Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Een experimenteel Model van dieet-geïnduceerde metabool syndroom in konijn: methodologische overwegingen, ontwikkeling en beoordeling

Published: April 20, 2018 doi: 10.3791/57117
Automatic Translation
1,2,3, 1,2,3, 1,2,4, 5, 2,3, 6, 2, 2, 1,3, 6
1CIBERCV, Instituto de Salud Carlos III, 2Department of Physiology, Universitat de València, 3INCLIVA, 4Department of Electronic Engineering, Universidad Politécnica de Valencia, 5UCIM, Universitat de València, 6Department of Physiotherapy, Universitat de València

Summary

Methoden voor het ontwikkelen van een experimenteel model van dieet-geïnduceerde metabool syndroom (MetS) beschrijven we bij konijnen met behulp van een high-fat, hoog-sacharose dieet. Dieren ontwikkeld centrale obesitas, milde hypertensie, pre diabetes en dyslipidemia, dus het reproduceren van de belangrijkste componenten van menselijke MetS. Deze chronische model zal het toestaan van overname van de onderliggende mechanismen van de kennis van progressie van de ziekte.

Abstract

Obesitas en het metabool syndroom (MetS) zijn in de afgelopen jaren een groeiend probleem voor de volksgezondheid en de klinische praktijk, gezien hun verhoogde prevalentie als gevolg van de opkomst van sedentaire levensstijl en ongezonde eetgewoonten geworden. Dankzij diermodellen, fundamenteel onderzoek kan het onderzoeken van de mechanismen die ten grondslag liggen aan de pathologische processen zoals MetS. Hier beschrijven we de gebruikte methoden voor het ontwikkelen van een model van de experimentele konijn dieet-geïnduceerde MetS en haar beoordeling. Na een periode van acclimatisering, zijn dieren een hoog-vet (10% gehydrogeneerde kokosolie en 5% reuzel), hoge-sacharose (15% sacharose in water opgeloste) dieet voor 28 weken gevoed. In deze periode verschillende experimentele procedures werden uitgevoerd om te evalueren van de verschillende onderdelen van MetS: morfologische en bloeddrukmetingen, glucose tolerantie vastberadenheid, en de analyse van verschillende plasma markers. Aan het einde van de proefperiode, dieren ontwikkeld centrale obesitas, milde hypertensie, pre diabetes en dyslipidemia met laag HDL, hoge LDL, en een toename van de triglyceriden (TG) niveaus, dus de belangrijkste componenten van menselijke MetS te reproduceren. Dankzij dit chronische model kan nieuwe perspectieven voor het begrip van de onderliggende mechanismen in de progressie van de ziekte, het detecteren van preklinische en klinische merkers, waarmee de identificatie van patiënten in gevaar, of zelfs het testen van nieuwe therapeutische benaderingen voor de behandeling van deze complexe pathologie.

Introduction

Overgewicht en metabool syndroom (MetS) zijn een groeiend probleem voor de volksgezondheid en de klinische praktijk, gezien hun verhoogde prevalentie als gevolg van de opkomst van sedentaire levensstijl en ongezond eten gewoonten1geworden. Er zijn verschillende definities van MetS, maar de meeste van hen beschrijven als een cluster van cardiovasculaire en metabole veranderingen zoals abdominale obesitas, verlaagde HDL en verhoogde LDL cholesterol, verhoogde triglyceriden, glucose-intolerantie en hypertensie2 ,3,4. Diagnose vereist dat drie van deze vijf criteria aanwezig zijn.

Als gevolg van diermodellen, is fundamenteel onderzoek geslaagd te onderzoeken van de mechanismen die ten grondslag liggen aan de pathologische processen zoals MetS. Verschillende diermodellen zijn gebruikt, maar het is van cruciaal belang dat het model van keuze de belangrijkste Klinische manifestaties van de menselijke pathologie (Figuur 1 reproduceert). Met dit doel, hebben diermodellen beschouwd als vergelijkbaar met mensen, voornamelijk honden en varkens, ontwikkeld (Zie Verkest5 en Zhang & Lerman6 voor beoordeling). Echter, canine modellen vertonen geen alle componenten van MetS, gezien het feit dat de ontwikkeling van arteriosclerose of hyperglykemie in honden door middel van het dieet twijfelachtig5 is. Varkens modellen presenteren de meest anatomische en fysiologische gelijkenis met de mens, en bieden dus belangrijke voorspellende kracht voor het ophelderen van de mechanismen die ten grondslag liggen aan de MetS, maar het onderhoud en de complexiteit van de experimentele procedures gebruik maken van dit model zeer arbeid-intensieve en dure6.

Aan de andere kant, knaagdier modellen (muis en rat), dieet-geïnduceerde spontane en transgene, zijn uitgebreid gebruikt in de literatuur voor de studie van obesitas, hypertensie, en MetS en de pathologische gevolgen daarvan in verschillende organen en systemen (Zie Wong et al. 7 voor beoordeling). Hoewel het gebruik van deze modellen meer betaalbaar dan canine of varkens, hebben ze belangrijke nadelen. Inderdaad, afhankelijk van de spanning, dieren ontwikkelen sommige onderdelen van MetS, terwijl anderen zoals hypertensie, hyperglycemie en hyperinsulinemia afwezige7 zijn. Bovendien, een van de belangrijkste onderdelen van MetS, obesitas, in sommige genetisch gemodificeerde stammen, alleen hangt niet factoren die samenhangen met het dieet, eerder is gebleken dat sommige dieren zwaarlijvige met normale of zelfs minder voedsel inname8geworden. Ten slotte, muizen en ratten een natuurlijke tekort vertonen cholesteryl ester transfer proteïne (CETP) en gebruik van HDL als het belangrijkste vervoermiddel cholesterol, waardoor ze relatief resistent zijn tegen de ontwikkeling van atherosclerose. Dit is een belangrijk verschil in lipide metabolisme met de mens, die express CETP en hun cholesterol voornamelijk in LDL9vervoer.

Omgekeerd, het laboratorium konijn vertegenwoordigt een tussenstadium tussen de grotere dier en knaagdier experimentele modellen. Dus, het konijn kan gemakkelijk worden ingediend bij verschillende soorten protocollen met minimale eisen voor personeel en onderhoud, behandeld gemakkelijker in experimentele procedures dan grotere diermodellen. Bovendien, het is gemeld dat konijnen gevoed met een vetrijke dieet soortgelijke hemodynamische en neurohumorale veranderingen als zwaarlijvige mensen8,10,11 hebben. Van de nota, met betrekking tot de lipide metabolisme, het konijn heeft overvloedige CETP in plasma en hun profiel lipoproteïne LDL-rijke12, die is ook vergelijkbaar met mensen. Ook ontwikkelen konijnen hyperlipidemie vrij snel gezien het feit dat als herbivoren, ze zeer gevoelig voor dieet vet13 zijn.

Figure 1
Figuur 1: vergelijking van MetS diermodellen. Zie Verkest5, Zhang en Lerman6en Wong et al. 7 voor herziening. "Equation 1" geeft een voordeel en "Equation 2" geeft een nadeel. *omstreden, hangt af van de studie, *zoals die door Carroll et al. 8, sommige genetisch gemodificeerde stammen worden zwaarlijvig is onafhankelijk van de voedselinname. CEPT: cholesteryl ester transfer proteïne. GTT: glucose tolerantie test. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Om het verhelderen van de fundamentele mechanismen die ten grondslag liggen aan de pathologische remodelleren geproduceerd door MetS in de verschillende organen en systemen en inzicht van deze complexe pathologie, de keuze van een experimenteel model dat de belangrijkste onderdelen van reproduceert menselijke MetS is essentieel. Het konijn kan bieden veel voordelen gegeven zijn gelijkenis met menselijke fysiologie en de betaalbaarheid van gebruik in chronische protocollen en metingen. In deze lijn, paar dieet-geïnduceerde konijn modellen met behulp van high-fat en hoge-sacharose dieet geweest gebruikt14,15,16,17,18,19 (tabel 1), en een karakterisering van de verschillende onderdelen van MetS is van groot belang wanneer een fenotype met orgel remodelleren inzake. De belangrijkste doelstelling van dit artikel is dus te beschrijven van de methoden voor de ontwikkeling van een model van dieet-geïnduceerde MetS bij konijnen, waarmee het onderzoek naar de pathofysiologie en de impact in het remodelleren van het orgel.

Studie Dieet Duur RAS MetS onderdelen
Ob HT HG DL
Yin et al. (2002)14 ·    10% vet 24 weken ·      Mannelijke NZW Equation 2 - Equation 1 Equation 1
·    37 gewichtspercenten sacharose ·      2 kg
Zhao et al. (2007)15 ·    10% vet 36 weken ·      Mannelijke JW Equation 1 Equation 2 Equation 2 Equation 2
·    30 gewichtspercenten sacharose ·      16 weken
Helfestein et al. (2011)16 ·    10% vet 24 weken ·      Mannelijke NZW Equation 2 - Equation 1 Equation 1
·    40% sucrose ·      12 weken
·    0,5-0,1 cholesterol
Ning et al. (2015)17 ·    10% vet 8-16 weken ·      Mannelijke WHHL Equation 2 - Equation 2 Equation 1
·    30% fructose * ·      12 weken
Liu et al. (2016)18 ·    10% vet 48 weken ·      Mannelijke NZW Equation 2 - Equation 1 Equation 1
·    30 gewichtspercenten sacharose ·      12 weken
Arias-Mutis et al. (2017)19 ·    15% vet 28 weken ·      Mannelijke NZW Equation 1 Equation 1 Equation 1 Equation 1

Tabel 1: dieet-geïnduceerde MetS konijn modellen met behulp van high-fat, hoog-sacharose dieet. Het symbool "Equation 2"geeft afwezigheid,"Equation 1" aanwezigheid, en "-" niet geëvalueerd. * beperkt. WHHL, Watanabe erfelijke hiperlipidemic konijnen. JW, Japanse witte konijnen. Ob, obesitas. HT, hypertensie. HG, hyperglycemie. DL, dyslipidemia.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Verzorging van de dieren en de experimentele protocollen die worden gebruikt in deze studie nageleefd EU richtlijn 2010/63 betreffende de bescherming van dieren die voor wetenschappelijke doeleinden worden gebruikt en zijn goedgekeurd door het dier zorginstellingen en gebruik Comité (2015/VSC/PEA/00049).

Opmerking: Het protocol bestaat uit de chronische toediening van een high-fat, hoog-sacharose dieet voor 28 weken, en de beoordeling van de belangrijkste onderdelen van MetS. We gebruikten 11 volwassen mannelijke Nieuw-Zeeland Wit (NZW) konijnen met een gewicht van 4.39 ± 0.14 (s.d.) kg, die waren 20-22 weken oude aan het begin van de experimentele protocol. Ze werden gehuisvest in een kamer met vochtigheid (50 ± 5%) en temperatuur (20 ± 1,5 ° C) gecontroleerde omstandigheden met een 12-h licht fietsen. De woorden "chow" en "dieet" kunnen door elkaar worden gebruikt in de stappen van het protocol.

1. dieet administratie

  1. Verkrijgen of bereiden van diëten
    1. Verkrijgen van een commercieel beschikbare hoog vet dieet met toegevoegde gehydrogeneerde kokosolie (10%) en spek (5%)19. Dit dieet biedt 3.7 kcal·g-1.
    2. 5 tot 15% sacharose oplossingen voor te bereiden door ontbinding van de juiste hoeveelheden sacharose in gesteriliseerd water (bvgebruik 300 g sacharose in 2 L voorraad voor een sacharoseoplossing 15%). Een 15% oplossing biedt 0.6 kcal·mL-1.
    3. Het verkrijgen van een commercieel beschikbare control dieet19, waarin 2.7 kcal·g-1.
  2. De dieren voor 4 weken acclimatiseren
    1. Dagelijks feed van elk dier in de controlegroep 120 g van control dieet. Water ad libitumverstrekt.
    2. Het voederen van dieren in MetS groep 250gr chow beginnen met een controle van 50% en 50% high-fat chow, geleidelijk verhogen tot 100% high-fat chow tegen het einde van week 4.
      Opmerking: Het doel zou zijn om te bereiken: (i) controle van de 35% en 65% high-fat chow tegen het einde van week 1; (ii) controle 25% en 75% high-fat chow tegen het einde van week 2; (iii) 15% controle en 85% high-fat chow tegen het einde van week 3. (iv) 100% high-fat chow tegen het einde van week 4.
    3. Geef dieren in de MetS groep water met 5 gewichtspercenten sacharose aan het begin, en verhogen van sucrose concentratie tot 15% tegen het einde van de 4th -week.
    4. Registreren de dagelijkse inname van chow en sacharose oplossing voor het berekenen van de calorie-inname per waarden voorzien in 1.1.1. en 1.1.2.
  3. Induceren van MetS (28 weken)
    1. Feed van elk dier in de controlegroep 120 g van besturingselement chow en water ad libitum dagelijks.
    2. Het voeden van de dieren in de groep van de MetS 250gr van high-fat chow en 15% sucrose in water. Chow dagelijks en de sacharoseoplossing elke derde dag vervangen.
    3. Weeg de resterende chow en water dagelijks te schatten dagelijkse inname.

2. morfologische beoordeling

  1. Meten van dierlijke lichaamsgewicht op een wekelijkse basis.
  2. Hoogte, lengte, abdominale contouren tibiale lengtemeten en schatten BMI vóór administratie van de experimentele dieet en weken 14 en 28 in narcose dieren.
    1. Cannulate rechter oor marginale ader met een steriele wegwerp katheter (18-22 G) en injecteren propofol (8 mgkg-1) gevolgd door 1,5 mL van 0.9% NaCl-oplossing. In de narcose konijn, de metingen die zijn vermeld in de volgende stappen uit te voeren.
    2. Maat hoogte en lengte. Met behulp van meten tape, maatregel en record de afstand van de neus tot de hiel in de positie van de laterale decubitus (lengte). Nemen in dezelfde positie, de afstand tussen het acromion in de schouder naar het uiteinde van de poot (hoogte).
    3. Berekenen van de Body mass index (BMI)20 als lichaamsgewicht (kg) · [lichaam lengte (m) x lengte (m)] -1.
    4. Plaats het meetlint zachtjes rondom de buik contour en nemen een meting met het dier in liggende positie.
    5. Meten tibiale lengte van het onderste gedeelte van het kniegewricht tot de invoeging van de achillespees.

3. vasten Glycemia en intraveneuze Glucose tolerantie Test (IVGTT)

Opmerking: Het is raadzaam om te beginnen de procedures de dezelfde tijd van dag (dat wil zeggen, 2-3 PM).

  1. Voorbereiden van een stamoplossing glucose (60%) met 60 g glucose in 100 mL van 0.9% NaCl-oplossing.
  2. Snel het dier voor 7 h (verwijderen van voedsel en onderhouden van water), plaats dan het bewuste konijn in een afdekking in de vatbaar positie. Voorbereiden van de glucose meter (insert een nieuwe strip in de meter), en nemen in het eerste voorbeeld van de linker oor marginale ader een lancet gebruiken om een druppel bloed. Dan raken de daling van de bloed met de test strip en maatregel bloed glucoseniveaus met behulp van de glucose meter om te vasten glycemia te bepalen.
  3. Cannulate rechter oor marginale ader met een disposable katheter (18-22 G) en injecteren van een bolus van een 60% glucose-oplossing (0.6 g·kg-1).
    Opmerking: Ter voorbereiding van de bolus, toevoegen 1 mL/kg voor de voorraad van glucose.
  4. Nemen van bloedmonsters die met behulp van de lancet (één druppel bloed) bij 15, 30, 60, 90, 120 en 180 min na injectie van glucose en analyseren met de meter van de glucose in 3.2.
  5. Verwijder de wegwerp katheter en knijpen van de site van inbrengen van de katheter met een gaas. Zodra bloed heeft gecoaguleerd, verwijder het gaas en controleer de status van het dier.

4. Blood Pressure

  1. Voorbereiden van de acquisitie-systeem, met inbegrip van een drukopnemer, een 10 mL spuit met 0,9% NaCl, een drie-weg-afsluiter, een versterker en een PC/laptop met de acquisitie software (voor het opnemen van de bloeddruk).
  2. De apparatuur instellen. Eerst plaats het drieweg afsluiter en de spuit in de drukopnemer, tussen de transducer en de katheter, en de drukopnemer verbinden met de versterker. Sluit de versterker op de PC/laptop.
  3. Uitvoeren van het druk transducer kalibreren volgens de aanbevelingen van de fabrikant.
  4. Plaats het bewuste dier in de afdekking van een konijn in de vatbaar positie. Opwarmen van het oor voor cannulation, topisch breng dan een plaatselijke verdoving (2,5% Lidocaïne-prilocaïnecrème) in het oor rond de plaats van de invoegpositie. Tik zachtjes op het gebied waar de vasculaire pakket loopt gemakkelijk kunnen identificeren van de slagader. Voeg vervolgens een steriele katheter (18-22 G) in het linker oor centrale slagader. Los van de beperkingen en laat het dier blijf rustig gedurende 30 minuten.
  5. Opnemen van de bloeddruk voortdurend voor 20 min vanuit de arteriële katheter, plaatsen de drukopnemer gepositioneerd naast het dier op het niveau van het hart (sampling-frequentie: 1 KHz, Zie figuur 5B).
    Opmerking: Om te houden van de bloeddruk (BP) gratis opname uit bloed coagulatie interferentie (BP signaal amplitude verliest of verdwijnt), een injectie NaCl (0,9%) moet worden gemaakt. Met behulp van de drie-weg-afsluiter, sluit het circuit dat gaat de transducer op de katheter, open het circuit dat van de injectiespuit naar de katheter gaat, en 1-2 mL te injecteren. Hiermee verwijdert u bloedstolsels die kunnen vormen in de katheter. Vervolgens opent het circuit tussen de transducer en de katheter, en doorgaan met het opnemen zodra het signaal gerecupereerd.
  6. Zodra de opname is voltooid, verwijdert u de katheter en knijpen met een gaas op de site van de katheter inbrengen om te stoppen met bloedverlies. Zodra het bloed heeft gecoaguleerd, verwijder het gaas en controleer de status van het dier.

5. plasma metingen

Opmerking: Het is raadzaam om te beginnen de procedures de dezelfde tijd van dag (dat wil zeggen, 2-3 PM).

  1. Snel het dier voor 7 h (verwijderen van voedsel en onderhouden van water), vervolgens het bewuste dier in een afdekking in de vatbaar positie plaatsen en invoegen van een steriele naald 21 G in de linker oor marginale ader. Zodra bloed begint te druppelen, negeren de eerste druppel en verzamelen de bloedmonsters in EDTA buizen tot op het niveau dat is aangegeven in de buis. De monsters worden opgeslagen op het ijs.
  2. Centrifugeer bloedmonsters op 1.500 x g, 15 min, 4 ° C. Na het centrifugeren, zuiging van het plasma dat met behulp van een precisiepipet en aliquots van 250 µL te bereiden.
  3. Analyseer de monsters verse onmiddellijk. Basis controleparameters zijn als volgt: triglyceriden, totaal cholesterol, HDL en LDL cholesterol.
    Opmerking: Monsters niet vers geanalyseerd moeten worden opgeslagen onmiddellijk in een vriezer-80 ° C. Indien u interesse hebt in het bloedglucose uit plasma monsters analyseren, gebruik de bloedglucose test buizen met Fluoride oxalaat in plaats van EDTA.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

MetS vertegenwoordigt een cluster van metabole en cardiovasculaire afwijkingen wiens studie kan worden vergemakkelijkt door het gebruik van experimentele modellen. Inderdaad, om het ophelderen van de mechanismen die ten grondslag liggen aan de pathologische remodelleren geproduceerd door MetS, de keuze van een experimenteel model dat op de juiste manier lijkt op de menselijke conditie en is geschikt voor onderzoek is van cruciaal belang. Hier presenteren we de methoden om te induceren MetS in konijn met behulp van een dieet hoog in verzadigd vet en sacharose, en een gedetailleerde karakterisering voor de beoordeling ervan. Het gebruik van voeding in plaats van een genetisch gemodificeerde diermodel is van groot belang aangezien dieet gehele lichaam metabolisme19 beïnvloedt, dus lijkend op nauw wat er gebeurt in menselijke MetS. We gebruikten een faculteit (gemengd model) ANOVA met twee factoren, één herhaalde maatregelen of "within" factor (tijd: pre, week 14 en week 28, afhankelijk van de analyse) en een "tussen" factor (groep: controle en MetS) voor statistische analyse. Betekenis werd aanvaard wanneer p < 0.05.

De hoog-vet, hoog-sacharose dieet wordt goed verdragen door de dieren. Een periode van de acclimatisering van 4 weken is noodzakelijk voor de juiste overgang van de vorige voeding regime aan de hoog-vet, hoog-sacharose dieet. Dieren in de controlegroep zijn 120 g chow, waarvan is aangetoond dat geschikt is voor het onderhoud van de volwassen konijn8worden gevoed. Konijnen in de MetS groep steeg geleidelijk in gewicht tot het einde van de experimentele protocol (tabel 2). Dieren moeten 50-100 g per week krijgen. Het is belangrijk dat de konijnen individueel in kooien met genoeg ruimte, licht en milieu verrijking (figuur 2C gehuisvest zijn), en een dagelijkse controle van de dieren wordt uitgevoerd. Ook op een dagelijkse basis, chow en drankje inname moet worden gecontroleerd en geregistreerd, om te bereiken van gewichtstoename en detecteren van mogelijke gezondheidsproblemen, aangezien konijnen gemakkelijk benadrukt zijn en het antwoord zijn kan om te stoppen met voeding consumptie. Daarnaast, omdat vetrijke pellets neiging om zeer onstabiel en verliezen van samenhang heel gemakkelijk, draaien tot poeder welke konijnen niet eten, is het van essentieel belang zijn voor de dagelijkse gedeelten van chow zeer zorgvuldig voor te bereiden (figuur 2A). In figuur 3A, kunnen we observeren het gedrag van de energie-inname en de schommelingen, variërend van 250 tot 815 kCal in de MetS-groep. In figuur 3B, is de relatieve bijdrage van de verschillende bronnen van energie (chow en drankje) afgebeeld. Er zijn kritieke perioden in weken 14 en 28, omdat de stress geproduceerd door experimentele procedures, konijnen kunnen verlagen chow en water inname. De dagelijkse kwantificering maakt de snelle identificatie van dit probleem, dat kan worden vermeden door de invoering van controle chow (80% hoog-vet, 20% controle) en verminderen de sacharoseoplossing van 15% naar 10%, of zelfs 5%, gedurende 2-3 dagen tot dieren herstellen hunnormale de waarden van de inname. Dieren ontwikkeld ook centrale obesitas zoals blijkt uit de toename van gewicht, buik omtrek en BMI (tabel 2), dat nauw verwant is met de risicofactoren die MetS3definiëren.

Figure 2
Figuur 2: dieet administratie. Controle in deelvenster Achow (boven) en high-fat chow (zie hieronder) worden afgebeeld, waarin de verschillen tussen de twee als gevolg van de toegevoegde vet. Om te voorkomen dat het poeder dat vetrijke pellets minder maakt smakelijk, het is noodzakelijk om het gebruik van een zeef te scheiden van vetrijke pellet poeder (deelvenster A, bodem). In Configuratiescherm B, we kunnen constateren dat de materialen die nodig zijn om de drinken oplossing (links) en hoe het is aan te raden om het maken van een stamoplossing om te verspreiden in de water dispenser. Tot slot, het welzijn van de dieren is zeer belangrijk, en zij moeten individueel worden gehuisvest in kooien (C) met voldoende ruimte en licht en, indien mogelijk, milieu verrijking (d.w.z., platformen, speelgoed, enz.). Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 3
Figuur 3: energieopname. De evolutie van de wekelijkse inname tijdens de 28 weken van de experimentele periode is afgebeeld in deelvenster A voor controle en MetS. De relatieve inname (in procenten) van kCal van high-fat chow en de drinken oplossing van MetS dieren wordt weergegeven in het deelvenster B. Control (n = 5), MetS (n = 6). Foutbalken: SD. Modified van Arias-Mutis et al. 19 Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Pre dieet Week 14 Week 28
Controle MetS Controle MetS Controle MetS
Gewicht (Kg) 4.35(0.15) 4.43(0.14) 4.49(0.12) 5.42(0.17) 4.51(0.13) 5.75(0.6)
Lengte (cm) 52.4(1.6) 53.6(1.7) 52.5(0.8) 54.4(1.7) 53.7(0.7) 54.6(0.8)
Hoogte (cm) 25.9(0.7) 25.5(1.1) 25.9(2.2) 26.1(5.3) 26.0(1.0) 26.1(1.5)
Abdom. omtrek (cm) 39.8(1.7) 40.5(1.4) 38.5(1.5) 47.5(2.2) 38.1(1.0) 49.7(3.5)
Tibiale lengte (cm) 16.4(0.8) 16.3(0.7) 16.7(0.3) 16.7(0.4) 17.4(0.4) 16.8(0.6)
BMI (Kg/m2) 32.8(1.9) 32.9(2.6) 32.8(1.2) 36.8(1.9) 32.6(2.1) 39.3(6.0)

Tabel 2: morfologische kenmerken. We vonden verschillen bij het vergelijken van controle vs. MetS op weken 14 en 28 in gewicht (belangrijkste effect p = 0.003, η2 = 0,6; paarsgewijze vergelijkingen op week 14 p < 0.001 en week 28 p < 0.001), buik omtrek (belangrijkste effect p < 0,001, η2 = 0,9 paarsgewijs vergelijkingen op week 14 p < 0.001 en week 28 p < 0.001), en BMI (belangrijkste effect p = 0.016, η2 = 0,5; paarsgewijze vergelijkingen op week 14 p < 0.001 en week 28 p < 0,001). Controle (n = 5) en MetS (n = 6). Waarden worden uitgedrukt als betekenen (SD). Vanaf Arias-Mutis et al.gewijzigd. 19.

Met betrekking tot het glucosegehalte van het bloed speelt het antwoord op de IVGTT een sleutelrol in de karakterisering van glucose homeostase21. We observeren milde hyperglykemie in week 14, die een plateau bereikt en onderhoudt gelijkaardige waarden in week 28 (figuur 4A). Het gebied onder de curve (AUC) verhoogt ook in de MetS groep (figuur 4B). Hoewel de licht-donkerscheiding te identificeren van type II diabetes bij konijnen gebaseerd op nuchtere bloedglucose waarden nog niet hebben erkend19, met dit experimentele protocol, konijnen ingediend tot 28 weken van high-fat, ontwikkeld hoog-sacharose voeding pre diabetes met verminderde nuchtere glucose en glucose-intolerantie.

Figure 4
Figuur 4: Blood glucose verordening. De resultaten van de IVGTT in controle en MetS dieren op weken 14 en 28 worden weergegeven in het deelvenster A. De kwantificering van het gebied onder de curve (AUC) van 0 tot 180 min wordt afgebeeld in deelvenster B met een doos en snorharen plot. Deze parameter steeg in MetS dieren in weken 14 en 28 versus besturingselementen (belangrijkste effect p = 0,001, η2 = 0,5; paarsgewijze vergelijkingen op week 14 p = 0,001 en week 28 p = 0.002). Controle (n = 5), MetS (n = 6). Vanaf Arias-Mutis et al.gewijzigd. 19 Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Hypertensie is nauw en direct gerelateerd aan de ernst van de obesitas. Konijnen gevoed een high-fat, hoog-sacharose dieet voor 28 weken sprake van een toename in gemiddelde, systolische en diastolische bloeddruk al in week 14, en deze stijging van de bloeddruk wordt gehandhaafd tijdens week 28 (figuur 5C - E). Gezien de nauwe relatie tussen bloeddruk en BMI22, is het van groot belang om ervoor te zorgen dat de dieren gewichtstoename geleidelijk met het oog op een aanzienlijke stijging van de bloeddruk.

Figure 5
Figuur 5: wijzigingen in bloeddruk. Deelvenster A toont de katheter die is ingevoegd in de auricular slagader. Van de nota, gezien het feit dat de ader en de auricular slagader de gebitsstructuur van het oor zeer nauw doorlopen, is het van cruciaal belang om hen te onderscheiden. Voor cannulation is het raadzaam om te warmen het oor en, na topische verdoving, naar tik zachtjes het gebied waar de vasculaire pakket loopt. De slagader heeft een dikker vasculaire muur en een lichtere kleur dan de ader, en bloed pulsen kunnen worden waargenomen. Paneel B toont de experimentele opzet met de drukopnemer, die is aangesloten op een versterker en registreert continu het signaal (BP opname). Panelen C en D Toon vak en snorharen percelen van systolische en diastolische bloeddruk bij week 14 en 28 in beide experimentele groepen. Gemiddelde arteriële druk (kaart) wordt gepresenteerd in deelvenster E. We vonden verschillen bij het vergelijken van controle vs. MetS op weken 14 en 28 in systolische (belangrijkste effect p = 0.003, η2 = 0,4; paarsgewijze vergelijkingen op week 14 p = 0.029 en week 28 p = 0,013), diastolische (belangrijkste effect p = 0.027, η2 = 0,3; paarsgewijze vergelijkingen op week 14 p = 0,036 en week 28 p = 0,001) en plattegrond (belangrijkste effect p = 0.006, η2 = 0,4; paarsgewijze vergelijkingen op week 14 p = 0.027 en week 28 p = 0,001). Controle (n = 5), MetS (n = 6). Vanaf Arias-Mutis et al.gewijzigd. 19 Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Tot slot, om te beoordelen van de ontwikkeling van MetS, een evaluatie van veranderingen in de Biochemische merkers plasma is noodzakelijk. In dit chronische model, we een verandering in het lipide profiel zo vroeg als week 14 waargenomen en deze wijziging bleef stabiel tot week 28, zonder verdere stijgingen van de verschillen. Wijzigingen in plasma lipid profiel worden gekenmerkt door een toename van de triglyceriden en de LDL, een daling van de HDL, en geen veranderingen in totaal cholesterol in MetS dieren versus controles aan beide tijd punten (weken 14 en 28) (tabel 3).

Week 14 Week 28
Controle MetS Controle MetS
Totaal cholesterol (mg·dL-1) 20.4(2.3) 24.0(9.1) 27.4(15.7) 21.2(4.4)
HDL (mg·dL-1) 9.1(4.2) 4.3(1.7) 11.2(4.2) 5.1(2.9)
LDL (mg·dL-1) 3.8(1.1) 8.7(4.5) 4.0(1.2) 13.8(9.3)
Triglyceriden (mg·dL-1) 71.2(58.8) 118.0(40.7) 30.2(11.4) 76.8(28.2)

Tabel 3: beoordeling van plasma biochemie. We vonden verschillen bij het vergelijken van controle vs. MetS op weken 14 en 28 in HDL (belangrijkste effect p = 0,008, η2 = 0,3; paarsgewijze vergelijkingen op week 14 p = 0.006 en week 28 p = 0.037), LDL (belangrijkste effect p = 0.040, η2 = 0,2; paarsgewijze vergelijkingen op week 14 p = 0,02 8 en week 28 p = 0,034), en triglyceriden (belangrijkste effect p = 0.002, η2 = 0,4; paarsgewijze vergelijkingen op week 14 p = 0.004 en week 28 p = 0,001). Controle (n = 5) en MetS (n = 6). Waarden worden uitgedrukt als betekenen (SD). Vanaf Arias-Mutis et al.gewijzigd. 19

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

De oprichting van een passende experimentele model kan bieden een meer consistente en betrouwbare methode om te studeren van de ontwikkeling van MetS, en het is ook noodzakelijk om te begrijpen van de fundamentele mechanismen die ten grondslag liggen aan de organen en systemen remodelleren. Hier beschrijven we de methoden gebruikt voor het ontwikkelen van een relevante experimentele model van dieet-geïnduceerde MetS en hoe om te beoordelen van de belangrijkste onderdelen van dit cluster van metabole en cardiovasculaire afwijkingen die kenmerkend zijn voor dit model: centrale obesitas, hypertensie, glucose-intolerantie, en dyslipidemia met laag HDL, hoge LDL, en een toename van TG niveaus.

Een grote kracht van het model is de mogelijkheid te bestuderen van de toestand die voorafgaat aan de klinische manifestatie van de pathologie. Inderdaad, met betrekking tot metabole veranderingen, in 28 weken dieren heb niet de ontwikkeling van diabetes type II en werden in een toestand van prediabetes (Figuur 4). Evenzo, plasma Biochemische merkers toonde een duidelijke wijziging in het lipide-profiel met een stijging van de LDL en TG, een daling van de HDL, maar geen wijzigingen in totaal cholesterol (tabel 3), dat een belangrijke factor in de ontwikkeling van atherosclerose is. Hoewel we zien een toename van kunnen systolische, diastolische, en kaart op week 28 (Figuur 5), dit kan worden beschouwd als milde hypertensie. Over het geheel genomen de effecten in de metabole en cardiovasculaire markeringen zijn bescheiden, maar dit model kunnen het onderzoek van de pathologie van de staat voor de gemanifesteerde (en in de meeste gevallen onomkeerbaar), waardoor de identificatie van de preklinische en klinische markeringen die mogelijk de detectie van patiënten in gevaar.

Bovendien, in tegenstelling tot andere MetS dierlijke modellen (muis, rat en hond), spontane of transgene konijnen modellen kunnen ontwikkelen alle onderdelen van de MetS. Interessant, werd er gemeld dat de combinatie van de verschillende onderdelen van MetS cardiovasculair risico versterken kan. Inderdaad, de pathologische remodelleren geproduceerd door hypertensie wordt nog verergerd wanneer meer onderdelen van MetS23 verschijnen. Deze experimentele model kunnen de studie van de onderliggende mechanismen en het effect van de verschillende onderdelen worden gecombineerd. Bovendien, gezien het feit dat voeding gehele lichaam metabolisme beïnvloedt, het gebruik van een dieet-geïnduceerde model heeft grote betekenis, nauw emuleert wat er gebeurt in menselijke MetS19.

De laatste, maar niet minst belangrijke sterkte, is het evenwicht tussen de relevantie en impact op translationeel onderzoek en de economische kosten. Aan de ene kant vinden we de varkens modellen, zeer vergelijkbaar voor de mens, maar erg duur in termen van tijd, middelen en economische kosten. Aan de andere kant hebben we knaagdier modellen, die gemakkelijk te implementeren met weinig kosten, maar hebben een lagere vermogen van de generalisatie. Het konijn model vertegenwoordigt het middelste punt, want het is flexibel genoeg voor vele verschillende types van studies terwijl het vermijden van enkele van de nadelen van grote diermodellen, en gelijkaardige hemodynamische en neurohumorale wijzigingen waargenomen in menselijke MetS8geeft, 10,19.

De volgende beperkingen van de beschreven methoden moeten worden beschouwd. Met betrekking tot centrale obesitas en lichaam vet distributie, zou het gebruik van magnetische resonantie beeldvorming worden de gouden standaard, indien beschikbaar, anders gebruiken de kwantificering van viscerale vet aan het eind van de 28 weken. Andere niet-invasieve methoden voor longitudinale studies, zou zoals de X-ray berekend tomografie, meer adequate24. We in plaats daarvan buik omtrek en BMI gemeten (tabel 2), die ook zijn gebruikt in verschillende studies bij konijnen als een maatregel van centrale obesitas25,11,26. Tibiale lengte meting zou ook nauwkeuriger met behulp van echografie of een been radiografie. Om vast te stellen als de oorzaak van glucose-intolerantie in dit chronische model insulineresistentie of verminderde insulineproductie is, insulineresistentie moet worden bepaald met behulp van een insuline tolerantie test of nuchtere insulineniveaus bepalen.

Ten slotte, ter verbetering van het model, verschillende maatregelen kunnen worden genomen. We kunnen waarschijnlijk hebben verkregen een snellere toename van de glycaemie met de combinatie van korte perioden van alloxaan injectie en de hoog vet, hoog sucrose diet, maar toen het fenotype kan niet worden toegeschreven aan het dieet alleen. Leeftijd ook een belangrijke rol kunnen spelen, aangezien wij samengewerkt met jonge volwassen konijnen (4,5 maanden oud toen dieren in de dierlijke faciliteiten, 12,5-13 maanden oude tegen het einde van de experimentele protocol aankwamen) en MetS vaak optreedt bij oudere leeftijd27. Oudere konijnen waren helaas niet commercieel beschikbaar. Het zou interessant zijn om te testen dit model bij oudere dieren en observeren als het fenotype wordt verergerd.

De methoden die hier gepresenteerd voor de ontwikkeling van dit experimenteel model van MetS in laboratorium konijnen dient een waardevol instrument voor onderzoek gericht op het ophelderen van de fundamentele mechanismen die ten grondslag liggen aan de pathologische remodelleren geproduceerd door MetS in de verschillende organen en systemen, en inzicht van deze complexe pathologie. Tot slot, aangezien NZW konijnen sedentaire dieren, dit dieet-geïnduceerde model kunnen nuttig zijn te onderzoeken hoe de verschillende componenten van de pathologie evolueren op een vergelijkbare manier dan treedt op in menselijke MetS, en nieuwe perspectieven tot begrip leiden kan het pathofysiologische mechanismen die betrokken zijn bij de progressie van de ziekte, de identificatie van preklinische en klinische markers te identificeren van patiënten met risico, of zelfs het testen van nieuwe therapeutische benaderingen voor de behandeling van deze complexe pathologie.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende financiële belangen hebben.

Acknowledgments

Dit werk werd gesteund door de Generalitat Valenciana (GV2015-062), Instituto de Salud Carlos III-FEDER fondsen (CB16/11/0486-CIBERCV) aan FJC, Universitat de València (UV-INV-PRECOMP14-206372) aan MZ en Generalitat Valenciana (PROMETEOII/2014/037).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Veterinary scale SOEHNLE 7858 Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Shovel for aluminum feed COPELE 10308 Shovel for aluminum feed
http://copele.com/es/herramientas/48-pala-para-pienso-de-aluminio.html
Balance PCE Ibérica PCE-TB 15 Balance
http://www.pce-iberica.es/medidor-detalles-tecnicos/balanzas/balanza-compacta-pce-bdm.htm
Strainer (20 cm diam.) ZWILLING 39643-020-0 Strainer
https://es.zwilling-shop.com/Menaje-del-hogar/Menaje-de-cocina/Menaje-especial/Accesorios/Colador-20-cm-ZWILLING-39643-020-0.html
Bowl ZWILLING 40850-751-0 Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Funnel BT Ingenieros not available Funnel
http://www.bt-ingenieros.com/fluidos-y-combustibles/961-juego-de-4-embudos-de-plastico.html?gclid=EAIaIQobChMIuInui_y-1QIVASjTCh28Zwf-EAQYBSABEgK7xPD_BwE
Introcan Certo 22G blue B Braun 4251318 Peripheral intravenous catheter
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-
Propofol Lipuro 10 mg/ml vial 20 ml B Braun 3544761VET General intravenous anesthetic
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/propofol-lipuro-1-
FisioVet serum solution 500ml B Braun 472779 Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Askina Film Vet 1,25cm x 5m B Braun OCT13501 Plastic Plaster
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet
Askina Film Vet 2,50cm x 5m B Braun OCT13502 Plastic Plaster
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet
Injekt siringe 10ml luer B Braun 4606108V Injection-aspiration syringe of two single-use bodies
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/injekt-
Seca 201 seca seca 201 Ergonomic tape for measuring perimeters
https://www.seca.com/es_es/productos/todos-los-productos/detalles-del-producto/seca201.html#referred
Sterican 21Gx1" - 0,8x25mm verde B Braun 4657543 Single Use Hypodermic Needle
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/agujas-hipodermicas-sterican-
CONTOURNEXT-Meter BAYER 84413470 Blood glucose analysis system
http://www.contournextstore.com/en/contour-next-meter-2
CONTOUR NEXT test strips BAYER 83624788 Blood glucose test strips
http://www.contournextstore.com/en/contour-next-test-strips-100-ct-package
MICROLET NEXT LANCING DEVICE BAYER 6702 Lancing device
http://www.contournextstore.com/en/new-microlet-next-lancing-device
MICROLET 2 Colored Lancets BAYER 81264857 Ultra-thin sterile lancet for capillary puncture
http://www.contournextstore.com/en/microlet2-colored-lancets-100s
Injekt 20ml luer siringe B Braun 4606205V Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Askina Mullkompressen 7,5x7,5cm - sterile B Braun 9031219N Sterile gauze packets in envelopes
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-mullkompressen-esteril
Emla lidocaine/prilocaine AstraZeneca not available Local anesthetics
https://www.astrazeneca.es/areas-terapeuticas/neurociencias.html
Introcan Certo 18G short B Braun 4251342 Peripheral intravenous catheter
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-
Introcan Certo 20G B Braun 4251326 Peripheral intravenous catheter
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-
Blood Pressure Transducers-MA1 72-4497 Harvard Apparatus 724497 Transducer for monitoring blood pressure
http://www.harvardapparatus.com/physiology/physiological-measurements/transducers/pressure-transducers/research-grade-pressure-transducers.html
PowerLab 2/26 AD Instruments ML826 Amplifier
https://www.adinstruments.com/products/powerlab
LabChart ver. 6 AD Instruments not available Acquisition software
https://www.adinstruments.com/products/labchart
Animal Bio Amp AD Instruments FE136 Amplifier
https://www.adinstruments.com/products/bio-amps#product-FE136
K2EDTA 7.2mg BD 367861 Blood collection tubes
http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=367861
Centrifuge SciQuip 2-16KL Centrifuge
http://www.sigma-centrifuges.co.uk/store/products/refrigerated-sigma-2-16k-centrifuge/
Eppendorf Reference 2, 100 – 1000 μL Eppendorf 4920000083 Pipette
https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Pipeteo-44563/Pipetas-44564/Eppendorf-Reference2-PF-42806.html
Eppendorf Safe-Lock Tubes, 0.5 mL Eppendorf 30121023 Tubes
https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Puntas-tubos-y-placas-44512/Tubos-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html
NZW rabbits (16-18 weeks old) Granja San Bernardo not available New Zealand White rabbits
http://www.granjasanbernardo.com/en/welcome/
Sucrose  Sigma S0389-5KG Sucrose for drinking solution
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s0389?lang=es&region=ES
Rabbit maintenance control diet Ssniff V2333-000 Control diet
http://www.ssniff.com/
Rabbit high-fat diet Ssniff S9052-E020 High-fat diet
http://www.ssniff.com/
Rabbit rack and drinker Sodispan not available Rack for rabbits
https://www.sodispan.com/jaulas-y-racks/racks-conejo-y-cobaya/
Rabbit restrainer Zoonlab 3045601 http://www.zoonlab.de/en/index.html

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Cornier, M. A., Dabelea, D., Hernandez, T. L., Lindstrom, R. C., Steig, A. J., Stob, N. R., et al. The metabolic syndrome. Endocr rev. 29 (7), 777-822 (2008).
  2. Alberti, K. G., Zimmet, P., Shaw, J., Grundy, S. M. IDF Consensus Worldwide Definition of the Metabolic Syndrome. , Available from: https://www.idf.org/e-library/consensus-statements.html (2006).
  3. Alberti, K. G., Eckel, R. H., Grundy, S. M., Zimmet, P. Z., Cleeman, J. I., Donato, K. A., et al. Harmonizing the metabolic syndrome: a joint interim statement of the International Diabetes Federation Task Force on Epidemiology and Prevention; National Heart, Lung, and Blood Institute; American Heart Association; World Heart Federation; International Atherosclerosis Society; and International Association for the Study of Obesity. Circulation. 120 (16), 1640-1645 (2009).
  4. Grundy, S. M. Pre-diabetes, metabolic syndrome, and cardiovascular risk. JACC. 59 (7), 635-643 (2012).
  5. Verkest, K. R. Is the metabolic syndrome a useful clinical concept in dogs? A review of the evidence. Vet J. 199 (1), 24-30 (2014).
  6. Zhang, X., Lerman, L. O. Investigating the Metabolic Syndrome: Contributions of Swine Models. Toxicol Pathol. 44 (3), 358-366 (2016).
  7. Wong, S. K., Chin, K. Y., Suhaimi, F. H., Fairus, A., Ima-Nirwana, S. Animal models of metabolic syndrome: a review. Nutr Metab (Lond). 13, 65 (2016).
  8. Carroll, J. F., Dwyer, T. M., Grady, A. W., Reinhart, G. A., Montani, J. P., Cockrell, K., et al. Hypertension, cardiac hypertrophy, and neurohumoral activity in a new animal model of obesity. Am J Physiol. 271 (1 Pt 2), H373-H378 (1996).
  9. Grooth, G. J., Klerkx, A. H., Stroes, E. S., Stalenhoef, A. F., Kastelein, J. J., Kuivenhoven, J. A. A review of CETP and its relation to atherosclerosis. J Lipid Res. 45 (11), 1967-1974 (2004).
  10. Zarzoso, M., Mironov, S., Guerrero-Serna, G., Willis, B. C., Pandit, S. V. Ventricular remodelling in rabbits with sustained high-fat diet. Acta Physiol (Oxf). 211 (1), 36-47 (2014).
  11. Filippi, S., Vignozzi, L., Morelli, A., Chavalmane, A. K., Sarchielli, E., Fibbi, B., Saad, F., Sandner, P., Ruggiano, P., Vannelli, G. B., Mannucci, E., Maggi, M. Testosterone partially ameliorates metabolic profile and erectile responsiveness to PDE5 inhibitors in an animal model of male metabolic syndrome. J Sex Med. 6 (12), 3274-3288 (2009).
  12. Waqar, A. B., Koike, T., Yu, Y., Inoue, T., Aoki, T., Liu, E., et al. High-fat diet without excess calories induces metabolic disorders and enhances atherosclerosis in rabbits. Atherosclerosis. 213 (1), 148-155 (2010).
  13. Fan, J., Watanabe, T. Cholesterol-fed and transgenic rabbit models for the study of atherosclerosis. J Atheroscler Thromb. 7 (1), 26-32 (2000).
  14. Yin, W., Yuan, Z., Wang, Z., Yang, B., Yang, Y. A diet high in saturated fat and sucrose alters glucoregulation and induces aortic fatty streaks in New Zealand White rabbits. Int J Exp Diabetes Res. 3 (3), 179-184 (2002).
  15. Zhao, S., Chu, Y., Zhang, C., Lin, Y., Xu, K., Yang, P., et al. Diet-induced central obesity and insulin resistance in rabbits. J Anim Physiol Anim Nutr (Berl). 92 (1), 105-111 (2008).
  16. Helfenstein, T., Fonseca, F. A., Ihara, S. S., Bottos, J. M., Moreira, F. T., Pott, H. Jr, et al. Impaired glucose tolerance plus hyperlipidaemia induced by diet promotes retina microaneurysms in New Zealand rabbits. Int J Exp Pathol. 92 (1), 40-49 (2011).
  17. Ning, B., Wang, X., Yu, Y., Waqar, A. B., Yu, Q., Koike, T., et al. High-fructose and high-fat diet-induced insulin resistance enhances atherosclerosis in Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits. Nutr Metab (Lond). 12, 30 (2015).
  18. Liu, Y., Li, B., Li, M., Yu, Y., Wang, Z., Chen, S. Improvement of cardiac dysfunction by bilateral surgical renal denervation in animals with diabetes induced by high fructose and high fat diet. Diabetes Res Clin Pract. 115, 140-149 (2016).
  19. Arias-Mutis, O. J., Marrachelli, V. G., Ruiz-Saurí, A., Alberola, A., Morales, J. M., Such-Miquel, L., Monleon, D., Chorro, F. J., Such, L., Zarzoso, M. Development and characterization of an experimental model of diet-induced metabolic syndrome in rabbit. PLoS One. 12 (5), e0178315 (2017).
  20. Nelson, R. W., Himsel, C. A., Feldman, E. C., Bottoms, G. D. Glucose tolerance and insulin response in normal-weight and obese cats. Am J Vet Res. 51 (9), 1357-1362 (1990).
  21. Staup, M., Aoyagi, G., Bayless, T., Wang, Y., Chng, K. Characterization of Metabolic Status in Nonhuman Primates with the Intravenous Glucose Tolerance Test. J Vis Exp. (117), e52895 (2016).
  22. Hall, J. E., do Carmo, J. M., da Silva, A. A., Wang, Z., Hall, M. E. Obesity-induced hypertension: interaction of neurohumoral and renal mechanisms. Circ Res. 116 (6), 991-1006 (2015).
  23. Linz, D., Hohl, M., Mahfoud, F., Reil, J. C., Linz, W., Hübschle, T., Juretschke, H. P., Neumann-Häflin, C., Rütten, H., Böhm, M. Cardiac remodeling and myocardial dysfunction in obese spontaneously hypertensive rats. J Transl Med. 10 (10), 187 (2012).
  24. Sasser, T. A., Chapman, S. E., Li, S., Hudson, C., Orton, S. P., Diener, J. M., Gammon, S. T., Correcher, C., Leevy, W. M. Segmentation and measurement of fat volumes in murine obesity models using X-ray computed tomography. J Vis Exp. (62), e3680 (2012).
  25. Kawai, T., Ito, T., Ohwada, K., Mera, Y., Matsushita, M., Tomoike, H. Hereditary postprandial hypertriglyceridemic rabbit exhibits insulin resistance and central obesity: a novel model of metabolic syndrome. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 26 (12), 2752-2757 (2006).
  26. Shiomi, M., Kobayashi, T., Kuniyoshi, N., Yamada, S., Ito, T. Myocardial infarction-prone Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits with mesenteric fat accumulation are a novel animal model for metabolic syndrome. Pathobiology. 79 (6), 329-338 (2012).
  27. Hildrum, B., Mykletun, A., Hole, T., Midthjell, K., Dahl, A. A. Age-specific prevalence of the metabolic syndrome defined by the International Diabetes Federation and the National Cholesterol Education Program: The Norwegian HUNT 2 study. BMC Public Health. 7, 220 (2007).

Tags

Geneeskunde kwestie 134 metabool syndroom diermodellen konijn hart-en vaatziekten bloeddruk glucosetolerantie
Een experimenteel Model van dieet-geïnduceerde metabool syndroom in konijn: methodologische overwegingen, ontwikkeling en beoordeling
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Arias-Mutis, Ó. J., Genovés,… More

Arias-Mutis, Ó. J., Genovés, P., Calvo, C. J., Díaz, A., Parra, G., Such-Miquel, L., Such, L., Alberola, A., Chorro, F. J., Zarzoso, M. An Experimental Model of Diet-Induced Metabolic Syndrome in Rabbit: Methodological Considerations, Development, and Assessment. J. Vis. Exp. (134), e57117, doi:10.3791/57117 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter