Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

מדגם ניסיוני של דיאטה-Induced סינדרום מטבולי בקרב ארנב: שיקולים מתודולוגי, פיתוח והערכה

Published: April 20, 2018 doi: 10.3791/57117
Automatic Translation
1,2,3, 1,2,3, 1,2,4, 5, 2,3, 6, 2, 2, 1,3, 6
1CIBERCV, Instituto de Salud Carlos III, 2Department of Physiology, Universitat de València, 3INCLIVA, 4Department of Electronic Engineering, Universidad Politécnica de Valencia, 5UCIM, Universitat de València, 6Department of Physiotherapy, Universitat de València

Summary

אנו מתארים שיטות לפיתוח מודל ניסיוני של דיאטה-induced תסמונת מטבולית (גרורות) בארנבים באמצעות דיאטה עתירת שומן, בסוכרוז. בעלי החיים התפתחו השמנה מרכזית, יתר לחץ דם מתון, קדם סכרת ו dyslipidemia, וכך מתרבה המרכיבים העיקריים של המטס אנושי. מודל כרוני זה יאפשר רכישת הידע הבסיסי מנגנונים של התקדמות המחלה.

Abstract

בשנים האחרונות, השמנת יתר, תסמונת מטבולית (גרורות) הפכו בעיה גוברת על בריאות הציבור ועל הקלינית, בהתחשב שלהם שכיחות מוגברת עקב העלייה בישיבה אורחות חיים, הרגלי אכילה לא בריאים. בזכות דגמים בעלי חיים, מחקר בסיסי יכול לחקור את המנגנונים תהליכים פתולוגיים כגון גרורות. כאן, אנו מתארים את שיטות השתמשו כדי לפתח מודל ניסיוני הארנב של המטס דיאטה-induced והערכה שלה. לאחר תקופת והפיזיולוגי, בעלי חיים ניזונים עתירי שומן (שמן קוקוס מוקשה 10% ו- 5% שומן), בסוכרוז (15% סוכרוז מומס במים) דיאטה במשך 28 שבועות. במהלך תקופה זו בוצעו מספר הליכים ניסיוני כדי להעריך את הרכיבים השונים של המטס: מורפולוגי, מדידות לחץ דם, גלוקוז סובלנות נחישות ועמידה הניתוח של מספר סמנים פלזמה. בקצה של תקופה ניסיונית, חיות שפותחה במרכז השמנת יתר, לחץ דם מתון, קדם סכרת, dyslipidemia עם HDL נמוך, LDL גבוה, גידול של רמות טריגליצרידים (TG), וכך מתרבה המרכיבים העיקריים של המטס אנושי. דגם כרוני זה מאפשר במרכיבי הבנת המנגנונים שבבסיס ב התקדמות המחלה, זיהוי סמנים קליניות המאפשרים את הזיהוי של חולים בסיכון, או אפילו בדיקה של חדש טיפולית גישות לטיפול של הפתולוגיה המורכבת הזאת.

Introduction

השמנת יתר, תסמונת מטבולית (גרורות) הפכו להיות בעיה גוברת על בריאות הציבור ועל הקלינית, בהתחשב שלהם שכיחות מוגברת עקב העלייה בישיבה אורחות חיים, הרגלי אכילה לא בריאים1. קיימות מספר הגדרות של גרורות, אך רובם מתארים מקבץ של שינויים מטבוליים וכלי דם כגון השמנה של הבטן, HDL מופחתת של כולסטרול LDL גבוהות, רמות טריגליצרידים גבוהות, גלוקוז בחוסר סובלנות יתר לחץ דם2 3, ,4. האבחנה דורשת כי שלושה מתוך חמישה קריטריונים אלה נוכחים.

בשל חייתיים, מחקר בסיסי כבר מסוגל לחקור את המנגנונים שבבסיס תהליכים פתולוגיים כגון גרורות. השתמשו במספר דגמים בעלי חיים, אבל זה חשיבות מכרעת כי המודל של הבחירה מתרבה המאפיינים הקליניים העיקריים של פתולוגיה אנושית (איור 1). במטרה זו, מודלים בעלי חיים נחשבים דומים לבני אדם, בעיקר כלב, חזיר, פותחו (ראה Verkest5 ואבשלום & לרמן6 לבדיקה). עם זאת, מודלים הכלבים אינם מראים כל הרכיבים של המטס, בהתחשב בכך התפתחות טרשת עורקים או היפרגליקמיה בכלבים באמצעות הדיאטה היא בספק5. מודלים החזירים להציג את הדמיון ביותר אנטומית, פיזיולוגית עם בני אדם, ולכן מציעים כוח הניבוי משמעותי עבור שחקרתי המנגנונים מטס, אבל התחזוקה שלהם ואת המורכבות של ההליכים ניסיוני לעשות שימוש זה מודל העבודה מאוד אינטנסיבית ויקרות6.

מצד שני, מודלים מכרסמים (עכבר, חולדה), תזונה-induced ספונטנית, מהונדס, בהרחבה שימשו בספרות המחקר השמנה, יתר לחץ דם, מטס, ואת השלכותיה פתולוגיים איברים שונים ומערכות (ראה וונג et al. 7 לסקירה). למרות השימוש של מודלים אלה הוא במחיר נוח יותר מאשר כלב או חזיר, יש להם חסרונות חשוב. אכן, בהתאם המתח, חיות לפתח רכיבים מסוימים של המטס, בעוד אחרים כגון יתר לחץ דם, היפרגליקמיה, היפראינסולינמיה נעדר7. יתר על כן, אחד המרכיבים העיקריים של המטס, השמנת יתר, כמה זנים מהונדסים, תלויה רק גורמים יחד עם הדיאטה, אלא הוכח כי בעלי חיים הופכים כרסתן עם צריכת מזון רגיל או אפילו מופחת8. לבסוף, עכברים וחולדות להראות חוסר טבעי cholesteryl אסתר העברה חלבון (CETP) ועושים שימוש HDL אמצעי עיקרי של תעבורה כולסטרול, מה שהופך אותם יחסית עמידים בפני ההתפתחות של טרשת עורקים. זה הבדל חשוב בנוזל מטבולי עם בני אדם, מי אקספרס CETP ולהעביר את הכולסטרול שלהם בעיקר ב- LDL9.

לעומת זאת, הארנב מעבדה מייצג שלב ביניים בין חיים גדול יותר ניסיוניות מכרסמים. לפיכך, הארנב ניתן להגיש בקלות לסוגים שונים של פרוטוקולים עם דרישות מינימליות של כוח אדם, תחזוקה, מטופל בקלות רבה יותר מאשר דגמים בעלי חיים גדולים בהליכים ניסיוני. יתר על כן, דווח כי ארנבים האכיל עם דיאטה עתירת שומן יש שינויים דומים והמודינמיקה neurohumoral כמו בני אדם שמנים8,10,11. ראוי לציין, לגבי מטבולי, הארנב CETP שופע בפלסמה ונמצא פרופיל ליפופרוטאין LDL-עשיר12, אשר דומה גם לבני אדם. בנוסף, ארנבים לפתח היפרליפידמיה מתפתח מהר מאוד בהתחשב בעובדה, כמו אוכלי עשב, הם רגישים מאוד שמן תזונתיים13.

Figure 1
איור 1: השוואה של המטס חייתיים. לראות Verkest5, ג'אנג ולרמן6ווונג. et al. 7 לסקירה. "Equation 1" מצביע על יתרון, "Equation 2" מציינת חיסרון. *במחלוקת, תלוי המחקר, *כמו ציין בחוץ על ידי קרול. et al. 8, כמה זנים מהונדסים להשמין ללא תלות צריכת המזון. חוץ מזה: cholesteryl אסתר העברה חלבון. GTT: בדיקת הגלוקוז סובלנות. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

כדי להבהיר את המנגנונים הבסיסיים שיפוץ פתולוגיים המיוצר על ידי הגרורות איברים שונים, מערכות, וכדי להשיג הבנה של הפתולוגיה המורכבת הזאת, הבחירה של מדגם ניסיוני מתרבה המרכיבים העיקריים של המטס אנושי חיוני. הארנב יכול לספק יתרונות רבים נותן לדמיונו פיזיולוגיה אנושית ומחיר השימוש בפרוטוקולי כרונית ו מדידות. בשורה זו, היו כמה מודלים ארנב הנוצרות על-ידי תזונה באמצעות תזונה עתירת שומן בסוכרוז בשימוש14,15,16,17,18,19 (טבלה 1), ו- a אפיון של הרכיבים השונים של המטס הוא בעל חשיבות רבה כאשר מתייחסים הפנוטיפ עם איברים שיפוץ. לכן, המטרה העיקרית של מאמר זה היא לתאר את השיטות כדי לפתח מודל של גרורות דיאטה-induced ארנבים המאפשר לימוד פתופיזיולוגיה שלה ואת ההשפעה ב עוגב שיפוץ.

המחקר דיאטה משך גזע רכיבים מטס
Ob HT HG Dl
היין et al. (2002)14 ·    10% שומן 24 שבועות ·      NZW זכר Equation 2 - Equation 1 Equation 1
·    37% סוכרוז ·      2 ק ג
ז'או et al. (2007)15 ·    10% שומן 36 שבועות ·      JW זכר Equation 1 Equation 2 Equation 2 Equation 2
·    30% סוכרוז ·      16 שבועות
Helfestein et al. (2011)16 ·    10% שומן 24 שבועות ·      NZW זכר Equation 2 - Equation 1 Equation 1
·    40% סוכרוז ·      12 שבועות
·    0.5-0.1 כולסטרול
נינג et al. (2015)17 ·    10% שומן 8-16 שבועות ·      WHHL זכר Equation 2 - Equation 2 Equation 1
·    30% פרוקטוז * ·      12 שבועות
ליו et al. (2016)18 ·    10% שומן 48 שבועות ·      NZW זכר Equation 2 - Equation 1 Equation 1
·    30% סוכרוז ·      12 שבועות
אריות-Mutis et al. (2017)19 ·    15% שומן 28 שבועות ·      NZW זכר Equation 1 Equation 1 Equation 1 Equation 1

טבלה 1: מטס דיאטה-induced ארנב מודלים באמצעות תזונה עתירת שומן, בסוכרוז. הסמל "Equation 2"מצביע על היעדרות,"Equation 1" נוכחות, ו "-" לא מוערכים. * מוגבל. WHHL, וואטאנאבה heritable hiperlipidemic ארנבים. . ג'. וו, יפני וארנבים לבנים. אבוב, השמנת יתר. HT, יתר לחץ דם. כספית, היפרגליקמיה. Dl, dyslipidemia.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

טיפול בבעלי חיים, בפרוטוקולים ניסיוניים המשמשים במחקר זה תאמו האירופי 2010 הוראת/63 על צער בעלי חיים משמשים למטרות מדעיות, אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה (2015/VSC אפונה 00049).

הערה: הפרוטוקול מורכב ממשל כרונית של דיאטה עתירת שומן, בסוכרוז 28 שבועות, את ההערכה של הרכיבים העיקריים של המטס. היינו 11 למבוגרים זכר ניו זילנד הלבן (NZW) ארנבים שקילה 4.39 ± 0.14 (ש) ק ג, אשר היו 20-22 שבועות בתחילת פרוטוקול נסיוני. הם שוכנו בחדר עם לחות (50 ± 5%), בתנאי טמפרטורה (20 ± 1.5 ° C) מבוקרת עם אור 12-h מחזור. המילים "האוכל" ואת "דיאטה" עשוי לשמש לסירוגין בשלבים פרוטוקול.

1. תזונה המינהל

  1. להשיג או להכין דיאטות
    1. להשיג זמינים מסחרית בשומן עם הוסיף שמן קוקוס מוקשה (10%) ואת ביקון/חלב (5%)19. דיאטה זו תספק 3.7 kcal·g-1.
    2. להכין 5-15% סוכרוז פתרונות על ידי המסת את כמויות מתאימות של סוכרוז במים סטיריליים (למשל, שימוש 300 גרם סוכרוז במלאי 2 L פתרון 15% סוכרוז). פתרון 15% תספק 0.6 kcal·mL-1.
    3. להשיג זמינים מסחרית שליטה דיאטה19, אשר מספק 2.7 kcal·g-1.
  2. חבל החיות 4 שבועות
    1. להאכיל כל חיה קבוצת הבקרה 120 גרם של שליטה דיאטה מדי יום. לספק מים ad libitum.
    2. להאכיל חיות המטס קבוצה 250 גרם צ'או מתחיל עם שליטה 50%, 50% שומן צ'או, גדל בהדרגה ל 100% שומן צ'או עד לסוף שבוע 4.
      הערה: המטרה תהיה להשיג: (i) ובקרה 35% 65% צ'או עתירי שומן עד לסוף שבוע 1; (ii) שליטה 25% ו 75% צ'או עתירי שומן עד לסוף שבוע 2; (iii) 15% שליטה ו- 85% שומן צ'או עד לסוף שבוע 3 (iv) צ'או עתירי שומן 100% עד לסוף שבוע 4.
    3. תן בבעלי הגרורות קבוצה מים עם 5% סוכרוז בתחילתו, להגדיל את ריכוז סוכרוז עד 15% עד סוף השבועה 4.
    4. הירשם הצריכה היומית של צ'או וסוכרוז פתרון כדי לחשב את צריכת הקלוריות לפי ערכים הניתנים 1.1.1. 1.1.2.
  3. זירוז הגרורות (28 שבועות)
    1. להאכיל כל חיה בקבוצת הבקרה 120 גרם של שליטה צ'או ולהשקות ad libitum מדי יום.
    2. להאכיל את בעלי החיים בקבוצת המטס 250 גרם של סוכרוז צ'או וכ-15% שומן במים. החלף את האוכל מדי יום ואת הפתרון סוכרוז בכל יום שלישי.
    3. שוקלים את האוכל ואת המים כל יום כדי להעריך את הצריכה היומית הנותרים.

2. הערכה מורפולוגית

  1. מודדים בעלי משקל גוף על בסיס שבועי.
  2. למדוד את גובה, אורך, מתאר בטן ואורך הטיביאלי, אומדן BMI לפני ניהול של הדיאטה ניסיוני, שבועות 14 ו- 28 בבעלי חיים מורדם.
    1. נקרר אוזן ימין ווריד שולית עם קטטר חד פעמי סטרילי (18-22 גרם), להזריק propofol (8 mgkg-1) ואחריו 1.5 מ של 0.9% NaCl פתרון. ב הארנב anesthetized, לבצע את המדידות המופיעים והשלבים הבאים.
    2. מדד גובה ואורך. באמצעות מדידה הקלטת, מדד שיא המרחק מן האף אל העקב במצב לרוחב חמצן (אורך). באותה תנוחה, קח את המרחק כתפיים בכתף לקצה של הכפה (גובה).
    3. חישוב מדד מסת (BMI) הגוף20 כמו bodyweight (ק ג) · [גוף אורך (ז) × גובה (ז)] -1.
    4. מכניסים את הקלטת המדידה בעדינות סביב קו המתאר בטן ולקחת מדידה עם החיה במצב פרקדן.
    5. למדוד אורך הטיביאלי מהחלק התחתון של הברך משותפת כדי ההוספה של גיד אכילס.

3. צום גליקמיה ובדיקה סובלנות גלוקוז תוך ורידי (IVGTT)

הערה: מומלץ להתחיל את ההליכים באותו הזמן של היום (כלומר, 2-3 בצהריים).

  1. להכין פתרון מלאי הגלוקוז (60%) עם 60 גרם גלוקוז ב- 100 מ של 0.9% NaCl פתרון.
  2. מהר החיה במשך 7 שעות (הסרת המזון ושמירה על המים), ואז למקם את הארנב בהכרה restrainer במצב שכיבה. הכנת מד הסוכר (insert רצועת קומיקס חדשה הסרט לתוך המד), ולקחת את המדגם הראשון מן הווריד שולית של אוזן שמאל באמצעות אזמל מנתחים כדי לקבל טיפת דם. ואז לגעת הטיפה את הדם עם מבחן רצועת ולמדוד רמות הגלוקוז בדם באמצעות מד הסוכר כדי לקבוע צום גליקמיה.
  3. נקרר אוזן ימין ווריד שולית עם קטטר חד פעמיות (18-22 גרם), להזריק סיילין פתרון גלוקוז 60% (0.6 g·kg-1).
    הערה: כדי להכין את בולוס, להוסיף 1 מ"ל/ק"ג של המניה גלוקוז.
  4. לקחת דגימות דם באמצעות אזמל המנתחים (טיפה אחת של דם)-15, 30, 60, 90, 120 ו- 180 דקות לאחר ההזרקה גלוקוז ולנתח אותם עם מד גלוקוז כמו 3.2.
  5. להסיר את הצנתר חד פעמיות וצבטתי באתר של הכנסת קטטר עם גזה. ברגע דם יש התקרש, להסיר את הגזה, לבדוק את מצב החיה.

4. לחץ דם

  1. הכנת מערכת הרכישה כולל מתמר לחץ, מזרק 10-mL עם 0.9% NaCl, צימוד של 3 חלקים, מגבר ו למחשב/מחשב נייד עם תוכנת רכישה (להקלטה לחץ דם).
  2. להגדיר את הציוד. ראשית, הצב את צימוד-כיוונית ואת המזרק מתמר לחץ, בין המתמר הקטטר, וחבר מתמר לחץ המגבר. לאחר מכן להתחבר למחשב/מחשב נייד המגבר
  3. לבצע את הכיול מתמר לחץ על-פי ההמלצות של היצרן.
  4. מקם את החיה בהכרה restrainer הארנב במצב שכיבה. לחמם את האוזן לפני תעלות, והחילו topically הרדמה מקומית (2.5% לידוקאין/prilocaine) באוזן סביב האתר של ההכנסה. טפח בעדינות את האזור שבו חבילת כלי הדם עובר בקלות לזהות את העורק. ואז להכניס צנתר סטרילי (18-22 גרם) העורק המרכזי של אוזן שמאל. שחרר את האזיקים ולאפשר את החיה להישאר בשקט למשך 30 דקות.
  5. להקליט את לחץ הדם באופן רציף במשך 20 דקות ישירות דרך הקטטר עורקי, הצבת מתמר לחץ ליד החיה ברמת הלב (תדר הדגימה: 1 KHz, ראה איור 5B).
    הערה: כדי לשמור על לחץ הדם (BP) הקלטה חינם מהפרעה קרישת דם (לחץ דם האות מאבדת משרעת או נעלם), זריקה NaCl (0.9%) צריך להיעשות. שימוש של צימוד-כיוונית, לסגור את המעגל שעובר בין המתמר על הקטטר, לפתוח את המעגל העובר מן המזרק כדי הקטטר, ולהזריק 1-2 מ. פעולה זו תגרום להסרת קרישי דם שעלול להיווצר הקטטר. לאחר מכן, לפתוח את המעגל בין המתמר הקטטר ולהמשיך את ההקלטה לאחר האות אבדו.
  6. לאחר סיום ההקלטות, להסיר את הצנתר וצבטתי עם גזה באתר של קטטר הכניסה כדי למנוע איבוד דם. ברגע שהדם הוא התקרש, להסיר את הגזה, לבדוק את מצב החיה.

5. פלזמה מדידות

הערה: מומלץ להתחיל את ההליכים באותו הזמן של היום (כלומר, 2-3 בצהריים).

  1. מהר החיה במשך 7 שעות (הסרת המזון ושמירה על המים), לאחר מכן הכנס החיה בהכרה restrainer במצב שכיבה, להכניס מחט סטרילית 21 G הווריד שולית של אוזן שמאל. ברגע הדם מתחיל לטפטף, למחוק הראשונה ו לאסוף דגימות דם EDTA צינורות עד רמת המצוין בצינור. לאחסן את הדגימות הקרח.
  2. צנטריפוגה דגימות דם-1,500 x g, 15 דקות, 4 מעלות צלזיוס. לאחר צנטריפוגה, שאיבה פלזמה בעזרת פיפטה ולהכין aliquots של 250 µL.
  3. לנתח את הדגימות טריים באופן מיידי. שליטה בסיסית הפרמטרים הם כדלקמן: טריגליצרידים, כולסטרול, HDL ו- LDL כולסטרול.
    הערה: לא טרי ניתחו דגימות יש לאחסן באופן מיידי במקפיא-80 ° C. אם אתם מעוניינים בניתוח הגלוקוז בדם מדגימות פלזמה, בדיקת הגלוקוז הדם עליך להשתמש צינורות עם פלואוריד אוקסלט במקום EDTA.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

המטס מייצג מקבץ של ליקויים מטבולית, לב וכלי דם, שמחקרו ניתן להקל על ידי שימוש ניסיוניות. אכן, להבהיר את המנגנונים שבבסיס שיפוץ פתולוגיים המיוצר על ידי הגרורות, הבחירה של מדגם ניסיוני כראוי דומה המצב האנושי, מתאימה למחקר היא בעלת חשיבות מכרעת. כאן, אנו מציגים את השיטות לזירוז המטס ב הארנב באמצעות תזונה עתיר שומן רווי סוכרוז, אפיון מפורט עבור ההערכה שלו. השימוש של דיאטה במקום מודל בעלי חיים מהונדסים הוא חשיבות רבה מאז תזונה משפיעה על כלל הגוף מטבוליזם19, ובכך הדומה מקרוב מה קורה במטס אנושי. השתמשנו בעצרת (מודל מעורב) ANOVA עם שני גורמים, אחד האמצעים חוזרות או "במסגרת" פקטור (זמן: מראש, שבוע 14, בשבוע 28, בהתאם של הניתוח), גורם "בין" אחד (קבוצה: מטס ובקרה) לשם ניתוח סטטיסטי. משמעות התקבלה כאשר p < 0.05.

דיאטה עתירת שומן, בסוכרוז הוא נסבל היטב על ידי בעלי החיים. תקופה בעזיבה של 4 שבועות הוא הכרחי עבור המעבר הנכון האכלה המשטר הקודם לדיאטה עתירת שומן, בסוכרוז. בעלי החיים בקבוצת הבקרה אכלו 120 g צ'או, אשר הוכח להיות מתאים לשם קיום ארנב למבוגרים8. ארנבים בקבוצה המטס גדל בהדרגה במשקל עד הסוף של פרוטוקול נסיוני (טבלה 2). חיות צריך לקבל 50-100 גרם בשבוע. חשוב כי ארנבים מוחזקים בנפרד בתוך כלובים עם מספיק מרחב, אור של העשרה סביבתית (איור 2C), מתבצעת בדיקה יומית של בעלי החיים. גם על בסיס יומי, צריכת האוכל והשתייה חייב להיות בפיקוח, רשום, על מנת להשיג עלייה במשקל, לזהות את הבעיות הבריאותיות אפשרי, כיוון שפנים בקלות לחוצה ואני התגובה ייתכן להפסיק צריכת מזון. בנוסף, מאז כדורי שומן נוטים להיות מאוד לא יציב. ותאבד את עקביות בקלות רבה, הופך לאבקה איזה ארנבונים אינם אוכלים, זה חשיבות קריטית כדי להכין את החלקים יומי של צ'או בזהירות רבה (איור 2 א). ב- איור 3A, ניתן להבחין את אופן הפעולה של צריכת אנרגיה, תנודות שלה, ועד 815 250 קק ל קבוצה הגרורות. ב- 3B איור, מתואר התרומה היחסית של מקורות שונים של אנרגיה (אוכל ושתיה). יש תקופות קריטיות בשבועות 14 ו- 28, כי בהתחשב הלחץ המיוצר על ידי נהלים ניסיוני, ארנבים עלול להקטין צריכת אוכל ומים. כימות יומי מאפשר זיהוי מהיר של הבעיה, אשר ניתן להימנע על ידי הצגת שליטה צ'או (80% שומן, 20% שליטה), הפחתת הפתרון סוכרוז מ- 15% עד 10%, או אפילו 5%, במהלך 2-3 ימים עד חיות לשחזר שלהם נורמלי צריכת ערכים. בעלי חיים גם פיתחו השמנה מרכזית כפי שמוצג על ידי עליית משקל, היקף בטן ו- BMI (טבלה 2), אשר קשורה קשר הדוק עם גורמי הסיכון המגדירים את המטס3.

Figure 2
איור 2: דיאטה המינהל. בחלונית ' א, לשלוט צ'או (למעלה), מתוארים צ'או עתירי שומן (להלן), הצגת ההבדלים בין השניים בשל השומן שנוספו. על מנת למנוע את האבקה שגורם כדורי שומן פחות טעים, יש צורך להשתמש מסננת כדי להפריד בין אבקת צניפה עתירי שומן (פאנל A, התחתון). בחלונית B, ניתן להבחין את החומרים הדרושים כדי להפוך את הפתרון שתייה (משמאל), איך זה רצוי לבצע פתרון מניות כדי להפיץ מתקן מים. לבסוף, רווחתם של בעלי החיים חשובה מאוד, הם חייבים להיות בו בנפרד בכלובים (C) עם מספיק מקום אור ואת, במידת האפשר, העשרה סביבתית (קרי, פלטפורמות, צעצועים וכד'). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 3
איור 3: צריכת אנרגיה- האבולוציה של צריכת שבועי במהלך השבועות 28 של תקופת הניסוי מתוארת בלוח A עבור הפקד ואת הגרורות. צריכת היחסי (באחוזים) קק ל צ'או עתירי שומן, הפתרון שתייה של המטס חיות מוצג בלוח הבקרה ב' (n = 5), גרורות (n = 6). קווי שגיאה: SD. שונה מאריות-Mutis et al. 19 אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

דיאטה טרום שבוע 14 שבוע 28
שליטה מטס שליטה מטס שליטה מטס
משקל (ק ג) 4.35(0.15) 4.43(0.14) 4.49(0.12) 5.42(0.17) 4.51(0.13) 5.75(0.6)
אורך (ס מ) 52.4(1.6) 53.6(1.7) 52.5(0.8) 54.4(1.7) 53.7(0.7) 54.6(0.8)
גובה (ס מ) 25.9(0.7) 25.5(1.1) 25.9(2.2) 26.1(5.3) 26.0(1.0) 26.1(1.5)
Abdom. היקף (ס מ) 39.8(1.7) 40.5(1.4) 38.5(1.5) 47.5(2.2) 38.1(1.0) 49.7(3.5)
אורך הטיביאלי (ס מ) 16.4(0.8) 16.3(0.7) 16.7(0.3) 16.7(0.4) 17.4(0.4) 16.8(0.6)
BMI (Kg/m2) 32.8(1.9) 32.9(2.6) 32.8(1.2) 36.8(1.9) 32.6(2.1) 39.3(6.0)

בטבלה 2: מאפיינים מורפולוגיים. מצאנו הבדלים בהשוואת בקרה נגד המטס שבועות 14 ו- 28 במשקל (האפקט העיקרי p = 0.003, η2 = 0.6; השוואות pairwise בשבוע 14 p < 0.001 ושבוע 28 p < 0.001), היקף בטן (האפקט העיקרי p < η 0.001,2 = 0.9 של pairwise השוואות בשבוע 14 p < 0.001 ושבוע 28 p < 0.001), ו- BMI (האפקט העיקרי p = 0.016, η2 = 0.5; השוואות pairwise בשבוע 14 p < 0.001 ושבוע 28 p < 0.001). שליטה (n = 5) ואת הגרורות (n = 6). הערכים מבוטאים כמו מתכוון (SD). ששינה מן אריאס-Mutis et al. 19.

לגבי רמת הסוכר בדם בצום, התגובה IVGTT ממלא תפקיד מפתח האפיון של גלוקוז הומאוסטזיס21. אנו מבחינים היפרגליקמיה מתונה בשבוע 14, אשר מגיע מישור ושומר ערכים דומים בשבוע 28 (איור 4A). השטח מתחת לעקומה (AUC) גדלה גם בקבוצה הגרורות (איור 4B). אף-על-פי ערכים ניתוק לזיהוי סוג סוכרת II בארנבים בהתבסס על רמת הסוכר בדם בצום טרם אושרו שזוהה19, עם פרוטוקול זה ניסיוני, ארנבים נאספו 28 שבועות של עתירת שומן, האכלה בסוכרוז פיתח קדם סוכרת עם ליקויי גלוקוז בצום וקנאות גלוקוז.

Figure 4
איור 4: דם גלוקוז תקנה. תוצאות IVGTT ב שליטה ובעלי המטס שבועות 14 ו- 28 מוצגים בלוח א כימות של השטח מתחת העקומה (AUC) בין 0 ל- 180 דקות מתואר בחלונית B עם תיבת ותכין שפם. פרמטר זה גדל בבעלי חיים המטס בשבועות 14 ו- 28 לעומת פקדים (האפקט העיקרי p = 0.001, η2 = 0.5; השוואות pairwise בשבוע 14 p = 0.001 ושבוע 28 p = 0.002). שליטה (n = 5), גרורות (n = 6). ששינה מן אריאס-Mutis et al. 19 אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

יתר לחץ דם קשורה קשר הדוק, ישירות חומרת השמנת יתר. ארנבים להזנה דיאטה עתירת שומן, בסוכרוז 28 שבועות הראה עלייה בלחץ דם סיסטולי, דיאסטולי, כלומר כבר בשבוע 14, ואת זה עלייה בלחץ הדם נשמרת בשבוע 28 (איור 5C – E). לאור הקשר ההדוק בין לחץ דם ו- BMI22, זה חשיבות רבה על מנת להבטיח כי חיות במשקל בהדרגה כדי להשיג עלייה משמעותית בלחץ הדם.

Figure 5
איור 5: שינויים בלחץ הדם. פאנל A מתאר את הצנתר הוכנס העורק אוריקולארית. ראוי לציין, בהתחשב בכך את הווריד והעורק אוריקולארית לרוץ דרך dentition של האוזן מקרוב מאוד, זה חשיבות מכרעת כדי להבדילם. לפני תעלות, רצוי לחמם את האוזן, ואחרי הרדמה מקומי, להתחבר בעדינות את האזור שבו פועל חבילת כלי הדם. העורק יש קיר כלי דם עבה של צבע בהיר יותר מאשר הווריד, והוא יכול להיות שנצפו דם פולסים. החלונית ' B מציגה את הגדרת הניסוי עם מתמר לחץ, אשר מחובר מגבר רשומות באופן רציף את האות (הקלטה BP). לוחות C ו- D הצג תיבת, שפם מתווה של לחץ דם סיסטולי, דיאסטולי בשבוע 14 ו- 28 בשתי הקבוצות ניסיוני. כלומר לחץ הדם בעורק (מפה) מוצג בחלונית ה מצאנו הבדלים בהשוואת בקרה נגד המטס שבועות 14 ו- 28 סיסטולית (האפקט העיקרי p = 0.003, η2 = 0.4; השוואות pairwise בשבוע 14 p = 0.029, בשבוע 28 p = 0.013), דיאסטולי (האפקט העיקרי p = 0.027, η2 = 0.3; השוואות pairwise בשבוע 14 p = 0.036 ושבוע 28 p = 0.001) ומפת (האפקט העיקרי p = 0.006, η2 = 0.4; השוואות pairwise בשבוע 14 p = 0.027 ושבוע 28 p = 0.001). שליטה (n = 5), גרורות (n = 6). ששינה מן אריאס-Mutis et al. 19 אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

לבסוף, כדי להעריך את התפתחות הגרורות, נדרשת הערכה של שינויי ב פלזמה סמנים ביוכימיים. במודל זה כרוני, הבחנו שינוי בפרופיל השומנים מוקדמת בשבוע 14, שינוי זה נשארה יציבה עד שבוע 28, ללא עליות נוספות ההבדלים. שינויים בפרופיל השומנים פלזמה מאופיינים על ידי עלייה טריגליצרידים ו- LDL, ירידה ברמת ה-HDL, והזמן שאין שינוי הכולסטרול בבעלי המטס לעומת שולטת בשני נקודות (שבועות 14 ו- 28) (טבלה 3).

שבוע 14 שבוע 28
שליטה מטס שליטה מטס
הכולסטרול הכללי (mg·dL-1) 20.4(2.3) 24.0(9.1) 27.4(15.7) 21.2(4.4)
ה-HDL (mg·dL-1) 9.1(4.2) 4.3(1.7) 11.2(4.2) 5.1(2.9)
LDL (mg·dL-1) 3.8(1.1) 8.7(4.5) 4.0(1.2) 13.8(9.3)
טריגליצרידים (mg·dL-1) 71.2(58.8) 118.0(40.7) 30.2(11.4) 76.8(28.2)

טבלה 3: הערכה של פלזמה ביוכימיה. מצאנו הבדלים בהשוואת בקרה נגד המטס שבועות 14 ו- 28 ב- HDL (האפקט העיקרי p = 0.008, η2 = 0.3; השוואות pairwise בשבוע 14 p = 0.006 ושבוע p = 0.037 28), LDL (האפקט העיקרי p = 0.040, η2 = 0.2; השוואות pairwise בשבוע 14 p = 0.02 8 ושבוע 28 p = 0.034), וטריגליצרידים (האפקט העיקרי p = 0.002, η2 = 0.4; השוואות pairwise בשבוע 14 p = 0.004 ושבוע 28 p = 0.001). שליטה (n = 5) ואת הגרורות (n = 6). הערכים מבוטאים כמו מתכוון (SD). ששינה מן אריאס-Mutis et al. 19

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

הקמת מדגם ניסיוני המתאים יכול לספק שיטה עקבית ומהימנה יותר ללמוד על התפתחות הגרורות, יש גם צורך להבין את המנגנונים הבסיסיים העומדים בבסיס האיברים ומערכות שיפוץ. כאן, אנו מתארים את שיטות השתמשו כדי לפתח מודל ניסיוני הרלוונטיים של המטס דיאטה-induced וכיצד להעריך את המרכיבים העיקריים של מקבץ של ליקויים מטבולית, לב וכלי דם המאפיינות את המודל הזה: השמנה מרכזית, יתר לחץ דם, גלוקוז סובלנות dyslipidemia עם HDL נמוך, LDL גבוה, גידול של רמות TG.

כוח גדול של המודל היא היכולת ללמוד המצב שלפני הביטוי הקליני של המחלה. אכן, לגבי שינויים מטבוליים, ב- 28 שבועות חיות לא לפתח סוג סוכרת II, היו במצב של prediabetes (איור 4). באופן דומה, סמנים ביוכימיים פלזמה הראה שינוי ניכר בפרופיל השומנים עם עלייה LDL ו- TG, ירידה ברמת ה-HDL, אך אין שינויים הכולסטרול הכללי (טבלה 3), הוא גורם מפתח בפיתוח של טרשת עורקים. אף-על-פי ניתן להבחין עלייה סיסטולי, דיאסטולי, ומפת בשבוע 28 (איור 5), זה יכול להיחשב קלה יתר לחץ דם. בסך הכל, ההשפעות האלה סמנים מטבוליים, לב וכלי דם הן צנועות, אך מודל זה יכול לאפשר המחקר של פתולוגיה המדינה לפני שמגשימה את (ו בלתי הפיך ברוב המקרים), ובכך מאפשר זיהוי קליניות סמנים עשויים לאפשר הגילוי של חולים בסיכון.

יתר על כן, בניגוד למטס חיה דגמים אחרים (עכבר, חולדה, והכלב), ארנבים ספונטני או הטרנסגניים מודלים יכולים לפתח כל הרכיבים של הגרורות. מעניין, זה דווח כי השילוב בין המרכיבים השונים של המטס להגביר את הסיכון למחלות לב. אכן, שיפוץ פתולוגיים המיוצר על ידי לחץ דם גבוה מועצמת כאשר רכיבים נוספים של גרורות מופיעים23. מודל ניסיוני זה עלולה לאפשר חקר המנגנונים שבבסיס ושילב ההשפעה של הרכיבים השונים. יתר על כן, בהתחשב בכך תזונה משפיעה על כלל הגוף מטבוליזם, השימוש של מודל דיאטה-induced יש משמעות חשוב, מקרוב הדמיית מה קורה המטס האנושי19.

הכוח האחרון, אך לא פחות חשוב, הוא האיזון בין הרלוונטיות וההשפעה על המחקר translational ואת העלות הכלכלית. מצד אחד אנו מוצאים החזיר מודלים, דומה מאוד לבני אדם, אבל מאוד יקר במונחים של זמן, משאבים, עלות כלכלית. בצד השני, יש לנו מודלים מכרסמים, אשר קל ליישם עם עלות מעט מאוד, אבל יש כוח הכללה נמוכה יותר. דגם ארנב מייצגת את נקודת האמצע, כפי שזה גמיש מספיק עבור סוגים שונים של מחקרים תוך הימנעות חלק החסרונות של מודלים בעלי חיים גדולים, מציגה את השינויים והמודינמיקה ו neurohumoral דומה שנצפתה המטס האנושי8, 10,19.

יש לקחת בחשבון את המגבלות הבאות בשיטות המתוארות. השמנה מרכזית, חלוקת השומן בגוף, השימוש של תהודה מגנטית להיות תקן הזהב, אם הוא זמין, אחרת להשתמש כימות של שומן מהבטן בסוף השבועות 28. שיטות אחרות לא פולשנית ללימודים האורך, כגון x-ray טומוגרפיה, יהיה הולם יותר24. מדדנו את היקף בטן ו- BMI במקום (טבלה 2), אשר היו בשימוש גם במספר מחקרים בארנבים כאמצעי של השמנה מרכזית25,11,26. מדידת אורך הטיביאלי יכול להיות גם יותר מדויק באמצעות echography או רדיוגרפיה הרגל. כדי לקבוע אם סיבת אי סבילות גלוקוז במודל זה כרוני תנגודת לאינסולין או ירידה של אינסולין, צריך להיות נחוש תנגודת לאינסולין באמצעות מבחן עמידות לאינסולין או קביעת רמות האינסולין בצום.

לבסוף, על מנת לשפר את המודל, מספר אמצעים יכול להילקח. אנחנו כנראה לקבל עלייה מהירה יותר glycaemia עם השילוב של תקופות קצרות של הזרקת alloxan, השומן גבוהה, גבוהה סוכרוז דיאטה, אבל אז את פנוטיפ לא ניתן לייחס רק הדיאטה. גיל יכול גם לשחק תפקיד חשוב, מאז עבדנו עם שפנים צעירים למבוגרים (4.5 חודשים כאשר בעלי חיים הגיעו במתקני בעלי חיים, 12.5-13 חודשים בסוף הפרוטוקול ניסויית), גרורות לעיתים קרובות מתרחשת בגיל מבוגר27. למרבה הצער, ארנבים בוגרים לא היו זמינים מסחרית. זה יהיה מעניין לבחון מודל זה בבעלי חיים בוגרים ולבחון אם פנוטיפ מועצמת.

השיטות המובאות כאן עבור הפיתוח של מודל זה ניסיוני של המטס מעבדה בארנבים צריך לספק כלי חשוב ללימודי במטרה להבהיר את המנגנונים הבסיסיים שיפוץ פתולוגיים המיוצר על ידי הגרורות השונות איברים ומערכות, ולהשיג הבנה של הפתולוגיה המורכבת הזאת. לבסוף, מאחר NZW ארנבים הם בעלי חיים פעילים, מודל זה דיאטה-induced יכול להיות שימושי ללמוד איך הרכיבים השונים של המחלה להתפתח בצורה דומה יותר מתהווה המטס האנושי, והיא עלולה לאפשר נקודות מבט חדשות על ההבנה מנגנונים הקשורים pathophysiological מעורב התקדמות המחלה, זיהוי סמנים קליניות כדי לזהות חולים בסיכון, או אפילו בדיקה של גישות טיפוליות חדשות לטיפול של הפתולוגיה המורכבת הזאת.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחברים מצהירים כי יש להם אינטרסים כלכליים אין מתחרים.

Acknowledgments

עבודה זו נתמכה על ידי Generalitat Valenciana (GV2015-062), València דה אוניברסיטט (UV-INV-PRECOMP14-206372) כדי MZ, Generalitat Valenciana (PROMETEOII/2014/037) וקרנות אינסטיטוטו דה סאלוד קרלוס השלישי-פדר (CIBERCV CB16/11/0486) כדי FJC.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Veterinary scale SOEHNLE 7858 Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Shovel for aluminum feed COPELE 10308 Shovel for aluminum feed
http://copele.com/es/herramientas/48-pala-para-pienso-de-aluminio.html
Balance PCE Ibérica PCE-TB 15 Balance
http://www.pce-iberica.es/medidor-detalles-tecnicos/balanzas/balanza-compacta-pce-bdm.htm
Strainer (20 cm diam.) ZWILLING 39643-020-0 Strainer
https://es.zwilling-shop.com/Menaje-del-hogar/Menaje-de-cocina/Menaje-especial/Accesorios/Colador-20-cm-ZWILLING-39643-020-0.html
Bowl ZWILLING 40850-751-0 Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Funnel BT Ingenieros not available Funnel
http://www.bt-ingenieros.com/fluidos-y-combustibles/961-juego-de-4-embudos-de-plastico.html?gclid=EAIaIQobChMIuInui_y-1QIVASjTCh28Zwf-EAQYBSABEgK7xPD_BwE
Introcan Certo 22G blue B Braun 4251318 Peripheral intravenous catheter
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-
Propofol Lipuro 10 mg/ml vial 20 ml B Braun 3544761VET General intravenous anesthetic
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/propofol-lipuro-1-
FisioVet serum solution 500ml B Braun 472779 Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Askina Film Vet 1,25cm x 5m B Braun OCT13501 Plastic Plaster
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet
Askina Film Vet 2,50cm x 5m B Braun OCT13502 Plastic Plaster
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet
Injekt siringe 10ml luer B Braun 4606108V Injection-aspiration syringe of two single-use bodies
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/injekt-
Seca 201 seca seca 201 Ergonomic tape for measuring perimeters
https://www.seca.com/es_es/productos/todos-los-productos/detalles-del-producto/seca201.html#referred
Sterican 21Gx1" - 0,8x25mm verde B Braun 4657543 Single Use Hypodermic Needle
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/agujas-hipodermicas-sterican-
CONTOURNEXT-Meter BAYER 84413470 Blood glucose analysis system
http://www.contournextstore.com/en/contour-next-meter-2
CONTOUR NEXT test strips BAYER 83624788 Blood glucose test strips
http://www.contournextstore.com/en/contour-next-test-strips-100-ct-package
MICROLET NEXT LANCING DEVICE BAYER 6702 Lancing device
http://www.contournextstore.com/en/new-microlet-next-lancing-device
MICROLET 2 Colored Lancets BAYER 81264857 Ultra-thin sterile lancet for capillary puncture
http://www.contournextstore.com/en/microlet2-colored-lancets-100s
Injekt 20ml luer siringe B Braun 4606205V Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Askina Mullkompressen 7,5x7,5cm - sterile B Braun 9031219N Sterile gauze packets in envelopes
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-mullkompressen-esteril
Emla lidocaine/prilocaine AstraZeneca not available Local anesthetics
https://www.astrazeneca.es/areas-terapeuticas/neurociencias.html
Introcan Certo 18G short B Braun 4251342 Peripheral intravenous catheter
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-
Introcan Certo 20G B Braun 4251326 Peripheral intravenous catheter
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-
Blood Pressure Transducers-MA1 72-4497 Harvard Apparatus 724497 Transducer for monitoring blood pressure
http://www.harvardapparatus.com/physiology/physiological-measurements/transducers/pressure-transducers/research-grade-pressure-transducers.html
PowerLab 2/26 AD Instruments ML826 Amplifier
https://www.adinstruments.com/products/powerlab
LabChart ver. 6 AD Instruments not available Acquisition software
https://www.adinstruments.com/products/labchart
Animal Bio Amp AD Instruments FE136 Amplifier
https://www.adinstruments.com/products/bio-amps#product-FE136
K2EDTA 7.2mg BD 367861 Blood collection tubes
http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=367861
Centrifuge SciQuip 2-16KL Centrifuge
http://www.sigma-centrifuges.co.uk/store/products/refrigerated-sigma-2-16k-centrifuge/
Eppendorf Reference 2, 100 – 1000 μL Eppendorf 4920000083 Pipette
https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Pipeteo-44563/Pipetas-44564/Eppendorf-Reference2-PF-42806.html
Eppendorf Safe-Lock Tubes, 0.5 mL Eppendorf 30121023 Tubes
https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Puntas-tubos-y-placas-44512/Tubos-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html
NZW rabbits (16-18 weeks old) Granja San Bernardo not available New Zealand White rabbits
http://www.granjasanbernardo.com/en/welcome/
Sucrose  Sigma S0389-5KG Sucrose for drinking solution
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s0389?lang=es&region=ES
Rabbit maintenance control diet Ssniff V2333-000 Control diet
http://www.ssniff.com/
Rabbit high-fat diet Ssniff S9052-E020 High-fat diet
http://www.ssniff.com/
Rabbit rack and drinker Sodispan not available Rack for rabbits
https://www.sodispan.com/jaulas-y-racks/racks-conejo-y-cobaya/
Rabbit restrainer Zoonlab 3045601 http://www.zoonlab.de/en/index.html

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Cornier, M. A., Dabelea, D., Hernandez, T. L., Lindstrom, R. C., Steig, A. J., Stob, N. R., et al. The metabolic syndrome. Endocr rev. 29 (7), 777-822 (2008).
  2. Alberti, K. G., Zimmet, P., Shaw, J., Grundy, S. M. IDF Consensus Worldwide Definition of the Metabolic Syndrome. , Available from: https://www.idf.org/e-library/consensus-statements.html (2006).
  3. Alberti, K. G., Eckel, R. H., Grundy, S. M., Zimmet, P. Z., Cleeman, J. I., Donato, K. A., et al. Harmonizing the metabolic syndrome: a joint interim statement of the International Diabetes Federation Task Force on Epidemiology and Prevention; National Heart, Lung, and Blood Institute; American Heart Association; World Heart Federation; International Atherosclerosis Society; and International Association for the Study of Obesity. Circulation. 120 (16), 1640-1645 (2009).
  4. Grundy, S. M. Pre-diabetes, metabolic syndrome, and cardiovascular risk. JACC. 59 (7), 635-643 (2012).
  5. Verkest, K. R. Is the metabolic syndrome a useful clinical concept in dogs? A review of the evidence. Vet J. 199 (1), 24-30 (2014).
  6. Zhang, X., Lerman, L. O. Investigating the Metabolic Syndrome: Contributions of Swine Models. Toxicol Pathol. 44 (3), 358-366 (2016).
  7. Wong, S. K., Chin, K. Y., Suhaimi, F. H., Fairus, A., Ima-Nirwana, S. Animal models of metabolic syndrome: a review. Nutr Metab (Lond). 13, 65 (2016).
  8. Carroll, J. F., Dwyer, T. M., Grady, A. W., Reinhart, G. A., Montani, J. P., Cockrell, K., et al. Hypertension, cardiac hypertrophy, and neurohumoral activity in a new animal model of obesity. Am J Physiol. 271 (1 Pt 2), H373-H378 (1996).
  9. Grooth, G. J., Klerkx, A. H., Stroes, E. S., Stalenhoef, A. F., Kastelein, J. J., Kuivenhoven, J. A. A review of CETP and its relation to atherosclerosis. J Lipid Res. 45 (11), 1967-1974 (2004).
  10. Zarzoso, M., Mironov, S., Guerrero-Serna, G., Willis, B. C., Pandit, S. V. Ventricular remodelling in rabbits with sustained high-fat diet. Acta Physiol (Oxf). 211 (1), 36-47 (2014).
  11. Filippi, S., Vignozzi, L., Morelli, A., Chavalmane, A. K., Sarchielli, E., Fibbi, B., Saad, F., Sandner, P., Ruggiano, P., Vannelli, G. B., Mannucci, E., Maggi, M. Testosterone partially ameliorates metabolic profile and erectile responsiveness to PDE5 inhibitors in an animal model of male metabolic syndrome. J Sex Med. 6 (12), 3274-3288 (2009).
  12. Waqar, A. B., Koike, T., Yu, Y., Inoue, T., Aoki, T., Liu, E., et al. High-fat diet without excess calories induces metabolic disorders and enhances atherosclerosis in rabbits. Atherosclerosis. 213 (1), 148-155 (2010).
  13. Fan, J., Watanabe, T. Cholesterol-fed and transgenic rabbit models for the study of atherosclerosis. J Atheroscler Thromb. 7 (1), 26-32 (2000).
  14. Yin, W., Yuan, Z., Wang, Z., Yang, B., Yang, Y. A diet high in saturated fat and sucrose alters glucoregulation and induces aortic fatty streaks in New Zealand White rabbits. Int J Exp Diabetes Res. 3 (3), 179-184 (2002).
  15. Zhao, S., Chu, Y., Zhang, C., Lin, Y., Xu, K., Yang, P., et al. Diet-induced central obesity and insulin resistance in rabbits. J Anim Physiol Anim Nutr (Berl). 92 (1), 105-111 (2008).
  16. Helfenstein, T., Fonseca, F. A., Ihara, S. S., Bottos, J. M., Moreira, F. T., Pott, H. Jr, et al. Impaired glucose tolerance plus hyperlipidaemia induced by diet promotes retina microaneurysms in New Zealand rabbits. Int J Exp Pathol. 92 (1), 40-49 (2011).
  17. Ning, B., Wang, X., Yu, Y., Waqar, A. B., Yu, Q., Koike, T., et al. High-fructose and high-fat diet-induced insulin resistance enhances atherosclerosis in Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits. Nutr Metab (Lond). 12, 30 (2015).
  18. Liu, Y., Li, B., Li, M., Yu, Y., Wang, Z., Chen, S. Improvement of cardiac dysfunction by bilateral surgical renal denervation in animals with diabetes induced by high fructose and high fat diet. Diabetes Res Clin Pract. 115, 140-149 (2016).
  19. Arias-Mutis, O. J., Marrachelli, V. G., Ruiz-Saurí, A., Alberola, A., Morales, J. M., Such-Miquel, L., Monleon, D., Chorro, F. J., Such, L., Zarzoso, M. Development and characterization of an experimental model of diet-induced metabolic syndrome in rabbit. PLoS One. 12 (5), e0178315 (2017).
  20. Nelson, R. W., Himsel, C. A., Feldman, E. C., Bottoms, G. D. Glucose tolerance and insulin response in normal-weight and obese cats. Am J Vet Res. 51 (9), 1357-1362 (1990).
  21. Staup, M., Aoyagi, G., Bayless, T., Wang, Y., Chng, K. Characterization of Metabolic Status in Nonhuman Primates with the Intravenous Glucose Tolerance Test. J Vis Exp. (117), e52895 (2016).
  22. Hall, J. E., do Carmo, J. M., da Silva, A. A., Wang, Z., Hall, M. E. Obesity-induced hypertension: interaction of neurohumoral and renal mechanisms. Circ Res. 116 (6), 991-1006 (2015).
  23. Linz, D., Hohl, M., Mahfoud, F., Reil, J. C., Linz, W., Hübschle, T., Juretschke, H. P., Neumann-Häflin, C., Rütten, H., Böhm, M. Cardiac remodeling and myocardial dysfunction in obese spontaneously hypertensive rats. J Transl Med. 10 (10), 187 (2012).
  24. Sasser, T. A., Chapman, S. E., Li, S., Hudson, C., Orton, S. P., Diener, J. M., Gammon, S. T., Correcher, C., Leevy, W. M. Segmentation and measurement of fat volumes in murine obesity models using X-ray computed tomography. J Vis Exp. (62), e3680 (2012).
  25. Kawai, T., Ito, T., Ohwada, K., Mera, Y., Matsushita, M., Tomoike, H. Hereditary postprandial hypertriglyceridemic rabbit exhibits insulin resistance and central obesity: a novel model of metabolic syndrome. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 26 (12), 2752-2757 (2006).
  26. Shiomi, M., Kobayashi, T., Kuniyoshi, N., Yamada, S., Ito, T. Myocardial infarction-prone Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits with mesenteric fat accumulation are a novel animal model for metabolic syndrome. Pathobiology. 79 (6), 329-338 (2012).
  27. Hildrum, B., Mykletun, A., Hole, T., Midthjell, K., Dahl, A. A. Age-specific prevalence of the metabolic syndrome defined by the International Diabetes Federation and the National Cholesterol Education Program: The Norwegian HUNT 2 study. BMC Public Health. 7, 220 (2007).

Tags

רפואה בעיה 134 תסמונת מטבולית חייתיים ארנב מחלות לב וכלי דם לחץ דם גלוקוזה
מדגם ניסיוני של דיאטה-Induced סינדרום מטבולי בקרב ארנב: שיקולים מתודולוגי, פיתוח והערכה
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Arias-Mutis, Ó. J., Genovés,… More

Arias-Mutis, Ó. J., Genovés, P., Calvo, C. J., Díaz, A., Parra, G., Such-Miquel, L., Such, L., Alberola, A., Chorro, F. J., Zarzoso, M. An Experimental Model of Diet-Induced Metabolic Syndrome in Rabbit: Methodological Considerations, Development, and Assessment. J. Vis. Exp. (134), e57117, doi:10.3791/57117 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter