5), 469-483 (2005).
- Frese, K. K., et al. nab-Paclitaxel potentiates gemcitabine activity by reducing cytidine deaminase levels in a mouse model of pancreatic cancer. Cancer Discovery. 2 (3), 260-269 (2012).
- Paredes, J. L., et al. A non-invasive method of quantifying pancreatic volume in mice using micro-MRI. PLoS One. 9 (3), e92263 (2014).
- Boj, S. F., et al. Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer. Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).
- Aung, W., et al. Immunotargeting of Integrin alpha6beta4 for Single-Photon Emission Computed Tomography and Near-Infrared Fluorescence Imaging in a Pancreatic Cancer Model. Molecular Imaging. 15, (2016).
- Akladios, C. Y., et al. Contribution of microCT structural imaging to preclinical evaluation of hepatocellular carcinoma chemotherapeutics on orthotopic graft in ACI rats. Bulletin du Cancer. 98 (2), 120-132 (2011).
- Neesse, A., et al. CTGF antagonism with mAb FG-3019 enhances chemotherapy response without increasing drug delivery in murine ductal pancreas cancer. Proceedings of the National Academy of Science USA. 110 (30), 12325-12330 (2013).
- Sastra, S. A., Olive, K. P. Quantification of murine pancreatic tumors by high-resolution ultrasound. Methods in Molecular Biology. 980, 249-266 (2013).
